Материалы и методы

Исследования включали анализ особенностей данных лабораторного исследования системы вторичного гемостаза у детей, больных геморрагическим васкулитом и находившихся на лечении в гематологическом отделении для детей РНПЦ «РМиЭЧ» (г. Гомель) за период 2008;2009гг.

Оценка состояния вторичного гемостаза была проведена у 42 детей в возрасте от 3 до16 лет с выставленным диагнозом — геморрагический васкулит. Диагноз геморрагический васкулит был выставлен на основании анамнеза, клинических данных, данных общего анализа крови, биохимических исследований, общего анализа мочи, анализа кала на скрытую кровь, коагулограммы, иммунограммы и инструментальных методов исследования.

По данным анамнеза, клинической картины, биохимических исследований, инструментальных методов исследования был определен преобладающий синдром или их сочетание (кожный, суставной, абдоминальный, почечный, церебральный, легочный, кардиальный).

На основании данных осмотра, данных общего анализа крови, биохимических исследований, коагулограммы, иммунограммы и инструментальных методов исследования была выставлена степень тяжести процесса. Степени тяжести процесса устанавливались по следующим признакам:

• • Легкая: общее состояние мало нарушено, температура тела нормальная или субфебрильная, имеются немногочисленные геморрагические высыпания на коже конечностей, могут быть летучие боли в суставах, иногда в мышцах; абдоминальный и почечный синдромы отсутствуют. Изменение в крови часто отсутствуют.
• • Средняя степень тяжести: общее состояние средней тяжести, температура тела повышена до 38'С, жалобы на общую слабость, головную боль; выражен кожный и/или суставной синдромы со всеми признаками воспаления; абдоминальный синдром присутствует и носит умеренно выраженный характер (тошнота, рвота, боли в животе, учащение стула, возможно с прожилками крови); почечный синдром присутствует в виде изолированного мочевого синдрома. В периферической крови лейкоцитоз (10×10⁹/л и выше), нейтрофилез со сдвигом влево, эозинофилия, СОЭ ускорена до 20−40 мм/час, умеренное ускорение свертывания крови по ЛИ-Уайту — до 3−4ґ, диспротеинемия.
• • Тяжелая степень: состояние тяжелое, жалобы на головную боль, слабость, тошноту, может быть многократная рвота с кровью, частый стул; выражен суставной, абдоминальный и почечный синдромы; кожный — носит сливной, некротический характер; возможны сердечно-сосудистые расстройства, поражение центральной и периферической нервной системы. Все лабораторные показатели изменены значительно. 3,5,16]

Характер течения заболевания (острое, подострое, хроническое) устанавливали с помощью данных анамнеза заболевания и особенностей его течения. Острое течение ГВ ограничивается временным промежутком до 2 месяцев, подострое — от 2 до 6 месяцев, хроническое — свыше 6 месяцев.

Контрольную группу составили 20 практически здоровых детей, сопоставимых с основной группой по полу и возрасту.

Для исследования использовались данные историй болезни, результаты общего анализа крови, полученные на автоматическом анализаторе, данные коагулограммы.

Для исследования системы первичного гемостаза использовался только показатель количества тромбоцитов в периферической крови.

Исследование системы вторичного гемостаза проводилось по следующим показателям:

• 1. Активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ)
• 2. Протромбиновый индекс
• 3. Международное нормализованное отношение (MHO)
• 4. Определение концентрации фибриногена в плазме
• 5. Определение тромбинового времени

Активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ) АЧТВ является основным тестом, оценивающим 1 фазу свертывания крови. Оно зависит от содержания в плазме факторов II, V, VIII, IX, X, XI, XII, фибриногена и не зависит от количества тромбоцитов и факторов III, VII.

Принцип метода: время образования фибринового сгустка после добавления кефалина и каолина. Каолин используется для стандартизации контактной активации фактора XII, кефалин — для стандартизации фосфолипидно-мембранной активации.

В норме активированное частичное тромбопластиновое время составляет 28,2−33,2 с.

Показатель активированного частичного тромбопластинового времени в контрольной группе составил 30,38±1,6 с. 8,10].

Протромбиновое (тромбопластиновое) время Принцип метода: ПТВ позволяет оценить II фазу свертывания крови путем определения времени появления фибринового сгустка при добавлении избытка тканевого тромбопластина и показывает активность исследуемого протромбина по отношению к референтному контрольному протромбину.

ПТВ зависит от содержания факторов I, II, V, VII, X.

В основе метода лежит определение времени свертывания рекальцифицированной плазмы (или крови) при добавлении к ней тканевого тромбопластина определенной активности и чувствительности к дефициту факторов протромбинового комплекса (VII, X, V, II).

Протромбиновое время в норме составляет 12—20 с.

При определении протромбинового времени используются различные виды тромбопластина. Он может быть приготовлен из мозга человека, кролика, быка, из плаценты человека или получен рекомбинантным способом. Поэтому полученные результаты исследования протромбинового времени всегда должны сопоставляться с контрольными значениями, полученными при исследовании контрольной нормальной плазмы.

В норме протромбиновый индекс = 90—105% (по некоторым данным 80−120%). 8,10,11].

Среди контрольной группы протромбиновый индекс ровнялся 0,952± 0,0488/.

Международное нормализованное отношение.

Величина протромбинового времени зависит от чувствительности используемого в методе тромбопластина. Различные тромбопластины отличаются по ISI (International Sensitivity Index — Международный индекс чувствительности). Данные об ISI прилагаются к описанию набора для определения протромбинового времени.

В 1983 г. ВОЗ совместно с Международным обществом тромбозов и гемостаза постановили считать тромбопластин из мозга человека референтным и ISI этого тромбопластина приняли за 1.0 (Международный референтный препарат ВОЗ). Все другие коммерческие тромбопластины калибруются по нему, и для каждого определяется своя чувствительность, т. е. свой индекс ISI. Затем необходимо сравнить результаты исследования протромбинового времени с протромбиновым временем контроля и рассчитать международное нормализованное отношение (MHO), или International.

Нормальное международное нормализованное отношение (MHO) или INR близко к 1.0 и меньше 1.4. 10,11].

В контрольной группе МНО составило 1,068± 0,0816.

Определение концентрации фибриногена в плазме Содержание фибриногена в плазме крови в норме 1,5—3,0 г/л.

В крови фибриноген находится в растворенном состоянии, под влиянием тромбина и фактора ХIII он превращается в фибрин. 8].

Среди контрольной группы уровень фибриногена в плазме составлял 2,94 ±0,5 г./л.

Определение тромбинового времени Принцип метода: ТВ — это время образования фибринового сгустка от момента добавления тромбина, зависит только от концентрации фибриногена и содержания ингибиторов тромбина и образования фибрина (гепарина). 8,10].

Нормальное тромбиновое время — 11,7—15,7 с.

Показатель тромбинового времени в контрольной группе составил 13,5 ± 1,3 с.

С целью хранения и обработки информации создана электронная база данных в среде MS Access. Результаты исследования обработаны с использованием программы «Statistica 6.0».