Обмен веществ клетки, снабженной оболочкой, с окружающей средой

Долгое время приписывали оболочке первенствующую роль в питании клетки. Установлению этого взгляда много содействовало сделанное Дютроше открытие диосмоза через перепонку; он первый показал, что если разъединить коллоидальной перепонкой две жидкости, способные смешиваться между собою, и установить их на одинаковом уровне, то по прошествии некоторого времени равенство уровней окажется нарушенным; по одну сторону перепонки уровень жидкости поднимется, по другую — понизится на соответственную величину.

Диосмотичсские явления весьма удобно наблюдаются при посредстве диосмометра Дютроше. Прибор этот состоит из узкой стеклянной трубки, расширенной в нижней части в плоский сквозной стеклянный сосуд; нижний край сосуда снабжен выступом. На широкое отверстие его натягивается перепонка, предназначенная для диосмотических опытов; выступающие края перепонки по возможности крепко привязываются к сосуду ниткою повыше ободка. Перепонку предварительно смачивают и натягивают ее еще влажною. Убедившись, что она не имеет отверстий и крепко привязана, вливают в затянутый ею сосуд одну из жидкостей при посредстве длинной воронки; другую жидкость помещают в цилиндрический стеклянный сосуд, в который опускают эндосмометр на столько, чтобы уровень жидкостей в обоих сосудах был одинаковым. Эндосмометр удерживается на этой высоте посредством штатива. Влияние перепонки на смешивание жидкостей весьма наглядно выясняется посредством следующих опытов: если затянуть эпдосмометр пергаментной бумагой или бычачьим пузырем и налить в эндосмометр спирта, а во внешний сосуд воды, то внутри эндосмометра обнаружится поднятие уровня жидкости. Если, наоборот, в эндосмометр ввести воду, а во внешний сосуд спирт, то уровень жидкости в эндосмометре понизится, а в наружном повысится. Оба опыта указывают на то, что через перепонку происходит обмен жидкостей и что в данном случае вода проникает в большем количестве через перепонку, чем спирт; вследствие этого происходит поднятие уровня жидкости в сосуде, в который был направлен ток воды.

Направление эндосмотического тока зависит, однако, не только от состава жидкостей, но и от свойств употребленной перепонки. Влияние перепонки на характер обмена жидкостей удается обнаружить, наблюдая одновременно два эндосмометра, из которых один затянут пергаментною бумагою, а другой — пластинкой каучука. Если в оба эндосмометра влить спирт и опустить оба в воду, то в первом мы заметим, но прошествии некоторого времени поднятие уровня жидкости, между тем как во втором он будет понижаться; при наполнении эндосмометров водою и погружении в спирт обнаружатся изменения в уровне жидкостей диаметрально противоположные. Явления эти объясняются различием проницаемости перепонки для каждой из разъединяемых жидкостей.

Весьма любопытные разыскания над диосмозом произведены Грэмом. Особенно интересна обнаруженная им зависимость между свойствами испытуемого соединения и прохождением через коллоидальные перепонки (пергаментную бумагу и бычачий пузырь). Грэм нашел, что для целого ряда соединений они представляют почти непроницаемую преграду; пропуская легко тела кристаллические, перепонки эти задерживали почти совершенно растворы коллоидальных тел, например белка, клея и др. Различие это оказалось столь резким, что Грэм воспользовался им для разъединения смеси тел коллоидальных и кристаллических. Раствор подобной смеси наливают в кольцо из гуттаперчи, затянутое внизу перепонкой, в прибор, называемый диализатором, и погружают его нижним краем в большой сосуд с дистиллированною водою; кристаллические тела быстро переходят во внешний сосуд, между тем как коллоидальные остаются в диализаторе; этим способом удается иногда достигнуть полного разъединения этих двух групп тел, если только возобновлять жидкость во внешнем сосуде. Диализом пользуются в настоящее время в сахароварнях для очищения сахара от патоки; этим же приемом Вюрц приготовил из белка куриного яйца альбумин, совершенно свободный от минеральных примесей.

