Биотехнология кормовой добавки с целлюлозолитическими свой-ствами на основе Trichoderma

Биотехнология кормовой добавки с целлюлозолитическими свойствами на основе Trichoderma

В настоящее время активно ведется работа по расширению кормовой базы нетрадиционными и при этом дешевыми кормовыми средствами, зачастую требующими повышения их пищевой полноценности [53, 54, 63], а также разработка и внедрение в производство кормовых добавок с функциональными свойствами [58, 59, 68, 74]. Их систематическое применение позволяет более эффективно использовать рационы и обеспечить профилактику заболеваний птицы, и при этом полностью реализовать потенциал современных кроссов и пород [2, 14, 61, 66, 76].

Традиционные пути производства комбикормов с использованием животного белка и синтетических добавок не могут удовлетворить растущие потребности промышленного птицеводства в дешевом кормовом сырье и не отвечают требованиям экологической безопасности сельскохозяйственной продукции. В современных экономических условиях необходимо создание новых функциональных продуктов путем использования растительного сырья и применения биотехнологических приемов его ресурсосберегающей переработки [9, 18]. Одним из перспективных направлений является получение кормовых добавок на основе растительного сырья. В качестве такого сырья широко используется кукуруза [11, 17, 57], подсолнечный шрот [3, 62], плоды тыквы [16, 20, 56], продукты фракционирования зеленой массы люцерны [12, 13, 55, 60] и суспензию хлореллы [6, 71, 72]. Помимо этого, в птицеводстве также широко применяются пробиотики [21−25, 27, 29, 75], позволяющие одновременно нормализовать деятельность желудочно-кишечной микрофлоры у птицы, улучшить переваримость растительных кормов и обеспечить организм биологически активными веществами [7, 19, 30, 64, 73]. К настоящему времени разработаны не только технологии получения кормовых добавок, но и способы их применения в птицеводстве [31−52].

За последние годы в рецептуре комбикормов возросло содержание нетрадиционного фуражного сырья (ячмень, овес, рожь, горох, отруби), а в связи с изменением экономической ситуации в стране на сегодняшний день при производстве корма используют более дешевые компоненты (подсолнечный шрот и жмых, отруби, мясо-перьевая мука и пр.). Включение такого сырья значительно повышает содержание в комбикорме трудногидролизуемых веществ, снижающих его энергетическую питательность, нарушающих процессы пищеварения и, как следствие, приводящих к снижению интенсивности роста молодняка и продуктивности взрослой птицы, а также увеличению риска возникновения заболеваний [1, 10, 15, 26, 28]. Поэтому важной научной и практической задачей является разработка комплексных кормовых добавок с ферментативными свойствами способными улучшить перевариваемость компонентов корма, содержащих клетчатку [4, 65, 67].

Применение целлюлозолитических микроорганизмов, в частности микроскопического гриба рода Trichoderma, играет важную роль в биоконверсии различных целлюлозных отходов [5]. Такая технология заключается в следующем: сырьевые компоненты (отходы), содержащие сложные полисахариды — пектиновые вещества, целлюлозу, гемицеллюлозу и др., подвергаются воздействию комплексных ферментов, которые расщепляют сложные полисахариды на простые с последующим построением на их основе легко усваиваемого кормового белка. Таким образом, получаемая кормовая добавка, отличается высокой питательностью, более легкой усваиваемостью, биологической активностью, а также ферментной, витаминной и минеральной ценностью. Использование такой добавки в рационе птицы может повысить переваримость корма и качество получаемой продукции.

Целью нашей работы было разработать технологию получения кормовой добавки с целлюлозолитической активностью на основе микроскопического гриба рода Trichoderma и определить ее токсичность на простейших и теплокровных животных.

Материалы и методы. Разработку лабораторной технологии производства кормовой добавки с целлюлозолитическими свойствами и определение ее токсичности проводили на кафедре биотехнологии, биохимии и биофизики Кубанского государственного аграрного университета.

В качестве продуцента для получения кормовой добавки нами был использован штамм микроскопического гриба Trichoderma lignorum 81−17, предоставленный ФГУ «Краснодарский биоцентр». В предварительных исследованиях он показал хорошие результаты по деструкции клетчатки грубых кормов, а также высокую целлюлазную активность.

