Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Биосинтез, очистка и практическое применение продигиозина-пигмента Serratia Marcescens

Диссертация: Биосинтез, очистка и практическое применение продигиозина-пигмента Serratia Marcescens
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

В 90-е годы прошлого века исследователи вновь заинтересовались продигиозином и продигиозинподобными пигментами в связи с обнаружением иммунносупрессивной и противоопухолевой активности этих соединений. В многочисленных работах исследуются механизмы противоопухолевого действия продигиозинов, регуляции биосинтеза на генетическом уровне, клонирован кластер генов, кодирующих пигмент. Результаты… Читать ещё >

Биосинтез, очистка и практическое применение продигиозина-пигмента Serratia Marcescens (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • Список сокращений
  • 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 1. 1. Характеристика Serratia marcescens
    • 1. 2. Бактериальный пигмент продигиозин
      • 1. 2. 1. Биосинтез продигиозина
      • 1. 2. 2. Питательные среды и условия культивирования ^ оптимальные для биосинтеза продигиозина
      • 1. 2. 3. Локализация пигмента в клетках S. marcescens
      • 1. 2. 4. Методы экстракции и идентификации продигиозина
      • 1. 2. 5. Биологическое значение продигиозина в жизни продуцента и ^ практическое использование
      • 1. 2. 6. Цитотоксичность продигиозина
    • 1. 3. Продигиозинподобные пигменты
    • 1. 4. Биологические маркеры для нефтепродуктов
    • 1. 5. Стратегия исследований генотоксичности соединений
  • ЗАКЛЮЧЕНИЕ 48 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТ
  • 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
    • 2. 1. Объекты исследования
    • 2. 2. Использованные материалы
    • 2. 3. Условия культивирования, определение продуктивности
    • 2. 4. Определение концентрации продигиозина
    • 2. 5. Получение продигиозина и его экстракционная очистка
    • 2. 6. Очистка пигментного препарата
      • 2. 6. 1. Жидкостная хроматография
      • 2. 6. 2. Тонкослойная хроматография (ТСХ)
    • 2. 7. Физико-химические методы анализа очищенного продигиозина
    • 2. 8. Оценка антагонистической активности Serratia marcescens
    • 2. 9. Оценка фунгицидной активности препаратов продигиозина
    • 2. 10. Методы оценки токсичности
      • 2. 10. 1. Оценка влияния препаратов продигиозина на рост корней растении
      • 2. 10. 2. Оценка влияния препаратов продигиозина на накопление биомассы растений
      • 2. 10. 3. Определение острой летальной токсичности на тест-объекте Paramecium caudatum
    • 2. 11. Методы оценки генотоксичности
      • 2. 11. 1. Тест на токсичность по отношению к Salmonella typhimurium
      • 2. 11. 2. Полуколичественный метод учета генных мутаций (тест Эймса)
      • 2. 11. 3. Микроядерный тест на эритроцитах периферической крови мышей in vivo
    • 2. 12. Маркирование и идентификация маркированных нефтепродуктов
    • 2. 13. Статистическая обработка результатов 3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
    • 3. 1. Подбор высокопродуктивных штаммов
      • 3. 1. 1. Сравнительная характеристика роста и пигментообразования исследуемых штаммов S. marcescens
    • 3. 2. Подбор оптимальной питательной среды
      • 3. 2. 1. Образование продигиозина при культивировании бактерий на различных средах
      • 3. 2. 2. Рост и образование продигиозина
  • Serratia marcescens на модифицированной среде Кинга А
    • 3. 2. 3. Рост и образование продигиозина Serratia marcescens на модифицированной пептон-глицериновой среде
    • 3. 3. Определение оптимального количества посевного материала
    • 3. 4. Подбор метода экстракции пигмента из клеток
    • 3. 5. Выделение и очистка пигментного препарата продигиозина, его характеристика
    • 3. 5. 1. Жидкостная хроматография
    • 3. 5. 2. Тонкослойная хроматография
    • 3. 6. Продигиозин, как фактор антагонистической активности S. marcescens
    • 3. 6. 1. Антагонистическая активность S. marcescens
    • 3. 6. 2. Характеристика роста фитопатогенных микромицетов на питательных средах с добавлением пигментных препаратов
    • 3. 7. Токсическое воздействие препаратов продигиозина на прорастание семян и накопление биомассы растений
    • 3. 8. Определение острой летальной токсичности ^ на тест-объекте Paramecium caudatum
    • 3. 9. Токсические эффекты продигиозина ^ по отношению к микроорганизмам
    • 3. 10. Индукция генных мутаций пигментными препаратами в тесте ^ Эймса
    • 3. 11. Микроядерный тест на эритроцитаху периферической крови мышей in vivo
    • 3. 12. Возможное практическое применение продигиозина 98 3.12.1 Маркирование нефтепродуктов продигиозиномg и способ идентификации маркированных нефтепродуктов
  • 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
  • ВЫВОДЫ
  • Благодарности

Актуальность проблемы. Большинство работ, в области изучения бактериальных пигментов посвящено фототрофам, в то время, как пигменты нефотосинтезирующих микроорганизмов изучены в значительно меньшей степени. Ярко-красный пигмент продигиозин, синтезируемый энтеробактериями Serratia marcescens, представляет собой линейный трипиррол (пиррол, 3-метоксипиррол, 2-метил-З-амилпиррол). Как и многие вторичные метаболиты бактерий, продигиозин приобретает практическое значение в промышленности и медицине. В промышленности продигиозин рекомендуется в качестве красителя для полимеров, поскольку он обладает рядом преимуществ по сравнению с применяемыми в настоящее время органическими и неорганическими пигментами. Разработан способ использования продигиозина для маркирования нефтепродуктов [Гарейшина с соавт., 2003]. Пигмент хорошо растворим в различных марках топлива и легко обнаруживается по характерному спектру поглощения. Продигиозин и продигиозинподобные пигменты, синтезируемые некоторыми видами микроорганизмов, рассматриваются как новое семейство противоопухолевых лекарственных препаратов [Montaner et al., 2000; Llagostera et al., 2005]. Показано, что продигиозин действует, как иммунодепрессант, селективно блокируя пролиферацию Т-клеток киллеров [Han et al., 1998; Azuma et al., 2000], избирательно индуцирует апоптоз различных типов злокачественных клеток [Montaner, Perez-Tomas, 2001; Campas et al., 2003], ингибирует образование метастаз, обладает антиинвазивными свойствами [Perez-Tomas et al., 2003].

