Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Сравнительная оценка антиоксидантной активности некрахмальных полисахаридов

Диссертация: Сравнительная оценка антиоксидантной активности некрахмальных полисахаридов
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Результаты оценки состояния систем перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты у животных, получавших оба полисахарида в дозе 50 мг/кг массы тела, показали статистически достоверные отличия по всем показателям по сравнению с группой «контрольная-2», за исключением уровня тиоловых групп (табл. 1, 2). В результате введения пектина содержание ТБК-активных продуктов в печени уменьшилось… Читать ещё >

Сравнительная оценка антиоксидантной активности некрахмальных полисахаридов (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ ФАРМАКОЛОГИЯ НЕКРАХМАЛЬНЫХ ПОЛИСАХАРИДОВ
    • 1. 1. Химическая структура и физико-химические свойства полисахаридов
    • 1. 2. Некрахмальные полисахариды и сердечно-сосудистые заболевания
    • 1. 3. Некрахмальные полисахариды и заболевания желудочно-кишечного тракта
    • 1. 4. Антибактериальные, противовирусные и иммуномодулирующие свойства некрахмальных полисахаридов
    • 1. 5. Связывание тяжелых металлов и радионуклидов некрахмальными полисахаридами

Актуальность проблемы. Проблемы лекарственной регуляции окислительного стресса и поиск фармакологически активных веществ, обладающих антиоксидантной активностью, по-прежнему остаются в центре внимания исследователей по различным направлениям экспериментальной и клинической фармакологии (Кения и др., 1993; Lewis et al., 2000; Kanner et al., 2001; Halvorsen et al., 2002; Matthaus, 2002; Ladas et al., 2004). В физиологических условиях окислительно-восстановительные процессы, обеспечивающие энергетические потребности клеток и утилизацию кислорода в тканях, контролируются регуляторными системами, поддерживающими сбалансированное взаимодействие реакций образования продуктов оксидации и антиокислительных факторов. Нарушение этого взаимодействия, которое сопровождается активацией свободно-радикальных процессов и накоплением продуктов перекисного окисления липидов, рассматривается в качестве универсального механизма повреждения биологических мембран (Gorman et al., 1999; Halliwell, 2001; Vertuani et al., 2004), лежащего в основе таких патофизиологических процессов, как воспаление, атерогенез и канцерогенез (Bounous, Molson, 2003), и является важным звеном в патогенезе атеросклероза (Heinecke, 1998; Азизова, 2000; Kaul et al., 2001), инфаркта миокарда (Klipstein-Grobusch et al., 1999), злокачественных опухолей (Kumaraguruparan et al., 2002; Saintot et al., 2002), перитонита (Konukoglu et al., 1999), хронического гломерулонефрита (Тугушева и др., 1994), острых и хронических интоксикаций тяжелыми металлами (Shaikh et al., 1999; Gaetke, Chow, 2003).

Установление роли окислительного стресса в развитии многих заболеваний свидетельствует о том, что эндогенная антиоксидантная система не обеспечивает в достаточной степени защиту клеток и тканей от повреждающего действия свободных радикалов. Поэтому вполне оправдан поиск новых подходов и средств подавления прооксидантных процессов и активации реакций антиоксидации (Fang et al., 2002; Schlesier et al., 2002; Violi et al., 2004).

Среди природных соединений, обладающих фармакологической активностью, обращают на себя внимание некрахмальные полисахариды, такие как соли альгиновой кислоты, пектины, фукоиданы, хитозан и каррагинаны. В той или иной степени они оказывают гипохолестеринемический (Miura et al., 1995; Knopp et al., 1999; Ylitalo et al., 2002), противоязвенный (Shibata et al., 1999; Ito et al., 2000; Yamamoto et al., 2000), антикоагулянтный (Huang et al., 2003; Mourao, 2004), энтеросорбционный (Соболев и др., 1999; Савченко, Хотимченко, 2002), иммуномодулирующий (Назарова и др., 1998; Pratt-Pearce, Phillips, 1996) и противовирусный (Ponce et al., 2003) эффекты. Некоторые из этих эффектов сопровождаются снижением уровня продуктов пере-кисного окисления липидов в крови экспериментальных животных (Хотимченко и др., 1997; Иванова, Янькова, 1998; Шевцова, 1999; Хотимченко и др., 20 006- Шевцова, 2000). Кроме того, показано, что экстракты из ряда бурых и красных водорослей, содержащие соединения полисахаридной природы, проявляют антиоксидантные свойства (Xue et al., 2001; Ruperez et al., 2002; Zhang et al., 2003). Эти данные наводят на мысль, что некрахмальные полисахариды могут обладать антиоксидантными свойствами. Проверке этого предположения и анализу возможных механизмов антиоксидантного действия некрахмальных полисахаридов посвящена настоящая работа.

Цель работы.

Цель работы состояла в сравнительной оценке и изучении механизмов антиоксидантной активности некрахмальных полисахаридов растительного и животного происхождения.

Задачи работы:

1. Экспериментально изучить эффекты альгинатов кальция и натрия, низкоэтерифицированного и высокоэтерифицированного пектинов, фукоида-на, хитозана и каррагинанов на модели окислительного стресса, вызванного индукторами перекисного окисления липидов у лабораторных животных.

2. Исследовать профилактические эффекты некрахмальных полисахаридов на модели окислительного стресса у лабораторных животных.

3. Исследовать антиоксидантное действие некрахмальных полисахаридов на модели Ре2±аскорбатиндуцированного перекисного окисления липи-дов в мембранах гепатоцитов здоровых животных и животных с экспериментальным окислительным стрессом.

4. В условиях in vitro изучить антиоксидантные эффекты некрахмальных полисахаридов по восстановлению трехвалентного железа (метод FRAP).

5. В условиях in vitro изучить антиоксидантные эффекты некрахмальл I ных полисахаридов по ингибированию Feаскорбатиндуцированного окисления твина-80 до малонового диальдегида.

6. Провести сравнительную оценку антиоксидантной активности некрахмальных полисахаридов и лекарственных препаратов-антиоксидантовмилдроната и эмоксипина.

Научная новизна. Впервые проведены сравнительные исследования антиоксидантных свойств некрахмальных полисахаридов, таких как натриевая и кальциевая соли альгиновой кислоты, пектины с разной степенью эте-рификации, каррагинаны, фукоидан и хитозан. Установлено, что исследованные полисахариды, за исключением высокоэтерифицированного пектина и каррагинанов, на различных моделях окислительного стресса у экспериментальных животных снижают интенсивность перекисного окисления липидов и способствуют нормализации показателей эндогенной антиоксидантной системы. На модельных системах in vitro, позволяющих судить о механизмах антиоксидантного действия тестируемых веществ, показано, что полисахариды обладают восстанавливающей активностью и ингибируют Fe2±аскорбатиндуцированное окисление твина-80 до малонового диальдегида. Впервые показано, что антиоксидантных эффект полисахаридов зависит от их структуры и физико-химических свойств.

Теоретическое и практическое значение работы. Полученные данные об антиоксидантных свойствах исследуемых веществ послужат базой для дальнейших исследований фармакологической активности некрахмальных полисахаридов. Эти сведения расширяют теоретические представления о закономерных связях структуры и физико-химических свойств органических соединений с фармакологической активностью. Они дополняют представления о фармакологической регуляции оксидативных процессов при патологических состояниях. Полученные данные могут стать основой для разработки новых лекарственных препаратов и биологически активных добавок к пище, предназначенных для применения в качестве антиоксидантных средств.

Апробация работы. Основные результаты исследования доложены и обсуждены на итоговой конференции Института биологии моря ДВО РАН (Владивосток, 2002, 2003), на X Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2003), на 2-ом съезде Российского научного общества фармакологов «Фундаментальные проблемы фармакологии» (Москва, 2003), на XI Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2004).

Материалы диссертации были доложены и обсуждены на заседаниях Семинара по морфологии, физиологии и биохимии Института биологии моря ДВО РАН. По результатам обсуждения диссертация была рекомендована к защите.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 6 печатных работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация выполнена на 138 страницах машинописного текста и состоит их введения, обзора литературы, описания материалов и методов, 3 глав результатов собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и списка литературы. Работа содержит 28 рисунков и 19 таблиц. Библиография состоит из 49 отечественных и 213 зарубежных источников.

выводы.

1. На модели окислительного стресса, индуцированного активаторами перекисного окисления липидов у крыс, пектины, альгинат кальция, фукои-дан и хитозан снижают уровень ТБК-активных продуктов и диеновых конъ-югатов в печени и крови, повышают уровень восстановленного глутатиона, тиоловых групп в печени и антиоксидантную активность плазмы крови.

2. Профилактическое введение экспериментальным животным альги-ната кальция и низкоэтерифицированного пектина дозо-зависимым образом ослабляет развитие окислительного стресса, вызванного тетрахлорметаном.

3. Низкоэтерифицированный пектин, альгинат натрия, альгинат кальция, фукоидан и суммарный препарат Хи к-каррагинанов при энтеральном введении интактным животным подавляют Ре2±аскорбатиндуцированное окисление липидов мембран гепатоцитов.

4. Низкоэтерифицированный пектин, альгинат натрия, альгинат кальция, фукоидан и суммарный препарат Хи к-каррагинанов при энтеральном введении животным с окислительным стрессом, вызванным ацетатом свинца, подавляют Ре2±аскорбатиндуцированное окисление липидов мембран гепатоцитов.

5. Восстанавливающая активность некрахмальных полисахаридов в условиях in vitro (метод FRAP) повышается в ряду: альгинат натрия, хитозан, низкоэтерифицированный пектин, высокоэтерифицированный пектин, суммарный препарат Хи к-каррагинанов, фукоидан, зостерин.

6. Некрахмальные полисахариды дозо-зависимым образом ингибируют Ре2±аскорбатиндуцированное окисление твина-80 до малонового диальдеги-да. Ингибирующая активность повышается в ряду: высокоэтерифицированный пектин, низкоэтерифицированный пектин, зостерин, альгинат натрия, альгинат кальция, фукоидан, хитозан.

Заключение

.

Представленный в обзоре материал свидетельствует о наличии у некрахмальных полисахаридов большого разнообразия фармакологических эффектов, таких как гипохолестеринемический, энтеросорбционный, антибактериальный, противовирусный, противоопухолевый, антикоагулянтный, противоязвенный, иммуномоделирующий. Один из механизмов действия полисахаридов может быть обусловлен их антиоксидантной активностью. Об этом свидетельствует ряд работ, демонстрирующих, что под влиянием пектинов и альгинатов происходит снижение уровня ТБК-активных продуктов и диеновых конъюгатов в сыворотке крови экспериментальных животных (Хо-тимченко и др., 1997; Иванова, Янькова, 1998; Шевцова, 1999; Хотимченко и др., 20 006- Шевцова, 2000). Эти данные наводят на мысль, что некрахмальные полисахариды могут обладать антиоксидантными свойствами. Однако в литературе практически отсутствуют сведения об антиоксидантной активности полисахаридов (Xue et al., 2001; Ruperez et al., 2002; Zhang et al., 2003), что и определило тему настоящей работы.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Общая характеристика экспериментальных животных.

Работа проводилась на 504 белых нелинейных крысах-самцах массой 130−200 г в начале экспериментов. Животных содержали в виварии ТИБОХ ДВО РАН. Во время экспериментальных исследований животные находились в специальных пластмассовых клетках со стружечной подстилкой по 34 в каждой. Животные имели 12-часовой цикл (день — ночь) содержания и свободный доступ к воде и пище. В состав стандартной диеты входили (г/100 г): казеин, 21,0- целлюлоза, 5,3- подсолнечное масло, 7,0- холестерин, 1,0- сахароза, 15,0- крахмал, 45,9- метионин, 0,3- минералы, 3,5 и смесь витаминов, 1,0. Все животные помимо сбалансированного рациона получали овес, хлеб, свежие овощи и фрукты, мел, а в зимнее время также были добавлены комплексные поливитаминные препараты.