Для определения общей токсичности ферментной кормовой добавки на основе микроскопического гриба провели серию опытов [69, 70]. Экспресс-методом (за 1,5−3 ч) на стилонихиях (Stylonychia mytilus) оценивали количество погибших особей после воздействия на них водного и ацетонового экстракта кормовой добавки. В качестве контроля в первом случае использовали минеральный раствор Лозина-Лозинского, а во втором — 1%-й раствор ацетона. На начало опыта в каждой лунке было от 10 до 20 шт. инфузорий. Пробу корма для каждого экстракта исследовали в пяти повторностях.

Основной метод определения общей токсичности был разделен на два опыта: острый и хронический. Острый опыт проводили в течение четырех суток на лабораторных животных — мыши (Mus musculus). Для этого были сформированы четыре группы (две контрольные и две опытные) по десять белых мышей с начальной массой 22−25 г в каждой. При этом по завершении наблюдения провели вскрытие с целью учета воздействия токсинов на внутренние органы животных.

Хронический опыт проводили в течение 28 сут на семисуточных перепелах (Coturnix japonica) с начальной массой 26−27 г. Для этого сформировали две группы (контрольная и опытная) по десять голов в каждой. В результате были изучены интенсивность роста птицы, морфологический и биохимический составы крови, а также в конце опыта проведено патологоанатомическое вскрытие.

Результаты и обсуждение. Разработанная нами технология получения ферментной кормовой добавки Микоцел включает в себя следующие стадии: хранение маточной культуры Trichoderma lignorum 81−17; выращивание жидкой культуры микроскопического гриба на сахарозодрожжевой среде; получение кормовой добавки с целлюлозолитическими свойствами и оценка ее качества; фасовка, хранение и обезвреживание отходов производства (рисунок).

Рисунок — Блок-схема производства кормовой добавки Микоцел Маточную культуру Trichoderma lignorum 81−17 хранят на скошенном сусло-агаре в холодильнике при температуре 2−4 °С в течение 3−6 мес. Состав среды следующий (на 100 мл): 10 мл сусла, разведенного водопроводной водой до содержания сухого вещества в нем 7%, 10 г пептона, 2 г дрожжевого экстракта и 5 г микробиологического агара. Перед посевом скошенный сусло-агар проверяют на стерильность. Для этого пробирки инкубируют в течение 2−3 сут в термостате при температуре 37 ± 1 °C. По истечении указанного срока при наличии на поверхности незасеянного агара роста микроорганизмов, пробирки отправляют на «убивку» в автоклав. Чистый скошенный агар засевают подготовленным штаммом микроскопического гриба. Контроль качества осуществляют визуально микроскопически.

Жидкую культуру микроскопического гриба выращивают на стерильной сахарозодрожжевой питательной среде в бутылках из стекла по ГОСТ 10 782–85 емкостью 400 мл. Состав среды следующий (г/л): NH4NO3 — 6; KH2PO4 — 1; MgSO4 Ч 7H2O — 0,5; сахароза — 5; дрожжевой экстракт — 4; рН 6,0−6,5. Засеянные бутыли устанавливают на горизонтальную круговую качалку со скоростью вращения 150−170 об./мин и выдерживают их в течение 72 ч при температуре 24−26 °С. Контроль качества жидкой культуры осуществляют визуально и микроскопически, пересевая культуру в чашки Петри на мясо-пептонный агар (отсутствие посторонней микрофлоры), а также подсчетом в камере Горяева общего титра спор — не менее 1,0 Ч 108−1,5 Ч 108 спор/мл. Допускается хранение жидкой формы препарата в холодильнике при температуре 2−4 °С в течение трех месяцев.

В качестве носителя для производства кормовой добавки Микоцел используют простерилизованную смесь лузги подсолнечника и отрубей пшеничных (70%-й влажности), взятых в соотношении 7: 3. Культивирование проводят методом твердофазной ферментации в тонком слое на поддонах размером 350 Ч 450 мм с высотой бортов 20 мм, при комнатной температуре в течение 7−10 сут. При этом каждый поддон накрывают предварительно обработанной спиртом пленкой размером 500 Ч 1000 мм с перфорацией шириной 250 мм с обеих сторон. Аэрация обеспечивается за счет пористости субстрата, а отвод теплоты — благодаря перфорированию пленки. Для контроля готового препарата отбирают образец массой 5 г, измельчают и определяют содержание клетчатки, сырого протеина и активность целлюлозных ферментов.

