Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Альтернативные системы экспрессии рекомбинантного ИФН-?-2b человека

Диссертация: Альтернативные системы экспрессии рекомбинантного ИФН-?-2b человека
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Последние достижения в геномике, протеомике и биоинженерии привели к значительному росту числа лекарственных белков, получаемых с использованием 5 биотехнологий. В технологическом процессе применяются различные методы очистки и используется целый ряд продуцентов: бактериальные и дрожжевые клетки, культуры клеток насекомых и млекопитающих, а также растения. При разработке технологии получения… Читать ещё >

Альтернативные системы экспрессии рекомбинантного ИФН-?-2b человека (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • Глава 1. Обзор литературы
    • 1. 1. Общие сведения об интерферонах
    • 1. 2. Механизм действия
    • 1. 3. Биологические эффекты
    • 1. 4. Клиническое применение препаратов интерферона
    • 1. 5. Получение интерферонов
  • Глава 2. Материалы и методы
  • Глава 3. Результаты
    • 3. 1. Получение чИФН-а-2Ь из бактериального продуцента
    • 3. 2. Получение растительного продуцента чИФН-а
    • 3. 3. Определение биологической активности рекомбинантных белков, полученных разными способами
  • Перспективы применения разработанных технологий
  • Выводы

Препараты интерферона-а-2Ь человека (чИФН-а-2Ь) нашли широкое применение в медицине в качестве противовирусных и иммуномодулирующих лекарственных средств. Существующие на фармацевтическом рынке препараты используются при лечении ряда онкозаболеваний как доброкачественной, так и злокачественной природы. Несмотря на это они редко назначаются пациентам с соответствующим диагнозом. Это связано с тем, что зарубежные препараты недоступны для многих больных в силу ряда причин (высокая стоимость, недостаточное количество или полное отсутствие на отечественном рынке), а российские аналоги показали себя как менее эффективные. В рамках государственной программы импортозамещения разработка технологии получения высокоэффективного препарата чИФН-а-2Ь, позволяющей снизить себестоимость субстанции, является актуальной на сегодняшний день.

В продаже присутствует ряд препаратов на основе интерферонов человека. Источники их получения различны. Однако препараты первого поколения на основе природных интерферонов практически полностью вытеснены рекомбинантными аналогами. Это связано с дефицитом и неоднородностью сырья (донорской крови) и высокой стоимостью конечного продукта. Основные коммерческие препараты представляют собой рекомбинантную форму человеческого ИФН-а-2. Их фармакологическое действие сходно с нативным белком и включает в себя противовирусный, противоопухолевый и иммуномодулирующий эффекты, характерные для всех ИФН-а. Наиболее часто в клинике используется ИФН-а-2Ь. Одной из важнейших областей использования этого белка является онкология. Препараты ИФН включены в состав комбинированной терапии в схемы лечения хронического миелолейкоза, Т-клеточной лимфомы кожи, множественной миеломы, злокачественной меланомы и рака почки.

Последние достижения в геномике, протеомике и биоинженерии привели к значительному росту числа лекарственных белков, получаемых с использованием 5 биотехнологий. В технологическом процессе применяются различные методы очистки и используется целый ряд продуцентов: бактериальные и дрожжевые клетки, культуры клеток насекомых и млекопитающих, а также растения. При разработке технологии получения высокоочищенного рекомбинантного белка целью исследования становится снижение конечной стоимости субстанции. При этом основной акцент ставится на получение максимально возможного количества целевого белка в единице объема, эффективности его очищения и восстановлении биологической активности.

В настоящее время существует два наиболее перспективных направления. Первое из них — использование в качестве продуцента бактериальных культур. Эта система экспрессии пользуется популярностью благодаря большому объему доступной информации об этом организме и высоким показателям продуктивности. Оптимизация отдельных процессов в технологии получения рекомбинантных белков из бактериальных культур клеток позволит снизить себестоимость конечного продукта, но эти цифры будут незначительными (порядка 10−20%).

