Оптические свойства ленгмюровских пленок органических красителей и белков

Актуальность темы

Значительные успехи, достигнутые в области конструирования различных молекулярных структур в последние десятилетия, во многом обусловлены использованием такого метода получения организованных пленок амфифильных (биполярных) соединений, как метод Ленгмюра — Блоджетт (ЛБ). Его важным достоинством является возможность получения многослойных планарных структур с заданным количественным и качественным составом как в плоскости монослоя, так и в направлении, перпендикулярном к подложке.

Другие высокотехнологичные методы, такие как молекулярно — лучевая эпитаксия, металлорганическое химическое газофазное нанесение, жидкофазная эпитаксия, расширяют возможности для создания новых пленочных материалов за счет модификации субстрата с помощью нанесения тонкого слоя или слоев. Технология ЛБ является одним из методов, позволяющих создавать молекулярные приборы. Конечно, как любая технология получения тонких пленок, метод ЛБ имеет свои ограничения, прежде всего — это необходимость использования биполярных молекул, способных образовывать монослои на водной поверхности. Пленки, полученные методом ЛБ, имеют ту же область применения в оптических и электронных устройствах, как и пленки, полученные другими методами.

Поскольку живые организмы имеют в своем составе многие компоненты, которые применяются для получения пленок ЛБ (жирные кислоты, фосфолипиды, белки), существует возможность создания совместимых поверхностей раздела между традиционными материалами и биоматериалами для конструирования биосенсоров или биохимических зондов. Тонкие органические пленки часто используются в качестве матрицы для роста ориентированных кристаллов из белков или органических и неорганических материалов, с помощью которых достаточно просто изменять кристаллическую структуру и кинетику роста кристаллов.

Разработка высокочувствительных биосенсоров — быстро прогрессирующая область прикладной науки, которая становится главной темой исследований по созданию дешевых и быстродействующих (в режиме реального времени) анализов для определения биомолекул: антигенов, ферментов, антител. Метод ЛБ позволяет осуществлять нанесение пленок белка на твердый субстрат. Такой способ не только не разрушает структуру белка, но и придает ей новые полезные свойства, такие как термоустойчивость, стабильность во времени и определенную анизотропию пленки белка. Известно, что структура белков в пленках ЛБ не претерпевает существенных изменений при нагревании. Термическая стабильность таких пленок белков на 30 — 40 °C выше по сравнению с их растворами.

Таким образом, использование пленок ЛБ является одним из перспективных и эффективных подходов к получению наноструктур, обладающих уникальными свойствами, для создания на их базе молекулярных приборов (наноэлектроника), а также чувствительных микрочипов для химического, биологического, медицинского мониторинга окружающей среды и организма человека.

В настоящей работе с помощью оптических методов (спектроскопия поглощения, флуоресцентная спектроскопия) нами были исследованы различные молекулярные структуры, приготовленные с помощью методики Ленгмюра — Блоджетт.

Цель работы. Целью было исследование объектов различных классов, методически объединенных использованием методики ЛБ, чтобы определить общие закономерности и оптимальные условия формирования и функционирования активных молекул в тонких пленках, как на поверхности водной субфазы, так и на твердой подложке, а также предложить использование пленок для широкого спектра практических применений.

Цель работы определила следующие задачи:

1. Исследовать влияние структурной организации смешанных монослоев на границе раздела фаз вода/воздух на свойства этих же монослоев на твердом субстрате.

2. Изучить зависимость активных свойств смешанных пленок от состава субфазы (присутствие различных буферных систем, различных неорганических солей, рН, ионной силы).

3. Исследовать связь основных параметров, влияющих на формирование пленки ЛБ, а именно, компонентного состава (соотношения активного вещества и матрицы) и количества перенесенных на твердый субстрат монослоев, а также длины алифатического заместителя в структуре матрицы, модификации поверхности с оптическими свойствами молекул в ЛБ пленках.

4. Изучить сенсибилизацию (кофлуоресценцию) флуоресценции смешанных пленок, состоящих из смеси комплекса редкоземельного иона (РЗИ) с порфирином (основной ион) и матрицы, при воздействии растворами, содержащими разные концентрации комплексов теноилтрифторацетона с РЗИ (усиливающий ион) для дополнительного увеличения сигнала флуоресценции основного иона.

