Влияние половых стероидов (этинилэстрадиола и левоноргестрела) на взаимодействие тромбин-фибриноген в кровотоке (экспериментальное исследование)

Актуальность исследований.

Гормональные препараты, содержащие эстрогенный и гестагенный компоненты, применяются достаточно широко для заместительной гормональной терапии или контрацепции [Geverse е.а., 1990; Brinton, 1996; Ranganatan е.а., 1996; Dusterberg, Brill, 1998; Simpkins J.W. е.а., 2005]. Однако уже в первые годы их использования возникли проблемы, связанные с побочными эффектами. Внимание к возможным побочным действиям сохранилось и к настоящему времени [К.Корн, 1998; В. Н. Серов, 1998;

B.А.Полякова, 1999; В. А. Полякова и др., 1999; А. Ш. Бышевский и др. 2005; Roy, 1999; Roy е.а., 1999; Salobir е.а., 2002; Stevenson е.а., 2004; Мою е. а., 2005]. Показано, что наряду с метаболическими сдвигами, свойственными половым стероидам или их аналогам, являющимся компонентами оральных контрацептивов, эти гормоны могут вызывать ряд осложнений [Bellinger, 1998; Roy, Liehr, 1999; Cucinelli е.а., 1999; Gennari L. е.а., 2005], в числе которых значатся нарушения системы гемостаза и сопряженные с этим патологические состояния — инсульт головного мозга, венозная тромбоэмболия, ишемическая болезнь сердца, субарахноидальные кровоизлияния [Р.Г.Бароян, 1997; А. А. Куземин, 1998; В. А. Полякова,.

C.В.Кудинов, 1999; С. И. Россошанская, 2005; Farmer, Preston, 1995; Herrington е.а., 1999; Peterson е.а., 1999; Sung е.а., 1999]. Добавим, что в повышении степени напряжения в системе гемостаза играют роль и повышенное накопление в кровотоке микровезикул, обладающих способностью ускорять тромбиногенез [Зубаирова Л.Д. и др., 2005 а, б].

Анализ литературы последних десятилетий выявил существенный вклад нарушений гемокоагуляции в развитие сердечно-сосудистых осложнений у женщин, использовавших оральные контрацептивы или прибегавших к заместительной гормональной терапии препаратами, содержащими эстрогенные и (или) гестагенные компоненты [А.А.Куземин,.

1998; А. Ш. Бышевский, 1999 а, бThorn е.а., 1977; Макацария А. Д., Бицад-зе В.О., 2005; Lindberg е.а., 1989; Norris ел., 1996; Cheung е.а., 1999; Wie-gratz I. е.а., 2004; Syed, Khosla, 2005].

Появление у таких пациенток гемокоагуляционных сдвигов или связанных с ними осложнений побудило клиницистов обратить особое внимание на изучение системы свертывания крови в связи с всё более расширяющимся использованием препаратов на основе эстрогенов и гестагенов [Gorodeski, 1994; Tranquilli е.а., 1995; Cushman е.а., 1999; Cummings е.а., 1999].

В последние годы появились сообщения о свойстве половых стероидов и их производных ускорять в организме процессы липидпероксидации [Э.А.Шабанов, 1999; В. В. Юдин, 2000 а, б, вП.Я.Шаповалов, 2001]. Активация перекисного окисления липидов сопровождается сдвигами гипер-коагуляционного характера [С.Л.Галян, 1993; Л. С. Лошкарева, 1999; И. А. Мухачева и др., 1999; И. Е. Попова, 1999; А. Ш. Бышевский и др., 2003; С. Ю. Мухачева и др. 2004]. В свою очередь это повысило заинтересованность исследователей к углубленному изучению роли изменений интенсивности липидперокидации /ЛПО/ под влиянием гестагенов или эстрогенов [В.Г.Соловьев, 1997; А. Ш. Бышевский и др., 1999 аГ.Х.Мирсаева, 1999; А. В. Соловьева, 1999; И. А. Мухачева и др., 1999; Thijs е.а., 2003].

В последние годы гемостазиологи обратили внимание и на то, что наклонность к тромботическим или геморрагическим осложнениям проявляется не только сдвигами содержания или активности отдельных компонентов гемостаза, но и сдвигами содержания соединений, уровень которых изменяется при ускорении (или замедлении) взаимодействия тромбин-фибриноген в кровотоке /ВТФ/ [И.Н. Бокарев, 2000 а, б, в- 2002; Д. М. Зубаиров, 2000; Пшеничникова Е. Б. и др., 2005]. Так, оказалось, что наклонность к геморрагии сочетается с замедлением ВТФ, наклонность к тромбозам, напротив, — с ускорением процесса [Salobir е.а., 2002; Stevenson е.а., 2004].

В условиях эксперимента судить о наклонности к тромбозам или ге-моррагиям, как это показано в разные годы, можно и по результатам пробы, известной под названием «толерантность к тромбину» [Б.А.Кудряшов, 1975; С. Л. Галян, 1994; В. Г. Соловьев, 1997; И. В. Ральченко, 1998; А.Ш.Бы-шевский, и др., 2000].

