Стандартный раствор. Около 0,06 г (точная навеска) стандартного образца салициловой кислоты (стандарт ВР или аналогичного качества) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в спирте 96%, доводят объем раствора спиртом 96% до метки и перемешивают. К 1 мл полученного раствора прибавляют 39 мл спирта 96%, 4 мл 0,2% раствора железоаммониевых квасцов и количественно разбавляют водой до 100 мл.
Используют свежеприготовленные растворы.
Измеряют оптическую плотность испытуемого и стандартного раствора на фотоколориметре в максимуме поглощения при длине волны 520 нм в кювете с толщиной слоя 50 мм.
Содержание салициловой кислоты свободной должно быть не более 0,05%.
Для испытуемого раствора масса навески ацетилсалициловой кислоты составила:
m1=0,3001г
m2=0,2998г
m3=0,3002г
m4=0,3000г
m5=0,3001 г Для стандартного раствора масса навески салициловой кислоты составила:
m1=0,0602 г Результаты измерений оптических плотностей в пяти повторностях.
№ 1 А 1 0,515 2 0,511 3 0,513 № 2 А 1 0,515 2 0,511 3 0,513 № 3 А 1 0,515 2 0,511 3 0,513
№ 5 А 1 0,515 2 0,511 3 0,513 № 4 А 1 0,515 2 0,511 3 0,513
Результаты измерений оптических плотностей стандартного раствора.
№ 0 А 1 0,487 2 0,488 3 0,487
Содержание салициловой кислоты свободной в субстанции ацетилсалициловой кислоты в процентах (Х) вычисляют по формуле:
1)
2)
3)
4)
5)
В результате выполненных анализов были получены завышенные результаты по количественному содержанию примеси салициловой кислоты в кислоте ацетилсалициловой. Завышенные результаты были получены по следующим причинам:
1) Субстанция ацетилсалициловой кислоты, взятая для анализа, была с просроченным сроком годности, в результате чего можно сделать следующий вывод: в процессе хранения ацетилсалициловая кислота подвергается гидролизу, то есть разлагается с образованием уксусной и салициловой кислот. Вследствие этого явления, количество нормируемой примеси салициловой кислоты в ацетилсалициловой кислоте увеличивается.
2) Субстанция салициловой кислоты, взятая за стандартный образец, была с просроченным сроком годности и количественное содержание салициловой кислоты в субстанции составило 94,06%, что на 5,44% меньше нормируемого предела. В результате этого были получены завышенные результаты, так как для проведения фотоэлектроколориметрического метода анализа был использован стандартный раствор салициловой кислоты, содержание которой в субстанции меньше нормируемого предела.
Глава 3. Статистическая обработка данных
Завершающей стадией количественного анализа химического состава вещества любым методом является статистическая обработка результатов измерений. Она позволяет оценить систематические и случайные погрешности измерений.
Обработку данных количественного определения содержания примеси свободной салициловой кислоты в ацетилсалициловой кислоте проводили сравнением двух методов при помощи двух показателей:
Критерий Фишера вычисляют при сравнении воспроизводимости двух методов анализа с оценками дисперсий s12 и s22 (s12 > s22)
(1.1)
Критерий F характеризует при s12 > s22 достоверность различия между s12 и s22.
Критерий Стьюдента вычисляют для решения вопроса о наличии или отсутствия систематической ошибки, если при выборке m величина > 0
(1.2)
F — критерий Фишера;
f — число степеней свободы;
i — порядковый номер варианты;
m, n — объемы выборки;
Р — доверительная вероятность при двусторонней постановке задачи;
s — стандартное отклонение (оценка случайной ошибки);
s2 — дисперсия;
s — стандартное отклонение среднего результата;
sP2 — дисперсия разности
t — критерий Стьюдента;
x, y — текущие координаты в уравнении линейной зависимости;
— средние выборки (координаты центра линейной зависимости);
xi, yi — i-тая варианта (i-тая пара экспериментальных значений x и y);
— граничные значения доверительного интервала среднего результата;
— граничные значения доверительного интервала результата отдельного определения;
Δ - разность некоторых величин;
Δx — полуширина доверительного интервала величины;
— относительные ошибки соответственно результата отдельного определения и среднего результата;
μ - истинное значение измеряемой величины;
∑ - знак суммирования (сумма).
Определение содержания примеси свободной салициловой кислоты в кислоте ацетилсалициловой Таблица.
