Вирусные параличи. 
Характеристика, методы лечения и диагностики пчелиных болезней

Вирусные параличи (лат. — Paralysis apium; англ. — Honey bee paralysis) — группа болезней (хронический, острый и медленный паралич) взрослых медоносных пчел, сопровождающихся параличами конечностей насекомого.

Историческая справка, распространение, степень опасности и ущерб. Описания некоторых признаков поражения взрослых пчел параличом встречаются еще в работах античных авторов (Аристотель, Варрон, Колумелла). Название болезни «паралич» и ее краткая характеристика впервые даны Барнсайдом (1933).

Установлено, что заболевание пчел в естественных условиях вызывает вирус хронического паралича, позднее (1974) были выделены самостоятельные возбудители острого и медленного паралича.

На территории бывшего СССР хронический паралич впервые зарегистрирован в Приморском крае и Украине в 1965—1967 гг.

До 60—70-х годов XX в. из трех указанных вирусов только повсеместно распространенный вирус хронического паралича периодически вызывал явные признаки поражения в отдельных странах у 1…2% семей пчел, остальные вирозы протекали, как правило, в виде инаппарантных инфекций. Однако эпизоотическая ситуация резко изменилась с появлением и распространением клеща варроа, выступившего в роли активатора репликации вирусов и переносчика, результатом чего явилась повсеместная гибель тысяч семей пчел.

Хронический паралич (лат. — Paralysis chronic apium; англ. — Chronic paralysis; паралич, вирусный паралич, ползучка) — вирусное заболевание куколок, взрослых медоносных пчел и доимагинальных форм пчел-листорезов.

Распространение. Заболевание пчел хроническим параличом отмечено на всех континентах, кроме Южной Америки и, возможно, стран Карибского бассейна. Широкое распространение болезни отмечено в Китае, она выявлена в ряде областей России, а также в Украине, Республике Молдова и Казахстане.

Возбудитель болезни. РНК-содержащий вирус эллипсовидной формы, размером 30…75×20…22 нм, культивируется в первичной культуре клеток медоносной пчелы. ЦПД вируса на культуре ткани отмечается через 48 ч после заражения.

Вирус размножается в цитоплазме клеток нервной ткани, тонкой кишки в месте впадения мальпигиевых сосудов, в мандибулярных и гипофа-ренгиальных железах взрослых медоносных пчел. В пораженных клетках образует скопления частиц различных размера и формы; цитоплазмати-ческие включения в виде базофильной грануляции в эпителиальных клетках тонкой кишки получили название телец-включений Морисона.

Вирус хронического паралича часто встречается в пчелах, пораженных вирусом острого паралича. При 30 «С размножение вируса хронического паралича подавляется вирусом острого паралича, при 35 «С отмечается обратная зависимость.

По устойчивости вируса к внешним воздействиям данные противоречивые. При температуре —70 °С сохраняется в трупах пчел более полугода, при температуре —15 °С — более 1 мес, при температуре 4 °C — 3…4 дня. Инактивируется при нагревании до 60 °C в течение 30…60 мин, при 75 °C — в течение 10 мин. Однако имеется сообщение, что при 95 °C вирус погибает через 30 мин. При 35 «С вирус сохраняется 7 дней, в 0,2%-ном растворе формалина при температуре 35 «С — 3 сут; под действием ультрафиолетовых лучей погибает за 1 ч.

Эпизоотология. Гибель пчел может происходить в любое время года. Однако вспышки острого течения болезни чаще всего регистрируются летом. Хронический паралич наблюдают в некоторых семьях пчел или во всех семьях пчел пасеки.

Вирусоносительство широко распространено. Активизацию размножения вируса хронического паралича в организме пчел могут вызывать некачественные корма.

Внутри семьи вирус передается от больных пчел к здоровым при их соприкосновениях на сотах, удалении пораженных особей, а также кормовых контактах через слюну.

Вместе со слюной вирус поступает в заготовленную пергу. Распространению возбудителя между семьями пасек способствуют перелеты пчел и трутней, а также перестановка пчеловодом сотов с кормом.