Основные требования к содержанию, выбору и подготовке животных для экспериментов выполняли с принятыми в настоящее время рекомендациями. При разделении животных на группы проводили их ранжирование по массе тела с целью обеспечения идентичности указанных групп по данному показателю. Содержание животных, наркоз, декапитацию проводили в соответствии с рекомендациями Европейской конвенции по охране позвоночных животных (European., 1986).

2.2. Общая характеристика препаратов.

В работе были исследованы следующие препараты и вещества:

1. Низкоэтерифицированный пектин — порошок. Полимер галактуроно-вой кислоты. Концентрация чистого галактуронана в молекуле используемого пектина составляла 67,1%, степень этерификации около 2,5%. Свободные и метилированные карбоксильные группы расположены в случайном порядке. Характеристическая вязкость препарата составила 201 мл/г галактурона-иа. Молекулярный вес, вычисленный с помощью уравнения Марка-Куна.

ПК.

Хауинка, составлял в среднем 20 500 Да.

2. Высокоэтерифицированный пектин — порошок. Концентрация чистого галактуронана в молекуле пектина составляла 78%, степень этерификации около 61%. Свободные и метилированные карбоксильные группы расположены в случайном порядке. Характеристическая вязкость препарата составила 352 мл/г галактуронана. Молекулярный вес, вычисленный с помощью щ, уравнения Марка-Куна-Хауинка, составлял в среднем 224 кДа.

Низкоэтерифицированный и высокоэтерифицированный пектины были изготовлены ООО НПФ «Востокфарм» из пектина полученного от компании Copenhagen Pectin A/S, Lille Skensved, Дания. Пектины представляли собой мелкий однородный порошок кремового цвета с наличием частиц более светлого и более темного цвета. Массовая доля влаги в исследуемых образцах составляла не более 10%.

3. Зостерин-пектин из морской травы Zostera marina. Концентрация чистого галактуронана в молекуле пектина составляла 74,8%, степень этери-фикации около 5,7%, характеристическая вязкость 340 мл/г галактуронана.

4. Альгинат натрия — порошок. Полимер гулуроновой и маннуроновой кислот. Характеристическая вязкость 1270 мл/г галактуронана, молекулярная масса — 403 кДа. Альгинат натрия типа HV РС-35−0-351−0 был произведен компанией Kelco Div.

5. Альгинат кальция — порошок. Содержание уроновых кислот — 77,3%, содержание кальция — 72,5%. 82,5% карбоксильных групп представлены в виде кальциевой соли. Альгинат кальция был изготовлен ООО НПФ «Востокфарм» из альгината натрия.

6. Хитозан, выделенный их хитина панциря камчатского краба. Изготовлен ООО НПФ «Востокфарм».

7. Х-Каррагинан, выделенный из красной морской водоросли Chondrus crispatus, предоставлен Тихоокеанским институтом биоорганической химии ДВО РАН.

8. к-Каррагинан, выделенный из красной морской водоросли Chondrus crispatus, предоставлен Тихоокеанским институтом биоорганической химии ДВО РАН.

9. Суммарный препарат Хи к-каррагинанов, выделенный из красной морской водоросли Chondrus crispatus, предоставлен Тихоокеанским институтом биоорганической химии ДВО РАН.

10. Фукоидан, полученный из бурой водоросли Laminaria japonica. Изготовлен ООО НПФ «Востокфарм».

11. Агар бактериологический — порошок («Sigma», США). Представляет собой смесь агарозы и агаропектина.

12. Камедь карайи, выделенная из дерева рода Sterculia («Sigma», США). Представляет собой частично ацетилированный полимер, состоящий из остатков галактозы, рамнозы и глюкуроновой кислоты. Молекулярный вес в среднем составлял 9500 кДа.

13. Камедь рожкового дерева, выделенная из семян Ceratonia siliqua («Sigma», США). Представляет собой линейный полимер, состоящий из остатков маннозы, при этом каждый 4-й остаток маннозы имеет заместитель в виде галактозы. Молекулярный вес в среднем составлял 310 кДа.

14. Сахароза («ДиаэМ», Россия).

15. Глюкоза («ДиаэМ», Россия).

16. Эмоксипин — 1% раствор (ФГУП «Московский эндокринный завод», г. Москва). По химической структуре представляет собой 3-окси-б-метил-2-этил-пиридина гидрохлорид. Препарат относится к группе антиок-сидантов, обладающих ангиопротекторной, антигипоксической и антиагрега-ционной активностью (Клебанов и др., 2001).

17. Милдронат — 10% раствор (ПАО «Гриндекс», Латвия). Препарат представляет собой четвертичное аммониевое соединениепо химической структуре — это 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионат, который является аналогом у-бутиробетаина, предшественника карнитина. Препарат обладает антиоксидантной и антигипоксической активностью (Суслина и др., 2003).

2. 3. Методы оценки антиоксидантной активности некрахмальных полисахаридов.

Антиоксидантную активность исследуемых веществ определяли тремя способами. Во-первых, по их способности в условиях in vivo подавлять процессы пероксидации и активировать антиоксидантные механизмы при окислительном стрессе, вызванном различными активаторами перекисного окисления липидов у экспериментальных животных. Во-вторых, по способности исследуемых веществ тормозить Ре2±аскорбатиндуцированное перекисное окисление липидов мембран гепатоцитов в 0,05 М трисовом буфере (рН 7,4). В-третьих, по их способности восстанавливать Fe3+ in vitro (модифицированный метод FRAP) и ингибировать Ре2±аскорбатиндуцированное окисление твина-80 до малонового диальдегида.

На экспериментальных животных были проведены три серии опытов: по проверке лечебного действия (1 серия), профилактического действия (2 серия) и лечебно-профилактического действия (3 серия) некрахмальных полисахаридов на модели окислительного стресса, вызванного различными индукторами перекисного окисления липидов. В качестве индукторов перекисного окисления липидов использовали следующие вещества: тетрахлорметан (ССЦ), ацетат свинца и этанол. Указанные вещества вводили внутрижелу-дочно, натощак, за 1 ч до кормления животных. Ацетат свинца растворяли в дистиллированной воде, а тетрахлорметан — в оливковом масле. Интактные животные получали обычную виварийную пищу.

Для исследования лечебного действия некрахмальных полисахаридов был проведен ряд экспериментов. В первом опыте крысам с окислительным стрессом, вызванным введением 1,0 мл тетрахлорметана в дозе 300 мг/кг массы тела животного в течение 7 дней, энтерально водили 1,0 мл раствора низкоэтерифицированного пектина и альгината кальция в дозах 10, 50 и 250 мг/кг массы тела, а фукоидана, хитозана, Х-каррагинана и к-каррагинана в дозе 200 мг/кг массы тела в течение 21 дня. Во втором опыте крысам с окислительным стрессом, вызванным введением ацетата свинца в дозе 100 мг/кг в течение 15 дней, внутрижелудочно вводили раствор низкоэтерифицированного пектина в дозе 200 мг/кг массы тела в виде 1% геля в течение 15 дней. В третьем эксперименте лабораторным животным в начале вводили ацетат свинца в дозе 100 мг/кг массы тела в течение 20 дней, а затем раствор низкоэтерифицированного пектина в дозе 200 мг/кг массы тела в виде 1% геля в течение 14 и 28 дней.

Для исследования профилактического действия полисахаридов крысам в начале эксперимента вводили внутрижелудочно 1,0 мл раствора низкоэтерифицированного пектина и альгината кальция в дозах 10, 50 и 250 мг/кг массы тела за 1 час до кормления в течение 21 дня, а на 22 день — тетрахлор-метан в дозе 300 мг/кг за 1 час до кормления в течение 7 дней.

Для исследования лечебно-профилактического действия полисахаридов крысам ежедневно в течение 7 дней вводили 1% раствор пектина-зостерина в дозе 100 мг/кг массы тела, а через 1ч- 40% раствор этилового спирта в дозе 7 мл/кг.

По завершении экспериментов животных декапитировали под легким эфирным наркозом, собирали кровь, извлекали печень и хранили их при -20°С до проведения анализов.

Для определения в печени животных содержания продуктов перекис-ного окисления липидов, взаимодействующих с 2-тиобарбитуровой кислотой (ТБК-активные продукты), после индукции перекисного окисления липидов системой Беаскорбат брали навеску печени, промывали физиологическим раствором, гомогенизировали при 0−4°С в 50 мМ трис-НС1 буфере (рН 7,4) и центрифугировали при 10 000% в течение 10 мин. В супернатанте определяли концентрацию белка. К супернатанту добавляли 10 мкМ раствор Бе и 0,5 мМ раствор аскорбиновой кислоты, затем смесь инкубировали в течение 30 мин в водяном термостате при 37 °C при постоянном перемешивании. Через is I.

30 мин с момента добавления прооксидантов (10 мкМ раствор Fe и 0,5 мМ раствор аскорбиновой кислоты) из смеси отбирали аликвоту в 1,0 мл и реакцию останавливали добавлением к ней 1,0 мл 30% раствора трихлоруксусной кислоты (ТХУ) и 1,0 мл 0,75% тиобарбитуровой кислоты (ТБК). Полученную смесь перемешивали и нагревали в горячей водяной бане в течение 15 мин, а затем центрифугировали 10 мин при 3000 об/мин. Содержание ТБК-активных продуктов (ТБК-АП) в надосадочной жидкости определяли спектрофотомет-рически при длине волны 532 нм, используя молярный коэффициент экстин-ции 8=1,56×105 М*1 см* (Владимиров, Арчаков, 1972).

Для определения способности некрахмальных полисахаридов в уело-виях in vitro ингибировать Feаскорбатиндуцированное окисление твина-80 до малонового диальдегида к 2,0 мл 1% твина-80 добавляли 0,2 мл 1 мМ раствора FeS04 • 7НгО, 0,2 мл 10 мМ раствора аскорбиновой кислоты и 0,2 мл 0,1%, 0,5% или 1% раствора полисахарида, в контрольную пробу — соответствующее количество дистиллированной воды. Смесь инкубировали 48 ч при 37 °C, затем к 2,0 мл смеси приливали 1,0 мл 40% раствора ТХУ, выдерживали 60 мин и центрифугировали при 8000 об/мин 15 мин. После этого к 1,0 мл надосадочной прибавляли 2,0 мл 0,25% раствора ТБК и кипятили в водяной бане в течение 15 мин. Оптическую плотность раствора измеряли при длине волны 532 нм против дистиллированной воды. Расчет проводили по формуле:

А, где Dk и D" - оптическая плотность соответственно контрольной и опытной проб (Галактионова и др., 1998).

Для определения восстанавливающей способности полисахаридов in vitro (модифицированный метод FRAP), к 0,3 мл свежеприготовленного реагента (0,5 мкМ раствор FeCb • 6Н20, 0,25 мкМ раствор 2,4,6-трипиридил-8.

РОССИЙСХАЯ 'ГОСУДАРСТВЕННАЯ 41 БИШЮТЕКА триазина в 1 мкМ НС1 и 75 мкМ ацетатный буфер (рН 3,6)) добавляли 0,04 мл 0,1%, 0,5% или 1% раствора полисахарида или дистиллированной воды. Восстановительную способность определяли спектрофотометрически по количеI ству образовавшегося в течение 60 мин окрашенного комплекса Fe с 2,4,6-трипиридил-Б-триазином при длине волны 593 нм (Benzie, Strain, 1996).

2.4. Биохимические методы.

Содержание уроновых кислот определяли колориметрическим ш-гидроксидифениловым методом (Blumenkrantz, Asboe-Haunsen, 1973).

