Микроскопические и культуральные исследования при дерматомикозах

Для микроскопирования патологического материала в лабораторных условиях отбирают волоски с белыми чехликами у корня, обрезая маленькими ножницами пораженную часть волоса. Подготовленные таким образом волоски переносят на предметное стекло в каплю 10−20%-го едкого натра, подогревают над пламенем горелки до появления ободка, затем добавляют каплю глицерина, покрывают покровным стеклом и просматривают под микроскопом.

У возбудителей трихофитии споры гриба округлые, в цепочках и образуют вокруг волоса чехол. Споры располагаются вокруг волоса, на поверхности и внутри волоса. В чешуйках и на ранних стадиях поражения встречается ветвящийся мицелий. Споры грибов Т. verrucosum и Т. equinum более крупные, чем споры дерматофита Т. mentagrophytes.

Для возбудителей микроспории характерно то, что мелкие споры (3−5 мкм) беспорядочно располагаются или у основания волоса, иногда образуя чехлы, или на его поверхности. Споры резко преломляют свет и плотно прилегают друг к другу. Искривление мицелия и распад его на споры обусловливают характерное для микроспории мозаичное расположение спор. В редких случаях мозаичность расположения спор бывает выражена нечетко. В чешуйках встречается ветвящийся мицелий.

При культуральной диагностике для получения чистой культуры дерматофита и дифференциации вида возбудителя высев патологического материала проводят на сусло-агар (pH 6,2−6,8) или МПГА + 2% глюкозы и выдерживают в термостате при температуре +26−28°С в течение 20−30 дней. Для изучения характерного роста дерматофитов наряду с пробирками используют чашки Петри. После изучения макрокультур готовят препараты и просматривают их под микроскопом. Для этого кусочек культуры переносят на предметное стекло в каплю дистиллированной воды, покрывают покровным стеклом и просматривают под микроскопом. Предварительно целесообразно спичкой постучать немного, но покровному стеклу, чтобы образовался равномерный слой для просматривания.

Т. verrucosum (син. Т. faviforme). Культура развивается медленно и достигает достаточных размеров на 30- 40 й день. Наиболее типичны плотные, возвышающиеся над средой, кожистые, складчатые колонии серовато-белсго цвета. Колонии глубоко врастают в питательную среду* Могут иногда вырастать и колонии без обильного количества кожистых складок. Под микроскопом виден септированный мицелий толщиной 0,7−4,0 мкм, цепочки артроспор 5−15 мкм в диаметре, отдельные хламидоепоры. Некоторые штаммы образуют много микроконидий овальной, грушевидной и палочковидной формы, размером 0,7−3×2−8 мкм. В отдельных штаммах встречаются макроконидии, состоящие из 2−8 сегментов размером 3−8×20−60 мкм.

Т. mentagrophytes. Рост начинается на 3−4-й день после посева. Развившиеся колонии плоские, ровные, приподнятые в центре в виде маленького бугорка. Поверхность мучнистая. Молодые культуры белые, с возрастом желтеют. Могут вырастать колонии с многочисленными радиальными лучами. Обратная сторона колоний пигментирована в темно-красный, вишневый цвет. Мицелий слабоветвящийся. Отдельные гифы толщиной 1,5−8,5 мкм образуют типичные спирали. Вдоль гиф по боковым нитям мицелия расположено множество микроконидий диаметром 2−4 мкм в основном округлой формы. Редко встречаются крупные макроконидии веретенообразной формы с 3−8 перегородками, размером 5- 10×30−50 мкм.

Т. equinuin. При высеве патологического материала на сусло-агар рост культуры отмечают на 6−9-й день. Вырастают белые, бархатистые колонии с выраженными радиальными бороздками. Обратная сторона колонии пигментирована в желтый цвет. Мицелий ветвящийся, шириной 1−3 мкм, множество округлых или грушевидных микроконидий размером 1−3×3−7 мкм. Характерным элементом является наличие большого количества рудиментарных микроконидий из 2−4 сегментов, тонкостенных размером 3−7×15−50 мкм. Хламидоспоры единичные или отсутствуют.

М. canis. Из патологического материала начинает прорастать на 2−4-й день после посева. Первичные колонии плоские, сероватого или коричневатого цвета с паутинистым растущим краем. Обратная сторона желтоватого цвета. При пересевах культура приобретает устойчивую белую окраску. Мицелий ветвящийся, разной ширины, иногда с ракеткообразными гифами. Много макроконидий веретенообразной формы с 5−12 перегородками размером 1,1−1,5×50−80 мкм. Встречаются микроконидии (алейроспоры) округлой или овальной формы, размером 1−3×2−5 мкм.

М. equinum. Рост культуры отмечают на 6−8-й день после посева патологического материла на сусло-агар. Гриб образует кожистые, складчатые колонии, покрытые серовато-белым мицелием. С первых же дней развития культура глубоко врастает в питательную среду. Отдельные штаммы при пересевах образуют кожистые колонии желтого или коричневого цвета, на которых отсутствует воздушный мицелий. Поверхность колоний имеет много хорошо очерченных радиальных борозд, сходящихся в центре. У старых колоний в центре может появляться кратерообразное углубление. Мицелий ветвящийся, септированный, шириной 1−5 мкм, с возрастом утолщается и принимает четкообразный вид. В старых культурах множество интеркалярных и терминальных хламидоспор. Иногда встречаются многоклеточные макроконидии с 5−7 перегородками размером 5−10×15- GO мкм. Редко встречаются микроконидии размером 1- 2×3−5 мкм.

М. gypseum. На сусло-агаре вырастают плоские, слегка желтоватые, порошистые колонии. Иногда колонии окрашены в бежевый цвет. Мицелий ветвящийся с ракеткообразными утолщениями. Множество макроконидий с закругленными концами и 3−6 перегородками. Встречаются хламидоспоры и много микроконидий.

Т. sarkisovi. На сусло-агаре вырастают пушистые, ровные или клочковатые, бежевые, кожистые, бугристые или складчатые колонии, глубоко врастающие в питательную среду. Ширина мицелия 1,5−9 мкм. Встречаются единичные микроконидии овальной формы, размером 2 5×3−10 мкм. Хламидоспоры диаметром 7−18 мкм располагаются одиночно или цепочками. Диаметр артроспор — 5−10 мкм.

Т. gallinae. Молодые колонии гладкие, бархатистые, белого цвета. С возрастом становятся складчатыми, мучнистыми, поверхность растрескивается. Иногда колонии могут быть окрашены в розовый или малиновый цвет. Мицелий ровный, сеитированный. Много микроконидий размером 3,5−5 мкм. Встречаются макроконидии с 2−6 перегородками. В старых культурах можно увидеть хламидоспоры.