Основы микробиологии

1. Предмет и задачи микробиологии, этапы развития, значение микробиологии для врача Микробиология от греч micros-маленький и bios-организм наука которая изучает микроорганизмы маленьких размеров менее 0,1 мм, систематизирует, выясняет свойства, а также вопросы наследственности, изменчивости. Микроорганизмы самая древняя форма организации жизни на земле около 3−4 млрд. лет назад. В то же время наиболее значимая и разнообразная часть живого мира. Количество их на планете 10³⁰. Они везде есть в космосе, на всех объектах внешней среды, растениях, заселяют организм животных насекомых, человека.

Значение микробов в природе:

1. Участие микробов в круговороте веществ (азота, углерода, фосфора, серы)

2. Влияние микроорганизмов на почву (структуру, плодородие)

3. Широко используются для обеспечение жизнедеятельности человека (получение хлеба, вина, пива, молочнокислых продуктов)

4. Получение белкового корма

5. Получение медицинских препаратов Биотехнология — использование биологических объектов для получения полезных для человека веществ (кислоты, спирты, кормовые белки, антибиотики, гормоны, заменители крови, вакцины и т. д.) Главные биологические объекты БТ: бактерии, вирусы, клетки человека, растений.

Мир микробов

Отличие прокариот от эукариот.

Вирусы это неклеточная форма, генетический материал представлен РНК или ДНК. Не имеют собственного метаболизма. Абсолютные внутриклеточные паразиты на генетическом уровне. Могут жить только внутри живой клетки изменяя ее геном. Присуща наследственность, изменчивость.

Прионы или белки PrP^Sc-возбудители конформационых болезней. Не имеют наследственного материала, являются инфекционными агентами (неживые). Pr^cell отличаются конформацией. Находятся в клетке, выполняют роль передачи импульсов, изменив конфигурацию становятся вредными и вызывают губчатые энцефалопатии. Прионы передаются с пищей, препаратами полученными от животных.

Вироиды нуклеиновые кислоты без белка. Они мигрируют, перемещаются вызывают болезни у растений и пока неизвестно что бы они вызывали болезни у человека.

История развития микробиологии.

Эмпирический период. А. Левенгук (1632−1723) Рассматривал в стекла и увидел организмы, которые назвал animalcuta viva т. о. Левенгук является основоположником микробиологию. Он создал оптический прибор, который давал увеличение 160, 300 раз. В этот период были открыты возбудители многих болезней (чумы, трихомонады, возбудитель сибирской язвы). Дженнер (1740−1823) предложил метод натуральной вакцинации (vacca — корова) для борьбы с натуральной оспой (перенос зараженного материала коровы к человеку).

Пастеровский период. Пастер (1822 — 1895). Первое открытие то что брожение не является только химическим процессом, оно вызывается различными группами микроорганизмов (молочнокислое — молочнокислыми бактериями, спиртовое — дрожжевыми клетками, уксуснокислое). Второе это открытие анаэробиоза — жизнь в отсутствии кислорода. Одновременно открыл микробы анаэробы. Провел опыты по самозарождению и доказал, что самозарождение не существует, а порча продукта связана с попаданием в этот продукт из воздуха микроорганизмов. Пастер доказал, что виновником гнойных послеоперационных осложнений являются патогенные стрептококки. В основе этого Листер предложил обработку ран карболовой кислотой это положило начало эры асептики и антисептики. Пастер установил природу гниения, то что в нем учувствуют Clostridium. Так же предложил превращение патогенного микроорганизма в непатогенный т. е. способ получение вакцин (получил против куриной язвы, бешенства). Вакцину против бешенства он изобрел взяв зараженный мозг собаки и заразил этой тканью кроликов введя в субдуральное пространства. Кролики заболели бешенством и погибли. И пересеял их мозговую ткань другим кроликам и т. д. Пастер затем заметил, что новая партия кроликов заболевает быстрее чем предыдущие. Таким образом он получил фиксированный вирус бешенства, который был высоко патогенен у кроликов. Пастер ввел этот фиксированный вирус собаке, человеку (другому биологическому виду) и т. д. И другим видом (подкожно) и увидел, что собаки не заболели бешенством, а так же были защищены от дикого вируса. Первыми пациента укушенными волком были смоленские крестьяне (18 человек) 15 из них выжили.

Роберт Кох открыл возбудителя туберкулеза, холеры, получил туберкулин. Предложил методы выделение чистой культуры, окраски микроорганизмов Сформулировал триаду признаков триада Генле-Коха для установление этиологической рполь для любого микроорганизма. Включает три признака:

Ш возбудитель должен быть выделен в чистой культуре, Ш возбудитель должен быть выделен только при этом заболевании и ни при каком другом, выделятся на чистой культуре Ш чистая культура должна вызывать эксперементальную инфекцию В этот период открыты (гонококки, возбудитель брюшного тифа, клепсиелы, эшерихии, палочка дизентерии).

Иммунологический период. Мечников открыл фагоцитоз чвляется основоположником клеточной теории иммунитета. Эрлих открыл антитела, гуморальная теория иммунитета. Разработал методы химиотерапии. Ивановский открытие вируса (табачная мозаика). Разработаны антибиотики.

Молекулярно-генетический период. Начало вторая половина 20 века до сих пор. Стало возможным изучение генома микроорганизмов открыты прионы, открыты новые вирусы (ВИЧ, SARS) открыты новые антигены — опухолевые, гистосовместимости системы HLA (человеческие лейкоцитарные антигены), расшифровано строение антител или иммуноглобулина, получены клеточные структуры ткани, получены рекомбинантные бактерии, вирусы содержащие генетические материал 2 вирусов. Созданы гибридомы — клетки, которые получены слиянием 2 типов клеток, и гибридомы с помощью которых получают моноклональные антитела. Открыты имуномодуляторы — вещества влияющие на имунокомпетентные клетки. Разработаны новые способы диагностики инфекционных заболеваний и других заболеваний методами ИФА, РИА, ПЦР. Развитие биотехнологий, т. е. использование микробных клеток для производства многих препаратов, гормонов, цитокинов. С открытием новых инфекций отмечается реставрация старых патогенов таких как возбудитель сифилиса, туберкулеза, дизентерия, гонорея.

