Разработка клеточной технологии получения антигенов цестод: На примере Coenurus cerebralis и Echinococcus multilocularis

ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Разработка клеточной технологии получения антигенов цестод: На примере Coenurus cerebralis и Echinococcus multilocularis (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

ВВЕДЕНИЕ. б
I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
- 1. 1. Антигены цестод. Иммунодиагностика, иммунопрофилактика цестодозов
- 1. 2. Биотехнологические методы получения антигенов цестод. а) генно-инженерная технология- б) клеточная технология
II. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
- 2. 1. Материалы и методы
  - 2. 1. 1. Культивирование клеток протосколексов
  С. cerebralis и вторичных ларводист Е. multilocularis в искусственных питательных средах а) приобретение гельминтного материала, подготовка лабораторной посуды, различных материалов, инструментов, растворов для проведения культуральной работы- б) техника получения первичной клеточной культуры, культивирование клеток в искусственных питательных средах и отбор клеточных метаболитов
  2.1.2. Экспериментальное заражение собак про-тосколексами С. cerebralis, приготовление онко-сферального секреторного антигена (ОСА) —
  2.1.3. Контроль клеточных метаболитов на стерильность и безвредность, определение содержания белка в клеточных метаболитах
  2.1.4. Определение специфических антигенов в клеточных метаболитах протосколексов
  С. cerebralis: а) иммуноферментной реакцией (ИФР) — б) реакцией иммунодиффузии в геле (РИД) — в) исследование сывороток экспериментально зараженных С. cerebralis овец ИФР в динамике инвазии
  2.1.5. Иммунизация овец клеточными метаболитами («клеточным» антигеном) С. cerebralis и ОСА, получение сывороток в динамике иммунизации
  2.1.6. Определение активности «клеточного» антигена протосколексов С. cerebralis и ОСА с иммунными сыворотками от овец: а) ИФР- б) РИД
  2.1.7. Определение диагностически активных компонентов в «клеточном» антигене протосколексов С. cerebralis
  2.1.8. Получение клеточных метаболитов вторичных ларвоцист Е. multilocularis и определение специфических антигенов в клеточных метаболитах вторичных ларвоцист Е. multilocularis: а) ИФР б) РИД
  2.1.9. Определение диагностически активных компонентов в «клеточном» антигене Е. multilocularis
  2.1.10. Изучение иммунопрофилактических свойств «клеточного» антигена Е. multilocularis при экспериментальном альвеолярном эхинококкозе
  2.1.11. Статистическая обработка полученных результатов
  III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
  3.1. Анализ данных по культивированию клеток протосколексов С. cerebralis и вторичных ларвоцист Е. multilocularis
  3.2. Результаты экспериментального заражения собак и получение онкосферального секреторного антигена (ОСА)
  3.3. Характеристика и контроль клеточных метаболитов С. cerebralis и Е. multilocularis
  3.4. Иммунохимическая и иммуноферментная характеристика антигенов клеточных метаболитов С. cerebralis
  3.5. Анализ сывороток овец, иммунизированных «клеточным» антигеном С. cerebralis и ОСА РИД
  3.6. Иммуноферментный анализ сывороток овец, иммунизированных «клеточным» антигеном
  С. cerebralis и ОСА.
  3.7. Диагностическая эффективность «клеточного» антигена С. cerebralis .-.
  3.8. Характеристика антигенов клеточных метаболитов Е. multilocularis ИФР и РИД
  3.9. Диагностическая эффективность «клеточного» антигена Е. multilocularis
  3.10. Оценка иммунопрофилактических свойств «клеточного» антигена Е. multilocularis
  IV. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
  Выводы.

Актуальность темы

Современная иммунология при гель-минтозах располагает достаточно большим научным материалом о формировании иммунитета у зараженных гельминтами животных и перспективности использования средств специфической иммунопрофилактики, имеющей важное значение при разработке комплексной программы борьбы с этими заболеваниями (Lightowlers M. W., 1990, 1993 и др.).

Экспериментально доказано, что характер развивающихся иммунологических реакций, как и напряженность иммунитета при тканевых гельминтозах, к числу которых относятся и ларвальные цестодозы, выражены сильнее (Clegg J. А., Smith M. А., 1978; Rickard M. D., Williams J. F., 1982; Косминков H. E., 1986; Бережко В. К., 1994 и др.). Под действием антигенов гельминтов активизируются эффекторные механизмы иммунной системы (Т-клетки, макрофаги, нейтро-филы, тучные клетки, эозинофилы, B-клетки, системы комплемента), способствующие разрушению патогенных объектов и удалению их из организма хозяина. Аналогичный механизм заложен и в действии противоцестодозных вакцин, основу которых составляют антигены паразитов, полученные различными способами (Wickerhauser, 1976; Smith, 1978; Ayuya, 1979; Lloyd 1979; Osborn, 1982; Косминков, 1986 и др.). Достигнутые успехи в иммунопрофилактике ценуроза (Косминков, Скрынникова, 1993), тенуикольного цистицеркоза (Шу-мова, 1987; Косминков, 1990), эхинококкоза (Richard et al., 1995) и других ларвальных цестодозов свидетельствуют о необходимости продолжения исследований в этом направлении и, особенно в плане разработки эффективных, недорогостоящих и длительно функционирующих источников получения антигенов цестод. Решение последней проблемы приобретает особое значение, поскольку получение достаточных количеств антигенного материала сопряжено с большими трудностями, а иногда просто невозможно из-за отсутствия необходимых условий для содержания зараженных животных источников паразитов.

