Активные свойства лейкоцитов в условиях нормы и при морфофункциональном изменении соединительной ткани

Соединительная ткань (СТ) является одной из самых распространённых, в организме человека и составляет более 50% массы тела. Она представлена разнообразными видами — костной, хрящевой и собственно соединительной тканями. СТ имеет мезенхимальное происхождение и состоит из клеток и хорошо развитого межклеточного вещества. СТ представлена во всех органах и её значение в некоторых из них весьма велико не только в структурном, но и в функциональном плане (кожа, стенки кровеносных сосудов, строма органов и т. д.).

Эта система обладает многообразными функциями: опорной, защитной, метаболической, структурообразовательной, пластической. Все перечисленные функции всегда выполняются совместно и клеточными элементами, и внеклеточными компонентами соединительной ткани. СТ представляет собой классический пример функциональной системы, все элементы которой находятся во взаимосвязи и взаимозависимости, и поэтому при любой патологии СТ нарушения в каком-либо звене обязательно приводят к изменению функциональной системы в целом (В.В.Серов и соавт., 1981).

Одной из основных функций СТ является защитная или барьерная, выражающаяся в предохранении организма от непосредственного влияния факторов внешней среды и чужеродных агентов. Также ведет себя СТ и внутри организма, формируя барьеры между органами и тканями. Эта же функция обеспечивается и деятельностью различных клеточных элементов СТ, которые способны к фагоцитозу (макрофаги, эндотелий сосудов, фиб-робласты), вступают в иммунные реакции (макрофаги, лимфоциты и плазматические клетки), участвуют в синтезе веществ с антимикробным и антивирусным действием (лимфоциты, макрофаги, фибробласты).

Соединительная ткань является основной мишенью при диффузных заболеваниях соединительной ткани (ДЗСТ), которые включают в себя та6 кие нозологии как системная красная волчанка, системная склеродермия и системные васкулиты. Системный воспалительный процесс — это общий и главный стержень, на основе которого объединяются все эти заболевания в группу диффузных болезней соединительной ткани.

Воспаление лежит в основе главных клинических проявлений диффузных болезней соединительной ткани. Несмотря на многообразие причин, вызывающих воспалительный процесс, всякое воспаление характеризуется рядом общих проявлений. За последние годы установлен ряд различных биохимических и иммунологических процессов, направленных на элиминацию повреждающего фактора, заживление пораженных тканей и восстановление нарушенной функции. Основную роль в процессе воспаления играют лейкоциты (Я.А.Сишдин и соавт., 1994).

В межклеточных взаимодействиях при патологии соединительной ткани принимают участие такие иммунокомпетентные клетки, как Ти В-лимфоциты, моноциты/макрофаги (Я.А.Сишдин и соавт., 1994; КЛ. Аш, 1993), а также нейтрофилы, тромбоциты и эндотелиальные клетки.

Ранее с полиморфноядерным нейтрофилом связывали лишь микроби-цидную функцию, не рассматривая его как иммунокомпетентную клетку. В настоящее время показано, что фагоцитирующие клетки играют ключевую роль в защите хозяина путём разрушения микробных и других токсических агентов (К.8пус1егтап, 1994).

Нейтрофилы воспринимают многочисленные сигналы о дестабилизации внутренней среды и изменяют свой функциональный облик, отражая нарушения гомеостаза (А.Н.Маянский, 1993). Нейтрофилы являются эффекторами острого течения процесса, которое сопровождается деструкцией тканей и экссудацией (Д.Н.Маянский, 1992).

После идентификации патогенного фактора высвобождается ряд про-воспалительных медиаторов, которые вызывают увеличение кровотока, по7 вышают сосудистую проницаемость, обуславливают адгезию и выход лейкоцитов в воспалительный очаг, что вызывает деструкцию и элиминацию антигена. Среди высвобождающихся цитокинов важную роль играют: ин-терлейкин 1, фактор некроза опухоли-альфа и интерферон-гамма. Выделяются также хемотаксические факторы типа иытерлейкина-8, лейкотриена В4 и макрофагального воспалительного протеина 1.