Разделы медицинкой микробиологии:

Ш паразитология Ш микология Ш иммунология В завистимости от целей и задач:

Ш медицинская микробиология Ш промышленная Ш сельскохозяйственная Ш ветеринарная Ш пицевая Медицинская в зависимости от цели и задач:

Ш клиническая — изучает условнопатагенные микроорганизмы вызывающие неспецифические инфекционные заболевания с локализацией в разных органах и тканях, с которыми сталкиваются в врачи любой профессии (гнойно-воспалительные процессы) и патогенные, которые вызывают конкретные инфекционные заболевания (чума, холера, дизентерия) .

Ш санитарная микробиология — изучает распространение в окружающей среде, наличие в объектах таких УПМ и ПМ, влияние их на здоровье населения Ш фармацевтическая — микрофлора лекарственного сырья, растений, вопросами микробиологической чистоты и стерильности препаратов, использованием микроорганизмов в производстве многих лекарственных препаратов.

2. Систематика, номенклатура микроорганизма, принципы классификации микроорганизмов Задачи систематики показать степень родства между организмами и эволюционную связь. Принципы классификации изучает — таксономия (от греч. taxis-расположение, homos — закон) Основные таксономические единицы в систематики микроорганизмов следующие:

Ш Царство в основе тип клеточной организации (прокариоты, эукариоты, вирусы) Ш Отдел — бактерии Ш Класс Ш Порядок Ш Семейство Ш Род Ш Вид Основная таксономическая единица в микробиологии вид, род, семейство.

Вид — бактерии это совокупность микроорганизмов одного генотипа, которые в одинаковых условиях имеют одинаковые фенотипические признаки. Например: Salmonella typhi (род, вид). В пределах одного вида отдельные признаки. Отдельные свойства могут варьировать, поэтому внутри вида могут вида могут определятся под виды (морфологические варианты, биоварианты, хемоварианты, фаговары, серовары (отличаются по антигенным свойствам)).

Установление принадлежности к роду и виду называется идентификацией бактерий. Для идентификации необходимо изучить все свойства микроорганизмов, обнаружить эти свойства в мире микроба. Идентификация микроорганизма происходит по набору следующих свойств: тинкториальный, кульруральных, биохимических, факторов патогенности, антигенных свойств и отношение к фагам. Для облегчения идентификации предложены специальные идентификационные ключи для определенных групп микроорганизмов это наборы признаков для микроорганизма — семейства, рода и вида. Идентификации подвергаются исключительно чистые культуры организма.

ЧКМ — микробы одного вида выращенные в лабораторных условиях на искусственных питательных средах.

Штамм — чистая культура выделенная из конкретного источника, либо чистая культура выделенная из одного источника, но в разное время.

Клон — чистая культура микробов полученная из одной бактериальной клетки Популяция микробов — совокупность особей одного вида длительно существующих на определенной территории и изолированных от других особой того же вида, популяция единица эволюции. Например популяция сальмонеллы тифи северных регионов отличается от обитающих в южных регионов.

Генетическая таксономия Идентификация бактерий на основании генетического родства. В основе определение генетических структур клетки — ДНК, внехромосомных структур — плазмиды, транспазоны. Доказано что состав основавний ДНК витоспецифичны т. е. определяется процентное содержание ГЦ от общего содержание всех оснований это может иметь значении е для определение вида. Определяется сходство или комплементарность кислот между различными организмами методом гибридизации. Устанавливают гомологию последовательности нуклеиновых кислот. Этим методом определяют родство между микроорганизмами. % сходства одного порядка равен 80%, для семейства 90%, рода 95% для вида почти 100%.

Первый труд в котором были описаны и классифицированы бактерий был составлен Берджи в 1923 г. В нем бактерии разделены на 25 группы. Патогенные всего 20 групп. В определителе бактерии разделены на Gracilicutes — тонкостенные, Firmicutes — толстостенные, Teniricutes — мягкотелые.

Ультраструктура бактериальной клетки Бактериальная клетка имеет постоянные структуры — клеточная стенка, цитоплазматическая мембрана, цитоплазма, рибосомы, нуклеоид. Непостоянные — жгутики, ворсинки, капсула, включения, споры.

Постоянные структуры.

Клеточная стенка: Функции — защитная, формообразующая, участвует в делении, транспортная, рецепторная, определяет антигенные свойства бактерии, определяет тинкториальные свойства бактерии (диффузии краски). Нарушение синтеза клеточной стенки приводит либо к гибели бактерии, либо к образованию сферобластов, протобластов (теряют способноть к размножению) или L-формы (сохранили функцию размножения). Утрата связана с антибиотиками, влияние лизоцина. Утрата будет сопровождаться () процесса и антибиотиками не лечится.

Главный элемент к. С Муреин — полимер, связываются фрагменты связываются уникальными аминокислотами (есть только у прокариот), муреин является мишенью для антибиотиков именно избирательность антибиотиков связана с муреином. КлС Г (-) тонкая, в ней выделяют ригидный слой образованный пептидогликаном (20%) и пластичный слой его толщина значительна и в нем много липополисахарида (80%), который имеет базисную часть это молекула полисахарида, липид-А (отвечает за токсичность, пирогенность), О-специфические боковые фрагменты (состоят из полисахаридов, определяют антигенные свойства). Г (+) стенка толще состоит из многослойного пептидогликана 90%, тейхоевые кислоты. Тк пронизывают клеточную стенку и связываются с ПГ за счет них определяются антигенные свойства, липополисахаридов почти нет. Белки порины пронизывают КС бактерии, но размеры разные у Г (-) больше, у Г (+) меньше.

Цитоплазматическая мембрана: функция: избирательная проницаемость, осмотический барьер, участие метаболизме, энергетический обмен (в составе много ферментов — цитохромы, оксидазы, дегидрогиназы, атефазы), репликация, участие в спорообразовании, выделительная.

Цитоплазма коллоидная система состоит из воды включений органелл, место где идет метаболизм.

Нуклеоид замкнутая ДНК (бактериальная хромосома) имеет гаплоидный набор. Методы выявления нуклеоида: специальная микрохимическая реакция по Фельгину, обнаружение в электронный микроскоп. Функции: хранение генетической информации, определение жизнеспособности клетки.

Непостоянные структуры.

Капсула: по химическому составу полисахаридное в-во, слизистый слой, белки, липиды. Может быть большой (больше чем клетка), маленькой можно обнаружить. Функции: защитная (от фагоцитоза макрофагами), дополнительный фактор патагенности, защищает от действия антилел, антибиотиков, придает адгезивные свойства. Продукция капсулы исключительно в живом организме, а не Вов внешней среде, на искусственной питательной среде (обогощенной полисахаридами) небольшая часть микробов может продуцировать капсулу (пневмококки, клепсиелы, возбудитель сибирской язвы).

