В хозяйстве СХП «Грант» пал поросенок в возрасте до 1 года. Ветеринарный врач проведя внешний осмотр и выяснив с какой клинической картиной протекала болезнь поставил предварительный диагноз — рожа свиней. При этом для исследования в лабораторию с сопроводительным документом (приложение 1) был отправлен следующий патологический материал: печень, сердце, селезенка, почка. Обосновываясь на том, что кожные покровы не истощенного трупа в области подгрудка и промежности цианотичны, на спине и боках различной величины темно-красные участки. Лимфатические узлы увеличены, резко гиперемированы с четко выступающими фолликулами. Лабораторные исследования проводим согласно схеме бактериологического исследования патологического материала на рожу свиней (приложение 2).
Первый день исследований:
Делаем мазки из присланных органов — селезенки, почки, печени, путем отпечатка. Стерильно вырезаем кусочки органов, поверхностью среза несколько раз касаемся предметного стекла. Мазки высушиваем на воздухе. Окрашиваем по Граму и проводим реакцию МФА.
Окраска по Граму:
На фиксированный мазок помещаем полоску фильтровальной бумаги, пропитанную спиртовым раствором генциан кристалвиолета, наносим на нее несколько капель дистиллированной воды для увлажнения, выдерживаем 2 мин, бумажку удаляем.
Препарат, не промывая, обрабатываем раствором Люголя 1−2 мин; раствор сливаем.
Наносим 96% этанола 45 сек, Препарат тщательно промываем водой и Окрашиваем фуксином Пфейффера 2 мин.
Вновь промываем водой, подсушиваем фильтровальной бумагой и микроскопируем Микрокартина: мелкие грамположительные палочки, располагающиеся одиночно и попарно в виде V, что схоже с описаниями морфологических свойств в литературных источниках [6].
Метод флуоресцирующих антител (МФА):
Готовим мазки отпечатки на предметном стекле из органов.
Подсушиваем на воздухе.
Фиксируем этанолом в течении 10−15 минут.
На предметное стекло наносим каплю противорожистой люминесцирующей сыворотки.
Препарат помещаем во влажную камеру (чашку Петри) с фильтрованной бумагой, смоченной водой.
Препарат помещаем в термостат при 37−38°С на 15−30 минут.
Промываем мазок проточной водой в течение 5−10 минут.
Высушиваем фильтровальной бумагой и микроскопируем.
С Ы В О Р О Т К, А Микрокартина: «+++» — отчетливо выраженная, достаточно яркая флуоресценция; в мазках имеются светящиеся клетки типичной морфологии.
Готовим МПБ, МПБ, МПЖ (согласно прил.6) и производим посев Культивируем 24 часов при температуре 36−38°С.
Проводим биопробу: тканевый материал измельчаем в ступке со стерильным физиологическим раствором в соотношении 1: 10 и вводим подкожно трем белым мышам массой 16−18 г по 0,2 мл.