Второе направление — это использование в качестве продуцентов растений. Такой принципиально новый подход предоставляет новые возможности для создания рекомбинантных аналогов. В настоящее время основными продуцентами для получения терапевтически значимых белков являются бактериальные или дрожжевые культуры, которые не обеспечивают проведения посттрансляционных модификаций, характерных для человека. Предполагают, что именно это является причиной образования антител против ИФН и сопутствующего снижения эффективности интерферонотерапии при длительном использовании препаратов этого цитокина в процессе лечения таких серьезных заболеваний как гепатит и рак почки. Создание растительного продуцента Шсойапа ЬеМкатгапа, экспрессирующего рекомбинантный чИФН-а-2Ь и обеспечивающего проведение посттрансляционных модификаций, характерных для человека, возможно, позволит решить эти проблемы.

Целью данной работы стало создание бактериального {Escherichia coli) и растительного (Nicotiana benthamiana) продуцента ИФН-а-2Ь человека (чИФН-а

2Ь), сравнение их эффективности и выбор оптимального варианта с точки зрения соотношения материальных и временных затрат.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1. Разработка генетических конструкций, оптимизированных для экспрессии чИФН-а-2Ь в E. coli и N. benthamiana

2. Получение продуцентов на основе Е. coli и N. benthamiana

3. Изучение эффективности экспрессии в каждом из продуцентов

4. Разработка технологий очистки целевого продукта

5. Изучение противовирусной активности рекомбинантных белков, полученных из разных продуцентов

6. Изучение противоопухолевой активности рекомбинантных белков, полученных из разных продуцентов

7. Сравнение двух систем экспрессии по нескольким параметрам: эффективность экспрессии, качество очистки, активность полученного продукта, материальные и временные затраты на получения субстанции.

Научная новизна исследования:

1. Впервые разработана технология получения ИФН-а-2Ь из растительного продуцента, дающего возможность дешевого промышленного производства терапевтического белка

2. Впервые разработана технология восстановления активности чИФН-а-2Ь на аффинной колонке, позволяющей значительно повысить выход биологически активного белка, полученного из бактериального продуцента

3. Впервые проведены сравнительные исследования влияния полигистидинового домена на эффективность экспрессии рекомбинантного белка в бактериальной системе экспрессии

4. Впервые в рамках одной работы проведено сравнение процессов продукции чИФН-ос-2Ь в бактериальных продуцентах и в растительной биомассе, которое дает основание утверждать, что разработанная технология получения чИФН-а-2Ь из растительного продуцента на основе N. ЪеШкат1апа более перспективна для дальнейшего масштабирования.

Выводы

• Получены высокоэффективные продуценты интерферона-а-2Ь человека на основе Е.соИ. Показано, что наличие полигистидинового домена на 1М-конце последовательности в 3−5 раз увеличивает уровень экспрессии рекомбинантного интерферона-а-2Ь человека.

• Проведено сравнение генетических конструкций, оптимизированных для экспрессии в Е. соН, которое позволило установить, что в отношении уровня экспрессии и эффективности очистки оптимальна конструкция с шестью гистидиновыми остатками на Ы-конце гибридного белка интерферона человека.

• Разработана технология восстановления конформации и биологической активности интерферона-а-2Ь человека, позволяющая в 2−3 раза повысить выход биологически активного белка, полученного из бактериального продуцента.

• Разработаны провирусные векторы для продукции рекомбинантного цитокина интерферона-а-2Ь человека в N. ЪеШкат1апа и установлено, что наиболее эффективна конструкция, в которой ген целевого белка находится под контролем актинового промотора.

• Показано, что синтезированный в разных продуцентах рекомбинантный интерферон-а-2Ь человека обладает противовирусной активностью, свойственной природным аналогам. Интерферон-а-2Ь человека, полученный из растительного продуцента обладает большей стабильностью.

• Полученные в разных продуцентах интерфероны-а-2Ь человека обладают цитотоксической активностью по отношению к опухолевым клеточным линиям те1Ког.

• Установлено, что уровень цитотоксического эффекта возрастает с увеличением концентрации и/или длительности инкубации опухолевых клеток с полученными рекомбинантными белками.

• Проведено сравнение процессов продукции интерферона-а-2Ь человека в бактериальных продуцентах и в растительной биомассе, на основании которого можно утверждать, что разработанная технология получения чИФН-а-2Ь из растительного продуцента на основе N. Ъеп№ат1апа более перспективна для дальнейшего масштабирования.