Степень этерификации пектинов устанавливали титриметрическим методом (Афанасьев и др., 1984).

Характеристическую вязкость определяли в смеси 0,05 М раствора NaCl и 0,005 М раствора оксалата натрия при температуре 25 °C и рН 6,0, использую вискозиметр Уббелода. Характеристическая вязкость связана с молекулярным весом империческим уравнением Марка-Куна-Хауинка (Krav-tchenko, Pilnik, 1990).

Содержание первичных продуктов перекисного окисления — диеновых конъюгатов (ДК) ненасыщенных жирных кислот — определяли по характерному спектру поглощения раствора липидов в смеси изопропанол-гептан. К 0,2 мл плазмы крови приливали 4,0 мл смеси изопропанол-гептан (1:1), встряхивали 10−15 мин на шейкере, прибавляли 1,0 мл раствора НС1 (рН 2,0), 2,0 мл гептана и интенсивно встряхивали. Через 20−30 мин отбирали верхний гептановый слой, в котором измеряли оптическую плотность при длине волны 233 нм (Гаврилов, Мишкорудная, 1983).

Для определения в печени экспериментальных животных содержания продуктов перекисного окисления липидов, взаимодействующих с 2-тиобарбитуровой кислотой (ТБК-активные продукты), навеску печени промывали физиологическим раствором, гомогенизировали при 0−4°С в 50 мМ трис-HCl буфере (рН 7,4) и центрифугировали при 10 000 g в течение 10 мин.

В супернатанте определяли концентрацию белка. К 1,0 мл супернатанта добавляли 1,0 мл 30% раствора ТХУ и 1,0 мл 0,75% раствора ТБК. Полученную смесь перемешивали и нагревали в горячей водяной бане в течение 15 мин, а затем центрифугировали 10 мин при 3000 об/мин. Содержание ТБК-АП в на-досадочной жидкости определяли спектрофотометрически при длине волны 532 нм, используя молярный коэффициент экстинции ?=1,56×105 М" 1 см (Владимиров, Арчаков, 1972).

Содержание ТБК-АП в плазме крови экспериментальных животных определяли следующим образом. К 0,3 мл плазмы крови добавляли 3,0 мл 30% раствора ТХУ, 1,0 мл 0,65% раствора ТБК и 2,5 мл 0,05 М раствора сульфата натрия. Полученную смесь нагревали в горячей водяной бане в течение 15 мин, а затем центрифугировали 5 мин при 3000 об/мин. Количество ТБК-АП в надосадочной жидкости определяли спектрофотометрически при длине волны 532 нм, используя молярный коэффициент экстинции е=1,56×105М" 1см" 1 (Saton, 1978).

Для измерения восстановленного глутатиона (TSH) навеску печени гомогенизировали в 50 мМ трисНС1 буфере (рН 7,5) при 0−4°С и центрифугировали при 10 000 g в течение 10 мин. Затем к 1,0 мл супернатанта приливали 0,12 мл 50% раствора ТХУ, пробу ставили на 30 мин на холод и потом центрифугировали 10 мин при 10 000 g. К 0,2 мл супернатанта приливали 1,8 мл 0,2 М трис-HCl (рН 8,5), 0,02 мл раствора Эллмана и определяли оптическую плотность раствора при длине волны 412 нм (Moron et al., 1979).

Содержание тиоловых групп (SH-группы) в печени животных определяли следующим образом. Из смеси содержащей 3,0 мл белкового центрифу-гата, 2,0 мл 0,2 М фосфатного буфера (рН 8,0) и 5,0 мл дистиллированной воды отбирали аликвоту в 3,0 мл и добавили 0,02 мл реактива Эллмана. Через 2 мин измеряли оптическую плотность пробы при длине волны 412 нм (Торчинский, 1971).

Оценку показателя интегральной антиоксидантной активности (АОА) плазмы крови проводили методом с применением желточных липопротеи-дов. Суспензию желточных липопротеидов получали путем гомогенизирования желтка куриного яйца, содержащего два типа липидно-белковых комплексов, соответствующих по липидному и белковому составу липопротеи-дам очень низкой и низкой плотности плазмы крови, в равном объеме раствора, содержащего 40 мМ фосфатный буфер (рН 7,45) и 105 мМ КС1. Полученную суспензию перед использованием разводили в 25 раз тем же буфером. Анализ проводили следующим образом. К 1,0 мл суспензии желточных липопротеидов добавляли 1,0 мл плазмы крови и 7,0 мл фосфатного буфера (рН 7,45). Перекисное окисление липидов во всех пробах инициировали добавлением 1,0 мл 25 мМ раствора БеБОд • 7НгО, который готовили перед употреблениемконечный объем пробы составлял 10,0 мл. Контрольная проба плазму крови не содержала. В нулевую пробу добавляли только фосфат.

Л I ный буфер (рН 7,45) и раствор Бе. Пробы инкубировали при 37 °C в течение 15 мин при интенсивном перемешивании. Скорость перекисного окисления липидов определяли по количеству накопленных в образце продуктов, реагирующих с ТБК. После инкубации отбирали по 2,0 мл из каждой пробы, приливали по 1,0 мл 20% ТХУ и 0,1 мл.

10″ 'М ионола в этаноле. Содержимое пробирок перемешивали и центрифугировали 15 мин при 900 К 2,0 мл полученного супернатанта добавляли 1,8 мл ТБК-реагента (0,5% раствор ТБК в 0,3% растворе додецилсульфата натрия). Смесь инкубировали в кипящей бане в течение 15 мин, пробирки охлаждали, добавляли по 2,0 мл хлороформа и после интенсивного встряхивания вновь центрифугировали при тех же условиях. В водной фазе измеряли оптическую плотность контрольной и опытных проб против контрольной пробы при длине волны 532 нм. Антиокси-дантную активность плазмы крови рассчитывали по формуле:

АЛк-Ай АОА = —-га- -100%,.

ДА, где ADK =D'K-D°, ADM = Z>° , — оптическая плотность, измеренная в суспензии желточных липопротеидов с плазмой крови до инкубацииD’K, Dl, — оптическая плотность, измеренная в тех же образцах в момент времени t (через 15 мин инкубации). Измерение ADK и ADM было необходимо для того, чтобы учесть исходную степень окисленности суспензии желточных липопротеидов и плазмы крови (Клебанов и др., 1988).

Активность аланинаминотрансферазы (AJIT) и аспартатаминотрансфе-разы (ACT) в плазме крови определяли с помощью наборов реактивов «Jla-хема» (Чехия). 0,25 мл субстратно-буферных растворов для определения АЛТ или ACT нагревали 5 мин при 37 °C, затем добавляли 0,05 мл плазмы крови и инкубировали 60 мин при 37 °C. К смеси добавляли 0,25 мл раствора 2,4-динитрофенилгидразина и выдерживали 20 мин при комнатной температуре. После этого добавляли 2,5 мл 0,4 н. раствора NaOH, тщательно перемешивали и спустя 10 мин измеряли оптическую плотность раствора при длине волны 520 нм.

Содержание общего и конъюгированного билирубина в плазме крови определяли с помощью наборов реактивов фирмы «Лахема» (Чехия).

Содержание общих липидов в печени животных определяли, добавляя к 0,2 мл центрифугата печени порциями, периодически встряхивая, 3,8 мл смеси Блюра (3 части 96° этилового спирта и 1 часть сернокислого эфира). Затем содержимое пробирки встряхивали 2−3 мин и погружали на 20 с в кипящую водяную баню. После охлаждения восстанавливали первоначальный объем (4,0 мл) смесью Блюра и профильтровывали смесь через бумажный фильтр. К 2,0 мл фильтрата прибавляли 10,0 мл 1% раствора серной кислоты. Через 60 мин измеряли оптическую плотность раствора при длине волны 434 нм (Портяная и др., 1990).

Гликоген в печени лабораторных животных измеряли с антроновым реактивом (Van Handel, 1965), используя глюкозу в качестве стандарта.

Содержание общего холестерина (ХЛ) в плазме крови определяли с помощью наборов реактивов фирмы «Вектор-Бест» (Россия).

Содержание триглицеридов (ТГ) в плазме крови определяли с помощью наборов реактивов фирмы «Ольвекс Диагностикум» (Россия).

Содержание белка определяли по методу Гринберга (Greenberg, Gad-dock, 1982).

2.5. Статистическая обработка результатов.

Статистическую обработку результатов проводили с помощью программы «Statistica, v. 5. О». Для статистического анализа и обработки результатов исследования рассчитывали средние арифметические величины и ошибки средних арифметических. Оценку достоверности различия результатов экспериментальных наблюдений производили в сравнении с контролем с применением t-критерия Стьюдента для малых величин (п < 30). Уровень значимости считали достоверным при р < 0,05 (Гублер, 1978).

Г л, а в, а 3. ОЦЕНКА АНТИОКСИДАНТНОЙ АКТИВНОСТИ НЕКРАХМАЛЬНЫХ ПОЛИСАХАРИДОВ В УСЛОВИЯХ IN VIVO НА ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ С ОКИСЛИТЕЛЬНЫМ.

СТРЕССОМ.

Эксперименты по исследованию антиоксидантного действия некрахмальных полисахаридов животного и растительного происхождения проводились на экспериментальных животных, которых разделяли на группы: ин-тактные, контрольные и экспериментальные. Интактные животные (негативный контроль) получали обычную пищу вивария на протяжении каждого эксперимента. Животным контрольных групп (позитивный контроль) энте-рально с помощью зонда вводили различные индукторы перекисного окисления липидов, такие как тетрахлорметан, ацетат свинца и этанол. У каждого из этих веществ механизмы начального повреждающего действия различны, но в конечном итоге все они активируют перекисное окисление липидов. Животным экспериментальных групп внутрижелудочно вводили один из индукторов перекисного окисления липидов и исследуемые полисахариды в виде растворов и суспензий.

По завершении экспериментов животных декапитировали под легким эфирным наркозом, собирали кровь и извлекали печень.

Для оценки процессов перекисного окисления липидов определяли содержание диеновых конъюгатов в плазме крови и ТБК-активных продуктов в печени и плазме крови. О состоянии системы антиоксидантной защиты судили по показателю интегральной антиоксидантной активности плазмы крови, содержанию в печени восстановленного глутатиона и тиоловых групп. Для оценки функционального состояния печени в плазме крови определяли содержание общего и конъюгированного билирубина, активность аланинами-нотрансферазы и аспартатаминотрансферазы. О нарушении жирового и углеводного обмена судили по содержанию в печени общих липидов и гликогена, а в плазме крови — общего холестерина и триглицеридов.

Поражение печени, вызванное 7-дневным введением тетрахлорметана в дозе 300 мг/кг массы тела, приводило к достоверным изменениям всех регистрируемых биохимических показателей. Уровень диеновых конъюгатов в плазме крови повысился в среднем на 78,7−163,1%, ТБК-активных продуктов в печени — на 141,6−243,5%, в плазме крови — на 177,0−250,1%. Содержание восстановленного глутатиона и тиоловых групп уменьшилось в среднем на 56,3−69,3% и 46,7−54,0% соответственно. Антиоксидантная активность плазмы крови упала более чем в 2 раза по сравнению с интактными животными-1 (табл. 1, 2, 3, 10, 11). В плазме крови происходило значительное повышение активности аланинаминотрансферазы и аспартатаминотрансферазы, в среднем в 5,0−7,0 и 6,4−11,4 раза соответственно, а также возрастал уровень общего и конъюгированного билирубина, в среднем в 2,5−4,5 и 2,6—4,7 раза соответственно. Содержание общих липидов в печени увеличилось на 201,3%, а содержание гликогена уменьшилось в среднем на 67,0−71,2% (табл. 4, 5, 6, 12, 13).