№ п/п N f % s2 s Р,% t (Р, f) t выч Δx F (Р, f1, f2)
Табл. Р=99% F выч. 1 6 5 0,5 033 0,042 0,21 0,084 95 2,57 0,004 0,82 0,33 1,63 0,65 10,77
0,036 2 5 4 0,05 0,048 0,22 0,098 95 2,78 0,033 0,73 0,32 1,36 0,60
1) Метод сравнения со стандартом При выборке m = 6, получили следующие значения содержания примеси свободной салициловой кислоты в субстанции ацетилсалициловой кислоты:
1. 0,051 4. 0,051
2. 0,051 5. 0,050
3. 0,048 6. 0,051
2) Метод фотоколориметрии При выборке m = 5, получили следующие значения содержания примеси свободной салициловой кислоты в субстанции ацетилсалициловой кислоты:
1. 0,5 282 4. 0,5 380
2. 0,5 384 5. 0,5 265
3. 0,5 338
Поскольку t1 = 0,004 < t (95%, 5) = 2,57, а t2 = 0,033 < t (95%, 4) = 2,78, гипотезы и могут быть отвергнуты, что позволяет считать результаты двух выборок свободными от систематических ошибок.
По значению критерия Фишера F = 0,036 < F (99%, 5, 4) = 15,52 можно сделать вывод о том, что различие значений s12 и s22 не может быть признано значимым и заключение о различии воспроизводимости методов сделать нельзя ввиду недостаточного объёма информации.
Заключение
Для исследования нами была выбрана тема «Примеси в лекарственных препаратах. Разработка методики определения примеси свободной салициловой кислоты в кислоте ацетилсалициловой».
Поставленные задачи были решены. Цель достигнута.
Изучены литературные источники по данной теме (Государственная фармакопея СССР. — 10-е изд., Государственная фармакопея СССР. — 11-е изд., вып.
1 и 2, и другие). Рассмотрены методы определения примеси свободной салициловой кислоты в ацетилсалициловой кислоте по фармакопеям разных стран (британская фармакопея, украинская фармакопея, фармакопея США). Проведен практический анализ по Государственной фармакопее СССР. Проведен практический анализ субстанции ацетилсалициловой кислоты на содержание примеси свободной салициловой кислоты по разработанной методике. С помощью статистической обработки данных выявлено отсутствие систематической ошибки с помощью вычисления критерия Стьюдента.
Заключение
о воспроизводимости второго метода сделать нельзя ввиду недостаточного объема информации.
Выводы
1) На основе статистической обработки данных определения содержания примеси свободной салициловой кислоты в кислоте ацетилсалициловой наиболее селективным и точным методом является метод фотоэлектроколориметрии, так как относительные ошибки значений данного метода меньше, чем относительные ошибки значений метода сравнения со стандартным раствором.
2) После обработки данных определения содержания примеси свободной салициловой кислоты в кислоте ацетилсалициловой определили наиболее оптимальным методом фотоэлектроколориметрию.
3) Завышенные результаты были получены по следующим причинам:
1) Субстанция ацетилсалициловой кислоты, взятая для анализа, была с просроченным сроком годности, в результате чего можно сделать следующий вывод: в процессе хранения ацетилсалициловая кислота подвергается гидролизу, то есть разлагается с образованием уксусной и салициловой кислот. Вследствие этого явления, количество нормируемой примеси салициловой кислоты в ацетилсалициловой кислоте увеличивается.
2) Субстанция салициловой кислоты, взятая за стандартный образец, была с просроченным сроком годности и количественное содержание салициловой кислоты в субстанции составило 94,06%, что на 5,44% меньше нормируемого предела. В результате этого были получены завышенные результаты, так как для проведения фотоэлектроколориметрического метода анализа был использован в качестве стандартного раствора раствор салициловой кислоты, содержание которой в субстанции ниже нормируемого предела.
Список используемой литературы Арзамасцев А. П. Фармацевтическая химия: учеб. пособие.
М.: ГЭОТАР-МЕД, 2004. — 640 с.
Граник В.Г. «Основы медицинской химии». -М.: Вузовская книга, 2001.-384с.
Гузей Л.С., В. Н. Кузнецов. «Новый справочник по химии». Москва. 1998 г. С-261.
Международная фармакопея / Издательство «Медицина"/. — Издание третье., Том 2., 1983.
Методическое пособие (фотометрический анализ).
Оганесян Э.Т. «Руководство по химии поступающим в вузы». Москва. 1992 г. С-447.
Степаненко Б.Н. «Органическая химия». Москва. 1980 г. С-253.
Тюкавкина Н.А., Ю. И. Бауков. «Биоорганическая химия». Москва. 1985 г. С-258.
Халецкий А. М. Фармацевтическая химия.
Ленинградское отделение. Издательство Медицина. 1968.
Государственная Фармакопея СССР/ выпуски 1,2/ Репринтное издание.
Москва, 1998.
Государственная Фармакопея СССР/ десятое издание/ издательство «Медицина». — Москва. 1968.
Государственная Фармакопея Российской Федерации. Часть 1. Москва, 2007.
Государственная Фармакопея Украины / Государственное предприятие «Научно-экспертный фармакопейный центр». — I-е изд., 2004. 672 с.
The Pharmacopeia of the United States of America, 1965.
British Pharmacopeia, 1963.
