Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Разработка биотехнологических параметров по получению протективного, инактивированного антигена Ornithobacterium rhinotracheale

Диссертация: Разработка биотехнологических параметров по получению протективного, инактивированного антигена Ornithobacterium rhinotracheale
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Поэтому возникла необходимость перейти к другому способу дезинтеграции, который позволил бы получить больший процент разрушенных клеток. Одним из таких способов явилась дезинтеграция бактерий с помощью ультразвука. Применяя для этих целей ультразвуковой дезинтегратор, нам удалось добиться большего процента разрушаемости бактериальных клеток. В экспериментах был определён оптимальный режим… Читать ещё >

Разработка биотехнологических параметров по получению протективного, инактивированного антигена Ornithobacterium rhinotracheale (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • Список условных сокращений
  • I. Обзор литературы
    • 1. 1. Биологические свойства бактерий ОтШоЪаЫегшт гЫпоЬгаскеаЫ — возбудителей орнитобактериоза птиц
      • 1. 1. 1. Морфология, тинкториальные и биохимические свойства ОтШюЬаЫегшт гЫпо1гаскеа1е
      • 1. 1. 2. Резервуар и распространение инфекции
      • 1. 1. 3. Устойчивость бактерий ОгпШюЪаМегшт гЫпоЬ’аскесйе к инактивирующим веществам
    • 1. 2. Характеристика и практическое применение теотропина для инактивации бактерий
    • 1. 3. Представления о строении поверхностных структур бактериальных клеток
      • 1. 3. 1. Строение клеточной стенки бактерий
      • 1. 3. 2. Строение цитоплазматической мембраны
    • 1. 4. Дезинтеграция бактерий
    • 1. 5. Основы взаимодействия дезинфектантов с бактериями
  • II. Собственные исследования
    • 2. 1. Материалы и методы
    • 2. 2. Результаты собственных исследований
      • 2. 2. 1. Основные культуральные и биологические свойства референс-штаммов бактерии ОгпШюЪаМепит гЫпо^аскеа1е
        • 2. 2. 1. 1. Тинкториальные свойства бактерий ОтикоЪасгепит гМпои-аскеак
        • 2. 2. 1. 2. Культуральные свойства бактерий ОтШюЬаМегшт гЫпо1гаскеа1е
        • 2. 2. 1. 3. Проведение сравнительного анализа ростовых характеристик бактерий ОгпИкоЪасЬепит гЫпоЬ’аскесйе на различных питательных средах
      • 2. 2. 2. Определение показателей КОЕ бактерий ОтіїИоЬасіегіит гШпоії'асІїеаІе для выявления оптимальной накопительной среды для наработки бактериальной массы
        • 2. 2. 2. 1. Конструирование среды накопления для наработки бактериальной массы ОтіікоЬасіегіит гкіпои'аскеаіе
        • 2. 2. 2. 2. Расчет оптимального времени культивирования бактерий ОтіїкоЬасіегіит гкіпоігаскеаіе на среде накопления
      • 2. 2. 3. Изучение бактерицидного и бактериостатического действия теотропина
        • 2. 2. 3. 1. Изучение бактерицидного и бактериостатического действия теотропина на микроорганизмы различной морфологической структуры
        • 2. 2. 3. 2. Изучение бактерицидного и бактериостатического действия теотропина на бактерии ОгпШюЬаіїегіит гШпоігаскеаІе
      • 2. 2. 4. Принципиальная технологическая схема изготовления инактивированной вакцинного препарата из бактерии ОгпіїУіоЬасІеНит гкіпоігаскеаіе и проверка его антигенной эффективности
        • 2. 2. 4. 1. Подбор адьюванта
        • 2. 2. 4. 2. Разработка методов дезинтеграции бактериальной клетки ОтШгоЬасІегіит гкіпоігаскеаіе
        • 2. 2. 4. 3. Изучение иммуногенных свойств разрушенной бактериальной клетки От’йНоЬаМеНит гкіпоїгасЬеаІе
        • 2. 2. 4. 4. Конструирование вакцинного препарата
        • 2. 2. 4. 5. Проверка создаваемого биопрепарата его на безвредность

В последней трети XX века, несмотря на определенные успехи в борьбе с инфекционными болезнями, значение инфекционной патологии, как одного из основных критериев здоровья, признано всем мировым сообществом.

Сегодня можно констатировать, что суммарная распространенность инфекционных (и паразитарных) болезней, несмотря на предпринимаемые усилия, направленные на борьбу с ними, не только не сокращается, но даже возрастает. Так, если в начале девяностых годов в России ежегодно регистрировалось в среднем 30 млн. случаев инфекционных заболеваний, то в последние годы эта величина превышает 40 млн. {Шандала, 2005).

Мировой опыт борьбы с болезнями животных показал, что в системе мероприятий обеспечения здоровья всех видов животных специфическая профилактика занимает важное место. Это связано с тем, что активная иммунизация является наиболее эффективным средством предотвращения многих болезней вирусной и бактериальной этиологии {Шандала, 2003; Костюкова, Ляпин, Малюкова, 2005; Пантелеева, 2002).

С начала девяностых годов двадцатого века во многих странах мира были зарегистрированы вспышки заболевания респираторного тракта кур и индеек, вызванных Omithobacteriwn rhinotracheale. Отмечалось увеличение смертности и снижение продуктивности у бройлеров приблизительно с двадцативосьми дневного возраста и длилось до конца периода откорма {Van Beek et al., 1994; De Rosa, 1996). Omithobacteriwn rhinotracheale выделен во многих странах мира и инкриминирован, как возможный, дополнительный, причинно-обусловленный агент в комплексе респираторных болезней {Van Veen et al., 2000; Sakai et al., 2000).

Следует отметить, что, не смотря на то, что за последние годы в России расширился ассортимент разрешенных к применению средств воздействия на микроорганизмы и вирусы: в период 2001;2005 гг. в РФ зарегистрировано более 100 инактиваторов {Шандала, 2006, 2007), арсенал экологически безопасных препаратов, разлагающихся в природных условиях до продуктов, не загрязняющих окружающую среду, ограничен {Саврилов, 2004; Пантелеева, 2005, 2006). Поэтому изучение антибактериальных и антивирусных свойств соединений различных классов, с целью разработки новых нетоксичных, высокоэффективных, экологически безопасных антимикробных препаратов, используемых в качестве бактерицидов для создания инактивированных вакцин, представляет собой весьма актуальную задачу для науки и практики {Высоцкий, 2005; Аржаков, Ермакович, Аржаков, 2004). Безопасные инактивированные вакцины — это компромисс в настоящее время в создании вакцинных препаратов.

Цель и задачи исследования

Целью исследования является разработка биотехнологических параметров создания инактивированной вакцины против орнитобактериоза.

Поставленная цель решалась следующими задачами:

1. Изучить основные биологические свойства бактерий О. гЫпои-аскеа1е.

2. Выбрать оптимальную питательную среду накопления для культивирования бактерий О. гЫпоЬ’аскеа1е.

3. Разработать схему использования теотропина в качестве инактиватора бактерий О. гЫпои’аскеа1е.

4. Изучить возможность создания вакцинного препарата против орнитобактериоза.

