Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Изучение структурно-функциональной организации фибрилларина человека

Диссертация: Изучение структурно-функциональной организации фибрилларина человека
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Установлено, что почти половина общей транскрипционной активности в большинстве эукариотических клеток приходится на долю генов класса I, транскрибируемых с участием РНК-полимеразы I. Единственным продуктом этого процесса является предшественник рибосомной РНК (пре-рРНК). В клетках человека первичные транскрипты генов рРНК, известные как 45S-PHK, имеют в длину около 13 000 нуклеотидов. Прежде чем… Читать ещё >

Изучение структурно-функциональной организации фибрилларина человека (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • I. Роль фибрилларипа в биогенезе рибосом и жизнедеятельности клетки. Обзор литературы
    • 1. 1. Введение!
    • 1. 2. Структура и функции ядрышка в клетке. Созревание рРНК
    • 1. 3. Модификации рибонуклеотидов в пре-рРНК. Малые ядрышковые РНК
    • 1. 4. Фибрилларин. Общие сведения
    • 1. 5. Структурная организация фибрилларина человека и его отдельных участков
    • 1. 6. Ортологи фибрилларина у архебактерий. Консервативность структуры и функций
    • 1. 7. Роль структурных доменов фибрилларина в его специфической локализации в ядрышке
    • 1. 8. Функции фибрилларина в эмбриогенезе
    • 1. 9. Фибрилларин как антиген при аутоиммунных заболеваниях
    • 1. 10. Рекомбинантные фибрилларины. Роль остатков цистеина в иммуногенности фибрилларина

    1.11. Выводы. 39 II. Материалы и методы. 40 II.1. Материалы. 41 II. 1.1. Реактивы. 41 II. 1.2. Ферменты 41 II. 1.3. Бактериальные штаммы и плазмиды. 42 II. 1.4. Микробиологические среды. 42 II. 1.5. Линии клеток человека и среды для эукариотических клеток.

    II.2. Методы.

    11.2.1. Выделение плазмидной ДНК методом щелочного лизиса.

    11.2.2. Проведение полимеразной цепной реакции (PCR). 44 И.2.3. Олигонуклеотиды.

    11.2.4. Сайт-направленный мутагенез.

    11.2.5. Получение компетентных клеток Е. coli.

    11.2.6. Трансформация компетентных клеток Е. coli. 46 И.2.7. Скрининг рекомбинантных клонов. 47 И.2.8. Выделение рекомбинантного белка. 47 И.2.9. Ренатурация очищенного рекомбинантного белка. 48 II.2.10. Инъекция мышей препаратом белка и отбор крови. 48 И.2.11. Иммунодот. 49 И.2.12. Иммуноблот.

    11.2.13. Трансфекция клеток HeLa и иммуноцитохимические методы.

    11.2.14. Выявление мест синтеза рРНК.

    III. Изучение структурно-функциональной организации фибрилларина человека. Обсуждение результатов. 54 III. 1. Структурная организация фибрилларина человека и связь его функциональной активности с локализацией в ядрышках.

    111.2. Локализация химерного белка фибрилларин-GFP аналогична распределению эндогенного фибрилларина.

    111.3. Остатки цистеина Cys99 и Cys268 и наличие дисульфидной связи между ними не влияют на специфическую локализацию фибрилларина.

    111.4. Конструирование плазмидных векторов для изучения локализации мутантных вариантов фибрилларина, слитых с

    GFP в клетках человека.

    111.5. GAR-домен фибрилларина содержит сигналы ядрышковой локализации.

    III.6. Другие структурные участки фибрилларина по отдельности не содержат сигналов локализации в ядрышке.

    111.7. Лишенный GAR-домена фибрилларин локализуется — аналогично фибрилларину «дикого типа».

    111.8. Первый спейсерный участок играет важную роль в структурно-функциональной организации фибрилларина человека.

    111.9. Предполагаемый механизм специфического фибрилларин-зависимого 2'-0-метилирования остатков рибозы в пре-рРНК.

    III. 10. Получение рекомбинантного белка «стрептавидин — 2-й спейсерный участок — а-спиральный домен».

    III. 11. Получение и исследование поликлональной сыворотки мыши к С-концевому фрагменту фибрилларина человека.

    IV. Выводы. 100 Благодарности 101

    Список цитированной литературы.

    СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ.

    EDTA — этилендиаминтетраацетат натрия. EtBr -бромистый этидий.

    GFP — зеленый флуоресцирующий белок, green flourescent protein.

    IPTG — изопропил-Р, Б-тиогалактопиранозид.

    SDS — додецилсульфат натрия. а.о. — аминокислотный остаток. мякРНК — малая ядрышковая РНК. мякРНП — малый ядрышковый рибонуклеопротеид. пре-рРНК — прерибосомальная РНК рДНК — гены рибосомной РНК.

В последнее время в биологии весьма остро стоит вопрос системного познания фундаментальных принципов функционирования клетки. Одним из важнейших процессов в развитии клетки является формирование основного аппарата обеспечения жизнедеятельности клетки — биогенез рибосом, без которых развитие, дифференциация и другие процессы жизнедеятельности клеток нереализуемы. Изучение природных механизмов образования аппарата синтеза белка и систематизация знаний об этом процессе может внести существенный вклад в понимание основных принципов функционирования клеток.

Актуальность темы

диссертации. Прочная взаимосвязь, существующая между функциональной активностью отдельных белков и их внутриклеточной локализацией, позволяет проводить изучение значимости отдельных элементов молекулы для функционирования in vivo белка в целом, основываясь, прежде всего, на изменениях в локализации в клетке мутантных полипептидов, детектируемых с помощью методов иммуноцитохимии или флуоресценции слитых с исследуемым продуктом белков-маркеров.

Исследование структурно-функциональных отношений в белке ядрышка эукариот — фибрилларине, позволяет выявить участки белковой молекулы, определяющие его РНК-связывающую и метилтрансферазную активности, а также установить структурные элементы, направляющие транспорт этого белка в ядрышко. Такие данные, помимо фундаментальных знаний о принципах функционирования фибрилларина и механизмах процессинга пре-рРНК, позволяют выяснить закономерности распределения фибрилларина в клетке на разных стадиях клеточного цикла, онтои эмбриогенеза. Последнее особенно важно в связи с образованием у ряда больных аутоиммунными заболеваниями (например, системной склеродермией) антител к фибрилларину и его комплексам с нуклеиновыми кислотами и другими белками. Т.о., понимание закономерностей структурно-функциональной организации фибрилларина ведет к расширению знаний о возникновении и течении аутоиммунных заболеваний.

Сказанное выше и определяет актуальность темы исследования.

Цель работы. Целью работы являлось выяснение функциональной роли отдельных структурных элементов в молекуле фибрилларина человека — белка ядрышка эукариот, участвующего в процессинге прерибосомальной РНК.

Научная новизна работы. При проведении работы получена серия рекомбинантных векторов, несущих гены различных мутантных форм фибрилларина человека, слитых с маркерным зеленым флуоресцирующим белком (GFP) под контролем истинно раннего промотора цитомегаловируса. Исследована экспрессия генов рекомбинантных химерных белков и изучена локализация мутантных форм фибрилларина человека в клетках HeLa.

Впервые показано, что специфическая локализация фибрилларина в фокусах транскрипции рДНК в ядрышке обусловлена не какими-либо сигнальными последовательностями, а функциональной активностью белка. Установлено, что мутантный белок, лишенный N-концевого глицини.

• • ! ' ' ' Н аргинин-богатого участка, сохраняет функциональную активность и специфическую локализацию аналогично ортологам фибрилларина у представителей Archae. ¦ t.

Впервые установлено, что наличие или отсутствие дисульфидной связи между двумя высококонсервативными остатками цистеина в молекуле фибрилларина человека не влияет на локализацию и функциональную активность белка.

Впервые получен рекомбинантный экспрессионный вектор, в составе которого клонирован ген слитого белка «стрептавидин — С-концевой фрагмент фибрилларина человека». Показано, что полученная конструкция обеспечивает достаточный уровень экспрессии химерного гена в Е. coli. Разработана система выделения, очистки и ренатурации такого рекомбинантного белка из штамма-продуцента Е. coli.

Получена антисыворотка мыши, высокоспецифично взаимодействующая с С-концевым фрагментом фибрилларина и полноразмерным фибрилларином в системах in vivo и in vitro.