Введение

ацетата свинца в дозе 100 мг/кг массы в пересчете на металл в течение 15 и 21 сут приводило к заметным изменениям регистрируемых биохимических показателей. Уровень ТБК-активных продуктов в печени повысился в среднем на 96,2−151,6%, тогда как содержание восстановленного глутатиона и тиоловых групп уменьшилось в среднем на 53,4−55,8% и 46,152,9% соответственно. Содержание в плазме крови общего холестерина и триглицеридов увеличилось в среднем на 22,3−30,6% и 13,3−31,9% соответственно (табл. 7, 8,9).

7-дневное введение 40% этанола в дозе 7 мл/кг массы тела способствовало повышению уровня ТБК-активных продуктов в плазме крови на 19,1% и в печени — на 80,4%. Содержание общего холестерина и триглицеридов в плазме крови увеличилось на 62,0% и 59,0% соответственно (табл. 14).

В последующие 14−28 сут после прекращения введения индукторов пе-рекисного окисления липидов существенных положительных сдвигов регистрируемых биохимических показателей печени и плазмы крови, как правило, не происходило (контрольная-1), что свидетельствует об отсутствии самоизлечения подопытных животных за указанный период времени.

На экспериментальных животных были проведены три серии опытов: по проверке лечебного действия (1 серия), профилактического действия (2 серия) и лечебно-профилактического действия (3 серия) некрахмальных полисахаридов на модели окислительного стресса, вызванного различными индукторами перекисного окисления липидов.

3.1. Оценка лечебного действия некрахмальных полисахаридов на модели окислительного стресса.

После 7-дневного введения тетрахлорметана животные всех групп получали стандартную виварную пищу в течение 4 дней. Начиная с 5 дня экспериментальной группе животных вводили с помощью зонда растворы низ-коэтерифицированного пектина и альгината кальция в течение 21 дня. На фоне развившегося окислительного стресса пероральное введение исследуемых полисахаридов в различных дозах по-разному отразилось на процессах пероксидации липидов и антиоксидантных функциях организма животных. Так, введение низкоэтерифицированного пектина и альгината кальция в дозе 10 мг/кг массы тела, с одной стороны, повысило антиоксидантную активность плазмы крови соответственно на 31,3% и 23,6%, а с другой стороны, понизило уровень ТБК-активных продуктов в плазме крови на 33,5% и 22,6% соответственно по сравнению с группой «контрольная-2». На остальные биохимические показатели состояния печени и плазмы крови, как пектин, так и альгинат в указанной дозе существенно не повлияли.

Результаты оценки состояния систем перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты у животных, получавших оба полисахарида в дозе 50 мг/кг массы тела, показали статистически достоверные отличия по всем показателям по сравнению с группой «контрольная-2», за исключением уровня тиоловых групп (табл. 1, 2). В результате введения пектина содержание ТБК-активных продуктов в печени уменьшилось на 29,0%, ТБКактивных продуктов и диеновых конъюгатов в плазме крови — на 46,5% и 38,1% соответственно, тогда как уровень восстановленного глутатиона и ан-тиоксидантная активность плазмы крови повысились на 116,1% и 38,0% соответственно (табл. 1). Под влиянием альгината кальция происходило снижение уровня ТБК-активных продуктов в печени и плазме крови на 48,9% и 38,0% соответственно, а диеновых конъюгатов в плазме — на 50,0%. Уровень восстановленного глутатиона и антиоксидантная активность плазмы крови были выше, чем в группе «контрольная-2», на 66,7% и 55,4% соответственно (табл. 2).

Введение

пектина и альгината кальция в дозе 250 мг/кг массы тела приводило к более выраженным изменениям всех регистрируемых показателей по сравнению с аналогичными параметрами в группе «контрольная-2». Об ослаблении процессов перекисного окисления липидов под действием пектина и альгината кальция свидетельствовало снижение уровня ТБК-активных продуктов в печени соответственно на 46,0% и 53,9%, ТБК-активных продуктов в плазме крови — на 55,8% и 49,6%, диеновых конъюгатов в плазме — на 45,4% и 32,0% и, напротив, повышение уровня восстановленного глутатиона на 174,7% и 122,4%, тиоловых групп — на 41,7% и 45,6% и антиоксидантной активности плазмы крови — на 67,6% и 73,2% соответственно (табл. 1,2) указывало на активацию антиперекисных механизмов.

Хитозан и фукоидан в дозе 200 мг/кг массы тела снижали уровень ТБК-активных продуктов в печени соответственно на 25,9% и 48,4%, а диеновых конъюгатов в плазме крови — на 31,8% и 40,8%. Лямбда и каппа каррагинаны ни на один из регистрируемых показателей не повлияли (табл. 3).

Введение

исследуемых полисахаридов также дозо-зависимым образом повлияло на показатели функционального состояния печени. В группе животных, получавших низкоэтерифицированный пектин в дозе 10 мг/кг массы тела, только содержание гликогена было достоверно большим на 33,4%, чем в группе «контрольная-2». Альгинат кальция в этой же дозе на показатели состояния печени не повлиял.