5. Изучить безвредность, аректогенность созданного вакцинного препарата.

Научная новизна. Опираясь на биологические свойства бактерий вида О. гМпо1гасЪеа1е, подобрана питательная среда и параметры культивирования для наработки максимально возможного количества бактериальной массы данного микроорганизма. Разработаны схемы инактивации бактерий различных морфологических форм с помощью препарата теотропина. На основании полученных данных предложена схема инактивации теотропином бактерий О. гЫпо1гаскеа1е с целью создания инактивированного вакцинного препарата. В результате экспериментов доказана сложность в конструировании вакцины против орнитобактериоза с использованием адыовантов и предложена схема создания инактивированной орнитобактериозной вакцины, основанной на новых биотехнологических методах, в частности, ультразвуковой дезинтеграции и инактиватора теотропина.

Практическая значимость. Предложена схема инактивации бактерий с помощью препарата теотропина. Разработано «Временное наставление по применению теотропина для профилактики и лечения инфекционных болезней птиц», рассмотренное на научно-техническом совете и утвержденное первым проректором — проректором по научной работе ФГБОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия имени П.А. Столыпина» (15.05.2012). Полученные данные позволяют утверждать, что указанный препарат можно использовать в качестве инактиванта для производства инактивированных вакцин.

Разработаны параметры ультразвуковой дезинтеграции бактерий ОтШгоЬаМегтт гЫпои-аскеа1е, позволяющие получать протективный антиген для изготовления вакцин.

Доказана возможность создания вакцинного препарата для профилактики орнитобактериоза на основе дезинтеграта бактериальной массы указанных бактерий и инактиванта теотропина.

Материалы диссертационной работы используются в учебном процессе при чтении лекций, для практических занятий студентов, работы аспирантов на кафедре микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ВСЭ Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии им. П. А. Столыпина.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Путем микроскопии под иммерсионной системой мазка суточной культуры, окрашенной по Грамму, установлены тинкториальные свойства бактерий ОтШюЬаМегшт гЫпо (гаскеа1е — это небольшие грамотрицательные палочки с круглыми концами, спор и капсул не образуют. Установлены ферментативные свойства, отсутствие способности образовывать индол, сероводород и утилизировать цитратне зависимо от вида донора гемолитическая активность (разрушения эритроцитов) не выявлена.

2. Опыты демонстрируют, что наиболее интенсивный рост бактерий изучаемой культуры идёт на обогащенных средах: РРЬО-агаре и кровяном агаре. Данные среды для наработки бактериальной массы достаточно дороги и экономически невыгодны. По результатам экспериментов, пришли к выводу, что в качестве азотно-витаминной основы для конструируемой среды нужно использовать дрожжевой экстракт, пептон, в качестве источника углерода — глюкозу. По результатам опытов сконструирована оптимальная питательная среда накопления для культивирования бактерий О. гЫпои’аскеа1е.

3. Результаты исследований свидетельствуют, что из использованных доз (5,0- 7,5 и 10 мг/мл) изучаемого препарата теотропина, дозы 5,0 и 7,5 мг/мл обладают бактериостатическим, но не бактерицидным действием, а доза 10 мг/мл, после 18 часовой экспозиции с бактериальной культурой концентрацией Ю10 микробных тел, является бактерицидной для всех изучаемых микроорганизмов и может быть использована в качестве инактиванта бактерий О. гЫпоиъскеаЫ для производства инактивированных вакцин.

4. Эксперименты позволили сделать однозначный вывод, что дезинтеграционные структуры бактериальных клеток орнитобактерий, инактивированные теотропином, обладают протективными свойствами, но величина их активности различна. Полученные данные убеждают, что дезинтеграт с дозой иммунизации по белку в 2,4 и 2,8 мг обладает более высокими протективными свойствами, чем дезинтеграт с меньшими дозами инъекций.

5. Экспериментальные биопрепараты из бактерий ОтНЬоЬаЫепит гЫпо1гаскеа1е не обладают дермонекротической реакцией, ареактогенены и безвредны для макроорганизма, что дает возможность сконструировать ареактогенный инактивированный вакцинный препарат.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на научно-практических конференциях: на Международной научно-практической конференции посвященной 65-летию УГСХА «Актуальные вопросы аграрной науки и образования» (Ульяновск, 2008), Международной научно-практической конференции «Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути решения» (Ульяновск, 2009). Международной научно-практической конференции «Наука в современных условиях: от идеи до внедрения: материалы международной научно-практической конференции» (Димитровград, 2009, 2010, 2011).

Работа выполнена на кафедре микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы ФГБОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия им. П.А. Столыпина».

Публикации. По теме диссертации опубликовано 10 работ из них 1 в журнале, рекомендованном ВАК РФ.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, состоящих из материалов и методов, результатов исследования и их обсуждения, заключения, выводов, практических предложений, списка использованных литературных источников. Материалы диссертации изложены на 115 страницах, включают 11 таблиц и 27 рисунков. Список использованных литературных источников 171 (в том числе 58 иностранных).

выводы.

1. Охарактеризованы основные биологические свойства бактерий О. гЫпои-аскеа1е (по данным микроскопии — это короткие палочки с округлыми концами, спор и капсул не образуютустановлено отсутствие способности образовывать индол, сероводород и утилизировать цитратгемолитическая активность не выявленапри взаимодействии с лактозой, сахарозой, глюкозой, маннозой, маннитом, оксидазой — реакция положительная, при взаимодействии с аргининдекарбоксилазой, лизиндекарбоксилазой, арабинозой, лизином, аргинином, уреазой, адонитом, сорбитом — реакция отрицательная).

2. Разработана питательная среда для наработки бактериальной массы О. гЫпои’аскеа1е с целыо получения инактивированного антигена: мясопептонный агар — 1000 млдрожжевой экстракт — 4,0 гпептон — 5,0 гглюкоза — 3,5 гК2НР04 — 2,0 гМ§ Б04 — 5,0 г.

3. Определена бактерицидная доза препарата теотропина в 10 мг/мл после восемнадцати часовой экспозиции с бактериальной культурой ОгпИкоЪаМегшт гЫпои-аскеа1е с концентрацией 1010 микробных тел.

4. Исследована возможность создания вакцинного препарата против орнитобактериоза при сочетании ультразвукового дезинтеграта бактерий и теотропина. Установлено, что дезинтеграционные структуры бактериальных клеток орнитобактерий обладают протективными свойствами, но величина их активности различна.

5. Экспериментальные биопрепараты из бактерий ОтикоЬаМегшт гЫпо1гаскеа1е не обладают дермонекротической реакцией, ареактогенены и безвредны для макроорганизма, что дает возможность сконструировать ареактогенный вакцинный препарат.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

1. Для наработки максимально возможного количества бактериальной массы О. гЫпо&аскеа1е рекомендуем использовать сконструированную нами накопительную питательную среду.

2. Разработанную схему создания протективного антигена О. гЫпо&аскеа1е рекомендуем использовать при изготовлении инактивированной вакцины против орнитобактериоза.

3. Материалы научных исследований, полученные в рамках диссертационных исследований, используются в учебном процессе студентами на факультета ветеринарной медицины ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА имени П.А. Столыпина».

