Определение метацеркарий и их описание

Состав метацеркарий, паразитирующих в мышцах рыб, довольно разнообразен. Помимо описторхид нередко, (особенно на озерах, где живет много рыбоядных птиц), встречаются представители семейств Shigeidae, Diрlоstошаtidае, Cyathocotylidae, Clinostomatidae, Echinostomatidae, Heterophyidae. Если работа проводится с «эпидемиологическим акцентом», не лишне подчеркнуть, что метацеркарии перечисленных семейств безопасны для человека.

Все паразитирующие в мышцах рыб метацеркарии имеют шарообразную форму и окружены прозрачными или полупрозрачными оболочками. Характерным признаком метацеркарий описторхид служит наличие овального экскреторного пузыря. В компрессории, при микроскопировании в проходящих лучах света, он виден черным пятном, занимающим заднюю часть тела личинки. При пользовании искусственным источником освещения экскреторный пузырь приобретает золотистый цвет и виден хуже, чем при естественном освещении.

Метацеркария О. feliпeus

Определение трематод до вида по строению цисты возможно только при достаточном навыке исследователя. В противном случае для уточнения видовой принадлежности трематод целесообразно извлечь метацеркарию из цисты.

Тщательно отделенную от окружающих тканей цисту помещают на стекло в каплю воды или физиологического раствора. Оболочку ее разрывают тонкими иглами (лучше энтомологическими булавками N 00) или легким надавливанием покровного стекла. Если при этом личинка сама не выходит из цисты, то ее вымывают водой из пипетки. Выход метацеркарий из цист можно стимулировать, воздействуя дуоденальным содержимым человека или животных или трипсином.

При обнаружении личинок описторхисов в рыбной продукции, в т. ч. при оценке эффективности ее обеззараживания, необходимо определить их жизнеспособность, т.к. потенциальную опасность для здоровья человека представляют только живые личинки гельминтов.

В первую очередь можно ориентироваться на морфологические признаки и двигательную активность. Метацеркарий описторхисов, выделенных из тканей рыбы с помощью препаровальной иглы, помещают в каплю теплой воды или физиологического раствора (37−40 град. C) на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и исследуют под малым и большим увеличением микроскопа. Явное нарушение целостности оболочек цист, грубые изменения внутреннего строения личинки, распад ее содержимого, разрушение экскреторного пузыря являются признаками гибели метацеркарий. Наличие даже самых слабых самостоятельных движений личинки свидетельствует о ее жизнеспособности. Отсутствие движения еще не свидетельствует о гибели. Движение можно стимулировать слабым придавливанием метацеркарий покровным стеклом.

В компрессории личинка имеет круглую или слегка овальную форму. Ее размеры варьируют от 0,17×0,21 до 0,34×0,43 мм и зависят, видимо, как от возраста личинки, так и от интенсивности заражения рыбы. Две тонкие оболочки, окружающие метацеркарию, прозрачны, и через них личинка хорошо просматривается в компрессории. Длина самой личинки значительно больше диаметра цисты, поэтому она помещается в цисте только в изогнутом положении, которое постоянно меняется благодаря почти непрестанному движению личинки. Активность ее резко возрастает с повышением температуры (например, при легком подогреве компрессория).

Извлеченная из цисты личинка ланцетовидной формы. Поверхность передней ее части до заднего края брюшной присоски порыта тонкими шипиками. Вероятно, они легко выпадают, поскольку увидеть их удается лишь у живой, только что извлечений из цисты личинки. Длина метацеркарии в покое 0,22−0,62, ширина 0,12−0,27 мм. В расправленном состоянии она может достигать 1 мм. Задняя часть тела почти целиком занята экскреторым пузырем. От переднего его края отходят два тонких экскреорных канальца, видимых до уровня глотки.

Ротовая присоска диаметром 0,071- 0,12 мм находится на переднем конце тела и несколько направлена на брюшную сторону. К заднему краю ротовой присоски примыкает глотка (0,025×0,046 мм). Хорошо выраженный пищевод раздваивается под острым углом на две ветви кишечника на середине расстояния между присосками либо чуть ближе к ротовой присоске. Обе ветви доходят до заднего конца тела.

Брюшная присоска (0,088×0,139 мм) больше ротовой. Расположена в задней половине тела, разделяя его в соотношении 1:0,5 — 1:0,7. При окраске личинок кармином можно увидеть зачатки половых желез в виде групп клеток, примыкающих с обеих сторон экскреторного пузыря к его стенкам. Наискось один к другому лежат семенники. У передней стенки экскреторного пузыря находится еще одна группа клеток — яичник и семенник. Вперед от них идут зачатки матки и семяизвергательного канала.

Как уже отмечалось, в качестве дефинитивного хозяина О. feliпeus зарегистрировано 33 вида млекопитающих 7 отрядов. Гельминты паразитируют у них в желчном пузыре и протоках печени, реже — в поджелудочной железе. Помимо О. felineиs в мышцах рыб встречаются метацеркарии еще нескольких видов семейства Opisthorchidae, паразитирующих в фазе мариты у млекопитиющих, хищных и водных птиц.