5. Исследовать эффективность безызлучательного переноса энергии в различных донорно-акцепторных парах красителей, иммобилизованных на белках, составляющих иммунную пару, в процессе иммунологической реакции в пленках ЛБ для определения оптимальной донорно-акцепторной пары, которая в дальнейшем будет использована при создании чувствительного элемента иммуносенсора с флуоресцентной регистрацией.

6. Определить и оптимизировать основные параметры чувствительного элемента иммуносенсора с флуоресцентной регистрацией на базе пленок ЛБ, а именно, способ иммобилизации биомолекул в пленках, отношение полезного сигнала к сигналу фона, чувствительность, селективность, воспроизводимость.

Объекты исследования. Объектами исследования являлись монослои на поверхности раздела фаз вода/воздух и пленки, полученные из этих монослоев. Для приготовления монослоев и пленок ЛБ использовались органические красители из класса полиметинов, сквараинов, спиропиранов, комплексы различных порфиринов с РЗИ, комплексы бензоилтрифторацетона и теноилтрифторацетона с РЗИ, биомолекулы (иммунологическая пара), в качестве матрицы использовались жирные кислоты и липиды.

Научная новизна и практическая ценность. В данной работе приведены результаты использования классического метода Ленгмюра — Блоджетт для молекулярного конструирования тонких ориентированных пленок, содержащих органические красители, впервые синтезированных нами или синтезированных специально для наших целей, а также белков, составляющих иммунную пару, для решения практических задач. Новизна полученных результатов заключается также в систематическом исследовании физико-химических и иммунологических свойств упомянутых выше красителей и белков на поверхности воды и на твердом субстрате, что позволило выявить условия их оптимального функционирования, которые определяют максимальный отклик системы. Такие систематические исследования позволили нам в какой-то мере предсказывать свойства молекул, как при формировании монослойной структуры на поверхности воды, так и после перенесения на твердый субстрат.

Новизна работы заключается и в использовании синтезированных нами красителей, обладающих флуоресценцией в красной области спектра и в ближнем ИК диапазоне (тех областей, в которых отсутствует фоновое свечение биологических объектов), в качестве флуоресцентных маркеров для иммунологического анализа с флуоресцентной регистрацией. Нами были впервые использованы для иммобилизации антител смеси этого белка в липиде и формирование из них ленгмюровских пленок. Создание кооперативной системы на основе ленгмюровских пленок, состоящих из смеси белка и липида, позволило нам существенно снизить растворимость белка в воде. Это позволяет нам говорить о новом методе иммобилизации белков на поверхность субстрата, в дополнение к уже имеющимся методам ковалентного связывания. Использование метода Ленгмюра — Блоджетт для иммобилизации белков, меченных упомянутыми выше флуоресцентными маркерами, на твердом субстрате позволяет увеличить чувствительность за счет снижения фонового сигнала, значительно сократить величину неспецифического связывания, сократить время анализа, снизить расход дорогостоящих биологических материалов. Все сказанное выше от формирования белоклипидного монослоя на поверхности воды и на твердом субстрате до использования маркеров с флуоресценцией в красной области и ближнем ИК диапазоне, приводит к образованию чувствительной кооперативной системы, называемой леншюровской пленкой или, что-то же, чувствительным элементом биосенсора, и является, по нашему мнению, новым научным направлением.

Практическая ценность полученных нами результатов определяется возможностью использования такого рода пленок в органической наноэлектронике и фотонике, а также в биохимии, экологии, медицине (в качестве высокочувствительных и быстродействующих биосенсоров для биохимического, медицинского и экологического скрининга).

На защиту выносятся:

1. Экспериментальное определение условий оптимального функционирования активных молекул в тонких пленках на границе раздела фаз и твердой подложке.

2. Выявление корреляции между структурой и компонентным составом смешанных монослоев на границе раздела фаз вода/воздух и их спектральными свойствами при осаждении на подложку.

3. Комплексный метод исследования агрегатов органических красителей различных классов, образующихся в процессе формирования полислойной пленки различного компонентного состава, с использованием спектроскопии поглощения, определение эффективности этого процесса.