Целлюлозная активность штамма Trichoderma lignorum 81−17, выращенного на смеси лузги подсолнечника и отрубей пшеничных, составляет 28 ед./г. Используемый субстрат содержал 37% клетчатки и 7% белка. Так, благодаря активности ферментов и хорошей деструктивной способности микромицета, количество клетчатки в корме после твердофазного культивирования уменьшилось более чем на 20%. При этом интенсивный рост микроскопического гриба и быстрое его разрастание в субстрате способствовали увеличению белка более чем на 50%.

Конечный этап производства включает подсушивание в термошкафу при 40 °C готового препарат Микоцел, его механическое измельчение на лабораторной мельнице и фасовку в целлофановые пакеты с замком Zip-Lock. Сверху наклеивается этикетка с указанием наименования, целлюлазной активностью добавки и датой производства. Упакованную кормовую добавку хранят в течение 4−6 мес при 20−25 °С или в течение 9 мес в холодильнике.

Одним из параметров установления биологической ценности кормовой добавки Микоцел было определение в ней токсичности, так как микроскопический гриб р. Trichoderma может быть потенциальным аллергеном и являться возбудителем токсикозов. Исследуя отруби и лузгу подсолнечника на общую токсичность экспресс-методом на стилонихиях, была отмечена практически 100%-я сохранность инфузорий для каждого экстракта, что свидетельствует о не токсичности компонентов субстрата. В свою очередь, результаты кормовой добавки показали 97,5% выживаемость инфузорий в водном экстракте и 89,7% - в водном растворе ацетонового экстракта, что позволяет нам отнести ее к категории нетоксичных кормов.

Во время проведения острого опыта (после однократного ввода добавки непосредственно в желудок) лабораторных животных не ограничивали в корме и воде (таблица 1). На протяжении всего исследования мыши сохраняли активность и подвижность, а также хороший аппетит, в итоге отклонений от нормы поведения замечено не было.

Таблица 1 — Определение острой токсичности кормовой добавки Микоцел на лабораторных мышах.

По результатам опыта была 100%-я сохранность лабораторных животных во всех группах. По окончании исследования мышей усыпили медицинским эфиром и провели вскрытие, которое показало, что внутренние органы были в пределах физиологической нормы — ровные, однородные, без деформаций, расположены правильно, патолого-анатомические изменения выявлены не были.

При проведении хронического опыта по выявлению общей токсичности кормовой добавки Микоцел перепела обеих групп на протяжении 28 дней сохраняли активность и хороший аппетит, отклонения в поведении и токсикоз замечены не были. Результаты, характеризующие интенсивность роста и развития птицы, представлены в таблице 2.

Таблица 2 — Влияние кормовой добавки Микоцел на рост и развитие перепелов (M ± m).

Исследование показало 100%-ю сохранность поголовья в обеих группах. Однако установлено, что по окончании опыта живая масса перепелов в опытной группе, получавшей ферментную кормовую добавку, была достоверно выше на 6% по сравнению с контролем. К тому же, затраты корма на 1 кг прироста живой массы птицы в опытной группе составили 3,58 кг, что на 7,5% ниже, чем в контроле.

Как видно из данных таблицы 3 значительных изменений в морфологических и биохимических показателях крови при использовании кормовой добавки Микоцел не выявлено, все было в пределах физиологических норм.

Таблица 3 — Морфологические и биохимические показатели крови перепелов при использовании в корме кормовой добавки Микоцел (M ± m).

Однако в опытной группе отмечено достоверное различие в уменьшении количества лейкоцитов на 4,7% по сравнению с контролем. Из полученных показателей можно сделать вывод, что кормовая добавка не только не оказала токсического действия на организм перепелов, но и способствовала отсутствию воспалительных процессов у птицы. Результаты вскрытия патологоанатомических изменений внутренних органов не выявило. Они были в пределах физиологической нормы (ровные, однородные, без деформаций).