В связи с большой практической значимостью продигиозина возникает необходимость в наработке больших количеств пигмента и снижении его стоимости. Высокая стоимость пигмента тормозит, в частности, использование его в качестве маркера нефтепродуктов. Кроме 6 того, неизученным остается вопрос о мутагенности, генетической токсичности продигиозина. Для изучения этих свойств необходимы высокоочищенные препараты продигиозина. В представленной работе предполагается разработать эффективную схему получения продигиозина и изучить некоторые биологические эффекты пигмента.

Цель и задачи исследований. Цель данной работы состояла в следующем: разработать эффективную схему получения бактериального пигмента продигиозинаопределить его токсические и генотоксические свойства и установить возможности практического применения. В соответствии с поставленной целью решались следующие задачи:

• подобрать высокопродуктивные по биосинтезу пигмента продигиозина штаммы Serratia marcescens, оптимизировать питательную среду и условия культивирования для получения продигиозина в лабораторных и полупромышленных масштабах;

• получить и охарактеризовать высокоочищенный пигментный препарат с привлечением физико-химических методов;

• установить токсичные и безопасные концентрации продигиозина для растений, простейших и микроорганизмов;

• определить мутагенные свойства препаратов продигиозина с использованием основных методов генетической токсикологии;

• определить возможность применения пигмента в качестве фунгицидного агента для защиты растений от фитопатогенных микромицетов;

• оценить возможность и перспективность использования продигиозина в качестве биологического маркера нефтепродуктов и разработать более точный метод идентификации маркера. Научная новизна. Проведена сравнительная оценка токсичности пигментных препаратов по отношению к прокариотическим и эукариотическим организмам. Получены приоритетные данные о генотоксических эффектах продигиозина. Показано отсутствие генотоксического воздействия очищенного продигиозина в тесте Эймса и микроядерном тесте in vivo. Определены антагонистические свойства продигиозина в отношении фитопатогенных микромицетов, Оценка возможности применения пигмента в качестве фунгицидного агента для защиты растений проведена с учетом определения эффективной и безопасной концентрации продигиозина.

Практическая значимость. Разработана дешевая, простая в приготовлении питательная среда для культивирования Serratia marcescens — штамма-продуцента продигиозина, способствующая высокому выходу пигмента. Разработан метод получения высокоочищенного пигментного препарата. С учетом использования продигиозина в различных отраслях биотехнологии (красителя полимеров, маркера нефтепродуктов) результаты, полученные в данной работе, позволяют определить возможную экологическую опасность при попадании пигмента и связанных с ним продуктов производства в окружающую среду. Выявленная фунгицидная активность продигиозина, как одно из проявлений токсического эффекта, может служить аргументом в пользу разработки методов применения данного препарата для защиты сельскохозяйственных растений от фитопатогенов. Упрощенный метод идентификации продигиозина и хорошая растворимость в различных марках топлива позволяют рекомендовать пигмент в качестве маркера нефтепродуктов.

Связь работы с научными программами и собственный вклад автора в исследования. Исследования автора по тематике диссертационной работы поддержаны федеральными программами «Развитие научного потенциала высшей школы» РНП.2.1.1.1005, РНП.2.1.1.3222. Грант АН РТ, № 03−3.5−33/ 2006 (Г) 2006 г. Индивидуальный грант КГУ (2008). Научные положения диссертации и выводы базируются на результатах собственных исследований автора. 8.

Масс-спектроскопические исследования проведены в лаборатории ИОФХ им. Арбузова. Микроядерный тест проведен в лаборатории ИОФХ им. Арбузова.

Положения, выносимые на защиту:

1. Разработана эффективная схема получения продигиозинас применением хроматографических методов получен и охарактеризован препарат продигиозина высокой степени очистки.

2. В тестах in vitro и in vivo впервые установлены особенности генотоксического влияния продигиозина, определена возможность возникновения мутаций в клетках Salmonella typhimurium ТА 100 и индукции хромосомных повреждений эритробластов у млекопитающих.

3. Установлены антагонистическая активность штамма Serratia marcescens АТСС 9986 и фунгицидная активность продигиозина. Определены эффективные нетоксичные концентрации пигмента при использовании продигиозина для защиты растений. ^.

4. Разработан и рекомендуется к применению новый способ идентификации нефтепродуктов, маркированных пигментом.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на: 2-й международной конференции «Наука-бизнес-образование биотехнология-биомедицина-окружающая среда» (Пущино, 2005), 10-й Пущинской школе-конференции молодых ученых «Биология наука XXI века» (Пущино, 2006), XLV международной научной студенческой конференции «Студент и научно-технический прогресс» (Новосибирск, 2007), Региональной научно-практической конференции «Синтез и перспективы использования новых биологически активных соединений» (Казань, 2007), Научной конференции молодых ученых, аспирантов и студентов научно-образовательного центра КГУ «Материалы и технологии XXI века» (Казань, 2007), I международной практическая конференция «Микробная биотехнология — новые подходы и решения» (Казань, 2007).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 11 научных работ. 9.

Структура и объем диссертации

Работа изложена на 142 страницах, содержит 8 таблиц и 44 рисунка и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, результатов исследований, обсуждения результатов, выводов и списка литературы, включающего 163 источников, из них 133 на иностранном языке и приложения.

выводы.

1. Штаммы Serratia marcescens АТСС 9986 и ВКМ В-851 являются перспективными продуцентами продигиозина. Модифицированная среда Кинга, А рекомендуется для получения продигиозина при использовании в качестве продуцентов штаммов Serratia marcescens АТСС 9986 и ВКМ В-851.

2. Применяемый в работе метод очистки пигментного препарата позволяет получить высокоочищенный продигиозин, что подтверждено методами тонкослойной хроматографии, ядерного магнитного резонанса и масс-спектрометр ии.