Показать весь текст

Список литературы

  1. O.A. Роль окисленных липопротеидов в патогенезе атеросклероза // Эфферентная терапия. 2000. — Т. 6, № 1. — С. 24−31.
  2. Н.М., Подкорытова A.B., Корзун В. Н. Влияние альгино-вой кислоты и ее солей на динамику накопления 85Sr и 137Cs в организме крыс // Радиационная биология. Радиоэкология. 1994. — Т. 34, № 4−5. — С. 703−712.
  3. О.Г., Беззубов А. Д., Хатина А. И. Связывание и выведение свинца из организма под влиянием пектина // Токсикология новых промышленных химических веществ. М., 1961. — Вып. 2. -С. 148−165.
  4. С.П., Чирва В. Ю., Кацева Г. Н. и др. Модификация титри-метрического метода анализа пектиновых веществ // Химия природ, соединений. 1984. — № 4. — С. 428−431.
  5. М.В. Ишемические и реперфузионные повреждения органов. М.: Медицина, 1989. — 367 с.
  6. В.Н. Свободнорадикальное окисление в патогенезе заболеваний, сопряженных со старением // Пат. физиол. и экспер. терапия. 1989. -№ 5.-С. 90−94.
  7. В.Н., Почерняева В. Ф., Стародубцев С. Г. и др. Специфичность систем антиоксидантной защиты органов и тканей основа дифференцированной фармакотерапии антиоксидантами // Экспер. и клин, фармакол. -1994. — Т. 57, № 1. С. 47−54.
  8. О.В., Любицкий О. Б., Клебанов Г. И., Владимиров Ю. А. Действие антиоксидантов на кинетику цепного окисления липидов в липосо-мах // Биол. мембраны. 1998. — Т. 15, № 2. — С. 177−183.
  9. Ю.А., Арчаков А. И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М.: Наука, 1972. — 252 с.
  10. О.Н. Общие проблемы биологии. Т. 5. М. — 1986. --С. 163−201.
  11. В.Б., Мишкорудная М. И. Спектрофотометрическое определение содержания гидроперекисей липидов в плазме крови // Лаб. дело. -1983. -№ 3.- С. 33−35.
  12. Л.П., Молчанов A.B., Ельчанинова С. А., Варшавский Б. Я. Состояние перекисного окисления у больных с язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки // Клин. лаб. дианостика. 1998. — № 6. -С. 10−14.
  13. Прш C.B. Сумюна д1я ксенобютиюв на стан антиоксидантно1 сис-теми организму // Укр. 6ioxiM. журн. 1999. — Т. 71, № 1. — С. 103−108.
  14. Е.В. Вычислительные методы анализа и распознавания патологических процессов. Л.: Медицина, 1978. — 296 с.
  15. Т.С., Беседнова H.H., Лямкин Г. П. и др. Антибактериальная и терапевтическая эффективность пектина из морской травы Zostera II Антибиотики и химиотерапия. 1991. — № 4. — С. 24−26.
  16. И.Л., Янькова В. И. Влияние пектина морского происхождения в комплексе с минеральными водами на антиоксидантную систему крови при экспериментальной гиперлипидемии // Вопр. питания. 1998. — № 4.-С. 36−38.
  17. М.В., Лукаш А. И., Гуськов Е. П. Роль низкомолекулярных антиоксидантов при окислительном стрессе // Успехи соврем, биологии. -1993.-Т. 113,№ 4.-С. 456−470.
  18. Г. И., Бабенкова И. В., Теселкин Ю. О. и др. Оценка антиокислительной активности плазмы крови с применением желточных липо-протеидов // Лаб. дело. 1988. — № 5. — С. 59−62.
  19. Г. И., Любицкий О. Б., Васильева О. В. и др. Антиокси-дантные свойства производных 3-оксипиридина: мексидола, эмоксипина и проксипина // Вопр. мед. химии. 2001. — Т. 47, № 4. — С. 288−300.
  20. Г. К., Членов М. А., Кирьянов A.B. и др. Модифицированный альгинат кальция — высокоэффективное средство выведения радиоактивного стронция // Радиобиология. 1992. — Т. 32, № 1. — С. 126−129.
  21. В.И., Колесниченко JI.C. Биологическая роль глутатио-на // Успехи соврем, биологии. 1990. — Т. 110, № 1. — С. 20−33.
  22. Г. Е., Коршун М. Н., Швайко И. И. Исследование защитных свойств пектина при экспериментальной ртутной интоксикации // Рациональное питание. 1971. — Вып. 9. — С. 101−103.
  23. Д.Д., Лазарева Е. Б., Попова Т. С. и др. Антимикробные свойства пектинов и их влияние на активность антибиотиков // Антибиотики и химиотерапия. 1997. — Т. 42, № 12. — С. 10−15.
  24. Е.Б., Зенков Н. К. Антиоксиданты и ингибиторы радикальных окислительных процессов // Успехи соврем, биологии. 1993. — Т. ИЗ, № 4.-С. 442−455.
  25. И.Б. Основы рациональной фармакотерапии. СПб.: Фолиант, 1999. — 480 с.
  26. И.В., Шевченко Н. М., Ковалев Б. М., Хотимченко Ю. С. Иммуномодулирующие свойства полисахаридов из красных водорослей: влияние на систему комплемента // Биол. моря. 1998. — Т. 24, № 1. — С. 4952.
  27. A.M., Лямкин Г. П., Артюков A.A. и др. Изучение фармако-кинетики зостерина пектина из морской травы Zostera marina II Докл. АН СССР. — 1990. — Т. 315, № 1. — С. 232−235.
  28. Н.И., Осипенко Б. Г., Москадынова П. А., Новохатская Н. К. Биохимические исследования в токсилогическом эксперименте. Иркутск: Изд-во Иркутского университета, 1990. — 216 с.
  29. Э.Г., Ашубаева З.Дж., Рахимов Д. А. и др. Бактерицидное действие пектинов на возбудителей острых кишечных инфекций // Мед. журн. Узбекистана. 1991. — № 7. — С. 20−22.
  30. Э.Г., Шавахабов Ш. Ш., Бондаренко В. М., Ашубаева З. Д. Экспериментальное и клиническое изучение влияния пектина на возбудителей острых кишечных инфекций // Журн. микробиол. 1994. — Прилож. -С. 106−109.
  31. Э.Г., Шендяпина Е. Ф. Применение пектина у детей, больных острыми кишечными инфекциями // Педиатрия. 2000. — № 6. — С. 66−68.
  32. О.В., Хотимченко Ю. С. Энтеросорбция свинца детокса-лом у детей // Педиатрия. 2002. — № 1. — С. 76−80.
  33. М.Б., Хацкель С. Б., Мурадов А. Ю. Энтеросорбция некрахмальными полисахаридами как метод лечения детей с меркуриализмом // Вопр. питания. 1999. — Т. 68, № 1. — С. 28−30.
  34. В.В. Тиоловые антиоксиданты в молекулярных механизмах неспецифической реакции организма на экстремальное воздействие // Вопр. мед. химии. 1988. — № 6. — С. 2−11.
  35. З.А., Федорова Т. Н., Максимова М. Ю., Ким Е.К. Антиок-сидантное действие милдроната и L-карнитина при лечении больных с сосудистыми заболеваниями головного мозга // Экспер. и клин, фармакол. 2003. -Т. 66,№ 3,-С. 32−35.
  36. Ю.М. Сульфгидрильные и дисульфидные группы белков. М.: Наука, 1971. — 230 с.
  37. А.И., Чижов О. С. Химические исследования водорослей. — М.: Знание, 1988.-48 с.
  38. P.P., Лиховских В. А. Хемилюминесцентные методы исследования свободно-радикального окисления в биологии и медицине. -Уфа, 1995.-90 с.
  39. Ю.С., Ковалев В. В., Савченко О. В., Зиганшина O.A. Физико-химические свойства, физиологическая активность и применение альгинатов полисахаридов бурых водорослей // Биол. моря. — 2001а. — Т. 27, № 3.-С. 151−162.
  40. Ю.С., Ковалев В. В., Савченко О. В., Кропотов A.B. Де-токсирующие свойства альгината кальция при свинцовой интоксикации экспериментальных животных // Человек и лекарство: V Рос. нац. конгр., тез. докл. М., 1998. — С. 632.
  41. Ю.С., Кропотов A.B., Хотимченко М. Ю. Фармакологические свойства пектинов // Эфферентная терапия. 20 016. — Т. 7, № 4. — С. 22−36.
  42. Ю.С., Хасина Э. И., Ковалев В. В. и др. Эффективность пищевых некрахмальных полисахаридов при экспериментальном токсическом гепатите // Вопр. питания. 20 006. — Т. 69, № 1−2. — С. 22−26.
  43. Ю.С., Хасина Э. И., Шевцова О. И. и др. Лечебное действие полисахаридов из морских гидробионтов при экспериментальном токсическом гепатите // Дальневосточный мед. журн. 1997. — № 4. — С. 58−59.
  44. О.И. Влияние альгината кальция и пектина на перекисное окисление липидов при токсическом гепатите // Биол. моря. 1999. — Т. 25, № 2.-С. 177−178.
  45. О.И. Влияние хитозана на пероксидное окисление липидов при токсическом поражении печени // Укр. биохим. журн. 2000. — Т. 72, № 2.-С. 102−104.
  46. О.В., Гордеец A.B., Хотимченко Ю. С. Оценка эффективности биологически активной добавки «полисорбовит-50» при лечении острыхкишечных инфекций, осложненных дисбактериозом кишечника // Тихоокеанский мед. журн. 2001. — № 1 (6). — С. 52−55.1.>
  47. Adonaylo V.N., Oteiza P.I. Lead intoxication: antioxidant defenses and oxidative damage in rat brain // Toxicology. 1999. — V. 135, № 15. — P. 77−85.
  48. Alfieri M.A., Pomerleau J., Grace D.M., Anderson L. Fiber intake of normal weigh, moderately obese and severely obese subjects // Obesity Res. — 1995. Vol. 3, № 6. — P. 541−547.
  49. Amara A., Lorthioir O., Valenzuela A. et al. Stromal cell-derived factor-Ice associates with heparan sulfates through the first /З-strand of the chemokine // J. Biol. Chem. 1999. — Vol. 274, № 34. — P. 23 916−23 925.
  50. Arnhold J., Hammerschmidt S., Arnold K. Role of functional groups of human plasma and luminol in scavenging of NaOCl and neutrophil-derived hy-pochlorous acid // Biochem. Biophys. Acta. 1991. — Vol. 1097, № 2. — P. 145 151.
  51. Aruoma O.I., Halliwell В., Laughton M.J. et al. The mechanism of initiation of lipid peroxidation. Evidence against a requirement for anion (II) iron (III) complex // Biochem. J. — 1989. — Vol. 258, № 2. — P. 617−620.
  52. Ascherio A., Hennekens C., Willett W.C. et al. Prospective study of nutritional factors, blood pressure, and hypertension among US women // Hypertension. 1996. — Vol. 27, № 5. — P. 1065−1072.
  53. Ascherio A., Rimm E.B., Giovannucci E.L. et al A prospective study of nutritional factors and hypertension among US men // Circulation. 1992. — Vol. 86, № 5.-P. 1475−1484.
  54. Ascherio A., Rimm E.B., Hernan M.A. et al. Intake of potassium, magnesium, calcium, and fiber and risk of stroke among US men // Circulation. 1998. -Vol. 98, № 12.-P. 1198−11 204.
  55. Asp N.-G.L. Classification and methodology of food carbohydrates asrelated to nutritional effects // Am. J. Clin. Nutr. 1995. — Vol. 61, Suppl. 4. — P. S930-S937.
  56. Bagger M., Andersen O., Nielsen J.B., Rytigg K.R. Dietary fibers reduce blood pressure, serum total cholesterol and platelet aggregation in rats // Br. J. Nutr. 1996. — Vol. 75, № 3. — P. 483−493.
  57. Bast A., Haenen G.R., Doelman C.J. Oxidants and antioxidants: state of the art // Am. J. Med. 1991. — Vol. 91, № 3C. — P. 2S-13S.
  58. Becker T., Schlaak M., Strasdeit H. Adsorption of nickel (II), zinc (II), and cadmium (II) by new chitosan derivates // React. Func. Polym. 2000. — Vol. 44.-P. 289−298.
  59. Benzie I.F.F., Strain J.J. The ferric reducing ability of plasma (FRAP) as a measure of «antioxidant power»: the FRAP assay // Anal. Biochem. 1996. -Vol. 239,№ l.-P. 70−76.
  60. Beress A., Wassermann O., Bruhn T. et al. A new procedure for the isolation of anti-HIV compounds (polysaccharides and polyphenols) from the marine alga Fucus vesiculosus II J. Nat. Prod. 1993. — Vol. 56, № 4. — P. 478−488.
  61. Blumenkrantz N., Asboe-Haunsen G. New method for quantitative determination of uronic acids // Anal. Biochem. 1973. — Vol. 54, № 2. — P. 484 489.
  62. Boll M., Weber L.W.D., Becker E., Stampfl A. Mechanism of carbon tetrachloride induced hepatotoxicity. Hepatocellular damage by reactive carbon tetrachloride metabolites // J. Biosci. 2001. — V. 56, № 7−8. — P. 649−659.
  63. Bounous G., Molson J.H. The antioxidant system // Anticancer Res. -2003. Vol. 23, № 2B. — P. 1411−1415.
  64. Brand-Williams W., Cuvelier M.E., Berset C. Use of a free radical method to evaluate antioxidant activity // Lebensm.-Wiss. Technol. 1995. — V. 28.-P. 25−30.
  65. Brown L., Rosner B., Willett W.W., Sacks F.M. Cholesterol-loweringeffects of dietary fiber: a meta-analysis // Amer. J. Clin. Nutr. 1999. — Vol. 69. -P. 30−42.
