Этиопатогенетическая терапия гельминтозов: На примере токсокароза собак

Среди непродуктивных животных наиболее часто встречается токсо-кароз собак. Основной хозяин — домашняя собака — находится в тесном контакте с человеком и сельскохозяйственными животными. Токсокароз чрезвычайно широко распространен в Центральном Черноземье России. Ромашов В. А., Беспалова Н. С. с соавт. (1996), Беспалова Н. С. (1997;1999), Беспалова Н. С., Гладков Б. А. (1998), Беспалова Н. С., Долгова Е. Ю. (1999), Беспалова Н. С., Никитина Н. А. (1999, 2002) указывают, что экстенсивность токсокарозной инвазии среди щенков бродячих собак 2−6 месячного возраста в городе Воронеже и области достигает 80−90%, а среди породистых, содержащихся в квартирных условиях и частных домах — 52,5%.

Широкому распространению токсокарозной инвазии способствует нарушение правил содержания и выгула собак в условиях города. Аналогичная ситуация складывается в разных городах нашей страны и зарубе-жом, о чем свидетельствует целый ряд работ: Каспранова Г. Ф. (1989) — Во-личев А.Н., Горохов В. В. (1999) — Головкина Л. П., Волкова Г. Н. (2000) — Шинкаренко А. Н. с соавт. (2000) — Колеватова А. И., Жданова О. Б., Назарова С. Г. с соавт. (2000) — Полоз С. В., Якубовский М. В. (2000) — Снегирев С. И., Гуславский И. И. (2001) — Vanpairis О. et al (1991) — Franc М., Cadierques М.С. et al. (1997) — Overgaauw P.A., Boersema Y.H. (1998) — Araujo Flabior., Araujo Cristina P. et al. (2000) и другие.

Токсокароз чрезвычайно опасен для человека. Жертвой мигрирующих личинок токсокар (larva migrans) чаще всего становятся дети. По данным статистики Федерального Центра Государственного санитарно-эпидемиологического надзора министерства здравоохранения Российской Федерации (ГСЭН) в Брянской области ларвальный токсокароз у детей составляет 4,9%, в Москве — 5,4%, Тульской области -5,5%, Тюменской — 7,3%. В Чукотской автономной области, на Камчатке и в Якутии это заболевание не отмечено.

В настоящее время хорошо известно, что гельминтозы вызывают вторичные иммунодефициты в организме хозяина, сопровождающиеся иммунным дисбалансом (Озерецковская Н.Н., 1980;1995).Однако, применяемые для лечения антгельминтные препараты также могут вызывать иммунодепрессию (Малахов А.В., 1987. Колесников В. И. с соавт., 1990; Даугалиева Э. Х., 1991 и др.). В последнее время возрос интерес к иммунотерапии гельминтозов домашних животных, а также комплексной терапии, когда применяют и антгельминтики и иммуностимуляторы вместе, что значительно повышает иммунобиологическую реактивность организма (Даугалиева Э.Х., Колесников В. И., Новицкий С. В., 1997).

Исследования Серикбаевой В. (1979), Плиева А. (1984), Даугалиевой Э. Х., Курочкиной К. Г. (1989;1994), Маннаповой Р. Т. (2000) и других ученых характеризуют иммунобиологическую реактивность и иммунный статус животных при гельминтозах. Необходимо стимулировать иммунную систему больных животных так как даже при повторном применении ант-гельминтиков или увеличении их терапевтической дозы лечебный эффект не достигается и наблюдается повторное заражение (Даугалиева Э.Х., 1990).

В литературе имеются данные о патогенном воздействии ларвальных стадий гельминтов на организм хозяина в целом и на каждый орган или систему органов и тканей в частности. Вишняков С. И. (1967), Астафьев Б. А. (1975), Вовченко Н. М. (1980), Кондрахин И. П. (1985), Гладенко И. Н. (1985), Филиппов В. В. (1998) отмечают обязательное нарушение обменных процессов в организме больных животных. Они наблюдали изменения в морфологическом и биохимическом составе крови. Однако, исследователи подчеркивают, что механизм действия ряда антгельминтиков на состав крови и физиологические процессы организма хозяина до конца не изучен. Остаются до конца не выясненными и вопросы патогенеза при гельминто-зах.

Для более тонкого и полного изучения изменений в структуре пораженных гельминтами и их мигрирующими стадиями тканей и воздействия препаратов, вводимых больным животным, необходимо применение гистологических, гистохимических и электронномикроскопических исследований. Озерецковская Н. Н. (1960), Чебышев Н. В. (1975), Абдулазизов А. И. (1977), Рачковская И. В. (1984), Раисов Т. К. (1990) и ряд других исследователей указывают на глубокие патологические процессы в органах, вовлекающихся в процесс миграции гельминтов, а также воздействие метаболитов паразитов в выведении которых эти органы участвуют. Именно глубина поражения того или иного органа определяет тяжесть течения гельмин-тозов. Многие ученые подчеркивают необходимость изучения воздействия гельминтов на всех стадиях развития, а также антгельминтиков и иммуностимуляторов на тканевом и внутриклеточном уровне.

Знакомство с современной литературой показало, что не полностью изучены вопросы патогенеза при гельминтозах. В терапии гельминтозов необходимо исследовать воздействие веществ, повышающих резистентность организма, а также комплексное применение иммуностимуляторов с антгельминтиками. Остаются не исследованными вопросы воздействия паразитов и противопаразитарных препаратов на клетку хозяина. Все эти моменты требуют более пристального изучения.

Цели и задачи исследований. Целью работы было теоретически обосновать патогенез и иммунопатологию при токсокарозе собак, а также разработать методы иммунотерапии и иммунопрофилактики.

В связи с поставленной целью работы в задачи исследований входило:

1. Изучить особенности патогенеза и иммунопатологии при токсока-розах собак, а именно:

— белковый, жировой, углеводный и минеральный обмены на фоне спонтанного токсокароза собак;

— гистологическую, гистохимическую, морфометрическую, иммуно-морфологическую картину различных органов и тканей животных при спонтанном токсокарозе;

— динамику площадей структурных компонентов тимуса;

— на уровне клетки изменение ее состояния и соотношения органоидов в патологии.

2. Определить влияние комплексных препаратов в состав которых входит антгельминтик и иммуномодулятор (рибонуклеиновая или аминокислота):

— установить их влияние на факторы неспецифической резистентности;

— на морфологические и биохимические показатели крови;

— на иммуноморфологические, гистохимические, электронномикро-скопические изменения;

— определить антгельминтную эффективность и иммунокорректи-рующую способность комплексных препаратов и их пролонгирующего действия.

3. Разработать методические рекомендации по комплексной терапии при мигрирующих гельминтозах.

Научная новизна. Впервые проведено комплексное изучение спонтанного токсокароза собак с использованием современных иммунологических, гистохимических, гистологичеких, электронномикроскопических и морфометрических методов. Выявлены иммунологические и морфофунк-циональные изменения в органах больных собак при использовании различных комбинаций терапевтических и иммуностимулирующих препаратов на органзменном, органном и ультраструктурном (клеточном) уровнях.

Теоретически обоснованы и практически подтверждены наиболее эффективные сочетания антгельминтика и биологически активных веществ для физиологически щадящей терапии токсокароза собак.

Разработана и предложена производству комплексная терапия спонтанного токсокароза собак с использованием антгельминтика и иммуностимулятора (низкомолекулярной дрожжевой рибонуклеиновой кислоты и L-аргинина).

Новизна разработки подтверждена патентом на изобретение № 2 000 108 199/13(8 731) от 14 марта 2002 г. Комплексный антгельминтный препарат «НИЛРИБ».

Теоретическое и практическое значение работы.

1. Разработан новый способ лечения плотоядных животных при токсокарозе с применением комплексного препарата на основе антгельминтика и низкомолекулярной дрожжевой рибонуклеиновой кислоты для коррекции иммуносупрессивных состояний организма животных.

2. Предложен новый высокоэффективный антгельминтный препарат альбен С для терапии животных при токсокарозе, высокая эффективность и низкая токсичность которого подтверждены в условиях производства.

