Структурный анализ фенилпропаноидов

В структурных исследованиях фенилпропаноидов используется весь арсенал химических и спектральных методов, применяемых для установления строения природных соединений. Наиболее информативным методом является спектроскопия ядерного магнитного резонанса (ЯМР). В структурных исследованиях фенилпропаноидов полезной также является масс-спектроскопия, которая позволяет обнаруживать характерные фрагменты распада. Также используются инфракрасная и ультрафиолетовая спектроскопия. ИК — спектры фенилпропаноидов, содержащих сложноэфирную группу, имеют характерную полосу поглощения в области около 1700 см^-1 (С-О). УФ — спектры фенилпропаноидов также являются достаточно характерными и позволяют определить природу вещества.

Для установления строения фенилпропаноидов успешно используются химические методы, в особенности ферментативный, кислотный и щелочной гидролиз. Данные химические реакции позволяют в сочетании с ацетилированием и метилированием установить место присоединения остатка и порядок присоединения сахаров. Реакционная способность фенилпропаноидов возрастает в ряду: коричный спирт — п-кумаровый спирт — конифериловый спирт — синаповый спирт. Эта закономерность объясняет, почему ведущую роль в биосинтезе лигнанов, неолигнанов и лигноидов, широко распространенных в растениях, играют конифериловый и синаповый спирты [2].

Растворимость Они, как правило, растворимы во многих органических растворителях. Трудно растворяются в неполярных растворителях, таких как гексан, но хорошо в полярных растворителях, таких как хлороформ, метанол и диметилсульфоксид. Соединения с карбоксильными или фенольными гидроксильными группами растворимы в водных растворах щелочей. Так как они легко окисляются в жидком состоянии, лучше использовать их в течение короткого периода времени после приготовления [7].

Биосинтез фенилпропаноидов Биосинтез фенилпропаноидов, как и большинства фенольных соединений, берет начало от общего предшественника — шикимовой кислоты, в связи с этим говорят об общем шикиматном пути их биосинтеза. Сама же шикимовая кислота синтезируется из продуктов первичного метаболизма растений:

Рис.

Фенилпропаноиды (особенно коричные спирты и кислоты) выступают как биогенетические предшественники для целого ряда самостоятельных групп и классов флавоноидов, кумаринов, лигнанов, хинонов, простых фенольных соединений, дубильных веществ:

Рис.

Методика количественного определения суммарного содержания фенилпропаноидов.

Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито, с отверстиями диаметром 1 мм. Около 0,5 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в колбу со шлифом вместимостью 250 мл, приливают 100 мл 70% этанола, присоединяют обратный холодильник и нагревают на кипящей водяной бане в течение 60 мин. После охлаждения извлечение фильтруют в мерную колбу вместимостью 200 мл. Экстракцию сырья повторяют в тех же условиях еще раз. Объем объединенного фильтрата доводят до метки 70% спиртом этиловым (раствор А). 1 мл раствора, А переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят объем раствора до метки 70% спиртом этиловым (раствор Б). Оптическую плотность раствора Б определяют при длине волны 330 нм.

Суммарное содержание фенилпропаноидов (Х) в пересчете на хлорогеновую кислоту (в %) и абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле:

X = (D*K^v)/(m*530)*(100/(100-W)).

где D — оптическая плотность исследуемого раствора;

K^v— коэффициент разбавления исследуемого раствора (2500);

530 — удельный коэффициент погашения хлорогеновой кислоты в 70% спирте этиловом при длине волны 330 нм;

m — масса сырья, г;

W — потеря в массе при высушивании сырья, % [6].