Оценка иммунного статуса при иммунодефицитах

РефератПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Оценка иммунного статуса при иммунодефицитах (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Количество методов, необходимых для полноценной характеристики состояния системы иммунитета, быстро увеличивается параллельно сложности их выполнения. Поэтому применение тестов I и даже II уровня для оценки иммунного статуса недостаточно эффективно. Концепция иммунологического образа болезни, обосновывающая существование для каждого заболевания и его вариантов своих измененных параметров, а также ориентировка на вид и вариант иммунного статуса, позволяет использовать небольшую группу главных диагностических показателей в каждом конкретном случае.

Лабораторная диагностика иммунодефицита (ИД) основывается на определенной последовательности, алгоритме действий, используемых при оценке иммунного статуса. Выявление ИД проводят в двух ситуациях:

1) при скрининге контингентов населения определенных регионов и рабочих коллективов на предмет наличия ИД;
2) при обследовании больных с целью уточнения предварительного диагноза. Для некоторых генетических обусловленных иммунодефицитов возможна пренатальная диагностика на основании ультразвукового обследования, хромосомного и биохимического анализов. Эпидемиологические скрининговые обследования различных групп населения и больных на наличие иммунодефицитов проводятся по следующей примерной схеме.
1. Анамнез и осмотр. Заполнение анкет. Их анализ, формирование групп риска с предварительным диагнозом по основным синдромам.
2. Клинико-лабораторное обследование. Основные показатели крови и биохимический статус (объем по показаниям). Предварительный диагноз иммунопатологии (вариант иммунного статуса). Рекомендации по набору тестов для оценки иммунного статуса.
3. Оценка иммунного статуса (наиболее распространенные тесты):
3.1. Общий анализ крови; определение соотношении нейтрофилы/лимфоциты/моноциты. СОЭ, СРБ, белковые фракции сыворотки крови (g-глобулины).
3.2. Определение количества Т-лимфоцитов (процент и абсолютное число) методами с моноклональными антителами (мАТ) антителами к CD2, CD3, CD4, CD8, CD25. Отношения CD4/CD8.
3.3. Определение В-лимфоцитов — CD19, CD21, CD22, CD72 или Ig+B.
3.4. Определение иммуноглобулинов классов G, М, А, Е в сыворотке крови и sIgA слюне. Соотношения их количества (G/M/A).
3.5. Поглотительная активность нейтрофилов крови, частиц латекса и/или стафилококков, кандид (фагоцитарное число, фагоцитарный индекс); оценка киллинга кандид, бактерий.
3.6. НСТ-тест.
3.7. Определение циркулирующих иммунных комплексов (методом ПЭГ-осаждения). Другие тесты по показаниям.
3.8. Антитела против стрептококка, дифтерийного токсина, гемофильной палочки, столбнячного токсоида, стафилококка, его токсина и вирусов (кори, гриппа).
3.9. Определение гемолитической активности комплемента (С50) и/или его компонентов.
3.10. Внутрикожные пробы (после забора крови!) с распространенными антигенами (туберкулин, стрептокиназа-стрептодерназа, антигены бактерий и грибов).
3.11. По показаниям—определение ферментов, отсутствующих при первичных иммунодефицитах (АДА, пуриннуклеозидфосфорилазы, альфафетопротеин при атаксии; гранулы лейкоцитов при гранулематозной болезни).
3.12. Оценка интерферонового статуса: концентрация интерферона в сыворотке крови; уровень интерферонa, а и g в культуре лимфоцитов крови после стимуляции вирусом болезни Ньюкастла и стафилококковым энтеротоксином соответственно.
3.13. HLA-типирование (при необходимости).
3.14. Выявление цитокинов (по показаниям), в крови методом иммуноферментного анализа (ИФА) и в клетках системы иммунитета (СИ) методами проточной цитометрии.
3.15. Определение общей g-цепи рецепторов цитокинов при тяжелом комбинированном иммунодефиците (ТКИД) методом проточной цитометрии.

Основные показатели лимфоидной системы

Среди различных методов ОИС центральным является определение фенотипа популяций и субпопуляций лимфоцитов.

Фенотипирование лимфоцитов, в настоящее время, проводиться с помощью моноклональных антител (мАТ) к СD-антигенам в реакции иммунной флуоресценции с учетом результатов на люминисцентном микроскопе или проточном цитометре. Метод проточной цитометрии является высокоточным и эффективным для анализа популяций и субпопуляций любых лейкоцитов, в том числе по двум и трем маркерам с помощью мАТ меченых флюоресцентными метками, однако не может широко использоваться в клинической практике из-за дороговизны анализов. Для анализа популяций и субпопуляций лимфоцитов помимо методов иммунофлюоресценции с суспензией лимфоцитов можно использовать разработанные нами стабильные иммунодиагностикумы на основе моноклональных антител, позволяющие фенотипировать лимфоциты в лейкосуспензии с регистрацией при обычной световой микроскопии.