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

До настоящего времени в Российской Федерации не поднимались вопросы по созданию вакцинного препарата против орнитобактериоза. Не существует даже методических подходов для уяснения наиболее оптимальной схемы его конструирования и как следствие схем его создания. Учитывая, что вакцинация живыми бактериальными клетками является прошедшей эпохой в создании вакцин, нами предпринята попытка в разработке наиболее вероятных инактивированных вакцинных препаратов для профилактики орнитобактериоза. С этой целью были поставлены выше приведённые задачи в диссертационных исследованиях.

Согластно поставленной задаче нами изучены основные биологические свойства Omithobacterium rhinotracheale. При исследовании морфологических свойств бактерий Omithobacterium rhinotracheale установлено, что это небольшие грамм — отрицательные палочки с округлыми концами. Споры и капсулы не образуют. Результаты электронной микроскопии дают характерную информацию о данном микроорганизме. Данная информация согласуется с результатами исследований, представленных зарубежными учеными (Van Beek et al, 1994; Charlton et al., 1993; Hafez et al., 1993; Hinz et al., 1994).

Ростовые хорактеристики бактерии следующие — колонии гладкие, мелкие, круглые, серые или серо-белые, выпуклые, непрозрачные, не пигментированы, 1−3 мм в диаметре, большинство культур имеет специфический запах масляной кислоты. Непигментированные колонии развиваются после 2 дней (48 ч) инкубации на обогащенном пептоне, что совпадает с результетами исследований Van Empel and Hafez, 1999.

В результате проведённых исследований из всех использованных накопительных сред для наработки бактериальной массы, сконструированная нами накопительная среда для бактерий Omithobacterium rhinotracheale по показателям КОЕ имеет следующий состав: стерильный мясо-пептоннный агар — 1000 млдрожжевой экстракт — 4,0 гпептон — 5 гглюкоза — 3,5 г;

К2НР04 — 2,0 г;

MgS04 — 5,0 г;

Для решения поставленной цели оптимальное время культивирования изучаемого микроорганизма на данной питательной среде составляет 48 часов.

Культуральные свойства изучаемых микроорганизмов по нашим данным соответствует следующим результатам: наличие цитохромоксидазыотсутствие образования индола и сероводородане утилизируют цитратфермент ДНК-аза отсутствует. При ферментации углеводов бактерии производят слабое сбраживание лактозы, глюкозы, сахарозы, мальтозы, маннит, маннозы. Эти дангные аналогичны данным полученным Vandamm et al., 1994 и Gunther et al., 2002.

В результате проведённых исследований установлено, что препарат теотропин в дозе 5 мг/мл при концентрации бактерий в Ю10 микробных тел после пяти часовой экспозиции обладает бактериостатическим действием по отношению к бактериальной культуре Е. coli, L. monocytogenes, S. aureus. Доза препарата в 7,5 мг/мл является бактериостатической при трёх часовой экспозиции. Доза в 10 мг/мл после восемнадцати часовой экспозиции с бактериальной культурой концентрацией 1010 микробных тел является бактерицидным для данного вида бактерий и возможна как инактиватор для производства инактивированных вакцин из бактериальной массы Omithobacterium rhinotracheale.

Для усиления иммунного ответа было решено абсорбировать антиген с помощью адъюванта. Поэтому с целью выбора эффективного адьюванта для изготовления инактивированной вакцины были выбраны в качестве адъювантов два отечественных адыованта — гидрат окиси алюминия и алюмокалиевые, а так же полный адыованта Фрейнда (Біґсо). Технология их изготовления была проведена по общепринятым методикам.

Получив готовые антигенные препараты, трёх видов мы занялись проверкой их антигенной активности методом получения гипериммунной сыворотки при гипериммунизации кроликов и постановки реакции диффузной преципитации в агаровом геле. Первой группе кроликов вводили антиген без адьвантов, второй — второй антигенный препарат, третьейтретий антигенный препарат, четвертой — первый антигенный препарат с адыовантом Фрейнда.

В результате данных эксперементов установлено, что максимальная величина титра антител наблюдается в ответ на введение антигена с адьювантом Фрейнда и равна к 10 дню гипериммунизации 1:80. К 20 дню титр антител вырос до 1:320 и оставался самым высоким.

Дальнейшее изучение антигенных свойств у полученных препаратов было направлено на выяснение их антигенного состава с целью выбора лучшего препарата. Для этого нами была использована реакция диффузионной преципитации (РДП) по Оухтерлони в модификации Остермана. Показателем эффективности иммунного ответа макроорганизма являлось количество образованных антигенных комплексов (линий преципитации) в реакции РДП. Установлено, что сыворотка, полученная на чистый антиген инактивированный теотропином, даёт от 2 до 3 линий преципитации. Гипериммунная сыворотка, полученная на антиген, включающий полный адъювант Фрейнда даёт две чёткие линии преципитации, но по характеру рисунка, по плотности диффузионной преципитации возможны наличие ещё дополнительных линий. Гипериммунная сыворотка, полученная на антиген с адювантом гидрата окиси алюминия (ГОА) давала максимум 2 полосы преципитации. Гипериммунная сыворотка, полученная на антиген, и алюмокалиевые квасцы формировала 1 полосу преципитации. В связи с полученными результатами нами были проведены дополнительные исследования с целыо улучшения антигенных свойств вакцинного препарата. Для этого было необходимо использовать в качестве протективного антигена не только поверхностные антигенные детерминантные структуры, но и внутриклеточные антигенные комплексы.

Необходимость в этом была обусловлена изучением возможности использования в качестве вакцинного препарата дезинтеграта разрушенной бактерии, учитывая, что в данном препарате в качестве протективного антигена будут использованы антигенные детерминанты не только поверхностных, но и внутренних клеточных структур — рибосом, клеточных мембран, цитоплазматической фракции. Ключевым пунктом в решении этого вопроса является дезинтеграция микробных тел. Согласно литературным данным, наиболее оптимальным вариантом для решения поставленной задачи явилось бы применение криогенного метода дезинтеграции, позволяющего получить клеточные компоненты при минимальной потере их биологических свойств. Одним из методов криогенной дезинтеграции является способ разрушения бактериальных клеток, предложенный Грассе. Проведённая нами проверка данного способа с целыо его применения для данных исследований показала, что двадцатичетырёх кратное замораживание и оттаивание бактериальной культуры ОгпНкоЪасЬегшт гЫпои’аскеа1е не обеспечивает высокого процента разрушения бактериальных клеток, показатель дезинтеграции был низок (до 10−15%) и не мог отвечать требованиям, необходимым для проведения исследований.

