Выбор технологий и оборудования для рабочего места лаборанта гистолога

Предметные стекла, применяемые для получения гистологических препаратов, необходимо предварительно подготовить. Исключение составляют готовые к использованию и специально упакованные импортные предметные стекла.

Предметные стекла моют в теплой мыльной воде или кипятят в 2 — 3% растворе гидрокарбоната натрия, затем ополаскивают горячей водой и промывают в течение нескольких часов в проточной воде. Вымытые стекла протирают чистой хлопчатобумажной тканью и на несколько дней помещают в смесь Никифорова: 96% спирт и эфир (1:1). Обезжиренные стекла извлекают пинцетом из этой смеси, протирают чистой тканью и складывают в коробочку.

Для обезжиривания предметных стекол используют хромовую смесь, в состав которой входят 100 г бихромата калия, концентрированной серной кислоты и 1000 мл горячей воды. Бихромат калия растворяют сначала в горячей воде, затем раствор охлаждают и после этого по стеклянной палочке осторожно по каплям добавляют серную кислоту. Стекла выдерживают в хромовой смеси 2 — 3 дня, а затем тщательно промывают в проточной воде в течение 1—2 дней.

Предметные стекла также хорошо обезжириваются в крепком растворе соляной кислоты. Через несколько суток их промывают проточной водой и высушивают.

Качество обезжиривания можно проверить, капнув на предметное стекло воду из пипетки: по обезжиренному стеклу вода растекается тонким слоем, а не собирается в каплю.

Для лучшей фиксации срезов на стекле его предварительно смазывают смесью белка с глицерином. Свежий яичный белок взбивают и фильтруют через крупнопористый фильтр, смоченный дистиллированной водой, затем размешивают с равным объемом глицерина и добавляют несколько кристаллов тимола. Смесь хранится в течение нескольких месяцев. Применяют также смесь, в состав которой входят 15 мл сыворотки крови, 5 мл дистиллированной воды и 6 мл 5% формалина. После фильтрации смесь готова к нанесению на предметные стекла. Ее использование дает лучшие результаты, чем применение яичного белка, так как при окрашивании не образуется фон.

Для нанесения белка на обезжиренные предметные стекла в одну руку берут 5 — 6 стекол в виде веера, а в другую — чистую стеклянную палочку, которой наносят белок, прикасаясь к каждому стеклу. Затем белок растирают обезжиренным спиртом пальцем по поверхности стекла до его середины, прилагая небольшое усилие. Некоторые авторы рекомендуют натертые белком стекла прогревать в термостате, но опыт показывает, что это излишне, так как после переноса срезов на стекла их помещают в термостат или на специальный столик для просушивания, где одновременно происходит коагуляция белка.

Разработан способ фиксации среза к предметному стеклу без предварительного натирания последнего белком с глицерином. В ванночку с теплой дистиллированной водой капают несколько капель жидкого казеинового клея и перемешивают. В полученную мутноватую жидкость опускают срезы, расправляют препаровальной иглой и вылавливают на чистое обезжиренное стекло. Этот способ дает неизменно хороший эффект и вокруг среза отсутствует окрашенный фон, как это часто бывает при применении белка.

Лаборатории гистологии и цитологии в последнее время полностью оснащаются новейшим автоматическим оборудованием производства японской компании Sakura. Основная деятельность лабораторий направлена на прижизненную морфологическую диагностику патологических состояний различных органов и систем. Здесь производится гистологическое и цитологическое исследование операционного и биопсийного материала. Результаты исследований можно получить уже в течение 1 рабочего дня, а по операционному материалу в течение 1−2 рабочих дней, что позволяет врачам оказывать больному необходимую и своевременную помощь в лечении.

В работу внедрены иммуногистохимические методы исследований инфекционной патологии. В настоящий момент возможна диагностика вируса простого герпеса 1 и 2 типов, цитомегаловируса, вируса Эпштейна-Барр, вируса папилломы человека (онкогенные штаммы), парвовируса В19, пневмоцисты (Pneumocystiscarinii), токсоплазмы (Toxoplasmagondii), аденовирусной инфекции в биопсийном, операционном и цитологическом материале.

Также в лаборатории имеются удобная и современная система архивирования полученных от пациентов материалов, предназначенная для длительного хранения и быстрого поиска диагностических препаратов в случае необходимости.

Морфологическое исследование является неотъемлемой составной частью любой экспериментально-клинической работы. При получении результатов, имеющих важное практическое, в том числе коммерческое, значение или являющихся предметом изобретения или открытия, морфолог — полноправный участник творческого коллектива — может использовать результаты эксперимента в собственной научной работе.

Специализированное оборудование и расходные материалы производства PFM, Feather, Medite, Bright, MDS обеспечивает комфортную, быструю и точную работу.

Благодаря разнообразию моделей и модульным конфигурациям, можно подобрать комплектацию в полном соответствии с запросами любой гистологической лаборатории.(рис 2).

Рис. 2. Комплектация в соответствии с запросами гистологической лаборатории.

