Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Применение хемилюминесценции иммунокомпетентных клеток крови для прижизненной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота

Диссертация: Применение хемилюминесценции иммунокомпетентных клеток крови для прижизненной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Разработка твердотельных радиолюминесцентных эталонов яркости ЭЯ-1 и подобных ему аналогов, а также современных фотонносчетных устройств позволяет подойти к фотометрии хемилюминесцентного излучения на единой метрологической основе. Эталон яркости ЭЯ — 1 представляет собой радиолюминесцентный источник на основе светосостава постоянного действия и возбудителя — изотопа С14. Диапазон интенсивности… Читать ещё >

Применение хемилюминесценции иммунокомпетентных клеток крови для прижизненной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 1. 1. Современные представления о молекулярно-клеточных механизмах инфекционного процесса при туберкулезе
    • 1. 2. Теоретические и экспериментальные основы хемилюминесценции биологических тканей
    • 1. 3. Использование хемилюминесценции для диагностики болезней человека и животных

Актуальность темы

В системе противотуберкулезных мероприятий решающая роль отводится диагностике, так как успех борьбы с этой антропозоонозной инфекцией во многом зависит от полного и своевременного выявления источников возбудителя болезни. Между тем, многолетний опыт использования традиционных методов диагностики туберкулеза выявил ряд свойственных им недостатков. Основной метод массовых аллергических исследований, туберкулиновая проба, не выявляет в стаде всех больных туберкулезом животных. Это вынуждает проводить многократные повторные исследования, что значительно затягивает сроки оздоровления неблагополучных стад (М.К.Юсковец, 1948, 1965, В. П. Урбан, 1982, 1998; Л. М. Ходун, 1985, 1987, 1988; А. С. Донченко, 1994, 2004; Н. П. Овдиенко, 1997).

В то же время туберкулиновая проба нередко проявляется неспецифически у животных в заведомо благополучных хозяйствах. При исследовании животных в благополучных по туберкулезу пунктах в случае выявления реагирующих на ППД-туберкулин животных значительная их часть подлежит диагностическому убою и последующему исследованию в условиях ветлабораторий. Для дифференциальной диагностики в этих случаях применяют громоздкую, длительную по времени и дорогостоящую схему исследований: симультанную пробу с туберкулином для птиц или КАМ, с последующим убоем и патологоанатомической экспертизой, бактериологическим и биологическим исследованиями биоматериала от убитых с диагностической целью животных (Л.М.Ходун, 1984; 1988; 1990; А. Х. Найманов, 1992; А. С. Донченко, 2000; В. Г. Ощепков, 2001, 2003).

В соответствии с действующими ветеринарными и санитарными правилами (1996 г.) при туберкулезе биоматериал от каждого убитого с диагностической целью животного высевают на твердые яичные питательные среды, заражают морских свинок и кроликов для определения видовой принадлежности выделенных культур микобактерий и их вирулентности. Кроме того, для дифференциальной диагностики в ряде случаев используют гистологические исследования и серологические реакции: связывания комплемента (Э.Д.Лакман, И. В. Шлыгин, 1976; Ю. Я. Кассич, 1979; Л. М. Ходун, 1983) — диффузной преципитации в агаровом геле (РДПА), непрямой гемагглютинации (РНГА), бласттрансформации лейкоцитов (РБТЛ), торможения миграции лейкоцитов (Е.А.Суворов, 1968; Н. П. Овдиенко и др., 1980; М. В. Харитонов, 1983; Г. Г. Попова, 1985; Е. И. Буряк, 1987; А. П. Лысенко, 1987; F. Griffin, 1988).

Но значительная трудоемкость, недостаточная информативность, длительность исследований (3−6 мес.), большое число животных, необходимых для диагностического убоя, являются существенными недостатками указанных методов и делают их малопригодными для массовых исследований. Несовершенство методов дифференциальной прижизненной диагностики этого заболевания приводит к тому, что ежегодно на мясокомбинаты сдаются тысячи голов крупного рогатого скота, реагирующих на ППД-туберкулин и подозреваемых в заражении, но во многих случаях не являющихся истинными больными туберкулезом, а это неизбежно увеличивает прямые и косвенные потери животноводства. Возрастают они и за счет сокращения срока эксплуатации продуктивных коров и преждевременного убоя молодняка, не достигшего товарных кондиций (А.Н.Шаров, 1982; А. С. Найманов, 1990, 1993; А. С. Донченко, Ю. А. Макаров, 1997; А. И. Кузин, 1982).

Современные достижения зарубежной и отечественной науки в области биологии и медицины открывают возможности в создании нового поколения средств и методов диагностики туберкулеза с высокой чувствительностью и специфичностью.

В этом плане перспективны биофизические и иммунохимические методы, позволяющие разработать эффективные способы прижизненной диагностики туберкулеза. Наибольшее признание получили метод иммуноферментного анализа — ИФА, общий принцип которого состоит в том, что антигены или антитела фиксируются на твердой фазе, а затем выявляются с помощью соответствующих антител или антигенов, меченых пероксидазой хрена или другим ферментом путем определения ферментной активности в субстратах смеси по уровню окрашивания фермента (Y.Morris, C. Thorm, 1985; Р. А. Хамзин и др., 1985; А. А. Нуррулин, 1986; Е. Маслов с соавт., 1986; T.M.Daniel, 1987; М. В. Андросова, 1987, 1989; Л. М. Ходун, 1989; Л. М. Ходун с соавт., 1990; Н. И. Цунская с соавт., 1991; Н. П. Овдиенко с соавт., 2001; О. А. Верховский с соавт., 2001; М. Ф. Губкина с соавт., 2002) — полимеразная цепная реакция — ПЦР, которая дает возможность экспрессно выявлять ДНК микобактерий туберкулеза в клиническом материале (A.J.Hance, 1988; B. Boddinghaus, 1999; Kaneko S. et al., 1995; Cheong.H.I. et al., 1996; А. Н. Шаров и др., 2002; M. B Чеснокова. и др. 2001, 2003; М. А. Владимирский и др., 2003; А. Х. Найманов и др., 2004), а также биохемилюминесцентный анализ (А.И Журавлев, 1961, 1968, 1974, 1975; Э. А. Бурнштейн, 1964; А. А. Аревшатян, 1965, 1966; Н. А. Клипсон, Т. Г. Мамедов, 1965; Журавлев А. И., В. Н. Тростников, 1966; У. М. Авакян, 1967; Ю. А. Владимиров, С. Ф. Львова, З. П. Черемисина, 1966; Г. М. Баренбойм с соавт., 1966; ВА. Веселовский с соавт., 1963; Г. И. Лихштейн с соавт., 1966; Е. И Шуцкая., 1979; Н. К. Куликов, В. Ю. Куликов, 1985 и др.).

Высокая эффективность применения последнего биофизического теста в биологии и медицине, актуальность проблемы дифференциальной диагностики туберкулеза предопределили направленность наших исследований.

Цель исследований: Изучить хемилюминесценцию иммунокомпетентных клеток крови лабораторных и сельскохозяйственных животных, и ее применение для прижизненной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота.

Для достижения этой цели необходимо было решить следующие задачи:

Задачи исследований:

1. Разработать методику выделения иммунокомпетентных клеток периферической крови для хемилюминесцентных исследований.

2. Определить уровень сверхслабого свечения (XJ1) лейкоцитов лабораторных животных, экспериментально зараженных M.bovis.

3. Определить уровень сверхслабого свечения клеток крови телят, экспериментально зараженных M.bovis.

4. Определить уровень сверхслабого свечения клеток крови коров, экспериментально зараженных M. bovis, и установить влияние ППД-туберкулина для млекопитающих на их хемилюминесценцию.

5. Испытать специфичность и чувствительность иммунохемилюминесцентного способа диагностики туберкулеза в производственных условиях.

Научная новизна полученных результатов:. Разработан способ прижизненной диагностики туберкулеза, включающий выделение полиморфноядерных лейкоцитов, сохранение их в стабилизирующем растворе, сравнительную оценку спонтанной и индуцированной люминолзависимой хемилюминесценциив качестве индуктора «дыхательного взрыва» используют опсонизированный зимозанотличающийся тем, что в качестве специфического индуктора используют туберкулезный антигендезинтеграцию микобактерий проводят ультразвуком.

Получен патент РФ и две положительные формальные экспертизы ФИПС.

Теоретическая значимость и практическая ценность результатов исследований.