Практическая ценность работы. Исследованы структурно-функциональные отношения отдельных элементов молекулы фибрилларина человека, что позволит расширить понимание фундаментальных процессов созревания прерибосомальной РНК и механизмов транспорта белков в клетке.

Впервые получен штамм-продуцент слитого белка «стрептавидин — С-концевой фрагмент фибрилларина» и разработана методика выделения и очистки рекомбинантного белка. Выделение такого химерного белка позволило получить высокоспецифичную антисыворотку, потенциально применимую как в научной практике для иммуноцитохимических исследований, так и в медицинской диагностике.

I. Роль фибрилларина в биогенезе рибосом жизнедеятельности клетки. Обзор литературы.

1.1 Введение.

Одним из важнейших процессов в жизнедеятельности клетки является синтез полипептидных молекул на матрице мРНК — процесс трансляций.

Основными участниками процесса считывания информации, закодированной в последовательности мРНК, являются аминоацил-тРНК-синтетазы, тРНК, рибосомы, белки, связанные с рибосомами, и некоторые другие белки.

Рибосомы — молекулярные машины, играющие ключевую роль в синтезе белка, имеются во всех клеткахих число колеблется от 20 000 до.

50 000 в зависимости от белок-синтезирующей активности клеток [1].

Рибосомы эукариот, находящиеся в цитозоле, состоят из малых (40S) и больших (60S) субчастиц. Малые субчастицы содержат одну молекулу i) рибосомальной РНК (18S) размером около 1900 нуклеотидов и 30 — 35 белковбольшие — три цепи рРНК длиной 120 (5S), 160 (5,8S) и 4800 (28S) нуклеотидов и 45 — 50 белков [1].

Установлено, что почти половина общей транскрипционной активности в большинстве эукариотических клеток приходится на долю генов класса I, транскрибируемых с участием РНК-полимеразы I [2, 4]. Единственным продуктом этого процесса является предшественник рибосомной РНК (пре-рРНК). В клетках человека первичные транскрипты генов рРНК, известные как 45S-PHK, имеют в длину около 13 000 нуклеотидов. Прежде чем покинуть ядро в составе собранной субчастицы рибосомы, 45S-PHK подвергается специфическому расщеплению, в результате чего образуется по одной копии 28S-PHK, 18S-PHK и 5,8S-PHK, которые и являются компонентами рибосомы. Общее происхождение всех трех типов рРНК из одного первичного транскрипта является гарантией того, что они будут образованы в равных количествах. Остальная часть пре-рРНК транскрипта (около 6000 нуклеотидов) деградирует в ядре (рис. 1). Возможно, эти «излишние» участки первичного 455-транскрипта играют определенную роль на ранних стадиях процессинга пре-рРНК, происходящих непосредственно по завершении синтеза 45S-PHK.

1фру Деградкруянцне участки нуклеотндной последов атачыюсти.

ISS-pPHK.

3″ .

Включение в малую субчастицу рибосомы.

2SS-pPHK.

Включеюш и большую субчастнцу рибосомы.

Молекулы SS-pPHK снкгеэируются в футом месте.

Рисунок 1. Общая схема процессинга 45S-npe-pPHK эукариот с образованием молекул рРНК трех типов. Почти половина первичного транскрипта деградирует в ядре.

Число генов, кодирующих рРНК, колеблется от сотен до нескольких тысяч в зависимости от вида эукариот (у человека — около 200 копий гена пре-рРНК на гаплоидный геном [3]). Множественные копии высококонсервативных генов рРНК расположены в виде серии тандемных повторов, отделенных друг от друга межгенным спейсером ДНК. У человека эти копии распределены небольшими кластерами по пяти различным хромосомам [3].

Другие тандемно повторяющиеся гены, также разделенные спейсерами, — это гены 5S-PHK большой субчастицы рибосомы (это единственная рРНК, транскрибируемая отдельно от других). Гены этой рРНК насчитывают в длину всего 120 пар нуклеотидов и, как и большинство других генов, кодирующих небольшие стабильные РНК, транскрибируются РНК-полимеразой III. У человека насчитывается около 2000 генов 5S-pPHK, которые тандемно расположены внутри единственного кластера, локализованного в отличной от других генов рРНК области. Остается неизвестным, почему этот тип рРНК транскрибируется отдельно [3].