Показать весь текст

Список литературы

  1. Н.В., Краснов В. В., Кузин Б. В., Гапонюк П. Я., Щипанова А. И. Лечение ОРВИ и гриппа у беременных женщин и детей / Эффективная фармакотерапия в акушерстве и гинекологии. № 1. — 2007. С.: 30−33.
  2. М.А. Интерфероны и их применение в онкогематологии // Российский биотерапевтический журнал. 2002. — № 1, Т.1. — С. 25−33.
  3. Ф.И. Пять десятилетий интерферона / Интерферону 50 лет. -Москва, 2007.-С. 11−34.
  4. Ф.И., Киселев О. И. Интерфероны и их индукторы (от молекул до лекарств). М.: ГЕОТАР Медиа, 2005. — 368 с.
  5. Э.Т. Обоснование и возможности применения интерферона в комплексной терапии рака молочной железы: Автореф. дис. канд. мед. наук.-Уфа, 1999.-24 с.
  6. З.Г. Цитокины // Практическая онкология. 2003. — Т.4, № 3. -С. 131−139.
  7. О.И., Ершов Ф. И., Деева Э. Г. Интерферон гамма: структура и свойства/ Интерферону — 50 лет. — Москва, 2007. — С. 35−44.
  8. О. Лабораторное руководство по хроматографическим и смежным методам. Часть 1. М: Мир, 1982. С. 400.
  9. Л.Н., Камалян Л. А. Интерфероны в онкологии. Ер.: Айстан, 1989.-123с.
  10. Ю.Патрушев Л. И. Искусственные генетические системы Т.1: Генная и белковая инженерия. М.: Наука, 2004. -526с.
  11. PJIC Регистр лекарственных средств. Энциклопедия лекарств. 16-й вып. /Гл. ред. Г. Л. Вышковский. — М.: «РЛС-2008», 2007. — 1456с.
  12. Albini A., Marchisone С., Del Grosso F. et al. Inhibition of angiogenesis and vascular tumor growth by interferon-producing cells: A gene therapy approach // Am J Pathol. 2000, Apr. — Vol. l56(4). — P. 1381−1393.
  13. Yl.Amato R.J., Jac J., Hernandez-McClain J. Interferon-alpha in combination with either imatinib (Gleevec) or gefitinib (Iressa) in metastatic renal cell carcinoma: a phase II trial // Anticancer Drugs. 2008, Jun. — Vol. 19(5). — P. 527−533.
  14. Archuleta TD, Armitage JO. Advances in follicular lymphoma // Semin Oncol. 2004, Apr-31 (2 Suppl 4). -P.66−71.
  15. Arnau J., Lauritzen C., Petersen GE., Pedersen J. Current strategies for the use of affinity tags avd tag removal for the purification of recombinant proteins // Protein Expr Purif. 2006, -Vol. 48. — P. 1−13.
  16. Bagheri K., Javaranl M.J., Mahboudi F., Moeini A., Zebarjadi A. Expression of human interferon gamma in Brassica napus seeds // African Journal of Biotechnology. 2010. -Vol. 9(32). — P. — 5066−5072.
  17. Bardor M., Faveeuw C., Fitchette AC., Gilbert D., Galas L., TrotteinF., Faye L., Lerouge P. Immunoreactivity in mammals of two typical plant glyco-epitopes, core alpha (l, 3)-fucose and core xylose // Glycobiology. 2003, Jun. -Vol. 13(6). P. 427134.
  18. Bock R. Plastid biotechnology: prospects for herbicide and insect resistance, metabolic engineering and molecular farming // Curr Opin Biotechnol. 2007, Apr.-Vol. 18(2).-P. 100−106.
  19. Bogdan Ck, Mattner J., Schleicher U. The role of type I interferons in non-viral infections // Immunol Rev.- 2004. Vol. 202. — P. 33−48.
  20. Borden EC, Sen GC, Uze G, Silverman RH, RansohoffRM, Foster GR, Stark GR. Interferons at age 50: past, current and future impact on biomedicine // Nat Rev Drug Discov. 2007, Dec. Vol. 6(12). — P. 975−990.
  21. Brancho D, Tanaka N, Jaeschke A, Ventura J J, Kelkar N, Tanaha Y, Kyuuma M, Takeshita T, Flavell RA, Davis RJ Mechanism of p38 MAP kinase activation in vivo // Genes Dev. 2003, Aug. Vol. 15−17(16). -P. 1969−1978.
