Выделение ингибиторов РНКаз хроматографическими методами и разработка технологии их производства
Диссертация
Целью данной работы явилась разработка промышленной технологии получения ингибитора рибонуклеаз из плаценты человека, поиск ингибиторов кислых РНКаз, разработка лабораторного метода их выделения и очистки, изучение некоторых физико-химических свойств выделенных ингибиторов. Для достижения указанной цели необходимо было решить следующие основные задачи: I) оптимизировать методики очистки и анализа… Читать ещё >
Список литературы
- Blackburn P., Wilson G. and Moore S. Ribonuclease inhibitor from human placenta // J. Biol. Chem.- 1977.- V. 252, — Я 16.-P. 5.904−5910.
- Blackburn P. Ribonuclease inhibitor from human placenta: rapid purification and assay // J. Biol. Chem.- 1979.- V. 24,-N 24.- P. 12 484−12 487.
- ОрнаЛ.А., Безбородова. С. И. Получение специфического ингибитора РНКа, зы животных из плапенты человека // Методы полученияи анализа биохимических препаратов: Тез. докл. v Всесоюз. конф, — Юрмала, 1987. С. 46.
- Зимницкий А.Н. Выделение препаратов ддя генной инженерии и биотехнологии из плапенты человека // Метода получения и анализа биохимических препаратов: Тез. докл. V Всесоюз. конф,-Юрмала., 1987. С. 48.
- Хеймс Б., Хиггенс С. Транскрипция и трансляция. Метода: Пер. с анг. М.: Мир, 1987. — 260 с.
- Шалот B.C. Нуклеазы. М.: Мир, 1968. — 220 — 300 с.
- Felling J., Willey С.Е. The inhibition of pancreatin ribonuclease by anionic polimers // Arch. Biochem. Blophys. Acta.-1959.- V. 85.- P. 313−325.
- Berger S. L. and Birkenmeier S.A. Inhibition of iateractable, nucleases with ribonucleosid-vanadil complexes: Isolationwof messenger ribonucleic acid from resting limophocytes // Biochemistry.- 1979.- V. 18.- P. 5143−5150.
- Shortman K. Studies on cellular inhibitors of ribonuclease 1. The assay of the ribonuclease-inhibitor system and the purification of the inhibitor from rat liver /'/' Biochim. Biophys. Acta.- 1961.- V. 51.- P. 37−49.
- Bardon A., Pamula Z. and Hiller M. Isolation and purificationof an alkaline ribonuclease from human placenta // Acta Biochim. Pol.- 1969.- V. 16.- P. 119−126.
- Sela M., Anfinsen C.B., Harrington W.P. The correlation of ribonuclease activity with specific aspects of teritary structure // Biochim. Biophys, Acta.- 1957.- V, 26.- P. 506 513.
- Brownhill T.Y., Jones A.S., Stacey M. The inactivation of ribonuclease during the isolation of ribonuclease acids and ribonucleoproteins from yeast // Biochem. J.- 1959.- V. 73,-N 3.- P. 434−440.
- Singer B., Fraenkel-Conrat H. Effect of bentonite on infectivi-ty and stability of TMV-RNA // Virology.- 1961.- V. 13, — N ' 1 P. 59−61.
- Richmond A, E, Cherry J. H, An artifact associated with the use of bentonite clay in assay for ribonucleic acid polymerization in peanut cotyledons // Biochim. Biophys. Acta.-1964.- V. 91,-N 2.- P. 330−340.
- Tyulkina L.G., Mankin A.S. Inhibitor of ribonuclease contamination in preparations of T4 RNA ligase, polynucleotide kinase and bacterial alkaline phosphatase // Anal. Biochem.-1984. -V. 138.- P. 285−290.
- Roth J.S. Ribonuclease II. Activation and inhibitors for ribonuclease // Arch. Biochem. Biophys.- 1953.- V. 44.-P. 265−280.
- Zollner N., Felling J. Hemmung der Ribonuclease durch Heparin//, Naturwissenshaften.- 1952.- B. 39.- S, 523−524.
- Zollner N., Pelling J. Nature of ribonuclease inhibitor of heparin // Am. J. Physiol.- 1953.- V. 173, — N 2.- P. 223−250.