3. Разработана и утверждена в установленном порядке соответствующая нормативно-техническая документация на изготовление, контроль и применение в ветеринарной практике препаратов нилриб и альбен С.

4. Результаты работы вошли в ряд рекомендаций по профилактике и комплексной терапии, а также коррекции иммунодефицитных состояний организма животных при токсокарозе.

Экономичность, доступность и простота применения, фармакологическая совместимость и низкая токсичность позволяют рекомендовать изученные препараты для широкого использования в ветеринарной практике с высокой терапевтической эффективностью, что дает возможность снизить экстенсивность инвазии до 100%.

Реализация результатов. Результаты-исследований могут быть использованы при разработке и изучении комплексных региональных программ по применению профилактических и лечебно-реабилитационных средств и способов борьбы с гельминтозами домашних животных, а также при написании учебно-методической и научной литературы для ветеринарных, медицинских специалистов и студентов высших учебных заведений биологического профиля.

Апробация работы. Основные теоретические и практические положения диссертации доложены и получили положительные оценки на Всероссийских научных конференциях: «Гельминтозоонозы — меры борьбы и профилактика», Москва, 1994; «Актуальные вопросы медицинской паразитологии», Санкт-Петербург, 1998; Москва, 1999, 2001; «Экологические аспекты эпизоотологии и патологии животных», Воронеж, 1999; VIII Международном конгрессе по проблемам ветеринарной медицины мелких домашних животных, Москва, 2000. Научных конференциях профессорско-преподавательского состава, научных сотрудников и аспирантов ВГАУ, Воронеж, 1996;1999, а также Киевского национального аграрного университета, 1999. Региональных научных конференциях и семинарах: Воронеж, 1997;1999; 1-ой региональной конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины мелких домашних животных на Северном Кавказе», 1998. Международных научно-производственных конференциях по проблемам биологии и медицинской паразитологии, Санкт-Петербург, 2000. «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями (зоонозы)», Москва, 1999;2002. «Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях», Воронеж, 2002. «Достижения ветеринарной медицины — XXI веку», Барнаул, 2002.

Имеются публикации в официальном научном журнале Росскийской Кинологической Федерации (Научный сборник РКФ), Москва. — 2000. — № 4, 5- в Трудах Всероссийского инстйтута гельминотологии им. К. И. Скрябина, 2000.

Основные положения выносимые на защиту.

1. Гельминты и их мигрирующие стадии вызывают глубокие изменения гемограммы, биохимического и иммунологического гомеостаза, вызывают патоморфологические и патофизиологические состояния органов больных животных.

2. Терапия токсокароза собак с использованием антгельминтика в комплексе с биологически активными веществами наиболее эффективна и способствует созданию прочного иммунного баланса в организме и повышению иммунологического гомеостаза.

3. Комплексный препарат усиливает антгельминтную эффективность, снижает супрессивное воздействие паразита и антгельминтика, повышает и пролонгирует иммунные реакции, тем самым, приводит к освобождению животных от гельминтов или значительно снижает зараженность ими.

4. ВЫВОДЫ.

1. Изучено влияние имагинальных и мигрирующих форм Тохосага canis на организм собак. Гельминты вызывают динамические изменения гемограммы: снижение эритроцитов на 16,42%, гемоглобина — 17,82%, сегментоядерных нейтрофилов — 13,45%- повышение количества лейкоцитов на 17,76%), палочкоядерных нейтрофилов в 2,8 раза, эозинофилов — 3%, моноцитов-2,10%, лимфоцитов — 11,8%).

2. Установлены изменения в биохимического гомеостаза собак, зараженных токсокарозом: снижено содержание общего белка на 3,40%), мочевины — 13,50%, альбуминов — 15,69%), у-глобулинов — 6,12%, глюкозына 2,28 мМоль/л, общего кальция и неорганического фосфора — на 25,18 и 5,83%. Повышено содержание крови а-глобулинов на 19,25%), Р-глобулинов- 3,13%, ПВК и лактата-2,12 и 15,4%. Активность ферментов: АсАТ, АлАТ и ЩФ была повышена на 28,53- 34,38 и 19,40%) соответственно.

3. Гельминты и их мигрирующие стадии вызывают иммуносупрес-сию, проявляющуюся снижением показателей иммунологического гомеостаза: бактерицидной активности сыворотки крови на 0,16%, лизоцимной -1,35%о, комплементарной — до 4,17±0,25%, фагоцитарной — до 69,09%, фагоцитарного числа и фагоцитарного индекса-до 5,96±0,19 и 4,92±0,25 соответственно. '.

4. Развитие иммунопатологических процессов при гельминтозах сопровождается морфофункциональными изменениями в органах и тканях (печени, почках, легких и тимусе): нарушение микроциркуляции и кровообращения, аллергические и иммунодефицитные состояния, дистрофические изменения, явления воспаления, низкий уровень активности тканевых ферментов.

5. Электронной микроскопией установлены значительные ультраструктурные нарушения в клетках тимуса и печени больных животных, заключающиеся в уплотнении матрикса митохондрий, уменьшении доли ГЭС, исчезновении или резком скоплении гликогена, вакуолизации цитоплазмы, что характеризует клетки как функционально угнетенные. Площади коркового и мозгового вещества тимуса близки по значению (34,72±4,14 и 39,38±5,00%).

6. Применение нилверма в дозе 1 мл/10 кг снизило ИИ в 19 раз, ЭИ — на 80%. Препарат мало влияет на гемограмму собак, но изменяет биохимический гомеостаз собак: снижает содержание альбуминов на 0,05%, у-глобулинов — 0,20%, глюкозы, общих липидов — на 0,51%, общего холестерина—на 1,58%.

6.1.

Введение

нилверма не только не повлияло на факторы иммунной защиты, низкие изначально у больных животных, но и усугубило морфо-функциональные изменения в органах и тканях. Наблюдалась тенденция к усилению процессов дистрофии и некроза, наряду с которыми отмечались защитно-приспособи-тельные реакции, связанные с раздражающим и токсическим действием нилверма.

6.2. На электронограммах срезов печени и тимуса животных после однократного применения нилверма установлено снижение электронной плотности цитоплазмы, уменьшение количества органоидов и включений. В ядрах наблюдались деструктивные процессы. Основная масса клеток тимуса в малоактивном состоянии. Площади коркового и мозгового вещества тимуса почти равны (40,48±4,39 и 41,89±4,29%).

7. Комплексный препарат (нилверм + аргинин + РНК) обладает высоким терапевтическим, протективным, антитоксическим и иммуностимулирующим эффектом. Снижает ИИ в 29,2 раза, ЭИ — на 80% (до 100%).

7.1. Комплекс нилверм + аргинин + РНК значительно улучшает гемограмму подопытных животных. Количество эритроцитов увеличилось.

1 ^ на 0,80×10 /л, гемоглобина — 15,95 г/л, нормализовалось соотношение составных частей лейкоформулы.

7.2. Данная комбинация препаратов оказала положительное влияние на биохимический гоместаз собак: повысился уровень общего белка на 3,27%, мочевины — 16,66%, общих липидов и общего холестерина, глюкозы, макрои микроэлементов. Нормализовалось соотношение белковых фракций и активность ферментов.

7.3. Комплексный препарат нилверм + аргинин + РНК активизирует иммунологический гомеостаз собак, повышая бактерицидную активность на 3,60%, лизоцимную — 10,16%, комплементарную — 2,07%, фагоцитарную — 3,75, фагоцитарное число и фагоцитарный индекс — на 9,94 и .1,45.

• * соответственно.

7.4. Комбинация нилверм + аргинин + РНК обладает выраженным антитоксическим и протективным действием. Гистологически установлено, что на срезах органов клетки хорошо сохранены с четко выраженным ядром и ядрышком. Лишь на отдельных небольших участках явления дистрофии сохраняются.

7.5. Электронномикроскопически установлено, что после применения комплекса нилверм + аргинин + РНК клетки печени и тимуса имеют характерную для них ультраструктуру. Органоиды клеток сохранены, что характеризует их как функционально активные. Активность клеточных ферментов высокая. В тимусе преобладает доля мозгового вещества (45,21 ±3,27%) над корковым (36,70±3,05%).

