Используют реактивы аналитической чистоты и воду квалификации «для хроматографии».
Растворители: этилацетат, хлороформ и толуол.
Подвижные фазы для двумерной ТСХ:
- — бензол/метанол/уксусная кислота (массовой долей 80%) (19:2:1 по объему);
- -толуол/этилацетат/муравьиная кислота (массовой долей 90%) (5:4:1 по объему).
Силикагель для колоночной хроматографии с размером частиц от 0,063 до 0,2 мм.
Элюирующий раствор: смесь толуола с этилацетатом (75:25 по объему).
Стандартный раствор патулина (С7Н604).
Приготовление стандартного раствора патулина.
Навеску патулина массой 10,0 мг, взятую с точностью до 0,1 мг, растворяют в мерной колбе с одной отметкой вместимостью 100 см3 в этилацетате (1.3.2.1). Объем содержимого в колбе доводят до отметки этилацетатом.
Пипеткой переносят 10,0 см приготовленного раствора в другую мерную колбу с одной отметкой вместимостью 100 см, объем содержимого в колбе доводят до отметки этилацетатом.
Массовая концентрация патулина в приготовленном стандартном растворе составляет около 10 мкг/см3.
Измеряют оптическую плотность стандартного раствора при длине волны 276 нм на подходящем спектрофотометре с использованием кварцевых кювет рабочей длиной 10 мм.
Расчет концентрации стандартного раствора патулина Концентрацию стандартного раствора патулина сps. мгк/см3, рассчитывают по формуле.
сps= (3.1).
где — оптическая плотность стандартного раствора патулина;
— молярный показатель поглощения раствора патулина при длине волны 276 нм, дм3*моль-1 *см -1 (14 600);
М — молярная масса патулина, г/моль;
С — постоянная прибора (обычно С = 1).
Приготовление раствора гидрохлорида МБТГ.
Навеску моногидрата гидрохлорида гидразона З-метил-2-бензотиазолина (МБТГ) массой 0,5 г растворяют в 100 см3 воды.
Приготовленный раствор хранят в холодильнике. Срок годности раствора — 3 сут.