- Ukita Т., Terao T. and Irie M. Inhibition of pancreatic ribonuclease I activity by heparin // J. Biochem.- 1962.- V. 52,-N 6.- P. 455.
- Кречетова. Г. Д., Чудинова И. А., Шалот B.C. О свойствах поливинил сульфата как ингибитора рибо и дезоксирибонуклеаз //
- Биохимия.-1963.-Т.28.-вып.4.-С.682−690.
- Dickman S.R., Ring В. Effect of strength on ribonucleic acidstructure and ribonuclease activity //J. Biol. Chem.- 1958.-Y. 231, — N 2.- P. 741−750.
- Hummel J.P., Plorens M., Nelson G. Anionic polimers //J. Biol. Chem.- 1958.- V. 233, — N 3.- P. 717−725.
- Houck J.C. The inhibition of ribonuclease // Biochim. Biophys. Acta.- 1957.- V. 26, — N 3.- P. 649−670.
- Stockx J., Dierich W. Inhibitory effect of anionic polimers on the decyclization of cytidin 23'-phosphate by pancreas ribonuclease // Enzimologia.- 1959.- V. 21.- P. 189−201.
- Nomura M., Hosodo J., Nashimura S. Enzime roformation in lyso-syme lysate of Bacillus subtilis // Biochem. Biophys. Acta.-1958.- V. 29, — N 1.- P. 161−172.
- Roth J.S. Methods Cancer Res.- New York: 1967.- V. 3.- P. 208 209.
- Шалот B.C., Чудинова И. А., Кречетова, Г.Д. Современные метода в биохимии.-М.: Мир, 1964.-247−262 С.
- Лениджер А. Биохимия.-М.:Мир, 1976.-370с.
- Zittle С.A. and Reading Е.Н. Ribonuclease I. Manometric determination of ribonuclease in blood and tissues of the rat and therabbit // J. Biol. Chem.- 1945.- V. 160, — N 2.- P. 519.
- Davis P.P. and Allen F.W. Studies of the enzymes of purine metabolism in skin // J. Biol. Chem.- 1955.- V. 217, — N 1.-P. 43−50.
- Муег Y.P., Schellman J.A. The interaction of ribonuclease with purine and pyrimidine phosphates // Biochim. Biophys. Acta.-1962.- V. 55, — N 3.- P. 361−373.
- Maniatis Т., Pritsch E.P., Sambrook J. Molecular cloning.-New York: 1982.- 230 p.
- M* 37. Sela M. Inhibition of ribonuclease by copolymers of glutamicacid and aromatic amino acids // J. Biol. Chem.- 1962.— V. 237,-N 2.- P. 418−427.
- Богданов А.А., Прокофьев М. А., Антонович Е.Т, и др. К вопросуо структуре нуклеотид-пептидов, входящих в состав рибонуклеиновой кислоты, выделенной из-под желудочной железы // Биохимия.-1962.-Т.27.-вып.2¦-С.266−270,
- Smeaton J.R., Elliot W.H., Coleman G. Isolation and properties of A-specific bacterial ribonuclease inhibitor // Biochim. Biophys. Acta.- 1967.- V. 145, — 2i 3.- P. 547−561.
- Shenk Т.Е. Defective-interfering particles of Sindbis virus I. Isolation and some chemical and biological properties // Virology.- 1973.- V. 53, — N 1.- P. 162−173.
- Roth J.S., Hilton S., Morris H.P. Ribonuclease activity in some transplantable rat hepatomas // Cancer Res.- 1964.- V. 24,-Pt. 1.- P. 294−301.
- Colter J.S., Brown R.A. Preparation of nucleic acids from Ehrlich ascites tumor cells // Science.- 1956, — V. 124, — N 3231.-P. 1077−1080.
- Djikstra J., Jouw J., Halsema J., Gruber M. and Geert A. The isolation of non-degraded polysomes from avian liver using an endogenous ribonuclease inhibitor // Biochim. Biophys. Acta.-1978.- V. 521.- P. 363−373.
- Roth J.S. Ribonuclease IX. Further studies on ribonuclease inhibitor // Biochim. Biophys. Acta.- 1962.- V. 61.- N 6.-P. 903.
- Brody S. Ribonuclease activity and cellular growth // Biochim. Biophys. Acta.- 1957.- V. 24, — N 3.- P. 502−506.