Таким образом, кормовая добавка Микоцел, полученная методом твердофазной ферментации штамма Trichoderma lignorum 81−17 в тонком слое на смеси лузги подсолнечника и отрубей пшеничных, характеризуется пониженным содержанием клетчатки, повышенным — белка и обладает целлюлозной активностью не ниже 28 ед./г, а также является нетоксичным продуктом, который мы рекомендуем для птицеводства.

• 1. Анализ зараженности зернового сырья микотоксинами / И. Н. Хмара, А. Г. Кощаев, А. В. Лунева, О. В. Кощаева // Сборник научных трудов Ставропольского научно-исследовательского института животноводства и кормопроизводства. — 2013. — Т. 3. — № 6. — С. 290−293.
• 2. Бацелл — средство повышения резистентности и продуктивности птицы / Е. В. Якубенко, А. Г. Кощаев [и др.] // Ветеринария. — 2006. — № 3. — С. 14−16.
• 3. Безотходная переработка подсолнечного шрота / А. Г. Кощаев, Г. А. Плутахин, Г. В. Фисенко, А. И. Петренко // Хранение и переработка сельхозсырья. — 2008. — № 3. — С. 66−68.
• 4. Биологическое обоснование использования кормовой добавки Микоцел / А. Г. Кощаев, Г. В. Фисенко, С. А. Калюжный, Г. В. Кобыляцкая // Сборник научных трудов Ставропольского научно-исследовательского института животноводства и кормопроизводства. — 2013. — Т. 3. — № 6. — С. 132−135.
• 5. Биотехнология кормов и кормовых добавок / А. И. Петенко, А. Г. Кощаев, И. С. Жолобова, Н. В. Сазонова // Краснодар: ФГОУ ВПО «Кубанский ГАУ», 2011. — 454 с.
• 6. Биотехнология получения хлореллы и ее применение в птицеводстве как функциональной кормовой добавки / Г. А. Плутахин, Н. Л. Мачнева, А. Г. Кощаев, И. В. Пятиконов // Труды Кубанского государственного аграрного университета. — 2011. — Т. 1. — № 31. — С. 101−104.
• 7. Влияния кормовой добавки Бацелл на обмен веществ у цыплят-бройлеров / А. Г. Кощаев [и др.] // Труды Кубанского государственного аграрного университета. — 2012. — № 1(36). — С. 235−239.
• 8. Изменения в пигментном комплексе плодов тыквы мускатной в процессе созревания и хранения / А. Г. Кощаев, С. Н. Николаенко, Г. А. Плутахин, А. И. Петенко // Хранение и переработка сельхозсырья. — 2007. — № 4. — С. 45−48.
• 9. Использование в птицеводстве функциональных кормовых добавок из растительного сырья / А. Г. Кощаев, И. А. Петенко, И. В. Хмара, С. А. Калюжный, Е. В. Якубенко // Ветеринария Кубани. — 2013. — № 5. — С. 20−23.
• 10. Кощаев А. Г. Естественная контаминация зернофуража и комбикормов для птицеводства микотоксинами / А. Г. Кощаев, И. Н. Хмара, И. В. Хмара // Труды Кубанского государственного аграрного университета. — 2013. — Т. 1. — № 42. — С. 87−92.
• 11. Кощаев А. Г. Использование кукурузы и кукурузного глютена для пигментации продукции птицеводства / А. Г. Кощаев // Аграрная наука. — 2007. — № 7. — С. 30−31.
• 12. Кощаев А. Г. Биотехнологические и физиолого-биохимические аспекты получения, консервирования и использования коагулята из сока люцерны при выращивании цыплят-бройлеров: дис. … канд. биол. наук / А. Г. Кощаев. — Краснодар, 2000.
• 13. Кощаев А. Г. Биотехнология получения и консервирования сока люцерны и испытания коагулята на птице // Труды Кубанского государственного аграрного университета. — 2006. — № 3. — С. 222−234.