3. Продигиозин (0.1мкг/мл — 2мкг/мл) оказывает существенное токсическое воздействие на растения, выражающееся в ингибировании прорастания корней и накопления биомассына тестерный штамм Paramecium caudatum и фитопатогенные микромицеты родов Fusarium и Alternaria. Очистка продигиозина приводит к усилению его фунгицидного эффекта и фитотоксичности, но снижает токсический потенциал по отношению к простейшим.

4. Результаты изучения генотоксичности очищенного продигиозина в тесте Эймса и микроядерном тесте на эритроцитах мышей позволяют причислить продигиозин к веществам с незначительной мутагенной активностью.

5. Возможно использование продигиозина в качестве фунгицидного агента для защиты растений от фитопатогенных микромицетов в концентрациях от 0.05 мкг/мл до 0.1 мкг/мл, не оказывающих фитотоксическое воздействие.

6. Препарат продигиозина может быть использован для маркирования различных нефтепродуктов, где его содержание определяется по интенсивности характерных спектральных линий в области длин волн.

А=300.600нм при рН ниже 7, в отсутствие проявляющих реактивов.

Благодарности.

Автор выражает огромную благодарность своему научному руководителю к.б.н. Юсуповой Дельбэр Вафовне за предоставление интересной темы диссертационной работы и научное руководство.

Автор также благодарит:

Клочкова В.В. за проведение ЯМР-спектроскопии,.

Карамову Н.С. и Маргулис А. Б. за помощь в освоении методов генетической токсикологии.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

Обзор литературы показывает, что основные сведения о продигиозине были получены исследователями в первой половине прошлого столетия: расшифрована структурная формула пигмента, получены высокоочищенные препараты пигмента и изучены его основные свойства, установлены основные этапы биосинтеза.

В 90-е годы прошлого века исследователи вновь заинтересовались продигиозином и продигиозинподобными пигментами в связи с обнаружением иммунносупрессивной и противоопухолевой активности этих соединений. В многочисленных работах исследуются механизмы противоопухолевого действия продигиозинов, регуляции биосинтеза на генетическом уровне, клонирован кластер генов, кодирующих пигмент. Результаты изучения противоопухолевой активности продигиозинов говорят о том, что продигиозины представляют собой новый многообещающий класс противоопухолевых препаратов для фармакологической индустрии. Разрабатывается программа по созданию синтетических продигиозинов с меньшей токсичностью. Одновременно разрабатываются методы использования продигиозина в промышленности в качестве красителя и маркера.

Из всего выше сказанного следует, что на сегодняшний день продигиозин имеет практическую значимость, и актуальными становятся работы по разработке новых дешевых производственных питательных сред и новых методов, стимулирующих рост и биосинтез пигмента бактериями. Большое значение приобретает также изучение влияния продигиозина на организмы различного эволюционного уровня при попадании пигмента в окружающую среду, выяснение его токсических и генотоксических эффектов.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1 Объекты исследования.

Отбор высокоэффективных продуцентов пигмента, проводили среди штаммов Serratia marcescens из коллекции НИЛ ББФ Казанского университета (табл. 1).