  22. Cabanes-Macheteau M, Fitchette-Laine AC, Loutelier-Bourhis C, Lange C, Vine ND, Ma JK, Lerouge P, Faye L. N-Glycosylation of a mouse IgG expressed in transgenic tobacco plants // Glycobiology. 1999, Apr. Vol. 9(4). — P. 365−372.
  23. Chawla-Sarkar M, Leaman DW, Borden EC. Preferential induction of apoptosis by interferon (IFN)-beta compared with IFN-alpha2: correlation with TRAIL/Apo2L induction in melanoma cell lines // Clin Cancer Res. 2001, Jun.-Vol. 7(6).-P. 1821−1831.
  24. Chawla-Sarkar M, Lindner DJ, Liu YF, Williams BR, Sen GC, Silverman RH, Borden EC. Apoptosis and interferons: role of interferon-stimulated genes as mediators of apoptosis // Apoptosis. 2003, Jun. Vol. 8(3). P. 237−249.
  25. Chen iQ, Gong B, Mahmoud-Ahmed AS, Zhou A, Hsi ED, Hussein M, Almasan A. Apo2L/TRAIL and Bcl-2-related proteins regulate type I interferon-induced apoptosis in multiple myeloma // Blood. 2001, Oct. Vol. 1−98(7). — P. 21 832 192.
  26. Desai P.N., Shrivastava N., Padh H. Production of heterologous proteins in plants: strategies for optimal expression // Biotechnol Adv. 2010 Jul-Aug. -Vol. 28(4).-P. 427−435.
  27. De Zoeten GA, Penswick JR, Horisberger MA, Ahl P, Schultze M, Hohn T. The expression, localization, and effect of a human interferon in plants // Virology. 1989, Sep. Vol. 172(1). -P.213−222.
  28. Dijkema R, Pouwels P, de Reus A, Schellekens H. Structure and expression in Escherichia coli of a cloned rat interferon-alpha gene // Nucleic Acids Res. 1984, Jan 25. Vol. 12(2). — P. 1227−1242.
  29. Faye, L., Boulaflous, A., Benchabane, M., Gomord, V. and Michaud, D. Protein modifications in the plant secretory pathway: current status and practical implications in molecular pharming // Vaccine. 2005. — Vol. 23. -P. 1770−1778.
  30. Feinstein SI, Chernajovsky Y, Chen L, Maroteaux L, Mory Y. Expression of human interferon genes using the recA promoter of Escherichia coli // Nucleic Acids Res. -1983, May 11.- Vol. 11(9). P. 2927−2941.
  31. Gasdaska J.R., Spenser D., Dickey L. Advantages of Therapeutic Protein Production in the Aquatic Plant Lemna // BioProcessing J. 2003. -Vol. 3. -P. 49−56.
  32. Giddings G. Transgenic plants as protein factories // Curr Opin Biotechnol. -2001, Oct. Vol. 12(5). — P. 450−454.
  33. Gomord V, Fitchette AC, Menu-Bouaouiche L, Saint-Jore-Dupas C, Plasson C, Michaud D, Faye L. Plant-specific glycosylation patterns in the context oftherapeutic protein production // Plant Biotechnol J. 2010, Jun. — Vol. 8(5). -P. 564−587.
  34. Gresser I. The antitumor effects of interferon: A personal history // Biochimie. 2007. — Vol. 89. — P. 723−728.
  35. Grimsley N, Hohn B, Hohn T, Walden R. «Agroinfection,» an alternative route for viral infection of plants by using the Ti plasmid // Proc Natl Acad Sci USA.- 1986, May. Vol. 83(10). — P. 3282−3286.
  36. Guilhot F., Chastang C., Michallet M. et al. Interferon Alfa-2b combined with Cytarabine versus Interferon alone in chronic Myelogenous Leukemia // N Engl J Med. 1997. — Vol. 337. — P.223−229.
  37. Guilhot F, Roy L, Guilhot J, Millot F. Interferon therapy in chronic myelogenous leukemia // Hematol Oncol Clin North Am. 2004, Jun. — Vol. 18(3).-P. 585−603.
  38. Gutterman J. U. Cytokine therapeutics: Lessons from interferon a // Proc. Nadl. Acad. Sci. USA. 1994. — Vol. 91. — P. 1198−1205.