8. Менее эффективны комбинация нилверм + РНК и отдельно РНК или риботан. Они снижают ИИ в 31,6- 4,4 и 3,8 раз соответственно, ЭИна 40−80%. У подопытных животных отмечены положительные, но менее выраженные, чем в III группе, динамические изменения гемограммы, биохимического и иммунологического гомеостаза, патоморфологические и функциональные изменения в органах собак.

9. Препарат альбен С обеспечивает терапевтический эффект до 100%) в дозе 1 табл. на 5 кг массы, однократно, внутрь с кормом при токсокарозе плотоядных.

9.1. Препарат альбен С не вызывает серьезных изменений в динамике гемограммы, биохимическом и иммунологическом гомеостазе собак.

9.2. Препарат альбен С не вызывает существенных патоморфологи-ческих и патофизиологических последствий в организме собак.

10. Комбинация нилверм + аргинин и отдельно аргинин снижают ИИ в 25,3 раза и на 9,6 экз. соответственно. ЭИ снижают на 80% и не изменяют ее в группе аргинина. Препараты не оказывают существенного влияния на гемограмму, биохимический и иммунологический гомеостаз подопытных животных. Обладают слабо выраженным антитоксическим и протективным действием.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

1. Методические рекомендации по комплексной терапии токсокароза собак. Утверждены Российской Кинологической Федерацией, 2001 г.

2. Патент на изобретение № 2 000 108 199/13(8 731) Комплексный антгельминтный препарат «НИЛРИБ» от 14 марта 2002 г.

3. Методические рекомендации по коррекции естественной резистентности и иммунного статуса при комплексной терапии мигрирующих гельминтозов домашних животных в Липецкой области. Утверждены начальником Управления ветеринарии Липецкой области 18 декабря 2002 г.

4. Наставление по применению препарата альбен С при цестодозах и нематодозах собак и кошек. Утверждено Департаментом ветеринарии Минсельхоза РФ 01.08.02 г. •.

5. Методические рекомендации по профилактике и лечению токсокароза собак. Утверждены Главным государственным ветеринарным инспектором Воронежской области 12 марта 2003 г.

6. Методические рекомендации по комплексной терапии на основе антгельминтика и иммуномодулятора при мигрирующих формах гельминтозов на примере токсокароза собак. Утверждены проректором по научной работе Воронежского госагроуниверситета им. К. Д. Глинки 17 марта 2003 г.

7. Региональная научно-обоснованная система профилактических и лечебно-реабилитационных мероприятий при токсокарозе плотоядных. Утверждена зам. руководителя Департамента ветеринарии минсельхоза России, 2003 г. Материалы диссертации используются в учебном процессе в качестве лекций для студентов биологических специальностей Воронежского государственного аграрного университета, Воронежского института ППКК АПК.

2.2.5.5.

Заключение

.

У больных токсокарозом животных IX группы отмечалось значительное повреждение структуры исследуемых органов в виде дистрофии вплоть до некроза и некробиоза на отдельных участках. Электронной микроскопией установлены значительные ультраструктурные нарушения органоидов гепатоцитов, заключающиеся в уплотнении матрикса митохондрий, в уменьшении доль ГЭС за счет потери ею рибосом, исчезновении или резком снижении гликогена и увеличении липидных включений, в вакуолизации цитоплазмы с образованием зон свободных от органоидов.

Лимфоциты, в большинстве своем, мало активированы, с небольшим уплотненным ядром и узкой полоской цитоплазмы, в которой встречались редкие органоиды. Во всех клетках практически отсутствовала гранулярная и агранулярная эндоплазматическая сеть.

Активность ферментов КФ, ЩФ, НЭ и СДГ печени и тимуса значительно снижена. Площади коркового и мозгового вещества тимуса близки по значению и составляют 34,72+4,14 и 39,38±5,00% соответственно. Морфофункциональное состояние подавляющего большинства лимфоцитов можно расценивать как малоактивное.

После дегельминтизации щенков нилвермом сильно выраженная дистрофия подавляющего большинства клеток исследуемых органов сохранялась, а в отдельных органах усугублялась. Это подтверждается данными электронной микроскопии. Наряду с этим отмечаются защитно-приспособительные реакции, связанные с токсическим и раздражающим действием нилверма. Оно выражается в большем скоплении лимфоидных клеток как вокруг сосудов, так и непосредственно в паренхиме органа. Уровень активности клеточных ферментов несколько выше, чем в группе IX. В тимусе основная масса клеток в малоактивном состоянии. Площади коркового и мозгового вещества примерно равны (40,48±4,39 и 41,89±4,24% соответственно) и почти не отличаются от данных IX группы.

Включение в схему лечения препаратов нуклеиновых кислот в комбинации с нилвермом или по отдельности наложило отпечаток на структурную организацию органов. Почти вся площадь срезов выглядит однообразной. Основная масеа клеток сохранена, с хорошо выраженным ядром и цитоплазмой, что подтверждается электронно-микроскопическими исследованиями. Однако, встречаются клетки в неактивном морфофункцио-нальном состоянии. В тимусе превалировали активированные клетки с хорошо выраженной ультраструктурой. Наблюдалось расширение зоны мозгового вещества до 45,21±3,27% и сужение коркового до 36,70±3,05%. Активность КФ, ЩФ, НЭ и СДГ повышены по сравнению с IX группой в 1,61,8 раза, с I группой — в 1,7−2,0 раза.

В IV, V, VII и VIII группах комбинации аргинин + РНК, нилверм + РНК, а также только РНК или риботан оказали положительное влияние на морфофункциональное состояние органов, но оно было менее выражено, чем в III опытной группе. В гистологических срезах органов животных этих групп преобладали структурно нормальные клетки, расположенные преимущественно вокруг сосудов, а дистрофически измененные смещены на периферию. Клетки в большинстве своем имели характерную для данного органа структуру, содержали хорошо выраженное ядро с ядрышком и умеренным количеством хроматина. Активность тканевых ферментов КФ, ЩФ, НЭ и СДГ повысилась по сравнению с IX и I группами в среднем на 1,3−1,6 раза. В тимусе была отмечена морфофункциональная перестройка, характеризующаяся увеличением площади мозгового вещества в среднем до 43,98+4,33−46,20+4,69% и уменьшения доли коркового до 37,93±1,74−35,72±4,75%.

Введение

аргинина животным VI опытной группы и комбинации нилверм + аргинин во II группе сопровождалось очень слабым изменением морфофункционального состояния печени, почек, легких и тимуса. Подавляющее большинство клеток находилось в состоянии выраженной дистрофии и лишь небольшие островки клеток относительно сохранились. В таких клетках разрушены или деформированы ядра, а в цитоплазме образуются вакуоли. Активность тканевых ферментов ниже, чем в других опытных группах, но выше данных IX и I группы в среднем в 1,4−1,5 раза или на 10,42−14,61 у.е. оптической плотности соответственно. В тимусе не отмечено существенных улучшений, но в структурной организации преобладает мозговое вещество 42,62+4,97−44,06±3,62%. Площадь коркового вещества составила — 39,68±4,72−37,94±3,62%, что указывает на незначительную активацию органа.

3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

Установлено, что гельминты и их мигрирующие стадии выделяют в организм хозяина токсичные продукты обмена, вызывающие серьезные изменения количественного и качественного состава крови хозяина. У спонтанно зараженных токсокарозом щенков IX группы мы отмечали сни.

12 жение содержания в периферической крови эритроцитов на 0,83×10 /л (16,42%) гемоглобина на 19,6 г/л (17,82%), повышение количества лейкоцитов на 2,24×109/л (17,76%). В лейкоформуле: увеличение палочкоядерных нейтрофилов до 2,80±0,29%, что превышало физиологическую норму в 2,8 раза: снижение сегментоядерных нейтрофилов до 29,60±1,14% (13,45%) — повышение эозинофилов до 13,39±1,90% (3%) — моноцитов до 2,40±0,35% (2,1%) — лимфоцитов до 51,81±2,68% (11,80%) по сравнению с физиологической нормой соответственно, то есть у больных животных наблюдались явления эритропении, гемоглобинемии, лейкоцитоза. В лейкоформуле — нейтрофилия с простым регенеративным сдвигом влево, эози-нофилия, моноцитоз, лимфоцитоз. Дегенеративных изменений в клетках не обнаружено.

