Характеристика лейкоза крупного рогатого скота

Лейкоз крупного рогатого скота — хроническая инфекционная болезнь, сопровождающаяся злокачественным разрастанием клеток кроветворных органов с нарушением их созревания, диффузной инфильтрацией органов или образованием опухолей из этих клеток. Название болезни «лейкоз» происходит от греческого слова Leukosis — белокровие, лейкемия. Понятие о лейкозе как о самостоятельной нозологической единице было введено в литературу Р. Вихровым в 1945 г., который, наблюдая в крови больных множество белых, бесцветных клеток, установил связь этого явления с увеличением селезёнки и лимфатических узлов. В конце девятнадцатого столетия большой вклад в описание этиологии опухолей и лейкозов человека, крупного рогатого скота, лошадей, свиней внесли: Томаров, Славенский, Шастный, Лейзеринг, Сидамгродский. Позднее в 20-х годах прошлого столетия появились сообщения о лейкозе овец, собак, кошек и птицы, также лейкоз наблюдали у слонов, лосей, оленей, жирафов, гиен, буйволов, морских львов, обезьян.

Определение лейкозов как злокачественных болезней, поражающих кроветворные органы и проявляющихся опухолевым ростом, отвечает современным понятиям классификации опухолей, по которым лейкозы и другие опухолевые болезни кроветворной и лимфоидной ткани объединены в одно понятие — гемобластозы, которые включают две группы болезней:

первая — лейкозы (лимфоидный лейкоз, миелолейкоз, недифференцированный лейкоз) — характеризуется системным поражением органов (селезёнка, лимфоузлы);

вторая — гематосаркомы (лимфосаркома, плазмоцитома, лимфогранулематоз) — характеризуется образованием очаговых опухолевых разрастаний, исходящих из клеток кроветворной ткани, нередко без изменений в периферической крови.

Лейкоз крупного рогатого скота широко распространен в Российской Федерации. Так, в 2002 году, по данным исследований в реакции иммунной диффузии (РИД) крови от КРС, количество зараженных животных составило в Московской области около 14%, в Ростовской и Владимирской — по 25%, в Брянской — 18%, в Краснодарском крае — до 45%. В некоторых хозяйствах количество инфицированных животных достигает 80—90%.

Болезнь наносит значительный экономический ущерб сельскохозяйственным предприятиям в связи со снижением продуктивности зараженных животных, их выбраковкой, ограничением срока хозяйственного использования, а также с затратами на проведение противолейкозных мероприятий, пастеризацию молока (непастеризованное молоко от зараженных животных запрещено использовать в питании людей).

Больные животные более восприимчивы к инфекционным и незаразным заболеваниям. При этом увеличивается яловость, снижается выход телят, наблюдаются аборты. Телята от таких коров чаще страдают расстройством пищеварения и нарушением органов дыхания.

Лейкоз крупного рогатого скота является серьезной проблемой для скотоводства Краснодарского края, занимая в структуре инфекционных патологий ведущее место.

Огромный вред, наносимый лейкозом животноводству края, складывается не только из потерь, связанных с гибелью и преждевременной выбраковкой высокопродуктивных коров, снижением продуктивности, качества молока, затратами на проведение противолейкозных мероприятий, но и рождения телят с иммунодефицитами. Все это ставит под угрозу сохранение племенных стад, ведение селекционно-племенной работы с целью совершенствования продуктивных качеств молочного скота.

Скот, зараженный вирусом лейкоза крупного рогатого скота, не может считаться здоровым, а получаемая от него продукция — качественной. Инфицированию вирусом лейкоза крупного рогатого скота и развитию болезни способствуют не только генетическая предрасположенность и дефекты иммунитета, часто развивающиеся в результате нарушения технологии содержания и кормления.