Выявленные особенности хемилюминесценции лейкоцитов крови у интактных и зараженных M. bovis лабораторных и сельскохозяйственных животных позволяют, с одной стороны, глубже познать молекулярно-клеточные механизмы развития инфекционного процесса туберкулеза и, с другой — использовать некоторые аспекты этих механизмов в диагностике болезни.

Применение способа прижизненной диагностики туберкулеза, основанного на хемилюминесценции клеток крови, индуцированных антигеном микобактерий туберкулеза, сократит сроки дифференциальной диагностики и предупредит значительный экономический ущерб за счет необоснованной сдачи на убой здоровых животных, реагирующих на ППД-туберкулин.

Составлены методические рекомендации для прижизненной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота с использованием иммунохемилюминесцентного метода (2005 г.).

Результаты научно-исследовательской работы используются в учебном процессе на кафедрах микробиологии, вирусологии, иммунологии, эпизоотологии и инфекционных болезней сельскохозяйственных животных ИВМ ОмГАУ.

Апробация работы: Материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на заседаниях ученого совета ВНИИБТЖ (1996;2004), выездных заседаниях Президиума Сибирского отделения Россельхозакадемии (1998, 2000), Всероссийской научной конференции по проблемам хронических инфекций (Омск, 2001) — годичных собраниях Отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии (1999, 2002), на межрегиональной научно-практической конференции, посвященной 175-летию аграрной науки Сибири (2003) — заседании Бюро отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии (2003), IV-межрегиональной научно-практической конференции по проблемам ветеринарной медицины (2005).

Материалы диссертации, выводы и практические предложения доложены, обсуждены и рекомендованы к защите на межлабораторном заседании сотрудников ВНИИБТЖ (2005).

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Экспериментальные основы выделения, сохранения и использования иммунокомпетентных клеток крови лабораторных и сельскохозяйственных животных для хемилюминесцентных исследований.

2. Результаты применения хемилюминесценции иммунокомпетентных клеток крови лабораторных животных и крупного рогатого скота для прижизненной диагностики туберкулеза в экспериментальных и производственных условиях.

Публикация результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 7 научных работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 121 страницах компьютерного набора и включает введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, выводы, практические предложения, список использованной литературы и приложение. Работа иллюстрирована 9 таблицами, 31 рисунком.

Список литературы

включает 203 источника, в т. ч. 29 иностранных авторов.

ВЫВОДЫ.

1. Разработаны и оптимизированы методики взятия, транспортировки, хранения проб крови и выделения лейкоцитов, предназначенных для хемилюминесцентных (ХЛ) исследований в динамике инфекционных болезней животных.

2. Для получения объективных показаний при ХЛ-исследованиях концентрация иммунокомпетентных клеток крови должна составлять не менее 2 млн./1 мл, их жизнеспособность и потенциальная функциональная активность достигается контролем воздействия опсонизированным зимозаном.

3. Надежность ХЛ-исследований существенно повышается за счет увеличения числа жизнеспособных лейкоцитов (до 95−96%) от всей популяции, изолируемой из крови, и использования при регистрации их хемилюминесценции физиологически адекватного стабилизирующего раствора. На активность проявления хемилюминесценции лейкоцитов в исследуемом субстрате ингибирующее влияние оказывают гемоглобин и элементы разрушенных клеток.

4. Антигенный комплекс, полученный из клеточных оболочек M. bovis шт. 8, можно использовать in vitro в качестве специфического индуктора хемилюминесценции иммунокомпетентных клеток крови крупного рогатого скота.

5.

Введение

ППД-туберкулина для млекопитающих крупному рогатому скоту в диагностической дозе 10 тыс. ME не оказывает влияния на показатели хемилюминесценции лейкоцитов.

6. Уровень хемилюминесценции иммунокомпетентных клеток крови телят и коров, экспериментально и спонтанно зараженных возбудителем туберкулеза M. bovis, превышает уровень хемилюминесценции аналогичных клеток крови здоровых животных в 1,5−2 и более раз.

7. Иммунохемилюминесцентный метод, основанный на регистрации сверхслабого свечения иммунокомпетентных клеток крови, индуцированных антигенным комплексом вирулентных микобактерий, обладает специфичностью и необходимой чувствительностью, и рекомендуется в качестве дополнительного прижизненного метода индивидуальной и групповой дифференциальной диагностики туберкулеза у крупного рогатого скота.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

1. Методические рекомендации «Хемилюминесцентный метод прижизненной диагностики туберкулеза у крупного рогатого скота». Предназначены для научных лабораторий, преподавателей и студентов ветеринарных факультетов. Методические рекомендации утверждены на заседании методической комиссии ВНИИБТЖ (протокол № 3 от 14 мая 2005 г.), подсекции «Инфекционная патология животных в регионе Сибири и Дальнего Востока» отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии (протокол № 5 от 21 июня 2005 г.).

2. Способ выделения лейкоцитов крови для хемилюминесцентного анализа (патент РФ № 2 232 395 от 10.07.2004 г.).

3. Способ сохранения иммунокомпетентных клеток в стабилизирующем растворе (положительный результат формальной экспертизы ФИПС № 2 004 113 929/13 (14 817) от 05.05.2004 г.).

4. Способ прижизненной диагностики туберкулеза (положительный результат формальной экспертизы ФИПС № 2 004 124 989/15 (26 935) от 16.08.2004 г.

1.4.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ПО ОБЗОРУ ЛИТЕРАТУРЫ.

Анализ отечественной и зарубежной научной литературы показывает, что при туберкулезе профилактика и организация противотуберкулезных мероприятий во многом зависят от правильной и своевременной диагностики, как прижизненной, так и послеубойной.

В настоящее время основным методом прижизненной диагностики туберкулеза сельскохозяйственных животных является внутрикожная туберкулиновая проба. С целью дифференциальной диагностики туберкулеза в ряде случаев используют пальпебральную, внутривенную, глазную туберкулиновые пробы, а также различные серологические и клеточные (РСК, ИФА, РБТЛ, РИМЛ и др.) реакции.

По мнению многих исследователей (В.П.Шишков, 1986; В.П.УрбанА.С.Донченко, 2004), в настоящее время в диагностике туберкулеза существуют две основные проблемы: туберкулеза, как такового, и дифференциации неспецифических реакций на туберкулин. В связи с этим чрезвычайно важным является разработка надежных, доступных и быстрых методов прижизненной диагностики и дифференциации туберкулеза.

За последние годы зарубежные и отечественные ученые добились значительных успехов в изучении эпизоотологии и иммунологии туберкулеза. Предложены различные модификации и дополнения к аллергическому, патологоанатомическому, бактериологическому, биологическому методам диагностики болезни, разрабатываются и проходят производственные испытания ИФА и ПЦР. На этой основе постоянно совершенствуются меры профилактики и борьбы с туберкулезом.

Использование новых современных методов, основанных на изучении нуклеиновых кислот, безусловно, открыло новое направление в микробиологии, однако их применение пока ограничено недостатком специфических зондов, праймеров, ферментов, других реактивов и приборов.

При всем многообразии предложенных методов остается открытым вопрос прижизненной диагностики туберкулеза сельскохозяйственных животных.

Одним из подходов к решению данного вопроса может стать хемилюминесцентный анализ иммунокомпетентных клеток крови. Исследованиями, проведенными во ВНИИБТЖ, показано, что разработанная методика постановки и учета хемилюминесценции иммунокомпетентных клеток крови лабораторных животных и крупного рогатого скота, индуцированных специфическим туберкулезным антигеном, позволяет оценить специфическую активность полиморфоноядерных лейкоцитов и дать оценку инфекционного статуса исследованных животных.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

Данная работа выполнена в лаборатории диагностики и микробиологии туберкулеза животных и лаборатории клеточной биотехнологии ГНУ ВНИИБТЖ СО РАСХН.

При проведении экспериментов были использованы 15 морских свинок, 15 кроликов, 4 теленка четырехмесячного возраста, 16 коров. При испытании диагностической эффективности хемилюминесцентного метода в производственных условиях были обследованы 96 коров, в т. ч. 66 коров из благополучных по туберкулезу хозяйств и 30 — из неблагополучных по туберкулезу хозяйств.

Для аллергических реакций использовали ППД-туберкулин для млекопитающих производства Курской биофабрики: серия 56, контроль 56, срок годности до 9.10.1995 г.- серия 23, контроль 23, срок годности до 5.08.1997 г.- серия 17, контроль 17, срок годности до 30.10. 2002 г.- серия 1, контроль 1, срок годности до 23.01.2006 г.