В последние годы наметился определенный прогресс в отношении получения иммунодиагностических, иммунопрофилак-тических и лечебных средств в области паразитологии с использованием биотехнологических методов.

Так, на основе генной инженерии стало возможным целенаправленное получение биологически активных веществ путем введения в геном реципиентной клетки участка ДНК, являющегося функциональной единицей, кодирующего синтез необходимого белка.

Одним из перспективных направлений биотехнологии является клеточная инженерия, которая позволяет использовать культивируемые клетки для решения многих научных и прикладных задач биологии, медицины и сельского хозяйства. Клеточные культуры являются важным объектом в изучении механизмов канцерогенеза, дифференцировки клеток и в производстве противовирусных вакцин. Культуры клеток активно используются как продуценты биологически активных веществ, обладающих различными свойствами. Успехи культивирования иммунокомпетентных клеток создали возможность применения культур клеток в паразитологии. Представляется перспективным получение антигенов-метаболитов, продуцируемых пролиферирующими клетками гельминтов в искусственных питательных средах.

Необходимость применения биотехнологических подходов в получении антигенных препаратов особенно остро ощущается при ларвальных цестодозах. Последнее связано с трудностью, а иногда и невозможностью приобретения достаточного количества гельминтного материала для проведения иммунологических исследований при этих гельминтозах. В то же время использование клеточной технологии позволяет не только значительно сократить расход источника антигена, но и по возможности значительно увеличить срок функциональной активности культуры клеток, продуцирующих антигены паразита.

Исходя из вышеизложенного и, в связи с существующим дефицитом специфических иммунопрофилактических средств при ларвальных цестодозах, считаем целесообразной и актуальной работу по разработке клеточной технологии получения перевиваемой культуры клеток источника антигенов для проведения иммунодиагностических и иммунопрофилактических исследований.

Цели и задачи исследования. Целью наших исследований было разработка клеточной технологии получения антигенов цес-тод, оценка их антигенной активности, иммунодиагностиче-ской и иммунопрофилактической эффективности.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи: разработать технологию получения первичной суспензии жизнеспособных клеток цестод (Coenurus cerebralis, Echinococcus multilocularis) — подобрать оптимальные условия культивирования клеток в искусственных питательных средах для получения перевиваемой культуры клеток, продуцирующих метаболиты — «клеточные» антигеныпровести иммунизацию овец «клеточными» антигенами протосколексов С. cerebralis, получить сыворотки в динамике иммунизацииисследовать иммунохимические и антигенные свойства «клеточных» антигеновоценить иммунодиагностические и иммунопрофилактиче-ские свойства «клеточных» антигенов.

Научная новизна. Впервые на примере С. cerebralis и Е. multilocularis разработана клеточная технология получения перевиваемой культуры клеток-продуцентов антигено-активных метаболитов, представляющих научно-практический интерес в иммунодиагностике и иммунопрофилактике цестодо-зов. Методами иммунохимического и иммуноферментного анализа в «клеточных» антигенах исследуемых видов цестод выявлены компоненты, идентичные антигенам паразитов.

Впервые проведена сравнительная оценка активности «клеточного» антигена протосколексов ценурусов и онкосфе-рального секреторного антигена М. multiceps в иммунофер-ментной реакции с сыворотками овец, иммунизированных этими препаратами.

Впервые проведена оценка диагностической эффективности «клеточных» антигенов С. cerebralis и Е. multilocularis в ИФР. На основе «клеточных» антигенов вторичных ларвоцист альвеолярного эхинококка изготовлены иммунопре-параты, показавшие в условиях эксперимента на мышах высокий профилактический эффект.

Практическая ценность работы. На основе материалов проведенной работы разработана «Методика получения перевиваемой клеточной культуры цестод», утвержденная на заседании секции «Инвазионные болезни животных» Отделения ветеринарной медицины РАСХН.

Получено свидетельство о рационализаторском предложении на «Способ получения антигенов цестод на основе клеточной технологии».

Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены:

1. На заседании секции «Инвазионные болезни животных (Москва, февраль, 1999 г.).

2. На заседаниях Ученого совета ВИГИС (Москва, 19 961 998 гг.).