Аналогичные изменения в морфологическом составе крови животных, больных токсокарозом и другими гельминтозами, имеющими в своем развитии мигрирующие стадии отмечали: Демидов Н. В. (1964, 1965) — Дау-галиева Э.Х. (1975) — Якубов В. Н., Лучко В. П., Лемеш В. М. (1980) — Абали-хин Б.Г. (1984) — Каспранова Г. Ф. (1989) — Мужжавлев Е. Ф. (1991) — Петров Б. Ф., Абалихин Б. Г. (1993) — Акбаев М. Ш. (1998) и другие ученые. Авторы обнаруживали явления резкой эритропении, гемоглобинемии, моноцитоза, лимфопении, в хронических случаях — уменьшение количества палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов, а в отдельных тяжелых случаяхдегеративные сдвиги в составе белой крови, чаще анизоцитоз. Наиболее сильные изменения наблюдаются на 60 сутки с момента заражения, несколько стабилизируются к 90 суткам, но не достигают показателей здоровых животных. Повышение количества нейтрофилов — важная защитная реакция организма, так как эти клетки содержат рецепторы для IgG и белков системы комплемента, они мигрируют и концентрируются в местах его активации. Нейтрофилы активно фагоцитируют опсонизированные частицы и действуют как эффекторы гуморального иммунитета. Моноциты являются морфологической модификацией фагоцитирующих клеток и повышение их количества также важно. Увеличение количества эозинофилов способствует разрушению паразитов за счет содержащейся в клетках пе-роксидазы. Эозинофилы вызывают хемотаксическую реакцию на комплекс антиген — антитело, которые перемещаются в места нахождения гельминтов. Эозинофилия связана с паразитарной инвазией и аллергией, на что указывает ряд авторов (Даугалиева Э. Х, Курочкина К. Г., Аринкин А. В., 1996; Павлович С. А., 1998; Barlough J.E., Pedersen N.C., 1995; Askenase P.W., 1977 и другие).

В биохимическом составе крови больных токсокарозом животных мы констатировали снижение общего белка на 3,40%- снижение уровня мочевины на 13,50%. Было обнаружено изменение уровня белковых фракций и их соотношения. Количество альбуминов ниже нормы на 15,69%- у-глобулинов — на 6,72%- а-глобулинов — превышало норму на 19,25%- Р-глобулинов — на 3,73±2,10%.

В липидном обмене серьезных изменений не было выявлено. Уровень общих липидов составил 7,91±0,23 г/л, общего холестерина 3,86±0,14 мМоль/л. Оба показателя находились в пределах нижней границы физиологической нормы.

В углеводном обмене уровень глюкозы снижен по отношению к физиологической норме на 2,28 мМоль/л, а ПВК и лактата повышен на 2,12 и 15,4% соответственно.

В минеральном обмене у зараженных животных снижено содержание в крови общего кальция и неорганического фосфора по сравнению с физиологической нормой на 25,18 и 5,83% соответственно. Количество неорганического магния и неорганического натрия составило 0,251 ±0,04 и 140,28±7,37 мМоль/л и находилось в пределах нижних границ физиологической нормы.

Активность ферментов АсАТ, АлАТ и ЩФ была повышена на 28,53- 34,38 и 19,40% по отношению к физиологической норме соответственно.

В литературе также есть указания на изменение белкового обмена у животных при имагинальных и ларвапьных гельминтозах, в том числе и при токсокарозе. Чубис А. И. и Битюков В. Э. (1965) — Вовченко Н. М. (1980) — Петров Ю. Ф. (1984) — Филиппов В. В. (1988) и др. доказывают обязательное нарушение белкового обмена, которое сопровождается уменьшением содержания общего белка и перегруппировкой белковых фракций. Это объясняется нарушением структурной организма печени и нарушением ее белковообразовательной функции, что приводит к подавлению специфического и неспецифического иммунитета, а также связано с угнетением функции лимфоидных органов. Увеличение содержания в крови одних белковых фракций и снижение других связано с сенсибилизацией организма хозяина и аллергической реакцией.

Азимов Ш. А. (1974) — Твердохлебов П. Т, Аюпов Х. В. (1988) Муж-жавлев Е.Ф. (1991) — Карпенко Л. Ю., Тиханин В. В. (1998) — Акбаев М. Ш. (1998) — и другие указывают на повышение уровня общего холестерина и липидов, снижение глюкозы, повышение содержания в крови ПВК и лактата, повышение активности ферментов. Это объясняется нарушением гликогенобразующей функции печени, когда происходит накопление в крови недоокисленных продуктов ПВК и лактата, что приводит к развитию молочнокислого ацидоза и замедлению экскреции почками мочевой кислоты и соответственно повышению содержания ее в крови.

Никитин В.Ф. (1985) — Байматов В. Н., Нурхаметов Х. Г. (1990) — Нор-баев К.Н. (1991) и другие считают, что нарушение липолитической функции печени при гельминтозах приводит к накоплению общих липидов и общего холестерина в крови, что в конечном счете приводит к образованию желчных камней и атеросклерозу. Работы Демидова Н. В. (1965, 19 821 987) — Вишнякова С. И. (1967) — Астафьева Б. А. (1975) — Кондрахина И. П. (1985) и других обращают внимание, что снижение содержания кальция связано с ослаблением фагоцитарной функции лейкоцитов и часто сопровождает миграционную стадию гельминтозов. Снижение этих макроэлементов в крови приводит к нарушению остеосинтеза и развитию остеодис-трофии и рахита. Мы нашли довольно мало сведений о динамике микроэлементов. Демидов Н. В. (1987) упоминает о снижении концентрации натрия и магния при мигрирующих формах гельминтозов.

Петров Ю.Ф., Мамедов М. С. (1988) — Петров Ю. Ф. (1988) — Мужжав-лев Е.Ф. (1991) — Шелякин И. Д., Кузьмичева В. Н. (1996) и другие указывают на повышение активности ферментов крови АсАТ, АлАТ и ЩФ.

Нами также было установлено снижение факторов естественной резистентности организма больных животных.

Бактерицидной активности на 0,76% к фоновым данным, лизоцим-ной — на 1,35%, комплементарной — до 4,17±0,25%, фагоцитарной — до 69,09%. Показатели фагоцитарного числа и фагоцитарного индекса также были довольно низкими — 5,96±0,19 и 4,92±0,25 у.е. Все показатели продолжали плавно снижаться в ходе опыта.

Литературные данные соответствуют полученным нами. Даугалиева Э. Х., Колесников В. В., Новицкий, 1976; Карпенко Л. Ю., Тиханин В. В., 1997; Кораблева Т. Р., Барсуков В. В., 1998 и другие считают, что лизоцим — фермент относящийся к классу гидролаз стимулирует естественную резистентность организма и попадает в кровь при разрушении лейкоцитов. Он способствует предупреждению заболевания. Белки системы комплемента опсонируют чужеродный белок и подготавливает его для фагоцитоза, а также участвуют в процессе воспаления и иммунных реакциях, то есть фиксируют антитела на антигене, вызывают хемотаксис лейкоцитов, активизируют клетки иммунной памяти, участвуют в процессе цитолиза.

Даугалиева Э.Х., Янченко А. Я. (1985) считают, что угнетение фагоцитарной активности усугубляется в случае перехода острого процесса в хронический. Реакция фагоцитоза отражает состояние иммунной системы макроорганизма при гельминтозах.

Гельминты снижают активность факторов неспецифической резистентности, что приводит к развитию иммунопатологии, сопровождающейся иммунодепрессией.