• 14. Кощаев А. Г. Биотехнология производства и применение функциональных кормовых добавок для птицы: дис. … д-ра биол. наук / А. Г. Кощаев. — Краснодар, 2008.
• 15. Кощаев А. Г. Особенности сезонной контаминации микотоксинами зернового сырья и комбикормов в Краснодарском крае / А. Г. Кощаев, И. В. Хмара // Ветеринария Кубани. — 2013. — № 2. — С. 20−22.
• 16. Кощаев А. Г. Содержание каротина в плодах тыквы различных сортов / А. Г. Кощаев // Картофель и овощи. — 2008. — № 8. — С. 20.
• 17. Кощаев А. Г. Улучшение потребительской ценности продукции птицеводства / А. Г. Кощаев // Хранение и переработка сельхозсырья. — 2007. — № 2. — С. 34−38.
• 18. Кощаев А. Г. Фармакологическое действие натрия гипохлорит на организм перепелов / А. Г. Кощаев А.В. Лунева, Ю. А. Лысенко // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета (Научный журнал КубГАУ) [Электронный ресурс]. — Краснодар: КубГАУ, 2013. — № 06(090). — С. 487−501.
• 19. Кощаев А. Г. Экологизация продукции птицеводства путем использования пробиотиков как альтернативы антибиотикам / А. Г. Кощаев // Известия высших учебных заведений. Северо-Кавказский регион. Серия: Естественные науки. — 2006. — № S10. — С. 53−59.
• 20. Кощаев А. Г. Экологически безопасные технологии витаминизации продукции птицеводства в условиях юга России / А. Г. Кощаев // Известия высших учебных заведений. Северо-Кавказский регион. Серия: Естественные науки. — 2006. — № S9. — С. 58−66.
• 21. Кощаев А. Г. Эффективность использования бактериальных кормовых добавок в промышленном птицеводстве / А. Г. Кощаев, Г. В. Фисенко, А. И. Петенко // Труды Кубанского государственного аграрного университета. — 2009. — № 1(19). — С. 176−181.
• 22. Кощаев А. Кормовые добавки на основе живых культур микроорганизмов / А. Кощаев, А. Петенко, А. Калашников // Птицеводство. — 2006. — № 11. — С. 43−45.
• 23. Кощаев А. Г. Кормовая добавка на основе ассоциативной микрофлоры: технология получения и использование / А. Г. Кощаев, А. И. Петенко // Биотехнология. — 2007. — № 2. — С. 57−62.
• 24. Кощаев А. Г. Экологизация продукции птицеводства путем использования пробиотиков как альтернативы антибиотикам / А. Г. Кощаев // Юг России: экология, развитие. — 2007. — № 3. — С. 93−97.
• 25. Кощаев А. Г. Эффективность кормовых добавок Бацелл и Моноспорин при выращивании цыплят-бройлеров / А. Г. Кощаев // Ветеринария. — 2007. — № 1. — С. 16−17.
• 26. Кузьминова Е. В. Перспективность каротинсодержащих препаратов в птицеводстве / Е. В. Кузьминова, В. А. Антипов // Птицеводство. — 2006. — № 8. — С. 16.
• 27. Микробиоценоз пищеварительного тракта перепелов и его коррекция пробиотиками / А. Г. Кощаев [и др.] // Ветеринария Кубани. — 2013. — № 3. — С. 6−9.
• 28. Обеспечение биологической безопасности кормов / А. И. Петенко, В. А. Ярошенко, А. Г. Кощаев, А. К. Карганян // Ветеринария. — 2006. — № 7. — С. 7−11.
• 29. Особенности культивирования штамма Ruminococcus albus Kr. / Г. П. Гудзь, А. О. Бадякина, А. Г. Кощаев, М. Н. Жирова // Труды Кубанского государственного аграрного университета. — 2009. — Т. 1. — № 22. — С. 59−64.
• 30. Особенности обмена веществ птицы при использовании в рационе пробиотической кормовой добавки / А. Г. Кощаев, С. А. Калюжный, Е. И. Мигина, Д. В. Гавриленко, О. В. Кощаева // Ветеринария Кубани. — 2013. — № 4. — С. 17−20.