  39. I.Isaacs A., Lindenmann J. Virus interference. I. The interferon // Proc. R. Soc. Lond. Ser. 1957. — Vol. 147. — P. 258−267.
  40. Jana S., Deb J.K. Strategies for efficient production of heterologous proteins in Escherichia coli // Appl Microbiol Biotechnol. 2005, May. — Vol. 67(3). -P.289−298.
  41. Kavanagh D., Hill A.D., Djikstra B. et al. Adjuvant therapies in the treatment of stage II and III malignant melanoma // Surgeon. 2005. — Vol. 3(4). — P. 245−256.
  42. Kondo M., Nagano H., Hiroshi Wada H. et al. Combination of IFN-A and 5-Fluorouracil Induces Apoptosis through IFN-A/B Receptor in Human Hepatocellular Carcinoma Cells // Clin Cancer Res. 2005. -Vol. 11. — P. 1277−1286.
  43. Lengyel P. Tumor-suppressor genes: News about the interferon connection // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1993. — Vol. 90 — P. 5893−5895.
  44. S9.Lessard PA, Kulaveerasingam H, York GM, Strong A, Sinskey AJ.
  45. Manipulating gene expression for the metabolic engineering of plants // Metab Eng. 2002, Jan. — Vol. 4(1). — P. 67−79.
  46. Maeyer E.D., Skup D., Prasad K.S.N, et al. Expression of a chemically synthesized human al interferon gene // Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1982, July. — Vol. 79. — P. 4256−4259.
  47. Marino M.H. Expression systems for heterologous protein production // BioPharm- 1989. Vol.2. P. 18−33.
  48. Marschall Z., Scholz A., Cramer T. et al. Effects of interferon alpha on vascular endothelial growth factor gene transcription and tumor angiogenesis // J Natl Cancer Inst. 2003, Mar. — Vol. 95(6). — P. 437−448.
  49. Meager A. Biological assays for interferon // J Immunol Methods. 2002. -Vol.261.-P. 21−36.
  50. Melamed D., Resnitzky D., Haimov I. et al. Interleukin 6 Induces DNA Binding Activity of API in Ml Myeloblasts Cells but not in a Growth Resistant Cell Derivative // Cell Growth Differ. 1993. -Vol. 4. — P. 689 698.
  51. Mickisch G.H., Garin A., va Poppel H. et al. Radical nephrectomy plus interferon-alfa-based immunotherapy compared with interferon alfa alone in metastatic renal-cell carcinoma: a randomised trial // Lancet. 2001. — Vol. 22, N 358 (9286). — P.966−970.
  52. Milner AE, Grand RJ, Gregory CD. Effects of interferon-alpha on human B cells: repression of apoptosis and prevention of cell growth are independent responses of Burkitt lymphoma lines // Int J Cancer. 1995, May 4. — Vol. 61(3).-P. 348−354.
  53. Moen M.D., McKeage K., Plosker G.L. et al. Imatinib: a review of its use in chronic myeloid leukaemia // Drugs. 2007. — Vol. 67 (2). — P. 299−320.
  54. Mori M. Zhang GH. Kaido M, Okuno T, Furusawa I. Efficient production of human gamma interferon in tobacco protoplasts by genetically engineered brome mosaic virus RNAs // J Gen Virol. 1993, Jul. — Vol. 74 (Pt 7). — P. 1255−1260.
  55. Motzer RJ, Bacik J, Mazumdar M. Prognostic factors for survival of patients with stage IV renal cell carcinoma: memorial sloan-kettering cancer117center experience // Clin Cancer Res. 2004, Sep 15. — Vol. 10(18 Pt 2). — P. 6302S-6303S.
  56. Miiller C.R., Smeland S., Bauer H.C. et al. Interferon-alpha as the only adjuvant treatment in high-grade osteosarcoma: long term results of the Karolinska Hospital series // Acta Oncol. 2005. — Vol.44(5. — P. 475−480.
  57. Negrier S., Escudier B., Las set C. et al. Recombinant Human Interleukin-2, recombinant human Interferon Alfa-2a, or both n metastatic renal-cell carcinoma // N Engl J Med. 1998. — Vol. 338. — P. 1272−1278.