3. На конференции ВОГ (Москва, 1997 г.).

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Технология получения перевиваемой культуры клеток цестод С. cerebralis и Е. multilocularis, продуцирующих метаболиты — «клеточные» антигены.

2. Иммунохимические свойства и антигенная активность клеточных метаболитов С. cerebralis и Е. multilocularis.

3. Выявление диагностически активных компонентов С. cerebralis и E. multilocularis в «клеточных» антигенах.

4. Иммунопрофилактические свойства «клеточных» антигенов Е. multilocularis.

Публикации. По теме диссертации опубликованы 4 статьи.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 125 страницах машинописного текста. Состоит из введения, обзора литературы, раздела собственных исследований, включающего: материалы и методы, результаты исследований, обсуждение результатов, выводы, список использованной литературы, приложения.

выводы.

1. Разработана технология получения перевиваемой культуры клеток протосколексов Coenurus cerebralis и вторичных ларвоцист Echinococcus multilocularis, синтезирующих в процессе культивирования в искусственных питательных средах биологически активные вещества, обладающие свойствами антигенов.

2. Иммуноферментным тестом и реакцией иммунодиффузии в агаровом геле с использованием сывороток ценурозных овец в продуктах метаболизма культивируемых клеток протосколексов С. cerebralis выявлены специфические «клеточные» антигены паразитатеми же тестами с сывороткой человека с подтвержденным диагнозом альвеолярного эхинококкоза в клеточных метаболитах вторичных ларвоцист Е. multilocularis зарегистрированы антигены альвеолярного эхинококка.

3. Установлено, что продукты метаболизма клеток протосколексов С. cerebralis являются активными антигенами, вызывающими синтез антител у иммунизированных овец, сохраняющихся в их кровотоке длительное время на высоком уровне. Антитела-преципитины в сыворотке иммунизированных овец выявляли с 15-го по 107-й день, максимальное число комплексов антиген-антитело регистрировали с 16-го по 85-й день после второй иммунизации. Сывороточные антитела иммуноферментной реакцией у этих овец определяли с 10-го дня иммунизации. Их уровень после 2-й иммунизирующей дозы, судя по показателям оптической плотности, значительно увеличивался и сохранялся таковым более года (срок наблюдений) .

4. При сравнительной оценке антигенной активности метаболитов клеток протосколексов С. cerebralis с онкосфе-ральным секреторным антигеном (Скрынникова Т. И., 1993) статистически достоверных различий не установлено. По результатам реакции иммунодиффузии в агаровом геле и имму-ноферментного анализа оба препарата являются активными иммуногенами.

5. Иммунохимическим анализом с использованием сывороток овец экспериментально зараженных С. cerebralis в «клеточном» антигене протосколексов ценурусов выявлено не менее 2 антигенных компонентов идентичных функциональным антигенам С. cerebralis.

6. «Клеточный» антиген протосколексов С. cerebralis содержал диагностически активные компоненты, эффективность которых в иммуноферментной реакции при экспериментальном ценурозе овец составила по чувствительности 83,5%, по специфичности — 7 8,5%.

7. В «клеточном» антигене вторичных ларвоцист Е. multilocularis иммунохимическим методом с сывороткой человека с подтвержденным диагнозом альвеолярного эхинококкоза определено 2−3 антигенных компонента, идентичных функциональным антигенам этого паразита.

8. Установлено, что «клеточный» антиген вторичных ларвоцист Е. multilocularis обладает иммунопрофилактическим действием. Иммунизация мышей этим препаратом в сочетании с полным адъювантом Фрейнда, адъювантом ВНИИЗЖ и иммуно-модулятором риботаном предохраняла их от последующего заражения Е. multilocularis.