Лейкоз крупного рогатого скота — хроническая инфекционная болезнь, вызываемая РНК-содержащим вирусом семейства Retroviridae. Инфекционный процесс при лейкозе крупного рогатого скота характеризуется стадийностью. Различают 3 стадии или периода в развитии инфекции: инкубационную, гематологическую и опухолевую. Источником возбудителя болезни являются инфицированные вирусом лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС) животные на всех стадиях инфекционного процесса. Животные заражаются при проникновении в организм лимфоцитов, содержащих вирус лейкоза, энтерально и парентерально. Факторами передачи вируса являются: кровь, молоко и другие материалы, содержащие лимфоидные клетки животных, зараженных вирусом лейкоза крупного рогатого скота.

При этом заболевании рассматривают два пути передачи вируса: преднатальный (вертикальный) от матери плоду и постнатальный (горизонтальный) от животного животному. Материалы экспериментальных и эпизоотических исследований, а также данные специальной литературы показывают, что вертикальный путь передачи вируса лейкоза КРС не имеет существенного значения в эпизоотическом процессе онковирусной инфекции.

Постнатальный путь передачи ВЛКРС рассматривается с позиции, включающих опасность, которую может представлять: совместное содержание положительных и отрицательных в РИД животных, использование телятам молозива коров с положительной серологической реакцией, нарушение правил асептики и антисептики при одновременных зоотехнических манипуляций среди серопозитивных и серонегативных животных, также передача животными-переносчиками инфекционного начала (например, спаривание положительных быков с отрицательными в РИД коровами, вызывает инфицирование последних).

Эпизоотология. Лейкозы животных диагностируются почти во всех странах мира. Наиболее широко распространены в США, в ряде стран Центральной Европы, Дании, Швеции и странах Ближнего Востока. Лейкоз установлен в Африке и в Австралии. В нашей стране лейкоз распространён повсеместно. Лейкоз занимает первую позицию среди инфекционных болезней КРС и представляет потенциальную опасность для генофонда племенного молочного скота.

Экономический ущерб складывается из недополучения молока, приплода, из-за выбраковки и убоя животных; утилизации лейкозных туш; сдачи на мясо племенного молодняка от больных коров; расходов на проведение ветеринарно — санитарных мероприятий.

В 1969 году в США Miller I. и соавторы открыли вирус лейкоза крупного рогатого скота. Установлено, что вирус является этиологическим агентом бычьего лейкоза, он получил название «вирус лейкоза крупного рогатого скота» (ВЛКРС или в зарубежной литературе BLV — Bovine leukemia virus). ВЛКРС является экзогенным вирусом, относится к семейству Retroviridae, подсемейству Oncovirinae. Имеет структурное, функциональное и генетическое сходство с вирусом Т-клеточного лейкоза человека, что позволило отнести эти виды вирусов к одному роду, обозначенному типом Е. Вирус лейкоза КРС присутствует в организме в виде провируса, интегрированного в клеточный геном, что позволяет патогену уйти от защитных иммунных механизмов хозяина. Единственное место локализации ВЛКРС в организме — лимфоцит, поэтому выделение вируса лейкоза во внешнюю среду возможно только с кровью и любым секретом или экскретом, содержащим лимфоциты.

Вирус лейкоза можно обнаружить только при культивации лейкоцитов, in vivo он не обнаруживается. В культурах, заражённых ВЛКРС, зрелые вирионы имеют округлую форму, содержат центрально расположенный электронно-плотный нуклеоид. Центральная часть нуклеоида отделена от двухконтурной внешней оболочки промежуточной зоной, общий диаметр вириона 80 — 120 нм.

Не установлено заражение человека вирусом лейкоза КРС, т. е. по современным понятиям лейкоз не является зооантропонозным заболеванием. Лейкозы человека — это самостоятельные неопластические (опухолевые) болезни, преимущественно не установленной этиологии, за исключением острой Т — клеточной лимфомы — лейкоза. Возбудителем последней является онкогенный вирус, входящий в одну таксономическую группу с ВЛКРС.

Течение и симптомы. Инкубационный период — 2−6 лет. В течении выделяют предлейкозную, начальную, развёрнутую и терминальную стадии, следующие одна за другой месяцы, иногда и годы. В начальной период болезни — лейкоцитоз, носящий стойкий характер, затем в дальнейшем наблюдается системное или регионарное увеличение лимфатических узлов, селезёнки, развивается экзофтальмия, а у телят — опухолевые разросты в зобной железе, увеличивается количество незрелых кроветворных клеток (лейкемия).