4. Экспериментальное обнаружение сенсибилизированной флуоресценции пленок ЛБ, содержащих комплексы тетрафенилпорфирина с РЗИ (иттербий (Yb), туллий (Тш), диспрозий (Dy)), растворами теноилтрифторацетонатных (ТТА) комплексов РЗИ, и оптимальных пар: основной ион — усиливающий ион, приводящих к максимальному эффекту.

5. Экспериментальное определение и оптимизация основных параметров чувствительного элемента иммуносенсора на базе ленгмюровских пленок.

Апробация работы. Материалы работы были доложены на конференциях:

1. G. Chudinova, V. Rumiantseva, I. Nagovitsyn, «The IR fluorescence and cofluorescence study of tetraphenylporphyrin — dysprosium complex in LangmuirBlodgett films» // VIII International Conference on Spectroscopy and Chemistry of Porphyrins and their Analogs, Book of Abstracts, Minsk, Republic of Belarus, Sept. 22−26,1998, p. 81.

2. I. Nagovitsyn, G. Chudinova, V. Rumiantseva, A. V. Lobanov, «The Red Fluorescence Enhancement of Thulium Tetraphenylporphyrin in Langmuir — Blodgett Films» // VI Международная конференция «Наукоемкие химические техноло-гии», тезисы докладов, 25−29 октября 1999, Москва, Россия, с.208−209.

3. G.Chudinova. V. Rumiantseva, A. Chudinov, «The red fluorescence sensitization of ytterbium ion in complex with tetraphenylporphin in LB films under the action of rare earth ions thenoyltrifluoroacetonates in solution», ECOF 7 Proceedings, Sept. 14−18, 1998, Potsdam Germany, p.342−343.

4. V. Barachevsky, M. Alfimov, G.Chudinova. M. Kozlova, T. Tolmachev, N. Tvorogov «Photopolymerizable heterogeneous systems for nonsilver light-sensitive color papers» // Proc. SPIE, 1997, v.3227, p.144−152.

5. V. Barachevsky, G.K. Chudinova «Photochromic and nonlinear optical properties of Langmuir — Blodgett dye films» (poster). European Conference Thin Organized Films (ECOF 7), September 14−18,1998. Potsdam. Germany. Abstracts. 1998, p. 258.

6. G.K. Chudinova, LA. Maslyanitsyn, V.A. Barachevsky, V.D. Shigorin, R. Guglielmetti, A. Samat «Nonlinear optical properties of Langmuir — Blodgett Photochromic films». Abstracts, XVII IUPAC Symposium on Photochemistry. Barcelona. Spain, July 19−24, 1998, p. 244.

7. V.A. Barachevsky, A.M.F. Oliveira — Campos, L.V. Stebunova, G.K. Chudinova. V.G. Avakyan, I.A. Maslyanitsyn, V.D. Shigorin «Photochromic and nonlinear optical properties of systems based on thienothiazole azodyes». Book of Abstracts of XX International Conference on Photochemistry. Moscow. July 30 — August 4,2001, p. 179−180.

8. R.E. Karpov, V.A. Barachevsky, L.V. Stebunova, G.K. Chudinova, Yu. P. Strokach, O.A. Fedorova, S.P. Gromov «Photoinduced aggregation of photochromic spirocompounds». Book of Abstracts of XX International Conference on Photochemistry. Moscow. July 30 -August 4, 2001, p. 289−290.

9. G.K. Chudinova. L.V. Stebunova, T.V. Pichuzhkina, R.E. Karpov, O.A. Fedorova, V.A. Barachevsky, A. Samat, R. Guglielmetti «Study of aggregation for photochromic spirocompounds in solution and LB films» // Russian — France Symposium on Organic Photochromes Moscow, Russia, August 6,2001, p.33−34.

10. А. Лобанов, Г. Чудинова «Перенос энергии в липидных монослоях ЛенгмюраБлоджетт, содержащих Yb — порфирин — белковые конъюгаты» // Материалы III съезда фотобиологов России, Москва, 28 июня — 4 августа 2001 г., с. 116.

11. V. Barachevsky, G. Chudinova «Polymolecular and aggregated structures of photochromic organic compounds» // The International Nanophotonics Symposium. Handai, Japan, July 24−26, 2003, p. 59.