Показать весь текст

Список литературы

  1. , Л.И. Промышленная микробиология Текст. / Л. И. Воробьева.- Москва: Изд-во Моск. ун-та, 1989.-С.115−118.
  2. , М.С. Полимерная красящая композиция-концентрат Текст. / М. С. Габутдинов, И. Н. Рязанцева, И. Ф. Черевин и др. -Патент Р.Ф. № 2 129 136,по заявке № 97 106 747 с приоритетом от 23.04.97.
  3. , Н.П. Новое в современной генетике Текст. / Н. П. Дубинин //- М.: 1986. -С. 12−15.
  4. , Н.С. Практикум по микробиологии Текст. / Н. С. Егоров.-Москва: Изд-во Моск. ун-та, 1976.-С.153−154.
  5. , Л.В. Влияние неорганического фосфата на рост и биосинтез щелочной внеклеточной РНКазы Bacillus intermedius Текст. / Л. В. Знаменская, М. Н. Капранова, Г. И. Клейнер, И. Б. Лещинская // Микробиология. 1982. — Т.51, № 5. — С.776−779.
  6. , О.Н. Краткосрочные тест-системы для определения генотоксичности. Методическое руководство / О. Н. Ильинская, А. Б. Маргулис. Казань: Изд-во Казан, ун-та, 2005. — 31с.
  7. , Т.Б. Микробиология Текст. // Т. Б. Казанская, Р. П. Анохина. 1974. — Т.43. — С.546−547.
  8. Красители для бензинов и ДТ. ООО «РУСКОЛОР» Электронныйресурс. 2008. — Режим доступа: http://www.euromarker.ru/kras benzin/ Дата доступа: 12.05.2008.116
  9. Красители и маркеры для дизельного топлива и бензинов.
  10. Компания «НАТЭК-КОЛОР». — 2008.- Режим доступа: http://www.natec-color.ru/prod.php?id=3 Дата доступа: 12.05.2008.
  11. , И.Б. Нуклеазы бактерий / И. Б. Лещинская, В. И. Варламов, Б. М. Куриненко Текст. // Нуклеазы бактерий, Казань: Изд-во Казанского университета, 1991, — 232с.
  12. , Ж.К., Микробиология Текст. // Ж. К. Лория, Б. Брюннер, Н. С. Егоров. 1977. — Т.46. — С.440−446.
  13. Маркеры для нефтепродуктов. ООО «РУСКОЛОР» Электронный ресурс. 2008. — Режим доступа: http://www.euromarker.ru/marker/ -Дата доступа: 12.05.2008.
  14. МЗ СССР. Руководящие методические материалы по экспериментальному и клиническому испытанию новых лекарственных средств. — М.: 1982. С.21−59.
  15. Определитель бактерий Берджи в 2-х томах / перевод с англ. под ред. Дж. Хоулта, Н. Крига, П. Снипа, Дж. Стейли, С. Уильямса // М.: Мир (перевод 9 американского издания, 1994), 1997, Т.1, — 432с.
  16. Официальный сайт компании «ЛУКОЙЛ» Электронный ресурс. -2008. Режим доступа: http://www.lukoil.ru.- Дата доступа: 12.05.08.
  17. , Л.О. Липазы грамотрицательных бактерий Текст. / Л. О. Северина, Н. А. Башкатова // Прикладная биохим.микробиол., 1981, -Т. 17, вып.2,-С.181−196.
  18. , С.М. Роль процесса биосинтеза продигиозина в регуляции окислительного обмена продуцента Текст. / С. М. Трутко, В. К. Акименко // Микробиология. 1989. — Т.58, № 3. — С. 723−729.
  19. , Е.П. Пигменты микроорганизмов Текст. / Е. П. Феофилова. М.: Наука, 1974. — 218 с.
  20. , М.Н. Эндонуклеаза Serratia marcescens. Характеристика фермента Текст. / М. Н. Филимонова J1.A. Боратова, И. Б. Воспельникова, О. В. Желтова // Биохимия, 1981, — Т.46, № 9, -С.1660−1665.
  21. Фонштейн, JLM. Методы первичного выявления генетической активности загрязнителей среды с помощью бактериальных тест-систем Текст. / JI.M. Фонштейн, С. К. Абилев, Е. В. Бобринев // Методические указания. М.- 1985.- 34с.
  22. , JI.M. Микроорганизмы как индикаторы мутагенной активности химических соединений и их метаболитов Текст. / JI.M. Фонштейн, А. А. Шапиро, С. К. Абилев // Итоги науки и техники ВИНИТИ, сер. Биология.-1975, — № 5, — 690с.
  23. Хроматография в тонких слоях Текст. / под ред. Э. Шталя, пер. с нем. канд. техн. наук М. И. Яновского. М.:Мир, 1965. — 508 с.
  24. , А.Г., Хитиназа Serratia marcescens ВКМБ-851 / А. Г. Чигалейчик, Д. Л. Пириева, С. С. Рылкин // Прикладная биохимия и микробиология. 1976. — Т.12. — С.581−586.
  25. Энтеробактерии. Руководство для врачей Текст. / под ред. акад. В. И. Покровского. М. Медицина, 1985. — 319с.
  26. , Д.В. Индукция синтеза внеклеточной эндонуклеазы Serratia marcescens агентами, подавляющими репликацию ДНК Текст. / Д. В. Юсупова, Р. Б. Соколова, О. В. Порфирьева, А.З. Пономарева//Микробиология, 1991, Т.60, вып.2, — С.279−284.
  27. , Д.В. Нуклеодеполимеразная активность бактерий в связи с некоторыми особенностями их физиологии Текст. / Д. В. Юсупова //- Казань. Изд.КГУ. 1978. — с.204.
  28. , Д.В. Питательная среда для выращивания Serratia marcescens 24 — продуцента нуклеазы Текст. / Д. В. Юсупова, Р. Б. Соколова, З. А. Виестуре // Авторское свидетельство № 992 568, опубликовано 30.01.83. Бюллетень № 4.
  29. , JI.H. Изучение динамики накопления экстрацеллюлярных белков Serratia marcescens и их нуклеазной активности в процессе роста клеток Текст. / JI.H. Яснова, Л. И. Пучкова // Микробиология. -1976. Т.45. — С.979−983.
  30. Akatsuka, Н. Lipase secretion by bacterial hybrid ATP-binding cassette exporters: molecular recognition of the Lip BCD, Prt DE Fand Has DEF exportes Text. / H. Akatsuka, R. Biner, E. Kawai, et al. // J.Bacteriol. -1997. V.179. P.4754−4760.
  31. Akatsuka, H. Overproduction of the extracellular lipase is closely related to that of metallopotease in Serratia marcescens Text. / H. Akatsuka, E. Kawai, K. Omori, S. Komatsubara et al. // J. Ferment.Bioeng. 1996. V.81. — P. l 15−120.
  32. Ames, B. N. Mutagenesis and carcinogenesis: endogenous and exogenous factors Text. / B. N. Ames // Environ. Mol. Mutagen. 1989. — V. 14. N. 16.- P. 66−77.