Показать весь текст

Список литературы

Баллад Н. Е. Изучение антигенных компонентов цистицерков Cysticercus bovis //Тр. Всес. ин-та гель-минтол.- 1971.- Т. 17.- С. 269−270.
Баллад Н. Е. Иммунохимическая характеристика антигенов, выделенных из личиночных стадий Тае-niarhynhus saginatus //Мед. паразитол. и пара-зитарн. болезни.- 1973.- № 2.- С. 131−136.
Бережко В. К. Анализ антигенной структуры экстрактовиз половозрелых Dictyocaulus filaria и Dictio-caulus viviparus //Тр. Всес. ин-та гельминтол.-1970.- Т. 16.- С. 17−24.
Бережко В. К. Иммуноэлектроферетический анализ антигенной структуры половозрелых Dictyocaulus filaria и Dictiocaulus viviparus //Тр. Всес. инта гельминтол.- 1972.- Т. 19.- С. 14−23.
Бережко В. К. Изучение антигенности свободноживущейнематоды Rhabditis axei //Бюл. Всес. ин-та гельминтол.- 1973. Вып. 10.- С. 16−18.
Бережко В. К., Нисенбаум И. А. Вакцинация при гельминтозах гетерологичными антигенами.
Антропозоогельминтозы и перспективы их ликвидации. Тезисы докл. научн. конф.-Самарканд-Тайляк, 1975.-С.7−8.
Бережко В. КРоманенко Л. Н. Антигенное родство цестод рода Taenia //Паразитология.— 1989.— Т. 23.- № 2.- С. 153−158.
Бережко В. К. Сравнительная иммунохимическая характеристика и серологическая активность антигенов Cysticercus tenuicollis и Taenia hydatigena //Паразитология.- 1989.- Т.23.- № 5.- С. 399 406.
Бережко В. К. Дисс. докт. биол. наук.- М.- 1994.
Бережко В. К., Бессонов А. С. //Тр. Всес. ин-тагельминтол.- 1996.- Т. 32.- С. 18−22.
Бережко В. К., Клименко В. В. //Тез. докл. научн.конф. «Современное состояние и перспективы оздоровления хозяйств от эхинококкоза и цистицер-коза.- М.-1990, С.30−31
Берлинских М. С., Султанова 3. Д., Куликова К. С. Овидоспецифических антигенах клеток перевиваемых культур //Вопр. вирусологии.- 1969.- N 1.-С.23−27.
Бессонов А. С. Тениоз Taenia solium цистицеркоз
М. „Колос“.- 1996.- 336 с.
Бессонов А. С. Комплексное применение иммунореакцийдля диагностики трихинеллеза свиней
Ветеринария.- 1967.- № 2.- С. 62−65.
Головина А. А., Константинов В. И. Опыт культивирования личинок альвеолярного эхинококка человека вне организма //Трю Новосибирск, гос. вет. инта, 1961.- Т. 36.- С. 53−57.
Голубев Д. Б. г Соминина А. А., Медведева М. Н. Руководство по применению клеточных культур в вирусологии.- JT.: Медицина, 1972.- 222 С.
Гусев А. И., Цветков В. С. К технике постановки реакции микропреципитации в агаре //Лабор. дело.-1961.- N 2.- С. 43.
Даугалиева Э. X., Курочкина К. Г. Конъюгированная поливалентная вакцина Н-поливак при гельминтозах животных //Тез. докл. научн. конф. Актуальные проблемы биотехнологии в растениеводстве, животноводстве, ветеринарии.- М.- 1996, — С. 20.
Дьяконов Л. П., Глухов Б. Ф., Поздняков А. А., Денисенко Г. Ф., Гололобова М. Т., Панкова Г. Е., Камыкова Т. Т. Культура клеток и тканей животных: Учебно-методическое пособие //Ставрополь.-1980.- 112 С.
Кваленко Ф. П. //Тез. докл. 3-го Респ. съезда эпидемиологов и паразитологов.- Ереван, 1983.- С. 124−126.
Коколова Л. М., Эпизоотология ларвальных тениидозовсеверных оленей Якутии и меры борьбы с ними: Дис. канд. вет. наук.- М., 1995.- 100с.
Коляков Я. Е. Ветеринарная иммунология М. Агропромиздат.- 1986.- 272 С.
Косминков Я. Е., Комаров Е. И., Морозова Е. Ф., Серяков Н. И., Устяков А. В. Иммунизация овец против ценуроза //Ветеринария.— 1986.— № 12.— С. 41.42.
Косминков H. Е. Специфическая иммунопрофилактика ценуроза овец //Совершенствование ветеринарного обслуживания животных в условиях интенсификации. Тез. докл. Всесоюзн. научн-техн. конф. 1517 сент. 1987. Махачкала.- М., 1987. С. 112 113.
Косминков Н. Е Дис. докт. вет. наук — М., 1991.- 397с
Красюкова Л. С. Культивирование клеток ларвоцист эхинококка и использование его протосколексов для отбора антгельминтных препаратов: Дис. канд. биол. наук.- М., 1987.- 184с.