Обе вышеназванные перепонки настолько, однако, отличаются по своему строению от оболочки растительных клеток, что из результатов диосмотических опытов над ними нельзя еще сделать определенных выводов касательно перепонки растительных клеток; одно из главных отличий заключается в том, что пергамент и бычачий пузырь, кроме интрамолекулярных пор, представляют между фибрами щели и промежутки, которых нет в оболочке растительных клеток. Попытки отыскать перепонку, более подходящую к оболочке растительной клетки, еще пе увенчались успехом. Одно время казалось, что задача эта решена и искомая перепонка отыскана. Шумахер^[1] предложил употреблять для диосмотических опытов мешочки из пироксилина, легко приготовляемые из коллодиума. Для получения мешочка наливают густой коллодиум в пробирку и затем осторожно сливают; на стенках пробирки остается слой густого раствора, который засыхает в сплошную перепонку. Если медленно вращать пробирку до застывания жидкости, то получается на внутренней стенке трубочки слой пироксилина, совершенно равномерный; повторением этой операции можно приготовить перепонку желаемой толщины. Верхний край мешочка отделяют от стекла и прилепляют к нему посредством коллодиума конец сквозной стеклянной трубочки, разделенной на части определенного объема. Мешочку не дают вполне высохнуть в пробирке и, как только стеклянная трубочка оказывается приставшею к краю мешочка, немедленно отдирают его от пробирки и переносят в воду, в которой оставляют приборик до тех пор, пока он не потеряет спиртового запаха. Мешочек с трубочкою (рис. 77) наполняют до известной черты одною из испытуемых жидкостей, погружают в сосуд с другою жидкостью и наблюдают, чтобы во все время опыта уровепь жидкостей в обоих сосудах был одинаковый. Деления трубочки, соответствующие уровню жидкости в ней в начале и в конце опыта, указывают на изменения объема жидкости в эндосмометре.

Рис. 77.

Приборик этот весьма удобен для демонстрации диосмотических опытов на лекции. Различное прохождение через перепонку коллоидальных и кристаллических тел выступает весьма резко, если в наружный сосуд налить раствор двухлористого железа, а в мешочек — раствор таннина, которые при непосредственном смешивании образуют чернила. Таннин, тело коллоидальное, задерживается в мешочке; двухлористое железо проникает в полость мешочка и образует с таннином чернила, просвечивающие через стенку мешочка; содержимое мешочка делается совершенно черным, между тем как окружающая жидкость остается прозрачною.

Диосмотические опыты с мешочком из пироксилина удобны еще и потому, что приборик может сохраняться без изменения в продолжение нескольких недель, если только его держать в воде.

Отсутствие щелей и однородность структуры заставляли предполагать a priori, что по диосмотическим свойствам перепонка из пироксилина будет больше походить на оболочку растительной клетки, чем пергаментная бумага и бычачий пузырь. Опыты Баранецкого однако, не подтвердили этого предположения. Уже Шумахер заметил, что пироксилиновая перепонка, вполне высушенная, совершенно непроницаема для воды и водных растворов и, следовательно, непригодна для диосмотических опытов; поэтому, как уже выше было мною упомянуто, пеобходимо погружать перепонку пироксилина в воду, не давая ей высохнуть на воздухе; эндосмотические свойства данной перепонки обусловливаются вполне степенью высушивания ее до погружения в воду и для каждого мешочка, следовательно, различны. Сравнительные диосмотическпе опыты обнаружили, что пироксилиновая перепонка в большей мере отличается от оболочки растительной клетки, чем пергаментная бумага и бычачий пузырь, и ближе последних подходит к каучуку; подобно последнему, она оказалась более проницаемою для спирта, чем для воды.

Ввиду этих данных Баранецкий пытался превратить посредством раскисления пироксилиновую перепонку в клетчатку. Высушив ее настолько, что она потеряла запах спирта, он обрабатывал ее однохлористым железом, которое было приготовлено растворением в атмосфере углекислоты закиси железа в соляной кислоте.

При нагревании в плоской чашке реакция шла очень быстро; светлозеленоватый цвет жидкости переходил в бурый и темнел по мере того, как жидкость становилась концентрированнее. Пироксилиновая перепонка при этом размягчалась, и если действие реактива не было остановлено вовремя, то она делалась столь ломкою, что при неосторожном прикосновении распадалась на части. Гораздо раньше окончательного размягчения перепонка пироксилина обнаруживала уже характерную для клетчатки окраску в синий цвет от йода и серной кислоты. Появление этой окраски служило Баранецкому указанием для прекращения реакции. Раскисленная перепонка затем промывалась водою и высушивалась на воздухе. Получаемая оболочка резко отличалась от пироксилиновой; она съеживалась при высыхании, в воде разбухала до прежнего размера и, подобно клетчатке, делалась проницаемой для воды и водных растворов кристаллических тел. К сожалению, Баранецкий произвел с этою перепонкою очень небольшое число опытов, и ему удалось только выяснить, что она по диосмотическим свойствам гораздо ближе подходит к пергаментной бумаге и бычачьему пузырю, чем к перепонке из пироксилина.