Непрерывная транскрипция дуплицированных генов обеспечивает клетку достаточным количеством рРНК. Новосинтезированные транскрипты незамедлительно связываются с рибосомными белками с образованием рибосом. Сборка рибосом происходит в ядре, а именно в той его специфической области с диффузной структурой, которая называется ядрышком.

IV. Выводы.

1. GAR-домен фибрилларина человека содержит сигналы ядрышковой локализации. Другие структурные участки фибрилларина по отдельности таких сигналов не содержат.

2. Специфическая локализация фибрилларина в фокусах транскрипции рДНК не зависит от наличия дисульфидной связи в белке.

3. Локализация фибрилларина обусловлена его взаимодействием с мякРНК в составе мякРНП участком 1 Sp-RB-2Sp-a.

4. Предложена модель осуществления специфического фибрилларин-зависимого 2'-0-метилирования остатков рибозы в пре-рРНК.

5. Получен штамм-продуцент слитого белка «стрептавидин — 2-й спейсерный участок — a-спиральный домен фибрилларина» и разработана схема выделения, очистки и ренатурации рекомбинантного белка.

6. Получена антисыворотка мыши, специфично взаимодействующая с фибрилларинами человека и мыши в условиях in vivo и in vitro.

Благодарности.

Автор выражает признательность и благодарность всем сотрудникам лаборатории Молекулярной биологии ФГУП ГосНИИгенетика, а также д.б.н. О. В. Зацепиной, К. Ш. Мухарьямовой и всем сотрудникам лаборатории Структурной биохимии Института Биоорганической химии им. М. М. Шемякина и Ю. А. Овчинникова РАН.