- Wojnar R.J. and Roth J.S. Metal ions in ribonuclease acid: Their nature and interference with the assay for ribonuclease and ribonuclease inhibitor // Biochim. Biophys. Acta.- 1964.
- Some properties of the inhibitor from rat liver // Biochim. Biophys. Acta.- 1962.- V. 55.- P. 88−96.
- Blobel G., Van Potter R. Relation of ribonuclease and ribonuclease inhibitor to the isolation of polisomes from rat liver // Proc. Natl. Acad. Sci.- 1966.- V. 55.- P. 1283−1292.
- Northup P.V., Hummond W.S., LaVia M.F. The inhibition of splenic ribonuclease by liver cell extract // Proc. Natl. Acad. Sci.- 1967.- V. 57.- P. 237−246.
- Gribnau A.A.M., Schoenmakers J.G.G., Kraaikamp M., Bloemendal H. High purification of the RNase inhibitor from rat liver byaffinity chromatography // Biochem. Biophys. Res, Commun.1970.- V. 38, — N 6.- P. Ю64-Ю68.
- Малер Г., Кордес Ю. Основы биологической химии.-М.: Мир, 1970.-390 с.
- Herres D.G., Mathias А.P., Rabin B.R. The active site and mechanism of action of bovine pancreatic ribonuclease. 3. The
- Roth J.S., Milstein S.W. Ribonuclease I. A new assay method32with P -labeled yest ribonucleic acid // J. Biol. Chem.- 1952.-V. 196, — N 2.- P. 489−497.
- Crook E.M., Mathias A. P., Rabin B.R. Spectrophotometric assay of bovine pancreatic ribonuclease by the use of cytidine 2 *:3' -phosphate // Biochem. J.- 1960.- V. 74, — N 2.- P. 234−238.
- Roth J.S. Ribonuclease IX. Further studies on ribonuclease inhibitor // Biochim. Biophys. Acta.- 1962.- V. 61, — N 6.- P. 903 921.
- Chromatography, electrophoresis, immunochemistry, molecular biology, HPLC: Katalog M / Bio-Rad'.- USA., 1987.- 27 p.
- Biochemical catalogue N 12: Tecnical bulletin / Paesel.- FRG., 1986.- 78 p.
- Molecular biology: Catalogue / Amersham.- United Kingdom., 1985.* 40 p.
- Biochemical and organic compounds for resarch and diagnostic clinical reagents / Sigma.- USA., 1988.- 243 p.
- Berns A.J.M., Zweer A., Gribnau A.A.M., Bloemendal H. Proteolytic activity of partly purified ribonuclease inhibitor from rat liver // Biochim. Biophys. Acta.- 1971.- V. 247, — N 1.1. P. 62−65.
- Takahashi Y., Mase K. and Sugano H. Preparation of polysomes from rat brain tissues // Biochim. Biophys. Acta.- 1966.- V. 1191. N 3.- P. 627−629.
- Bont W.S., Rezelman G., Meisner J., Bloemendal H. Studies on cytoplasmic ribonucleic acid from rat liver. VIII Stability of polyribosomes from normal and regenerated rat liver // Arch. Biochem. Biophys.- 1967.- V. 119, — N 1.- P. 36−40.
- Buel G.N., Wickens M.P., Payvar P., Schimke R.T. Synthesis of full length cDNA from four partially purified oviduct m RNAs // J. Biol. Chem.- 1978.- V. 253.- 2471−2492.
- Scheel G. and Blackburn P. Role of mammalian RNase inhibitor in cell-free protein synthesis // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1979.- V. 76, — N 10.- P. 4898−4902.
- Gillis S., Stollar V. Translation of vesicular stomatitis and sindbis virus m RNAs in cell-free extracts of Aedes albopictus cells // J. Biol. Chem.- 1981.- V. 256, — N 13.- P. 13 188−13 189.
- Pelham H.R.B., Jakson R.J. An efficient m RNA-dependent tranlation system from reticulocyte lysates // Sur. J. Biochem.- 1976.-V. 67, — N 1, — P. 247−256.
- Abelson J. RNA processing and the inervening sequence problem// Ann. Rev. Biochem.- 1979.- V. 48.- P. 1035-Ю69.