  66. Burkitt D.P. Epidemiology of cancer of the colon and rectum // Cancer. 1971. — Vol. 28, № 1. -P. 3−13.
  67. Carlucci M.J., Ciancia M., Matulewicz M.C. et al. Antiherpetic activity and mode of action of natural carrageenans of diverse structural types // Antiviral Res. 1999a. — Vol. 43, № 2. — P. 93−102.
  68. Carlucci M.J., Scolaro L.A., Damonte E.B. Inhibitory action of natural carrageenans on Herpes simplex virus infection of mouse astrocytes // Chemotherapy. 1999 b. — Vol. 45, № 6. — P. 429−436.
  69. Chandra M., Gandhi I.S. Comparative study of alginate and non-alginate antacids concurrently administered with H2 antagonists in cases of duodenal ulcert // Br. J. Clin. Pract. 1989. — Vol. 43, № 3. — P. 97−101.
  70. Chapman V. J., Chapman D.J. Seaweeds and their uses. Third edition. -London- New York: Chapman and Hall, 1980. 334 p.
  71. Chen W.-J.L., Anderson J.W., Jennings D. Propionate may mediate the hypocholesterolemic effects of certain soluble plant fibers in cholesterol fed rats // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1984. — Vol. 175, № 2. — P. 215−218.
  72. Chevolot L., Foucault A., Chaubet F. et al. Further data on the structure of brown seaweed fucans: relationships with anticoagulant activity // Carbohydr. Res.-1999.-Vol.319, № 1−4.-P. 154−165.
  73. Clausen M.R., Mortensen P.B. Kinetic-studies on the metabolism of short-chain fatty-acids and glucose by isolated rat colonocytes // Gastroenterology. 1994. — Vol. 106, № 2. — P. 423−432.
  74. Darvill A.G., McNeil M., Albershein P. Sructure of plant cell wall. VIII. A new pectic polysaccharide // Plant Physiol. 1978. — Vol. 62. — P. 418−422.
  75. Davies M.A.F., Gidley M.J., Morris E.R. et al. Intermolecular association in pectin solution // Int. J. Biol. Macromolec. 1980. — Vol. 2. — P. 330.
  76. Deuchi K., Kanauchi O., Shizukuishi M., Kobayashi E. Continuous and massive intake of chitosan affects mineral and fat-soluble vitamin status in rats fed on a high-fat diet // Biosci. Biotech. Biochem. 1995. — Vol. 59, № 7. — P. 12 111 216.
  77. De Vries J.A., Voragen A.G.J., Rombouts F.M., Pilnik W. Structural studies of apple pectins with pectolytic enzymes // In: Chemistry and function of pectins. Washington: American Chemical Society. 1986. — P. 33−48.
  78. Di Mascio P., Kaiser S., Sies H. Lycopene as the most efficient biological carotenoid singlet oxygen quencher // Arch. Biochem. Biophys. 1989. — Vol. 274,№ 2.-P. 532−538.
  79. Duarte M.E.R., Cardoso M.A., Noseda M.D., Cerezo A.S. Structural studies on fucoidans from the brown seaweed Sargassum stenophylum II Carbohydr. Res. 2001. — Vol. 333, № 4. — P. 281−293.
  80. Dutta P.K., Ravi Kumar M.N.V. Chitosan amine oxide: thermal behavior of new gelling system // Indian J. Chem. Technol. — 1999. — Vol. 6. — P. 55.
  81. Dutta P.K., Viswanathan P., Mimrot L., Ravi Kumar M.N.V. Use of chi-tosan amine oxide gel as drug carrier // J. Polym. Mater. 1997. — Vol. 14. — P. 351.
  82. Ekstrom L. Molecular-weight-distribution and the behaviour of kappa-carrageenan // Carbohydr. Res. 1985. — Vol. 135. — P. 283−285.
  83. European Convention for the Protection of Verebrate Animals used for Experimental and other scientific purposes. Strasburg: Council of Europe, 1986. -51 p.
  84. Fang Y.Z., Yang S., Wu G.Y. Free radicals, antioxidants, and nutrition // Nutrition. 2002. — Vol. 18, № 10. — P. 872−879.
  85. Fernandez M.L. Distinct mechanisms of plasma LDL lowering by dietary fiber in the guinea pig: specific effects of pectin, guar gum, and psyllium // J. Lipid Res. 1995. — Vol. 36, № 11. — p. 2394−2404.
  86. Fogliano V., Verde V., Randazzo G., Ritieni A. Method for measuring antioxidant activity and its application to monitoring the antioxidant capacity of wines // J. Agric. Food Chem. 1999. — V. 47, № 3. — P. 1035−1040.
  87. Freudenheim J.L., Graham S., Marshall J.R. et al. A case control study of diet and rectal cancer in western New York // Am. J. Epidemiol. 1990. — Vol. 131,№ 4.-P. 612−624.
  88. Fridovich I. Superoxide dismutases. An adaptation to a paramagnetic gas // J. Biol. Chem. 1989. — Vol. 264, № 14. — P. 7761−7764.
  89. Fukada Y., Kimura K., Ayaki Y. Effect of chitosan feeding on intestinal bile acid metabolism in rats // Lipids. 1991. — Vol. 26, № 5. — P. 395−399.
  90. Fukunaga T., Sasaki M., Araki Y. et al. Effects of the soluble fibre pectin on intestinal cell proliferation, fecal short chain fatty acid production and microbial population // Digestion. 2003. — Vol. 67, № 1−2. — P. 42−49.
  91. Gaetke L.M., Chow C.K. Copper toxicity, oxidative stress, and antioxidant nutrients // Toxicology. 2003. — Vol.189, № 1−2. — P. 147−163.
  92. Gallaher D.D., Gallaher C.M., Mahrt G.J. et al. A glucomannan and chitosan fiber supplement decreases plasma cholesterol and increases cholesterol excretion in overweight normocholesterolemic humans // J. Am. Coll. Nutr. 2002. -Vol. 21,№ 5.-P. 428−433.
  93. Ghiselli A., Serafini M., Maiani G. et al. A fluorescence-based method for measuring total plasma antioxidant capability // Free Radic. Biol. Med. 1995. -V. 18,№ l.-P. 29−36.
  94. Gibson G.R., Macfarlane S., Cummings J.H. The fermentability of polysaccharides by mixed faecal bacteria in relation to their suitability as bulk-forming laxatives // Lett. Appl. Microbiol. 1990. — Vol. 11. — P. 251−254.
  95. Girond S., Crance J.M., Van Cuyck-Gandre H. et al. Antiviral activity of carrageenan on hepatitis A virus replication in cell culture // Res. Virol. 1991. — Vol. 142, № 4. — P. 261−270.
  96. Glore S.R., Van Treeck D., Knehans A.W., Guild M. Soluble fiber and serum-lipids. A literature review // J. Am. Diet. Assoc. 1994. — Vol. 94, № 4. -P. 425−436.
  97. Gonzalez M., Rivas C., Caride B. et al. Effect of orange and apple pectin on cholesterol concentration in serum, liver and faeces // J. Physiol. Biochem. -1998. Vol. 54, № 2. — P. 99−104.
  98. Gorman A.M., Heavey B., Creagh E. et al. Antioxidant-mediated inhibition of the heat shock response leads to apoptosis // FEBS Letters. 1999. — Vol. 445,№ l.-P. 98−102.
  99. Greenberg C.G., Gaddock P.R. Rapid single-step membrane protein assay // Clin. Chem. 1982. — Vol. 28, № 7. — P. 1725−1726.
  100. Hague A., Elder D.J.E., Hicks D.J., Paraskeva C. Apoptosis in colorectal tumor-cells. Induction by the short-chain fatty-acids butyrate, propionate and acetate and by the bile-salt deoxycholate // Int. J. Cancer. 1995. — Vol. 60, № 3. -P. 400−406.
  101. Halliwell B. Role of free radicals in the neurodegenerative diseases -Therapeutic implications for antioxidant treatment // Drugs and Aging. 2001. -Vol. 18, № 9.-P. 685−716.
  102. Halliwell B., Gutteridge J.M. The antioxidants of human extracellular fluids // Arch. Biochem. Biophys. 1990. — Vol. 280, № 1. — P. 1−8.
  103. Halvorsen B.L., Holte K., Myhrstad M.C.W. et al A systematic screening of total antioxidants in dietary plants // J. Nutr. 2002. — Vol. 132, № 3. — P. 461−471.
  104. Hamasuna R., Eizuru Y., Minamishima Y. Inhibition by iota-carrageenan of the spread of murine cytomegalovirus from the peritoneal-cavity to the blood-plasma // J. Gen. Virol. 1994. — Vol. 75, № 1. — P. 111 -116.
  105. Hamasuna R., Eizuru Y., Shishime Y., Minamishima Y. Protective effect of carrageenan against murine cytomegalovirus infection in mice // Antiviral Chem. Chemother. 1993. — Vol. 4. — P. 353−360.
  106. Haug A. Composition and properties of alginates // Norweg. Inst. Seaweed Rept. 1964. -№ 30. — P. 1−123.
  107. Heerdt B.G., Houston M.A., Augenlicht L.H. Potentiation by specific short-chain fatty-acids of differentiation and apoptosis in human colonic carcinoma cell fines // Cancer Res. 1994. — Vol. 54, № 12. — P. 3288−3293.
  108. Heinecke J.W. Oxidants and antioxidants in the pathogenesis of atherosclerosis: implications for the oxidized low density lipoprotein hypothesis // Atherosclerosis. 1998. — Vol. 141, № 1. — P. 1−15.
  109. Heyraud A., Rinaudo M., Rochas C. Physical and chemical properties of phycocolloids // Introduction to Applied Phycology Ed. I. Akatsuka. SPB Academic Publishing bv. The Hague. The Netherlands. 1990. — P. 151−176.
  110. Hirmo S., Kelm S., Schauer R. et al. Adhesion of Helicobacter pylori strains to a-2,3-linked sialic acids // Glycoconj. 1996. — Vol. 13, № 6. — P. 10 051 011.
  111. Howe G.R., Benito E., Castelleto R. et al. Dietary-intake of fiber and decreased risk of cancers of the colon and rectum. Evidence from the combined analysis of 13 case-control studies // J. Natl. Cancer Inst. 1992. — Vol. 84, № 24. -P. 1887−1896.
  112. Huang R., Du Y., Yang J., Fan L. Influence of functional groups on the in vitro anticoagulant activity of chitosan sulfate // Carbohydr. Res. 2003. — Vol. 338,№ 6.-P. 483−489.
  113. Humble C.G., Malarcher A.M., Tyroler H.A. Dietary fiber and coronary heart disease in middle-aged hypercholesterolemic men // Amer. J. Prevent. Med. 1993. — Vol. 9, № 4. — P. 197−202.
  114. Ikeda I., Sugano M., Yoshida K. et al. Effects of chitosan hydrolysates on lipid absorption and on serum and liver lipid concentration in rats // J. Agr. Food Chem. 1993. — Vol. 41. — P. 431−435.
  115. Irifune K. Alveolar destruction in experimental Klebsiella pneumonia II Acta Pathol. Jpn. 1987. — Vol. 37, № 3. — P. 475−486.
  116. Ito M., Ban A., Ishihara M. Anti-ulcer effects of chitin and chitosan, healty foods in rats // Jpn. J. Pharmacol. 2000. — Vol. 82, № 3. — P. 218−225.
  117. Jodra Y., Mijangos F. Ion exchange selectivities of calcium alginate gels for heavy metals // Water Sci. Technol. 2001. — Vol. 43, № 2. — P. 237 244.
  118. Kanner J., Harel S., Granit R. Betalains a new class of dietary cationized antioxidants // J. Agr. Food Chem. — 2001. -Vol. 49, № 11. — P. 51 785 185.
  119. Katayama H., Nishimura T., Ochi S. et al. Sustained release liquid preparation using sodium alginate for eradication of Helicobacter pylori II Biol. Pharm. Bull. 1999. — Vol. 22, № 1. — P. 55−60.
  120. Kaul N., Devaraj S., Jialal I. alpha-Tocopherol and Atherosclerosis // Experim. Biol. Med. 2001. — Vol. 226, № 1. — P. 5−12.
  121. Khaw K.T., Barret-Connor E. Dietary fiber and reduced ischemic disease mortality rates in men and women: a 12-year prospective study // Amer. J. Epidemiol. 1987. — Vol. 126, № 6. — P. 1093−1102.
  122. Kimura Y., Watanabe K., Okuda H. Effects of soluble sodium alginate on cholesterol excretion and glucose-tolerance in rats // J. Ethnopharmacol. 1996. -Vol. 54,№ l.-P.47−54.
  123. Kishimoto Y., Wakabayashi S., Takeda H. Hypocholesterolemic effect of dietary fiber: relation to intestinal fermentation and bile acid excretion // J. Nutr. Sci. Vitaminol. 1995. — Vol. 41, № 1. — p. 151−161.
  124. Klinkenberg-Knol E.C., Festen H.P., Meuwissen S.G. Pharmacological management of gastro-oesophageal reflux disease // Drugs. — 1995. Vol. 49, № 5. -P. 695−710.
  125. Klipstein-Grobusch K., Geleijnse J.M., denBreeijen J.H. et al. Dietary antioxidants and risk of myocardial infarction in the elderly: the Rotterdam Study // Amer. J. Clin. Nutr. 1999. — Vol. 69, № 2. — P. 261−266.