Публикации. В диссертационной работе использованы материалы, полученные лично автором или при его активном участии, и отражены в 34 печатных работах.

1. MJoly, «Rheological properties of monomolecular films» // Acad. Press, N.-Y. 1972, 325 p.;

2. F. Mac Ritchie «Spread monolayer of proteins» // Adv. Colloid Interface Sci., 1986, v.25, p.341−385;

3. В. Измайлова, Г. Ямпольская, Б. Сумм «Поверхностные явления в белковых системах» // М., «Химия», 1988, с.56−70;

4. D. Byler, H. Susi, «Examination of the secondary structure of proteins by deconvolved FTIR spectra» // Biopolymers, 1986, v.25, p.469−487;

5. K. Birdi, «Lipid and biopolymer monolayers at liquid interfaces» // Plenum Press, N.-Y., 1989, 540 p—.

6. J. Israelachvili, «Intermolecular and surface forces with applications to colloid and biological systems» // Orlando, FL: Academic, 1985, p.125−140;

7. J. Keuskam, J. Lyklema, «Adsorption at interfaces» (ACS Symposium Series 8), ed. K. Mittal, Washington, DC: American Chemical Society, 1975, p.191−198;

8. S. Lin, R. Blanco, В. Karger «Adsorption d esorption i sotherm h ysteresis о f p — 1 actoglobulin A with a weakly hydrophobic surface» // J.Chromatogr., 1991, v. 557, p.369−382;

9. L. Ter-Minassian-Saraga, «Reporting experimental pressure-area data film balances» // Pure Appl. i Chem., 1985, v.51, p.621−632;

10. L. Ter-Minassian-Saraga, «Thin films including layers: terminology in relation to their prepa-ration and characterization» // Pure Appl. Chem., 1994, v.66, p. l667−1738;

11. T. Kanamori, T. Takeshita, K. Sakai «Mass-transfer of antibiotics adsorbed by human serum albumin in hemo-dialyzers» // Biotechnol. Prog., 1996, v. 12, p.503−509;

12. T. Heimburg, D. Marsh, «Protein surface distribution and protein-protein interactions in the binding of peripheral proteins to charged lipid membranes» // Biophys. J., 1995, v. 68, p.536−546;

13. H. Warriner, J. Dung, A. Waring, J. Zasadzinski «A concentrationdependent mechanism by which serum albumin inactivates replacement lung surfactants» // Biophys. J., 2002, v.82, p.835−842;

14. F. Mac Ritchie, «Proteins at interfaces» // Adv. Proteins Chem., 1978, v.32, p.283−326;

15. R. Blanco, A. Arai, N. Grinberg, D. Varmush, B. Karger, «Role of association on protein adsorption isotherms of P-lactoglobulin A with a weakly hydrophobic surface» // J. Chromatogr., 1989, v.482, p.1−12;

16. M. Pulat, E. Memis, M. Gumusderelioglu, «Adsorption of bovin serum albumin onto surface modified polyhydroxyethyl methacrylate beads» // J. Biomater.Appl., 2003, v.17, p.237−248;

17. M. Kasbauer, T. Bayer, «Formation of domains of cationic or anionic lipid in binary lipid mixtures increases the electrostatic coupling strength of water-soluble proteins to supported bilayers» // Biochem., 1999, v.38, p.15 258−15 263;

18. A. Marierhofer, D. Bucknall, T. Bayerl, «Modulation of cytochrome C coupling to atomic lipid monolayers by a change of the phase state: A combined neutron and infrared reflection study» // The Biophys. J., 2000, v.79, p. 1428−1437;

19. I. Panaitov, T. Ivanova, A. Sanfeld, «Interfacial orientation of DOPC 1 iposomes spread at the air-water interface» // Adv. in Colloid and Interface Sci., 1992, v. 40, p. 147−156;

20. A. Sanfeld, M. Lin, A. Bios, I. Panaitov, J. Baret, «Mechanical and electrochemical effects on surface convection and on emulsification new criteria» // Adv. Colloid and Interface Sci., 1984, v. 32, p. 315−321;

21. S. Lin, R. B lanco, B. K arger «Adsorption d esorption i sotherm h ysteresis o f P-lactoglobulin A with a weakly hydrophobic surface» // J.Chromatogr., 1991, v. 557, p. 369−382;