Споры: является защитной реакцией присущей некоторым микроорганизмам, при попадании в неблагоприятные условия (внешняя среда — отсутствие воды, питательных веществ, старение культуры, неблагоприятная температура), обычно палочковидные (в зависимости от этого они делятся на бациллы, кластридии (Сп⁺) и остальные бактерии). Спорообразование у прокариот является формой сохранения генетического материала клетки при неблагоприятных условиях, а не метод размножения (из одной клетки 1 спора). Обязательное условия для спорообразования необходимо присутствие кислорода. Во внешней среде могут жить десятки лет. После прорастания (4−5 часов) вегетативная форма (способная к делению, метаболизму). Разрушаются оболочки споры, образуется ростовая трубочка, синтез клеточной стенки.

Процесс спорообразования:

1. образование спороносной зоны в которой находится нуклеоид,

2. образование проспоры при этом спорогенная зона отделяется,

3. образование кортекса — оболочки споры,

4. отмирание вегетативной части клетки и освобождение споры.

По локализации: спора может занимать центральное положение, субтерминальное, терминальное.

По величине: меньше чем диаметр палочки (бациллы), больше диаметра палочки (клостридии) Свойство споры:

Устойчивость. Термосвязано с химическим составом: мало воды 5−10%, много солей кальция, есть дипиолиновая кислота, поэтому выдерживает пастеризацию, кипячение. Что бы убить спору нужна T=180−200⁰, 20 мин, т=120⁰ + 1,5 атм.

Спорообразование присуще:

Бацилле антрацид — сибирская язва Кластридии — гангрена, столбняк Возбудителям ботулизма Жгутики: органы движения. Поверхностные структуры в виже ниточек, обнаруживаются только в электронный микроскоп в составе сократительный белок флагелин, прикрепляются к цитоплазматической мембране. По количеству и расположению все делятся на: монотрихии, лофотрихии (пучок), амфотрихии (два пучка), перитрихии (по периметру), Длина Ж больше чем длина клетки. Наиболее подвижны монотрихии, лофотрихии.

Методы изучение подвижности:

Висячая капля Раздавленная капля Темнопольная микроскопия Фазоконтрастная микросокпия Ворсинки: тонкие полые нити белковой природы, коротенькие, которые покрывают поверхность клетки, очень много, не выполняют локомоторную функции. Функции: адгезия (ворсинки 1 типа, с ними связана патогенность бактерии), конъюгативная (половые ворсинки) их мало.

Включения: зерна волютина (метафосфатические обладают свойством метохромазии — способность окрашиваться не в цвет красителя), жировые зерна, гликоген. Запас питательного вещества.

ОСНОВНЫЕ МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ФОРМЫ БАКТЕРИЙ.

Ш Шаровидные Ш Палочковидные Ш Извитиые (вибрионы, спириллы (имеют лофотрихии), спирохеты) Прокариоты имеющие особую морфологию:

Ш Спирохеты Ш Рикеции Ш Актиномицеты Ш Хламидии Ш Микоплазмы Спирохеты: нитевидные, спиральнозакрученые, извитые есть локомоторный внутренний аппарат представленный осевой нитью миофибрилл.

Семейства спирохет.

1. Борели — грубые завитки

2. Трепонемы — равномерные завитки

3. Лептоспиры имеют первичные завитки, и вторичные, утолщенные концы Дифференциация проходит: по количеству завитков, характеру концов, по характеру движения.

Типы движения:

Ш Винтообразные (трепонема, лептоспира) Ш Вперед-назад, право-лево Характер движения:

Ш Плавные Ш Резкие Методы изучение: окраска по Романовскому-Гинзе. Борели — синие, остальные розовые. Микроскопия темнопольная микроскопия, фазово-контрастная.

Риккетсии: прокариоты, маленьких размеров, Полиморфные (коковидную, кокобактериольную, палочковидные, длинную нитевидную) связано с особенностями деления, перегородка неполная и по этому клетки могут принять различную форму.

Облигатные внутриклеточные паразиты на искусственных средах не растут, могут культивироваться только в живой клетке (куриного зародыша), в организме насекомых.

Экологическая ниша: заселяют организм членистоногих, передаются трансмессивным путем (укусы) от насекомых — вши, блохи, клещи. Примеры: сыпной тиф.

Методы выявления: окраска — Романовскому — Гинзе, по Здоровскому, при этом клетки в которых находятся риккетсии окрашиваются в один цвет, ядро в другой, сама риккетсия в третий. Микроскопия: цветовая, фазово-контрастная, электронная.

Хламидии: возбудители трахомы, урогенитальный хламидиоз. Прокариоты, маленьких размеров, облигатные внутриклеточные организмы, энергетические паразиты.

Морфологические формы:

Ш Внеклеточная — элементарное тельце, сферическая форма, маленького размера 0,3 мкм, имеющая клеточную стенку, мембрану Ш Внутриклеточная — ретикулярное тельце, находится на разных стадиях созревания, можно обнаружить только внутри клетки, там созревает и разрывает клетку.

Методы обнаружения: окраска по Романовскому — Гинзе, фазово-контрастная микроскопия, реакция имунофлюоресценции, метод иммуноферментного анализа.

Микоплазмы: болезни: пневмония, бронхит, урогенитальный микоплазмоз, неонатальная патология.

Особенности:

Ш Нет клеточной стенки Ш Очень маленькие размеры Ш Полиморфны (сферические, нитевидные) Ш Не красятся по Граму Ш Не чувствительны к пенициллину Ш Являются мембранными паразитами — садятся на клеточную стенку и вытягивают в-ва (холестерин) Методы изучение: культивирование (с добавлением холестерина), растут медленно, РИФ, ИФА, ПЦР, фазово-контрастная микроскопия после окраски по Романовскому-Гинзе.

Актиномицеты: прокариоты имеющие сходство с грибами. Полиморфные (ветвистые, короткие палочки) способны образовывать мицелий, Грам⁺, кислотонеустойчивые. Растут медленно. Места обитание: внешняя среда, полость рта (нормальная микрофлора). Могут размножаться спорами. Изучение: окраска — по Романовскому-Гинзе, культивирование.

Морфология и структура вириона, особенности репродукции.

Размеры вирионов от 15 до 400 нм. Самые крупные — оспа, герпес, маленькие — пикорна вирусы.