  33. Ames, B.N. Durston An improved bacterial test system for defection and classification of mutagens and carcinogens Text. / B.N. Ames, F.D. Lee // Procl. Nac. Akad. Sci. USA. 1973. — V.70.N.3. — P.782.
  34. Ang, S. The role of RsmA in the regulation of swarming motility in Serratia marcescens Text. / S. Ang, Yu-Tze Horng, Jwu-Ching Shu, Po-Chi Soo, Jia-Hurng Liu // J. Biomed. Sci. 2001. — V.8. N2. — P.160−169.
  35. Arab, S. Verotoxin induces apoptosis and the complete, rapid, long-term elimination of human astrocytoma xenografts in nude mice Text. / S. Arab, J. Rutka, C. Lingwood // Oncol. Res. 1999. — V. l 1. — P.33−39.
  36. Arab, S. Verotoxins inhibit the growth of and induce apoptosis in human astrocytoma cells Text. / S. Arab, M. Murakami, P. Dirks, B. Boyd, S. Hubbard, D. Lingwood, J. Rutka // J. Neurol. Oncol. 1998. — V.40. -P.137−150.
  37. Ashby J., Tennant R.W. Definitive relationships among chemical structure, carcinogenicity and mutagenesity for 301 chemicals tested by the US NTP Text. / J. Ashby, R.W. Tennant // Mut. Res. 1991. — V.257. -P.229−306.
  38. Azuma, T. Induction of apoptosis of activated murine splenic T-cells by cycloprodigiosin hydrochloride, a novel immunosuppressant Text. / T. Azuma, N. Watanabe, H. Jagisawa, M. Iwamura, J. Kobayashi // Immunopharmacology. 2000. — V.46. N.l. — P. 29−37.
  39. Ball Т.К. Disulfide bound are required for Serratia marcescens nuclease activity Text. / Т.К. Ball, J. Suh, M.Y. Benedik // Nac. Acids. Res. -1992. V.20. — P.4971−4974.
  40. Ball, Т.К. Expression of Serratia marcescens extracellular proteins required recA Text. / Т.К. Ball, C.H. Washmuth, S.C. Braunagel, M.Y. Benedik//J. Bacterid., 1990, V. l72. N.l. — P.342−349.
  41. Ball, Т.К. The extracellular nuclease gene of Serratia marcescens and its secretion from Esherichia coli Text. / Т.К. Ball, P.H. Saurugger, M.Y. Benedik// Gene, 1987. V.57. — P. l 15−120.
  42. Banat, I.M. Potential applications of microbial surfactants Text. / I.M. Banat, R.S. Makkar, S.S. Cameotra // Appl. Microbiol. Biotechnol. 2000. -V.53.-P. 495−508.
  43. Barret J.C. Mechanisms of multistep cancerogenesis and carcinogen risk assessment Text. / J.C. Barret // Environ. Heals. Perspect. 1993. -V.100. — P.9−20.
  44. Benedik, M.Y. Serratia marcescens and its extracellular nuclease Text. / M.Y. Benedik, U. Struch // FEMS Microbiol.Lett., 1998. — V.165. N.l. -P.l-13.
  45. Bradford, M.M. A rapid and sensitive method for quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principles of protein-dye binding Text. / M.M. Bradford // Anal.Biochem. V.2. — P.248−254.
  46. Brown, J.M. Apoptosis, p53 and tumor cell sensitivity to anticancer agents Text. / J.M. Brown, B.G. Wouters // Cancer Res. 1999. — V.59. -P.1391−1399.
  47. Brown, M.R.W. Low magnesium and phospholipid content of cell wall of Pseudomonas aeruginosa resistant to polymyxin Text. / M.R.W. Brown, W.M. Watkins // Nature (London) 1970. — V. 227. — P. 13 601 361.
  48. Brurberg, M.B. Chitinase В from Serratia marcescens BYJ 200 is exportet to the periplasm without processing Text. / M.B. Brurberg, J.H. Eijsink, A.Y. Heandrik et al. // Microbiol., 1995. — V.141. N.2. — P.123−131.
  49. Bunting, M.J. A description of some color variants produced by Serratia marcescens strain 274 Text. / M.J. Bunting// J.Bacteriol.-1940. -V.40. N.2 P.57−62.
  50. Cameron, R. Mollecular cellular and tissue reactions of apoptosis and their modulation by drugs Text. / R. Cameron, G. Feuer // Exp. Pharmacol. 2000. — V.142. — P.37−57.
  51. Campas, С. Prodigiosin induces apoptosisof В and T cells from B-cell chronic lymphocytic leukemia Text. / C. Campas, M. Dalmau, B. Montaner, M. Barragan, B. Bellosillo, D. Colomer, G. Pons, R. Perez-Tomas, J. Gil, //Leukemia. -2003. V.17. — P.746−750.
  52. Castro, A.J. Products from Serratia marcescens Text. / A.J. Castro, A.H. Corwin, FJ. Waxham, A.Z. Beilby // J. Organic. Chem. 1959. -V.24.N.4.-P. 455−459.
  53. Chawrai, S.R. Chemoenzymatic synthesis of prodigiosin analogues -exploring the substrate specificity of Pig С Text. / S.R. Chawrai, N.R. Williamson, G.P.C. Salmond, F.J. Leeper // Chem. Commun. Camb. -2008. V.28. N.16. — P. 1862−1864.
  54. Chang, S. High production of prodigiosin by Serratia marcescens grown on ethanol Text. / S Chang, M Sanada, О Johdo, S Ohta, Y Nagamatsu, A Yoshimoto // Biotech Lett. 2000. — V.22. — P. 1761−1765
  55. Chen, E. Frequent mutations in the p53 tumor suppressor gene in human leukemia T-cell lines Text. / E. Chen, M. Haas // Mol. Cell Biol. 1990. -V.10. -, P.5502−5509.
  56. Dfaz-Ruiz, C. Prodigiosin induces cell death and morphological changes indicative of apoptosis in gastric cancer cell line HGT-1 Text. / C. Diaz-Ruiz, B. Montaner, R. Perez-Tomas // Histol. Histopathol. 2001, — V. 16. -P.415121.
  57. Filimonova, M.N. Kinetic studies of the Serratia marcescens extracellular nuclease isoforms Text. / M.N. Filimonova, K.L. Krause, MJ. Benedik // Biochem. Mol. Biol. Int. 1994. -V.33. N.6. — P.1229−1236.
