Правила эксплуатации оптических приборов в клинико-диагностической лаборатории

Для измерения оптической плотности растворов и регистрации спектров поглощения используют спектрофотометры. Важнейшая их часть — монохроматор. Другие узлы — источник света, приемник излучения и регистрирующее устройство.

Источники света. В зависимости от оптической области, в которой работает прибор, источниками света служат: в УФ-области — водородная или дейтериевая газоразрядные лампы, дающие сплошной спектр излучения; в видимой области — обычная лампа накаливания с вольфрамовой нитью, в ИК-области — глобар. Это керамический стержень, нагреваемый до температур порядка 1600 0С.

Монохроматоры. В спектрофотометрах применяют призменные монохроматоры или дифракционные решетки. Материал, из которого изготавливают оптическую систему прибора, должен хорошо пропускать свет в рабочем диапазоне длин волн. В УФ-области используют кварц, в видимой области — стекло, в ИК-области — кристаллические соли, галогениды щелочных и щелочноземельных металлов (NaCl, KBr, CaF2).

Прибор настраивают на нулевую оптическую плотность по кювете с раствором сравнения, а затем вместо нее вводят в световой поток кювету с исследуемым раствором. В результате меняется интенсивность светового потока, падающего на приемник излучения (фотоэлемент), меняется и величина фототока.

Работа с рефрактометром. Открывают нижнюю призму рефрактометра. На поверхность верхней призмы наносят несколько капель исследуемой жидкости и закрывают нижней призмой. Жидкость в силу капиллярности равномерно заполняет пространство между призмами. Летучие жидкости рекомендуется вносить через специальное углубление в обоймах призм, ослабив предварительно запорный винтик. Окуляр приспосабливают к зрению так, чтобы нити перекрытия были резко очерчены. Вращая зеркало, добиваются оптимального освещения поля зрения. После этого передвигают алидаду до тех пор, пока нижняя часть поля зрения не сделается темной. Размытую границу между светлой и темной зонами при помощи компенсатора делают резкой и отчетливой. Затем при помощи алидады границу точно совмещают с пересечением нитей в окуляре.

Показание на секторе, против которого остановилась отметка алидады, и температуру записывают.

Определения повторяют несколько раз. Результативным является среднее показание.

По окончании работы призмы протирают ваткой, смоченной в спирте или эфире. Температура в рефрактометре должна быть постоянной. Для этого в полость, находящуюся внутри оправ для призм, через предназначенные для этого ниппели подают воду определенной температуры при постоянной скорости. Вода подается в верхнюю оправу, переходит по резиновой трубке в нижнюю и вытекает из нее. Чтобы температура и скорость тока воды были постоянны, используют специальный прибор с терморегулятором.

Если нет таких приборов, коэффициент преломления определяют при произвольной температуре, а затем вводят поправку для перехода к требуемой температуре.

Проверка рефрактометра. Правильность показаний рефрактометра проверяют на жидком или твердом веществе с точно известным коэффициентам преломления. В качестве таких эталонов к рефрактометру прилагается специальная пластинка и нормальная жидкость — монобромнафталин (коэффициент преломления 1,658). Проверку проводят так же, как и определение коэффициента преломления. Если полученный коэффициент преломления окажется равным фактическому или предел ошибки не будет превышать 0,0002, рефрактометр пригоден к работе. В противном случае устанавливают алидаду отметкой против фактического коэффициента преломления и специальным ключиком поворачивают поправочный штифт до совмещения нитей окуляра с границей светлой и темной зон.