Только повышая свой профессиональный уровень, осваивая новейшие методы исследования с использованием новейшего оборудования и реактивов возможно оптимизировать труд в современных условиях работы.

В процессе работы периодически возникает ряд организационных проблем, требующие разумные варианты их решения.

1. Дефекты оформления направлений. В прикрепленных к лаборатории лечебно-профилактических учреждениях использовались различные формы бланков направлений на гистологическое исследование, и само оформление этих бланков не всегда соответствовало предъявляемым требованиям.

В настоящее время всем учреждениям была предложена для использования единая форма направления на гистологическое исследование, отражающая всю необходимую информацию. Врачам лечебно-профилактических учреждений необходимо дать рекомендации о важности и необходимости отражения в бланке всех исходных данных и доступном для восприятия (разборчивом) оформлении направлений.

2. Дефекты фиксации материала. Для фиксации и транспортировки биоматериала использовалась нестандартная, различная по емкости и способам закрывания, специально не предназначенная для этих целей тара: разномерные флаконы, нередко содержащие остатки лекарственных средств, полиэтиленовые мешки, банки из-под пищевых продуктов. При не соблюдении описанных в классических руководствах рекомендации по количеству фиксирующей жидкости (объем фиксирующей жидкости должен в 20 раз превышать объем биологического материала) возникали случаи отбраковки биоматериала. При негерметично закрытых флаконов проливалась фиксирующая жидкость, что значительно снижало качество фиксации; появлялись трудности при извлечении биоматериала из флаконов с узким горлышком.

Централизованная закупка специальной тары для фиксации и транспортировки биопсийного и операционного материла необходима для устранения описанных недостатков. Применимы специализированные пластиковые широкогорлые контейнеры (Deltalab, Испания). Они не являются одноразовыми. Используются повторно после специальной обработки.

Это решение также повлекло за собой необходимость централизованного изготовления унифицированных этикеток для флаконов, содержащих наименование лаборатории, наименование фиксирующей жидкости, наименование производителя, каталожный номер, срок годности и стандартное чистое поле для маркировки.

В качестве фиксирующей жидкости в разных прикрепленных лечебно-профилактических учреждениях использовались растворы формальдегида различной концентрации, а иногда формалин заменялся другой жидкостью (например, 96% спиртом, 3% перекисью водорода, уксусной кислотой и др.), что значительно снижало качество фиксации. Были также выявлены случаи несоблюдения температурного режима хранения фиксированного материала (помещение в холодильник, замораживание). Для унификации способа фиксации материала была налажена доставка во все прикрепленные лечебно-профилактические учреждения в необходимом количестве стандартного фиксирующего раствора (забуференного 4% раствора формальдегида рН 6,9 фирмы Merck, Германия), расфасованного в специализированные контейнеры, и проведено обучение персонала по правилам фиксации биоматериала.

3. Дефекты транспортировки материала в лабораторию. Материал привозили в разное время в течение всего рабочего дня, поэтому часть материала, доставленная в конце рабочего дня, пускалась в проводку лишь на следующий день, что, соответственно, отодвигало на день получение готового результата исследования.

Первоначально биоматериал в лабораторию доставлялся курьерами прикрепленных лечебно-профилактических учреждений. В настоящее время весь доставляемый материал поступает в лабораторию в первой половине рабочего дня и в этот же день подвергается необходимой технологической обработке. Для обеспечения транспортировки биоматериала была организована собственная курьерская служба, разработаны оптимальные маршруты, охватывающие все прикрепленные лечебно-профилактические учреждения, составлено расписание доставки биоматериала по дням недели.

Прием и первичная сортировка материала. По мере увеличения объемов исследований возникла необходимость введения новой штатной должности — медицинского регистратора. Первоначально приемом, сортировкой и регистрацией биоматериала в лаборатории занимались лаборанты и санитарки. В настоящее время в лаборатории в подготовительном процессе задействованы санитарки, медицинские регистраторы, лаборанты, причем их функции строго разграничены — санитарки осуществляют прием и первичную сортировку биоматериала и подготавливают специализированные контейнеры с формалином для отправки в лечебно-профилактические учреждения; лаборанты занимаются первичной лабораторной обработкой материала (первичная регистрация и вырезка); медицинские регистраторы занимаются оформлением всех других видов медицинской документации, отчетов, а также осуществляют обратную связь с направившими лечебно-профилактическими учреждениями (уточнение необходимых регистрационных данных).

Вывод: Несмотря на многие современные новшества, появление технического оснащения и одноразовой посуды снизило риск заражения медицинского персонала, избежать его не представляется возможным.

Химические реактивы так же не безопасны, среди них встречаются и ядовитые вещества, и пожароопасные. Переход на современные анализаторы упростил работу лабораторий, однако нехватка современного оборудования и перебои в обеспечении расходными материалами для них не позволяют полностью отказаться от старых методов.

Выявление факторов риска и определение методов профилактики заболеваний, связанных с условиями труда лаборанта гистологической лаборатории, является актуальной проблемой современной медицины труда.