Для определения хемилюминесценции (ХЛ) клеток крови лабораторных животных, телят и коров использовали люминометр серии CL3604, выполненный в виде единого конструктива и работающий под управлением ПЭВМ типа IBM XT/AT.

Люминометр предназначен для исследования кинетики хемилюминесценции биологически активных объектов. Допускает параллельное измерение до 36 образцов, загружаемых в термостатируемый юоветный барабан, имеет систему термостатирования в заданном диапазоне, систему промывки магистралей, сервисное программное обеспечение (программное обеспечение рассчитано на работу с EGAYVGA мониторами).

Электропитание монитора осуществляется от однофазной сети переменного тока напряжением 220 В с частотой 50 (+1/- 1) Гц с заземлением. Охлаждение термостатируемого барабана осуществляется водой, а ФЭУ — с помощью полупроводникового микроохладителя типа ТЭМО — 4, с отводом тепла из зоны нагрева проточной водой от вакуумного насоса. Возможна подача воды из буферной емкости водяного столба не более 1,5 м. Прибор нельзя подключать к водопроводной магистрали напрямую во избежание обрыва трубопроводов внутри прибора из-за большого напора и возможных пульсаций питающей сети.

Блок управления прибором собран на отдельной плате и включает в себя функциональные узлы.

Программное обеспечение. Дискета с программным управлением идет в комплекте с прибором. В первую ячейку кюветного барабана устанавливается кювета с эталоном яркости.

Разработка твердотельных радиолюминесцентных эталонов яркости ЭЯ-1 и подобных ему аналогов, а также современных фотонносчетных устройств позволяет подойти к фотометрии хемилюминесцентного излучения на единой метрологической основе. Эталон яркости ЭЯ — 1 представляет собой радиолюминесцентный источник на основе светосостава постоянного действия и возбудителя — изотопа С14. Диапазон интенсивности излучения: 1×1015 — 3×1010 квантов за секунду с 1 см², спектр излучения: 400 — 600 нм. Величина погрешности относительных изменений интенсивности светового потока составляет 2−10% в зависимости от номинального значения интенсивности эталона. Наличие ФЭУ и эталонов яркости со спектральной характеристикой, близкой к спектру хемилюминесценции биологических сред, в сочетании с одноэлектронным режимом ФЭУ, термостабилизацией ФЭУ и проб, а также компенсацией фона ставит измерение хемилюминесценции на объективную метрологическую основу, обеспечивая контроль стабильности аппаратуры и воспроизводимость результатов измерений.

Следует отметить, что аналогичный хемилюминесцентный эталон яркости ЭЯ — 1 был использован биологами и медиками при количественной оценке ряда хемилюминесцентных реакций («АТФ-люциферин-люцифераза» и «люцегинин-перекись водорода-каталаза») (И.М. Карнаух, Е. П Сидорик, М. И. Данко, Е. В. Гордиенко, Е. А. Баглей, И. Ф. Пельтек, 1976).

Благодаря нормированию одноэлектронных характеристик ФЭУ типа «Квантакон» (таких как плотность темновой эмиссии в одноэлектронном пике, одноэлектронное разрешение и коэффициент усиления первого динода), а также разработке средств метрологического обеспечения измерений сверхслабых потоков излучения появилась возможность перехода от качественных сравнительных оценок уровня свечения биологических объектов к количественным измерениям свечения в единицах квант в секунду на единицу объема или поверхности светящегося биологического объекта.

Удобство и даже в некотором смысле неизбежность применения единицы квант в секунду связаны с тем, что в заданном объеме реагента биохемилюминесцентные реакции излучают макроскопически однородно. Это излучение имеет характер некоррелированных явлений, при которых с поверхности источника излучаются отдельные кванты света, моменты вылета которых между собой не связаны, поскольку каждая молекула реагирует независимо от других подобных ей молекул. Таким образом, явление биохемилюминесцентного излучения в целом есть результат несвязанных между собой световых реакций отдельных молекул при отсутствии какого-либо управляющего механизма в этих реакциях (И.Х.Костюченко и др., 1978; И. М. Карнаух, Б. В. Урысан, 1983).

Программное меню состоит из 10 полей, включающего поле 1 -помощь, подсказка. При работе с меню в это поле выводится краткая информация о функциональных возможностях нажатой (выделенной) клавиши меню: поле 2 — свободная память, содержит информацию о величине свободной памяти (справочная информация для пользователя): поле 3 — меню пользователя, позволяет реализовать различные режимы работы с программой, включая последующую обработку полученной информации: поле 4 — графическая информация, в это поле выводится вся графическая информация и комментарии: поле 5 — индексация графиков, это поле выполнено в виде кнопок и разделено на 36 частей, по числу кювет на барабане. Каждая кнопка имеет двойное обозначение, справа — номер кюветы, совпадающий с номером кривой на графике в поле 4, слева — код клавиши, которую надо нажать, для того, чтобы включить или выключить выбранную кривую на графике в поле 4. Выбор числа кювет задается через главное меню: поле 6 — информация о программе для внешних дозаторов, в это поле выводится информация о номере работающего дозатора и объеме дозы вводимого реагента: поле 7 — информация о юоветном барабане, в этом поле схематично изображен кюветный барабан. Цветовой маркировкой выделены загруженные кюветы, номер измеряемой кюветы указан в центре барабана. При проведении эксперимента в этом поле можно наблюдать в динамике расположение кювет относительно датчика начала отсчета: поле 8 — температура в термостате, в это поле выводится информация о заданной температуре, если происходит нагрев термостата, то маркер перемещается вправо от центра в красную зону, если охлаждение, то маркер уходит влево от центра в зеленую зону. Процесс достижения заданной температуры считается законченным, если маркер достаточно стабильно находится в центре шкалы: поле 9 — время эксперимента, в это поле выводится информация о длительности эксперимента в минутах. Выбор режима начала эксперимента производится после достижения режима стабилизации заданной температуры термостата, при закрытой крышке кюветного барабана. Запрещается открывать крышку, менять пробы во время эксперимента, т.к. это ведет к потере работоспособности прибора. Можно уменьшить время эксперимента при условии, что новое время превышает время, прошедшее с момента начала эксперимента: поле 10 — текущее значение сигнала. В это поле выводится информация о текущем значении сигнала на хемилюминесцентной кривой для кюветы, которая в данный момент находится в зоне измерения.

Во время эксперимента можно включать (выключать) изображение любой кривой в поле 4 (графическое информация), изменять масштаб в поле 4 (графическая информация): вернуться в режим «Авто» (автомасштаб).

Конец эксперимента — возврат в основное меню, при этом сохраняется вся информация о режиме работы в файле «CL 3604, ini».

Режим «Данные» предназначен для обработки данных эксперимента: меню обработки графической информации: считывание данных из ранее записанного файла: фильтрация выбросов, по различным критериям обработки данных, на выбранных для обработки кривых: отмена режима «Фильтр» и переход к исходному значению выбранных кривых.

При выполнении данной работы мы придерживались следующих основных требований:

1. Исследовать изменения XJI крови в процессе развития туберкулезного процесса в организме животного.

2. Результаты измерений ХЛ крови должны иметь численные значения их собственного свечения в относительных единицах.

3.Чувствительность установки должна проверяться по стандартному эталону яркости ЭЯ — 1.

4. Относительная погрешность определения ХЛ — не более 30%.

5. До внесения раствора люминола все манипуляции проводить при Т не выше +4°С.

6. Результаты измерений ХЛ биосред здоровых и больных туберкулезом животных должны оцениваться по общепринятым статистическим критериям достоверности.

7. В реакции не используют биологически опасные компоненты.

8. Использовать реактивы марки «хч».

Для проведения хемилюминесцентных исследований проводили работу по подготовке посуды и взятию крови, готовили компоненты реакции.

Кровь у крупного рогатого скота для ХЛ-анализа брали общепринятым методом из яремной вены с трилоном Б в силиконизированные пробирки. Соотношение консерванта и крови 1:9. Антигенный комплекс, использованный при постановке хемилюминесценции, получен из M. bovis шт.8 и M. tuberculosis H37Rv по методике Л. М. Ходуна и Н. И. Цунской (1989). Бактериальную массу 2-месячной культуры, выращенную на синтетической среде ВКЛ, осаждали центрифугированием и промывали дистиллированной водой. Суспензию бактериальных клеток бакмассы подвергали ультразвуковой дезинтеграции на аппарате УЗДН-1, фракции отделяли центрифугированием, осадок ресуспендировали и вновь воздействовали УЗДН-1. Осадок отделяли центрифугированием, а из надосадочной жидкости осаждали протеиновую фракцию. Осадок растворяли в минимальном количестве 0,5%-го раствора фенола и доводили концентрацию белка до 0,60,7 мг/мл. Активность и специфичность полученного антигена проверяли в реакции непрямой гемагглютинации с нормальной сывороткой здорового кролика, положительной туберкулезной ' сывороткой от кролика, гипериммунизированного убитой культурой микобактерий туберкулеза, и с положительной бруцеллезной сывороткой. Антиген испытывали с разведения 1:10, сыворотки — в возрастающих разведениях с 1:5. Антиген считался пригодным, если с положительной туберкулезной сывороткой РНГА была положительной, а с нормальной и положительной бруцеллезной сывороткой — отрицательной.