Патогенез. Патогенез вирусных параличей, вероятно, имеет много общего: передача патогенеза происходит по ходу метаморфоза. Большая часть вирионов, поступивших с кормом личинки, погибает при ее преобразовании в куколку. Оставшиеся частицы встраиваются в клетки хозяина и могут оставаться в них в неактивном состоянии в куколке и вышедшей из нее взрослой пчеле. При различных нарушениях (стрессах) в результате изменившегося метаболизма происходит репликация вируса, выход вирионов в гемолимфу (вирусемия) и последующее заражение клеток.

Возбудитель хронического паралича при летальном и остром течение обнаружен в нервных клетках, клетках мандибулярных и гипофарингиальных желез, медового зобика. В околоядерной области клеток тонкой кишки формирует округлые, диаметром 0,5…5 мкм тельца-включения (тельца Морисона).

Насекомое погибает в результате полной дисфункции при высокой вирусемии.

Течение и клиническое проявление. При искусственном заражении признаки болезни отмечают у пчел на 4… 10-й день. Инкубационный период при введении минимальной дозы вируса в гемолимфу взрослых рабочих пчел составляет 7 дней, куколок — 5 дней. При размещении больных пчел с внешне здоровыми насекомыми гибель последних происходит на 5… 18-й день.

Болезнь характеризуется появлением на предлетковых площадках и летках ульев ползающих, не способных к полету пчел. Некоторые насекомые возбуждены, беспорядочно двигаются, прерывисто дрожат крыльями, взбираются по стеблям травы, но срываются, падают на землю, начинают быстро вертеться на боку, издавая характерное жужжание. Другие пчелы пассивны, часто собираются на почве или на растениях группами по 2…5 особей и более, плохо и неестественно медленно передвигаются, нередко волочат одну из конечностей, брюшко увеличено. Эти признаки чаще отмечают в начале весны и в конце осени.

В период повышенных температур летом более характерно появление черных, безволосых, блестящих пчел с уменьшенным брюшком, похожих на муравьев. У отдельных особей неровные, оборванные концы крыльев. Здоровые пчелы изгоняют больных из улья.

Проявившие внешние признаки болезни насекомые после паралича конечностей обычно погибают, что в конце концов приводит к сильному ослаблению или плохому развитию семей пчел. Выжившие после острого переболевания семьи пчелы могут в дальнейшем развиваться и давать продукцию, однако вирус в них сохраняется и вызывает постоянную небольшую гибель пчел.

Патологоанатомические признаки. Поверхность тела лишена волосков, концы крыльев обтрепаны, иногда увеличено брюшко. В цитоплазме клеток тонкой кишки на гистосрезах обнаруживают тельца Морисона.

Диагностика и дифференциальная диагностика. Диагностика основана на клинических проявлениях болезни, результатах лабораторных исследований и обнаружении телец-включений Морисона в протоплазме клеток тонкой кишки при окраске гистосрезов или мазков-отпечатков по Романовскому—Гимзе в соответствии с наставлением по гистологической диагностике вирусного паралича. Выявление телец-включений проводят также при помощи РИФ.

Наиболее четкие результаты при диагностике дает использование РДП иРН.

Хронический вирусный паралич необходимо дифференцировать от других вирозов взрослых пчел, спироплазмоза, фитотоксикозов и отравлений пчел, вызванных пестицидами.

Иммунитет, специфическая профилактика. Попытки создания иммунитета у насекомых путем скармливания инактивированного вируса результатов не дали.

Профилактика. Профилактика болезни складывается из охраны благополучия пасек от заноса возбудителя, создания нормальных условий содержания и кормления пчел, устранения перегрева гнезд. Не допускают зимовки пчел на меду, содержащем падь. Семьи пчел размещают в местности, богатой медоносами. Предупреждают пчелиное воровство на пасеках, не объединяют слабые семьи без выявления причин их ослабления. Вывод маток проводят в устойчивых к заболеванию семьях пчел, эти семьи используют для создания отводков. Поддерживают санитарное состояние пасеки и ульев, ведут систематическую борьбу с клещом варроа. С целью профилактики применяют эндоглюкин (эндонуклеаза) или виран (рибонуклеаза) согласно наставлениям по их использованию.