22. F. Mac Ritchie, L. Ter Minassian Saraga, «Concentrated protein monolayers. Decomposition studies with radiolabeled bovin serum albumin» // Colloids and Surfaces, 1984, v. 10, p. 189−209;

23. F. Mac Ritchie, «Protein adsorption/desorption at fluid interfaces» // Colloids and Surfaces, 1989, v.41, p.25−34;

24. B. Busetta «Conformational analysis of apamin using the residual representation» // FEBS Letters, 1980, v.112, p.138−142;

25. F. Mac Ritchie «Air/water interface studies of proteins» // Anal. Chem. Acta, 1991, v. 249, p.241−245;

26. A. Ben-Shaul, N. Ben-Tal, B. Honig «Structural thermodynamic analysis of peptide and protein insertion into lipid membranes» // Biophys. J., 1996, v. 71, p.130−138;

27. N. Ben-Tal, A. Ben-Saul, A. Nicholls, B. Honig «Free-energy determinants of a-helix insertion into lipid bilayers» // Biophys. J., 1996, v.70, p.1803−1816;

28. S. Taneva, I. Panaitov, L. Ter-Minassian Saraga «Effect surface pressure on mixed dipalmitoyllecitin — serum albumin monolayer composition» // Colloids & Surfaces, 1984, v. 10, p.101−111;

29. D. Cornell, R. Carroll «Electron microscopy of lipid protein monolayers» // Colloids & Surfaces, 1983, v.6, p.385−393;

30. P. Rodriguez, G. Navarro, N. Rodriguez «Protein lipid interactions at the oil — water interface» // Colloids & Surfaces, B: Biointerfaces, 2001, v.21, p.207−216;

31. N. Wustneck, R. Wustneck, V. Fainerman, R. Miller, U. Pison «Interfacial behavior and mechanical properties of spread lung surfactant protein lipid layers» // Colloids & Surfaces, B: Biointerfaces, 2001, v.21, p.191−205;

32. M. Aizawa, in A. Aviram (ed), «Molecular electronic science and technology» // Engineering Foundation, New York, 1989, p. 301−350;

33. D. Mobius, in G. Roberts (ed.)" Langmuir-Blodgett films" // Plenum Press, New York, 1990, p. 223 272;

34. A. Ahluwalia, D. De Rossi, M. Monici, A. Schirone «Thermodynamic study ofLangmuir antibody films for application to immunosensors» // Biosensors & Bioelectronics, 1991, v.6, p.133−141;

35. P. Facci, G. Radicci, V. Erokhin, C. Niccolini «On the mobility of immunoglobulines G in LangmuirBlodgett films» Thin Solid Films, 1995, v.269, p.85−89;

36. T. Dubrovsky, A. Tronin, C. Niccolini «Determination of orientation of the IgG molecules in immobilized Langmuir monolayers by means of binding with fragment specific antiimmunoglobulin antibodies'7/Thin Solid Films, 1995, v.257, p. 130−133.

37. Y. Ovchinnikov «Rhodopsin and bacteriorhodopsin: structure and function relationships» //FEBS Lett., 1982, v.148, p.179−181;

38. Y. Ovchinnikov «Rhodopsin and bacteriorhodopsin: structure and function relationships» //FEBS Lett., 1982, v.148, p.179−181;

39. Y. Ovchinnikov, N. Abdulaev, R. Vasilov, I. Vturina, A. Kuryatov, A. Kiselev «The antigenic structure and topography of bacteriorhodopsin in purple membranes as determined by interactional antibodies» // FEBS Lett. 1985, v. 179, p.343−350;

40. N. Adam «The physics and chemistry of surfaces» // Oxford University Press, London, 1930, p.24−27;

41. A. Adamson «Physical chemistry of surfaces» // Intersci. Publish.Inc., New York, 1960, p.124−138;

42. N. Gershfeld «Physical chemistry of lipid films at fluid interfaces» // Ann. Rev. Phys. Chem., 1976, v.21, p.349−368;

43. K. Keuogh, M. Hawco, C. Parsons «The effect of methylation of phosphatidylethanolamine on the behaviour of lipid monolayers at the air-water interface» // Biochem. Cell. Biol., 1988, v.66, p.405−417;