При ректальном исследовании у коров находят заметное увеличение лимфатических узлов тазовой полости, глубоких паховых, утолщение стенок матки.

Патологоанатомические изменения. При вскрытии трупов или осмотре туш на мясокомбинатах обращают внимание на величину органов, распространенность опухолевых разрастаний, пораженность лимфатических узлов. Следует учитывать, что при лимфолейкозе лимфатические узлы увеличены равномерно, не срастаются с окружающими тканями, капсула снимается легко, поверхность разреза серо-белая, консистенция узлов саловидная, сочная. Лимфатические узлы при лимфогранулематозе, лимфосаркоме бугристые, капсула сращена с паренхимой, на поверхности разреза кровоизлияния и некрозы, в органах брюшной, тазовой полостей, на серозных оболочках находят опухолевидные разрастания желтоватого цвета. Селезенка при лимфоидном лейкозе увеличена в 3—5 раз, гиперплазированные фолликулы четко выступают, консистенция резиноподобная, нередко капсулы резко увеличенного органа разрываются. При миелолеикозе селезенка красно-малинового цвета, фолликулы плохо заметны, консистенция органа рыхлая. При лимфосаркоме селезенка часто не увеличена При лейкозе находят очаговые или диффузные опухолевидные разрастания серо-белого цвета в паренхиме печени, почек, в толще сердечной мышцы, органах пищеварения, матке, скелетных мышцах и других органах На гистологическое исследование при лейкозе направляют кусочки селезенки, лимфатических узлов, печени, легких, сердца, стенки пораженных органов пищеварения (чаше сычуга), матки и скелетных мышц.

При гистологическом исследовании при лимфоидном лейкозе находят стирание характерного строения органа в результате бурной очаговой или диффузной лимфоидно-клеточной инфильтрации. Среди клеток преобладают зрелые лимфоциты и в меньшей степени пролимфоциты, лимфобласты. При миелолейкозе (встречается редко) в селезенке находят незрелые мегакариоциты, гематоцитобласты, а в лимфатических узлах, печени, почках — очаговые или диффузные разрастания миелоидных элементов.

Диагностические исследования. У крупного рогатого скота проводится прижизненная, предубойная и послеубойная диагностика на лейкоз. Диагноз устанавливают на основании эпизоотологических данных, клинических, патологоанатомических изменений и результатов лабораторных исследований, которые включают серологические, гематологические и гистологические исследования.

Прижизненная диагностика лейкоза. Основу диагностики лейкоза крупного рогатого скота составляет серологический метод исследования — реакция иммунодиффузии в агаровом геле (РИД).

Из числа положительно реагирующих по РИД животных (инфицированных ВЛКРС) с помощью гематологического и клинического методов, выявляют больных лейкозом.

При первичной постановке диагноза в хозяйстве, на ферме, в стаде проводят диагностический убой больных животных с последующими патологоанатомическими и гистологическими исследованиями. Больными признаются РИД — положительные животные, у которых при однократных гематологических исследованиях установлены изменения, характерные для данной болезни.

Серологический метод диагностики лейкоза КРС. У животных зараженных ВЛКРС, вырабатываются антитела к вирусным антигенам. Характерная особенность инфекции ВЛКРС — это появление специфических антител в крови через 2 — 8 недель после заражения и пожизненное сохранение в организме инфицированных особей. Серологическими методами ВЛКРС можно выявлять у животных только старше 6 месяцев, т.к. у телят, выпаиваемых молоком и молозивом инфицированных ВЛКРС матерей, имеются пассивно приобретённые материнские антитела, которые персистируют (сохраняются) до шестимесячного возраста.

Метод реакции иммунодиффузии (РИД) основан на обнаружении в сыворотки крови животных специфических преципитирующих антител против вируса лейкоза крупного рогатого скота. Пробы крови для исследования отбирают не ранее, чем через 30 — суток после введения животным вакцин и аллергенов, у стельных коров — за 30 суток до и после отёла. Животные, сыворотки которых дали положительный результат в РИД, считаются заражёнными вирусом лейкоза, их необходимо исследовать гематологическим методом.