Руководствуясь данными, полученными над диосмозом через перепонки (пергаментную бумагу и бычачий пузырь), всего ближе подходящие к оболочке растительных клеток, можпо, по моему мнению, вывести следующие положения относительно роли оболочки в питании клетки: 1) оболочкою устраняется непосредственное разложение плазмою твердых тел, находящихся вне клетки, если они нерастворимы в жидкости,^[2]

которая окружает клетку; 2) оболочка заправляет в значительной степени обменом веществ между плазмою и внешней средой, так как ею задерживаются, с одной стороны, внутри клетки коллоидальные соединения, заключенные в содержимом, а с другой — отстраняются от прикосновения с плазмою растворы коллоидальных тел окружающей жидкости;

3) допускаемый оболочкою диосмоз может изменяться и быть различным в разных тканях и даже в одной и той же клетке в различные фазы ее развития, смотря по толще, по характеру отложенных в оболочке соединений и другим особенностям строения; оболочка из чистой клетчатки будет, несомненно, обусловливать иной обмен веществ, чем оболочка кутикуляризованная, оиробкованная или пропитанная воскообразными отложениями. Этими немногими положениями исчерпывается в настоящее время все известное касательно роли оболочки в питании растительной клетки.

Особенное внимание обратили на себя в последнее время осадочные перепонки, открытые Траубе^[3], так как они оказались весьма сходными с оболочкой растительной клетки не только по строению, но и по способу нарастания; в диосмотических же свойствах обнаружилась между ними весьма значительная разница; их приравнивают, как увидим ниже, в этом отношении поверхностному слою периферической плазмы клетки.

Наиболее интересною из них представляется осадочная перепопка, образующаяся на куске твердой желатины при погружении ее в раствор дубильной кислоты'*. Для ее получения Траубе предписывает подвергнуть обыкновенную желатину кипячению с водою в продолжение 30 часов; затем раствор выпаривают до густоты сиропа и вынимают каплю жидкости концом стеклянной палочки, которая должна быть предварительно тщательно вымыта и прокалена. Палочку с каплей густой желатины медленно вращают до окончательного затвердения желатины, чтобы получить ее в форме по возможности правильной. Спустя несколько часов, когда капля уже вполне высохла, ее погружают в 2%-ный раствор дубильной кислоты. При удачном ходе опыта на поверхности желатины пемедлепно появляется прозрачная оболочка дубильнокислой желатины; оболочка эта постепенно растет, сохраняя стекловидную консистенцию; промежуток между нею и центральною, не растворенною еще массою желатины, занят прозрачною жидкостью, составленною из раствора дубильной кислоты в избытке желатины.

Разрастание перепонки дубильнокислой желатины представляется особенно интересным, так как оно происходит, подобно росту оболочки растительной клетки, без разрывов, через вставку новых частиц в промежутки между старыми. Рост оболочки происходит, по всему вероятию, следующим образом: в нарастающем шарике дубильнокислой желатины, как в живой растительной клетке, содержимое вызывает сильный эндосмотическнй ток воды; набирающаяся под оболочкой жидкость давит на оболочку и растягивает ее, увеличивая интрамолекулярные промежутки между ее частицами. Как только промежутки между частицами увеличиваются настолько, что в них может поместиться молекула вещества, из которого построена стенка, происходит вставка новых частиц между старыми; при этом способе разрастания оболочка растет тем сильнее, чем она тоньше; при неравномерной толщине вставка новых частиц происходит преимущественно в местах наиболее тонких, где частицы оболочки легче остальных раздвигаются под давлением содержимого. Наоблюдения над разрастанием оболочки дубильнокислой желатины вполне согласуются с этим представлением.

Осадочная перепонка дубильнокислой желатины получается, по Траубе, еще лучше, если вместо прокипяченной желатины взять смесь из 5 частей желатины, лишенной предварительным кипячением способности застывать в студень, 1 части обыкновенной желатины, 5 частей тростникового сахара и ‘/зо части медного купороса и погрузить вполне высохшую каплю этой смеси в 2—2,5%-ный раствор дубильной кислоты.