Нами также были установлены морфофункциональные изменения в органах и тканях при токсокарозе, которые указывают на развитие иммунопатологических процессов: дистрофические изменения, нарушение микроциркуляции и кровообращения, аллергические и иммунодефицитные состояния, явления воспаления. Например, в нечени, почках, легких и тимусе отмечалась сосудистая реакция, большая часть клеток находилась в состоянии белковой вакуольной и жировой дистрофии, а отдельные группы клеток в состоянии резко выраженной дистрофии и некробиоза. Электрон-номикроскопически было установлено, что большая часть клеток представляла собой электронносветлую массу с редкими разрозненными органоидами, находящимися как бы во взвешенном состоянии. Митохондрии с нарушенными или относительно сохранившимися кристами средней электронной плотности. Отдельные ядра находились в состоянии пикноза.

Функциональная активность клеток снижена, на что указывает низкий уровень активности КФ, ЩФ, НЭ и СДГ. Это влечет за собой замедление скорости реакций цикла Кребса, нарушение катаболических и синтетических функций клеток. Об этом свидетельствует нарушение биохимического состава крови. Аналогичные процессы описывали в своих работах.

Цветаева Н.П., 1963; Озерецковская Н. И., 1967; Аникиева JI.B., Аниканова B.C., Осташкова В. В., 1990; Маннапова Р. Т, 1998; Сергиев В. П., Малышев Н. А., Дрынов Н. Д., 1999 и другие.

Авторы указывают, что гельминты и их мигрирующие формы вызывают глубокие нарушения обмена веществ, связанные с недостаточной функцией поврежденного органа, а также антигенным воздействием.

Для дегельминтизации собак мы использовали наиболее известный и широко применяемый антгельминтик — нилверм. Однократное введение препарата животным I группы мало повлияло на морфологический состав.

1 «У крови. Количество эритроцитов повысилось на 0,04×10 /лгемоглобина на 7,87 г/лколичество лейкоцитов снизилось на 0,07×109/л по сравнению с группой больных животных.

В лейкоформуле снизилось процентное содержание палочкоядерных нейторофилов на 0,43%- сегментоядерных — повысилось на 4,0%. Количество эозинофилов снизилось на 2,05%- моноцитов — на 0,29%- лимфоцитов — на 1,34% по сравнению с данными животных IX группы.

Многие авторы считают, что негативное влияние на состав крови животных целого ряда антгельминтных средств зависит от химической структуры препарата, его дозы, кратности введения, продолжительности применения и индивидуальной реактивности организма. Петров Ю. Ф., Мамедов М. С. (1988) отмечали высокую смертность овец после дачи нилверма. Малахова Е. И. (1973) выявила лейкоцитарную и эозинофильную реакции после дегельминтизации пиперазином при экспериментальном аскаридозе Михайлова Е. П. (1976) указывает на стойкую эозинофилию.

Подгорный В.Р., Цветаева Н. П. (1965) — Орипов А. О., Мирзаев Ш. М., Садыков A.M. (1972) и другие авторы указывают на снижение в крови лейкоцитов, эозинофилов на 6−7% при увеличении процентного соотношения юных и палочкоядерных нейтрофилов на 4%, увеличении количества лимфоцитов до 11%. Необходимо отметить, что резкое снижение эозинофилии отрицательно сказывается на результатах дегельминтизации, так как эти клетки участвуют в ограничении аллергических реакций и нейтрализации токсинов.

В то же время Арапов В. В., Диденко П. П., Архипов И. А. (1999) — Щелканов К. Г., Колесников В. И. (1979) считают, что негативное влияние антгельминтиков связано с нарушением порядка их применения, низкими химиотерапевтическими дозами, длительным периодом применения.

Чебышев Н.Е., Богоявленский Ю. К., Гришина Е. А. (1998) считают, что клетки крови подвергаются токсическому влиянию антгельминтиков и изменяют свою функциональную активность и структуру, что в конечном счете приводит к нарушению метаболических процессов в организме животных.

В биохимическом составе крови животных I группы по сравнению с IX группой мы констатировали незначительное повышение уровня общего белка на 0,03- на 0,87% - мочевины. Содержание альбуминов снизилось на 0,05%, (3-глобулинов — на 10%- у-глобулинов — на 0,20%- глюкозы на 16,21%- повысилось содержание а-глобулинов на 0,21%- общих липидов на 0,51%, общего холестерина — на 1,58%- ПВК на 0,93%- лактата — на 11,90%. В минеральном обмене мы наблюдали незначительное повышение количества общего кальция на 1,46%- неорганического фосфора на 0,35%- неорганического магния на 0,79% по сравнению с IX группой. Содержание неорганического натрия не изменилось.

Активность ферментов после дегельминтизации снизилась: АсАТ на 2,80%- АлАТ — на 3,20%, ЩФ на 3,00%. То есть однократное применение нилверма вызвало хотя и незначительное, но все же отрицательное воздействие на белковый, липидный, углеводный, минеральный обмены и активность ферментов крови.

В литературе имеется относительно немного данных по изучению биохимического состава крови животных после применения антгельмин-тиков. Городович Н. И. (1956) установил увеличение концентрации альбуминов и снижение у-глобулинов после применения дитразинфосфата. Минеральный обмен не претерпел изменений. Смирнов А. В., Колесниченко Б. О. (1996) отмечали при дегельминтизации собак фенкуром снижение активности щелочной фосфатазы, мальтазы и других ферментов в 1,4−1,7 раза. Melo М.М., Margues А.Р. et el (1997) указывают на изменение активности АлАТ, АсАТ и ЩФ в течение 3-х недель после дегельминтизации собак ивермектином в терапевтической дозе. Такой же эффект выявила Галимова В. З. (1998), когда после дегельминтизации нилвермом снизилась активность ферментов на 52−56%, количество летучих жирных кислот на 21−25%. Нарушение в белковом обмене установили Переверзева Э. В., Ба-яндина Д.Г. с соавт. (1987).

Антгельминтик, попадая в кровь животного образует химические соединения с ее составными компонентами и трансформируется в ткани. Токсическому воздействию таких соединений подвергаются как сами клетки крови, так и клетки органа, в который они попадают, что приводит к нарушению функционального состояния последнего, а также нарушению биохимических процессов в организме в целом.

Целый ряд авторов (Филиппов В.В., 1982; Даугалиева Э. Х., Филиппов В. В., 1991; Прудников С. И., 1996; Черепанов А. А., 1998; Субботин В. В., Косменкова Н. Е., Лайпанов Б. К., 2001 и другие) считают, что подавляющее количество антгельминтиков обладает иммунодепрессивным эффектом. Сила этого эффекта зависит от химической структуры препарата, дозы, путей введения, продолжительности применения и индивидуальной иммунологической реактивности животного.

Наши исследования подтверждают эти данные. После однократного введения нилверма показатели неспецифической резистентности, низкие у больных животных изначально, мало изменились. БА, КА, ФА, JIA, ФИ и ФЧ повысились по сравнению с данными IX группы на 0,72- 0,08- 0,22- 0,15- 0,62 и 0,09 у.е. соответственно.

Возможно, введение химических веществ, вызывающих гибель паразитов приводит к сенсибилизации организма их антигенами, что усугубляет течение патологического процесса и вызывает подавление иммунной системы хозяина, а также тяжелые иммунопатологические реакции.

Морфофункциональные изменения после применения антгельминтиков по мнению многих исследователей усугубляются (Даугалиева Э.Х., Колесников В. И., Кошеваров Н. И., 2000; Галиуллина A.M., 2000; Манна-пова Р.Т., 1999; Куликова О. Л., 2001 и другие). Мы также обнаружили, что степень повреждения тканей после лечения нилвермом не имела тенденции к улучшению. Встречались скопления лимфоидных и гистиоцитарных клеток вокруг сосудов, что указывает на аллергические и иммунологические процессы. Большая часть клеток в состоянии сильно выраженной дистрофии и даже некроза.

На электронограммах срезов печени и тимуса отчетливо видно, что морфофункциональное состояние клеток мало отличается от группы зараженных животных. Уменьшена электронная плотность цитоплазмы за счет увеличения доли гиапоплазмы, уменьшена численность органоидов и включений. В ядрах наблюдались деструктивные процессы: мембраны сморщены и преобладает гетерохроматин. Уровень активности ферментов печени и тимуса был несколько выше данных больных животных и составил КФ — 40,43±5,12-" 41,60±3,75- ЩФ — 44,17±3,60- НЭ — 46,59±3,87- 42,41 ±8,16- СДГ — 39,07±5,26- 40,87±7,03 ед.