Структура вириона:

Ш Нуклеокапсид — нуклеотид (ДНК, РНК) Ш Капсид — состоит из субъединиц, которые укладываются вокруг нуклеиновой кислоты симметрично в виде спирали (палочковидная форма), кубическая (сферическая форма).

Ш Супер капсид имеет выступы в виде шипов.

Химический состав: нуклеиновая кислота, белки капсида, липиды, полисахариды, ионы кальция, магния.

Особенности вирусной ДНК.

Типы: двунитевые, однонитевые. По форме: линейная, кольцевая, может иметь повторы на концах. В кольцевой форме способна в репликации встраиванию в клеточный геном. Вирусная РНК — является носителем генетической информации. Типы: однонитевые, двунитевые, одна нить спирально закручена, нить фрагментарная, нить кольцевая. Формы: линейная, кольцевая, фрагментированная. Функции РНК:

Ш РНК+ нить — позитивный геном, способна выполнять функцию трансляции, информации на рибосомы клетки хозяина, Ш РНК-нить — негативный геном, не могут выполнять иРНК, а являются только матрицей для образования информационной РНК.

Функции вирусных белков:

Ш Струткрные Ш Рецепторные Ш Антигенные Ш Ферментативные Ш Способность к самосборке Ш Услойчивость к протеолитическим ферментам клетки хозяина Репродукция вируса.

1. Адсорбция. Прикрепление вирона к клеточной поверхность за счет рецепторов на клетке узнающих субстанции на поверхности вируса. Высоко специыфический процесс. Например вирус гриппа способен адсорбироваться на клетках продуцирующих муцин. Клеточным рецептор выступает сиаловая кислота. Для ВИЧ-вируса СД4. При этом одни вирусы имеют клеточные рецепторы только в организме приматов. Другие вирусы только среди бактериальных клеток, третьи только в организме насекомых.

2. Проникновение вируса в клетку. Рецепторный эндоцитоз. Вирус инвагинирует внутрь клетки с образованием фагосомы внутри клетки (Грипп). Слияние мембран — вирусная оболочка и плазматическая мембрана клетки сливается (ВИЧ), этот механизм включает и соседние клетки не инфицированные вирусом с образованием синцития.

3. «Раздевание вирона». Депроитенизация. Удаление вирусных защитных оболочек и освобождение генома. Это происходит в определенных участках при участии клеточных ферментов. Эта стадия необходима для экспрессии генома вируса, что бы все гены вируса заработали.

4. Транскрипция. Переписывания генетической информации ДНК или РНК на рибосомы клетки по законам генетического кода. Транскрипция заканчивается образованием иРНК. При этом у вирусов ДНК-содержащих иРНК синтезируется на одной из нитей ДНК. Вирусы РНК-содержащие+нитевые процесс транскрипции отсутствует РНК выполняет функцию иРНК. РНК-нитевые процесс транкрипции включает образование иРНК и далее. В составе этих вирусов есть фермент РНК полимераза. Ретровирусы (ВИЧ) это РНКовые вирусы, но в составе есть специальный фермент — обратная транскриптаза транскрипция у таких вирусов включает: обратное переписывание, сначала образуется ДНК (прегеномная), затем транскрипция прямая с образованием иРНК (гомологичная геномная) и далее трансляция — белок.

5. Трансляция процесс перевода иРНК на специфическую последовательность аминокислот. Этот этап необходим для синтеза вирусного белка. Есть 2 способа формирования вирусных белков.

1. иРНК транслируется в гигантский полипептид предшественник, который потом подвергается нарезанию на отдельные белки (полиомелит). Процесс нарезания происходит в специфических точках с помощью протеолитических ферментах. В результате образуются белки-слияния т. е. у вириона появляются инфекционные свойства.

2. и РНК транслируется с образованием зрелых белков. В качестве модификации может выступать-гликозилирование, метилирование, сульфирование, фосфолирирование с ним связан механизм антивирусного действия интерферона.

Многие противовирусные препараты способные задержать репродукцию на ходят точку мишени в этой стадии.

6. Репликация вирусной РНК. Синтез молекул нуклеиновой кислоты гомологичной вирусному геному. Репликация ДНК-содержащих вирусов осуществляется за счет ДНК-полимеразы. Репликация РНК-содержащих при участии фермента катализатора. И по этому у +нитевых вирусов практически не отличается от транскрипции. У — нитевых отличается только длинной образовшихся РНК.

7. Сборка вирусных частиц. Белки, нуклеиновые к. этот процесс разобщен, протекать в разных струткурах и по времени. Вирусные Б и НК обладают способностью узнавать и самопроизвольно соединятся друг с другом. Просные вирионы собираются на мембранах ЭПС, сложные на цитоплазматическоей мембране образуя почку. Многие ДНК-вирусы собираются в ядре, на мембране где образуются нуклеокапсиды из этих структур вирусы транспортируются на поверхность клетки.

8. Выход вирусных частиц из клетки. Происходит за счет: «взрыва» — при этом клетка гибнет. «почкование» — характерен для сложных вирусов при этом клетка не погибает.

Результаты взаимодействия вируса с клеткой хозяина.

Продуктивная вирусная инфекция — характеризуется репродукцией вирусов. Все стадии проходят в клетке. Результат вирусная инфекция приводящие к гибели клетки (грипп, корь, ветрянка, краснуха).

Интегративная вирусная инфекция. Вирогения. Сопровождается интеграцией нуклеиновой кислоты вируса в геном клетки хозяина и в этом виде функционирует как составная часть геном хозяина — лизогения клетки. (герпес, ВИЧ) это приводит к длительному персистированию в составе клетки. Результатом может быть злокачественная трансформация клетки.

Абортивная вирусная инфекция не приводит к появлению к вирусных белков, накоплению вирусных частиц. Обычно характерен для дефектных вирусов или для вирусов, которые внедрились в покоящиеся клетки. Это способствует хронизации процесса, скрытому латентному течению и любые внешние факторы способны вызвать в выраженную инфекцию.

Культивирование и индикация вирусов.

Культивирования:

Ш Лабораторное животные Ш Куриный эмбрион (8−10 дней) Ш Клеточные структуры ткани — монослой однородных клеток фиксированный к стеклу, который растет и размножается на специальной питательной среде (199). Они могут быть первичными — из нормальных клеток (культура Фб), она может дать только первичные регенерации в пробирке; перевиваемая — готовится как правило из опухолевой клетки (Hela), может пассироваться в течении долгих лет; Попупрививаемая — из норамльных клеток пассируется 10−15 раз.