  126. Knopp R.H., Superko H.R., Davidson M. et al. Long-term blood cholesterol-lowering effects of a dietary fiber supplement // Am. J. Prev. Med. 1999. -Vol. 17,№ l.-P. 18−23.
  127. Kohn R. Binding of divalent cations to oligomeric fragments of pectin // Carbohydr. Res. 1987. — Vol. 160. — P. 343.
  128. Kolender A.A., Matulevicz M.C., Cerezo A.S. Structural analysis of antiviral sulfated alpha-D-(l-3)-linked mannans // Carbohydr. Res. 1995. — Vol. 273, № 2.-P. 179−185.
  129. Kolender A.A., Pujol C.A., Damonte E.B. et al. The system of sulfated a-(l-3)-linked D-mannans from the seaweed Nothogenia fastigata: structures, an-tiherpetic, and anticoagulant properties // Carbohydr. Res. 1997. — Vol. 304, № 1. -P. 53−60.
  130. Konukoglu D., Iynem H., Ziylan E. Antioxidant status in experimental peritonitis: effects of alpha tocopherol and taurolin // Pharmacol. Res. 1999. -Vol. 39, № 3. — P. 247−251.
  131. Kostial K., Vnucec M., Tominac C., Simonovic I. A method for a simultaneous decrease of strontium, cesium and iodine retention after oral exposure in rats // Int. J. Radiat. Biol. 1980. — Vol. 37, № 3. — P. 347−350.
  132. Kravtchenko T.P., Pilnik A. A simplified method for the determination of the intrinsic viscosity of pectin solutions by classical viscosimetry // Gums and stabilizers in the food industry. Oxford: IRL Press. 1990. — Vol. 5. — P. 281−285.
  133. Kritchevsky D. In vitro binding properties of dietary fibre // Eur. J. Clin. Nutr. 1995. — Vol. 49, Suppl. 3. — P. SI 13-S115.
  134. Kumar M.N.V.R. A review of chitin and chitosan applications // React. Funct. Polym. 2000. — Vol. 46. — P. 1−27.
  135. Kumaraguruparan R., Subapriya R., Viswanathan P., Nagini S. Tissue lipid peroxidation and antioxidant status in patients with adenocarcinoma of the breast // Clinica Chimica Acta. 2002. — Vol. 325, № 1−2. — P. 165−170.
  136. Ladas E.J., Jacobson J.S., Kennedy D.D. et al. Antioxidants and cancer therapy: a systematic review // J. Clin. Oncology. 2004. — Vol. 22, № 3. — P. 517 528.
  137. Lecacheus D., Panaras R., Brigand G., Martin G. Molecular weight distribution of carrageenans de size exclusion chromatography and low angle laser light scattering // Carbohydr. Polum. 1985. — Vol. 5. — P. 423−440.
  138. Le Luyer B., Mougenot J.F., Mashako L. et al. Pharmacological efficacy of sodium alginate suspension on gastro-esophageal reflux in infants and children // Arch. Fr. Pediatr. 1990. — Vol. 47, № 1. — P. 65−68.
  139. Lewis J.G., Stanley N.F., Guist G.G. Commercial production and applications of algal hydrocolloids // Algae and human affairs / Ed. C.A. Lembi, J.R. Waaland. Cambridge Univ. Press. 1988. — P. 205−236.
  140. Lewis P.T., Wahala K., Hoikkala A. et al. Synthesis of antioxidant isoflavone fatty acid esters // Tetrahedron. 2000. — Vol. 56, № 39. — P. 78 057 810.
  141. Luyt C.-E., Meddahi-Pelle A., Ho-Tin-Noe B. et al. Low-molecular-weight fucoidan promotes therapeutic revascularization in a rat model of critical hindlimb ischemia // J. Pharmacol. Exp. Therap. 2003. — Vol. 305, № 1. — P. 2430.
  142. Maezaki Y., Tsuji K., Nakagawa Y. et al. Hypocholesterolemic effect of chitosan in adult males // Biosci. Biotech. Biochem. 1993. — Vol. 57. — P. 1439−1444.
  143. Manas E., Bravo L., Saura-Calixto F. Source of error in dietary fiber analysis // Food Chem. 1994. — Vol. 50. — P. 331−342.
  144. Maples K.R., Mason R.P. Free radical metabolite of uric acid // J. Biol. Chem. 1988.-Vol. 263, № 4.-P. 1709−1712.
  145. Matheson H.B., Colon I.S., Story J.A. Cholesterol 7-alpha-hydroxylase activity is increased by dietary modification with psyllium hydrocolloid, pectin, cholesterol and cholestyramine in rats // J. Nutr. 1995. — Vol. 125, № 3. — P. 454 458.
  146. Matou S., Helley D., Chabut D. et al. Effect of fucoidan on fibroblast growth factof-2-induced angiogenesis in vitro // Thromb. Res. 2002. — Vol. 106, № 4−5.-P. 213−221.
  147. Matthaus B. Antioxidant activity of extracts obtained from residues of different oilseeds // J. Agric. Food Chem. 2002. — Vol. 50, № 12. — P. 34 443 452.
  148. Miller N.J., Rice-Evans C.A., Davies M.J. et al. A novel method for measuring antioxidant capacity and its application to monitoring the antioxidant status in premature neonates // Clin. Sci. 1993. — V. 84, № 4. — P. 407−412.
  149. Miller N.J., Sampson J., Candeias L.P. et al. Antioxidant activities of carotenes and xanthophylls // Fed. Eur. Biochem. Soc. Lett. 1996. — V. 384, № 3. -P. 240−242.
  150. Millet J., Jouault S.C., Mauray S. et al. Antithrombotic and anticoagulant activities of a low molecular weight fucoidan // Thromb. Haemost. 1999. -Vol. 81, № 3.-P. 391−395.
  151. Miura T., Usami M., Tsuura Y. et al. Hypoglycemic and hypolipidemic effect of chitosan in normal and neonatal streptozotocin-induced diabetic mice // Biol. Pharm. Bull. 1995. — Vol. 18, № 11. — P. 1623−1625.
  152. Moron M.S., Depierre J.W., Mannervik B.F. Levels of glutathione, glutathione reductase and glutathione s-transferase activities in rat lung and livers // Biochim. Biophys. Acta. 1979. — Vol. 582, № 1. — P. 67−78.
  153. Moundras C., Demigne C., Mazur A., Remesy C. The cholesterol-lowering effect of steroid sequestrants is modulated by large-intestine fermentations //J. Nutr. Biochem. 1995. — Vol. 6. — P. 158−162.
  154. Mourao P.A.S. Use of sulfated fucans as anticoagulant and antithrombotic agents: future perspectives // Current Pharmaceutical Design. 2004.- Vol. 10,№ 9.-P. 967−981.wall of Ludwigothurea grisea II Eur. J. Biochem. 1987. — Vol. 166, № 3. — P. 639−645.
  155. Muralikrishna G., Taranathan R.N. Characterization of pectin polysaccharides from pulse husks // Food Chem. 1994. — Vol. 50. — P. 87−89.
  156. Nie Y., Li Y., Wu H. et al. Colloidal bismuth pectin: an alternative to bismuth subcitrate for the treatment of Helicobacter pylori-positive duodenal ulcer II Helicobacter. 1999. — Vol. 4, № 2. — P. 128−134.
  157. Nishide E., Anzai H., Uchida N. Effects of alginate on the ingestion and excretion of cholesterol in the rat // J. Appl. Phycol. 1993. — Vol. 5. — P. 207 211.
  158. Nishino T., Kiyohara H., Yamada H., Nagumo T. An anticoagulant fuc-oidan from the brown seaweed Ecklonia kurome II Phytochemistry. 1991a. -Vol. 30,№ 2.-P. 535−539.
  159. Nishino T., Takabe Y., Nagumo T. Isolation and partial characterization of a novel beta-D-galactan sulfate from the brown seaweed Laminaria angus-tata var longissima II Carbohydr. Polym. 1994. — Vol. 23. — P. 165−173.
  160. Oakenfull R.C., Scott A. Hydrophobic interaction in the gelation of high methoxyl pectins // J, Food. Sci. 1984. — Vol. 49. — P. 1093.
  161. Ogata M., Yoshida S., Kamochi M. et al. Enhancement of lipopolysac-charide-induced tumor necrosis factor production in mice by carrageenan pretreat-ment // Infect. Immunol. 1991. — Vol. 59, № 2. — P. 679−683.
  162. Okazaki M., Furuya K., Tsukayama K., Nisizawa K. Isolation and identification of alginic acid from a calcareous red alga Serraticardia maxima II Bot. Mar.-1982.-Vol. 25.-P. 123−131.
  163. Ormrod D.J., Holmes C.C., Miller T.E. Dietary chitosan inhibits hyper-cholesterolaemia and atherogenesis in the apolipoprotein E-deficient mouse model of atherosclerosis //Atherosclerosis. 1998. — Vol. 138, № 2. — P. 329−334.
  164. Pasman W.J., Saris W.H., Wauters M.A., Westerterp-Plantenga M.S. Effect of one week of fibre supplementation on hunger and satiety ratings and energy intake // Appetite. 1997. — Vol. 29, № 1. — P. 77−87.
  165. Patankar M.S., Oehninger S., Barnett T. et al. A revised structure for fucoidan may explain some of its biological activities // J. Biol. Chem. 1993. -Vol. 268, № 29. — P. 21 770−21 776.
  166. Pilnic W., Rombouts F. Polysaccharides and food processing // Carbo-hydr. Res. 1985. — Vol. 142, № 1. — P. 93−105.
  167. Plaami S.P. Content of dietary fiber in foods and its physiological effects // Food Rev. Int. 1997. — Vol. 13. — P. 29−76.
  168. Plashchina I. G., Muratalieva I.R., Braudo E.E., Tolstoguzov V.B. Studies of the gel formation of K-carrageenan above the coil-helix transition temperature range // Carbohydr. Polym. 1986. — Vol. 6. — P. 15−34.
  169. Ponce N.M.A., Pujol C.A., Damonte E.B. et al. Fucoidans from the brown seaweed Adenocystis urticularis: extraction methods, antiviral activity and structural studies // Carbohydr. Res. 2003. — Vol. 338, № 2. — P. 153−165.
  170. Popov I., Lewin G. Antioxidative homeostasis: characterisation by means of chemiluminescent technique // Meth. Enzymol. — 1999. V. 300. — P. 437−456.
  171. Ravi Kumar M.N.V., Singh P., Dutta P.K. Effect of swelling on chito-san amine oxide gel in extended drug delivery // Indian Drugs. — 1999. — Vol. 36. -P. 393.
  172. Razdan A., Pettersson D. Hypolipidaemic, gastrointestinal and related responses of broiler chickens to chitosans of different viscosity // Br. J. Nutr. -1996. Vol. 76, № 3. — P. 387−397.
  173. Re R., Pellegrini N., Proteggente A. et al. Antioxidant activity applying an improved ABTS radical cation decolorization assay // Free Radic. Biol. Med. -1999.-V. 26, № 9−10.-P. 1231−1237.
  174. Rehm B.H., Valla S. Bacterial alginates: biosynthesis and applications // Appl. Microbiol. Biotechnol. 1997. — Vol. 48, № 3. — P. 281−288.
  175. Rice-Evans C.A., Miller N. J., Paganga G. Structure-antioxidant activity relationships of flavonoids and phenolic acids // Free Rad. Biol. Med. 1996. — V. 20,№ 7.-P. 933−956.
  176. Rimm E.B., Ascherio A., Giovannucci E. et al. Vegetable, fruit, and cereal fiber intake and risk of coronary heart disease among men // J. Amer. Med. Assoc. 1996. — Vol. 275. № 6. — P. 447−451.
  177. Rolandelli R.H., Koruda M.J., Settle R.G. et al The effect of pectin on hepatic lipogenesis in the enterally-fed rat // J. Nutr. 1989. — Vol. 119, № 1. — P. 89−93.
  178. Rossel K.G., Srivastava L.M. Seasonal variation in the chemical constituents of the brown algae Macrocystis integrifolia and Noveocystic luetkeana II Can. F. Bot. 1984. — Vol. 62. — P. 2229−2236.
  179. Ruperez P., Ahrazem O., Leal J.A. Potential antioxidant capacity of sulfated polysaccharides from the edible marine brown seaweed Fucus vesiculosus II J. Agric. Food Chem. 2002. — Vol. 50, № 4. — P. 840−845.
  180. Saintot M., Mathieu-Daude H., Astre C. et al Oxidant-antioxidant status in relation to survival among breast cancer patients // Int. J. Cancer. 2002. -Vol. 97, № 5.-P. 574−579.
  181. Sandford P. Applications of marine polysaccharides in the chemical industries // Biotechnology of marine polysaccharides / Ed. P. Colwell. Washington- New York- London. 1985. — P. 453−519.
  182. Saton K. Serum lipid peroxide in cerebro vascular disorders determined by a new colorimetric method // Clin. Chem. Acta. 1978. — Vol. 90. — P. 37−43.
  183. Saura-Calixto F., Goni I., Manas E., Abia R. Klason lignin, condensed tannins and resistant protein as dietary fiber constituents: determination in grape pomaces // Food Chem. 1991. — Vol. 39. — P. 299−303.