  58. Francisco, R. Mechanisms of prodigiosin cytotoxicity in human neuroblastoma cell lines Text. / R. Francisco, R. Perez-Tomas, P. Gimenez-Bonafe, V. Soto-Cerrato, P. Gim6nez-Xavier, S. Ambrosio // European J. Pharmacol. 2007. — V.572. — P. l 11−119.
  59. Friedhoff P. Kinetic analisis of the cleavage of natural and synthetic substrates by the Serratia marcescens Text. / P. Friedhoff, Y. Meiss, B. Kolmes et al. // Ew. J. Biochem. 1996. — V.241. — P.572−580.
  60. Fuqua, C. Census and consensus in bacterial ecosystems: the LuxR-LuxI family of quorum-sensing transcriptional regulators Text. / C. Fuqua, S.C. Winans, E.P. Greenberg // Annu. Rev. Microbiol. 1996. — v.50. — P.727−751.
  61. Garthoff, B. Alternative testing drug research and development the validation issue Text. / B. Garthoff// Toxicol., — 1995, — V.9, — P.789−793.
  62. Giri, A. V. A novel medium for the enhanced cell growth and production of prodigiosin from Serratia marcescens isolated from soil Text. / A. V. Giri, N. Anandkumar, G. Muthukumaran, G. Pennathur // BMC Microbiol. 2004. — V.4. N1. — P.1−11.
  63. Gold L.S. Comparison of target organs of carcinogenicity for mutagenic and non-mutagenic chemicals Text. / L.S. Gold, Т.Н. Slone, B.R. Stern, L. Bernstein // Mut. Res. 1993. — V.286. -P.75−100.
  64. Goldschmidt, M.C. Inhibition by temperature of the terminal step in biosynthesis of prodigiosine Text. / M.C. Goldschmidt, C.L. Gott, R.P. Williams // J. Bacteriol. Proc. 1965. -P.92 — 94.
  65. Gott, C.L. Amino acid requirement for temperature induced pigmentation in Serratia marcescens Text. / C.L. Gott, R.P. Williams // Texas Rept. Biol. Med. 1964. — V. 22. — P. 225−230.
  66. Green, J.A. Studies on pigmentation of Serratia marcescens. IV. Analysis of syntrophic pigment Text. / J.A. Green, R.P. Williams // J. Bacteriol. 1957. — V. 74. N.4. — P. 633−636.
  67. Grimont, P.A.D. Biotyping of Serratia marcescens and Its Use in Epidemiological Studies Text. / P.A. D. Grimomt, F. Grimont // J. Clinical Microb., 1978. — V.8. —N.l. — P.73−83.
  68. Grimont, P.A.D. The genus Serratia Text. / P.A.D. Grimont, F. Grimont //Annu. Rev. Microbiol. 1978. — V.32. -P.221−248.
  69. Haddix, P.L. Measurement of mutation to antibiotic resistance: ampicillin resistance in Serratia marcescens Text. / P.L. Haddix, E.T. Paulsen, T.F. Werner // J. College Biology Teaching. 2000. — V.26. — P. 17−21.
  70. Hajazi, A. Serratia marcescens Text. / A. Hajazi, F.R. Falkiner // J. Med. Microbiol. 1997. — V.46. — P.903−912.
  71. Han, S.B. T-cell specific immunosuppression by prodigiosin isolated from Serratia marcescens Text. /S.B. Han H.M. Kim, Y.H. Kim, C.W. Lee, E.S. Jang and K.H. Son et al. II Int J. Immunopharmacol. 1998. — V. 20.-P.1−13.
  72. Haun, M. Biological activities and cytotoxicity of l, 3-dihydro-2H-indol-2-one derivatives Text. / M. Haun, M.F. Pereira, M.E. Hofrnann, A. Joyas, V. Campos, L.D. Filardy, S.L. De Castro, N. Duran // Bact. Hemistry, -1992.-V.25.-P.21−25.
  73. Hertle, R. Serratia type pore forming toxins Text. / R. Hertle, // Curr Protein Pept Sci. 2000. — V.l. N.l. — P.75−89.
  74. Hirakata Y. Serratia species, in particular, Serratia marcescens frequently causes bloodstream infections Text. / Y. Hirakata // Nippon Rinsho. — 2002. V.60. N. l 1. -P.2156−2160.
  75. Hoive, W. Transgenic tobacco plants which express the chi A gene from
  76. Serratia marcescens have enhanced tolerance to Rhizoctonia solani Text. /124
  77. W. Hoive, L. Joe, E. Newbiogin et al. // Transgenic Res., 1994 V.3. -P.90−98.
  78. Hubert, R.G. Pigment formation in L-forms of Serratia marcescens / R.G. Hubert, C.S. Potter, G.M. Kalmanson, L.B. Guze // J. Gen. Microb. -1969. V.55. N.2. -P.165−167.
  79. Hubbard, R. The biosynthesis of Prodigiosin, the tripyrrylmethene pigment from Bacillus prodigiosus (Serratia marcescens) Text. / R. Hubbard, C. Rimington // Biochem. 1950. — V.46. N.2. — P. 220−225.
  80. International Organization for Standardization ISO 11 269−1: Soil quality-determination of the effect of pollutans on soil flora. Part 1: Methods for the measurement of inhibition of root growth, 1993.
  81. Jones, P. A. Performance of the neutral red uptake assay in the COL-IP A international validation study on alternatives to the rabbit eye irritation test Text. / P.A. Jones // Toxicol. 1999. — V.13. — P.325−333.
  82. Kataoka, T. Prodigiosin 25-C uncouples vacuolar type H±ATPase, inhibits vacuolar acidification and affects glycoprotein processing Text. /125
  83. Т. Kataoka, М. Muroi, S. Ohkuma, Т. Waritani, J. Magae, A. Takatsulci, S. Kondo, M. Yamasaki, K. Nagai // FEBS Lett. 1995. — V.359. — P.53−59.
  84. Katz, D.S. Detection of pigment precursors in white clinical strains of Serratia marcescens Text. / D. S Katz, RJ. Sobleski // J. Cein. Microbiol. -1979. V.9. N.2. — P. 301−303.
  85. King, E.O. Pseudomonas P Agar/King A Medium Text. / O.E. King, M.K. Ward, D.E. Raney // J. Lab. And Clin Med. 1954. — V.44. — P. 301 307.
  86. Lannigan, R. Increased frequency of acceptance of plasmid deoxyribonucleic acid by a nonpigmented strain of Serratia marcescens Text. / R. Lannigan, L.E. Bryan // Microbios Lett. 1980. — V.13. — P. 123 — 127.
  87. Makkar, R.S. An update on the use of unconventional substrates for biosurfactant production and their new applications Text. /R.S. Makkar, S.S. Cameotra // Appl. Microbiol. Biotechnol. 2002. — V.58. — P. 428 434.