Показать весь текст

Список литературы

  1. М. Сингер, П. Берг. Гены и геномы./ -М.: «Мир»., 1998, т. 1. С. 142.
  2. М. Сингер, П. Берг. Гены и геномы./ -М.: «Мир», 1998, т. 2, С. 25−27.
  3. Б. Албертс и др. Молекулярная биология клетки./ -М.: «Мир», 1994, т.2, С. 162−166.
  4. Miller O.L.I I J. Cell Biol. 1981. — V. 91. — P. 15 — 27.
  5. Hadjiolov A.A. The Nucleolus and Ribosome Biogenesis./ New York, Springer-Verlag, 1985.
  6. ArnettF.C., Reveille J.D., Goldstein R., et al. //Arthritis Reum. 1996. -V.39. P. 1151- 1160.
  7. Tormey V.J., Bunn C.C., Denton C.P., et al. II Rheumatology. 2001. — V.40.-P. 1157−1162.
  8. Hultman P., Enestrom S., Turley S.J., et al. II Clin. Exp. Immunol. 1994. -V. 96.-P. 285−291.
  9. Yang J.M., Baserga S.J., Turley S.J., et al. II Clin. Immunol. 2001. — V. 101.-P. 38−50.
  10. URL http://npd.hgu.mrc.ac.uk/images/fullnucleolusfigl.jpg
  11. Miller, O. L., Jr., Beatty B. RJ/ Science. 1969. — V. 164. — P. 955.
  12. Brown J. W.S., Shaw P.J. II The Plant Cell. 1998. — V. 10. — P. 649−657.
  13. Dennis P.P., OmerA., Lowe T. U Mol. Microbiol. 2001. — V. 40.-P. 509 515.
  14. Madden B.E.HJI Prog. Nucleic Acid Res. 1990. — V. 39. — P. 241−303.
  15. Madden B.E.H. /The modified nucleotides in ribosomal RNA of man and other eukariotes. In Chromatography and Modification of Nucleosides, C.W. Gehrke and K.C.T. Kuo./ eds (Amsterdam: Elsevier), B265-B301.
  16. Maxwell, E.S., and Fournier, M.J. II Annu. Rev. Biochem. 1995. — V. 35. -P. 897−934.
  17. Ofengand, J., andBakin, AM J. Mol. Biol. 1997. V. 266. — P. 246−268.
  18. Bachellerie, J.-P., Michot В., Nicoloso M., et al. II Trends Biochem. Sci. -1995. -V. 20.-P. 261−264.
  19. SteizJ.A., Tycowski K.T.I I Science. 1995. — V. 270. — P. 1626−1627.
  20. A.G., Smith L., Fournier M.J. //Cell. 1996. — V. 86. — P. 823−834.
  21. Caffarelli, E., Fatica, A., Prislei, S., et al./IEUBO J. 1996. — V. 15. — P. 1121−1131.
  22. Watkins N.J., Leverette R.D., Xia L., et л/.//RNA. 1996. — V. 2. — P. 118 133.
  23. Verheggen C., Lafontaine D.L., Samarsky D., et alMEMBO J. 2002. — V. 21.-P. 2736−45.
  24. Christensen, M.E.I IBiochem. Biophys. Res. Commun. 1977. — V. 74. — P. 621 — 629.
  25. Ochs R.L., Lischwe M.A., Spohn W.H., et al. I I Biol. Cell. 1985. — V. 54. -P. 123−134.
  26. Aris J.P., Blobel G. II Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1991. — V. 88. — P. 931−935.
  27. Turley S.J., Tan E.M., PollardK.M. И Biochem. Biophys. Acta. 1993. -V. 1216.-P. 119−122.
  28. Lapeyre В., Mariottini P., Mathieu С., et al II Mol. Cell Biol. 1990. — V. 10.-P. 430−434.
  29. Christensen M.E., FuxaK.P. II Biochem. Biophys. Res. Com. 1988. — V. 155.-P. 1278−1283.
  30. Pierron G., Pedron J., Schelling M, et al И Biol. Cell. 1989. — V. 65. — P. 119−126.
  31. Testillano P. S., Sanchez-Pina M.A., Lopez-Iglesias C., et al II Chromosoma. 1992. — V. 102. — P. 41−49.
  32. Barneche F., Steinmetz F., Echeverria M. II J. Biol. Chem. 2000. — V. 275.-P. 27 212−27 220.
  33. Pih K.T., Yi M.J., Liang Y.S., et al //Plant Physiol. 2000. — V. 123. — P. 51−58.
  34. Tollervey D., Lehtonen H., Jansen R., et al II Cell. 1993. — V.72. — P. 443−457.
  35. Narcisi E.M., Glover С. V., Fechheimer M. II J. Eukaryotic Microbiol. -1998.-V. 45.-P. 105−111.
  36. Wang H., BoisvertD., Kim K.K., et al IIEMBO J. 2000. — V. 19. — P. 317−323.
  37. Туе, K., Steitz, J.A.IIEMBO J. 1989. — V. 8. — P. 3113 — 3119
  38. Kiss-Laszlo Z., Henry Y., Bachellerie J.P., et al II Cell. 1996. — V. 85. -P. 1077−1088.
  39. Tycowski K.T., Smith C.M., Shu M.D., et. all I Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1996. V. 93. — P. 14 480−14 485.
  40. Dunbar D.A., Wormsley S., Lowe T.M., et al II J. Biol. Chem. 2000. — V.275.-P. 14 767−14 776.