Из общего числа осадочных перепонок я упомяну здесь в виде примера о перепонках железисто-синеродистой меди и кремнекислого железа. Для получения первой из них достаточно бросить кусочек хлористой меди в раствор железисто-синеродистого калия; кусочек хлористой меди немедленно покрывается по всей свободной поверхности тоненькою, прозрачною оболочкою железисто-синеродистой меди; оболочка эта быстро разрастается в большой мешок, достигающий нередко поверхности жидкости; рост ее происходит без разрывов через вставку новых частиц между старыми; на маленьких кусочках хлористой меди удается наблюдать образование и рост этой оболочки под микроскопом. Оболочка кремнекислого железа образуется столь же легко, если в раствор фуксова стекла (кремнекислого натрия) бросить кусок дву хлористого железа; на поверхности его появляется оболочка, которая быстро вырастает кверху в длинные нитевидные и полые внутри отроги.

Осадочные перепонки не представляют отверстий, кроме интрамолекулярных пор, вследствие чего диосмотические качества перепонки вполне зависят от размера промежутков между ее частицами. Промежутки эти во всех осадочных перепонках оказались гораздо меньшими, чем в вышеприведенных коллоидальных перепонках, так как они не только задерживают растворы коллоидальных соединений, но и многих тел кристаллических, частицы которых, по всему вероятию, превосходят размеры интрамолекулярных пор оболочки.

Примером может служить перепонка железисто-синеродистой меди, непроницаемая для раствора сахара. Не менее характерную особенность осадочных перепонок составляет, по исследованиям Пфеффера^[4], сильное эидосмотическое давление, которое они вызывают в присутствии некоторых кристаллических тел. В прилагаемой табличке приведены в сантиметрах высоты поднятия ртути в манометре, находившемся в соединении с сосудом, который доверху наполнен был исследуемым раствором и замкнут одною из вышепоименованных перепонок. Для опытов с осадочпою перепонкою из железисто-синеродистой меди оказалось необходимым ввиду чрезвычайно малой ее прочности поддерживать ее посторонним телом. Пфеффер ⁸ воспользовался для этой цели пористыми глиняными сосудами; наполнив сосуд раствором медного купороса, он погружал его в раствор железисто-синеродистого калия; перепонка железисто-синеродистой меди получалась при этом внутри стенки глиняного сосуда.

При увеличении объема жидкости в сосуде она, с одной стороны, давила на ртуть манометра и вызывала се поднятие в открытом колене манометра, с другой же — оказывала давление на перепонку и частью проникала через нее кнаружи во внешнюю жидкость. Чем сильпее был эндосмотический ток и чем больше препятствия оказывала оболочка прохождению кнаружи раствора, заключенного в сосуде, тем значительнее было поднятие ртути в манометре.

Высота ртути в манометрах, см.

Из этой таблички ясно, что в сосуде, замкнутом осадочною перепонкою, некоторые из кристаллических тел (сахар и в особенности селитра) способны вызывать эндосмотическое давление в 35—70 раз больше, чем с пергаментной бумагой или перепонкой пузыря.

К этим последним, как мы видели, всего больше по эндосмотическим свойствам приближается оболочка растительной клетки, поэтому при ее посредстве нельзя ожидать появления высокого эндосмотического давления в живой клетке. Тем не менее мы имеем основание предполагать, что давление, оказываемое клеточным соком на периферическую плазму и оболочку, может быть по временам весьма значительно. При поранении и перерезывании живой клетки содержимое выдавливается иногда с большою силою. Ввиду этих фактов и некоторых других соображений Пфеффер принимает в живой клетке, кроме оболочки, существование еще двух осадочных перепоиок на периферической плазме, из которых одна выстилает плазму непрерывным слоем с наружной стороны и непосредственно прилегает к оболочке клетки, а другая — с внутренней и отделяет ее от полости, наполненной клеточным соком; обе эти осадочные перепонки Пфеффер обозначает названием гиалоплазмы.

Присутствие подобных же перепонок Пфеффер⁹ допускает на поверхности зерен хлорофилла, на ядре и некоторых других обособленных отложениях, встречаемых внутри клетки.^[5][6]

Этим перепонкам он приписывает свойства, сходные с осадочными перепонками, хотя и признает невозможным заключать о прохождении различных соединений через оболочки плазмы на основании опытов над оболочкой из железисто-синеродистой меди или дубильнокислой желатины. Присутствием подобных перепонок Пфеффер объясняет различие диосмотических свойств плазмы и целлюлозной оболочки по отношению к некоторым соединениям, которые легко пропускаются оболочкою, но не проникают в живую плазму. Отличным примером могут служить клетки с окрашенным клеточным соком, в которых живая плазма, непосредственно окружающая окрашенную жидкость, остается бесцветною и не пропускает пигмента кнаружи; в оболочке пигмент не встречает преграды к выходу из клетки и при поранении плазмы быстро переходит в окружающую жидкость. Неге ли^t0, кроме того, показал, что если произвести съеживание содержимого клетки раствором сахара, подкрашенным растительным пигментом, который не пропускается плазмою, то он вместе с сахаром проникает сквозь оболочку в промежуток между оболочкою и отставшею плазмою, но не окрашивает плазмы в то время, когда она съеживается от сахара.