Поэтому возникла необходимость перейти к другому способу дезинтеграции, который позволил бы получить больший процент разрушенных клеток. Одним из таких способов явилась дезинтеграция бактерий с помощью ультразвука. Применяя для этих целей ультразвуковой дезинтегратор, нам удалось добиться большего процента разрушаемости бактериальных клеток. В экспериментах был определён оптимальный режим разрушения бактериальной клетки, заключающийся в следующем: бактериальную суспензию концентрацией 10,0 млрдов микробных клеток в 1 мл дистилированной воды с рН — 7,2, подвергали ультразвуковой обработке на дезинтеграторе фирмы МБЕ (Англия) с амплитудой зонда — 6 мк, временем обработки — 10 минут, объём суспензии — 18−20 мл. В качестве охлаждающей смеси стакана дезинтегратора использовали смесь спирта со льдом. Эффективность разрушения бактериальных клеток оценивали по данным световой микроскопии, а также по данным подсчёта жизнеспособных клеток в исходной и разрушенной клеточной суспензии, путём титрования и высева их на питательную среду — МПА. В проведённых экспериментах при вышеуказанных режимах дезинтеграции показатель величины разрушения бактериальной клетки доходил до 90%. Полученный дезинтеграт бактериальной клетки был изучен в иммунологических опытах на животных с целью выбора из данной группы препарата, обладающего наиболее выраженными протективными свойствами.

Иммунологические исследования были проведены на белых мышах: в опытах мы варьировали как дозы иммунизирующего препарата, так и сами препараты, полученные из бактериальной клетки. В качестве контроля результатов опытов, для уяснения протективных свойств изучаемых препаратов, были использованы различные агенты, включая физиологический раствор, инактивированные целые клетки ОгпНкоЬаМепит гЫпои-асИеа1е и живые бактериальные клетки ОтШюЪаМег’шт гЫпо1гаскеа1е.

Результаты проведённых экспериментов позволили сделать однозначный вывод, что дезинтеграционные структуры бактериальных клеток орнитобактерий обладают протективными свойствами, но величина их активности различна. Полученные данные указывают, что неинактивированный теотропином дезинтеграт, с дозой иммунизации по белку в 2,4 и 2,8 мг, обладает более высокими протективными свойствами, чем дезинтеграт, инактивированный теотропином. Это объясняется тем, что препараты из неинактивированного дезинтеграта содержат живые бактерии, что повышает его протективные свойства. Препараты из целых, инактивированных различными способами бактериальных клеток ОтИкоЪасгепит гЫпоЬ’аскеаЫ, обладают меньшими протективными свойствами. Так, из 56 белых мышей иммунизированных дезинтегратом, после контрольного заражения выжило 31, т. е. более 50%. У препарата с целыми инактивированными клетками, данное соотношение значительно хуже — 27:11. Таким образом, уже первые эксперименты позволили нам положительно ответить на вопрос о наличии более эффективных протективных свойств у дезинтеграта бактериальной клетки ОтИкоЬас (егшт гЫпои’асИеа1е.

Данный ответ допускает возможность конструирования вакцинного препарата на основе дезинтеграта, полученного из бактериальных клеток орнитобактерий при соблюдении требований стандартности препаратов у вновь нарабатываемых серий. Как уже указывалось выше, оптимальным показателем стандартизации в данных экспериментах является величина белка, определяемого по методу Лоури.

Несомненно, не следовало забывать, что все исследования по данному вопросу носят поисковый характер, и при решении задачи конструирования вакцинного препарата бактериальной клетки орнитобактерий и выяснения наличия созданного им иммунитета против данной инфекции, необходимо было продолжать исследования по определению иммуногенных, протективных свойств изучаемых препаратов.

Результаты проведённых эксперементов дали положительный ответ на вопрос о наличии протективных свойств у изучаемых препаратов. Поэтому в дальнейших исследованиях задача была расширена. В экспериментах применяли различные комбинирования клеточных структур с новыми адьювантными иммуностимулирующими веществами, так как уже использованные ранее адьванты не показали достаточного эффекта. Это было необходимым для поиска оптимальной конструкции возможного вакцинного препарата.

Однако, полученные результаты серии опытов по выявлению оптимальной конструкции создаваемой вакцины с новым комплектом адыовантных препаратов, таких как «Декстран Т — 500» и «Конкавалин — А», показал, что количество мышей, выживших после контрольного заражения не превышало показателей контрольной группы (инактивированный дезинтеграт), иммунная эффективность данной конструкции практически равна нулю.

В иммунологических опытах хорошие результаты опять продемонстрировал препарат, состоящий из дезинтеграта бактериальной клетки, инактивированного теотропином. Эти данные свидетельствовали, что указанная конструкция вакцины обладает достаточными протективными свойствами, создавая защиту у животных против контрольного заражения дозой 101Л)5о практически у половины иммунизированных животных.

Полученный положительный эффект в данной проблеме дал дорогу вакцине нового поколения экологически и биологически безопасной совмещающей в себе достоинства живых и инактивированных препаратов. Вакцины, конструированной на новых технологических принципах и методах, отражающие появившееся требование создание вакцин, исключающее возбудителя болезни, даже в потенциально активной биологической форме с сохранением максимума антигенных протективных детерминант. Можно согласиться с В. В. Макаровым (1983), что, несмотря на относительно высокую стоимость, будущее за вакцинами подобного типа. Об этом свидетельствуют их достоинства: чистота антигенного раздражителя, высокая точность дозировки, отсутствие или сведение к минимому побочных реакций, ограниченные возможности для ассоциации антигенов, технологические перспективы запаса впрок антигенного сырья, его длительная сохранность в минимальных объёмах и главное польнейшая безопасность в связи с отсутствием в препаратах инфекционного агента. В настоящее время имеющийся научно технологический потенциал паозволяет подойти к разработке биопрепаратов подобного типа.

