Выводы. 
Диагностическая ценность изосерологических исследований

Опираясь на полученные в ходе исследования результаты, можно сделать следующие выводы:

• 1. При переливании несовместимой крови и резус-конфликте возникают тяжелейшие осложнения
• 2. В эритроцитах людей обнаружили ряд новых антигенов: новые варианты агглютиногена, А (А, А2, Am и т. д.), системы, свойственные многим людям, и системы, характерные для отдельных семей и даже отдельных лиц (М, N, Р, Льюис, Келл-Челано, Кидд, Даффи и др.)
• 3. Исследования определения группы крови позволили осуществить давнюю мечту человечества — трансплантацию органов и тканей. В 60-е годы XX столетия французским профессором Доссе была открыта система лейкоцитов, получившая международное название HLА от первых букв латинских слов: «гуман» (человек), «лейкоциты», «антиген» Благодаря открытию Доссе стал возможен подбор наиболее оптимального донора при пересадке органов.
• 4. Успехи определения группы крови могут быть использованы в судебной медицине. Определение группы крови с успехом используется в судебной медицине при спорах об отцовстве, материнстве и в случае потери детей в раннем возрасте.

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

• 1. Донсков С. И., Мороков В. А. Группы крови человека. Руководство по иммуносерологии. — М.: ИП Скороходов В. А., 2011. — 1016 с.
• 2. Липатова И. С. Аллоиммунизация групповыми антигенами эритроцитов (индивидуальные и популяционные особенности): Дисс. … канд. мед. наук. — М., 2009. — 99 с.
• 3. Приказ Минздрава России от 02.04.2013 № 183н «Об утверждении правил клинического использования донорской крови и (или) ее компонентов».
• 4. Приказ Минздравсоцразвития России от 28.03.2012 № 278н «Об утверждении требований к организациям здравоохранения (структурным подразделениям), осуществляющим заготовку, переработку, хранение и обеспечение безопасности донорской крови и ее компонентов, и перечня оборудования для их оснащения».
• 5. Рагимов А. А., Дашкова Н. Г. Основы трансфузионной иммунологии. — М.: Медицинское информационное агентство, 2004. — 280 с.
• 6. Требования к проведению иммуногематологических исследований доноров и реципиентов на СПК и в ЛПУ (Методические указания Минздрава России № 2001/109).
• 7. Шевченко Ю. Л., Жибурт Е. Б. Безопасное переливание крови. — СПб.: Питер, 2000. — 320 с.

ПРИЛОЖЕНИЕ № 1

Оснащение Стандартные изогемагглютинирующие сыворотки групп О (I), А (II), В (III) и АВ (IV) двух различных серий. Сыворотки для определения групп крови изготавливают в специальных серологических лабораториях из донорской крови. Сыворотки хранят при температуре 4−8 «С (в холодильнике).

Срок годности сыворотки указан на этикетке. Титр сыворотки (также указывается на этикетке) должен быть не ниже 1: 32 (для сыворотки В (III) — не ниже 1: 16/32). Под титром сыворотки понимается то максимальное ее разведение, при котором может наступать реакция агглютинации. Сыворотка должна быть прозрачной, без признаков гниения. Для удобства стандартные гемагглютинирующие сыворотки различных групп подкрашивают в определенный цвет: О (I) — бесцветная (серая), А (II) — синяя, В (III) — красная, АВ (IV) — ярко-желтая.

• — Белые фарфоровые или эмалированные тарелки или любые другие пластинки со смачиваемой поверхностью, маркированные 0(1), А (Ы), ВЦП), AB (IV).
• — Изотонический раствор хлорида натрия.
• — Иглы, пипетки, стеклянные палочки (предметные стекла).

Техника проведения реакции Под соответствующими обозначениями группы крови на тарелку (пластинку) наносят стандартные изогемагглютинирующие сыворотки I, II, III групп в объеме 0,1 мл (одна большая капля около 1 см в диаметре).

Во избежание ошибок наносят две серии сывороток каждой из групп, так как одна из серий может иметь низкую активность и не дать четкой агглютинации. Всего получается 6 капель, которые образуют два ряда по три капли в следующем порядке слева направо: О (I), A (II), В (III).

