Некоторые особенности морфогенеза метанефроса у крыс

За последние годы был достигнут большой прогресс в выявлении ряда паракринных факторов, регулирующих морфогенез многих органов, в том числе и почек (8). Рост и ветвление эпителиальных трубок в ходе эмбрионального гистоорганогенеза обусловлено координирующим влиянием негативной обратной связи между сигнальными центрами окружающей мезенхимы и эпителиальными структурами. Влияние многих экстрацеллюлярных регуляторов, включающей таких как семейство GDNF (9), семейства TGF-b, BMP-2 (10), HGF (11) и другие. Вместе с тем, мало внимания уделяется изучению механизмов морфогенеза, которые транслируют эти сигналы в морфологические формы. Общеизвестно, что потенциально мощным фактором эмбрионального гистогенеза является клеточная пролиферация, которая способна в принципе объяснить не только увеличение в размерах развивающиеся структуры, но и приобретение ими соответствующей формы и пространственной ориентации в ходе миграции, согласно строго регулируемой программе клеточного деления, и далее дифференцировки.

В работе изучались электронномикроскопические особенности специфической дифференцировки эпителиальных клеток (объемная плотность грЭПС, к. Гольджи, митохондрий, микрофиламентов), а также митотический индекс эпителия формирующегося почечного клубочка, изменение формы клеток, формирование цитопедикул и цитотрабекул, а также основные морфологические процессы, происходящие с эпителием при образовании фильтрационного барьера почечных телец метанефроса на материале эмбрионов 14−15, 18, а также 21 суток жизни крыс и новорожденных животных.

Результаты исследования.

При световой микроскопии обнаруживается неодинаковое строение почечных телец нефронов в различных зонах коркового вещества. Этот факт объясняется последовательным развитием и различной степенью дифференцировки генераций нефронов (Волкова О.В. 1976, Кнорре А. Г. 1967, Мельман 1988, Пэттен Б. М. 1959, Фалин Л.И.1976).

Почечные тельца субкапсулярной зоны коркового вещества почек эмбрионов всех изученных сроков и новорождённых животных наименее сформированы: они представлены зачатками капсул ложкообразного вида. Обнаружена тенденция к дифференцировке однослойного плоского эпителия наружного листка капсулы и однослойного высокопризматического внутреннего листка без формирования полости капсулы.

Почечные тельца среднекортикальной зоны выглядели более зрелыми: в них присутствовали петли капиллярного клубочка, появился узкий просвет капсулы почечного тельца. Отмечена тенденция к снижению высоты клеток внутреннего листка капсулы почечного тельца.

эпителиальный трубка метанефрос крыса.

Почечные тельца околомозговой зоны у эмбрионов и новорождённых выглядели сформированными. Отмечено увеличение количества капилляров, их просвета и кровенаполнения.

В наименее дифференцированных почечных тельцах субкапсулярной зоны коры почек как эмбрионов всех изученных сроков, так и новорождённых животных были установлены наиболее высокие показатели митотического индекса. В то же время самые низкие показатели митотической активности оказались в эпителии почечных телец околомозговой зоны.

В связи с тем, что во время митоза клетки в значительной степени теряют признаки предшествующей дифференцировки (Клишов А.А. 1968), ультраструктурная оценка компонентов ГФБ проводилась на почечных тельцах околомозговой зоны.

При изучении ультраструктурных особенностей подоцитов и эндотелиоцитов у эмбрионов и новорождённых животных было установлено, что по мере увеличения срока эмбриогенеза всё более отчётливыми становились признаки дифференцировки эпителиальных клеток. Они выражались в изменении строения ядер (преобладании деспирализованного хроматина, увеличении количества ядрышек и пор), параллельно которому в цитоплазме появлялось и прогрессивно увеличивалось количество структур аппарата синтеза (рибосом, полисом, грЭПС) а также митохондрий (табл. 3); затем появлялся комплекс Гольджи. Темпы развития последнего уступали темпам развития белок-синтезирующего комплекса и совпадали с появлением секреторных и транспортных пузырьков, а так же с развитием гликокаликса.

Формирование БМ включало в себя появление Lamina. densa, которая вначале состояла из отдельных разобщённых участков и имела вид расщеплённой, частично фрагментированной пластинки; затем она приобретала трёхслойное строение. Вместе с тем и у новорождённых она выглядела не вполне сформированной, т.к. Lamina. rara interna часто шире, чем Lamina. rara externa, что, возможно, связано с неустоявшимся ещё процессом фильтрации и с незавершённой дифференцировкой эндотелия, не имеющего достаточного количества пор и фенестр.

Параллельно происходило формирование ЦП, которое включало в себя их разделение, появление ФЩ и диафрагм.

Отмечена тенденция к увеличению толщины БМ, уменьшению ширины ЦП и ФЩ с увеличением срока эмбриогенеза (табл. 4).

Таким образом, было установлено, что в почечных тельцах околомозговой зоны коркового вещества почек ведущим являлся процесс дифференцировки. Несмотря на то, что на светооптическом уровне почечные тельца этой зоны уже выглядели сформированными, при ультраструктурном анализе выявлялась незрелость компонентов ГФБ. Степень дифференцировки прямо пропорциональна сроку эмбриогенеза.

Гломерулярный фильтрационный барьер новорожденного животного. Видны хорошо сформированные цитопедикулы и фильтрационные щели. Базальная мембрана не вполне сформирована. В цитоплазме эндотелиоцита видны фенестры.

Гломерулярный фильтрационный барьер эмбриона. Цитопедикулы недостаточно сформированы. Контуры их нечеткие. Фильтрационные щели узкие. Пластины базальной мембраны имеют разную толщину. В цитоплазме эндотелиоцита видны многочисленные пузырьки.