Показать весь текст

Список литературы

  1. В.Н. Перспективы использования современных дезинфицирующих средств в очагах особо опасных инфекций / В. Н. Андрус,
  2. Антибактериальная активность дезинфектантов нового поколения / О. Н. Воробьева и др. // Материалы VIII Всероссийского съезда эпидемиологов, микробиологов и паразитологов: сб. статей. Т.4. М., 2002.1. C.9−10.
  3. Антимикробные и дезинфицирующие свойства двух хлорактивных дезинфектантов: усовершенствованного гипохлорита натрия и ДТСГК / В. Н. Герасимов и др. // Дезинфекционное дело. 1999. — № 4. -С.10−18.
  4. В.Н. Дезинфекция и ее место в системе противоэпизоотических мероприятий / В. Н. Аржаков, Н. В. Аржаков // БИО.-2003,-№ 7. -С. 9−21.
  5. В.Н. Основные требования безопасности при проведении дезинфектологических работ в ветеринарии / В. Н. Аржаков, М. М. Ермакович, П. В. Аржаков //БИО.- 2004. № 7. -С.36−37.
  6. Ассоциаты на основе хлоргексидина и синергетический эффект / Г. Г. Кардаш и др. // Материалы VIII Всероссийского съезда эпидемиологов, микробиологов и паразитологов: сб. статей. Т.4. -М., 2002. С.21−22.
  7. И. П., Васильев Н. И., Абросимов В. А. Быстрые методы статистической обработки и планирования эксперимента. Л.: ЛГУ,-1975.-С. 46−53.
  8. Бактерицидная активность препаратов на основе полигексаметиленгуанидин гидрохлорида на возбудителей инфекционных заболеваний/ А. П. Лысенко и др. // Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии: труды ВНИИВСГЭ.Т. 116. -М., 2004. С.69−73.
  9. И.А. Сибирская язва (АНТРАКС): новые страницы в изучении старой болезни / И. А. Бакулов, В. А. Гаврилов, В. В. Селиверстов. -Владимир- Вольгинский: Посад, 2001. С. 86.
  10. Д. А. Биологические свойства изолированных клеточных компонентов листерий: дис. канд. вет. наук: 16.00.03 / Васильев Дмитрий Аркадьевич.- Покров, 1983. С. 29−33.
  11. В. И. Средства и методы стерилизации применяемые в медицине/В.И.Вашков. М.: Медицина, 1972.- С. 175−201.
  12. В.И. Антимикробные средства и методы дезинфекции при инфекционных болезнях / В. И. Вашков. М. Медицина, 1977. — 295 с.
  13. Ветеринарная микробиология и иммунология / H.A. Радчук и др. / под ред. Н. А. Радчука. М.: Агропромиздат, 1991. — 383 е.: ил.
  14. Вирулицидная, туберкулоцидная и фунгицидная активность новых средств из группы поверхностно-активных веществ / Л. Г. Пантелеева и др. // Дезинфекционное дело. 1998. — № 3. — С. 16−17.
  15. А.Э. Бактерицидная активность и токсикологическая характеристика дезинфицирующего препарата КД/ А. Э. Высоцкий // Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии: сб. науч. тр. ВНИИВСГЭ.Т. 117. М., 2005. -С.183−195.
  16. А.Э. Сравнительная биоцидная активность дезинфектанта «Сандим-Д» / А. Э. Высоцкий // Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии: сб. науч. тр. ВНИИВСГЭ. Т.117. -М., 2005. -С. 176−182.
  17. A.A. Введение в химию комплекных соединений / A.A. Гинсбург. -М., 1986. С. 263.
  18. В.М. Зависимость переноса холестерина из липосом в плазматические мембраны клеток Acholeplasma laidlwii от содержания в мембранах каротиноидов / В. М. Говорун, А. Б. Капитонов // Биологические мембраны. 1992. — № 9 (10). — С.940−945.
  19. Е.А. Антимикробные и физико-химические свойства новых перекисных дезинфектантов: дис.. канд. биол. наук: 03.00.06/ Голов Евгений Александрович. М., 2005. — С. 11−44.
  20. .В. Строение бактерий / Б. В. Громов. Л.: Издательство Ленинградского университета, 1984. — С. 100.
  21. Е.И. Прошлое, настоящее и будущее четвертично-аммониевых соединений / Е. И. Гудкова, А. А. Красильников, Н. Л. Рябцева // Дезинфекционное дело. 2002. — № 4. — С. 18−22
  22. Дезинфекция последствий биотерроризма / В. В. Буянов и др. -Черноголовка, 2005. С. 76−78.
  23. Дезинфицирующая активность йодеза и его композиций против микобактерий / И. Б. Павлова и др. // Ветеринария. 2003. — № 7. — С.9−11.
  24. Джассим Аднан А. Конденсация ацетилацетона с диаминами / Джассим Аднан А., Кузнецов А. И. // Ученые записки МИТХТ, выпуск. 1, Москва, 2006. С. 69−72.
  25. Н.Д. Липотейхоевые и тейхоевые кислоты патогенных стрептококков: структура, функции, роль во взаимодействии возбудителя с макроорганизмом / Н. Д. Дмитриева, Ю. М. Тимофеев, Н. И. Брико // ЖМЭИ. -2007. -№ 6.-С.100−107.
  26. К.Ш. Изучение ультраструктуры и дыхательной активности стафилококка при воздействии перекиси водорода / К. Ш. Досанов // Доклады ВАСХНИЛ. 1979. — № 3. — С.42−45.
  27. Достижения научно-исследовательской работы в области дезинфекции / Н. И. Попов // Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии: сб. науч. тр. ВНИИВСГЭ. Т.117. М., 2005. — С. 39−47.
  28. В.В. Использование перекисных и хлорсодержащих средств для обеззараживания в очагах сибирской язвы / В. В. Елизаров,
  29. , В.Т. Микробиология / В. Т. Емцев, E.H. Мишустин. М.: Дрофа, 2005.-С. 112−114.
  30. K.M. Полигуанидины класс малотоксичных дезсредств пролонгированного действия/ K.M. Ефимов, П. А. Гембицкий, А. Г. Снежко // Дезинфекционное дело. — 2000. — № 4. — С.5−13.
  31. М.Р. Разработка пенообразующего дезинфицирующего средства для промышленного птицеводства: автореф. дис.канд. биол. наук: 03.00.07- 16.00.03 / Зарипов Марк Рафаэлович. Казань, 2004. — С. 16.
  32. В. Принципы структурной организации нуклеиновых кислот / В. Зенгер- пер с англ. -М.:Мир, 1987. С. 431−433.
  33. Д.Ю. Разработка средств специфической профилактики и лечения вирусной геморрагической болезни кроликов в Краснодарском крае: Дис. канд. биол. наук: 03.00.23/3еркалев Дмитрий Юрьевич: Краснодар, 2004.-С.34.
  34. А. Бактерии и актиномицеты. Общая характеристика бактерий и актиномицетов Электронный ресурс.- Режим доступа: http://plant.geoman.ru «Жизнь растений»
  35. Е.Б. Новые отечественные разработки дезинфектантов для неспецифической профилактики инфекционных заболеваний / Е. Б. Иванова, A.M. Иванов, C.B. Ковалев //Ветеринарная медицина. 2006. — № 1. — С.9−10.
  36. Е.Б. Применение разработанных отечественных дезинфицирующих средств на основе четвертично-аммониевых соединений в профилактике внутрибольничных инфекций: дис. .канд. мед. наук: 14.00.30 / Иванова Елена Борисовна. М., 2001. — 168 с.