Кровь для исследования берут из пальца или из вены. Шесть капель исследуемой крови величиной приблизительно с булавочную головку 0,01 мл (маленькая капля) последовательно переносят сухой стеклянной палочкой на пластину в 6 точек, каждую рядом с каплей стандартной сыворотки (количество испытуемой крови должно быть приблизительно в 10 раз меньше количества стандартной сыворотки, с которой она смешивается), потом их осторожно с помощью стеклянных палочек с закругленными краями перемешивают.

Возможна более простая методика: на тарелку наносят одну большую каплю крови, из которой ее забирают уголком предметного стекла и переносят в каждую каплю сыворотки, аккуратно перемешивая с последней. При этом всякий раз кровь берут новым уголком стекла, следя за тем, чтобы капли не сливались.

После смешивания тарелку периодически покачивают. Агглютинация начинается в течение первых 10−30 секунд, однако наблюдение следует обязательно вести до 5 минут ввиду возможности более поздней агглютинации, например с эритроцитами группы А2(Н).

В те капли, где произошла агглютинация, добавляют по одной капле изотонического раствора хлорида натрия, после чего оценивают результат реакции.

ПРИЛОЖЕНИЕ № 2

Оснащение.

— Стандартные изогемагглютинирующие сыворотки групп О (I), А (II), В (III) и АВ (IV) двух различных серий. Сыворотки для определения групп крови изготавливают в специальных серологических лабораториях из донорской крови. Сыворотки хранят при температуре 4−8 «С (в холодильнике).

Срок годности сыворотки указан на этикетке. Титр сыворотки (также указывается на этикетке) должен быть не ниже 1: 32 (для сыворотки В (III) — не ниже 1: 16/32). Под титром сыворотки понимается то максимальное ее разведение, при котором может наступать реакция агглютинации. Сыворотка должна быть прозрачной, без признаков гниения. Для удобства стандартные гемагглютинирующие сыворотки различных групп подкрашивают в определенный цвет: О (I) — бесцветная (серая), А (II) — синяя, В (III) — красная, АВ (IV) — ярко-желтая.

• — Белые фарфоровые или эмалированные тарелки или любые другие пластинки со смачиваемой поверхностью, маркированные 0(1), А (Ы), ВЦП), AB (IV).
• — Изотонический раствор хлорида натрия.
• — Иглы, пипетки, стеклянные палочки (предметные стекла).

Техника проведения реакции Под соответствующими обозначениями группы крови на тарелку (пластинку) наносят стандартные изогемагглютинирующие сыворотки I, II, III групп в объеме 0,1 мл (одна большая капля около 1 см в диаметре).

Во избежание ошибок наносят две серии сывороток каждой из групп, так как одна из серий может иметь низкую активность и не дать четкой агглютинации. Всего получается 6 капель, которые образуют два ряда по три капли в следующем порядке слева направо: О (I), A (II), В (III).

Кровь для исследования берут из пальца или из вены. Шесть капель исследуемой крови величиной приблизительно с булавочную головку 0,01 мл (маленькая капля) последовательно переносят сухой стеклянной палочкой на пластину в 6 точек, каждую рядом с каплей стандартной сыворотки (количество испытуемой крови должно быть приблизительно в 10 раз меньше количества стандартной сыворотки, с которой она смешивается), потом их осторожно с помощью стеклянных палочек с закругленными краями перемешивают.

Возможна более простая методика: на тарелку наносят одну большую каплю крови, из которой ее забирают уголком предметного стекла и переносят в каждую каплю сыворотки, аккуратно перемешивая с последней. При этом всякий раз кровь берут новым уголком стекла, следя за тем, чтобы капли не сливались.

После смешивания тарелку периодически покачивают. Агглютинация начинается в течение первых 10−30 секунд, однако наблюдение следует обязательно вести до 5 минут ввиду возможности более поздней агглютинации, например с эритроцитами группы А2(Н).

В те капли, где произошла агглютинация, добавляют по одной капле изотонического раствора хлорида натрия, после чего оценивают результат реакции.