С врождённой или приобретённой функциональной неполноценностью клеток — эффекторов воспаления, прежде всего, полиморфноядерных нейтрофилов связывают хронизацию экссудативно-деструктивнош воспаления (Д.Н.Маянский, 1992).

Большой интерес исследователей привлекают и антинейтрофильные цитоплазматические антитела (АНЦА) — новый класс органонеспецифиче-ских антител, реагирующих с различными компонентами цитоплазмы нейтрофилов и моноцитов, в первую очередь протеиназой 3 и миелоперокси-дазой (В.А.Тищешсо и соавт., 1994; Т. В. Бекетова и соавт., 1995). Среди механизмов, лежащих в основе гиперпродукции АНЦА, можно предполагать роль инфекционного агента и генетических факторов, влияющих на выработку цитокинов и ферментов.

При ДЗСТ органом-мишенью является микроциркуляторное русло, которое первым вовлекается в патологический процесс.

Клеточным элементам крови отводится важная роль в гемоперфузии микрососудов и особенно капилляров. Микроциркуляторные нарушения обусловлены не только агрегацией эритроцитов, но и патологическими изменениями со стороны лейкоцитов (Е.Г.Редчиц и соавт., 1989). Ещё в 1932 году J.C.Sandison указывал на особую роль лейкоцитов в микроциркулятор-ном кровотоке. Он отметил, что именно лейкоциты, как более упругие и резистентные к деформации клетки, могут существенно нарушать кровоток в капиллярах вплоть до полного его прекращения (феномен «leukocyte plug8 ging55). В нормальных физиологических условиях окклюзия капилляра лейкоцитами носит преходящий характер и является естественным феноменом. В современной отечественной и зарубежной литературе встречается мало сведений о состоянии лейкоцитов, их реологических свойствах при патологии соединительной ткани.

Известно, что фаза острого воспаления непосредственно связана с участием полиморфноядерных лейкоцитов. Удаление нейтрофилов из циркулирующей крови предотвращает феномен Артюса, а также поражение сосудов при сывороточной болезни (KXHartiala, 1987). Не вызывает сомнений и факт участия нейтрофилов в реакциях хронического воспаления (Д.Н.Маянский, 1991; 1992).

Следует подчеркнуть, что возможна модуляция функциональной активности лейкоцитов как за счет влияния лекарственного агента непосредственно на гранулоцит, так и вследствие изменения функций’лимфоцитов, мононуклеарных фагоцитов, спектра гуморальных факторов крови (И.А.Мошрева и соавт., 1985; Ю. А. Гриневич и соавт., 1986; И. И. Долгушин, 1989; И. В. Нестерова, 1989; А. М. Земсков и соавт., 1993; C. Roques, et al, 1991; A.S.AI-Tuwaijri, A. AMustafa, 1992; S.L.Kolansinski et al, 1992) Исследования, посвященные изучению хемотаксических реакций полиморфноядерных лейкоцитов (ПМЯЛ) при ДЗСТ, обнаружили повышение последней, замедление фаз смены инфильтрации очага воспаления мононуклеарными клетками (И.Г.Салихов и соавт., 1991).

Исследования последних лет показали, что определение фагоцитарной активности нейтрофилов, как прослежено рядом авторов, позволяет уточнить активность основного патологического процесса (Г.П.Матвейков и соавт., 1987; K.T.Hartiala, 1987). Изучение фагоцитарных реакций на фоне проводимой терапии у больных ДЗСТ служит немаловажным способом оценки состояния иммунитета, так как фагоцитоз является интегральным 9 показателем, отражающим межклеточную кооперацию, опсонизируювдую активность плазмы и статус фагоцитов (Э.В.Гюллинг, 1989; А. Н. Маянский и соавт., 1989).