Ориентируясь на результаты титрации полученного антигена и в РСК, мы предположительно выбрали для индукции ХЛ клеток крови разведения 1:50, 1:100, 1:200.

РОССИЙСКАЯ лл ГОСУДАРСТВЕННАЯ.

БИБЛИОТЕКА.

Результаты индукции антигеном XJI у клеток крови представлены в таблице 1.

Показать весь текст

Список литературы

  1. , У.М. Применение хемилюминесцентного метода для регистрации биологических процессов /У.М.Авакян // Биол. журнал Армении.-1967. -Т.20. -№ 2. -С. 15−23.
  2. , М. М. Повышенная чувствительность замедленного типа и инфекционный процесс /М.М.Авербах, В. Я. Гергерт, В. И. Литвинов М.: Медицина, 1975. -335 с.
  3. , М.М. Туберкулез органов дыхания. /М.М.Авербах, В. И. Литвинов // Под ред. А. Г. Хоменко. М., 1981. -С. 61 — 77.
  4. Адо, А. Д. Общая аллергология /А.Д.Адо М.: Медицина, 1978. -277 278 с.
  5. , М.В. Идентификация микобактерий туберкулеза человеческого вида с помощью моноклональных антител / М. В. Андросова /VI Всероссийский съезд фтизиатров. Кемерово, 1987. -С.77 — 78.
  6. , М.В. Иммунологический метод идентификации M.tuberculosis и М. bovis BCG на основе применения моноклональных антител /М.В.Андросова, М. А. Владимирский, В. М. Должанский, Г. И. Алексеева // Проблемы туберкулеза. -1989. -№ 5. -С.43 46.
  7. Аревшатян, А. А. Влияние температуры на спектральный состав и интенсивность сверхслабого свечения некоторых биологических объектов /А.А.Аревшатян // Изд.Акад.наук Арм.ССР.-Биол.наука, 1965, т. 18. -№ 12. -С.105−107.
  8. , А.А. Количественная оценка слабых биологических свечений /А.А.Аревшатян //Биол.журнал Армении, 1966. Т. 19. — № 1, — С.73−77.
  9. , С. А. Изучение липидов методом хемилюминесценции / С. А. Аристархова, Е. Б. Бурлакова, Н. Г. Храпова //Тез докл. Всес. совещания по ХЛ. -Запорожье, 1976. -С. 77 79.
  10. Бак, 3. Основы радиобиологии / З. Бак, П. Александер // M.HJI. -1963.-С. 276.
  11. П.Барабой, В. А. Спонтанная хемилюминесценция сыворотки крови как биологический тест /В.А.Барабой //Тезисы респ. конф. «Применение радиоэлектроники в исследовании сверхслабого свечения биологических объектов. -Киев, КВИРТУ. -1978. -С. 64- 66.
  12. П.Барабой, В. А. Влияние некоторых про- и антиоксидантов на спонтанную XJ1 сыворотки крови крыс / В. А. Барабой, Ли-Ен-Бин // Украинский биохим. ж. -Киев, 1982. -Т. 54. -№ 3. -С. 330 336.
  13. М.Барабой, В. А. Спонтанная ХЛ сыворотки крови и ее стимуляция переменным синусоидальным электротоком / В. А. Барабой, В. Э. Орел, Ю. А. Таций / Биофизика. М., 1979. -С.143.
  14. В.А. Спонтанная ХЛ сыворотки крови в норме и при воздействии ионизирующей радиации /В.А.Барабой, В. Э. Орел // Биолюминесценция. Тр. МОИП. -М., 1983. -Т.Х. -С. 222 240.
  15. , Г. М. Люминесценция биополимеров клеток /Г.М.Баренбойм, А. Н. Доманский, К. К. Туроверов М., Наука, 1966, 233с.
  16. , Л.А. Спектр парамагнитного резонанса биологических объектов и миграция энергии / Л. А. Блюменфельд // Изв. АН СССР, серия биол. наук, 1957. № 3. -С. 285 — 292.
  17. , И. М. Интенсивность хемилюминесценции сыворотки крови крыс при туберкулезе и опухолевом поражении легких. /И.М.Бондарев, А. И. Журавлев, А. М. Шполянская // Пробл. туб. -1971. -№ 9. -С. 71−74.
  18. , В.М. Изменение функциональной активности фагоцитов в зависимости от наличия у бактерий плазмиды pR 50 / Е. В. Рябиченко, И. Л. Мальшакова, Г. Н. Коновалова // Журн. микробиол. -2003. № 3. -С. 3−7.
  19. , Е. И. Физика /Е.И.Бутиков, А. А. Быков, А. С. Кондратов -М., Наука, 1982.-570 с.
  20. , Э.А. Измерение спектров поглощения и спектров возбуждения люминесценции биологических объектов в коротковолновой и ультрафиолетовой области /Э.А.Бурнштейн, Ю. А. Владимиров / Биофизика. -1964.-Т.9 -Вып.2. -С.184−192.
  21. , В. Н. Микобактериозы и микозы легких. /В.Н.Васильев -София, 1971. -383 с.
  22. , Ю.А. Свободные радикалы в живых системах /О.А. Азизов, А. И. Деев., -М., 1991.
  23. , Ю.А. Реакции цепного окисления липидов в мембранных структурах клетки /Ю.А.Владимиров, Г. Б. Суслова -М., Наука, 1991.-С. 38−51.
  24. , Ю.А. Сверхслабые свечения при биохимических реакциях. /Ю.А.Владимиров-М., Наука, 1966. С. 83−85.
  25. , Ю.А. Сверхслабое свечение митохондрий и его связь с ферментативным окислением липидов /Ю.А.Владимиров, С. Ф. Львова, З. П. Черемисина. -М., 1966. -Т.31. -Вып.З. -С.507−515.
  26. , Ю.А. Хемилюминесценции, сопряженная с образованием липидных перекисей в митохондриях /Ю.А.Владимиров, Т. Б. Суслова, В. И. Оленев, З. П. Черемисина. -ML, 1969. -С.203−207.
  27. , М.А. Эффективность обнаружения микобактерий туберкулеза методом полимеразной цепной реакции (Результатырандомизированного исследования) /М.А.Владимирский, J1.K. Шипина, М. В. Левченко //Пробл. туб. -2003. -№ 12. -С.28−30.
  28. Верховский, О. А. Использование метода «СЭНДВИЧ» ИФА для диагностики туберкулеза крупного рогатого скота /О.А.Верховский, А. Х. Найманов, О. А. Савицкий, Ю. Н. Федоров, Н. П. Овдиенко //Инфекционная патология животных /Сб. науч.тр. — Омск, 2001. -С. 173 -174.
  29. , В.А. К вопросу о механизме сверхслабой спонтанной люминесценции организмов /В.А.Веселовский, Е. Н. Секамова, Б. Н. Тарусов -М., 1963. -Т.8. -Вып. 1. -С.125−127.
  30. , О. Н. Витамин Е и экспериментальной триглицеридный атеросклероз /О.Н.Воскресенский //Материалы симпозиума «Витамины при сердечно-сосудистых заболеваниях». -М., 1969. -С. 13−15.
  31. , М. В. Биофизика /М.В.Волькенштейн -М., Наука, 1981.-С. 151
  32. , В.П. Хемилюминесценция и физико-химические свойства липидов микроорганизмов. /В.П.Гаврилов //Тез. докл. Всес.совещ. по ХЛ. -Запорожье, 1976. -С. 83 -85.
  33. , И. М. Применение эталонов яркости для оценки интенсивности ХЛ биологических объектов /И.М.Гордиенко, Е. А. Баглей, И. Ф. Пельтек //Тез. докл. Всесоюз. совещания по ХЛ. -Запорожье, 1976. -С. 95−96.
  34. , И.В. Гематологическая норма /И.В. Грибова, А. И. Воробьев, Ю. И. Лорие /Руководство по гематологии -М., 1979. -С.53.
  35. , М.Ф. Ценность иммуноферментного анализа в диагностике и дифференциальной диагностике абациллярного туберкулеза у детей старшего возраста и подростков /М.Ф.Губкина, Е. С. Овсянкина, А. В. Баенский //Пробл. туб. -2002. -№ 12. -16−18.