Негативным моментом в дегельминтизации по мнению большинства авторов является снижение количества эозинофилов, которые ограничивают аллергические процессы и участвуют в нейтрализации компонентов, вызывающих их. А также иммунодепрессивное действие подавляющего количества антгельминтиков и способность их усугублять патоморфологи-ческие изменения в органах и тканях больных животных. Все это приводит к выводу о необходимости комплексной терапии при мигрирующих гель-минтозах (Чебышев Н.Е., Богоявленский Ю. К., Гришина Е. А., 1998; Смирнов А. Р., Колесниченко Б. О., 1996; Тотиков З. Д., 1997; Галимова В. З., 1998; Саушкин В. В., 2001; Даугалиева-Э.Х., Курочкина К. Г., 2001; Саит-батталова А.И., Маннапова Р. Т., 2001 и другие).

В качестве иммуностимулятора и биологически активного вещества мы выбрали РНК — низкомолекулярную дрожжевую, риботан — смесь низкомолекулярных полипептидов и фрагментов РНК, а также аргинин. Из различных комбинаций этих веществ с антгельминтиком высокий терапевтический, иммуностимулирующий, протективный и антитоксический эффект оказал комплекс нилверм + аргинин + РНК (III группа), который значительно улучшил морфологический и биохимический состав крови подопытных животных. Количество эритроцитов по сравнению с группой больных животных (IX) и группой, где применяли только нилверм (I) увеличилось на 0,80×10|2/л и 0,76×10|2/лгемоглобина — 15,95 и 8,08 г/лколичество лейкоцитов снизилось на 1,94 и 0,60×109/лсодержание в лейко-формуле палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов, а также. лимфоцитов повысилось на 0,05- 0,13% и 1,37% по отношению к IX группе, но снизилось на 0,48 и 3,88% - к I группесодержание эозинофилов и моноцитов снизилось на 0,69 и 0,86% по сравнению с IX. Оставалось повышенным к I группе количество эозинофилов и лимфоцитов на 1,26 и 2,71 соответственно.

В белковом обмене наблюдалось повышение уровня общего белка по сравнению с IX и I группами на 3,27 и 3,24%- мочевины на 16,66 и 17,39%- альбуминов на 8,01 и 8,06%- у-глобулинов на 3,81 и 4,01% соответственно при снижении, а и Р-глобулинов на 10,39 и 10,60%. Повышение уровня общих липидов и общего холестерина на 0,63 и 2,52- 1,13 и 4,04% соответственноглюкозы на 36,72 и 32,41% при понижении ПВК и лактата на 1,43 и 46,30- 0,52 и 39,05% соответственно. В минеральном обмене — повышение содержания в сыворотке крови общего кальция и неорганического фосфора, магния и натрия на 2,97- 0,53- 0,40 и 0,014% - к IX группе- 1,46- 0,18 и 0,014% - к I группе и снижение на 0,40% уровня магния по сравнению с I группой. Наблюдалась тенденция к нормализации активности всех ферментов: АсАТ, Ал AT и ЩФ по сравнению с IX и I группами на 8,80 и 6,17%- 9,20 и 6,20%- 8,90 и 6,07 соответственно.

Прослеживалась четкая тенденция к повышению активности факторов неспецифической резистентности БА, JIA, КА, ФА, а также ФЧ и ФИ по сравнению с группой больных животных и нилверма на 3,02, 3,60- 12,13, 10,16- 1,54 и 2,07%- 2,30, 3,75- 12,05, 9,94- 1,45 и 1,45% соответственно. Это указывает на высокую биологическую и иммунологическую активность выбранных веществ, а также их низкую токсичность, что хорошо просматривается на гистологических и электронно-микроскопических срезах. Вся площадь среза выглядит достаточно однородной, за исключением отдельных участков. Клетки хорошо сохранены с четко выраженным округлым ядром и ядрышком в центре. Цитоплазма интенсивно окрашена, глыбчатой структуры, слабооксифильная. Вокруг сосудов встречаются отдельные лимфоидные клетки.

На электронограмме видно, что гепатоциты имеют характерную для этих клеток ультраструктуру: с крупным округлым ядром и ядрышком с умеренным количеством хроматина, преимущественно в виде эухромати-на. Органоиды клеток сохранены, что характеризует их как функционально активные. Гистохимические исследования определили довольно высокую активность в печени и тимусе ферментов КФ, ЩФ, НЭ и СДГ их значения были равны 74,37±5,67 и 67,85±7,74- 71,64±5,28- 76,03±8,51 и.

69,33±7,90- 70,15±3,48 и 74,84±5,72 единиц оптической плотности соответственно. Это объясняется ускорением биохимических реакций в цикле Кребса, соответственно усилением катаболических и синтетических функций клеток, что подтверждается значительным улучшением биохимического состава крови.

Что касается тимуса, то и на гистологических и электронно-микроскопических срезах превалируют активированные клетки с расширенной цитоплазмой в которой хорошо выражены внутриклеточные ультраструктуры и активное ядро с двумя ядрышками. Соотношение структурных площадей изменяется в сторону увеличения мозгового вещества. Оно составляет 45,21±3,27%, в то время как корковое уменьшается до 36,70+3,05%. Это объясняется активированием тимуса, то есть его готовностью вырабатывать иммунокомпетентные клетки.

Менее эффективны препараты: альбен С (IV группа) — РНК (V группа) — нилверм + РНК (VII группа) и риботан (VIII группа). Как считают Даугалиева Э. Х. и Курочкина К. Г. (2001) действие большинства иммуностимуляторов амбивалентно и направленность их действия в значительной степени определяется дозой препарата, кратностью введения и исходной иммунореактивностью организма. Преимущество комбинаций аминокислот с антгельминтиком состоит в том, что они обладают значительной биологической активностью, что объясняется поливалентным действием нуклеиновых кислот на организм (Фролов В.М., 1979; Гринио Л. П. с соавт., 1991; Галиуллина A.M., 2000).

Главной особенностью экзогенной РНК, как указывают Земсков В. М. с соавт. (1973) — Белоус А. П. с соавт. (1974) — Булатникова В. А. (1977) — Земсков A.M. (1979) — Аликин Ю. С., Юшков Ю. Г., Чемитов В. Д. (2002) и другие является ееспособность стимулировать процессы метаболизма в клетках путем усиления синтеза эндогенных нуклеиновых кислот, тканес-пецифичных белков и ферментов. Усиливаются окислительновосстановительные процессы и синтез макроорганических соединений, происходит выраженная стимуляция факторов неспецифической резистентности. Кроме того, происходит стимуляция гипофизарно-надпочечниковой системы и повышение уровня эндогенных глюкокорти-коидов, гиперпродукция гранулоцитарных антикейлонов как указывают Фролов В. М. (1979) — Андрушкова О. А., Плевинскис В. Я., Якименко С. А. (1990).

У подопытных животных IV, V, VII и VIII групп мы отмечали положительные сдвиги в морфологическом и биохимическом составе крови. Количество эритроцитов у животных этих гру^п увеличилось по сравнению с IX группой на 0,58−0,69×1012/лс I группой — 0,54−0,61×10,2/л. Уровень гемоглобина поднялся на 10,75−13,15 г/л по сравнению с IX и на 2,885,28 г/л — с I группой. Количество эритроцитов снизилось на 1,24−1,80×10% по отношению к IX и 0,22−0,62×109/л — к I группе.

В лейкоформуле повысилось процентное содержание палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов в среднем на 0,22 и 0,10% в IV группе, а в V, VII и VIII количество палочкоядерных понизилось на 0,13−0,30%, а сегментоядерных повысилось на 0,10−2,02% по сравнению с данными группы больных животных. Количество эозинофилов и моноцитов снизилось на 0,84−1,79% и 0,70−0,90% соответственно, а лимфоцитов — повысилось на 0,09−1,49% во всех группах, кроме V, где показатель снизился на 0,13% по сравнению с IX группой. По отношению к I группе повысилось содержание палочкоядерных нейтрофилов на 0,13−0,63%- эозинофиловна 0,8−1,15%, лимфоцитов — 0,43−2,83%, но снизилось количество сегментоядерных нейтрофилов на 1,55−3,91% и моноцитов — 0,41−0,61%.