  58. Neves F.O., Ho P.L., Raw I. et al. Overexpression of a synthetic gene encoding human alpha interferon in Escherichia coli // Protein Expr Purif. -2004. Vol. 35. — P. 353−359.
  59. OBrien S.G., Guilhot F., Larson R.A. et al. Imatinib compared with interferon and low-dose cytarabine for newly diagnosed chronic-phase chronic myeloid leukemia // N Engl J Med. 2003. — Vol. 13, N 348(11). — P. 9 941 004.
  60. Ohya K, Matsumura T, Ohashi K, Onuma M, Sugimoto C. Expression of two subtypes of human IFN-alpha in transgenic potato plants // J Interferon Cytokine Res. 2001, Aug. — Vol. 21(8). — P. 595−602.118
  61. Parmar S. and Platanias L. C. Interferons: mechanisms of action and clinical applications // Curr Opin Oncol. 2003. — Vol. 15. — P. 431−439.
  62. Pestka S. The Interferons: 50 Years after their discovery, there Is much more to learn // J Biol Chem. 2007. — Vol. 282(28). — P.20 047−20 051.
  63. Pestka S., Krause C. D., Walter M. R. Interferons, interferon-like cytokines, and their receptors // Immunol Rev 2004. — Vol. 202. — P. 8−32.
  64. Platanias LC. The p38 mitogen-activated protein kinase pathway and its role in interferon signaling // Pharmacol Ther. 2003 May. — Vol. 98(2). — P. 129−142.
  65. Pulkkanen K.J., Yla-Herttuala S. Gene therapy for malignant glioma: current clinical status // Mol Ther. 2005. — Vol. 12(4). — P.585−98.
  66. Radhakrishnan R., Walter LJ., Hruza A., Reichert P., Trotta PP., Nagabhushan TL., Walter MR. Zinc mediated dimer of human interferon-a2b revealed by X-ray crystallography // Structure. 1996. — Vol. 4. — No 126. -P. 1453−1463.
  67. Rai M., Parh H. Expression systems for production of heterologous protein // Current Sciens. 2001. — Vol. 80. — P. 1121−1128.
  68. Rijckborst V, Jans sen HL. The Role of Interferon in Hepatitis B Therapy / Curr Hepat Rep. 2010 Nov-9(4):231−238. Epub 2010 Aug 26.
  69. Rizzetto M. Hepatitis D: clinical features and therapy // Dig Dis. 2010. -Vol. 28(1).-P. 139−143.
  70. Rodriguez-Villanueva J, McDonnell TJ. Induction of apoptotic cell death in non-melanoma skin cancer by interferon-alpha // Int J Cancer. 1995, Mar. -Vol. 29−61(1). P. 110−114.
  71. Roos G, Leanderson T, Lundgren E. Interferon-induced cell cycle changes in human hematopoietic cell lines and fresh leukemic cells // Cancer Res. -1984, Jun. Vol. 44(6). — P. 2358−2362.
  72. Rosano GL, Ceccarelli EA. Rare codon content affects the solubility of recombinant proteins in a codon bias-adjusted Escherichia coli strain // Microb Cell Fact. 2009, Jul. 24. — Vol. 8. — P. 41.
  73. Rudolph R, Lilie H. In vitro folding of inclusion body proteins // FASEB J. 1996, Jan. — Vol. 10(1). — P. 49−56.
  74. Sabel MS, Sondak VK. Pros and cons of adjuvant interferon in the treatment of melanoma // Oncologist. -2003. Vol. 8(5). — P. 451−458.
  75. Samuel C. E. Antiviral Actions of Interferons // Clin Microbiol Rev. -2001.-Vol. 14, N4.-P. 778−809.
  76. Sangfelt O, Erickson S, Einhorn S, Grander D. Induction of Cip/Kip and Ink4 cyclin dependent kinase inhibitors by interferon-alpha in hematopoietic cell lines // Oncogene. 1997, Jan 30. — Vol. 14(4). — P. 415123.
  77. Sangfelt O, Erickson S, Grander D. Mechanisms of interferon-induced cell cycle arrest // Front Biosci. 2000, Apr 1. — Vol. 5. — P. D479-D487.