Metorchis bilis (= albidus) (рисунок 3, 2) — вид, морфологически наиболее близкий личинкам О. feliпeиs. Средняя величина цист несколько меньше, чем у предыдущего вида (от 0,13×0,19 до 0,16×0,23). Но, поскольку максимальные размеры цист одного вида совпадают с минимальными размерами другого, этот признак не может считаться надежным при их дифференциации. Тонкие оболочки прозрачны, между ними часто остается промежуток, что хорошо видно в компрессории. Подвижность личинки в цисте хорошо выражена, но все же менее чем у О. jeliпeиs. Треугольной формы шипики, ясно различимые при микроскопировании, покрывают переднюю часть тела до заднего края брюшной присоски. Экскреторный пузырь занимает не более ¼ объема задней части тела. Извлеченная из цис-ты личинка достигает в длину 0,4−0,5 мм при ширине около 0,12 мм. Ротовая присоска (0,09 мм) крупнее брюшной (0,06 мм), расположенной немного сзади от середины тела и разделяющей его в соотношении 1:0,6 — 1:0,3. Мариты живут в различных млекопитающих (хищные и околоводные грызу-ны) и хищных птиц (канюки, луни).

1 2 3.

Рисунок 3 — Метацеркарии из подкожных мышц рыб сем. карповые:

1 .- метацеркарии описторхид в цистах; 2 — метацеркарии, извлеченные из цист; 3 — метацеркария Rhipidocotile illеnsе (в цисте и без цисты). а — О. fеliпeus, O. viverriпi, С. siпеnsis; b — Р.truncatum; c — М.bilis; d — М. xaпthosomus; n — пищевод.

Metorchis xanthosomus (= M. intermedius) (рисунок 3, 3) от предыдущих видов хорошо отличается толстой упругой прозрачной оболочкой. В компрессории она имеет вид светлого кольца, окружающего личинку. Размер цисты с толстой оболочкой 0,23 — 0,32 мм, без нее — 0,15 — 0,24 мм в диаметре. Передняя часть личинки густо покрыта шипиками, видными в компрессории даже через толстую оболочку. Ротовая и брюшная присоски равны по величине (0,037×0,07−0,067×0,071 мм). Такой же длины и пищевод.

Овальный экскреторный пузырь занимает большую часть тела за брюшной присоской. Длина личинки 0,40−0,86 мм, ширина — 0,11−0,14 мм.

1 2 3.

Рисунок 4 — Мариты некоторых описторхид: 1 — Рsеudатрhistотum truncatum, 2- Metorchis bilis (= albidиs), 3—Орisthorchis feliпeus (по Е. Г. Сидорову [5]).

Взрослые паразиты живут в желчном пузыре и протоках печени водных птиц (бакланы, пеликаны, утки и др.). Pseиdaтphistoтuт truncatuт в инцистированном состоянии отличить от О. feliпeus очень трудно и при экспресс анализе возможны ошибки. Несколько больший размер цист (0,30−0,44×0,24−0,38 мм) не может служить надежным критерием, так как зависит от возраста личинки. То же следует сказать и о более выраженной соединительно-тканой капсуле. Длина освобожденной от оболочки личинки 0,6−0,9 мм, ширина — 0,16−0,2 мм. Присоски равны по величине (0,08−0,1 мм диаметром). Пищевод отсутствует. Последний признак позволяет отличать данный вид от O.feliпeus и М. bilis (= albidus).

Мариты паразитируют в желчном пузыре и протоках печени различных млекопитающих. Особенно широко распространены среди каспийских тюленей, интенсивность инвазии которых может достигать многих сотен тысяч трематод.

Наиболее характерные признаки метацеркарий описанных выше описторхид приведены в таблице (таблица 2), которая может помочь в предварительном определении личинок.

Помимо личинок описторхид у многих рыб в мышцах часто встречаются сходные между собой метацеркарий Bucephalus polyтorphus и Rhipidocotyle illeпsе — представители семейства Bucephalidae. Округлая форма цисты, близкие размеры (0,27−0,51×0,27−0,40), прозрачные оболочки, наличие экскреторного пузыря — все это при беглом взгляде создает сходство с личинками описторхид.

Таблица 2 — Характеристика трематод [5].

При более внимательном рассмотрении даже инцистированных метацеркарий буцефалид можно увидеть, что экскреторный пузырь у них длинный, S-образно изогнутый, чего никогда не бывает у описторхид. Еще более четкие различия можно увидеть, если рассмотреть личинку, извлеченную из цисты. На одном конце ее располагается присоска треугольной (или близкой к ней) формы, выполняющая функцию брюшной, т. е. прикрепительный орган. Ротовая же присоска находится в средней части тела и ведет в короткий пузыреобразный кишечник. Взрослые паразиты живут в кишечнике различных хищных рыб.