44. A. Matsuda, M. Sugi, T. Fukui, S. Iizima, M. Miyahara, Y. Otsubo «Structure study of multilayer assembly films» // J.Appl.Phys., 1977, v.48, p.771−774;

45. M. Rosen, A. Cohen, M. Dahanayake, X.-Y.Hua «Relationship of structure to properties in surfactants «// J. Phys. Chem., 1982, v. 86, p.541−545;

46. S. Keller, A. Radhakrishnan, H. McConnell «Saturated phospholipids with high melting temperatures form complexes with cholesterols in monolayers «// J. Phys. Chem., 2000, v. 104, p.7522−7527;

47. T. Okonogi «Two fatty acids can replace one phospholipids in condensed complexes with cholesterol» // BBA / Biomembranes, 2002, v. 1564, p. 1−4;

48. H. McConnell, A. Radhakrishnan «Condensed complexes of cholesterol and phospholipids» // BBA / Biomembranes, 2003, v.1610, p.159−173;

49. F. Rana, A. Mautone, R. Dluhy «Surface chemistry of binary mixtures of phospholipids in monolayers. Infrared studies of surface composition at varying surface pressures in a pulmonary surfactant model system» // Biochemistry, 1993, v.32, p.3139−3177;

50. G. Chernik «Phase equilibria in phospholipid water systems «// Adv. Colloid and Interface Sci., 1995, v.61, p.65−129;

51. V. Schneider, R. Holman, G. Burr «A monolayer study of the isomerism of unsaturated and oxy fatty acids» // J. Phys. Chem., 1949, v.53, p.1016−1029;

52. F. Menger, M. Wood, S. Richardson, Q. Zhon, A. Ellington, M. Sherrod «Chainsubstituted lipids in monolayer films. A study of molecular packing» // J. Am. Chem. Soc., 1988, v. l 10, p.6797−6803;

53. T. Anderson, H. McConnell «Phase behavior of multicomponent phospholipid mixture with cholesterol» // J. Phys. Chem. B, 2000, v.104, p.9918−9928;

54. K. Shinoda, A. Carlsson, B. Lindman «On the importance of hydroxyl groups in the polar head-groups of nonionic surfactants and membrane lipids» // Adv. Colloid and Interface Sci., 1996, v.64, p. 253−271;

55. P. Dynarowicz «Recent developments in the modeling of the monolayers structure at the air / water interface» // Adv. Colloid and Interface Sci., 1993, v.45, p.215−241;

56. S. Ali, J. Smaby, M. Momsen, H. Brockman, R. Brown «Acyl chain-length asymmetry alters the interfacial elastic interactions of phoshatidylcholines» // Biophys. J., 1998, v.74, p.338−348;

57. F. Behroozi «Theory of elasticity in two dimensions and its application to LB films» // Langmuir, 1996, v. l2, p. 2289−2291;

58. S. Minones, P. Rodriges, P. Dynarowicz-Latka, C. Carrera «Structural and topographical characteristicsof dipalmitoyl phosphatidic acid in Langmuir monolayers» // J. Coll. Interface Sci., 2002, v.249, p.388−397;

59. D. Vollhardt «Morphology and phase behaviour of monolayers» // Adv. Colloid and Interface Sci., 1996, v. 64, p. 143−171;

60. T. Anderson, H. McConnell «Condensed complexes and the calorimetry of cholesterolphospholipid bilayers» // Biophys. J., 2001, v.81, p.2774−2785;

61. A. Dumaual, L. Jenski, W. Stillwell «Liquid crystalline / gel state phase separation in docosahexaenoic acid-containing b ilayers and monolayers» // BBA-Biomembranes, 2 000, v. 1463, p.395−406;

62. T. Anderson, H. McConnell «A thermodynamic model for extended complexes of cholesterol and phospholipid» // Biophys. J., 2002, v.83, p. 2039;2052;

63. A. Radhakrishnan, T. Anderson, H. McConnell «Condensed complexes, rafts, and the chemical activity of cholesterol in membranes» // Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2000, v.91, p. 12 422−12 427;