  88. Manderville, R.A. Synthesis, proton-affinity and anti-cancer properties of the prodigiosin-group natural products Text. / R.A. Manderville // Curr. Med. Chem. 2001. — V.l. — P. 195−218.
  89. Marks, G.S. Studies of the biosynthesis of prodigiozin in Serratia marcescens Text. / G.S. Marks, L. Bogorad // Proc. Nac. Acad. Sci. U. S. I960.-V. 46. N.l.-P. 25−28.
  90. Maron, D.M., Revised methods for the Salmonella mutagenicity test Text. / D.M. Maron, B.N. Ames // Mutat. Res. 1983. — V. l 13. -P.173−215.
  91. Matsuyama, T. Extracellular vesicle formation and biosufractant production by Serratia marcescens Text. / T. Matsuyama, T. Murakami, M. Fujita et al. // J. Gen. Microbiol. 1986. — V.132. N.4 — P. 865−875.
  92. McGowan, S.J. Bacterial production of carbapenems and clavams: evolution of |3 lactam antibiotic pathways Text. / S.J. McGowan // Trends of Microbiol. — 1998. — V.6. — P.203−208.
  93. Melo, P. S. Cytotoxicity of prodigiosin and benznidazole on V79 cells Text. / P. S. Melo, N. Duran, M. Haun // Toxicol.Lett., 2000. -V.l 16. — P.237−242.
  94. Melvin, M.S. DNA binding by 4-methoxypyrrolic natural products. Preference for intercalation at AT sites by tambjamine E and prodigiosin Text. / M.S. Melvin, D.C. Ferguson, N. Lindquist, R.A. Manderville // J. Org. Chem. 1999. — V.64. — P.6861−6869.
  95. , M.D. 2.A.A0 Structure for binding to doubl-strendid DNA Text. / M.D. Miller, Y. Tanmer, M. Alpaugh et al. // Nat. Structural. Biology. 1994.-V.l.-P.461−468.
  96. Miller, M.D. Identification of the Serratia endonuclease dimer: structural basis and implication for catalysis Text. / M.D. Miller, K.L. Krause // Protein. Sci. 1996. — V.5. — P.24−33.
  97. Monreal, Y. The chitinase of Serratia marcescens Text. / Y. Monreal, E. Rese // Can J.Microbiol. 1969. — V. l 5. N.7. — P.689−696.
  98. Montaner, B. Activation of protein kinase С is required for protection of cells against apoptosis induced by the immunosuppressor prodigiosin Text. / B. Montaner, R. Perez-Tomas // Biochem Pharmcol. — 2002.-V.63. -P.l-7.
  99. Montaner, B. DNA Interaction and Dual Topoisomerase I and II1. hibition Properties of the Anti-Tumor Drug Prodigiosin Text. / B.128
  100. Montaner, W Castillo-Avila, M. Martinell, R. Ollinger, J Aymami, E. Giralt, R. Perez-Tomas // Toxicol Sci. 2005. — V.85. N.2. — P.870−879.
  101. Montaner, B. Prodigiosin from the supernatant of Serratia marcescens induces apoptosis in hematopoietic cancer cell lines Text. / B. Montaner, S. Navarro, M. Piqu<3, M. Viaseca, M. Martinell, E. Giralt // J. Pharmacol. -2000. -V.131. P.585−593.
  102. Montaner, B. Prodigiosin induced apoptosis in human colon cancer cell Text. / B. Montaner, R. Perez-Tomas // Life Sci. 2001. — V. 68. N.17.-P. 2025−2036.
  103. Montaner, B. The prodigiosins: a new family of anticancer drugs Text. / B. Montaner, R. Perez-Tomas // Curr. Cancer Drug Targets. -2003.-V. 3.N.1.-P. 57−65.
  104. Nassif, N. Bacteria quorum sensing in silica matrices Text. / N. Nassif, C.Roux., T. Coradin et al// Materials Chemistry. 2004. — V.14. -P.2264−2268.
  105. Ohnishi, Y. Extracellular production of a Serratia marcescens serine protease of in Echerichia coli Text. / Y. Ohnishi, S. Horinouchi // Biosci.Biotechnol.Biochem. 1996. — V.60. N.10. — P.1551−1558.
  106. Oiler, A.R. Media effects of sugars on pigmentation and antibioticsusceptibility in Serratia marcescens Text. / A. R Oiler // J. Gen. Appl.
  107. Microbiol.- 2006.-V. 52. N. 2. P. l 13−117.129
  108. Ordentlich, A. Rhisosphere colonization by Serratia marcescens for the control of sclerotium rolfsii Text. / A. Ordentlich, Y. Eland, J. Chet // Sir.Biol.Biochem. 1987. — V.19. — P.744−751.
  109. Perez-Tomas, R. The prodigiosins, proapoptotic drugs with anticancer properties Text. / R. Perez-Tomas, B. Montaner, E. Llagostera, V. Soto-Cerrato // Biochem. Pharm. 2003. — V.66. N.8. — P. 1447−1452.
  110. Peter, M.Y. Chitin and chitosan from animal sourses Text. / M.Y. Peter // Biopolimers: Polysaccharides II, Wenheim: Wiley, — VCH, -2002. -P.499−512.
  111. Purkayastha, M. Association of pigment with the cell envelop of Serratia marcescens Text. / M. Purkayastha, R.P.Williams//Nature. 1960. — V.187.N.4734. -P.349−350.
  112. Qadri, S.M. Induction of prodigiozin biosyntesis after shift-down in temperature of nonprouferation cells of Serratia marcescens Text. / S.M. Qadri, R.P. Williams // Appl. Microbial. 1972. — V. 23. — P. 704 709.
  113. Raimondi, A. Mutation in Serratia marcescens Amp. С |3 — lactamase producting Text. / A. Raimondi, F. Sistro, H. Nikaido // Aint. Agent. Chemother. 2001. V.45. — P.2231−2339.
  114. Rapoport, H. The synthesis of Prodigiosin Text. / H. Rapoport, K.Y. Holden // Proc. National. Acad. Sci. USA. 1962. — V.84. N.20. -P.635−642.
  115. Reisner, G.S. Prodigiosin and the metabolism of free amino compounds in Serratia marcescens as a function of iron, marganese and aging Text. / G.S.Reisner// J. Microbiol. 1969. — V.15.-P.405- 408.
  116. Rizzo V. Equilibrium and kinetics of rotamer interconversion in immunosuppressant prodigiosin derivatives in solution Text. / V. Rizzo, A. Morelli, V. Pinciroli, D. Sciangula, R. D’Alessio // J. Pharmacol. Sci. -1998. V.88. — P.73−78.