Курносов А. Н. Новая модификация способа трипсинизации почек животных //Тезисы XVII научн. конф. ин-та полиемиелита и вирусных энцефалитов АМН СССР.- М., 1972.- С. 519−520.
Лайпанов Б. К. Разработка специфических мероприятийрекомендаций) по борьбе с ценурозом овец на основе иммунизации в условиях Карачаево-Черкессии.- Дисс. на соиск. уч. степ. канд. вет. наук.- М. 1993. С. 89−90.
Лейкина Е. СПолетаева О. Г. Проблемы общей и прикладной гельминтологии //М.: Наука, 1973.- С. 81−86.
Лейкина Е. С. Иммунология зхинококкоза и альвеококкоза и использовании ее достижений в борьбе с этими гельминтозами //Биохимия и физиология гельминтов и иммунитет при гельминтозах — М.— 1984.- С. 68−78.
Лейкина Е. С., Яроцкий Л. С., Озерецковская Н. Н.
Итоги и перспективы исследований по иммунологии эхинококкозов //Мед. паразитол.— 1987.— № 2.— С. 3−7.
Лукашенко Н. П. Некоторые наблюдения о культивировании А. multilocularis (Leucart, 1963) in vitro //Мат-лы к научн. конф. ВОГ.- М.-1964а.- Ч. 1.-С. 238−242.
Лукашенко Н. П. К изучению развития А. multilocularis1. ucart, 1963) in vitro //Мед. паразитол. и паразитарн. болезни.- 19 646.- № 3.- С. 271−278.
Лукашенко Н. П. Дис. докт. биол. наук.- М., 1967. Т.1, 2.
Людогорская Л. А., Какпаков В. Т. Изучение антигеновперевиваемых и штаммовых культур клеток человека в реакции преципитации в агаровом геле //Вопр. онкологии.- 1966.- № 10.- С. 64−68.
Озерецковская Н. Н. Иммунологические и иммунопатологические реакции в патогенезе гельминтозов
Основы общей гельминтологии.— М.— 1976.— Т. 3.- С. 169−214.
Петров Р. В. Иммунология М.: Медицина.- 1986, 416 с.
Пинаев Г. П. Методы культивирования клеток. „Наука"1988.- 319 с.
Подопригора Г. И., Збарский А. И. Мед. паразитол.—1990. № 5.- С. 26.
Разаков Ш. А. Выявление видоспецифических и перекрестно реагирующих антигенных компонентов эхинококка и альвеококка //Мед. паразитол. и парази-тарн. болезни.- 1975.- Т. 44.- № 4.- С. 448 455.
Разаков Ш. А. Получение сывороток узкой специфичностии их использовании для идентификации антигенных компонентов эхинококка и альвеококка //Мед. паразитол. и паразитарн. болезни.— 197 6.— Т. 45.— № 2.- С. 148−150.
Сергеев А. А. Размножение вирусов животных в культуреткани.- М.: Колос, 1966.- 311 С.
Сергеев А. А. Репродукция и выращивание вирусов животных.- М.: Колос, 1976.- 303 С.
Сергеева П. А., Эвранова В. Г. К вопросу культивирования личиночной формы Echinococcus granulosus на питательных средах и культурах тканей: (Предварительное сообщение)// Ученые записки Казанского вет. ин-та.- Казань, 1962. Т. 8 9.-С. 145−150.
Сивков Г. С.г Зубков В. С. Протективные свойства антигена из личинки овечьего овода.- „Ветеринария“.- 1995.5.- С. 39.
Скрынникова Т. И. Онкосферальный секреторный антиген
Multiceps multiceps для профилактики ценуроза овец: Дис. канд. вет. наук.- М., 1993.- 133 С.
Спиер Р.Е., Адаме Г. Д., Гриффите Дж. Б. Биотехнология клеток животных: в 2 т. Т. 2/пер. с англ. В. М. Тарасенко- под редакцией Г. А. Сафонова.-М.: Агропромиздат, 1989.- 520 С.
Сюрин В. Н., Белоусова Р. В., Фомина Я. В. Ветеринарная вирусология.- М.: Колос, 1984.- 375 С.
Тараканов В. И. Культивирование протосколексов эхинококка на двухфазных питательных средах // Материалы IV Закавказской конференции по паразитологии.- Тбилиси, 1986.
Шумова Я. С. Дис. канд. вет. наук.- М., 1994, 138 с.
Эвранова В. Г., Сергеева П. А. Культивирование личиночной стадии Echinococcus granulosus внге организма //Тез. докл. научн. конф. ВОГ.
Яраев Р. Г. Функциональные антигены жидкости пузыря
Coenurus cerebralis //Тр. всес. ин-та гельминтол.- 1971.- Т. 17.- С. 285−286.
Anderson I. //New Sci.- 1989.- Vol. 122, № 1673 P.34.
Ayuya J. M., Williams J. F. The immunological response of the rat to infection with Taenia tae-niaformis. VII. Immunisation by oral and parental alministration of antigents //Immunology.-1979.- 36. 825−34.
