Актуальность темы
За последнее десятилетие в силу неблагоприятно сложившихся экономических условий производства в сельском хозяйстве, в нашей стране произошло значительное снижение численности поголовья в различных отраслях животноводства, что неблагоприятно отразилось на количестве выпускаемой продукции. Так по данным ЦСУ (на апрель 2004 г.) в последние три года ежегодно поголовье крупного рогатого скота сокращается на 500 — 700 тыс., свиней на 1млн голов. В данных обстоятельствах выход, наряду с повышением сохранности поголовья, следует искать в совершенствовании методов регуляции репродуктивной функции животных. Одним из них является использование гормональных препаратов на основе гонадотропина сыворотки жеребых кобыл (СЖК), который эффективно применяют с целью повышения многоплодия в овцеводстве, свиноводстве, звероводстве, мясном скотоводстве, а также с целью синхронизации охоты и борьбы с некоторыми видами функционального бесплодия у самок сельскохозяйственных животных. (М.И.Прокофьев, 1979; В. К. Копытин, 1986;В. Е. Даровских, 1990; A.M. Чомаев, Ю. Д. Клинский, 2004). Препарат СЖК содержит гонадотропный гормон, который при введении животному стимулирует функцию половых желез, вызывает развитие дополнительных фолликулов при полноценном половом цикле и регулирует его фазы при некоторых формах бесплодия.
Заготовка сыворотки жеребых кобыл осуществляется в период с 40−45 по 90−100 день жеребости, когда в ней содержится максимальное количество гонадотропных гормонов. Однако, вследствие не совершенных методов определения гонадотропной активности, а также достоверно не изученных факторов прямо или косвенно влияющих на активность гонадотропина сыворотки, вопрос рационального использования животных реципиентов, улучшения качества, а также увеличения производства СЖК остается открытым, что в конечном итоге снижает экономическую эффективность использования препаратов изготовленных на основе СЖК. Все это требует более детального изучения причин влияющих на гонадотропную активность СЖК, а также совершенствования старых и разработки новых методов определения гонадотропина в сыворотке крови жеребых кобыл.
Цель и задачи исследований. Учитывая вышеизложенное, мы поставили перед собой цель — изучение факторов влияющих на биологическое качество получаемой СЖК и дальнейшее совершенствование технологии производства гонадотропного гормона.
Для достижения поставленной цели были поставлены следующие задачи:
1. Определить гонадотропную активность сыворотки крови жеребых кобыл в зависимости от индивидуальных особенностей продуцентов.
2.Изучить влияние условий содержания продуцентов на биологическое качество СЖК.
3.Определить оптимальные параметры эксплуатации кобыл-доноров.
4.Изыскать наиболее оптимальные и экономически целесообразные методы определения гонадотропной активности СЖК.
5.Провести анализ полученных данных и сформулировать выводы и практические предложения.
Научная новизна исследований. Впервые в качестве продуцентов ГСЖК использованы кобылки двухлетнего возраста. С целью преодоления сезонной гипофункции яичников у кобыл охота синхронизировалась с использованием гонадотропин содержащих препаратов. Для массовой заготовки СЖК в производственных условиях предложен и внедрен метод иммуноферментной диагностики активности гонадотропина сыворотки крови жеребых кобыл, а также проведена его сравнительная оценка с биологическим методом определения активности СЖК. Дано I технологическое обоснование выбора наиболее приемлемых продуцентов гонадотропина в условиях республики Башкортостан.
Практическая значимость работы. В условиях производства СЖК внедрен метод определения гонадотропной активности с наименьшими экономическими затратами и наибольшей достоверностью, что позволяет значительно повысить качество производимого гонадотропина из сыворотки жеребых кобыл.
Апробация работы. Результаты исследований доложены и одобрены на ученых советах Всероссийского государственного НИИ животноводства (2005 — 2006) — на объединенной конференции отдела эндокринологии, селекции молочного скота, лабораторий генетики животных и биохимии (2006). Материалы диссертации были представлены на III Международной научно-практической конференции «Современные технологические и селекционные аспекты развития животноводства России», Дубровицы (2005).