Индикация:

На эмбрионе:

Ш По реакции гемагглютинации (ГМА), склеивание эритроцитов под влиянием вируса.

Ш Реакция имуноферментативная (ИФА) Ш РИФ На клеточной культуре:

Ш По цитопатическому действию (ЦПД), которое проявляется в гибели, деструкции или образованию синтиция.

Ш По выявлению специфических вирусных включений. Могут находится в цитоплазме, ядре (вирус бешенства).

Ш Реакции имунофлюоресценции (РИФ) Ш Реакция гемабсорбции Ш По изменению цвета индикатора питательной среды (199) — цветная проба.

Ш Метод электронной микроскопии На животных:

Ш По клинической симптоматике Ш По специфическим изменением клеток Ш По включениям методом РИФ Диагностика:

Вирусоскопияобнаружение непосредственно в материале или найти его антигены, включения.

Ш Электронная микроскопия Ш РИФ Ш ИФА Ш Цитоскопически Вирусологический — включает культивирование вирусов, обнаружение вируса, идентификация вируса.

Ш Серологичекий — парные сыворотки больного для обнаружения специфических противовирусных антител.

Генетические — обнаружить в материале больного вирусные нуклеиновые кислоты.

Ш Метод гибридизации Ш Метод полимеразной цепной реакцией ПЦР

3. Физиология микроорганизмов Включает питание, дыхания, размножение бактерий.

Метаболизм.

Метаболизм микрообранизмов — совокупность всех биохимических процессов происходящих в клетке. Различают энергитичекий метаболизм 9катабализм) — реакции расщепления при которых выделяется энергия; конструктивный (анабализм) — процессы синтеза веществ из которых образуются основные структуры клетки, требует энергии. Оба типа метаболизма связаны между собой, происходят одновременно, деления на два типа условно. Для питания микроорганизмов требуется 4 главных элемента: углерод, кислород, водород, азот. Эти элементы являются основой органических веществ и составляют 95% клетки. Кроме этого требуются макроэлементы: сера, фосфор, калий, магний, кальция и микроэлементы: натрий, железо, цинк, марганец, медь.

1. Аутотрофный (сомопитающийся)

А широко распростеронены для культивирования неорганические питательные среды. Для Г среды с легко усвояемыми белками.

Микроорганизмы неспособные синтезировать, конкретное в-во из органического соединения — ауксотрофы обитают в среде обитания конкретных факторов роста (аминокислоты, пуриновые основания, пиримидиновые основания, фосфолипиды, холестерин, витамины В, геммы) могут нуждаться в одном или нескольких факторов. Прототрофы могут сами синтезировать.

Транспорт питательных веществ в бактериальную клетку.

1. Пассивный — облегченная диффузия, в следствии разности концентрации питательных веществ, без затрата энергии. Отвечает за транспорт цитоплазматическая мембрана. Помогают ферменты, белки

2. Активный транспорт — перемещение в-в происходит ч/з цитоплазматическую мембрану, отвечают за перенос специальные белки мембраны и периплазмы. Этот путь требует энергии и у бактерий он является доминирующим.

3. Транспорт обусловленный фосфорилированием (транслокация) — используется для переноса углевода. Вначале на наружней мембране происходит транслокация группы, дальше транспортируемое в-во поступает ч/з ЦПМ и на внутренней стороне происходит отделение радикалов от субстрата. Эти превращения необратимы.

Выделение в-в из клетки.

В процессе жизнедеятельности бактериальная клетка выделяет многие в-ва:

1. БАВ (ферменты)

2. Токсины

3. Антибиотикоподобные вещества — бактериоцили Они выделяются ч/з ЦПМ, содержат сигнальный пептид для прохождения, а при выходе пептид остается в мембране. Процесс выделение это не выброс шлаков, а механизм адаптации клетки к условиям внешней среды. Это определяет конкурентные свойства бактерий.

Ферменты бактерий.

Ферменты — специфические белковые катализаторы, которые присудствуют во всех живых клетках и за каждое превращение отвечает фермент.

Регуляторные, которые работают на уровне генома воспринимает все метаболические сигналы и изменяют каталитическую активность.

Эффекторные ферменты — определяют метаболизм в б/к можно выделить 6 класов этих ферментов:

1. Оксидоредуктазы — катализируют о-в реакции между субстратом (НАД, НАДФ, каталаза, ДГ);

2. Трансферазы — катализирует реакции переноса химических групп и одноуглеродных остатков;

3. Гидролазы — катализируют реакции гидролиза связей (протеиназа, липаза, гликозидаза);

4. Лиазы — катализирует реакции присоединения и обрыва групп по 2-м связям (альдолаза, фумаразы, декарбоксилазы, дезаминазы);

5. Изомеразы — катализируют реакции изомеризации (топаза);

6. Лигазы — катализируют реакции синтеза.

Синтез ферментов видоспецифичен, постоянен и поэтому набор ферментов у бактерий используется для их видовой идентификации. Ферменты которые синтезируются независимо от условий обитания клетки — конститутивные. Ферменты синтез которых зависит от определенного субстрата в среде обитания — индуцивельные.

Получение микробных ферментов важная отрасль промышленной микробиологии, широко используется в биотехнологии. Промышленная микробиология получает: амилазы, липазы… как лекарста, питательные добавки, пектиназы — для осветления соков, рибонуклеазы, ДНК-лагазы, полимеразы — в генной инженерии для моделирования нуклеиновых кислот.

Метаболизм.

Азот необходим для синтеза аминокислот, белков, пуриновых, пиримидиновых нуклеотидов, для витаминов. Использование неорганического азота происходит при ассимиляции под действием нитратредуктазы Б, дессимиляции — сопровождается выделением газообразных форм азота — под действием нитратредуктазы А, восстановлением нитратов в нитриты. Появление азота служит для идентификации бактерий. Способность разлагать определенные аминокислоты тоже как идентификационные тест.

Высоко молекулярные соединения неспособны проходит ч/з клеточную стенку поэтому утилизировать белковый азот могут бактерии которые выделяют экзоферменты протеазы они расщепляют белки до пептидаз, поэтому протеолитическая активность используется для оценки ферм активности.

При выращивании в лабораторных условиях для источника азота используют пептоны, или препараты неполно гидролиза белка, белковые гидролизаты (продукт первичного гидролиза белка) — рыбы, мяса (сухожилия, костная мука, фасции).

Фосфор основной его источник неорганические фосфаты, отдельные нуклеиновые кислоты.