Лечение. В больных семьях меняют маток. Пчел обрабатывают указанными выше ферментными препаратами. Определенный лечебный эффект также получен при скармливании семьям раствора сульфата меди, метронидазола, препарата ТДА.

Меры борьбы. При установлении заболевания на пасеку накладывают ограничения: оповещают ветеринарных специалистов и владельцев пасек о выявленном неблагополучии; прекращают реализацию пчел, маток, продуктов пчеловодства и предметов ухода за пчелами, проводят ветери-нарносанитарные мероприятия (старые непригодные соты перетапливают на воск; подвергают дезинфекции соты, бывшие в эксплуатации не более 2…3 лет, а также ульи, рамки, инвентарь, спецодежду); применяют противороевые меры, запрещают перестановку сотов с расплодом и кормом из больных семей, обезличенную обсушку сотов после откачки меда, не допускают содержание слабых и безматочных семей. Ограничения снимают после ликвидации заболевания.

Острый вирусный паралич (лат. — Paralysis acute apium; англ. — Acute paralysis) — заболевание куколок и взрослых медоносных пчел в семьях, пораженных клещом варроа, и шмелей.

Возбудитель болезни. Возбудитель острого паралича — РНК-содержа-щий вирус сферической формы, размером 30 нм. Репликация вируса происходит в нервной ткани, клетках глоточных желез и жирового тела взрослых пчел. Он образует однообразные цитоплазматические ацидофильные включения в клетках слизистой оболочки средней кишки. Культивирование в лабораторных условиях осуществляют парентеральным введением пчелам и их куколкам или в первичных культурах клеток эмбрионов медоносной пчелы.

Штаммы вируса имеют незначительные серологические различия, но идентичны по протеиновым профилям.

Нагревание до 90 °C в течение 1 ч полностью инактивирует возбудитель, при 55 «С титр его значительно снижается, прогревание при 50 °C изменений не вызывает.

Эпизоотология. Вирус обнаруживают у внешне здоровых пчел с апреля по ноябрь.

Передача возбудителя внутри семьи осуществляется взрослыми пчелами, которые со слюной передают его друг другу и личинкам и заносят в формируемые обножки пыльцы и в пергу. Удаление из ячеек сотов отдельных погибших куколок усиливает инфицирование взрослых пчел. Однако внешние признаки ослабления или гибели семей в естественных условиях обычно отсутствуют, острый паралич протекает как инаппарант-ная (скрытая) инфекция, не имеющая экономического значения. Распространению вируса способствуют перелеты, роение пчел, практикуемые пчеловодные приемы (подсиливание слабых семей, перестановка сотов с пергой, размножение семей-носителей).

Вирус острого паралича не размножается в присутствии возбудителей черных маточников и мешотчатого расплода. Помимо медоносных пчел возбудитель обнаружен у отловленных в природе шмелей и в обножках пыльцы клевера, собранных этими насекомыми.

Острый паралич неоднократно отмечался при лабораторных работах с медоносной пчелой и специальных исследованиях ее на присутствие вирусов и в виде инаппарантной инфекции. С появлением и широким распространением клеща варроа инфекция стала явной во многих странах континентальной Европы, включая Россию, и в США.

Выделяемая при питании на куколках и взрослых пчелах самками варроа слюна активизирует репликацию вируса, возможно, повышает его вирулентность. Обнаружение вируса и проявление паралича в семьях пчел, пораженных варроа, находятся в прямой зависимости от численности этого паразита.

Вместе с тем естественное сокращение расплода, нарастание численности пчел, инфицированных самками варроа к осени, и высокая скорость развития острого паралича по сравнению с другими вирозами приводят к тому, что острый паралич становится основной причиной гибели пчел.

Патогенез. Сходен с таковым при хроническом параличе. Репликация вируса происходит в клетках нервной ткани, глоточных желез, жировом теле, в клетках слизистой оболочки средней кишки. Устанавливают однообразные цитоплазматические ацидофильные включения (Жиоффере, 1968).