Гематологический метод. В периферической крови наблюдают количественные и качественные изменения клеток, особенно лейкоцитов, являющиеся одним из существенных признаков лейкоза. Метод заключается в количественной и качественной оценке лейкоцитов периферической крови животных, отнесенных по результатам РИД к группе инфицированных ВЛКРС.

При гематологическом исследовании осуществляют:

подсчет количества лейкоцитов при помощи электронных счётчиков или в камере Горяева;

дифференцированный подсчёт лейкоцитов в мазках (выведение лейкоформулы) или лимфоцитов при помощи фазово — контрастного микроскопирования крови в камере Горяева;

оценку количества лейкоцитов и абсолютного количества лимфоцитов по «лейкозному ключу».

Объектом гематологического исследования является периферическая кровь, пунктаты костного мозга, селезенка, лимфоузлы. Кровь для этих исследований берут из ярёмной вены в пробирки с антикоагулянтом. В качестве антикоагулянта используют трилон Б из расчёта 1 капля 10% - ного раствора на 1 мл крови, гепарин, или 6% раствор лимоннокислого натрия (1 капля на 1 мл крови). Стабилизированную кровь до исследования хранят в холодильнике при температуре 2 — 4 градуса С и исследуют не позднее, чем через 36 часов с момента взятия.

Дифференцированный подсчёт лейкоцитов (выведение лейкоцитарной формулы) проводят при обнаружении повышенного их количества. Для этой цели готовят мазки крови, которые фиксируют в этиловом спирте и окрашивают по Романовского — Гимза. Лейкоцитарную формулу выводят по результатам дифференцированного подсчета 100 клеток в окрашенных мазках крови под микроскопом с иммерсионной системой. Количество отдельных элементов крови выражают в процентах.

Животные относятся к категории больных по результатам однократного гематологического исследования. Животных, подозреваемых в заболевании лейкозом, подвергают дополнительному гематологическому исследованию через 1 — 2 месяца. При повторном подтверждении диагноза их считают больными.

Цитоморфологический метод. Сущность метода заключается в обнаружении в периферической крови и кроветворных органах накопления морфологически изменённых, преимущественно незрелых или патологических клеток.

Мазки, приготовленные на предметных стёклах, а также препараты — отпечатки, приготовленные из материала, взятого при биопсии, или из кусочков органов при убое животного, фиксируют в спирте, окрашивают по Паппенгейму и исследуют под микроскопом с иммерсионным объективом при увеличении 90.

Результаты считают положительными на лейкоз, если в мазках крови более 3%, а в кроветворных органах более 10% родоначальных, слабодифференцированных (пролимфоциты, лимфобласты, миелобласты) или опухолевых клеток, которые отличаются от нормальных по форме, величине, структуре и тождественны клеткам, образующим опухоли.

Электронно-микроскопический метод. Для прижизненной дифференциальной и экспресс — диагностики гемобластозов на начальных стадиях лейкозного процесса применяется трансмиссионная и сканирующая электронная микроскопия.

Сканирующая микроскопия позволяет оценить поверхностную архитектонику, а трансмиссионная — ультраструктуру инфицированных и «лейкозных» лимфоцитов. Метод электронной микроскопии включает в себя:

выделение лимфоцитов или лейкоцитов из крови или лимфы;

взятие кусочков лимфоузлов размером 0,5 * 1,0 см;

фиксацию, обезвоживание и заливку материала в эпоксидную смолу;

приготовление ультратонких срезов, их окраска солями тяжёлых металлов — цитратом свинца и уранилацетатом;

исследование в электронном микроскопе и фотографирование полученных объектов на фотопластины.

Вирус лейкоза КРС обнаруживается только in vitro при культивировании лейкоцитов крови и лимфы в течение 24, 48, 72 часов. Вирусные частицы образуются на поверхности клетки (лимфоцита) или в цитоплазматических вакуолях.