В биохимическом составе крови также отмечались положительные изменения. Уровень общего белка поднялся во всех группах на 3,13−3,24%- мочевины — 16,34−17,54%- альбуминов — 7,85−8,31%- у-глобулинов — 3,55.

4,12%, а, а и {3-глобулинов понизился на 6,59−10,89%" и 1,86−2,30%) соответственно в сравнении с данными IX группы. Эта же тенденция сохранялась и по сравнению с I группой. Уровень общего белка повысился на 3,103,21%: мочевины — 17,97−19,71%- альбуминов-4,62−8,36%- у-глобулинов — 3,75−4,32%". Снизилось содержание, а и Р-глобулинов в среднем на 6,8011,10% и 1,81−2,20%) соответственно. Мы наблюдали повышение уровня общих липидов и общего холестерина на 0,38−1,75% и 0,51−1,05% по сравнению с IX и на 0,88−1,87% и 2,06−3,06% по сравнению с I группой. Количество глюкозы поднялось в среднем на 24,82−34,16%- а ПВК и лактата снизилось 1,07−1,16 и 32,15−42,76% по отношению к IXповысилось на 11,46−27,27%, общее количество глюкозы. Снизилось — ПВК и лактата на 0,15−0,25 и 22,99−35,03% соответственно. В минеральном обмене повысилось содержание всех макрои микроэлементов: общего кальция на 2,412,47%, неорганического фосфора 0,35−0,53%- неорганического магния — на 1,19−1,59%, неорганического натрия — 0,03−0,014% в среднем по отношению к IX и на 0,97−0,98- 0,18−0,35- 0,40−0,79 и 0,07−0,014% к I группе соответственно. Активность АсАТ, АлАТ и ЩФ снизилась во всех группах по отношению к IX на 4,53−5,70- 4,10−4,99 и 4,20−7,00%- к I на 1,95−2,98- 0,935,67 и 1,09−4,11% соответственно.

Факторы неспецифической резистентности повышались во всех четырех опытных группах по сравнению с данными IX группы в среднем на 1,50−2,54% БА, 2,65−3,69% ЛА- 6,48−11,67% КА- 6,22−8,50% ФА- 0,64−1,18 ФЧ и 1,04−1,79 ФИс данными I группы — на 0,78−2,01- 2,80−3,69- 6,4011,59- 6,0−8,28%- 0,55−1,09 и 0,42−1,17 у.е. соответственно.

Морфофункциональные изменения в исследуемых органах и тканях характеризовались общей картиной улучшения состояния и повышения функциональной активности последних, однако дистрофические и дест-руктурные изменения у животных этих групп сохраняются и более выражены, чем в III опытной группе. Гистологическая картина органов представлена более равномерно как по степени окраски клеток, так и по их структуре. Ядра клеток лучше сохранены, хотя местами бледные, что указывает на дистрофические процессы в клетках. Лимфоидные скопления. вокруг сосудов сохраняются. Что касается активности ферментов, то она менее повышена, чем у животных III группы.

Уровень активности кислой фосфатазы составил в печени в среднем 58,24±6,24−69,70±3,51- НЭ — 70,55±6,30−72,99±4,07- СДГ — 62,02±3,60−65,16±4,82- в тимусе КФ — 60,82±7,16−69,96±6,59- ЩФ — 57,82±5,32−644,80±5,12- НЭ — 70,55±6,30−72,99±4,07- СДГ — 63,71±69,51±2,53 оптической плотности.

Ультраструктурные изменения в клетках подопытных животных данных групп были аналогичны таковым животных III группы, но были более или менее выражены в зависимости от комбинации препаратов. Соотношение структурных площадей в тимусе изменялось в сторону увеличения площади мозгового вещества (40,95+4,11−46,20±4,69%) и уменьшения коркового (35,72±4,75−41,03±4,08%).

Наши исследования еще раз доказывают, что нуклеиновые и аминокислоты, входящие в комплексные препараты не вызывают аллергических реакций, не токсичны, не индуцируют выработку антител, но обладают выраженным иммуностимулирующим и антитоксическим действием. Способны стимулировать метаболические процессы в клетках, понижая избыточный и повышая недостаточный уровень веществ в организме животных в пределах его физиологических возможностей.

Как предполагают Чернушенко Е. Ф. с соавторами (1984), Земсков В. М., Лидак М. Ю., Земсков A.M. и другие (1985), РНК воздействует на мембрану практически всех клеток организма извне (хотя рецепторы для РНК не обнаружены), либо изнутри при проникновении нуклеотидов в клетку. В обоих случаях происходит активация циклаз ц-АМФ и ц-ГМФ, стимуляция метаболизма, размножения, дифференциации клеток, продукция ими специфических белков, в том числе и иммуноглобулинов. Деток-сикационная роль РНК, как считают Земсков В. М., Барсуков А. А., Безно-сенко С.А. (1981) — Земсков A.M., Сулейманов С. М. (1981) и другие, также реализуется на внутриклеточном накопление АТФ и ц-АМФ клеточном (активация макрофагов) и органном (предупреждение гемолиза, жировой дистрофии, гипоксии, стимуляция межуточного обмена) уровнях.

Применяемый нами L-аргинин играет роль в преобразовании мочевины и оказывает влияние на активность ферментов цитохромной системы тканевого дыхания сердца и почек (Степаненко А.С., 1960; Bocheva А., Shishkova N., Petkov V.V., 1998; Borycz, Gadek-Michalska, 1998; Wang Li Jun at al., 1999; Wang Qing et al., 1999; Lerman A., Burnett J.C., Higano S.T., 1999 и другие). Возможно, что аргинин активизирует угнетенные ферментные системы при гельминтозах.

Мы не выявили существенных изменений в организме животных II и VI групп, которым применяли аргинин совместно с нилвермом или один аргинин. В морфологическом составе крови животных II и VI опытных.

1? групп количество эритроцитов и гемоглобина повысилось на 0,53×10 /л и.

0,04 г/л- 10,81×1012/л и 8,11 г/л по сравнению с IX и на 0,49×1012/л, 0,57 г/л 1 и 2,94×10 /л, 0,84 г/лпо сравнению с I группой. Во II группе понизилось количество лейкоцитов, палочкоядерных нейтрофилов, эозинофилов, моноцитов и лимфоцитов на 0,96×109/л- .0,45- 1,35- 0,31 и 1,37% к IX группе соответственно, повысилось количество лейкоцитов на 0,38×109/л к I группе и понизилось содержание палочкоядерных сегментоядерных нейтрофилов, эозинофилов, моноцитов и лимфоцитов на 0,02%, 0,11- 0,10- 0,02- 0,03% к IX группе соответственно.

В VI группе по отношению к IX снизилось количество лейкоцитов на 0,38×109/лэритроцитов — 0,38%- моноцитов — 0,90%- палочкоядерных нейтрофилов — 0,48%, эозинофилов — 1,89%). Повысилось содержание сег-ментоядерных нейтрофилов — на 3,95%- моноцитов — 0,29- лимфоцитов -1,49%. По отношению к I группе снизилось содержание в крови лейкоцитов на 0,96×109/л, сегментоядерных нейтрофилов на 0,06%. Повысилось количество эозинофилов на 0,06%, палочкоядерных нейтрофилов и лимфоцитов — на 0,05%.

В биохимическом составе крови у животных II и VI групп наблюдалось повышение общего белка на 1,52 и 1,48%- альбуминов — 0,76 и 2,71%- у-глобулинов — 0,29 и 0,35%. Снижение уровня мочевины на 0,30%, во II группе повышение на 0,31% в VI. Снижение а-глобулинов на 1,59 и 2,09%, Р-глобулинов — на 0,30 и 0,90% соответственно по сравнению с IX группой. По отношению k I группе мы отмечали повышение уровня общего белка на 1,87 и 1,45%, мочевины в VI группе — на 0,56%- альбуминов — на 0,81 и 2,76%, у-глобулинов — на 0,49 и 0,55%- снижение, а и Р-глобулинов на 1,80 и 2,30- 0,20 и 0,80% соответственно,.