Bassi G. E. r Ishiki D. K. r Ferreira A. W. r Camargo M.
E. Rev. bras, patol. clin.- 1991.- 27:49.
Benex J. Evolution in vitro d' explants de membraneprolifere Echinococcus granulosus //Ann. Para-sitol.— 1968.- V. 43.- N. 5.- P. 573−582.
Berezhko V., Bessonov A. //8th Int. Congr. of Parasitol. 10−14 Ock.- 1994 Ismir. Turkey, Abstracts.“ 1994.- V. 2.- P. 428.
Blazek R., Brec K. A. r Buchwalder R. et al. Some serological test in detecning spontaneous bovine cysticercosis //Folia parasitol.- 1982.- t. 29.- № 3.- S. 253−258.
Bomford //Internat. Tissue Reach.- 1982.- V. 4.- P.201.209.
Bowman D. D., Mika-Grieve M., Grieve R. B. //Exp.
Parasitol.- 1987.- V. 64.- N. 3.- P. 458−465.
Capron A., Biquet A. r Vernes A., Afchain E. Structural antigenique des helmintes. Aspects immu-nologiques. Des relations hote-parasite //Patol. Biol.- 1968.- P. 121−138
Capron A., Brigoo E., Afchin D. Apport de 1 etude dela structure antigenique a la philogenic des Helmintes //Bull. Mus. nat. hist, natur. Zool. 1972. — V. 55. — P. 877 — 885.
Clegg Y. A. r Smith M. A. Prospect for the developmentof dead vaccines against helmints // Adv. Para-sitol.- 1978. V. 16.- P. 165 — 218.
Chamerkh M., Grass-Masse H., Bossus M., Dissous C.,
Tartar A., Capron A. Use of synthetic peptides in immunodiagnosis of cystic echinococcosis //6 th Eur. Multicolog. Parasitol., The Hague, Sept., 7−11, 1992.- P. 81.
Choy W. FLim P. L., Ny M. U. // Vet. Parasitol.1989.- V. 32.- N 4.- P. 301−310.
Coutelen F. Essai de culture in vitro de scolex etd’hidatiles tchinococciques (Echinococcus granulosus) // Ann. de parasitol.- 1927.- V. 5.-N 1.- P.19.
Craig P. S. //Trans, roy. Soc. trop. Med. Hyg.1988.- Vol. 82, № 6.- P. 818.
Craig P. S., Hocking R. E., Mitchel G. F., Rickard M.
D. Murine hybridome-derived antibodies in the processing of antigens for the immunodiagnosis of hydatid (Echinococcus granulosos) infection in sheep //Parasitology.- 1981.- V. 83.- № 2.-P. 303−317.
Crue Silva S. A. Value and limits of immunodiagnosticmethods in Veterinary helminthiasis //Rev. iber. Parasitol.- 1971.- V. 31.- № 1−2.- P. 95 113.
Deve F. Evolution vesiculaire du scolex echinococcoique obtinue in vitro. La culture artificielle du cyst hydatide //Compt. rend. Soc. biol.- 1926.- V. 94.- P. 440−441.
Deve F. Scoliciculture hydatique on sac de colodienet in vitro //Compt. rend. Soc. biol.- 1926.-V. 98.-N 14.- P. 1176−1177.
Deplazes P., Eckert J., Pawlowsky Z., Machowska L. ,
Gottstein B //Trans. Roy. Soc. Trop. Med. Hyg.-1991.- 85:391.
Dukor P., Tarcsay L. and Baschang G.1.munostimulants. -197 9. Annu. Rep. Med. Chem. 14, — P. 146−167.
Eagle Н. Media for animal cell culture //Tissue Cult.
Assoc. Manual. 1977.- V. 3.- P. 517−520.
Ecker J. //Experimentia. 1988 .- V. 44.- N 10.- P.873.877.
Edelman R. Vaccine adyuvants. Rev. Infect. Dis. 2.1980. P. 370−383.
Edelman R., Hardegree M. C., Chedid L. Sammary of aninternational symposium on potentiation of the immune response to vaccines. J. Infect. Dis. 141.- P. 103−112.
Edwards G. THasket Г., Herbert J. V. Taenia hydatigena and Taenia multiceps infection in Snow-donia U. K. J. barmdogs as definitive hosts //Brit. Vet. J.- 1979.- V. 135.- № 5.- P. 426 432.
Edwards G. T. f Herbert J. V. Preliminare investigations into the immunization of lambs against infection with Taenia Multiceps metacestodes //Veter. Parasitology.- 1982.- V. 9.- N 3, 4.1. P. 193−199.
Farell Y. P., Muller I., Louis Y. A. //Y. Immunol.1989.- Vol. 142, № 6.- P. 2052−2056.
Feng J.-S., Guo H.-F., Shtn B.-Y., Xue H.-E. Chin I.
Parasitol. and Parasit. Disrases.- 1992.- V. 10.- N 2.- P. 86−89.
Gallie G. J., Sewell M. M. N. Experimental immunisation of six-month old calves against infection with the Cysticercus stage of Taenia saginata // Trop. anim. Healt. Product.- 1876.- V. 8.- N 4.- P. 233−242.