• 31. Пат. 2 171 035, Российская Федерация, МПК 7 А 23 К 1/14. Способ получения кормовой добавки из сока растений / А. Г. Кощаев, А. И. Петенко, Г. А. Плутахин. Опубл. 20.02.01.
• 32. Пат. 2 190 332, Российская Федерация, МПК 7 А 23 К 1/00, 1/16. Способ получения кормовой добавки / И. В. Хмара, А. Г. Кощаев, А. И. Петенко, А. О. Бадякина, Г. А. Плутахин, В. А. Ярошенко. Опубл. 03.04.2000.
• 33. Пат. 2 195 836, Российская Федерация, МПК 7 А 23 К 1/00, 1/12, А 23 J 1/14. Способ получения белкового концентрата / А. И. Петенко, О. П. Татарчук, А. Г. Кощаев. Опубл. 10.01.03.
• 34. Пат. 2 197 096, Российская Федерация, МПК 7 А 23 К 1/14. Способ получения белково-витаминной добавки / А. Г. Кощаев, А. О. Бадякина, Г. А. Плутахин, А. И. Петенко, А. А. Панков, С. А. Панков. Опубл. 28.03.2000.
• 35. Пат. 2 201 101, Российская Федерация, МПК 7 А 23 К 1/14. Способ обработки грубых кормов / А. Г. Кощаев, А. И. Петенко, О. П. Татарчук. Опубл. 30.05.2001.
• 36. Пат. 2 218 811, Российская Федерация, МПК 7 А 23 К 1/14. Способ изготовления белкового концентрата из подсолнечного шрота / А. И. Петенко, О. П. Татарчук, А. Г. Кощаев, Г. А. Плутахин. Опубл. 20.12.03.
• 37. Пат. 2 222 593, Российская Федерация, МПК 7 С 12 N 1/20, 1/14. Способ приготовления питательной среды для культивирования микроорганизмов / А. Г. Кощаев, И. В. Хмара, О. В. Кощаева, А. И. Петенко, Г. А. Плутахин, В. А. Ярошенко. Опубл. 06.05.2002.
• 38. Пат. 2 226 845, Российская Федерация, МПК 7 А 23 К 1/20, 1/14. Способ получения растительной энергопротеиновой витаминно-минеральной смеси на основе полножирной сои / А. Г. Кощаев, О. В. Кощаева, А. И. Петенко. Опубл. 16.05.2002.
• 39. Пат. 2 233 597, Российская Федерация, МПК 7 А 23 К 1/14. Способ получения кормовой добавки из сока растений / А. Г. Кощаев, А. И. Петенко, Г. А. Плутахин. Опубл. 10.08.04.
• 40. Пат. 2 261 619, Российская Федерация, МПК 7 А 23 К 1/00, 1/14, 1/16. Способ получения кормовой добавки для профилактики токсикозов / А. И. Петенко, В. А. Ярошенко, А. Г. Кощаев, Ю. И. Молотилин, Е. В. Андреева, Л. П. Шевченко. Опубл. 18.02.2004.
• 41. Пат. 2 266 126, Российская Федерация, МПК, А 61К 35/66, А 23 К 1/165. Способ получения жидкого пробиотического препарата / А. И. Петенко, В. А. Ярошенко, А. Г. Кощаев, Н. А. Ушакова. Опубл. 20.12.05.
• 42. Пат. 2 266 682, Российская Федерация, МПК, А 23 К 1/16. Способ получения кормовой добавки из отрубей / А. Г. Кощаев, А. И. Петенко, О. В. Кощаева. Опубл. 27.12.05.
• 43. Пат. 2 266 747, Российская Федерация, МПК, А 61К 35/66, А 23 К 1/165. Пробиотическая композиция для животных и птицы / А. И. Петенко, В. А. Ярошенко, А. Г. Кощаев, Н. А. Ушакова. Опубл. 27.12.05.
• 44. Пат. 2 268 612, Российская Федерация, МПК, А 23 К 1/14. Способ получения белковой добавки из гороха / А. Г. Кощаев, Г. А. Плутахин, А. И. Петенко, О. В. Кощаева, В. В. Ткачев. Опубл. 27.01.06.
• 45. Пат. 2 268 613, Российская Федерация, МПК, А 23 К 1/14. Способ получения белковой добавки из шрота / А. Г. Кощаев, Г. А. Плутахин, А. И. Петенко, О. В. Кощаева, В. В. Ткачев. Опубл. 27.01.06.