  184. Scheppach W., Bingham S., Bourton-Rauault M.C. et al. WHO consensus statement on the role of nutrition in colorectal cancer // Eur. J. Caner Pevent. -1999. Vol. 8, № 1. — P. 57−62.
  185. Schlesier K., Harwat M., Bohm V., Bitsch R. Assessment of antioxidant activity by using different in vitro methods // Free Radic. Res. 2002. — Vol. 36, № 2.-P. 177−187.
  186. Schoeters G.E.R., Luz A., Van der Borght O.L. Ra226 induced bone cancers. The effects of a delayed Na-alginate treatment // Int. J. Radiat. Biol. -1983. Vol. 43, № 3. — P. 231−247.
  187. Seal C.J., Mathers J.C. Comparative gastrointestinal and plasma cholesterol responses of rats fed on cholesterol-free diets supplemented with guar gum and sodium alginate // Br. J. Nutr. 2001. — Vol. 85, № 3. — P. 317−324.
  188. Sevanian A., Davies K.J., Hochstein P. Serum urate as an antioxidant for ascorbic acids // Am. Clin. Nutr. 1991. — Vol. 54, № 6. — P. 1129S-1134S.
  189. Shaikh Z.A., Vu T.T., Zaman K. Oxidative stress as a mechanism of chronic cadmium-induced hepatotoxicity and renal toxicity and protection by antioxidants // Toxicology and Applied Pharmacology. 1999. — Vol. 154, № 3. — P. 256−263.
  190. Shibata H., Kimura-Takagi I., Nagaoka M. et al. Inhibitory effect of Cladosiphon fucoidan on the adhesion of Helicobacter pylori to human gastric cells // J. Nutr. Sci. Vitaminol. 1999. — Vol. 45, № 3. — P. 325−336.
  191. Shibata H., Kimura-Takagi I., Nagaoka M. et al. Properties of fucoidan from Cladosiphon okamuranus Tokida in gastric mucosal protection // BioFactors. 2000. — Vol. 11, № 4. — P. 235−245.
  192. Sies H. Oxidative stress: from basic research to clinical application // Am. J. Med. 1991. — Vol. 91, № 3C.-P. 31S-38S.
  193. Simpson B.K., Egyankor K.B., Martin A.M. Extraction, purification and determination of pectin in tropical fruits // J. Food Process Preserv. — 1984. -Vol. 2. P. 63.
  194. Singh S., Jacobsson S. Kinetics of acid hydrolysis of K-carrageenan as determined by molecular weight (SEC-MALLS-RI), gel breaking strength, and viscosity measurements // Carbohydr. Polum. 1994. — Vol. 23. — P. 89−103.
  195. Stark A., Nyska A., Madar Z. Metabolic and morphometric changes in small and large intestine in rats fed high-fiber diets // Toxicol. Pathol. 1996. -Vol. 24,№ 2.-P. 166−171.
  196. Story J.A., Tepper S.A., Kritchevsky D. Influence of fiber on intestinal function. Involement of cholesterol and bile acid metabolism // Proc. Mile Symp. -1976.-Vol. 14.-P. 27.
  197. Sutton A., Harrison B.E., Carr T.E.F., Barltrop D. Reduction in the absorption of dietary strontium in children by an alginate derivate // Int. J. Radiat. Biol. 1971.-Vol. 19, № i.p. 79.85.
  198. Sweeney E.A., Lortat-Jacob H., Priestley G.V. et al. Sulfated polysaccharides increase plasma level of SDF-1 in monkeys and mice: involvement inmobilization of stem/progenitor cells // Blood. 2002. — Vol. 99, № 1. — P. 4451.
  199. Sweeney E.A., Priestley G.V., Nakamoto B. et al. Mobilization of stem/progenitor cells by sulfated polysaccharides does not require selectin presence // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2000. — Vol. 97, № 12. — P. 6544−6549.
  200. Tateda K. Acute induction of interleukin-6 and biphasic changes of serum complement C3 by carrageenan in mice // Mediators Inflamm. 1998. — Vol. 7.-P. 221−223.
  201. Tateda K., Irifime K., Tomono K. et al. Potential activity of carrageenan toenhance antibacterial host-defense system in mice // J. Infect. Chemother. -1995.-Vol. l.-P. 59−63.
  202. Thakur B.R., Singh R.K., Handa A.K. Chemistry and uses of pectin. A review // Crit. Rev. Food Sci. Nutr. 1997. — Vol. 37, № 1. — P. 47−37.
  203. Theander O., Aman P., Westerlund E., Graham H. Enzymatic chemical analysis of dietary fiber // J. AOAC Int. 1994. — Vol. 77, № 3. — P. 703−709.
  204. Thibault J.F., Rinaudo M. Chain association of pectic molecules during calcium induced gelation // Biopolymers. 1986. — Vol. 25. — P. 455−468.
  205. Tigemeyer E.C., Bourquin L.D., Fahey G.C., Garleb K.A. Fermantabil-ity of various fiber sources by human fecal bacteria in vitro II Am. J. Clin. Nutr. -1991.-Vol. 53.-P. 1418−1424.
  206. Tiwary C.M., Ward J.A., Jackson B.A. Effect of pectin on satiety in healthy US Army adults // J. Am. Coll. Nutr. 1997. — Vol. 16, № 5. — P. 423 428.
  207. Toda S., Kumura M., Ohnishi M. Effects of phenolcarboxylic acids on superoxide anion and lipid peroxidation induced by superoxide anion // Planta Med.-1991.-Vol. 57, № 1.-P.8−10.
  208. Topping D. Hydroxypropylmethylcellulose, viscosity, and plasma-cholesterol control // Nutr. Rev. 1994. — Vol. 52, № 5. — P. 176−178.
  209. Trock B., Lanza E., Greenwald P. Dietary fiber, vegetables, and colon cancer. Critical review and meta-analyses of the epidemiologic evidence // J. Natl. Cancer Inst. 1990. — Vol. 82, № 8. — P. 650−661.
  210. Trowell H. Dietary fiber and coronary heart disease // Rev. Eur. Etudes Clin. Biol. 1972a. — Vol. 17, № 4. — P. 345−349.
  211. Trowell H. Ischemic heart disease and dietary fiber // Am. J. Clin. Nutr. 1972 b. — Vol. 25, № 9. — P. 926−932.
  212. Truswell A.S. Dietary fibre and plasma-lipids // Eur. J. Clin. Nutr. -1995.-Vol. 49, Suppl. 3.-P. S105-S109.
  213. Ursini F., Barsacchi R., Pelosi G., Benassi A. Oxidative stress in the rat heart, studies on low-level chemiluminescence // J. Biolumin. Chemilumin. -1989. Vol. 4, № 1. — P. 241−244.
  214. Utsunomiya I., Nagai S., Oh-ishi S. Sequential appearance of IL-1 and IL-6 activities in rat carrageenan-induced pleurisy // J. Immunol. 1991. — Vol. 147, № 6.-P. 1803−1809.
  215. Van der Borght O.L., Van Puynbroeck S., Babakova I. Effect of combined alginate treatments on distribution and excretion of an old radiostrontuim contamination // Hlth. Phys. 1978. — Vol. 35. — P. 255−258.
  216. Van Handel E. Estimation of glycogen in small amounts of tissue // Anal. Biochem. 1965. — Vol. 11, № 2. — P. 256−265.
  217. Veldman F.J., Nair C.H., Vorster H.H. et al. Possible mechanisms through which dietary pectin influences fibrin network architecture in hypercholes-terolemic subjects // Thromb. Res. 1999. — Vol. 93, № 6. — P. 253−264.
  218. Venkateswaran P. S., Millman I., Blumberg B.S. Interaction of fiicoidan from Pelvetia fastigata with surface antigwens of hepatitis B and woodchuck hepatitis viruses // Planta Med. 1989. — Vol. 55, № 3. — P. 265−270.
  219. Vertuani S., Angusti A., Manfredini S. The antioxidants and pro-antioxidants network: An overview // Current Pharmaceutical Design. 2004. -Vol. 10, № 14.-P. 1677−1694.
  220. Vieira R.P., Mourao P.A.S. Occurrence of a unique fucose-branched chondroitin sulfate in the body wall of a sea cucumber // J. Biol. Chem. 1988. -Vol. 263, № 34.-P. 18 176−18 183.
  221. Violi F., Loffredo L., Musella L., Marcoccia A. Should antioxidant status be considered in interventional trials with antioxidants? // Heart. 2004. -Vol. 90,№ 6.-P. 598−602.
  222. Wagner J.R., Motchnik P.A., Stocker R. et al. The oxidation of blood plasma and low density lipoprotein components by chemically generated singlet oxygen // J. Biol. Chem. 1993. — Vol. 268, № 25. — P. 18 502−18 506.
  223. Waldron-Edward D., Paul T.M., Skoryna S.C. Suppression of intestinal absorption of radioactive strontium by naturally occurring non-absorbable polye-lectrolytes//Nature.- 1965.-Vol. 205, № 976. P. 1117−1118.
  224. Walkinshaw M.D., Arnott S. Conformation and interaction of pectin. II. Models for junctions zones in pectinic acid and calcium pectate gels // J. molec. Biol.-1981.-Vol. 153, № 4.-P. 1075−1085.
  225. Wang C., Yang G. Comparison of effects of two kinds of soluble algae polysaccharide on blood lipid, liver lipid, platelet aggregation and growth in rats // Chung Hua Yu Fang I Hsueh Tsa Chih. 1997. — Vol. 31, № 6. — P. 342 345.
  226. Washington N., Denton G. Effect of alginate and alginate-cimetidine combination therapy on stimulated postprandial gastroesophageal reflux // J. Pharm.Pharmacol.- 1995.-Vol.47,№ 11.-P. 879−882.
  227. Waterhouse E.T., Washington C., Washington N. An investiogation into the efficacy of the pectin based anti-reflux formulation-Aflurax // Int. J. Pharm. 2000. — Vol. 209, № 1−2. — P. 79−85.
  228. Witt H.J. Carrageenan, Nature is most versatile hydrocolloid // Biotechnology of marine polysaccharides / Ed. R. Colwell. Washington- New York- London. 1985. — P. 345−363.
  229. Witvrouw M., Desmyter J., De Clerq E. Antiviral portrait series: 4. Polysulfates as inhibitors of HIV and other enveloped viruses // Antiviral. Chem. Chemother. 1994. — Vol. 5. — P. 345−359.
  230. Xue C., Fang Y., Lin H. et al. Chemical characters and antioxidative properties of sulfated polysaccharides from Laminaria japonica II J. Appl. Phycol. -2001.-Vol. 13.-P. 67−70.
  231. Yamaguchi F., Shimizu N., Hatanaka C. Preparation and physiological effect of low-molecular-weight pectin // Biosci. Biotech. Biochem. 1994. — Vol. 58.-P. 679−682.
  232. Yamaguchi F., Uchida S., Watabe S. et al. Relationship between molecular weights of pectin and hypocholesterolemic effects in rats // Biosci. Biotech. Biochem. 1995.-Vol. 59, № 11.-P. 2130−2131.
  233. Yamamoto K., Fukuda N., Shiroi S. et al. Ameliorative effect of dietary probucol on polychlorinated biphenyls-induced hyperchlolesterolemia and lipid peroxidation in the rat // Life Sei. 1994. — V. 54, № 14. — P. 1019−1026.
  234. Yamamoto Y., Suzuki T., Hirano M. et al. Effect of fucoidan and fuc-oidan containing tea on gastric ulcer and non-ulcer dyspepsia // Jpn. Pharmacol. Ther. 2000. — Vol. 28. — P. 63−70.
  235. Ylitalo R., Lehtinen S., Wuolijoki E. et al. Cholesterol-lowering properties and safety of chitosan // Arzneim.-Forsch./Drug Res. 2002. — Vol. 52, № 1. -P. 1−7.
  236. Yoshie Y., Suzuki T., Shirai T., Hirano T. Effect of sodium alginate on fat contents and digestive organs of rats fed with fat-free diet // Fish. Sci. 1995. -Vol. 61.-P. 668−671.
  237. Zanma A., Matsumoto Y., MasuhoY. Conjugates of superoxide dismu-tase with the Fc fragment of immunoglobulin G // J. Biochem. 1991. — Vol. 110, № 6.-P. 868−872.
  238. Zee S. Body weight loss with the aid of alginic acid // Med. Arh. -1991.-Vol. 45.-P. 113−114.
  239. Zeitoun P., Salmon L., Bouche O. et al. Outcome of erosive/ulcerative reflux oesophagitis in 181 consecutive patients 5 years after diagnosis // Ital. J. Gastroenterol. Hepatol. 1998. — Vol. 30, № 5. — P. 470−474.
  240. Zhang Q., Yu P., Li Z., Zhang H. et al. Antioxidant activities of sulfated polysaccharide fractions from Porphyra haitanesis II J. Appl. Phycol. 2003. -Vol. 15.-P. 305−310.
  241. Zhang W., Piculell L., Nilsson S., Knutsen S.H. Cation specificity and cation binding to low sulfated carrageenans // Carbohydr. Polym. 1994. — Vol. 23.-P. 105−110.
  242. Zhou Y.C., Zheng R.L. Phenolic compounds and an analog as superoxide anion scavengers and antioxidants // Biochem. Pharmacol. 1991. — Vol. 42, № 6.-P. 1177−1179.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!