Сера получается из цистеина, метионина, витаминов (биотин, тионин), глютатион. Это определяет о-в потенциал клетки. Утилизируется в форме сульфатов и при этом переводит окисленную форму в восстановленную под действием сульфатредуктазы — с образованием сероводорода. Обнаружение сероводорода тоже идентификационный тест.

Кислород включается в бактериальную клетку из молекулярного кислорода с помощью оксигеназ и опосредовано из воды, СО₂ в зависимости от потребности в молекулярно кислороде бактерии делят на 5 основных групп:

1. Облигатные аэробы — способны получать энергию только путем дыхания (псевдомонады, вибрионы, бруцеллы) имеют фермент супроксиддесмутазу, каталазу

2. Облигатные анаэробы — метаболизм происходит в отсутствии свободного кислорода т.к. кислород ля них токсичен.

3. Факультативные анаэробы — растут как в присутствии свободного кислорода так и в отсутствии т.к. могут переключатся с дыхания на брожение пероксидаза

4. Аэробтолерантные — способны расти в присутствии атмосферного кислорода, но не используют его в качестве источника энергии (молочно-кислые бактерии) супреоксид десмутаза, пероксидаза

5. Микроаэрофилы (капнофилы) — нуждаются в кислороде для получения энергии в маленьких количествах, но лучше растут в присудствии высокой концентрации СО₂ (гонококки, кампилобактерии, хеликобактери) Катаболизм.

Реализуется ч/з образование молекулы АТФ «разменной монеты», может превражатся в АДФ, АМФ. Эта неустойчивость позволяет выполнять функцию переноса химической энергии. Синтез у гетеротрофов осуществляется двумя способами:

1. Окислительное фосфолирирование — дыхания при котором происходит транспорт электрона по дыхательной цепи у эукариот в митохондриях, у прокариот в ЦПМ. Перенос происходит по стандартной схеме: Субстрат > НАД > флавопротеины > железосодержащие белки>хиноны>цитохромы (а, в, с)>конечный акцептор. Окислению могут подвергаться органические субстраты идет до СО₂ и воды. Если субстрат неорганическое в-во, то это сероводородное (железное) дыхание. В реакциях окисления работают дегидрогеназы. Аэробное дыхание используется у сапрофитов, патогенные для человека имеют это дыхание (псевдомонады, холерные вибрионы).

2. Субстратное фосфолирирование — брожение Катаболизм углеводов.

Способность утилизировать углеводы важный идентификационный признак. Базовый субстрат — Глюкоза она используется как при дыхании, так и при брожении. Протекает одинаково у аэробов и анаэробов. Пути превращения:

1. Гликолиз — доминирует у энтеробактерии, конечное превращение идет с образованием пирувата (фермет аелаза). Затем он полностью окиляется и превращается в СО₂ в цикле Кребса (ферменты дегидрогиназы)

2. Пептофосфатный путь — не имеет специального назначения (дополнительный)

3. Кето-дезокси-6-фосфо глюканатный путь (КДФК) — только у прокариот (бактерий). Не образуется млочной муравьиной кислот.

Катаболизм азот содержащих органических сединений.

Происходит ч/з декарбоксилирования с образованием СО₂ и работают ферменты декарбоксилазы. Происходит за счет дезаминирования, конечные продукты аммиак, индол, триптофан. Происходит за счет периаминироания. Определение ферментов используется для идентификации.

Катаболизм жиров.

Происходит ч/з гидролиз кислот до глицерина и свободных кислот. Далее окисление с образованием ацетил КоА > цикл Кребса.

Анаболизм.

Углеродные соединения (сахара, аминогруппы) образуются в ходе синтеза продуктов окисления пирувата и ц. Кребса. Эти продукты используются для синтеза моно-, ди-, полисахоридов. Синтез происходит на рибосомах в сочетании в мРНК ДНК-азы, РНК-азы идет синтез моносахарав, жирных кислот полимеров белков лигазы, синтетазы, пептидазы.

Взаимосзясь метаболизма и катаболизма самая прямая разграничение условное. Между ними гибкий баланс, главный метаболит пируват.

Рост и размножение бактерий Ростувеличение массы клеток, размножение — увеличение чила популяции клетки. Если бактерии культивируются в жидкой питательной среде то в процессе роста и размножения выделяют несколько фаз:

1. Начальная фаза (ЛАГ) — 2 часа, клетка увеличивается гтовится к делению. В этой фазе увеличивается количесвто рибосом.

2. Экспотенциальная (ЛОК) — скорость деления максимальная, в эту фазу максимальная чуствительность к антифиотикам.

3. Стационарная — постоянное количество микробных клеток

4. Отмирание — гибель клеток и накопление кислых продуктов метаболизма в питательной среде Факторы влияющие на рост и размножение:

1. Культуральная среда — должны иметь определенный pH, стерильны, содержать углерод, азот, фосфор (5:1:0,3)

2. Температура — по этому микробы мезофильные (20−40⁰), термофилы (47⁰), сихрофилы (0 — +10)

3. Аэрация — присутствие свободного кислорода или его отсутствие

4. Концентрация ионов Н — большинство растут при 7,2, а некотрые растут в щелочной среде 8 (холерный вибрион), а некоторые килую (лактобактери). Поддержание рН необходимо для бактерий образующих кислые продукты. Для поддержания рН добавляют бикарбонаты, фосфаты.

Экология микроорганизмов. Микрофлора воды, воздуха, почвы.

Микробные биоценозы, влияние на бактерии физических факторов.

На Земле микробы живут практически во всех регионах, климатических зонах и т. д. Обнаружены следы микроорганизмов в космосе.

Факторы влияющие на микроорганизмы:

Температура: по этой характеристики делятся на психрофилы (от-10 до +10), микробы лучше переносят низкие температуры; мезофиллы (от +20 до +40) практически все паразитические симбиоитные бактерии, человек для них идеальная питательная среды; термофилы (от +50 до +70).

Температурный минимум — температура при которой микроб замедляет жизнедеятельность.

Температурный максимум — температура при которой жизнедеятельность прекращает.

Температурный оптимум — оптимальная среда для микроба.

В природе микробы размножаются только в воде и почве. Стоки воды большого города имеют бактерии которые разлагают вредные вещества и создают для патогенных бактерий неприемлемые условие происходит самоочищение.