64. S. Keller, T. Anderson, H. McConnell «Miscibility critical pressures in monolayers of ternary lipid mixtures» // Biophys. J., 2000, v. 79, p. 2033;2042;

65. A. Radhakrishnan, X. Li, R. Brown, H. McConnell «Stoichiometry of cholesterol sphingomyelin condensed complexes in monolayers» // BBA, 2001, v.1511, p.1−6;

66. J. Peng, G. Barnes, I. Gentle «The structures of LB films of fatty acids and their salts» // Adv. in Colloid Interface Sci., 2001, v.91, p.163−219;

67. J. Trevors «Fluorescent probes for bacterial cytoplasmic membrane research» // J.Biochem. Biophys. Methods, 2003, v.57, p.87−103;

68. S. Slotte «Sphingomyelin cholesterol interactions in biological and model membranes» // Chem. Phys. Lipids, 1999, v. 102, p. 13−27;

69. E. London «Insights into lipid raft structure and formation from experiments in model membranes» // Current Opinion in Structural Biology, 2002, v. 12, p.480−486;

70. P. Chong, I. Sugar «Fluorescence study of lipid regular distribution in membranes» // Chem. Phys. Lipids, 2002, v.116, p.153−175;

71. C. Knobler, R. Desai «Phase transitions in monolayers» // Ann. Rev. Phys. Chem., 1992, v. 43, p. 207−236;

72. H. McConnell «Structures and transitions in lipid monolayers at the water / air interface» // Ann. Rev. Phys. Chem., 1991, v. 42, p. 171−195;

73. G. Brezesinski, H. Mohwald «Langmuir monolayers to study interactions at model membrane surfaces» //Adv. Colloid and Interface Sci., 2003, v.100−102, p.563−584;

74. P. Dynarowicz-Latka, K. Kita «Molecular interaction in mixed monolayers at the air/water interface» // Adv. Colloid and Interface Sci., 1999, v.79, p.1−17;

75. D. Vollhardt «Phase transition in adsorption layers at the air / water interface» // Adv. Colloid and Interface Sci., 1999, v.79, p. 19−57;

76. P. Balgavy, F. Devinsky «Cut-off effects in biological activities of surfactants» // Adv. Colloid and Interface Sci., 1996, v.66, p.23−63;

77. D. Rhodes, J. Liu «Divalent cation mediated binding of oligonucleotides to langmuir monolayers of charged lipids» // Langmuir, 1996, v. 12, p. 1879−1883;

78. M. Matsumoto, S. Terrettaz, H. Tashibana «Photo-induced structural changes of azobenzene LB films» // Adv. Colloid and Interface Sci., 2000, v. 87, p. 165−181;

79. G. Gabrielli, G. Caminati, M. Pugelli «Interactions and reactions of monolayers and LB multilayers with compounds in the bulk phase» // Adv. Colloid and Interface Sci., 2000, v.87, p.75−111;

80. P. Chong, I. Sugar «Fluorescence studies of lipid regular distribution in membranes» // Chem. Phys. Lipids, 2002, v.116, p. 153−175;

81. M. Pinelli, P. Levstein, G. Fidelio, A. Gennaro «Cholesterol induced alterations of the packing properties of gangliosides: an EPR study» // Chem. Phys. Lipids, 2000, v. 104, p. 193−206;

82. M. de Rosa «Archaeal lipids: Structural features and supramolecular organization» Thin Solid Films, 1996, v.284−285, p.13−17;

83. L. Tamm, J. Crane, V. Kiessling «Membrane fusion: a structural perspective on the interplay of lipids and proteins» // Current Opinion in Struct. Biology, 2003, v. 13, p.453−466;

84. S. Hazra, A. Giband, A. Desert, V. Gasem, N. Gowlam, «X-ray scattering studies of imperfect manganese stearate LB films» // Physica B, Condensed Matter, 2000, v.283, p.45−48;

85. D. Benn, L. Pauchard, N. Shahidradeh, J. Meuner «Optical study of low-dimensional phase transitions» // Physica A, v.263, p.78−94;

86. D. Schwartz «LB film structures» // Surface Sci. Reports, 1997, v.27, p.245−334- N. Peachey, C. Eckhardt «Structural study of ordered monolayers using AFM» // Micron, 1994, v. 25, p. 271−292−92.95.