Иммунофенотипирование в диагностике острых лейкозов

Диагностика острых лейкозов включает исследование периферической крови, костного мозга и в отдельных случаях проведение трепанобиопсии. Определение варианта острых лейкозов базируется на данных морфоцитохимического, иммунологического и цитогенетического исследования бластных клеток костного мозга и крови [7,9,12,13,14,15]. Такой комплексный подход способствует значительному повышению эффективности современных схем терапии больных острым лейкозом.

На основании морфологической характеристики лейкемические миелобласты и монобласты были разделены на клетки с наличием или отсутствием признаков созревания. Направленность дифференцировки лейкемических элементов определяли с помощью цитохимических реакций. С помощью цитогенетических исследований были выявлены закономерные изменения кариотипа бластов при разных вариантах острых лейкозов.

В период 80-х годов в диагностике острых лейкозов важное значение приобрело иммунофенотипирование (ИФТ) бластов. С помощью гибридомной техники была получена широкая панель моноклональных антител (МКА), которые позволили выявить признаки дифференцировки клеток, не обнаруживаемые при исследовании морфоцитохимическими методами. Использование иммунологических подходов сыграло ведущую роль в диагностике отдельных вариантов острых нелимфобластных лейкозов (миелобластного с минимальной дифференцировкой, эритроидного, мегакариоцитарного) и характеристике всех типов бластов при Ви Т-линейных острых лимфобластных лейкозах [7,9,12,13].

Иммунодиагностика гемобластов основана на сопоставлении морфофункциональных характеристик лейкозных бластов и нормальных/нетрансформированных клеток гемопоэза. Известно, что нормальный процесс дифференцировки клеток в костном мозге и/или тимусе происходит с определенной, достаточно постоянной скоростью, определяемой потребностью организма в кроветворных и иммунокомпетентных клетках. По мере функционального созревания лимфоидных и миелоидных клеток происходит перестройка генов, кодирующих специфические рецепторы клеток, а значит, происходит изменение набора рецепторов для различных факторов роста, дифференцировки и межклеточного взаимодействия. По набору мембранных и цитоплазматических антигенов можно установить линейную принадлежность, стадию зрелости и функциональное состояние клетки.

К настоящему времени ИФТ превратилось в быстрый и полезный способ получения подробной характеристики опухолевых клеток, необходимой для диагностики острых лейкозов (ОЛ). Сходство между лейкозными и нормальными клетками позволяет установить линейность и стадию созревания патологических клеток, что необходимо для диагноза, классификации и прогностической оценки различных типов онкогематологических заболеваний [8].

Для количественного определения популяционного состава лейкоцитов используется способность их рецепторов взаимодействовать со специфическими антителами с образованием стабильных комплексов на поверхностной мембране клетки. На основании классической реакции антиген—антитело разработано довольно много способов количественного учета клеток, часть из которых имеет сугубо историческое значение, другие применяются в основном для научных исследований. Для практических целей максимально адаптированы и дают наиболее воспроизводимые результаты иммуноцитохимия (световая и люминесцентная микроскопия) и проточная цитометрия. Однако не только в клинически сложных случаях, но и в повседневной практике микроскопия все чаще уступает место проточной цитометрии, ставшей основным методом ИФТ в диагностике гемобластозов.