  37. Л.Г. Иммунохимическое исследование серологически активных веществ, выделенных из а.ЬошИпит типов, А и В / Иванова Л. Г. Булатова Т.И., Матвеев К.И.//Ж. микробиологии, 1968. -№ 1. С. 10−18.
  38. В.Г. Липидный бислой биологических мембран / В. Г. Ивков, Г. Н. Берестовский. М., 1982. — С. 104−105.
  39. Исследование механизма действия нового класса перекисных дезинфектантов пероксогидратов / В. Н. Герасимов и др. // Дезинфекционное дело. — 1999. — № 1.- С. 14−18.
  40. , В.Н. Ветеринарная микробиология и иммунология Часть 1. Общая микробиология./ Кисленко В. Н., Колычев Н.М.- М.: КолосС, 2006. С.37−38.
  41. Н.М. Ветеринарная микробиология и иммунология / Н. М. Колычев, Р. Г. Госманов. 3-е изд., перераб и доп. — М.: КолосС, 2003. -С. 98−99.
  42. Комплексная оценка вирулицидной активности дезинфектантов на основе четвертичных аммониевых соединений в отношении вируса гепатита А/ Л. И. Замятина и др. // Эпидемиология и инфекционные болезни. № 1. — 2007. — С. 3 7−41.
  43. Г. Н. К вопросу о механизмах химической инактивации микроорганизмов / Г. Н. Костина // ЖМЭИ. 1983. — № 12. — С.25−32.
  44. H.H. Современные представления о механизмах патогенного действия менингококка / H.H. Кострюкова, В. А. Бехало // Эпидемиология и инфекционные болезни. 2003. — № 3. — С.40−43.
  45. Костюкова Т. А Дезинфектанты: широкий спектр и возможности выбора/ Т. А. Кострюкова, М. Н. Ляпин, Т. А. Малюкова // Медицинская микробиология XXI век: материалы Всероссийской научно-практической конференции. — Саратов, 2004. — С. 123−124.
  46. A.A. Инфекционный ларинготрахеит птицы / А. Кушнир // Животноводство России. 2002. — № 3. — С. 43−44.
  47. A.C. Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований / A.C. Лабинская, Л. П. Блинкова, A.C. Ещина М.- Медицина, 2004. — С. 34−37.
  48. Т.В. Биологические свойства Pseudomonas aeruginosa, выделенной от животных, из кормов и объектов внешней среды в Краснодарском крае: дис.. канд. вет. наук: 16.00.03 / Марченко Татьяна Витальевна. Краснодар, 2006. — С. 9.
  49. Методические рекомедации по отбору, испытаниям и оценке антивирусных и антибактериальных химиопрепаратов среди соединений различных химических классов. М. — 2004. — С.3−7.
  50. Методические указания по определению чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам. МУК 4.2.1890−04. М. -2004.-С.З-12.
  51. Методические указания по оценке эффективности дезинфицирующих средств, предназначенных для обеззараживания различных объектов и санитарной обработки людей N 859−70. М. 1970. — С. 2−6.
  52. Микробиологические, биофизические и биохимические исследования механизма действия дезинфектанта Метацид на бактерии / В. Н. Герасимов и др. // Дезинфекционное дело. 1998. — № 5. — С. 19−25.
  53. Н.С. Дезрезистентность микроорганизмов в проблеме внутрибольничных инфекций / Н. С. Морозова, С. В. Корженевский,
  54. A.В.Теленев // Вестник ассоциации. 2001. — № 3. — С. 4−5
  55. А.Н., Органическая химия. Кн.1 / А. Н. Несмеянов, H.A. Несмеянов. М.: Химия, 1974. — С502−503.
  56. Особенности механизма действия перекисного дезинфектанта ПВК-2 на микробные клетки и споры / В. Н. Герасимов и др. // Дезинфекционное дело. 1998. — № 1. — С. 12−19.
  57. И.Б. Атлас морфологии популяций патогенных бактерий / И. Б. Павлова, Е. М. Ленченко, Д. А. Банникова. М.: Колос, 2007. -С.44−47.
  58. Н.В. Возможные механизмы реализации токсического потенциала липополисахаридов патогенных бактерий / Н. В. Павлович,
  59. B.И.Тынянова // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология.-2005.-№ 2. -С. 9−13.
  60. Л.Г. Современные дезинфицирующие средства для профилактики внутрибольничных инфекций / Л. Г. Пантелеева // Материалы VIII Всероссийского съезда эпидемиологов, микробиологов и паразитологов: сб. статей. Т.4. М., 2002. -С.45−46.
  61. A.A. Ветеринарная дезинфекция / А. А. Поляков. М.: Колос, 1979.-С. 277.
  62. Н.И. Дезинфекция в системе ветеринарно-санитарных мероприятий / Н. И. Попов, В. В. Селиверстов, В. В. Дудницкий // Ветеринария. 1999. — № 2. — С. 18−23.
  63. H. В., Рубашкина П. А. Основы микробиологии, вирусологии и иммунологии Электронный ресурс. — Режим доступа: http://www.medbookaide.ru/
  64. Т.Я. Выбор дезинфектанта. Краткая характеристика наиболее часто используемых дезинфицирующих средств Электронный ресурс. Режим доступа: http://www.iacmac.ru/
  65. Рис Э. Введение в молекулярную биологию: От клеток к атомам: Пер. с англ. / Э. Рис, М. Стенберг. М.: Мир, 2002. — С. 88.
  66. В.Е. Применение дезинфектантов в ветеринарии /
  67. B.Е.Романов, О. Г. Малых, Т. А. Тимошенко //Международный семинар «Современные средства и методы дезинфекции, применяемые при работе с патогенами»: тезисы докладов. Киров, 2006. — С.54−57.
  68. М.Р. Изыскание средств дезинфекции при сибирской язве / М. Р. Саврилов // Проблемы мониторинга и генодиагностики инфекционных болезней животных: материалы Международной научной конференции молодых ученых. Владимир, 2004. — С. 175−177.
  69. A.B. Липополисахарид иерсиний и его биологическая активность / A.B. Сварваль, Г. Я. Ценева, O.A. Шендерович // ЖМЭИ. 2006. -№ 3.-С. 100−104.
  70. Сибирская язва / Н. Г. Ипатенко и др. М.: Колос, 1996.1. C. 176.
  71. Сибирская язва / П. Н. Бургасов и др. М., 1970. — С.53.
  72. , C.B. Место бактерий в живой природе / C.B. Сидоренко // Инфекции и антимикробная терапия. 2000. — № 2 (Т.2) — С. 1219.
  73. Синтез и исследование реакционной способности производных 1,3,5-триазаадамантана / М. И. Шахгельдиев и др. // ХиГС. -1987. № 5. — С. 654−655.
  74. Современные средства дезинфекции и дезинсекции. Характеристика, назначение, перспективы / Л. С. Федорова и др. // Медицина и здравоохранение. Обзорная информация. М., 1991. — С. 3−25.
  75. Современный подход к выбору дезинфицирующих средств в системе профилактики внутрибольничных инфекций / И. Ф. Веткина и др. // ФАР Миндекс Практик. — 2005. — № 7. — С. 13−20.
  76. Н.Ф. Методологические основы определения устойчивости микроорганизмов к дезинфицирующим средствам / Н. Ф. Соколова // Материалы VIII Всероссийского съезда эпидемиологов, микробиологов и паразитологов: сб. статей. Т.4. М., 2002. — С.55−56.
  77. Н.Ф. Современные средства и методы дезинфекции при сибирской язве / Н. Ф. Соколова // Материалы VIII Всероссийского съезда эпидемиологов, микробиологов и паразитологов: сб. статей. Т.4. М., 2002. -С.56−57.