  36. , В.Н. Иммунный статус больных активным туберкулезным спондилитом / В. Н. Гусева, В. М. Иванов, Е. И. Потапенко, О .Я. Якунова, Р. И. Шендерова, А. Е. Гарбуз //Пробл. туб. -2003. -№ 6. -С.25.
  37. , А.С. Туберкулез крупного рогатого скота, верблюдов, яков, овец и пантовых оленей /А.С.Донченко, В. Н. Донченко / РАСХН. Сиб. отд-ние. ИЭВСиДВ. -Новосибирск, 1994.-354 с.
  38. , А.С. Туберкулез крупного рогатого скота в регионе Сибири и Дальнего Востока // Актуальные проблемы бруцеллеза и туберкулеза животных /Сб.науч.тр.ВНИИБТЖ -Омск, 2000. -С.29−46.
  39. , А.С. Ветеринарные проблемы Сибирского животноводства // Матер. Всерос. науч. конф. по пробл. хронич. инф. (16−17 мая 2001 г.) /Сб. науч.тр. ВНИИБТЖ. -Омск, 2001. -С.4−15.
  40. , А.И. Хемилюминесценция липидов и скорость роста тихоокеанских лососей / А. И. Журавлев, В. Н. Корженко //Докл. АН СССР. -М., 1963.-№ 2.-С. 457−460.
  41. , А. И. Хемилюминесценция и антиокислительные свойства липидов человека /А.И.Журавлев, Ю. Н Филиппов, В. В. Симонов //Тр. МОИП.-М., 1965. -С. 75−89.
  42. , А. И. К измерению БХЛ неохлажденным ФЭУ. /А.И.Журавлев, А. Е. Меламид, Г. М. Свищев, Т. А. Ковалева, Г. А. Попов, Ф. Н. Регинский // Свободнорадикальные процессы в биологических системах: Тез. докл. Симпозиума. -М, 1964. -С. 18−19.
  43. , А. И., Сафонов В. А. Биохемилюминесценция сыворотки крови крыс при задержании последа./А.И.Журавлев, В. А. Сафонов // Ветеринария. -1998. -№ 3. -С.48−50.
  44. , А. И. Сверхслабые свечения и антиокислительные свойства биосубстратов: Автореф. дис. Докт. биол.наук. -М., 1965.
  45. , А. И. Лучевое воздействие на липиды и липидная модель профилактического эффекта: Автореф. дисс.. канд.биол.наук. -М., 1959.-40с.
  46. , А. И. /Сверхслабое свечение сыворотки крови и его значение в комплексной диагностике /А.И. Журавлев, А. И. Журавлева. -М.: Медицина, 1975. -С. 5, 12 15, 72 — 73.
  47. , А. И. Спонтанное сверхслабое метаболическое свечение плазмы и сыворотки крови в видимой области спектра./А.И.Журавлев. —М., 1974. Тр. МОИП, t.XXXI. -С.9.
  48. , И.И. ХЛ в реакции перекисного окисления липидов /И.И.Иванов, С. И. Галкина, М. Н. Мурзляк, Ю. Н. Кауров / Тр. МОИП, т. VI. -М., 1975.-С.241 -245.
  49. , А.Б. Люминолзависимая ХЛ нейтрофилов у больных хроническими неспецифическими заболеваниями легких /А.Б.Инсанов, Л. С. Алиева, Ф. М. Абдуллаева, А. А. Умняшкин //Пробл. туб. -1997. -№ 2. -С.47 -49.
  50. , Я. Биомембраны. / Я.Кагава. -М., ВШ, 1985.-С. 19−44.
  51. , А.И. Учение о возбудителе туберкулеза //Пробл. туб. -1967.-№ 11.-С.21−26.
  52. , А.И. О взаимосвязи туберкулеза человека и сельскохозяйственных животных //Пробл туб. -1968. -№ 2.-С.69−74.
  53. , A.M. Атипичные микобактерии и их роль в сенсибилизации животных к туберкулезу./А.М.Кадочкин, А. В. Кузьмин //Бюл.ВИЭВ.-М., 1983, вып.51.-С.50−52.
  54. , A.M. Дифференциация и идентификация микобактерий /А.М.Кадочкин //Ветеринария.-1984. -№ 9.-С.62−63.
  55. , В.Н. Сверхслабое свечение при некоторых преципитирующих реакциях./В.Н.Казначеев, В. В. Каменская, Л. А. Куликова,
  56. Е.Н. Родюкова, Ю. А Старикин., С. Д. Роньжина, Э. Б. Фридман //Сб. вопрос, биофизики.-Новосибирск, 1967. -С.38.
  57. , И.Е. Кинетика и механизм реакций, связанных с XJ1 фталевых гидразидов /И.Е.Калиниченко //Тез. докл. Всесоюз. Совещ. по XJ1. -Запорожье, 1976. -С.43−44.
  58. , А.Е. Применение метода электронного парамагнитного резонанса в биохимии. /А.Е.Калмансон. Успехи биологической химии. -М., 1963. Т.5. С.289−351.
  59. , И.М. Применение эталонов яркости для оценки интенсивности XJ1 биологических объектов /И.М.Карнаух, Е. П. Сидорик, М. И. Данко, Е. В. Гордиенко, Е. А. Баглей, И. Ф. Пельтек //Тез.докл. всес. Совещ. по XJI. Запорожье, 1976. -С. 95 — 96.
  60. , И.М. Установки для измерения спонтанного сверхслабого свечения биологических и клинических объектов и вопросы метрологического обеспечения измерений./И.М.Карнаух, Б. В. Урысан. -М., 1983. Тр. МОИП, т. XXX. -С.118 134.
  61. , Ю.Я. Реакция связывания комплемента и ее применение при оздоровлении стад крупного рогатого скота от туберкулеза от туберкулеза / Ю.Я.Кассич- Автореф. дисс.. докт.вет.наук, 1979. -40 с.
  62. Кассич, Ю. Я. Изучение сенсибилизирующих свойств атипичных микобактерий /Ю.Я.Кассич, П. М. Тихонов, А. Е. Тесля, А. М. Харченко, А. И. Завгородний //Ветеринария.-1985.-№ 2. -С.29 30.
  63. , Ю.Я. Комплексная диагностика туберкулеза /Ю.Я.Кассич //Ветеринария.-1985. -№ 4.-С.28−29.
  64. , А.В. /А.В.Киселев, Г.А. Гордина, В. В. Ильяшенко, Т. Э. Свиридова и др. // Микробиол. -2002. -№ 4. -С.22.
  65. , Н.А. Люминесцентный метод исследования свободнорадикальных состояний /Н.А.Клипсон, Т. Г. Мамедов, Б. Н. Тарусов /Биохемилюминесценция.-М.:Наука, 1965. Тр. МОИП, Т.21.-С.107
  66. , A.M. Показатели крови крупного рогатого скота, иммунизированного ПКП-3 /А.М.Коваленко, Л. В. Коваленко, А. А. Евглевский, В. А. Бусол //Ветеринария. —2002. -№ 2.-С.17−19.
  67. , Я.Е. Ветеринарная иммунология. /Я.Е.Коляков. -М., Агропромиздат, 1986. -С.20−21, 39−40.
  68. , М.Н. Регуляция дыханий митохондрий при усиливающемся воздействии на клетку ./М.Н.Кондрашова. -М., 1970. Биофизика, вып.2,15. -С.312 323.
  69. , Ю.Б. Естественный радиомиметик и его действие на различные биологические объекты и системы./Ю.Б.Кудряшов, Г. И. Гасанов, Е. Н. Гончаренко // Ж. общей биологии. -1964. -Т.25. -№ 1. -С. 3 17.
  70. , Ю.Б. Токсические вещества липидной природы и их роль при лучевом поражении: Автореф. дисс. д-ра биол.наук. -М., МГУ, 1966.
  71. , В.Ю. Сб. вопросы биофизики / В. Ю. Куликов, Г. В. Данилевич, Э. Б. Фридман, Л. А. Куликова -Новосибирск. -1967. -С.65 68.
  72. , Л.А. Исследование сверхслабого светового излучения крови человека: Автореферат дисс. канд. биол.наук. -Новосибирск. -1967. -С. 152.
  73. , А.Л. Факторы патогенности микобактерий туберкулеза /А.Л.Лазовская, Л. М. Пинчук //Пробл. туб. -1988.- № 8. -С.72 75.
  74. , Э.Д. Иммунологические реакции у животных, зараженных различными типами микобактерий туберкулеза /Э.Д.Лакман, И. В. Шлыгин //Пробл.туб. -1976. -Вып.27. -С.31−34.