Чрезвычайно широкое применение половых стероидов или их аналогов в качестве оральных контрацептивов или средств заместительной гормональной терапии, наряду с данными об их влиянии на гемостаз, в частности, на содержание в кровотоке маркеров взаимодействия тромбин-фибриноген, а также их связь с липидпероксидацией, определили актуальность планируемого нами исследования.

Цель исследований Изучить в условиях эксперимента сдвиги содержания маркеров взаимодействия тромбин-фибриноген в плазме крови и изменения толерантности к тромбину при введении этинилэстрадиола и левоноргестрела, а также связь этих сдвигов с интенсивностью процессов липидпероксида-ции.

Задачи исследований.

1. Экспериментально изучить содержание продуктов взаимодействия тромбин-фибриноген в крогвотоке и прокоагулянтную активность тромбоцитов при введении этинилэстрадиола и левоноргестрела на фоне обычного рациона питания.

2. Изучить в условиях эксперимента содержание продуктов взаимодействия тромбин-фибриноген в плазме и толерантность к тромбину у животных, получавших этинилэстрадиол или левоноргестрел одновременно с антиоксидантом или прооксидантом.

3. Изучить изменения интенсивности взаимодействия тромбин-фибриноген и тромбоцитарного компонента гемостаза при совместном введении животным этинилэстрадиола и левоноргестрела на фоне антиоксидан-та или прооксиданта.

4. Изучить толерантность к тромбину у животных, получавших совместно этинилэстрадиол и левоноргестрел в зависимости от интенсивности липидпероксидации.

Научная новизна.

1. Впервые установлено, что при оральном введении этинилэстрадиола или левоноргестрела (совместно или раздельно) в плазме увеличивается содержание продуктов взаимодействия тромбин-фибриноген, и это сопровождается повышением активности тромбоцитов и общей свертываемости крови.

2. Установлено, что активация тромбоцитарного компонента гемостаза предшествует росту интенсивности взаимодействия тромбин-фибриноген, сопровождаясь ускорением процессов липидпероксидации и снижением антиоксидантного потенциала крови.

3. Установлено, что повышение содержания продуктов ВТФ, наблюдающееся при введении этинилэстрадиола и левоноргестрела (или обоих одновременно), сопровождается снижением толерантности к тромбину.

4. Показано, что предварительное введение прооксиданта потенцирует, а антиоксиданта — сдерживает сдвиги интенсивности ВТФ, прокоагулянт-ной активности тромбоцитов и толерантности к тромбину, вызываемые стероидами.

Практическая ценность работы Полученные данные обосновывают:

• представление о том, что рост содержания продуктов ВТФ указывает на наклонность к тромбообразованию;

• представление о связи тромбогеморрагических осложнений, вызываемых введением половых стероидов, с изменениями в коагуляционном и тромбоцитарном звеньях гемостаза, обусловленными свойствами этих гормонов ускорять липидпероксидацию;

• целесообразность углубленного изучения влияния антиоксидантов на гемостаз у женщин, прибегающих к оральной контрацепции или к заместительной гормональной терапии с помощью препаратов, содержащих половые стероиды.

На защиту вынесены следующие основные положения:

1.

Введение

: эстрогена (этинилэстрадиола) или гестагена (левоноргестрела) порознь сопровождается у экспериментальных животных повышением содержания в кровотоке индикаторов взаимодействия тромбин-фибриноген и ослаблением защитной реакции, возникающей в. условиях экзогенно вызываемой гипертромбинемии.

2. При совместном1 введении этих стероидов у экспериментальных животных возникают сходные по направленности и близкие по интенсивности изменения в гемостазе.

3. Изменениям, отражающим ускорение ВТФ, сопутствуют признаки усиления процессовлипидпероксидации и снижения антиоксидантного потенциала.

4.

Введение

одновременно с половыми стероидами димефосфона предупреждает ускорение липидпероксидации и снижение антиоксидантного потенциала, ограничивает изменения интенсивности ВТФ^{толерантности} к тромбину.

Апробацияи публикация. Основные положения диссертации доложены на Международных симпозиумах «Медицина и охрана здоровья» (Тюмень, 1998; 1999), на Региональной конференции биохимиков Урала^ Поволжья и Западной Сибири «Актуальные проблемы теоретической и прикладной биохимии» (Челябинск, 1999), на региональной конференции. «Пожилой человек на рубеже столетий, качество жизни» (Тюмень, 1999), на Международном конгрессе «Тромбоз, гемостаз, сосудистая патология» (International: congress of trombosis, hemostasis, vascular pathology, St. Peterburg, 2004), на 2-й Всероссийской конференции с международным участием «Клиническая гемостазиология и гемореология» (Москва, 2005).

По материалам диссертации опубликовано 9. работ.

Результаты работы экспериментально показали, что воздействия, активирующие липидпероксидацию и снижающие антиоксидантный потенциал тромбоцитов, ведут к ускорению взаимодействия тромбин-фибриноген в кровотоке и снижают толерантность к тромбину, т. е. повышают риск тромбообразования, и это следует учитывать при назначении препаратов, содержащих ЭЭ и ЛНГ.

Этим обусловлена целесообразность контроля содержания в периферической крови продуктов взаимодействия тромбин-фибриноген (ПДФ, РКМФ и особенно, D-димеров), что позволит выявить наклонность к тромбообразованию при использовании оральных гормональных контрацептивов или при заместительной гормональной терапии.