• 46. Пат. 2 276 941, Российская Федерация, МПК, А 23 L 1/20. Способ обработки семян сои / А. Г. Кощаев. Опубл. 27.05.06.
• 47. Пат. 2 280 464, Российская Федерация, МПК, А 61К 35/66, А 23 К 1/165. Способ получения сухого пробиотического препарата «Бацелл» / А. И. Петенко, В. А. Ярошенко, А. Г. Кощаев, Н. А. Ушакова, Б. А. Чернуха. Опубл. 27.07.06.
• 48. Пат. 2 292 738, Российская Федерация, МПК, А 23K 3/00, A23K 3/02, А 23К 1/00, A23 K 1/16. Способ приготовления корма для цыплят-бройлеров / А. Г. Кощаев. Опубл. 10.02.2007.
• 49. Пат. 2 293 471, Российская Федерация, МПК 7 A 2 3K 1/16. Способ изготовления витаминизированного корма для кур-несушек / А. Г. Кощаев. Опубл. 25.07.2005.
• 50. Пат. 2 293 473, Российская Федерация, МПК 7 А 23 К 3/00, А 23 К 3/02, А 23 К 1/00, А 23 К 1/16. Способ получения корма для цыплят-бройлеров / А. Г. Кощаев. Опубл. 25.07.2005.
• 51. Пат. 2 419 420, Российская Федерация, МПК, А 61К 31/00, А 61 Р 43/00. Средство повышения сохранности и продуктивности животных/ Е. В. Кузьминова, М. П. Семененко, А. Г. Кощаев, В. С. Соловьев. Опубл. 27.05.2011.
• 52. Пат. 2 423 109, Российская Федерация, МПК, А 61К 31/00, А 61 Р 43/00. Средство для нормализации обменных процессов у животных / Е. В. Кузьминова, М. П. Семененко, А. Г. Кощаев, В. С. Соловьев. Опубл. 10.07.2011.
• 53. Петенко А. И. Технология кормопродуктов и кормовых добавок функционального назначения: 1 том. / А. И. Петенко, А. Г. Кощаев. — Краснодар: ФГОУ ВПО «Кубанский ГАУ», 2007. — 490 с.
• 54. Петенко А. И. Технология кормопродуктов и кормовых добавок функционального назначения: 2 том. / А. И. Петенко, А. Г. Кощаев. — Краснодар: ФГОУ ВПО «Кубанский ГАУ», 2007. — 620 с.
• 55. Петенко А. Концентрат из сока люцерны / А. Петенко, А. Кощаев // Птицеводство. — 2005. — № 5. — С. 28−29.
• 56. Петенко А. Тыквенная паста — источник каротина / А. Петенко, А. Кощаев // Птицеводство. — 2005. — № 7. — С. 15−17.
• 57. Пигментный комплекс семян современных гибридов кукурузы / А. Г. Кощаев, С. Н. Николаенко, Г. А. Плутахин, А. И. Петенко // Хранение и переработка сельхозсырья. — 2007. — № 1. — С. 40−41.
• 58. Плутахин Г. А. Биофизика, 2-е изд., перераб. и доп.: учебное пособие для студентов высших учебных заведений / Г. А. Плутахин, А. Г. Кощаев. — СПб: Издательство «Лань», 2012. — 240 с.
• 59. Плутахин Г. А. Биофизика: учебное пособие для студентов высших учебных заведений / Г. А. Плутахин, А. Г. Кощаев. — Краснодар: ФГОУ ВПО «Кубанский гос. аграрный ун-т», 2010. — 264 с.
• 60. Плутахин Г. А. Электротермическое осаждение белков растительного сока / Г. А. Плутахин, А. Г. Кощаев, А. И. Петенко // Хранение и переработка сельхозсырья. — 2004. — № 8. — С. 20.
• 61. Повышение биоресурсного потенциала перепелов с применением гипохлорита натрия / А. Г. Кощаев, А. В. Лунева, Ю. А. Лысенко, О. В. Кощаева // Сборник научных трудов Ставропольского научно-исследовательского института животноводства и кормопроизводства. — 2013. — Т. 3. — № 6. — С. 135−138.
• 62. Получение кормового белкового изолята из подсолнечного шрота / А. Г. Кощаев [и др.] // Труды Кубанского государственного аграрного университета. — 2009. — Т. 1. — № 18. — С. 141−145.