Присутствие осадочных перепонок на плазме легкообъясняет напряженность тканей и значительное давление, которое оказывает иногда содержимое клетки на оболочку, но и при участии подобного рода оболочек в обмене веществ между растительными клетками и окружающею средою многое остается по-прежнему необъясненным. Сюда относится, например, показание Негели «, что крахмальные зерна, погруженные в раствор дубильной кислоты, пропитываются им насквозь и обнаруживают во всей толще свойственную дубильной кислоте окраску от солей железа и других реактивов; в этом случае мы имеем проникание коллоида сквозь коллоидальные перепонки, чего не наблюдалось еще при диосмотических опытах вне живой клетки. Мы не имеем также достаточно точных данных, чтобы отрицать прохождение сквозь оболочки клеток белковых соединений при передвижении их по тканям растений. На проникание плазмы через оболочку живой клетки указывает Корню^[7]2. По его наблюдениям, плазма 3—5 клеток конидий Nectria armeniaca Tul. переходит в конечную клетку, несмотря на разъединяющие перегородки. К подобного рода фактам необходимо, однако, относиться с крайнею осторожностью, так как в оболочке могут быть мельчайшие отверстия, которые весьма легко совсем просмотреть или принять за продушины. Доказательством этому может служить открытие Танглем ^{[8][9][10] сквозных отверстий в клетках белка Strychnos, где до последнего времени предполагали лишь продушины. Еще с меньшим правом можно отрицать вхождение в плазму раствора сахара и некоторых других кристаллических соединений (например, селитры), задерживаемых, как было показано выше, осадочными перепонками. Сам Пфеффер[11][12] допускает, что осадочные оболочки плазмы не только могут изменяться в консистенции и диосмотических свойствах под влиянием жизни клетки, но даже в состоянии пропускать через себя при сильном давлении молекулы, превосходящие по размерам интрамолекулярные отверстия оболочки; при этом, по его представлению, гиалоплазма разрывается и тотчас же затем вновь зарастает. Последнее допущение Пфеффера в значительной степени подрывает значение, придаваемое осадочным перепонкам в питании растений, и затемняет роль, которую они играют при обмене веществ живою клеткою. Во всяком случае, факты эти несомненно указывают на зависимость обмена веществ между клеткою и окружающею средой (или другими клетками) от давления жидкого содержимого на периферический слой плазмы и оболочку и заставляют думать, что при значительном давлении клетки становятся проницаемы для соединений, которые не пропускают сквозь себя при давлении меньшем.}

К необъяснимым особенностям диосмоза живых клеток относится способность удерживать в смежных клетках кислую и щелочную реакцию сока или, другими словами, оказывать сопротивление прохождению таким соединениям, которые легко проникают не только через пергаментную бумагу, пузырь, оболочку пироксилина, но и сквозь осадочные перепонки. Сакс ^{, 5}, например, показал, что при перерезывании ситовидных элементов вытекает сок щелочной, между тем как смежные клетки заключают сок кислый. Приложенная к поперечному разрезу перерезанного стебля чувствительная лакмусовая бумажка окрашивалась в яркий красный цвет на всем протяжении разреза, за исключением только мест, соответствующих перерезанным ситовидным элементам; в этих местах получались на бумажке темно-синие пятна.

Саксу также удалось находить среди ткани с кислым соком отдельные клетки с отложениями углекислого кальция в содержимом, что возможно только при щелочной или по крайней мере средней реакции клеточного сока; в самом деле, при поранении клеток с отложениями углекислого кальция последние моментально растворялись в кислой жидкости, вытекшей из перерезанных смежных клеток.

Ввиду своеобразного отношения к явлениям диосмоза растительных клеток особенный интерес представляют непосредственные опыты над диосмозом их перепонок. До сих пор в этом направлении произведены немногие опыты Шахтом с кусками оболочки водоросли Caulerpa, Иосифом Бусенго — над кожицей высших растений и Гартигом — над листьями Allium и Hyacinthus.