- Crick P. Splite gene and RNA splicing // Science.- 1979.- V. 204 N 4390.- P. 264- 271.
- Davidson E.H. and Britten R.J. Regulation of gene expression: possible role of repetitive sequences // Science.- 1979.- V.204,-N 4397.- P. 1052−1059.
- Perry R.P. Processing of RNA // Ann. Rev. Biochem.- 1976.-V. 45.-P. 605−629.
- Duane C. Eichler, Todd P. Tatar, Linda S. Lasater. Effect of human placental ribonuclease inhibitor in cell-free ribosomal RNA synthesis // Biochem. Biophys. Res. Commun.- 1981.- V. 10,-N 2.- P. 396−403.
- Boyer S.H., Smith K.D., Noyes A.N., Youg K. Adjuvantes to immunological methods for m RNA purification // J. Biol. Chem.1. V. 258.- P. 2068−2071.
- Методы получения особочистых неорганических веществ / Л: 1969.
- Скоупс Р. Методы очистки белков: Пер. с англ, — М: Мир, 1985.-78 с.
- Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assemblyof the head of the bacteriophage T4 // Nature.- 1970.- V. 227."1. P. 680.
- Ригетти П. Изоэлектрическое фокусирование. Теория, методы и применение: Пер, с англ.- М: Мир, 1986.-260 с.
- Фихте Б.А., Гуревич Г. А. Дезинтеграторы клеток.- М.:Наука, 1988.-27 с,
- Исаев A.C., Ремнев Ю. В. Методы выделения белкового ингибитора РНКаз из плаценты человека // Тез, докл. I отраслевой конф,-конкурса молодых ученых,-М., 1989, С. 41−42.
- Дин П., Джонсон У., Мидл Ф. Аффинная хроматография. Методы: Пер. с англ.-М.: Мир, 1988.-170 с.
- Вакцина гриппозная, инактивированная, элюатно-центрифужная, жидкая: Производственный регламент /Утв. Госуд. инст. стандартизации и контроля мед. и биологич. препаратов 26 мая 1989 г. М., 1989.-185 с.
- Ю1.Дарбе А. Практическая химия белка: Пер. с англ.- М.: Мир, 1989.-293 с.
- Ремнев Ю.В. Выделение РНК-зависимой ДНК-полимеразы методами * аффинной хроматографии, характеристика фермента и разработкаего промышленной технологии. Дис канд.биол.наук.-Оболенск, 1985.-87 с.
- Исаев А.С., Ремнев Ю. В., Шитикова Г. Е., Ершова О. А. Белковый ингибитор РНКаз. Новый реактив для генной инженерии // Тез. докл. первой научно-технической конф. ПО «Восток».- п. Восточный, 1987.-С. 13−14.
- При расчете экономической эффективности за базу сравнения принят аналогичный биопрепарат, выпускаемый фирмой Boehringer Mannheim (ФРГ).
- Основными факторами, обеспечивающими экономический эффект,• является сумма инвалютных рублей, высвобождаемая за сче-: аннулирование импорта препарата и экономия во внутренние рублях от замены импортного биопрепарата, на отечественный.
- Экономический эффект от использования новых препаргтов, позволяющих обеспечить производств"/ продукции с прекращением импорта, расчитывается по формуле: Э = (З’К • Kj 3) • А — Ен s ,
- Ен- нормативный отраслевой коэффициент эффективности, б предпроизводственные затраты, руб. Приведенные затраты (3) расчитываются по формуле:3 = С + Ец’К, где
- С себестоимость единицы продукции, руб., К — удельные капиталовложения в производственные фонды, руб. По производству ингибитора РНКаз К = 0 и формула приобретает вид: 3 = С.
- Таким образом, экономическая эффективность определяется по формуле:
- Э = (В-К-Кх- С) -А Ен. Б
- Исходные данные для вычисления экономической эффективности производства ингибитора РНКаз из плаценты человека: В 0,5 западно-германских марок К — 0,35 руб. Кг 2,01. С 0,29 руб.
- На основании представленной утвержденной научно-технической документации1. ПРИКАЗЫВАЮ:
- Центральной заводской лаборатории начать выпускопытно-промышленной партии ингибитора РНКаз из плаценты человека, начиная с I квартала 1989 года.
- Выпуск ингибитора проводить по заявкам организаций