• 63. Практическое применение электрохимически активированных водных растворов / Г. А. Плутахин, М. Аидер, А. Г. Кощаев, Е. Н. Гнатко // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета (Научный журнал КубГАУ) [Электронный ресурс]. — Краснодар: КубГАУ, 2013. — № 08(092). С. 911−941.
• 64. Применение монои полиштаммовых пробиотиков в птицеводстве для повышения продуктивности / А. Г. Кощаев [и др.] // Труды Кубанского государственного аграрного университета. — 2013. — Т. 1. — № 42. — С. 105−110.
• 65. Применение новой ферментной кормовой добавки микоцел в комбикормах для цыплят-бройлеров / Г. В. Фисенко, А. Г. Кощаев, И. А. Петенко, И. М. Донник, Е. В. Якубенко // Ветеринария Кубани. — 2013. — № 4. — С. 15−17.
• 66. Пробиотические добавки в комбикормах цыплят-бройлеров/ А. Г. Кощаев [и др.] // Ветеринария Кубани. — 2006. — № 5. — С. 12−15.
• 67. Разработка биотехнологии получения кормовой добавки Микоцел и оценка ее качества / Г. В. Фисенко, А. Г. Кощаев, И. А. Петенко, С. С. Хатхакумов // Сборник научных трудов Ставропольского научно-исследовательского института животноводства и кормопроизводства. — 2013. — Т. 3. — № 6. — С. 283−286.
• 68. Теоретические основы электрохимической обработки водных растворов / Г. А. Плутахин, М. Аидер, А. Г. Кощаев, Е. Н. Гнатко // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета (Научный журнал КубГАУ) [Электронный ресурс]. — Краснодар: КубГАУ, 2013. — № 08(092). С. 516−540.
• 69. Технология производства и токсикология кормовой добавки Микоцел / Г. В. Фисенко, А. Г. Кощаев, И. А. Петенко, О. В. Кощаева // Труды Кубанского государственного аграрного университета. — 2013. — Т. 4. — № 43. — С. 55−61.
• 70. Фармакологическое обоснование применения кормовой добавки Микоцел на перепелах / А. Г. Кощаев, Г. В. Фисенко, С. С. Хатхакумов, С. А. Калюжный // Труды Кубанского государственного аграрного университета. — 2013. — Т. 4. — № 43. — С. 79−85.
• 71. Хлорелла и её применение в птицеводстве / Г. А. Плутахин, Н. Л. Мачнева, А. Г. Кощаев [и др.] // Птицеводство. — 2011. — № 05. — С. 23−25.
• 72. Хлорелла и триходерма в качестве функциональных кормовых добавок перепелам / А. Г. Кощаев [и др.] // Аграрная наука. — 2012. — № 7. — С. 28−29.
• 73. Эффективность использования нового пробиотика в различные возрастные периоды выращивания перепелов мясного направлений продуктивности / А. Г. Кощаев [и др.] // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета (Научный журнал КубГАУ) [Электронный ресурс]. — Краснодар: КубГАУ, 2013. — № 06(090). — С. 468−486.
• 74. Эффективность применения биотехнологических функциональных добавок при выращивании перепелов/ А. Г. Кощаев [и др.] // Ветеринария Кубани. — 2011. — № 4. — С. 23−25.
• 75. Эффективность применения трехштаммового пробиотика в промышленном птицеводстве / Г. В. Кобыляцкая, С. А. Калюжный, А. Г. Кощаев, А. Г. Хатхакумов // Сборник научных трудов Ставропольского научно-исследовательского института животноводства и кормопроизводства. — 2013. — Т. 3. — № 6. — С. 120−123.
• 76. Якубенко Е. В. Эффективность применения пробиотиков Бацелл и Моноспорин разных технологий получения в составе комбикормов для цыплят-бройлеров / Е. В. Якубенко, А. И. Петенко, А. Г. Кощаев // Ветеринария Кубани. — 2009. — № 4. — С. 2−5.