Опыты Шахта^[13] с оболочкой Caulerpa дали странный результат, требующий тщательной проверки. При диосмозе спирта с водою уровень жидкости повышался в сосуде с водою. Различие от перепонки из пузыря особенно рельефно выступило при следующем сравнительном опыте: в трубочке, затянутой оболочкой и заключавшей спирт, уровень жидкости понижался в продолжение двух дней на 15 мм в сутки, между тем как в трубочке со спиртом, затянутой пузырем, жидкость постепенно прибывала. По отношению к спирту оболочка Caulerpa оказалась, следовательно, подходящею ближе к перепонкам каучуковой и пироксилиновой.

Иосиф Бусенго^[14] исследовал диосмотические свойства кожицы высших растений. Плоды, листья и корни разных растений погружались в воду, за исключением срезанного конца, оставленного над водою. При этом обнаружилось весьма существенное различие между воздушными частями (цветами, плодами, листьями) н подземными (корнями) по отношению к экзосмозу сахара: первые выделяли его через кожицу в воду, последние же удерживали сахар в себе.

Гартиг^[15] производил диосмотические опыты с концами листьев гиацинта и лука в 3—4 дюйма длины. Он предварительно удалял из них внутренние ткани, а оставшуюся наружную часть листа, составленную из кожицы, прилегающей паренхимы и сосудистых пучков, подвергал долгое время мацерации в воде; для удаления воскообразных отложений кожицы отрезки листа подвергались кипячению в спирте. Лист, наполненный одною из жидкостей, погружался в сосуд с другою жидкостью. Из полученных результатов наиболее интересны следующие: 1) листья гиацинта и лука оказались совершенно непроницаемы для раствора сахара независимо от того, помещался ли он внутри листа или в окружающей жидкости; 2) при погружении листа лука, наполненного раствором дубильной кислоты, в раствор двухлористого железа обнаруживалась быстрая убыль жидкости в листе, между тем как дубильная кислота задерживалась листом; 3) лист лука, наполненный тинктурой йода и погруженный в жидкий клейстер, выделял спирт и задерживал йод, так как клейстер оставался бесцветным; 4) лист лука, содержавший раствор хлористого кальция и опущенный в раствор щавелевокислого калия, покрывался только на наружной поверхности большими и длинными кристаллами щавелевокислого кальция, следовательно, выделял из себя хлористый кальций и не пропускал внутрь щавелевокислого калия, несмотря на то что уровень жидкости в листе поднимался столь быстро, что приходилось ежедневно выливать из листа часть жидкости; 3) при наполнении листа лука раствором щавелевокислого калия и погружении в раствор хлористого кальция жидкость в листе быстро убывала, но нигде не показывалось и следа кристаллов или осадка щавелевокислого кальция.

Ввиду этих фактов нельзя не сознаться, что условия обмена веществ живой клетки с окружающею средою еще далеко не вполне выяснены и что имеющиеся наблюдения и опыты могут служить лишь указанием пути, ведущего к разрешению намеченных вопросов.

• [1] Schumacher. Die Diffusion in ihrer Beziehung z. Pflanze, 1861, p. 29.
• [2] Баранецкий. Исследования над диосмозом. 1870.
• [3] Traube. Bot. Zeit. 1875; р. 57; его же подробная статья помещена в Archiv v. Reichert u. Du Bois Reymond, 1867. См. также: Cohn. Bot. Zeit. 1876, p. 697.
• [4] Pfeffer. Osmotische Untersuchungen. 1877.
• [5] 8 Pfeffer. L. с.
• [6] Pfeffer. L. с., 1; р. 34.
• [7] 2 Nageli. Pflanzenphysiol. Untersuch. Н. 1; 5 (1855).
• [8] и Nageli. Just. Jahresb. 1875. 875.
• [9] Cornu. C. R. 84, 133 (1877).
• [10] Tangl. Pringsh. Jahrbiich. 12, 170 (1880).
• [11] Pfejfer. L. с., р. 44.
• [12] .Sachs. Bot. Zeit. 1862, N 33.
• [13], e Schacht. Lehrb. d. Anat. u. Physiol, d. Gewachse, 1, 362 (1856).
• [14] Boussingault J. Ann. Chim. Phys. S. 4, t. 29, 360 (1873).
• [15] •e Hartig. Bot. Zeit. 1853, 309 и 481.