  117. Rodrigues, J.A. Cytotoxicity of trans-dehydrocrotonin from Croton cajucara on V79 cells and rat hepatocytes Text. / J.A. Rodrigues, M. Haun, // Planta.Med. 1999. — V.65. — P. 1−5.
  118. Santer U. Prodigiosin synthesis in Serratia marcescens: isolation of a pyrrolecontaining precursor Text. / U. Santer, Y. Vogel // BBA. -1956. V.19. N.3. — P.578−579.
  119. Sato, T. Prodigiosins as a new group of H+/C1— symporters that uncouple proton translocators Text. / T. Sato, H. Konno, Y. Tanaka, T. Kataoka, K. Nagai, H.H. Wasserman, S. Ohkuma // J. Biol. Chem. 1998. — V.273. — P.21 455−21 462.
  120. Shapira, R. Control of plants diseases by chitinase empulsed from cloned DNA in Echerichia coli Text. / R. Shapira, A. Ordenlich, J. Chet, A. Oppenheim // Phytopat. 1989. — V.79. — P. 1246−1249.
  121. Sole, M. The effect of pH on prodigiosin production by non-proliferating cells of Serratia marcescens Text. / M. Sole, N. Plus, A. Francia et al. // Letters in Applied Microbiology. 1994. — V.19. — P. 341 344.
  122. Sole, M. The role of pH in 'glucose effect' on prodigiosin production by non-proliferating cells of Serratia marcescens Text. / M. Sole, A. Francia, N. Rius et al.// Letter in Microbiology. 1994. -V.25.-P.81−84.
  123. Someya, N. Potential of Serratia marcescens strain B2 for biological control of rice sheath blight Text. / N. Someya, M. Nakajima, T. Hibi, K. Akutsu// Biocontrol science and technology. 2005. — V. l5. N. 1. — P.105−109.
  124. Suzuki, K. Serratia marcescens 2170 on chitin degradation Text. / K. Suzuki, N. Sugawara, M. Suzuki et al. // Biosci.Biochem., 2005. -V.66. N.2. — P.1075−1083.
  125. Tao. Strategy for the Improvement of Prodigiosin Production by a Serratia marcescens Mutant through Fed-Batch Fermentation Text. / Tao, Jin-li, Wang, Xue-dong, Shen, Ya-ling, Wei, Dong-zhi// W. J. Microbiol.
  126. Biotechnol. 2005. — V. 21. N.6−7. — P. 969−972.132
  127. Thomson, N.R. Biosynthesis of carbapenem antibiotic and prodigiosin pigment in Serratia is under quorum sensing control Text. / N.R. Thomson, M. A. Crow, S.J. McGowan, A. Cox, G.P.C. Salmond // Molecular Microbiology. 2000. — V.36. N.3. — P.539−556.
  128. Trias, J. Induction of Yellow Pigmentation in Serratia marcescens Text. / J. Trias, M. Vinas, J. Guinea, J. G. Loren // Apl.Enviroment.Microb, 1988. — V.54. N.12. — P.3138−3141.
  129. Vinas, M. Particulate-bound pigment of Serratia marcescens and its association with the cellular enveloped Text. / M. Vinas, J.G. Loren, J. Guinea // Microbios Letters. 1983. — V. 24. N.93. — P. 19−26.
  130. Wasserman, H.H. Studies related to the biosinthesis of prodigiosin in Serratia marcescens Text. / H.H. Wasserman, Y.E. Mckeon, U.V. Santer // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1960. — V.3. N.2. — P.146−149.
  131. Watanabe, T. Genetic analysis of the chitinase system of Serratia marcescens 2170 Text. / T. Watanabe, M. Suzuki, M. Taiyoji, S. Ferrer, M. Regue // J. Bacteriol. 1997. — V. 179. N.22. — P.7111 -7117.
  132. Wei, J.H. Enhanced production of prodigiosin like pigment from Serratia marcescens SM delta R by medium improvement and oil — supplementation strategies Text. / J. H Wei, W.C. Chen // J. BiosciBioeng. -2005.-V. 6.-P.616−622.
  133. Williams, R.P. Influence of temperature of incubation and type of growth medium on pigmentation in Serratia marcescens Text. / R.P. Williams, C.L. Gott, S.M. Qadri // J.Bacteriol. 1971. — V. 106. N. 2. — P. 438−443.
  134. Williams, R.P. Prodigiosin. In Antibiotics Text. / R.P. Williams, W.R. Hearn, D. Gottlieb and P.D. Shaw (ed.) // Springer Verlag., Berlin. — 1967. -V. 2.-P. 410−432.
  135. Williams, R.P. Studies on pigmentation of Serratia marcescens Text. / R.P. Williams, C.L.Gott, J.A.Green//J.Bacteriol. 1961. -V.81. N. 3.- P.376−379.
  136. Williams, R.P. Ynhibition by temperature of the terminal step in biosinthesis of prodigiosin Text. / R.P. Williams, M.C. Goldschmidt, C.L. Gott // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1965. — V.19. N.2. — P. 177 181.
  137. Williamson, N.R. The biosynthesis and regulation of bacterial prodigiosines Text. / N.R. Williamson, P.C. Fineran, F.J. Leeper, G.P.C. Salmond // Nat. Rev. Microbiol. 2006. — V.4. — P.887−899.
  138. Wrede, F. Uber das prodigiosin, der rotten farbstoff dess Bacillus prodigiosus Text. / F. Wrede, O. Hettche // J. Chem. Ber. 1929. — V. 62. -P. 438−443.
  139. Yamashita, M. Silika Gel- dependent Production of Prodigiosin and Serrawettins by Serration marcescens in a Liquid Culture Text. / M. Yamashita, Y. Nacagawa, H. and T. Matsuyama// Microbes and Environments. 2001. — V. 16. N. 4. — P.250−254.
  140. Yanagida, N.T. Specific excretion of Serratia marcescens protease trough the outer membrane of Esherichia coli Text. / N.T. Yanagida, T. Kosumi, T. Beppu // J.Bacteriol., 1986. — V.166. N.3. -P.937−944.
  141. Zhang, J. Antimetastatic effect of prodigiosin through inhibition of tumor invasion Text. / J. Zhang, Y. Shen, J. Liu, D. Wei // Biochem. Pharmacol. 2005. — V.69. N.3. — P.407−414.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!