ПРИЛОЖЕНИЕ № 3

Техника проведения реакции:

Цоликлоны анти-А и анти-В наносят на белый планшет по одной большой капле (0,1 мл) под соответствующими надписями: анти-А или анти-В. Рядом с каплями антител наносят по одной маленькой капле (0,01мл) исследуемой крови. После перемешивания составных частей за реакцией агглютинации наблюдают в течение 2−3 мин.

ПРИЛОЖЕНИЕ № 4

Методики определения резус-фактора и резус-антител Оснащение:

• 1. антирезусные сыворотки (2 серии);
• 2. стандартные резус-положительные и резус-отрицательные эритроциты;
• 3. планшет;
• 4. пипетки;
• 5. предметные стекла:
• 6. стеклянные палочки.

На чашку Петри наносят последовательно три крупные капли сыворотки анти-резус одной серии и параллельно три капли сыворотки второй серии).

Затем в первый ряд сывороток вносят по небольшой капли исследуемой крови (соотношение 1: 10 или 18). Во второй вертикальный (средний) ряд — по такой же капли стандартных резус-положительных эритроцитов (контроль активности) и в третьей ряд — резус-отрицательные стандартные эритроциты (контроль специфичности). Отдельной стеклянной палочкой или углами предметного стекла тщательно перемешивают каждую отдельно каплю чаш-ку закрывают крышкой и ставят на водяную баню при температуре 40−42 ° С. Через 10 мин получают результат. Если в каплях обеих серий антирезусных сывороток с эритроцитами исследуемой крови произошла реакция агглютинации, то кровь резус-положительная, нет агглютинации — кровь резус-отрицательная.

В неотложных ситуациях пользуются экспресс-методом с помощью сыворотки анти-резус АВ (IV) группы крови, разбавленной 20−30% раствором альбумина или 30−33% раствором полиглюкина. На чашку Петри наносят каплю стандартной сыворотки АВ (IV) группы, содержащая антирезусные антитела, и рядом каплю резус-отрицательной сыворотки АВ (IV) группы, не содержащих антител. В эти капли добавляют в 2−3 раза меньший объем исследуемой крови, перемешивают стеклянными палочками или поочередно углами предметного стекла, покачивают чашкой 3−4 мин, после чего добавляют по 1 капле изотонического раствора хлорида натрия. Результаты читают через 5 мин. При наличии агглютинации исследуемых эритроцитов с сывороткой, содержащей антирезусные тела и отсутствующей реакции с контрольной резус-отрицательной сывороткой кровь резус-положительная. При отсутствии реакции агглютинации в обеих сыворотках кровь — резус-отрицательная.

ПРИЛОЖЕНИЕ № 5

Рисунок 1 Графическое изображение групп крови человека.

Рис. 2 Динамика иммуногематологических исследований образцов крови доноров в ГБУЗ «РСПК» за период 2011;2016 гг.

Рис. 3 Распределение фенотипов эритроцитов по данным ГБУЗ РСПК и РФ

Рис. 4 Распределение фенотипов, А и АВ по данным ГБУЗ РСПК у доноров в РБ за период 201 102 016гг.

Рис. 5 Распределение реципиентов с фенотипами, А и АВ в 2013 году.

Рис. 6 Распределение реципиентов с фенотипами, А и АВ в 2014 году.

Таблица 1

Серологический состав основных групп крови (система АВО).

Таблица 2.

Таблица совместимости различных групп крови.

Таблица 3.

Динамика иммуногематологических исследований образцов крови доноров в ГБУЗ «РСПК» РБ за период 2011;2016гг.

Таблица 4

Динамика иммуногематологических исследований образцов крови доноров в ГБУЗ «РСПК» РБ за период 2011;2016гг.

Таблица 5.

Распределение фенотипов эритроцитов системы группы крови АВО у доноров Республики Башкортостан и по России.

Таблица 6.

Доля доноров с подгруппой антигена А2 в 2011;2016гг.

Таблица 7

Индивидуальный подбор компонентов крови реципиентам со сллабым антигеном А2 в группах крови, А иАВ за период 2013;2014гг.