Токсико-микологический контроль качества кормов

Токсико-микологический контроль кормов включает отбор проб кормов, органолептический анализ, микроскопические, токсико-биологические и микологические исследования, заключение и оценку кормов по результатам исследования, рекомендации по их использованию.

Отбор проб кормов для данного вида анализа проводят при обнаружении у животных признаков микотоксикозов. В ветеринарную лабораторию направляют образцы всех кормов, входящих в суточный рацион в последние дни перед отравлением, а также собирают остатки кормов в кормушке. В сопроводительной, указывают дату возникновения болезни, вид животных, количество заболевших; сообщают сведения о способе содержания, кормления животных; описывают основные клинические признаки. В случае падежа животных прилагают копию акта вскрытия, а также копии экспертиз ветеринарной лаборатории об исключении инфекционных болезней и отравлений, животных химическими и растительными ядами, если такие исследования к указанному моменту проведены. В сопроводительной указывают также общую массу партии корма, его вид, название хозяйства (или предприятия), дату взятия образца.

Органолептический анализ кормов проводят согласно описанным выше методикам. Органолептический анализ не всегда дает возможность определить пораженность корма. Часто пораженные токсическими грибами корма не имеют признаков порчи, то есть по внешнему виду не отличаются от доброкачественных.

Корма, подлежащие уничтожению или идущие на технические цели по результатам органолептического исследования, не подвергают токсико-микологическому анализу.

Микроскопические исследования. Грибной налет, обнаруженный на стеблях, листьях, зерне, соскабливают и переносят в каплю физиологического раствора или воды на предметном стекле, покрывают покровным и просматривают под микроскопом.

Для установления на кормах грибов, образующих поверхностные спорошения на различных частях растения, применяют метод смыва спор. Зерно, солому и сено предварительно измельчают, заливают чистой водой и в течение 20 мин взбалтывают. Патогенные споры плохо смываются водой, то пораженный корм помещают в шуттелъаппарат на 10 мин и после центрифугирования осадок исследуют обычным способом. Каплю суспензии пипеткой наносят на предметное стекло, покрывают покровным и просматривают под микроскопом. При спорошении в смыве можно определить род (Fusarium, Aspergillus, Mucor и др.), а иногда и вид гриба.

Тоскико-биологическому исследованию подвергают все корма, за исключением тех, в которых предполагается обнаружение возбудителей аспергиллеза. В этих случаях корма исследуют только микологически.

Основным методом для определения токсичности зернофуража, продуктов переработки зерна, грубых, комбинированных кормов и силоса является кожная проба на кролике (ГОСТ 13 496.7 — 71).

Кожная проба на кролике. Проба основана на извлечении из комбикорма этиловым эфиром жира из жироподобных веществ, в том числе растворителей токсинов грибов, удалении эфира из экстракта и нанесении масляного остатка экстракта на освобожденную от волос кожу кролика (на каждом боку допускается испытание не более трех проб). После нанесения экстракта его слегка втирают стеклянной палочкой. Нанесение экстракта повторяют через 24ч. Для предотвращения слизывания экстракта кроликом ему на шею надевают картонный воротник.

Этой пробой определяют наличие в кормах микотоксинов, продуцируемых грибами из рода Fusarium, Stachybotris и др. Наличие в кормах микотоксинов грибов из рода Aspergillus, Penicillium кожной пробой установить не возможно (токсины, попадая внутрь, вызывают дистрофические изменения в паренхиматозных органах, но не вызывают воспаления кожи при нанесении экстракта в виде аппликаций).