Публикации результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 3 работы.
Структура и объем диссертации
Диссертация изложена на 100 страницах компьютерной верстки, содержит 11 таблиц, 1 схему, 1 гистограмму, 2 графика. Структурно включает введение, обзор литературы, описание материалов и методов исследований, результаты собственных исследований, обсуждение результатов собственных исследований, выводы, практические предложения, список литературы, включающий 183 источника, из них 133 иностранных.
выводы.
1. Активность гонадотропина сыворотки крови жеребых кобыл возрастает с 39 до 71 дня жеребости с максимальным пиком активности у отдельного донора в 278 ИЕ/мл определенной биопробой на крысах, с последующим снижением до уровня 34 ИЕ/мл и ниже на сроке в 90 и более дней беременности.
2. С целью преодоления сезонной гипофункции и коррекции воспроизводительных качеств в переходный период между зимней анофродезией и сезоном размножения для полноценного использования кобыл в качестве продуцентов ГСЖК, применение препаратов на основе сывороточного гонадотропина является целесообразным. Это подтверждается тем, что экзогенное воздействие препаратов этой группы позволило приблизить сезон регулярной половой цикличности у кобыл.
3. Более высокая гонадотропная активность сыворотки обуславливается интенсивным обменом веществ, который характерен для особей с небольшой живой массой тела, а также для молодых животных. Оптимальный возраст использования кобыл в качестве продуцентов ГСЖК от 3 до 8 лет с живой массой тела 300 — 400 кг.
4. Генотип жеребцов оказывает значительное влияние на гонадотропную активность сыворотки крови кобыл. От беспородного жеребца Орлик у 4-х кобыл имелась средняя активность СЖК 45 ИЕ/мл, а от жеребцов русской рысистой породы (27 кобыл) средняя активность СЖК у покрытых ими кобыл колебалась от 65,2 до 84,5 ИЕ/мл. Самая высокая активность установлена от кобыл, покрытых жеребцом Малыш башкирской породы. Активность составила 96 ИЕ/мл (Р<0,05).
5. Гонадотропная активность сыворотки зависит также от фактора сезона случки, то есть взятие крови должно осуществляться в период наибольшей продолжительности светового дня, когда отрицательное действие эпифиза и секретируемого им мелатонина на выработку сывороточного гонадотропина минимально.
6. При более интенсивной эксплуатации кобыл, то есть с увеличением кратности взятия крови (до шести) происходит изменение гематологической картины в сторону снижения гемоглобина на 6,04г%, эритроцитов на 2,5 млн., лейкоцитов на 1,93 тыс., снижения форменных элементов крови при сдвиге лейкоцитарной формулы в сторону юных и палочкоядерных нейтрофилов. В связи с указанным рекомендуется использовать кобыл в качестве доноров не более 4−5 раз.
7. При определении активности сывороточного гонадотропина биологическим методом на крысах и иммуноферментным анализом установлена разница в показателях биологической активности, которая составила 12%, причем в сторону завышения данных по ИФА.
8. С целью повышения гонадотропной активности целесообразно использовать сурфагон в дозе 50 мкг на голову внутримышечно, однократно за 10−20 минут до взятия крови. При этом активность гонадотропина сыворотки увеличивается по сравнению с контролем в среднем на 4,5 ИЕ/мл, а экономическая эффективность от использования сурфагона за пять крововзятий от одной кобылы составляет 3335,7 рублей.
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.
С целью оптимизации производства сыворотки крови и повышения ее гонадотропной активности у кобыл — продуцентов ГСЖК рекомендуется:
1. Для повышения экономической эффективности заготовки ГСЖК использовать иммуноферментный метод определения биологической активности сывороточного гонадотропина.
2. Отбор крови для получения сыворотки у жеребых кобыл башкирской породы проводить в период 45 — 90 дней жеребости, когда активность сывороточного гонадотропина максимальна.
3. Для повышения биологической активности сывороточного гонадотропина, кобылам — продуцентам ГСЖК перед началом отбора крови, однократное внутримышечное введение синтетического аналога гонадотропин — рилизинг гормона сурфагона в дозе 10 мл (50мкг).