  78. Sangfelt O, Strander H. Apoptosis and cell growth inhibition as antitumor effector functions of interferons // Med Oncol. 2001. — Vol. 18(1). — P. 3−14.
  79. Santi L, Huang Z, Mason H. Virus-like particles production in green plants // Methods. 2006, Sep. — Vol. 40(1). — P. 66−76.120
  80. Sawahel WA. The production of transgenic potato plants expressing human alpha-interferon using lipofectin-mediated transformation // Cell Mol Biol Lett. -2002. Vol. 7(1). -P. 19−29.
  81. Slocombe P, Easton A, Boseley P, Burke DC. High-level expression of an interferon alpha 2 gene cloned in phage M13mp7 and subsequent purification with a monoclonal antibody // Proc Natl Acad Sci USA.- 1982, Sep. Vol. 79(18).-P. 5455−5459.
  82. Sen G.C., Lengyel P. The interferon system // J Biol Chem. 1992. — Vol. 267, № 8. -P. 5017−5020.
  83. Shepherd J., Brodin H., Cave C. et al. Pegylated interferon -2a and -2b in combination with ribavirin in the treatment of chronic hepatitis C: a systematic review and economic evaluation // Health Technol Assess. 2004. -Vol. 8, No. 39.-P. 1−125.
  84. Shepherd J., Jones J., Hartwell D. et al. Interferon alpha (pegylated and non-pegylated) and ribavirin for the treatment of mild chronic hepatitis C: a systematic review and economic evaluation // Health Technol Assess. 2007. — Vol. 11(11).-P. 1−205.
  85. Shiloach J., Fass R. Growing E. coli to hugh cell density a historical perspective on method development // Biotechnol Adv. — 2005, July. — Vol. 23, № 5. p. 345−357.
  86. Singh S.M., Panda A.K. Solubilization and refolding of bacterial inclusion body proteins // Biosci Bioeng. 2005, Apr. — Vol. 99(4). — P. 303−310.
  87. Song L, Zhao DG, Wu YJ, Li Y. Transient expression of chicken alpha interferon gene in lettuce // J Zhejiang Univ Sci B. 2008, May. — Vol. 9(5). -P. 351−355.
  88. Sun WH, Pabon C, Alsayed Y. et al. Interferon-alpha resistance in a cutaneous T-cell lymphoma cell line is associated with lack of STAT1 expression // Blood. 1998 Jan. — Vol. 91(2). — P. 570−576.
  89. Suzuki H, Brown CJ, Forney LJ, Top EM. Comparison of correspondence analysis methods for synonymous codon usage in bacteria // DNA Res. -2008, Dec. Vol. 15(6). — P. 357−365.
  90. Tacket C. O. Plant-based vaccines against diarrheal diseases // Trans Am Clin Climatol Assoc. 2007. — Vol. 118. — P. 79−87.
  91. Tacket CO. Plant-based oral vaccines: results of human trials // Curr Top Microbiol Immunol. 2009. — Vol. 332. — P. 103−117.
  92. Takemoto Y., Yano H., Seiya Momosaki S. Antiproliferative Effects of Interferon-aConl on Ovarian Clear Cell Adenocarcinoma In vitro and In vivo. II Clin Cancer Res. 2004. — Vol. 10. — P. 7418−7426.
  93. Talpaz M, Kantarjian HM, McCredie KB, Keating MJ, Trujillo J, Gutterman J. Clinical investigation of human alpha interferon in chronic myelogenous leukemia // Blood. 1987, May. — Vol. 69(5). — P. 1280−1288.
  94. Talpaz M., Rakhit A., Rittwegwr K. et al. Phase I Evaluation of a 40-kDa Branched-Chain Long-Acting Pegylated IFN-A-2aWith and Without Cytarabine in Patientswith ChronicMyelogenous Leukemia // Clin Cancer Res.-2005.-Vol. 6247, N 11(17).-P. 6247−6255.
  95. Taniguchi T., Fujii-Kuriyama Y, Muramatsu M. Molecular cloning of human interferon cDNA // Proc Natl Acad Sci USA. -1980, Jul. Vol. 77(7). — P.4003−4006.