Лейкозные лимфоциты имеют чёткие отличия от нормальных клеток. У них находят: полиморфизм ядра, гипертрофию мембранного аппарата, дубликацию ядерных и поверхностных мембран митохондрий, появление ядерных аномалий — ядерных карманов (самый важный признак).

В одном лимфоците обнаруживают от одного до шести и более ядерных карманов. Эти аномалии являются специфическими для лейкозных лимфоцитов.

Клиническая диагностика. Клинические признаки злокачественных заболеваний кроветворной ткани КРС — гемобластозов — складываются из наблюдений за больными животными. Они разнообразны и зависят от формы и стадии течения болезни. Выявляются чаще у животных 4 — 8 — летнего возраста и протекают в основном хронически (2 — 5 лет). Инфекционный процесс при лейкозе КРС характеризуется стадийностью. Различают 4 стадии болезни: инкубационную (онкорнавирусная инфекция), начальную, развёрнутую и терминальную. Болезнь протекает вначале бессимптомно, а затем проявляется лимфоцитозом и (или) образованием опухолевых разрастаний в кроветворных, лимфоидных органах и тканях.

При клинической диагностике применяют общие методы исследования: осмотр животного, пальпацию поверхностных лимфоузлов, термометрию, аускультацию, перкуссию, ректальное исследование лимфоузлов и органов тазовой полости.

Помимо поражения кровеносной и лимфоидной систем часто в патологический процесс вовлекаются внутренние органы, не имеющие отношения к кроветворению. Поэтому и клинические признаки могут быть неспецифические, отображающие функциональные нарушения той или иной системы органов вследствие опухолевых разрастаний, и специфические, характерные для отдельных форм лейкоза.

Неспецифические признаки выражаются расстройствами функций организма общего характера. У животных ухудшается общее состояние, наблюдается отсутствие аппетита, снижение удоя, быстрая утомляемость, исхудание. Нередко отмечают расстройства деятельности желудочно-кишечного тракта (диарея, запоры, атония, тимпания преджелудков). Опухолевые разрастания в сердце обуславливают ослабление сердечной деятельности, провоцируют симптомы травматического перикардита, цианоз, желтушность слизистых оболочек, нарушения дыхания, отёки подкожной соединительной ткани в области подгрудка, живота, вымени, подчелюстного пространства. Наблюдают увеличение одной или нескольких долей вымени (вначале без нарушения лактации).

В патологический процесс нередко вовлекается печень, она увеличивается в объёме. При резком увеличении её задний край пальпируется через брюшную стенку.

Специфические клинические признаки характеризуются увеличением поверхностных (предлопаточных, околоушных, нижнечелюстных, надколенных, надвыменных) и доступных ректальному исследованию внутренних лимфоузлов (глубокие паховые, крестцовые). Обнаруживается увеличение матки, мочевого пузыря, пучеглазие — экзофтальм за счёт опухолевых разрастаний. Характер и степень поражения лимфоузлов различны, зависят от формы болезни. Внутренние лимфоузлы поражаются чаще наружных. Увеличенные лимфоузлы без повышенной температуры, безболезненны, подвижны, эластичной или плотной консистенции. Они могут срастаться в конгломераты.

К специфическим признакам относится увеличение селезёнки. При лимфолейкозе её размеры возрастают в несколько раз, и селезёнка может достигать массы в 25 килограмм; в некоторых случаях капсула разрывается, и животное внезапно гибнет от внутреннего кровотечения.

Клинические признаки проявляются только у 10 — 30% больных лимфолейкозом животных. В результате непостоянного увеличения лимфоузлов при миелоидном, слабодифференцированном лейкозе, гематосаркомах поставить прижизненный диагноз по клиническим признакам даже в терминальной стадии болезни трудно. Необходимо проводить тщательное дифференциально-диагностическое исследование.

Дифференциальный диагноз. Дифференцируют от многих хронически и остро протекающих болезней (туберкулёза, бруцеллёза, паратуберкулёза, инвазионных болезней, а также незаразных).