1) Общее количество лимфоцитов при подсчете формулы крови. При рождении их содержание 20−28%. На 5−6 день жизни — 40−45%. В возрасте 2−3 мес. их относительное содержание достигает 55−65% и сохраняется на этом уровне до 5−6 лет, после чего происходит их снижение и в возрасте 6−15 лет и у взрослых, относительное количество лимфоцитов составляет 22−30% от других лейкоцитов (около 1500- 2500 клеток в 1 мм3). Увеличение количества лимфоцитов (лимфоцитоз) характерно для ряда инфекционных заболеваний, а также рецидивирующих и хронических заболеваний ЛОРорганов и бронхолегочной системы.
2) Общие Т-лимфоциты (CD2+, CD3± клетки), в настоящее время, определяются с помощью моноклональных антител к СD-антигенам (СD2, СD3). У новорожденных их содержание 40−48%. В раннем детском возрасте — 50−60%. У взрослых их уровень составляет 55−70% (1000−1500 клеток в 1 мм3). При заболеваниях инфекционной этиологии характерно снижение CD3± Т-лимфоцитов до 40−50%, которое может сохранятся в периоде реконвалесценции и не требует иммунокорригирующей терапии. Если же CD3± Тлимфоцитов в крови ниже 40% или после болезни их содержание в течении 1 месяца не приходит в норму — это расценивается как Т-клеточный иммунодефицит и необходимо проведение иммунокоррекции или иммунотерапии под контролем иммунограммы.
3) Уровень Т-хелперов и Т-цитотоксических определяется с помощью моноклональных антител к СD4 (Тx) и СD8 (Тц) антигенам. В норме CD4+ -Т-хелперов 36−45%, CD8±Т-цитотоксических (супрессоров)-19- 28%, соотношение Тx/Тц (иммунорегуляторный индекс, ИРИ) = 1,5−1.8. При рецидивирующих инфекционных заболеваниях этот индекс снижается до 1,2−1,5, за счет содержания CD4±Т-хелперов (26−32%). При аутоиммунных и аллергических заболеваниях индекс больше 2.0.
4) Для выявления ранней фазы активации лимфоцитов определяют рецептор для ИЛ-2 (CD25), поздней — HLA-DR антигены и CD71 (рецептор для трансферрина). В норме содержание CD25± лимфоцитов 6−12%. При вирусных и бактериальных инфекциях их уровень может достигать 20−30% в остром периоде заболевания, преимущественно за счет Т-лимфоцитов. Длительное сохранение высокого уровня CD25± лимфоцитов в ремиссию, после исчезновения клинических симптомов, указывающее на гиперактивацию, характерно для рецидивирующих и хронических заболеваний. HLA-DR антиген в норме экспрессируют В-лимфоциты и моноциты (12−18%). При активации он появляется на Т-лимфоцитах (3−6%).
5) Функциональные показатели Т-лимфоцитов: пролиферативная активность — реакция бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ) с определением продукции ИЛ-2, других цитокинов. Способность к бласттрансформации, после стимуляции антигеном или митогеном (ФГА) отражает функциональную активность иммунокомпетентных клеток. Лучшим показателем активации Т-клеток в тестах in vitro является определение ИЛ-2, который выделяется активированными Т-лимфоцитами и в норме поддерживает пролонгированную пролиферацию. Реакцию подавления миграции лимфоцитов (РПМЛ) можно использовать для дифференциальной диагностики с хроническими заболеваниями, при которых появляются медиаторы ПЧЗТ, подавляющие миграцию лейкоцитов.
6) Общее количество В-лимфоцитов можно определить с помощью моноклональных антител к антигенам СD19 — СD22, СD72. Используют также антитела к иммуноглобулинам, которые находятся на поверхности В-лимфоцитов. В-лимфоциты составляют 20−30% всех лимфоцитов (600−800 клеток в 1 мм³ крови). Содержание CD22±субпопуляции В-клеток составляет 14−20% у здоровых. Есть данные, что при острых респираторных заболеваниях их уровень в фазе реконвалесценции увеличивается до 26−28%.

Оценка иммунного статуса при иммунодефицитах.

7) Функциональные продукты В-лимфоцитов — иммуноглобулины классов G, М, A и их субклассы в сыворотке крови и различных биологических жидкостях определяют с помощью реакции преципитации по Манчини, а также иммуноферментным, нефелометрическим и турбидиметрическим методами. При иммунодефицитах уровень иммуноглобулинов снижается, а при стимуляции системы иммунитета и воспалении — повышается. Содержание иммуноглобулинов в норме представлено в табл.1.

При рецидивирующих инфекционных заболеваниях имеет важное значение определение субклассов IgG. Их физиологическое соотношение: IgG1 — 60−66%, IgG2 — 20−30%, IgG3 — 5- 8%, IgG4 — 4−5% от общего иммуноглобулина G (табл. 2). Широкий ряд респираторной патологии, включающей рецидивирующие бронхиты, пневмонии, бронхоэктазы, синуситы и др., ассоциируется с наличием дефицита IgG1. Дефицит IgG3, который может протекать совместно с дефицитом IgG1, связывают с рецидивирующими обструктивными заболеваниями легких. Рецидивирующие респираторные инфекции бактериальной этиологии (гемофильная палочка, пневмококк) имеют связь с дефицитом IgG2 в ассоциации с дефицитом IgA.

Показать весь текст

Заполнить форму текущей работой