  78. Специализированный справочно-информационный каталог Электронный ресурс. Режим доступа: www.dezsredstva.ru
  79. Сравнительный анализ средств, применяемых для дезинфекции опасных микроорганизмов / А. Д. Украинцев и др. // Химическая и биологическая безопасность. 2005. — № 6 (24). — С. 12−22.
  80. Н.И. Теотропин и его применение в ветеринарной практике / Срибный Н. И., Кузнецов А. И. Электронный ресурс. Режим доступа: http://rusagroug.ru/ - отраслевой агропромышленный портал «РусьАгроЮг»
  81. Стрептококкус пиогенес: выделение, идентификация и определение чувствительности к антибактериальным препаратам / К. В. Шпынев и др. / КМАХ. 2007. — № 2. — С. 104−120.
  82. О.И. Дезинфектанты. Новые аспекты исследований, /О.И.Стрилец, И. А. Дикий, Л. С. Стрельников // Дезинфектанты. 1999. -Вып. 11.-С. 15−19.
  83. В.И. Комплексные дезинфектанты на основе гипохлорита натрия: дис.. канд. вет. наук: 16.00.03 / Тикунов Владимир Иванович. Белгород, 2000. — С. 27−30.
  84. К.В. Координационные соединения пероксида водорода / К. В. Титова, В. Л. Никольская, В. В. Буянов.- Черноголовка, 2000.- С. 121−122.
  85. Г. А. Реакции гидроперекисного окисления / Г. А. Толстиков.-М.: Наука, 1976.-С. 134−136.
  86. Т.П. Изучение происхождения двух типов строения клеточной стенки и способности к спорообразованию у эубактерий с помощью молекулярно-биологических методов / Т. П. Турова // Микробиология. 1995. -№ 3(64). — С. 301−309.
  87. В.Ю. Статистический анализ в биологических и медицинских исследованиях. М.- Академия медицинский наук СССР. -1975.-С. 180−197.
  88. М. Радикалы кислорода, перекиси водорода и токсичность кислорода // Свободные радикалы в биологии. Т. 1 / пер. с англ. — под ред. М. Н. Эммануэля. -М.: Мир, 1979. С.272−378.
  89. А.Е. Основные начала органической химии. Т.1. -М.:Госхимиздат, 1963. С. 67−70.
  90. М.Г. Новые дезинфекционные технологии для профилактики инфекционных болезней / М. Г. Шандала // Эпидемиология и инфекционные болезни. 2006. — № 4. — С. 15−17.
  91. М.Г. Перспективы и проблемы современной дезинфектологии / М. Г. Шандала // ЖМЭИ. 2003. — № 3. — С. 119−125.
  92. М.Г. Современное состояние и возможные перспективы решения проблемы тестирования вирулицидности дезинфицирующих средств/ М. Г. Шандала // Эпидемиология и инфекционные болезни. 2005. -№ 2. — С. 42−43.
  93. Э.Н. Сибиреязвенный аллерген-антраксин (Принципы конструирования, методы получения, экспериментальное изучение, применение в эпидемической практике): Автореф. дис.. докт. мед. наук / Э. Н. Шляхов. Кишинев, 1965. 53 с.
  94. Abdul-Aziz Т.A., Weber L. Omithobacterium rhinotracheale infection in a turkey flock in Ontario. Can. Vet. J. 1999. — Vol. 40. — P. 349−350.
  95. Amonsin A., Wellenhan L., Li L-L., Vandamme P., Lindeman, C. Edman, M. Robinson, R.& Kapur, V. Molecular epidemiology of Omithobacterium rhinotracheale! Journal of Clinical Microbiology. 1997. -Vol. 35. — P. 2894−2898.
  96. Back A., Rajashekara G., Jeremiah R., Halvorson D and Nagaraja K. Tissue distribution of Omithobacterium rhinotracheale in experimentally infected turkeys// The Veterinary Record. 1998. — P. 143.
  97. Bretscher M. Membrane structure: same general principles / M. Bretscher//Science. 1973.-Vol. 181 — P. 622−699.
  98. Canal C.W., Rocha, S.L.S., Leao, J.A., Fallavena, L.C.B., Oliveira, S.D. and N. Beltrao. Polymerase chain reaction (PCR) detection of Omithobacterium rhinotracheale (ORT). Avian Path. 1999. — P. 369−377.
  99. Chansiripornchai N. Molekular Interaction of Omithobacterium rhinotracheale with Eukaryotic Cells. Proefschrift, Utrecht. 2004. -P.23.
  100. Charlton B.R., Channing-Santiago S.E., Bickford A.A., et al. Preliminary characterization of a pleomorphic gram-negative rod associated with avian respiratory disease// J. Vet. Diagn. Invest. 1993. — P. 47−51.
  101. Charlton B.R. Omithobacterium rhinotracheale (ORT) infection. In: Avian Disease Manual, 4th ed. American Association of Avian Pathologists, Kennett Square, PA. 1996.- P. 128−129.
  102. Chin R.P., Droual R. Omithobacterium rhinotracheale infection// In: Diseases of Poultry. 1997. — P. 1012−1013.
  103. De Rosa M., Droual, R., Chin, R., Shivaprasad, H. And Walker, R. Omithobacterium rhinotracheale infection in turkey breeders. Avian Diseases, 40.- 1996.-P. 865−874.
  104. Deveiese L.A., J. Nommez, P. Vandamme, K. Kersters, F. Haesebrouck In vitro antibiotic sensitivity of Omithobacterium rhinotracheale strains from poultry and wild birds. Vet. Ree. 1995. — Vol. 137. -P. 435−436.
  105. Dudouyt J. Leorat, J. Van Empel, P., Gardin, Y. and Celine, D. Isolement dvun nouvel pathogene chez la dinde: Omithobacterium rhinotracheale: Conduite a tenir, In Proceedings of the Journees de la Recherche Avicole, Angers.- 1995.-P. 240−243.
  106. EI-Gohary A. A. Omithobacterium rhinotracheale (ORT) associated with hatching problems in chicken and turkey eggs. Vet. Med. J. Giza., 46. 1998. -P. 183−191.
  107. El-Shamy A. Sanaa, Sohair Z. Hussein and A.H. Bayoumi Morphological and aetiological studies on pneumonia in turkey: Omithobacterium rhinotracheale infection. Assiut Vet. Med. J. 2000. — Vol. 43. — P. 338−346.
  108. Frankel E.N. Analysis of autoxydised fast by gas chromotografymass spectrometry. IV. Soybean oil methyl esters / E.N.Frankel, W.E. Neff // Lipids. -1979.-Vol.14.-P.39−46.
  109. Hafez H. Current status on the role of Omithobacterium rhinotracheale (ORT) in respiratory disease complexes in poultry// Arch. Geflugelk. 1996. — P. 60.
  110. Hafez H. Respiratory diseases in turkey: Serological Surveillance for Antibodies Against Ornithobacterium rhinotracheale (ORT) and Turkey Rhinotracheatis (TRT) //Proceeding of the XX Worlds Poultry Congress. 1996. -P. 243.
  111. Hafez H., Beyer W. Preliminary investigation on Ornithobacterium rhinotracheale «ORT» isolates using PCR-fingerprintings.// In: Proc. ll th Internation Congress of the World Veterinary Poultry Association, Budapest, Hungary. 1997. -P. 51.
  112. Hafez, H, and Friedrich. S. Isolierung von Ornithobacterium rhinotracheale «ORT» aus Mastputen in Osterreich. Tieraerztl. Umsch. 1998. -Vol. 53.-P. 500−504.