Ш Антагонизм — одному из организмов причиняется вред. Возможно, что один вид размножается быстрее и другому не хватает питания. Возможно выделение одним микробов продуктов обмена, которые изменяют характеристики среды и другой не может развиваться. Выделение антибиотиков.

Ш Симбиоз — любое совместное проживание макро и микроорганизмов. Классическим симбиозом является мутуализм при этом два организма извлекают пользу. Метабиоз — продукт жизнедеятельности одного микроба, питательная среда другого, разновидность сателитизм — один микроб выделяет продукты, которые стимулирует рост другого микроба. Синергизм — повышается жизнеспособность под действием в-в выделяемых другими бактериями. Комменсализм — один из членов микробиоза извлекая питание из другого не нанося ему вреда.

Ш Хищничество Ш Паразитизм Типы заболевания в зависимости от источника:

Антропонозные — источник человек Зоонозные, зооантропонозные — источник животные Сапронозные — источник сама окружающая среда. Долгое время холерный вибрион считался антропонозом, но недавно было выявлено что он сапрофит.

Но для большинства организмов окружающая среда прожиточный этап. Поэтому необходима оценка окружающей среды.

Методы оценки микробиологической чистоты объектов окружающей среды:

1. Прямые — подразумевают нахождение на объектах внешней среды патогенных микроорганизмов.

2. Косвенные — выявление санитарно-показательных микроорганизмов, они должны указывать возможность загрязнения и легко культивируются. Это микроорганизмы выделяются из организма человека.

Санитарная чистота воздуха.

СПМ: золотистый стафилококк, гемолитический стрептококк, споры плесневых грибов. Определяют общее микробное число — кол-во бактерий на 1 м³, число стафилококков, стрептококков, грибов по отдельности.

Классы чистоты медицинских помещений:

А) Повышенной чистоты — операционные, родильные блоки, боксы для ожоговых.

Б) чистые — процедурные, перевязочные В) условно чистые — палаты Г) грязные — коридоры, туалеты, кабинеты Методы определения чистоты воздуха:

Для общего числа — МПБ, для стафилококка — желточный агар, для стрептококков — кровяной агар, грибы — среда собурон.

Методы забора воздуха:

1)седиментация по Коху — открыть 2 чашки с питательной средой, ставить в термостат, на следующий день =считают 250 и менее чистые, 250−500 условно чистые, 500 и более грязные

2) 2 чашки открыть на 5 минут>термостат>подсчет по формуле Омелянского: за это время оседает столько микробов сколько содержится в столбе воздуха.

3) аспирационный метод — аппаратом Кротова. В аппарат помещается чашка с средой, над чашкой проходит поток воздуха и происходит посев. Зная скорость потока, время экспозиции и количество колоний можно подсчитать общее число микробов.

Санитарная чистота воды.

СПМ: общие колиформные бактерии ферментирующие лактозу при 37⁰, термолтолирантные ферментирующие бактерии при 40⁰. В 100 = 0 бактерий, колибактериофаги они указывают на вирусное загрязнение в 100 мл=0. Общее микробное число — число бактерий образующих колонии в 1 мл среды=50 КОЕ, споры сульфит продуцирующих бактерий, лямблии 50л=0, энтреробактерии.

Среды для колиформных бактерий: среда Эйтмана, Энда.

Методы определения колиформных бактерий:

1) бродильный — берут 333 мл (6 пробах) воды засевают в глюкозопептонную среду, затем заселяют колонии на среду, красят, делают оксидазный тест. Колитиртр объем воды в котором обнаружена 1 кишечная палочка, колииндекс — количество палочек на 1 литр.

2) Мембранных фильтров: через них пропускают воду, выкладывают на среду Энда если они присутствуют, то они берутся>красятся>считаются>окидазный тест>высевают >считают.

Основы химиотерапии, химиопрофилактики. Антибиотики.

Химиотерапия — лечение инфекционных заболеваний с помощью лекарственных препаратов, которые преобладают избирательным действием на микроорганизмы подавляя их рост и размножение Химиопрофилактика — предупреждение инфекционных болезней и рецидив путем их приема лекарственных средств Основоположником химиотерапии является Пауль Эрлих 1885 год. Сформулировал саму идею. Основной принцип химиотерапии: Физиологическая имитация. Химическое вещество способно избирательно взаимодействовать с бактериальным кл за счет наличия на поверхности рецепторов по своей конфигурацией подходящих для этого химического вещества.

Известно большое количество химиотерапевтических препаратов их объединяет ряд общих признаков:

1. Химический препарат не должен обладать токсическим действием на макроорганизм Безвредность проверяется с помощью химиотерапевтического индекса: ХТ_индекс = min_{терапевтическая доза}/max_{переносимой}<1. max_{переносимой}— достижимая концентрация в жидкостях организма.

2. Избирательное действие на микроорганизмы и их. Например на Г+, на грибы, на паразиты, на спирохеты, микобактерии.

3. Обладают бактериостатическим или бактерицидным действием.

4. Постоянное формирование лекарственной устойчивости у микроорганизма.

В основе мтодов профилактики и борьбы с инфекционными болезнями лежат методы уничтожения и подавления условно и патогенных микроорганизмов. Это подав может быть на объектах внешней среды и внутри организма. Известно много химических веществ с антимикробным действии — химические вещества:

Ш Дезинфектанты, которые используются для уничтожения микроорганизмов на объектах внешней среды (хлорсодержащие препараты, фенольные препараты — избирательным действием не обладают, токсичны для живых тканей).

Ш Антисептики — для уничтожения условно — патогенных на нормальных, поврежденных тканях, на медицинском инструментарии, средствах гигиены (спиртовой раствор йода, марганцовка, перекись водорода, 70% этиловый спирт, хлоргексидин, первомур, растворы кислот) могут быть использованы для местного применения, не обладают избирательным действием, малотоксичные.

Механизм действия связан с денатурацией белка.

Анитибиотики обладают избирательным действием, могут применятя внутрь, сохранятся внутри, они находят мишени (отдельные структуры бактериальной клетки) и не вступают в связь с другими клетками.

Антибиотики — высокоактивные продукты метаболизма многих микроорганизмов избирательно подавляющие рост и размножение бактерий и опухолей.

Открытие связано с явлением антоганизма (Пастер, мечников). Открыватель пенициллина — Флеминг 1940 год (через 20 лет после обнаружения явления). Производство связано с учеными Флори и Чейн 1942 год. В нашей стране 1943 год — Ермольева.