Течение и клиническое проявление. Признаки болезни неспецифичны, их наблюдают при многих других заболеваниях пчел. В основном поражаются молодые взрослые пчелы, которые теряют способность к полету, ползают или подпрыгивают около летка и вблизи улья, иногда скапливаются на прилетной доске. Некоторые пчелы медленно вращаются, трясутся, у них увеличенное брюшко, неправильно расположенные крылья. Черных пчел при этом не находят. Пораженных насекомых чаще наблюдают в утренние часы. В это же время обнаруживают погибших пчел на дне улья и прилетной доске. Поражение сопровождается изменениямисодержания в ткани пчел аминокислот и нуклеиновых кислот, увеличением содержания общего белка гемолимфы, снижением ее объема, разрушением, агломерацией гемоцитов.

Среди взрослых пчел заболевание длится от 7."18 дней до 3 мес. В некоторых случаях пораженные семьи выздоравливают без вмешательства человека, но обычно отстают в росте по сравнению со здоровыми. В течение сезона возможны рецидивы заболевания, повторные вспышки болезни проходят более тяжело. Отмечают осеннее резкое ослабление и гибель семей, сопровождающиеся большим отходом взрослых пчел, появлением признаков гнильца в открытом и печатном расплоде из-за развития се-кундарной микрофлоры.

Урон, наносимый острым параличом в семьях, различен и колеблется от гибели нескольких сотен пчел, снижения медопродуктивности и прироста семей пчел на пасеках до полной гибели семей, отдельных пасек и ряда пасек местности.

Патологоанатомические признаки. Чаще трупы не имеют внешних изменений. В гистосрезах эпителия средней кишки ацидофильные включения.

Диагностика и дифференциальная диагностика. Лабораторный диагноз на острый паралич устанавливают в РДП или ИФА.

Для дифференциации вирусов острого паралича и Кашмир-вируса в США используют серологический метод РИД при различных разведениях сыворотки, содержащей антитела к возбудителю острого паралича.

Профилактика. Профилактика болезни складывается из своевременного выявления семей — носителей вируса на пасеке. Размножение, подси-ливание семей, перестановку рамок с кормом из одной семьи в другую осуществляют с учетом их благополучия по острому параличу. Строго соблюдают правила содержания пчел, своевременно проводят противокле-щевые обработки, стремясь достигнуть максимально низкого уровня численности клещей варроа в семьях пчел. Следует учитывать, что проведение подобных обработок в момент появления признаков паралича обычно не дает должного эффекта, не приостанавливает запущенный механизм распространения вируса в семье пчел. В ряде случаев профилактический и лечебный эффект получают от применения эндонуклеазы (см. Хронический паралич) и общестимулирующей подкормки (полизин, биоспон, ВЭСП), которые более эффективны при приносе пчелами в улей свежей пыльцы.

Лечение. При подозрении на вирусный паралич применяют бактериальную эндонуклеазу. Для этого перед обработкой в 1 л воды растворяют 100 000 ЕД препарата. Для активизации фермента в раствор добавляют 1 г хлорида магния. Пчелосемьи обрабатывают с помощью распылителя, опрыскивая пчел, находящихся на рамках, при температуре воздуха не ниже 14 «С 6…8 раз с интервалом 10 дней. Каждую улочку с пчелами опрыскивают в течение 2…3 с. На одну пчелиную семью расходуют 40…50 мл раствора эндонуклеазы.

Ранней весной проводят подкормку пчел сахарным сиропом с биомицином, добавкой дрожжей и молока. Биомицин дают 3 раза через 2 сут по 200 000 ЕД на 500…600 мл сахарного сиропа на одну пчелиную семью. Порошок биовита распыляют на поверхность гнездовых сотов, не содержащих расплода. На одну пчелосемью распыляют биовита-40 5 г.

Меры борьбы. На неблагополучную пасеку накладывают ограничения, которые снимают после ликвидации болезни.