  113. Hafez H., Hess M. Modern Techniques in diagnosis of poultry diseases: review//Arch. Geflue gelkd. 1999. — Vol. 63. — P. 237−245.
  114. Hafez H. Sting, R. Serologic surveillance on Ornithobacterium rhinotracheale in poultry flocks using self-made ELISA. Proceedings of the 45th Western Poultry Disease Conference, Cancun. 1996. — P. 163−164.
  115. Hafez H., Sting, R. Investigation n different Ornithobacterium rhinotracheale «ORT» isolates // Avian Dis. 1999. — Vol.43. — P. 1−7.
  116. Hafez H., Sting, R. Serological surveillance on Ornithobacterium rhinotracheale «ORT» in broiler breeder flocks// In Proceedings of the XI th Internation congress of the World Veterinary Poultry Association, Budapest, 1997, p.331.
  117. Hinz K.-H., Blome, C., Ryll M. Acute exudative pneumonia and airsacculitis associated with Ornithobacterium rhinotracheale in turkey// Vet. Ree. 1994.-Vol. 135.-P. 233−234.
  118. Hinz, K.-H., and Hafez, H. Early history of Ornithobacterium rhinotracheale (ORT). Arch. Geflugelkd. 1997. — Vol. 61. — P. 95−96.
  119. Hung A., Alvarado, A. Characterization and serotyping. of Ornithobacterium rhinotracheale isolates associated with respiratory disease indomestic poultry in Peru// Abstract: 12 th World Poultry Congress, Montreal, Canada. 2000. — P.200.
  120. Hamblin M. Photodynamic therapy: a new antimicrobial approach to infectious disease? / M.R. Hamblin, T. Hasan // Photochem Photobiol. Sci. 2004. -Vol.3, № 5.-P. 436−450.
  121. Joubert, P., Higgins, R., Laperle, A., Mikaclian, I., Venne, D. And Silin, A. Isolation of Ornithobacterium rhinotracheale from turkeys in Quebec, Canada. Avian Diseases. 1999. — Vol. 43. — P. 622−626.
  122. King W.L. Lysis of bacterial spores with hydrogen peroxide / W.L.King, G.W.Gould // J. Appl. Bacteriol. 1969. — Vol. 32, № 4. -P.481−490.
  123. Leroy-Setrin, S., Flaujac, G., Thenaisy, K. and Chaslus-Dancla, E. Genetic diversity of Ornithobacterium rhinotracheale strains isolated from poultry in France. Letters in Applied Microbiology. 1998. — Vol.26. — P. 189−193.
  124. Moorer, W.R. Antiviral activity of alcohol for surface disinfection. / W.R. Moorer // Int J DentHyg. 2003. — Vol. 1, № 3. -P.42−138.
  125. Nikaido, H. Molecular basis of bacterial outer membrane permeability /H.Nikado, M. Vaara M. // Microbiol. Rev. 1985.-Vol. 49. — P. 1−32.
  126. Roepke D., Back, A., Shaw D., Nagaraja K., Sprenger S. and Halvorson D. Isolation and identification of Ornithobacterium rhinotracheale from commercial turkey flocks in the upper Midwest. Avian Dis. 1998. — Vol. 42. P. 219−221.
  127. Rothman J. Membrane asymmetry / J. Rothman, J. Lenard // Science. 1977.-Vol.195.-P.743−753.
  128. Ryll M., Hinz K, U. Neumann U., Lohren U., Sudbeck M. Steinhagen D. Pilotstudie zur Pravalenz der Omithobacteriiim rhinotracheale Infektion ei Masthuhnern in Nordwestdeutshcland. Berl. Munch. Tierarztl. Wschr. — 1997. -Vol.110. — P. 267−271.
  129. Sakai E., Tokuyama Y., Nonaka F., Ohisi S., Ishikawa Y., Tanaka M., Taneno A. Omithobacteriiim rhinotracheale infection in Japan- preliminary investigations. Vet. Ree. 2000. — Vol.146. — P. 502−503.
  130. Schleifer J. ORT in turkeys, Broilers has more questions than answers. Poultry Digest, July. 1997. -Vol.14. -P. 17.
  131. Siddique I., Srivastava K. Cell wall and cytoplasmic components of Listeria Inonocytogenes. Am. J.Vet. Res. 1973. — Vol.34. — P. 567−570.
  132. Soriano V.E., Vera N.A., Salado C.R. In Vitro Suscebility of Omithobacteriiim rhinotraheale to Several Antimicrobial Drugs. Avian Diseases. -2003.-Vol.47.-P. 476−480.
  133. Travers A.F. Concomitant Ornithobacterium rhinotracheale and Newcastle disease infection in broilers in South Africa// Avian dis. 1996. — Vol. 40. P. 488−490.
  134. Ulimann W., et al, Studies on the Monoclinic and Hexagonal Modifications of Isotactic Polypropylene, Progr. Colloid & Polymer Sei. 1979 -Vol.66.-P. 25−33.
  135. Vaara, M. Polycations as outer membrane-disorganizing agents/ M. Vaara, T. Vaara // Antimicrobial. Agents Chemother. 1983. — Vol.24. — P. 114 122.
  136. Van Beek P. Ornithobacterium rhinotracheale (ORT), clinical aspect in broilers and turkeys. Annual Meeting of the Veterinary Study Group of the EU, Amsterdam, November. 1994. — P.90.
  137. Van der Meer, J.P. Genetics of Gracilaria sp. (Rhodophyceae, Gigartinales). II. The life history and genetic implications of cytokinetic failure during tetraspore formation. Phycologia 16. 1977. — P.367−371.
  138. Van der Meer J.P. Genetics of Gracilaria tikvahiae (Rhodophyceae). VII. Further observations on mitotic recombination and the construction of polyploids. Can. J. Bot. 59. 1981. — P.787−792.
  139. Van Empel P. Ornithobacterium rhinotracheale: Isolation, identification and experimental infection results. Paper given at Poultry Veterinarian Study group of the EU held in Amsterdam 11th November. 1994. -P.76.
  140. Van Empe. l P. Ornithobacterium rhinotracheale: a review// Avian pathology. 1999. — Vol.28. — P. 217−227.
  141. Van Empel, P., Van den Bosch H., Loeffen P. and Storm P. Identification and serotyping of Ornithobacterium rhinotracheale //Journal of Clinical Microbiology. 1997. — P 35.
  142. Van Empel P., Van den Bosch, H. Vaccination of chickens against Ornithobacterium rhinotracheale infection// Avian Diseases. 1998. — P. 42.
  143. Van Empel P. and Hafez H. Ornithobacterium rhinotracheale: a review// Avian Pathology. 1999. — P. 28.
  144. Walker J. E. coli F 410 ATP-ase interact with a membrane protein component of proton channel / J.E. Walker, M. Saratse, N.J. Gay // Nature. 1982. -Vol. 289.-P. 867−869.
  145. Wyffels R. and Hommez, J. Pasteurella anatipestifer isolates from respiratory lesions in parteidges kept in captivity (Perdix perdix). Vlaams Dier. Tijdschrift. 1990. — Vol. 59. — P. 105−106.
  146. Yoon J.U., Lee, D.W., Kwon, H.J., Ahn, Y.K. and Kim, S.J. Pathogenicity of Korean isolates of Ornithobacterium rhinotracheale in Broiler chickens. In: Proc. Am. Assoc. Avian Path. Annual Meeting, Salt lake City, Utah. -2000. P. 29.1. O. Vl >01
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!