  75. , Н.В. ХЛ в модельных системах белок-липид под воздействием формалина /Н.Б.Левина, С. Н. Орлов, Ю. М. Петрусевич, Б. Н. Тарусов./ Биофизика. -1976. -Т. XXI. -Вып.З. -С. 420 423.
  76. , Н.Р. Стимуляция лимфоцитов /Н.Р.Линг. -М.:Медицина, 1971. -С.31−61.
  77. , Г. И. О хемилюминесценции, сопровождающей каталазный процесс. /Г.И.Лихштейн, А. А. Пурмаль. /Биофизика. -1976. Т.П. -Вып.2. -С. 245−248.
  78. Лярски, 3. Диагностика вирусных болезней животных /З.Лярски -М.: Колос, 1980. -С. 78−88.
  79. , С.Н. Изучение температурных зависимостей биохемилюминесценции сыворотки крови. /С.Н.Макаров // Сб. науч.тр. MBA. -М., 1980 -Т.113. -С. 35−37.
  80. , С.Н. Связь видовых различий содержания меди и спонтанной БХЛ сыворотки крови с устойчивостью к лейкозу / С. Н. Макаров // Сб. науч.тр. MB А. -1979. -Т. 106. -С.66 68.
  81. , С.Н. Связь содержания меди с уровнем биохемилюминесценции сыворотки крови млекопитающих./С.Н.Макаров //Сб. науч.тр. MBA. -1980.-Т.113. -С.30 35.
  82. , С.Н. Проблемы молекулярной биологии и патологии сельскохозяйственных животных. /С.Н.Макаров //Сб. науч. трудов МВА. -1980. -Т.113.-С. 30−35.
  83. , С.Н. Влияние меди на XJI сыворотки крови./С.Н.Макаров. Биохемилюминесценция. -М., Наука, 1983. Тр. МОИП. -Т.ХХ. -С. 135 148.
  84. , Г. В. Хемилюминесценция плазмы крови животных и человека при некоторых патологических состояниях и ее динамика в процессе применения физических факторов: Автореф. дис. канд.биол.наук. -М., 1973.-С.23.
  85. , Е.И. Оптимизация непрямого иммуноферментного анализа для выявления антител к M.bovis /Е.И. Маслов, А. А. Бойко, И. А. Хорьков //Ветеринария.-1986.-№ 10. -С.64−68.
  86. , А.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге. /А.Н.Маянский, Д. Н. Маянский. -Новосибирск. Наука, Сиб.отд., 1989. -С. 12
  87. , А.И. Влияние ультрафиолетового облучения на свечение сыворотки крови и кожи крыс./А.И.Митрофанов. //Вопросы курортологии. -1971. -№ 2. -С. 130- 134.
  88. , А.И. Некоторые закономерности хемилюминесценции плазмы крови. /А.И.Митрофанов, А. И. Журавлев //Тез. 2-ой Всес. Конф. по биолюм. -Новосибирск. Институт автоматики и электрометрии СО АН СССР, 1967. -С.14 15.
  89. , В.В. Гуморальные механизмы регуляции функций организма в норме и патологии. /В.В.Меньшиков. -М., Медицина, 1970. -С.256.
  90. , Е.Л. Исследование фагоцитоза в клинической практике. /Е.Л.Миллз, П. Г. Куи. -М., 1983. -С.78 -91.
  91. , Л.М. Биология туберкулезных микобактерий и иммунология туберкулеза/Л.М.Модель.-М., Медгиз, 1958.-С.91−97.
  92. , Б.С. Активность компонентов антиоксидантной системы в динамике инфекционного процесса бактериальной и вирусной этиологии /Б.С.Нагоев, З. Ф. Хараева, М. Р. Иванова //Эпидемиолог.и инфекц. болезни. -М., Медицина. -2003. -№ 2. -С.50.
  93. , А.Х. Применение диагностических тестов в неблагополучных по туберкулезу хозяйствах /А.Х.Найманов, Р. А. Нуратинов, И. С. Дубовой //Ветеринария. -1990. -№ 1. -С.31−33.
  94. , А.Х. Аллергическая диагностика микобактериальных инфекций крупного рогатого скота: Автореф.дис. .д-ра вет.наук. -Москва, 1993.-29с.
  95. , Е.А. К механизму окисления ненасыщенных жирных кислот раковыми и нормальными тканями. /Е.А.Нейфах //Тр. 8-го Междунар.противорак. конгр. -М., Медгиз, 1963. -С.141−144.
  96. Никанкина, J1.B. Модуляция кислородного метаболизма рекомбинантными цитокинами и комплексом природных цитокинов /Л.В.Никанкина, Е. Н. Долгина, Л. В. Ганковская и др. // Ж.микробиол. -1999. -№ 5. -С. 106- 108.
  97. , А.А. Возможность использования туберкулина (ППД) в качестве тест-антигена для иммуноферментного анализа /А.А.Нуррулин // Меры борьбы с хроническими инфекциями в животноводческих комплексах. -Казань, 1986.-С.21 22.
  98. , Н.П. Дифференциация неспецифических реакций на туберкулин для млекопитающих у крупного рогатого скота /Н.П. Овдиенко, А. И. Кузин //Материалыы Всес.науч.конф.по проблемам бруцеллеза и туберкулеза животных. -Омск, 1980. -С.116−118.
  99. , Н.П. Идентификация различных видов микобактерий методом иммуноферментного анализа /Н.П.Овдиенко, А. Х. Найманов, М. В. Головченко, Д. М. Мирзоев, Л. Н. Черноусова //Инфекционная патология животных /Сб. науч.тр. —Омск, 2001. -С. 171 -172.
  100. Ощепков, В. Г. Состояние и перспективы усовершенствования мероприятий против бруцеллеза и туберкулеза животных //Актуальные проблемы бруцеллеза и туберкулеза животных /Сб. науч.тр. ВНИИБТЖ. СО РАСХН. -С)мск, 2000.-С.4−14.
  101. , В.Г. Система контроля благополучия хозяйств по туберкулезу крупного рогатого скота /В.Г.Ощепков, Ю. И. Смолянинов, Н. С. Боганец и др. //Матер.Всерос.науч.конф. по пробл.хрон.инф.:Сб.науч.тр./РАСХН.Сиб.отд-ние.ВНИИБТЖ.-Омск, 2001. -С. 120−126.
  102. , P.P. Иммунология. /Р.Р.Петров. -М., Медицина, 1982.1. С. 78.
  103. , М.М. Биофизические подходы к диагностике злокачественных опухолей. / Р. Р. Петяев. -М., Медицина, 1972. -С.240.
  104. , А.А. Современное состояние и перспективы дальнейшего развития хемилюминесцентного количественного анализа. /А.А.Пономаренко//Тез. докл. всес. совещ. по ХЛ. -Запорожье, 1976. -С.8−9.
  105. , Б.М. Иммунологические и биофизические параллели при определении специфической реактивности больных туберкулезом. /Б.М.Пухлик, А. В. Михей, С.В. Зайков//Пробл. туб. -1986. -№ 6.-С. 33 -35.
  106. , В.И. / В.И.Петухов. Тер. арх. -2000. -№ 4. -С.64−68.
  107. , Н.А. Ветеринарная микробиология и иммунология /Н.А.Радчук. -Москва, ВО Агропромиздат, 1991. -С. 126.
  108. Рябиченко, Е. В Роль активных форм кислорода, генерируемых фагоцитами в патогенезе заболеваний. /Е.В.Рябиченко, В. М. Бондаренко, В. В. Рябиченко //Ж. Микробиол.-2000. -№ 4. -С.65 71.
  109. , А.А. Высокочувствительное определение активности дегидрогеназ в лимфоцитах периферической крови человека. /А.А.Савченко, Л. М. Сунцова //Лабораторное дело, 1989. -№ 11. -С.23 25.
  110. , Н.В. Использование метода биохемилюминесценции и ферментативной антиокислительной системы крови для оценки функционального состояния цыплят в норме и при гипотрофии./Н.В.Садовников // Био. -Екатеринбург -2002. -№ 4. -С. 16.
  111. , И.И. Хемилюминесценция, индуцированная излучениями. /И.И.Сапежинский // Тр. МОИП, т. XXXIX. -М., 1972. -С.32 -38.
  112. , Н.Н. Цепные реакции. /Н.Н.Семенов. -Л., Гостеххимиздат, 1934.-С.555.