  96. Tedjarati S., Baker C.H., Apte S. Synergistic Therapy of Human Ovarian Carcinoma Implanted Orthotopically in Nude Mice by Optimal Biological Dose of Pegylated Interferon a Combined with Paclitaxell // Clin Cancer Res. 2002. — Vol. 8. — P. 2413−2422.
  97. Thanavala Y, Mahoney M, Pal S, Scott A, Richter L, NatarajanN, Goodwin P, Arntzen CJ, Mason HS. Immunogenicity in humans of an edible vaccine for hepatitis B // Proc Natl Acad Sci USA.- 2005, Mar 1. Vol. 102(9). — P. 3378−3382.
  98. Thomas NS, Pizzey AR, Tiwari S, Williams CD, Yang J. pi30, pi07, and pRb are differentially regulated in proliferating cells and during cell cycle arrest by alpha-interferon // J Biol Chem. 1998, Sep 11. — Vol. 273(37). — P. 23 659−23 667.
  99. Thyrell L, Erickson S, Zhivotovsky B, Pokrovskaja K, Sangfelt O, Castro J, Einhorn S, Grander D. Mechanisms of Interferon-alpha induced apoptosis in malignant cells // Oncogene. 2002, Feb 14. — Vol. 21(8). — P. 1251−1262.
  100. Tiefenbrun N, Melamed D, Levy N, Resnitzky D, Hoffman I, Reed SI, Kimchi A. Alpha Interferon Suppresses the Cyclin D3 and cdc25A Genes, Leading to a Reversible G0-Like Arrest // Mol Cell Biol. 1996. — Vol. 16 (7). -P. 3934−3944.
  101. Uddin S, Sweet M, Colamonici OR, Krolewski J J, Platanias LC. The vav proto-oncogene product (p95vav) interacts with the Tyk-2 protein tyrosine kinase.// FEBS Lett. 1997, Feb 10. — Vol. 403(1). — P. 31−34.
  102. Uprichard SL. Hepatitis C virus experimental model systems and antiviral drug research // Virol Sin. 2010, Aug. — Vol. 25(4). — P. 227−245.
  103. Valente C.A., Prazeres D.M.F., Cabral J.M.S. et al. Translation features of human alpha 2b interferon production in Escherichia coli II Appl Environ Microbiol. 2004, Apr. — P. 5033−5036.
  104. Vallejo LF, Rinas U. Strategies for the recovery of active proteins through refolding of bacterial inclusion body proteins // Microb Cell Fact. 2004, Sep 2.-Vol. 3(1).-P. 11.
  105. Veluthambi K., Aditya K. Gupta and Arun Sharma. The current status of plant transformation technologies // Curr. Sci. 2003. — Vol. 84 (3). — P. 368 380.
  106. Verch T, Yusibov V, Koprowski H. Expression and assembly of a full-length monoclonal antibody in plants using a plant virus vector // J Immunol Methods. 1998, Nov 1. — Vol. 220(1−2). — P. 69−75.
  107. Vincentelli R, Canaan S, Campanacci V, Valencia C, MaurinD, Frassinetti F, Scappucini-Calvo L, Bourne Y, Cambillau C, Bignon C. High-throughput automated refolding screening of inclusion bodies // Protein Sci. 2004, Oct. — Vol. 13(10). — P. 2782−2792.
  108. Vitale A, Pedrazzini E. Recombinant pharmaceuticals from plants: the plant endomembrane system as bioreactor // Mol Interv. 2005, Aug. — Vol. 5(4). -P. 216−225.
  109. Voss T, Falkner E, Ahorn H, Krystek E, Maurer-Fogy I, Bodo G, Hauptmann R. Periplasmic expression of human interferon-alpha 2c in Escherichia coli results in a correctly folded molecule I I Biochem J. -1994, Mar 15. Vol. 298. — P. 719−725.
  110. Wagstaff J. Renal cell cancer: is immunotherapy dead? // Ann Oncol. -2007, Jul. Vol. 18. — Suppl 9. ix 94−97.
  111. Wu F., Zhao D., Song L., Xu W. Heterologous expression of synthetic chicken IFN-y in transgenic tobacco plants // Biologia. 2009. — Vol. 64 (6). -P. 1115−1122.
  112. Zhu Z., Hughes K., HuangL., Sun B., Liu C., Li Y. Expression of human ainterferon cDNA in transgenic rice plants // Plant Cell. 1994. — Vol. 36 (2). -P. 197−204.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!