После нанесения экстракта из зерна, продуктов его переработки, силоса, комбикорма, грубых и других кормов, пораженных токсическими грибами, на коже кролика устанавливают 4 степени воспалительной реакции:

• 1я степень — гиперемия, повышенная чувствительность, шелушение кожи, исчезающее через 1 — 2дня (корм слаботоксичный);
• 2я степень — гиперемия, незначительный отек, болезненность, на поверхности небольшие (с просяное зерно) желтоватые пузырьки, затем на их месте образуются тонкие корочки подсохшего экссудата (корм слаботоксичный);
• 3я степень — гиперемия, отек кожи, на коже темные язвы образующие сплошной тонкий струп (корм токсичный);
• 4я — гиперемия сильный отек, выступающий в виде массивного вала на нижней границе очага, долго незаживающие язвы, струп толстый, сплошной (корм очень токсичный)

Введение

экстракта белым мышам в желудок. Готовят экстракт корма на основе стерильного физиологического раствора. Вытяжку вводят по 0,5 мл ежедневно 3…4 мышам в течение трех дней с помощью зонда в желудок, натощак. В качестве зонда можно использовать шприц с тупой слегка изогнутой иглой длиной 3−4 см. В случае отсутствия падежа мышей убивают (эфиром) и вскрывают.

Учет токсичности:

корм не токсичный — мыши живы, при вскрытии патологоанатомических изменений нет;

корм слаботоксичный — мыши живы, на вскрытии выявляют очаговое геморрагическое воспаление желудочно-кишечного тракта;

корм токсичный — гибель хотя бы одной мыши, на вскрытии выявляют геморрагическое воспаление желудочно-кишечного тракта, дегенеративные изменения печени, почек, кровоизлияния в паренхиматозных органах.

Проба на бородках кур. Экстрагируют измельченный корм спиртово-эфирным экстрактом (в соотношении 1:2,1:3) в течение 24 ч, сливают его и выпаривают до полного исчезновения запаха спирта и эфира. После этого к 0,5 мл экстракта добавляют 4,5 мл стерильного нейтрального рыбьего жира. Перемешанный маслянистый экстракт вводят в одну из бородок курицы в дозе 0,1−0,2 мл. В другую бородку вводят экстракт из заведомо доброкачественного корма или масло.

Введение

контрольного экстракта может вызвать незначительный ограниченный отек. Оценку реакции проводят по наличию изменений. Если диффузный отек бородки наступил через 4−24 ч, толщина ее увеличилась до 8 мм и больше, на вторые сутки в центре отека возникло кровоизлияние с последующим развитием некроза — реакция считается резко положительной. Когда же диффузный отек бородки возникает через 24 ч, ее толщина достигает 5…8 мм., а кровоизлияние и некроз не развиваются — реакция положительная. В случае если через 24 ч появляется только ограниченная припухлость бородки, а ее толщина не более 4 мм — реакция считается отрицательной.

Алиментарные пробы. Применяют как единственный метод подтверждения диагноза, когда микологическими исследованиями установлено наличие токсичных грибов в кормах. Для установления токсичности корма его скармливают (цыплятам, голубям, морским свинкам, кроликам, мышам) наряду с доброкачественным кормом двум группам (не менее трех голов в группе) животных. Суточную норму кормов заменяют исследуемым кормом и скармливают его подопытным животным не менее 10 дней. Животных содержат изолированно.

Положительными показателями биопробы при отравлении токсическими грибами считают: расстройства желудочно-кишечного тракта и поражение центральной нервной системы, и также повышение температуры (на 1… 5° С).

Если при биопробе животные не гибнут в течение 10 дней, то их убивают и вскрывают. На вскрытии павших или убитых животных устанавливают катаральное воспаление желудочно-кишечного тракта, иногда кровоизлияния, и дегенеративные изменения в паренхиматозных органах. У птиц, кроме того, выражен гепатит различной интенсивности в зависимости от степени токсикоза; цвет печени оранжевый, желтый.

Микологическое исследование кормов. При микологическом исследовании кормов необходимо:

выделить грибы из корма, провести их количественный учет и дифференциацию;

из первичных посевов выделить чистые культуры;

Определить токсичность выделенной чистой культуры.

Определение токсичности культур грибов, выделенных из образца кормов, проводят:

скармливанием подозрительного корма подопытным животным;

проведением кожной пробы и других биологических проб установлением роли выделенного гриба в этиологии заболевания;

Для определения токсичности культур грибов их культивируют в течение 10…20 дней при температуре 22−25 °С на различных питательных средах. При появлении культуры из неё готовят экстракт, токсичность экстракта проверяют методом кожной пробы на кролике. Упрощенный способ постановки кожной пробы. Для этого снимают мицелиальную пленку гриба, выросшего на корме, растирают до кашицеобразного состояния и шпателем или палочкой наносят на кожу кролика. Этим методом определяют первичную токсичность известных культур Fusarium, Stachybotris, Dendrochium, Aspergillus, так и выделенных из корма неизвестных грибов. Токсические штаммы грибов у животных вызывают через несколько суток, такие же симптомы отравления, как и при скармливании кормов пораженных грибами.