  113. , Н.Н. О некоторых проблемах химической кинетики и реакционной способности./Н.Н.Семенов -М., Ан СССР, 1958. -С.686.
  114. , Я.И. Хемилюминесценция крови в экспериментальной и клинической онкологии./Я.И.Серкиз, Е. Е. Чеботарев, В. А. Барабой, В. Э. Орел, Г. Е. Чеботарев. -Киев, Наукова думка, 1984. -С. 183.
  115. Серкиз, Я.И.,. Кшетичш хемшюмшесцентш характеристики сиворотки KpoBi тварин i людини./ Я. И. Серкиз, Е. Ю. Чеботарев, З. П. Федоров, Е. З. Рябова, Е. И. Гитис // Ф1зюлопчний журнал. -Киев, Наукова думка, 1977. -T.XXIII. -№ 2. -С. 274−276.
  116. , Ю.И. Особенности проявления неспецифических реакций на туберкулин у крупного рогатого скота / Ю. И. Смолянинов,
  117. А.М.Падалица //Тез.докл.науч.-практ.конф. ИЭВСиДВ. -Новосибирск, 1995.-С.42−43.
  118. , Е.А. О некоторых вопросах эпизоотологии туберкулеза крупного рогатого скота в Куйбышевской области /Е.А.Суворов // Сб.науч.тр./ Куйбышевская НИВС.-1968.-Вып.5.-С.155−165.
  119. , Ю.Г. Иммунный статус больных с впервые выявленным инфильтративным туберкулезом легких, страдающих частой респираторной вирусной инфекцией /Ю.Г.Суховей, С. А. Петров, А. В. Попов, И. Г. Унгер, Г. А. Аргунова //Пробл. туб.-2004.-№ 5.-С. 28−31.
  120. , В.Н. Методы лабораторной диагностики вирусных болезней животных /В.Н.Сюрин, Р. В. Белоусова, Б. В. Соловьев, Н. В. Фомин. -М., Агропромиздат. -1986.-С.95−98.
  121. , Б.Н. Основы биологического действия радиоактивных излучений /Б.Н.Тарусов. -М., Медгиз, 1954. -С. 140.
  122. , Б.Н. Сверхслабая хемилюминесценция биологических систем. /Б.Н.Тарусов //Тез. докл. Всес. совещ. по XJI. -Запорожье, 1976. -С.228 229.
  123. , Б.Н. Первичные процессы лучевого поражения /Б.Н.Тарусов. -М., Атомиздат, 1962. -С.96.
  124. Тарусов, Б. Н Биохемилюминесценция липидов./Б.Н.Тарусов, А. И. Журавлев. -М., Наука. -1965. -С.125 133.
  125. , Б.Н. Изучение сверхслабой спонтанной XJ1 животных клеток. / Б. Н. Тарусов, А. И. Поливода, А. И. Журавлев. Биофизика. -М., 1961. -Вып.4. -С.490 492.
  126. , Б.Н. Обнаружение хемилюминесценции в печени облученных мышей /Б.Н.Тарусов, А. И. Поливода, А. И. Журавлев. Радиобиология.-М., 1961, 1. № 1. -С. 150 — 151.
  127. Туберкулез // Профилактика и борьба с заразными болезнями, общими для человека и животных /Сб. санитарных и ветеринарных правил. -М., 1996. -С. 157−172.
  128. , В.П. О природе повторных вспышек туберкулеза //Ветеринария. -1982. -№ 10. -С. 12−14.
  129. , В.П. Туберкулез сельскохозяйственных животных./В.П.Урбан, В. П. Шишков. -М.: ВО Агропромиздат, 1991. -С.59−79.
  130. , Е.А. Хемилюминесценция очищенной популяции гранулоцитов и цельной крови. Действие различных факторов. /Е.А.Черепанова, М. Ю. Тузов, С. М. Гордиенко //Лабораторное дело. -1987. -№ 8. -С.610 614.
  131. , М.В. Оценка эффективности полимеразной цепной реакции при расследовании вспышек псевдотуберкулеза. /М.В.Чеснокова,
  132. B.Т. Климов, А. С. Марамович, В. Я. Антонюк, Н. В. Бренева //ЖМЭИ. -2003. -№ 3. -С.7−11.
  133. Чеснокова, М.В. ,. Опыт применения полимеразной цепной реакции (ПЦР) для ранней лабораторной диагностики спорадического псевдотуберкулеза./М.В.Чеснокова, В. Т. Климов, Н. В. Бренева. и др. //Эпидемиол., инфекц. бол. -2001. -№ 6. -С.22 -26.
  134. , Е.С. Актуальные вопросы фтизиопульмонологии. -Киев.- 1983.-С.92−93.
  135. , Н.З. Туберкулез крупного рогатого скота /Н.З.Хазипов, М. А. Сафин, Г. З. Идрисов. -М.:Агропромиздат, 1985. -127с.
  136. , P.M. Современные подходы к оценке основных этапов фагоцитарного процесса /Р.М.Хаитов, Б. В. Пинегин. // Иммунология. -1995. -№ 4. -С.27−32.
  137. Хамзин, Р. А. Иммуноферментный метод при диагностике туберкулеза крупного рогатого скота /Р.А.Хамзин, М. А. Сафин, К. И. Идрисова // Сб.науч.тр. КГВИ. Казань, 1985. -С.89- 95.
  138. , М.В. О дифференциации неспецифических реакций от специфических /М.В.Харитонов // Ветеринария. -1983. -№ 1.-С.30−31.
  139. , Л.М. Выделение атипичных микобактерий от нереагирующих на туберкулин животных /Л.М.Ходун, Л. В. Погуляева, Л. А. Ильиных //Ветеринария.-1990.-№ 6.-С.21−23.
  140. , Л.М. Дезинтеграция и фракционирование микобактерий ультразвуком низкой частоты / Л. М. Ходун //Сб.трудов КазНИВИ,-Алма-Ата, 1976.-Т. XVI.-C.187−193.
  141. , JI.M. Иммуноферментный анализ для диагностики туберкулеза животных. Приготовление реагентов тест-системы и методика постановки реакции //Методические рекомендации.-С)мск.-1990.-С.11.
  142. , Л.М. К вопросу дифференциации парааллергических и поствакцинальных туберкулиновых реакций у крупного рогатого скота //Сб.науч.тр.ВНИИБТЖ.-1988.-С. 15−20.
  143. , JI.M. Проблема серологической диагностики туберкулеза /Л.М.Ходун // Сб.науч.тр. ВНИИБТЖ. -Новосибирск, 1983.-С.119−127.
  144. , Л.М. Применение симультанной пробы с КАМ при диагностике туберкулеза /Л.М.Ходун, А. И. Лапшин, В. П. Курдюк, И. Н. Расторгуев, В, П. Доронин//Ветеринария.-1984.-№ 10.-С.25−27.
  145. , Л.М. Иммунопрофилактика и диагностика туберкулеза у телят /Л.М.Ходун //Сб.науч.тр. ВНИИБТЖ. Новосибирск, 1985.-c.21−24.
  146. Ходун, Л.М.Тест-система ELIZA для диагностики туберкулеза крупного рогатого скота и критерии оценки результатов метода //Разработка средств и методов борьбы с туберкулезом животных: Сб.науч.тр. /ВАСХНИЛ. ВНИИБТЖ. Новосибирск, 1990.-С. 10−24.
  147. , Л.М. Эпизоотическое значение крупного рогатого скота, реагирующего на повторное введение туберкулина /Л.М.Ходун, Ю. В. Мартынов, Л. В. Погуляева //Сб.науч.тр. ВНИИБТЖ. Новосибирск, 1987.-С.135−141.
  148. Ходун, Л. М. Современные проблемы научных исследований диагностики туберкулеза крупного рогатого скота / Л. М. Ходун //Сб.науч.тр.ВНИИБТЖ. -Омск, 1988. -С.89−95.
  149. , А.Г. Туберкулез органов дыхания / А. Г. Хоменко, М. М Авербах, А. В Александрова и др. -М.: Медицина, 1988. -С.61 -62.
  150. , Н.И. Диагностика туберкулеза крупного рогатого скота методом ИФА / Н. И. Цунская, Л. Т. Аппельганц //Система мер борьбы с туберкулезом с.х.животных: Сб.науч.тр. / ВАСХНИЛ. ВНИИБТЖ. -Новосибирск, 1991. -С.35−37.
  151. Шаров А. Н. Качество туберкулина из одного штамма M. bovis /А.Н.Шаров, В. С. Тырина, В. А. Алехин, В. М. Безгин //Ветеринария.-1984.-№ 10.-С.24−25.
