Иммуноцитохимический и иммуногистохимиеский анализ

Иммуногистохимимческое исслемдование — метод микроскопического исследования тканей, обеспечивающий наиболее специфическое выявление в них искомых веществ и основанный на обработке срезов маркированными специфическими антителами к выявляемому веществу, которое в данной ситуации служит антигеном. Впервые способ окрашивания клеточных и тканевых компонентов с помощью специфических антител для микроскопического исследования был предложен A. Coons с соавт. в 1941 году; позднее были разработаны антитела, меченные не флуоресцентными красителями, а ферментами.

Прямой иммуногистохимический метод основан на реакции специфического связывания маркированных антител непосредственно с выявляемым веществом:

Рис. 10 Схематичное изображение прямого гистохимического метода.

Непрямой иммуногистохимический метод является более чувствительным, основан на том, что немаркированные первичные антитела связываются с искомым антигеном (выявляемым веществом), а далее уже их выявляют при помощи вторичных меченых антител, при этом первичные антитела служат для вторичных антигенами.

Маркировка антител производится путём их связывания с одной из следующих групп веществ:

флуоресцентные красители (родамин, флуоресцеин);

ферменты (щелочная фосфатаза, пероксидаза хрена) — далее выявляются гистохимически;

электронно-плотные частицы (коллоидное золото, ферритин).