Gottstein B. Purification by chromatofocusing of anantigen fraction with high species specificity for Echinococcus multilocularis in ELISA //Experientia.- 1983.- V. 39.- N 12.- P. 14 351 436.
Gottstein B., Eckert J., Fey H. Serological differenciation between Echinococcus granulosus, E. multilocularis in man //Z. Parasitenk.- 1983.-V. 69.- N 3.- P. 347−356.
Gottstein B. f Hemphill A. In vitro cultivation andproliferation of Echinococcus multilocularis metacestoide: (Vortr.) Jahrestag //Schweiz, med. Wachenschr.- 1995.- V. 125.- N 18.- P. 928 .
Harmanek J., Prokopic J. Effect of T-activin on thecourse of experimental infection with T. cras-siceps (Zeder, 1800) in mice //Folia parasitol.- 1989.- V 36.- N 2, — P. 117−125.
House R. V., Dean Y. H. //Exp. Parasitol.- 1988.
Vol. 67, № 1.- P. 104−115.
Haernander Ana, Niero Alberto. Induction of protective secondary hydatidosis //Parasite Immunol.-1994.- V. 16.- N 10.- P. 537−544.
Heath D. D. Resistence to Taenia pisiformis larve inrabbits. Examination of the antigenially protective phase of larva development //International Journal for Parasitology.-1973.- V. 3.- 485−9.
Heath D. D. Resistance of Taenia pisiformis larvae inrabbits: Immunisation against infection using non-living antigens from in vitro culture //Intern. J. Parasitology.- 1976.- V. 6.- P. 19−24.
Harrison L. G. S., Parkhouse R. M. E. //Parasite Immunol.- 1986.- V. 8.- N 4.- P. 319−332.
Jolles P. and Paraf A. //» Chemical and Biological
Basis of Adyuvants". — 1973.- Chapman and Hall, London.
Jong W. K., Heath D. D. //"Ars 3″ antibodies in meraof sheep infected with E. granulosus, T. hyda-tigena and T. ovis.- 1979.- Parasite Immunology.- P. 27−38.
Jenkins D. J., Rickard M. D. Specific antibody responses to Taenia hidatigena, Taenia pisiformis fnd Echinococcus granulosus infection in dogs // Aust. Vet. J.- 1985.- V.62.- № 3.- P. 72−78.
Jonson K. S. Harrison L. G. SLightowlers R. P1. wrense S. B., Vinton J. G., Heath D. D., Rickard D. D. //Nature.- 1989.- V. 338.-N. 6216.- P. 585−587.
Kassai T., Rede P., Takats C. A szarvasmarhacysticercosis diagnosztikajarol. 1. Elterjedes, kartetel, vadohidi husvizsgalatiradalmi ossze-foglalas // Magy. allotorv. lapja.- 1983.- V. 38.- N 12.- P. 707−710.
Kudrna K., Prokopik J. Chalone-like inhybition of
DNA syntesis in helminths. //Folia Parasitologica.- 1985.- V. 35.- № 2.- P. 145−149.
Kudrna K., Prokopik J. //Microbios lett.- 1985.- V.29.- N 114.- P. 61−63.
Kudrna K., Prokopik J. //2-nd Int. Symp. Teniasis
Cysticercosis and Hydatidosis/ Echinococcosis, Cesce Budejovice, 2−7 Dec.- 1985. Proc. Cesce Budejovice.- 1986.- P. 46−55.
Kwa B. H., Liew F. Y. //Immuniti in taeniasiscysticercosis. I. Vaccination against T. tae-niaformis in rats using parified antigens.-1977.- Journal of Experimental Medicine № 146.-P. 118−31.
Lightowlers M. W. Cestode infections in animals- immunological diagnosisand vaccinations //Rev. sci et tech off. int epizoot.- 1990.- V. 9.- N 2.- P. 463−467.
Lightowlers M. W., Rickard M. D. //Immunol and cellbiol.- 1993.- V. 71.- N 5.- P. 443−451.
Liu D., Lightowlers M. W., Rickard M. D.
Parasitology.- 1992.- V. 104.- N 2.-P.357−361
Lloyd S. //Homologous and heterologous immunizationagainst the metaeestodes of T. saginata and T. taeniaformis in cattle and mice.- 1979.-Zeitschrift fur Parasitencunde 60, P. 87−96.
Mi the11 G. //Parasitol. Today.- 1987.- Vol. 3, № 4.1. P. 106 111.
Mithell G. //Parasitology.- 1989.- Vol. 98.- P. 1928 .
Muller IPedrazzini Th., Louis Y. A. //Immunol.1.tt.- 1988.- Vol. 19, № 3.- P. 251−259.
Moore G. E., Gerner JR. E., Franclin H. A. Culture ofnormal human leukocytes // J. Amer. Med. Assoc. 1967.- V. 199.- P. 519−524.
Morton H. J. f Tolnai S. Preparation of medium 199
Tissue Cult. Assoc. Manual.- 1978.- V. 4.- P. 729−736.
Nascimento E., Tavares 5. A., Lopez J. D. //J. Clin.