В липидном обмене у животных обеих опытных групп повышался уровень общих липидов на 0,50 и 0,25% к IX- 1,00 и 0,25% - к I группеуровень общего холестерина на 0,51 во II и был равен данным IX группы в VIна 2,06 и 1,55% - к I группе.

В углеводном обмене повысился уровень глюкозы по сравнению с IX группой на 16,86 и 2,30%- с I — 0,79 и 14,23%". Снизилось содержание ПВК и лактата на 1,10 и 0,93%" — 35,37 и 18,65% по сравнению с IX и 0,18 и 0,01- 26,64 и 7,66% по сравнению с I группой.

В минеральном обмене значения показателей изменялись меньше, чем в III группе. Уровень общего кальция повысился на 1,98%- неорганического фосфора — 0,70%, натрия — 0,014%- магния — понизилось на 0,40% по отношению к IX группе.

По сравнению с I группой уровень общего кальция поднялся на 0,49%- фосфора — 0,35%- магния — на 0,40%, натрия — на 0,014% в VI и был равен данным I группы во II.

Уровень активности ферментов АсАТ, АлАТ и ЩФ снизился в обеих группах по сравнению с IX на 3,30 и 0,60- 3,50 и 0,50- 3,40 и 0,40%- с I — на 0,51- 0,31- 0,42% во II и повысился на 2,26- 2,79 и 2,63% соответственно в VI группе.

Динамика факторов неспецифической резистентности имела преимущественную тенденцию к повышению БА, JIA, КА, ФА, ФЧ и ФИ по сравнению с данными IX группы во II на 1,07- 0,15- 4,25- 2,58%, 0,35 и 0,69 в VI на 1,83- 1,15- 4,17- 1,88%, 0,44 и 1,20 соответственно. По сравнению с данными I группы — на 0,35- 0,30- 4,17- 2,36%, 0,26 и 0,07 во II- 1,11- 1,30- 4,09- 1,66%, 0,35 и 0,58 в VI группах.

На неоднозначность действия аминокислот и в частности аргинина указывают Белокрылов Г. А., Молчанова И. В. (1988). Авторы считают, что аргинин снижает уровень иммунного ответа, но усиливает фагоцитарную активность. Регуляция иммунной системы, представленная аминокислотами зависит от их состава и обеспеченности ими организма животных, что отражается на морфофункциональных особенностях лимфоцитов периферической крови, активности микросомальных ферментов (Джиенбаева Н.А., 1978).

Белоконь Н.С. (1975) — Шугалей B.C. (1991) — Wangl Jun et. al. (1999) — Lerman A. Burnett J.C., Higano S.T. (1999) указывают на незначительное влияние аргинина на структурное состояние микросомальных мембран. Он проявляет антиоксидантные свойства, активизирует разные изоформы ци-тохрома Р-450, снижает микровязкость липидного бислоя и повышает степень погруженности белков в мембраны.

Гистологические и гистохимические исследования, проведенные нами, показывают, что аргинин несколько смягчает отрицательное действие нилверма. Дистрофические процессы в клетках выражены слабее, нет пустот в цитоплазме клеток, ядра их хорошо сохранены, крупнее, с четко-очерченным хроматином и выраженным ядрышком. Сосуды в большинстве своем пустые, а некоторые с небольшим количеством форменных элементов крови. Однако, встречается большая часть светлых клеток, дистрофически измененных.

Уровень активности ферментов печени и тимуса у животных II и VI групп был ниже, чем в других опытных группах, но выше, чем в группе отрицательного контроля и группе нилверма. КФ, НЭ и СДГ в печени составляли 57,37±6,08- 62,82±4,14- 62,78±2,21 и 50,85±5,39- 61,20±8,00- 56,21 ±2,47 у.е. КФ, ЩФ, НЭ и СДГ в тимусе составляли 57,54±4,70- 59,36±6,03- 52,54±7,21- 48,69+3,42 у.е. и 51,32+6,78- 47,01+4,18- 50,66±5,30- 56,18±14,60 у.е. соответственно. Это говорит о том, что функциональная активность клеток начинает повышаться и активируются окислительно-восстановительные процессы в них.

Электронномикроскопически мы установили также активацию клеток тимуса. Они были более крупные и характеризовались как плазмобла-сты и плазмоциты, что указывает на усиление иммуноморфологической перестройки организма хозяина. Соотношение долей коркового и мозгового вещества смещалось в сторону увеличения мозгового. Во II группе это соотношение составляло 39,68±4,72 и 42,62±4,97%, а в VI — 37,94±3,62 и 44,06±3,62%.

Результаты гельминтоовоскопических исследований и гельминтологического вскрытия кишечника собак показали, что ИИ в IX группе составляла 38,6+3,80 экз. яиц Т. canis, ЭИ — 100%. После дегельминтизации собак нилвермом ИИ снизилась в 19,0 раз, ЭИ — на 80%. На вскрытии в тонком отделе кишечника были обнаружены единичные экземпляры Т. canis.

Добавление к нилверму БАВ: РНК или аргинина в значительной степени улучшило эффективность дегельминтизации. В III (нилверм + аргинин + РНК), VII (нилверм + РНК) и II (нилверм + аргинин) группах уровень ИИ снизился по сравнению с группой IX в 29,2- 31,6 и 25,3 раза соответственно. ЭИ снизилась на 80%. На вскрытии у животных этих групп не обнаружены имагинапьные стадии Т. canis, но встречались яйца гельминтов в содержимом кишечника и в соскобах со слизистой оболочки.

Несколько ниже антгельминтный эффект был отмечен в I и IV группах. ИИ снизилась в 25,5 и 2,6 раза по сравнению с фоновыми даннымив 19,0 и 4,2 раза по отношению к IX группе соответственно. В IV группе ИИ была выше в 4,5 раза, чем в I группе. ЭИ в I группе составляла 20%, а в IV — 40%. В кишечнике щенков этих групп на вскрытии было обнаружено 2 и 3 экз. Т. canis.

Довольно низкий антгельминтный эффект был выявлен в V и VIII опытной группах. ИИ снизилась в 3,3 и 4,3 раза по отношению к фонув 4,4 и 3,8 раз по отношению к IX и в 4,3 и 5,0 раз к I группе соответственно. ЭИ составляла 60 и 80%> и была ниже фона и IX группы на 40 и 20%>, -выше I группы на 40 и 60% соответственно. На вскрытии у подопытных животных этих групп было обнаружено 6 и 2 экз. Т. canis.

Незначительное изменение ИИ мы отмечали в VI опытной группе. Показатель снизился в 1,9 раза по отношению к фону, на 9,6 экз. по сравнению с IX группой и выше в 14,2 раза по сравнению с данными I группы. ЭИ находилась в пределах 100%). На вскрытии в кишечнике щенков было обнаружено 6 экз. Т. canis.

Для усиления терапевтической эффективности антгельминтиков низкомолекулярную РНК и ее препараты применяли Петров Р. В. (1987) — Мовсесян С. О., Петросян Р. А. и др. (1996) — Прудников С. И. (1996) — Фадина.

В.А., Аликин Ю. С., Даниленко Е. Д. (1996) — Даугалиева Э. Х., Курочкина.

К.Г. (2000) и др. Полученные данные совпадают с нашими исследования ми.

Проведенная нами работа по изучению механизмов регуляции физиологического состояния организма, а также структуры и функционального состояния органов после введения лекарственных веществ в виде комплексных соединений аминои нуклеиновых кислот с антгельминти-ком или по-отдельности показывают, что наиболее активна комбинация нилверм + аргинин + РНК (III) — менее активны препараты: альбен С (LV) — РНК (V) — нилверм + РНК (VII) и VIII (риботан). Довольно низкий терапевтический, иммуностимулирующий и антитоксический эффект получен во II (нилверм + аргинин) и IV (аргинин) группах.

На основе проведенных исследований мы можем рекомендовать низкомолекулярную РНК и аргинин в качестве патогенетического лечения при комплексной терапии гельминтозов.