Для установления рода грибов колонию, выросшую на агаре, снимают с поверхности среды, переносят на предметное стекло в каплю дистиллированной воды и исследую под микроскопом.

Оценка кормов по результатам исследования. Солому и полову, образцы, которых оказались токсичными и пораженными токсическими вариантами гриба Stachybotris alternans, запрещается использовать без обезвреживания для кормления лошадей, крупного рогатого скота, овец и свиней, а также для подстилки. Такую солому, полову можно допускать для фуражных целей только после обезвреживания (обработки щелочью) при условии получения отрицательного результата повторного исследования на токсичность. В случае положительной биопробы при повторном исследовании солому уничтожают.

Токсичное сено, пораженное грибом Dendrochium toxicum, запрещается использовать для фуражных целей, его уничтожают.

Грубые корма, пораженные токсическими вариантами грибов из рода Fusarium (за исключением представителей секции Sporotrichiella), слаботоксичные по кожной пробе и давшие отрицательный результат при скармливании, допускают в корм откормочным группам крупного рогатого скота в смеси с другими кормами (не более 25% к общему рациону) с 10- дневными перерывами. Не рекомендуется скармливать их одновременно с кислыми кормами (силосом, жомом и др.).

Если грубые корма поражены токсическими видами грибов из рода Fusarium, а результат первичной кожной пробы отрицателен, то ставят пробу повторно и при получении отрицательных показателей их используют откормочным группам животных, причем хранить такой корм запрещается.

Сено, солома, оказавшиеся в результате исследования слаботоксичными и зараженными токсическими грибами из родов Aspergillus, Penicillium, Mucor, Rhizopus и др., допускают в корм в количестве 25% к общему рациону крупному и мелкому рогатому скоту (кроме животных во второй половине беременности и лактирующих) при полном исключении из рациона кислых кормов.

Грубые корма, зараженные грибом Aspergillum fumigatus, использовать для подстилки животным запрещается.

Партии зерна, перезимовавшие под снегом или подвергшиеся самосогреванию (первой и второй степени порчи) и признанные в результате исследования нетоксичными, допускают для фуражных целей только после просушивания. Такие корма не рекомендуется долго хранить.

Зерно, пораженное токсическими вариантами грибов из рода Fusarium (кроме представителей секции Sporotrichiella, а также F. graminearum), слаботоксичное по биопробе, допускают в корм откормочным группам крупного рогатого скота в смеси с другими кормами (не более 25% к общему рациону) периодически с 10-дневными перерывами. Такое зерно нельзя скармливать одновременно с кислыми кормами.

Партии зерна, продукты его переработки, а также комбикорма, слаботоксичные по биопробе и пораженные токсическими видами грибов из родов Aspergillus, Penicillium, Mucor, Rhizopus, Trichoderma и др., допускают после тщательного просушивания в корм крупному рогатому скоту и овцам (за исключением молодняка и животных во второй половине беременности) в количестве 25% к общему рациону, а также свиньям, лошадям и птице после обеззараживания.

Запрещается использовать для фуражных целей:

• а) грубые корма, комбикорм, зернофураж, резкотоксичные по биопробе;
• б) грубые корма, слаботоксичные по биопробе, зараженные токсическими грибами: Fus. sporotrichiella, Fus. sporotrichiella var. poae, Fus. sporotrichieila var. sporotrichioides, Fus. sporotrichiella var. tricinctum;
• в) зерно, слаботоксичное, но биопробе, зараженное токсическими грибами Fus. sporotrichiella и var. poae, sporotrichiodes, tricinetum, а также Fus. graminearum;
• г) силос, пораженный различными видами токсических грибов,

Непригодны для скармливания живот…