Microbiol.- 1987.- V. 25.- S. 1181.
Osborn PHeath D. Res. Vet. Sci.- 1982.- V.33.- N1.- P. 132−133.
Onawunmi O. A., Coles G. C. Attempt to immunise seepwith culture antigens of Taenia hydatigena //Res. in Veter. Sc.- 1980 .- v. 29.- N 1.- P. 102−103.
Pappas M. G. // Vet. Parasitol.- 1988.- V. 29.- N.2.3.- P. 105−129.
Roller G., Milstein C. Continious cultures of fusedcell secreting antibody of predefined specificity.- Nature, 1975, 256, 495.
Koller G., Milstein C. Derivation of specific antibody-produsing tissue culture and tumor lines by cell fusion.- Eur. Immunol., 1976.- V. 6.-P. 511.
Rauch R., Jentoft V. L. Stadies on the helmints
Fauna of Alaska. XXXIa Observation on the propagation of the larva Echinococcus multilocularis Deukart, 1963, in vitro //J. Parasitology.- 1957.- V. 43.- N 1.- P. 1−8.
Rickard M. D. and Bell K. J. Successful vaccinationof lambs against infection with Taenia ovis using antigens produced during in vitro culture of the lava stages. //Res. Vet. Sei.- 1971.- V. 12.- P. 401−402.
Rickard M. D., Adolf A. J. Vaccination of calvesagainst Taenia saginata using a parasite-free vaccne //Veterinary Parasitology.- 1975.- 45. 255−62.
Rickard M. D. 4-th Intern. Congr. Parasitol. 19−26
Aug. 1978. Warszawa. Short Commun. Sect. C: 134 .
Rickard M. D., Jenkins D. J. Studies on the serological diagnosis of infection with Taenia spp. and Echinococcus granulosus in dogs. //2 th Inter. Symp. Taeniasis /Cysticercosis and Hydati-dosis/ Echinococcosis., Ceske Budejovice.-1986.- P. 78−86.
Rickard M. D., Williams J.- Adv. Parasitol.- 1982.1. V. 21.- P. 229.
Rickard M. D., Harrison G. B. L., Heath D. D., 1. dthowters M. W. Taenia ovis recombinant vaccine «quo vadit» //Parasitology.- 1992.- V. 110, Suppl.- V. 5−9.
Rose J. H. Preliminary results using metabolites andin vitro grown larve of Ostertagia circumcincta to immune lambs against oral challenge. // Res. Vet. Sc.- 1976.- V.21.- P. 76−78.
Rose J. H. Further attempts to immune lambs usingmetabolites and in vitro grown larve of Ostertagia circumcincta. //Res. Vet. Sc.- 1978.- V. 24.- P. 61−64.
Sakamoto T., Yamashita J. r Ohbayashi. // Jap. J.
Vet. Res.-1967.- V. 15.- N 2.- P. 75−84.
Sakamoto T. f Kotani T. //Jap. J. Vet. Res.-1967.- V.15.- N 4.- P. 165−170.
Sakamoto T. //Mem. Fac. Agric. Hagoshimo-Univ.1978.- V. 14.- P. 109−115.
Sugane K., Sun Sh.-H. //J. Immunol. Meth.-1994.- V.168.- N 1.- P. 55−60.
Smith M. A. Echinococcus granulosus and Echinococcusmultilocularis: in vitro Culture of the Strobi-lar stages from Protoscoleces //Angew. Parasit.- 1979.- V. 20.- P. 137−147.
Speiser C. J. Roy. Soc. Med.- 1982, 78: 844.
Varela-Diaz V. M., Coltorti E. A., Rickard M. D.,
Torrks J. M. Comparative antigenic characterization of Echinococcus granulosus and Taeniahydatigena cyst fluids by Immunoelectrophoresis //Res. Vet. SC.- 1977.- V. 23.- N 2.- P. 213 216.
Varma</span> T. K., Malviya H. C., Ahluwalia S. S. //Indian
J. Anim.- 1986.- Sci. 56:621.
Vogel M., Gottstein B., Muller N., Seebeck T.
Molec. biochem. Parasitol.- 1988.- Vol. 31, № 2.- P. 117−126.
Williams J. F., Sandeman M. Cysticercosis: presetstate of knowlelge and perspectives Flisser A. e.a. (eds) //Acad. Press. New York: 525.
Wickerhauser T., Zukovic M., Dracula N. //Exp. Parasitol.- 1976.- V.-30.- N 1.- P. 36−40.
Weller T. H., Wheeldon S. K. The cultivation in vitro of cell derived from adalt Schistosoma man-soni I. Methodology: Criteria for Evaluation of Cultures and development of media //Amer. J. Trop. Med. Hyg.- 1982.- V.31.- N 2.- P. 335 348.
Yong W. K., Heath D. D., Parmeter S. N. Echinococcusgranulosus, Taenia hydatigena, Taenia ovis: evaluation of cyst fluids as antigen for sero-diagnosis of larva cestodes in sheep. //New. Zealand. Vet. Sournal.- 1978.- V. 26.- N 9.- P. 231−234.

Заполнить форму текущей работой