Качественное обнаружение фенольных соединений

РефератПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Учитывая высокую разностороннюю биологическую активность фенольных соединений, был проведен поиск этих веществ с помощью качественных реакций и хроматографическими методами. Определение фенолкарбоновых кислот проводили методом БХ. Хроматограммы проявляли в УФ-свете и обрабатывали раствором аммиака и 1% водным раствором железа (III) хлорида. Результаты хроматографического разделения… Читать ещё >

Качественное обнаружение фенольных соединений (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Таблица 24 Качественные реакции на флавоноидные соединения.


Реактив.	Класс флавоноидов.	Наблюдаемое окрашивание.	Результат реакции.
Металлический магний в солянокислой среде.	флавонолы, флаваноны, флавоны.	красное.
Раствор аммиака.	флавонолы, флаваноны, флавоны, флаванонолы.	желтое, при нагревании оранжево-красное.
халконы, ауроны.	красное (пурпурное).	;
Раствор аммиака, натрия карбонат.	антоцианы.	синее или фиолетовое.	_.
Кислота серная.	флавоны, флавонолы.	ярко-желтое.
Свинца ацетат основной.	флавоны, халконы, ауроны.	ярко-желтое.
Кислота борная и лимонная.	катехины, лейкоантоцианидины, флавонолы, флаванонолы.	зеленая или желтая флюоресценция.	_.
Соли диазония.	флавоны.	оранжевая или красная.

Для установления классов флавоноидов, использовали следующие доступные нам реактивы: кислоту хлористоводородную разбавленную, магний металлический, раствор аммиака, натрия карбонат, кислоту серную (разведенную), свинца ацетат основной, кислоту борную, кислоту лимонную, соли диазония (свежеприготовленные). По результатам можно предположить, что основные классы флавоноидов представлены флавонолами и флавонами (табл. 24). Для обнаружения флавоноидов на хроматографическую бумагу наносили 30 мкл извлечения из дудника обыкновенного и спиртовые растворы СО флавоноидов (рутина, гиперозида, кверцетина, лютеолина, лютеолин-7-гликозида и апигенина). Время экспозиции хроматограмм 24 часа. Когда фронт растворителя доходил до конца хроматографической бумаги, ее доставали из камеры и сушили в вытяжном шкафу. После этого хроматограммы последовательно обрабатывали парами концентрированного аммиака и спиртовым раствором щелочи, затем посматривали в УФ-свете до и после проявления. Обнаружено шесть контрастных зон адсорбции. По результатам БХ в различных системах в этилацетатном извлечении из подземной части дудника обыкновенного, было обнаружено шесть контрастных зон адсорбции. Три по характеристикам совпадали с зонами адсорбции СО апигенина, кверцетина и рутина.

Таблица 25 Результаты хроматографического разделения флавоноидов дудника обыкновенного в системе БУВ (4:1:5).


CO и исследуемое извлечение.	Окраска зон адсорбции.	Значение Rf.
УФ-свет.	Пары аммиака, УФ-свет.	10% раствор алюминия хлорида спиртовой, УФ-свет.
Апигенин.	коричневая.	желто-коричневая.	желтая.	0,76±0,03.
Лютеолин.	коричневая.	желто-зеленая.	желто-зеленая.	0,70±0,02.
Кверцетин.	желто-корич.	желтая.	зелено-желтая.	0,74±0,03.
Гиперозид.	;	темно-желтая.	желто-зеленая.	0,55±0,03.
Рутин.	желтая.	желто-бурая.	коричневая.	0,54±0,03.
Извлечение.	; коричневая желто-корич. ; желтая. ;	; желто-коричневая желтая темно-желтая желто-бурая желтая.	желто-зеленая желтая зелено-желтая желто-зеленая коричневая желто-зеленая.	0,82±0,03 0,81±0,02 0,84±0,03 0,70±0,02 0,64±0,03 0,32±0,02

Таблица 26 Результаты хроматографического разделения флавоноидов дудника обыкновенного в системе БУВ (4:1:2).


CO и исследуемое извлечение.	Окраска зон адсорбции.	Значение Rf.
УФ-свет.	Пары аммиака, УФ-свет.	10% раствор алюминия хлорида спиртовой, УФ-свет.
Апигенин.	коричневая.	желто-коричневая.	желтая.	0,77±0,02.
Лютеолин.	коричневая.	желто-зеленая.	желто-зеленая.	0,72±0,03.
Кверцетин.	желто-корич.	желтая.	зелено-желтая.	0,75±0,02.
Гиперозид.	;	темно-желтая.	желто-зеленая.	0,70±0,02.
Рутин.	желтая.	желто-бурая.	коричневая.	0,70±0,03.
Извлечение.	; коричневая желто-корич. ; желтая. ;	; желто-коричневая желтая темно-желтая желто-бурая желтая.	желто-зеленая желтая зелено-желтая желто-зеленая коричневая желто-зеленая.	0,82±0,02 0,87±0,02 0,75±0,03 0,68±0,02 0,60±0,03 0,35±0,04

Таблица 27 Результаты хроматографического разделения флавоноидов дудника обыкновенного в системе: кислота уксусная 15%.