  152. , А.Н. ПЦР при диагностике туберкулеза /А.Н.Шаров, Л. А. Ерошенко, И. П. Суханов и др. // БИО. -2002. -№ 12. -С.29−30.
  153. , А.Г. Экологические проблемы здоровья животных и пути их решения./ А. Г. Шахов, М. Н Аргунов, B.C. Бузлама //Ветеринария. -2003. -№ 5.-С. 5.
  154. , В.Н. Микрометод исследования сверхслабого свечения плазмы крови. /В.Н.Шилов //Тез. респ. конф. «Применение радиоэлектроники в исследовании сверхслабого свечения биологических объектов». -Киев, КВИРТУ, 1978.-С.111 113.
  155. , Э.Н. Иммунодиагностика и специфическая профилактика инфекционных болезней /Под ред. проф. Э. Н. Шляхова и канд. мед. наук С. А. Шварца. -Кишинев, «Штиинца», 1974. -С.45.
  156. , Е.И. Хемилюминометрия в дифференциальной диагностике округлых образований легких. /Е.И.Шуцкая, Ю. Г. Зелинский, J1.A. Куликова, О. Ф. Драников // Пробл. туб. -1979. -№ 1. -С. 42 45.
  157. , Н.И., Лейкоз у мышей и особенности его развития при воздействии ингибиторов цепных окислительных процессов./ Н. И. Эмануэль, Л. П. Липчина // -М.,. ДАН СССР, 121, 1958. -С.141 148.
  158. , М.К. Туберкулез сельскохозяйственных животных и птиц./М.К.Юсковец. -Минск: Сельхозиздат, 1965. 449 с.
  159. Ahnstrom, G. The study of hershoradische peroxidase catalyzed oxidations by means of chemiluminescence /G.Ahnsrtom, G. Ehrenstein, R. Nilsson //Acta chem.skand., 1961 .-V. 16.-P. 1417−1422.
  160. Boddinghaus, B. Detection and Identification of micobacteria by Amplification of RNA / B. Boddinghaus, T. Rogall, T. Flor, T. Blocker et al.// J.Clin.Microbiol. -1990. -Vol.28, N8. -P.1751−1759.
  161. Cheong, H.I. Diagnosis of Yersinia pseudotuberculosis infection by polymerase chain reaction. /H.I.Cheong, H.W. Park, J.W. Koo et al. //Pediatr.Infect. Dis.J., 1996,15 (7): 596 599.
  162. Cheung, Kee. Luminol- dependent chemiluminescence produced by neutrophils stimulated by immune complexes /Kee Cheung, Anna C. Archibald, Michael Robinson //Austral.J.Exp.Biol.and Med.Sci. -1984,62. -Vol. 4. -P.403 -419.
  163. Christman, M.F. Positive control of a regulon for defenses against oxidative srtess and ome heat shock proteins in Salmonella typhimurium./M.F.Christman, R.W. Morgan // Cell.-1985, 41. -P. 753 — 762.
  164. Commoner, R. Free radicals in biological materials /F.Commoner, I. Townsend, G.Pake./ Nature, 1954.-Vol. 174. -P.689−691.
  165. Daniel, T.M. The serodiagnosis of tuberculosis and other mycobacterial diseases by enzyme-linked immunosorbent assay /T.M.Daniel, S.M.Debanne //Am.respir.dis.-1987.-Vol. 136.-P. 1137−1151.
  166. Descamps-Latsha, M.-N.Fulux chemiluminescens micromounts ofwhole blood for investigation of the human fagocyteoxidative metabolism function. /В. Descamps-Latsha, R. M .Golub., B. Feuiller // Annal Immunol.(Inst.Pasteur.). -1982. -P. 19−32.
  167. Griffin, F. Nev Tb test cut control costs. Diagnosis no longe meams a visit to Heartbreak Hotel /F.Griffin // The deer Farmer. -1988.-№ 3. -P. 53 54.
  168. Hance, A.J.Detection and identification of mycobacteria by amplification of mycobacterial DNA /A.J.Hance, B. Grandchamp, V. Levy-Frebault, D. Lecossier et al.//Mol.Microbiol. -1988.-Vol.3.-P.843−849.
  169. Jackett, P. S., Macrophages and NK /P.S.Jackett, P. W Andrew, D. B Lowrie. //Cell. Regulation and function. -New York, 1982.
  170. , P. S. / P.S. Jackett, P.W. Andrew, V.R. Aber, D.P. Lowrie //Ibid.-1982.-P. 419−428.
  171. Jackett, P. S.Aber V.R., Lowrie D.B.// J. gen Microbiol. -1978. -Vol.104.-P.37−45.
  172. Jackett P. S., Aber V.R., Lowrie D.B.// Ibid. -I980.-Vol. 121.-P.381 386.
  173. Jones T.C., Hirsch J.G.// J.exp. Med. -1972. -Vol.136. -P. 1173 -1197.
  174. Goren M.B., Hart P.D.A., Young M.R., Amstrong J. A. //Proc.nat.Acad.Sci.U.S.A.-1976. -Vol.73. -P.2510 2514.
  175. Gordon A.N., Hart P.D.A., Young M.R. // Nature. -1980. -Vol.286. -P. 79 80.
  176. Kaneko, S. Detection of pathogenic Yersinia enterocolitica and Yersinia pseudotuberculosis from pork using the polymerase chain reaction./S.Kaneko, N. Ishizaki., Y. Kokudo // Contrib.Microbiol. Immunol.-1995.-Vol.13.-P. 153 155.
  177. Lowrie D.B., Jackett P. S., Ratchiffe N.A.// Nature. -1975. -Vol.254. -P. 600 602.
  178. Lowrie D.B., Aber V.R., Jackett P. S.// J.gen.Microbiol. -1979. -Vol.110.-P. 431 -441.
  179. Michaelis, L. The formation of semiguinones as intermediary reduction products from pycocyamide and other dyestuffss./L.Michaelis// J.Biol.Chem.-1931.-Vol.92. -P. 211 -232.
  180. Michaelis, L. Theory oxydation- reduction. The enzymes./ Eds: Summen J.B., Myrbacr К./ Acad.Press. -New York, 1951. P.21 27.
  181. Morris, Y.C. Immunoassay of field isolated of mycobacterium bovis and other mycobacteriaby use of monoclonal antibodies /Y.C.Morris, J. Ivanyi // J.Med.Microbiol.-1985 -Vol.19. P.367−373.
  182. Ristola, M. Luminol-enhanced chemiluminescense of whole blood. Statistical analysis and comparison of responses of different subjects /М. Ristola, H. Repo // APMIS.-1989, 97. -Vol. 6. -C. 503 512.
  183. Takeshige, K., Early events and stimulants triggering oxidative metabolism in neutrophils /К. Takeshige, S. Minakami // Jn. Cellular chemiluminescens. Boca Raton: CRC Press, 1987 v. l, p.113−129.
  184. Stocker, R. Oxidative Stress, Oxidants and antioxidants. /R.Stocker, 1. B. Frei.-London, 1991.
  185. Van Kessel Kok, P.M.Antibody-coated tarrrget cell membrane-induced chemiluminescence by human polymorphonuclear leukocytes. / P.M.Van Kessel Kok, A.G. Strijp Jos, Lia. M. Miltenburg., Henny J. Van Kats-Renaud, Add
  186. C. Fluit, Jan Verhoef // J.Immunol.Meth. -1989. -118, № 2. -P.279 -285.
  187. , L.G. Таксономические и генетические аспекты мирового распространения атипичных микобактерий //Тр.21-й Междун.конф.по туберкулезу.-1971 .-С. 145−147.
  188. Wolfsson, N. Lipid Peroxide Formation. /N.Wolfsson, K. M Wilbur., Heim Bern. -Exp.Cell.Research, 1956.-V.2. -P.556 558.
  189. Wills, E. D Mechanisma of lipid peroxide formation in tissues. Role of metals and haematin proteins in catalysis of unsaturated fatty acids./E.D.Mills //Biochim.et Biophys.-Acta, 1965.-Vol.2.-P.238.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!