Классификация антибиотиков:

По источникам получения:

Ш Бактериальные — актиномицеты Ш Грибы — плесень Ш Растения — чеснок, лук, редька, редис, сосновые (фитонциды) Ш Животные — лизоцим (слюна, слезы) Ш Биологический синтез По спектру действия:

Ш Широкого спектра способны действаваьь на Г+, Г-, риккеции и т. д.

Ш Узкого спектра По направленности Ш Бактериальные Ш Противогрипковые Ш Противовирусные Ш Противоопухолевые Ш Противопаразитарные По химическому строению:

Ш Бета-лактанные (пенициллины) Ш Тетрациклины Ш Аминогликозиды Ш Макролиды Ш Левомицетин Ш Рифампицины Ш Полиеновые антибиотики Противобактериальные антибиотики.

По механизму Ш Ингибиторы синтеза компонентов клеточной стенки (пенициллины,

1. ингибиторы сборки и пространственного положения

2. ингибиторы синтеза самого пептидогликана Пеницинины:

Природные, продуцирутся грибами, использование сейчас минимально они действуют только на Г+, разрушаются НСl, неустойчивы к воздейсвию беталактамаз.

Полусинтетические с 1957 года. Сейчас имеются 4 покаления. (мелин, ампициллин) Потенцированные пенициллины — в составе вещество разрушающее бета-лактамазу. Препетары действуют на Г+ и Г- (амоксиклав, сульбактан) Цефалоспорины:

Природные: грибы, легко модифицируются известно более 30 препаратов. Имеется 1 поколение только на Г+, 4 покаление и на Г;

Монобактаны:

Карбопенемы имеют самый широкий спектр дейстия Батитроцины, ванкомицины — стрептомицетами на Г+, основной стафилококковый антибтиоттик. Циклосерин — противотуберкулезный Ш Нарушающие функцию цитоплазматической мембраны:

Полимексины: бактерии, нарушают осматическое равновесие, токсичны для макроорганизма Полиеновые: нистатин-протиивогрипковый. Леварин — взаимодействуют с белком эргостеролом входящим в состав мембраны.

Ш Ингибиторы синтеза белка на уровне рибосом.

Влияющие на 30S ;

Тетрациклины — продуцируются стрептомицетами, природные сейчас не применяются. Используются полусинтетические — доксициклин, миноциклин на Г+ и Г-, микоплазмы, рикеции, хламидии. Быстро формируют дисбактериоз. Депонируются в костной ткани не назначаются детям, беременным.

Аминогликозины (известно 50 препаратов стрептомицин, гентамицин,) нейротоксичны, нефротоксичны, потеря слуха.

Влияющие на 50S линкомицины, Левомицитины — стрептомицетами. Г+ и Г-, анаэробы, гемофилы. Вызывают осложнение со стороны ЖКТ, нарушают функции костного мозга.

Макролиды — эритромицин, троксимицин. Широкого спектра. Последние группы суммамед.

Ш Ингибиторы транскрипции и синтез нуклеиновых кислот.

1. подавляющие синтез ДНК

2. подавляющие синтез РНК Римфампицин — противотуберкулезный ингибирует ДНК-зависимую РНК-полимеразу. Быстро развивается устойчивость.

Хинолоны — получаются только синтезом. Ингибируют ДНК-лигазу. Примеры: налидицевая кислота, оксалинеевая кислота, циноксоцин.

Фторхинолоны — широкого спектра. Норфлоксацин, офлоксацин, ципрофлоксацин.

Ш Препараты нарушающие метаболизм Сульфамины Триметаприн — действуют на уровне рибосом. Ингибируют синтез пуринов, пиримидинов, фолиевой кислоты. Действуют на Г+ и некоторых Г-. Модификации позволяют использовать для лечения хемофильной, протейной, стрептокковой, пневмококковой инфекцией.

Метранидозол — действуют против хеликобактерной инфекции. Действует на белки пиродоксины, которые участвуют в О-В реакциях.

Нитрофунаны — фурациллин, фурозалидол, фурагин для лежения инфекций ЖКТ, МПС.

Противовирусные антибиотики.

Механизмы:

Ш Ингибиторы адсорбции, проникновения, депроинезации вируса:

Антитела Амантадины: ремантадин Ш Ингибиторы синтеза ранних белков вируса (еще разрабатывается) Ш Ингибиторы синтеза нуклеиновых кислот:

1. Ингибиторы фермента обратной транскриптазы: Зидафудин, ставудин, зальцитовин

2. Ингибиторы ДНК-полимеразы (протиивогерпетические): ацикловир, фамцикловир, рибовирин, доксуридин — аномальные нуклиазиды

3. Ингибитры синтеза нуклеиновых кислот (вирусных протеаз) саквиновир, риктоновир МЕХАНИЗМЫ РЕЗИСТЕНТНОСТИ БАКТЕРИЙ К АНТИБИОТИКАМ.

1. Естественная резистентность, видовая связана с отсутствием мишеней. Например микоплазмы не имеют клеточной стрелки > они к бета-лактанным антибиотикам будут резистентные. Уменьшением числа мишеней

2. Генетическая. Приобретается в процессе жизнедеятельность. Мезанизмы: продукция клеткой специальных ферментов (бета-лактамазы, ацитилтрансферазы) инактивирующих препаратов. Изменение структуры молекулы мишени — ответственны хромосомные мутации — изменение ДНК-гиразы, РНК-полимеразы, субъединиц рибосом.

3. Изменение транспортных механизмов (поринов клетки) — может быть ускорение выведения препарата, снижение проницаемости клетки, хромосомные мутации.

ПУТИ ПРЕОДОЛЕНИЯ РЕЗИСТЕНТРОНОСТИ.

1. постоянная разработка и получение новых препаратов с разными механизмами действия

2. Химическая модификация известного антибиотика.

3. Комплексное использование антибиотиков.

4. Изучение лекарственной устойчивости.

5. Запрещение использования антибиотиков в качестве консервантов, добавок. Ограничение применения без достаточных показаний. Иметь антибиотики резерва.

Осложнения антибиотикотерапии:

1. Токсичность (нейро, нефро, гепато)

2. Развитие дизбактериоза

3. Формирование резистентных штаммов

4. Аллергизация

4. Генетика бактерий

1865 год Мендель установил существование генов. 1869 Фишер выделил ДНК. Через 80 лет доказано что носителем генов является ДНК, 1953 Крик, Уотсон — расшифрована структура ДНК.

Ген выполняет следующие основные функции:

1. Непрерывность наследования генетической информации благодаря механизму репликации ДНК