Фагоцитарные клетки — гранулоциты и агранулоциты в сумме — являются основными в количественном отношении клеточными популяциями в периферической крови человека" Эта удивительная популяция клеток «вооружена до зубов» микробицидньши и цитотоксическими механизмами, и в организме нет клеток, равных им по такому «вооружению». В связи с этим при нормальном функционировании фагоцитарной системы теоретически патологические процессы должны быть маловероятным событием. Тем не менее они существуют. Одной из причин существования таких процессов являются известные нам и неизвестные изменения фагоцитов и других «работающих» с ними в комплексе защитных систем организма. Вот почему изучение всех систем фагоцитарных клеток, их свойств и механизмов действия и создание методов, позволяющих оценить эти системы, являются одной из необходимых задач нашего времени.

Решение этих вопросов важно для оценки фагоцитарного процесса у человека при различных патологических состояниях, так как этот процесс имеет определяющее значение для сохранения гомеостаза организма. Иллюстрацией данного положения является то обстоятельство, что снижение числа нейтрофилов ниже 25% от нормы опасно для жизни («Внутренние болезни», 1993).

Имеется недостаточно данных и об активных свойствах лейкоцитов не только в здоровом организме, но и у лиц с различными патологическими состояниями, включая и с морфофункциональными изменениями соединительной ткани. Таким образом, чтобы составить полный «функциональный портрет» лейкоцитов, недостаточно знать об их способности поглощать чужеродные частицы. По поглощению, нейтрализации и перевариванию лей.

10 коцитами какого-то объекта ещё нельзя судить об эффективности активной функции лейкоцитов в целом. Для оценки полноценности лейкоцитов как в здоровом, так и в больном организме, необходимо как минимум иметь сведения об их фагоцитарной активности, их способности спонтанно мигрировать или проникать в зону повреждения, их осмотической резистентности, в связи с чем и была предпринята наша работа.

Целью настоящего исследования было изучение активных свойств лейкоцитов в условиях нормы и при морфофункциональном изменении соединительной ткани.

Исследование ставит задачи:

1. Изучить комплекс активных свойств лейкоцитов у практически здоровых лиц.

2. Определить особенности активных свойств лейкоцитов в условиях дезорганизации соединительной ткани.

3. Оценить активные свойства лейкоцитов у пациентов с ДЗСТ на стадии ремиссии и обострения процессов, обусловленных изменениями соединительной ткани.

4. Выявить сезонные изменения свойств лейкоцитов.

Научная новизна.

В настоящей работе впервые проведено изучение активных свойств лейкоцитов в условиях нормы и при морфофункциональном изменении соединительной ткани с определением фагоцитарной активности, миграционной способности, осморегуляторных реакций и осмотической резистентности при обострении и ремиссии процессов, обусловленных изменениями.

11 соединительной ткани. Выявлены сезонные колебания активных свойств лейкоцитов.

На основе апробированного в работе метода комплексного исследования геометрии, площади поверхности, резервных возможностей и осморе-гуляции белых клеток крови получены новые сведения о мембранном резерве лейкоцитов, а также их сопротивляемости растяжению в средах с низкой осмолярностью, выраженной через осмотическую резистентность и ре-гуляторные возможности, позволяющие оценить функциональное состояние белых клеток крови на стадии обострения в осенний и весенний периоды и при ремиссии.

Праетичеететя значимость.

Полученные данные имеют значение для оценки состояния неспецифических механизмов иммунной защиты организма при морфофункцио-нальном изменении соединительной ткани в зависимости от стадии патологического процесса и сезона. Выявленные нарушения функциональных свойств лейкоцитов указывают на сдвиги адаптационных механизмов, что позволяет обосновать принципы коррелирующей терапии в соответствии с характером шмеостатических реакций и учётом сезонных колебаний. Способы исследования активных свойств белых клеток крови, применённые в работе, могут быть рекомендованы не только для экспериментальных изысканий, но и в клинической практике. Материалы исследования имеют прикладное значение и могут применяться для преподавания соответствующих разделов физиологии, патофизиологии и клинических дисциплин, а также служить базой для проведения дальнейших исследований в данной области.