CO и исследуемое извлечение.	Окраска зон адсорбции.	Значение Rf.
УФ-свет.	Пары аммиака, УФ-свет.	10% раствор алюминия хлорида спиртовой, УФ-свет.
Рутин.	желтая.	желто-бурая.	коричневая.	0,62±0,03.
Гиперозид.	;	темно-желтая.	желто-зеленая.	0,50±0,02.
Кверцетин.	желто-корич.	желтая.	зелено-желтая.	0,29±0,01.
Лютеолин.	коричневая.	желто-зеленая.	желто-зеленая.	0,22±0,01.
Апигенин.	коричневая.	желто-коричневая.	желтая.	0,20±0,01.
Извлечение.	желтая. - - желто-корич. коричневая. ;	желто-бурая темно-желтая желтая желтая желто-коричневая. ;	коричневая желто-зеленая желто-зеленая зелено-желтая желтая желто-зеленая.	0,64±0,02 0,57±0,02 0,35±0,02 0,29±0,01 0,20±0,01 0,17±0,01

Кроме БХ для определения флавоноидов использовали хроматографию в тонком слое сорбента (ТСХ). Полученное с помощью 70% спирта этилового извлечение из сырья дудника обыкновенного — 30 мкл наносили на пластинки и хроматографировали в системе этилацетат-кислота муравьиная-вода (70:15:15). Система должна быть свежеприготовленной. Хроматографическую камеру насыщали в течение 30 минут. Стандартными образцами (СО) служили спиртовые растворы рутина, лютеолина, апигенина, кверцетина и гиперозида. После прохождения растворителем расстояния 10−11 см, пластинки вынимали из камеры, сушили и просматривали в УФ-свете при длине волны 365 нм. Результаты определения представлены в таблице 28.

В результате ТСХ в извлечении из подземных органов дудника обыкновенного корневища и корни, приготовленного с помощью 70% спирта этилового нами было обнаружено семь контрастных зон адсорбции, три из которых сравнением с СО идентифицированы как флавоноиды (апигенин, кверцетин и рутин).

Таблица 28 Результаты тонкослойной хроматографии спиртоводного извлечения дудника обыкновенного корневища и корни.


CO и исследуемое извлечение.	Флюоресценция и окраска после проявителя.	Значения Rf.
УФ-свет.	пары аммиака.
Апигенин.	темно-коричневая.	желто-коричневая.	0,77±0,03.
Лютеолин.	темно-коричневая.	желто-коричневая.	0,79±0,02.
Кверцетин.	желтая.	темно-желтая.	0,74±0,02.
Рутин.	темно-коричневая.	желто-коричневая.	0,65±0,02.
Гиперозид.	;	темно-желтая.	0,68±0,03.
Извлечение.	темно-коричневая темно-коричневая темно-коричневая желтая. ; темно-коричневая. ;	желто-коричневая желто-коричневая желто-коричневая темно-желтая темно-желтая желто-бурая бежевая.	0,87±0,04 0,79±0,02 0,65±0,02 0,64±0,02 0,45±0,03 0,35±0,03 0,10±0,01

Определение фенолкарбоновых кислот проводили методом БХ. Хроматограммы проявляли в УФ-свете и обрабатывали раствором аммиака и 1% водным раствором железа (III) хлорида.

Наилучшее разделение, а значит наибольшее количество зон абсорбции (голубое свечение в УФ-свете) достигнуто в системах БУВ (4:1:2) и 2% уксусной кислоте, поэтому дальнейшее изучение гидроксикоричных кислот продолжили в этих системах с использованием следующих стандартных образцов: спиртовые растворы кофейной, коричной, галловой, n-кумаровой и феруловой кислот.

Результаты хроматографического разделения фенолкарбоновых кислот в спиртоводном извлечении дудника обыкновенного представлены в таблице 29.

Таблица 29 Результаты БХ этилацетатного извлечения дудника обыкновенного в системе БУВ (4:1:2).


CO и исследуемое извлечение.	Окраска зон адсобции.	Значение Rf.
УФ-свет.	Пары аммиака, УФ-свет.	3% р-р железа (III) хлорида.
Коричная к-та.	;	желтая.	оранжевая.	0,77±0,03.
Кофейная к-та.	светло-голубая.	ярко-голубая.	сине-зеленая.	0,82±0,01А; 0,28±0,01Б
Феруловая к-та.	голубая.	ярко-голубая.	оранжевая.	0,83±0,03А; 0,33±0,02Б
Галловая к-та.	темно-серо-голубая.	;	;	0,62±0,02А.
n-кумаровая к-та.	светло-фиолетовая.	фиолетовая.	желто-оранжевая.	0,40±0,01А; 0,50±0,01Б
Извлечение.	светло-голубая.	голубая.	серо-зеленая кофейная.	0,82±0,01.
голубая.	ярко-голубая.	оранжевая феруловая.	0,83±0,03А; 0,33±0,02Б
голубая.	желто-зеленая.	сине-зеленая хлорогеновая.	0,63±0,02А; 0,72±0,01Б
сине-фиолетовая.	;	;	цикоривая.
темно-серо-голубая.	;	;	0,61±0,02А галловая.
сиреневая.	желтая.	эллаговая.	0,25±0,01А; 0,1±0,01Б

Показать весь текст

Заполнить форму текущей работой