  41. Pinol-Roma ?//Mol. Biol. Cell. 1999. — V. 10. — P. 77−90.
  42. Nicol S.M., Causevic M., Prescott A.R., et a/.//Exp. Cell Res. 2000. — V. 257. — P. 272−280.
  43. Ghosh S., Ghosh R., Das P., et cr/.//Prot. Expr. Purif. 2001. — V. 21. — P. 40−48.
  44. Snaar S., Weismeijer K., Jochemsen A.G., et all I J. Cell Biol. 2000. — V. 151 — P. 653−662.
  45. Chen M., Rockel Т., Steinweger G., et al. II Mol. Cell Biol. 2002. — V. 13. -P. 3576−3587.
  46. O.O., Медэ/сидова A.A., Федорова H.E., и др. // Доклады Академии Наук. 2002. — Т. 387. — С. 1−4.
  47. Newton К., Petfalski Е., Tollervey D., et alJMol Cell Biol. 2003. — V. 23. -P. 8519−27.
  48. Jang Y.K., Kim M., Dai Park SV/Biochem. Biophys. Res. Commun. 2002. -V. 294. — P. 1184−1190.
  49. Jones K.W., GorzynskiK., Hales C.M., et al. lI J. Biol. Chem. 2001. — V.276.-P. 38 645−38 651.
  50. Pellizzoni L" Baccon J., Charroux В., et al. l I Curr. Biol. 2001. — V. 11. -P. 1079−1088.
  51. Ghisolfi L., Joseph G., Amalric F" et all/J. Biol. Chem. 1992. — V. 267. -P. 2955−2959
  52. Pellar G.J., DiMario P./V/Chromosoma. 2003. — V. 111. — P. 461−469
  53. Jong A., Clark M., Gilbert M, et alJMoX. Cell Biol. 1987. — V. 7. — P. 2947−2955.
  54. CobianchiF., SenGupta D., Zmudzka В., et all ft. Biol. Chem. 1995 — V. 261.-P. 3536−3543
  55. Girard, J. P., Lehtonen, H., Caizergues-Ferrer, M., et aUFEMBO J. — 1992.-V. 11.-P. 673−682.
  56. Gendra E., Moreno A., Mar Alba M., et alJ! The Plant J. 2004. — V. 38. -P. 875−886.
  57. Lin C.H., Huang H.M., Hsieh M., et alllJ. Protein Chem. 2002. — V. 21. -P. 447−453.
  58. Bouvet P., Diaz J.-J., Kindbeiter K., Madjar J.-J., et alt'/J. Biol. Chem. -1998. V. 273. — P. 19 025−19 029.
  59. Yanagida M., Hayano Т., Yamauchi Y., et я/V/JBC Papers in Press. -Published on October 28, 2003 as Manuscript M305604200.
  60. Lu Deng, N.G. Starostina, Zhi-Jie Liu, et al. II Biochem. Biophys. Res. Com. 2004. -V. 315. — P. 726−732.
  61. Jansen R.P., Hurt E.C., Kern H, et all/J. Cell Biol. 1991. — V. 113. — P. 715−729.
  62. Speckmann W.A., Li Z.H., Lowe T.M., et alllCun. Biol. 2002. — V. 12. -P. 199−203.
  63. CreancierL., Prats H" Zanibellato С., et al.llMol. Cell Biol. 1993. — V. 4.-P. 1239−1250.
  64. Schmidt-Zachmann M.S., Nigg E.A.IIJ. Cell Sci. 1993. — V. 105. — P. 799 806.
  65. Ou YFritzer M.J., Valdez B.C., et о/.//Exp. Cell Res. 1999. — V. 247. -P. 389−398.
  66. Dundr M., Herbert M.D., Karpova T.S., et allll. Cell Biol. 2004. — V. 164.-P. 831−842.
  67. Zatsepina О. V., Baly Ch., Chebrout M., et al. ll Dev. Biol. 2003. — V. 253. -P. 66−83.
  68. Baran V., VeselaJ., RehakP., et al.llMoX. Reprod. Dev. 1995. — V. 40. -P. 305−310.
  69. FerreiraJ., Carmo-Fonseca M.//Development. 1995. — V. 121. — P. 601 612.
  70. YangJ.-M., Baserga S.J., Turley S.J., et ^/.//Clinical Immunology. 2001. -V. 101.-P. 38−50.
  71. Arnett F.C., Reveille J.D., Goldstein R., et al. II Arthritis Reum. 1996. -V. 39.-P. 1151−1160.
  72. Van Eenennaam H., Vogelzangs J.H.P., Bisschops L., et al. ll Clin. Exp. Immunol. 2002. — V. 130. — P. 532−540.
  73. Chen M, von Mikecz A.IIExp. Cell Res. 2000. — V. 259. — P. 225−238.
  74. Zhou X., Tan F.K., Xiong M., et al.Hl. Immunol. 2001. — V. 167. — P. 7126−7133
  75. D.L. Pearson, R.D. Reimonenq, KM. Pollard. il Protein Expr. Purif. 1999. -V. 17.-P. 49−56
  76. B.M. Молекулярная Биология. Структура и функции белков./Под ред. А.С. Спирина-М.: Высш. шк., 1996, С. 111−113.
  77. Takeuchi К., Turley S. J., Tan Е. М., et al.lП. Immunol. 1995. — V. 154. -P. 961−971.
  78. Lubben В., Rottmann N., Kubicka-Muranyi M., et д/.//Мо1. Biol. Rep. -1994.-V. 20.-P. 63−73.
  79. Azum-Gelade M.C., Noaillac-Depeyre J., Caizergues-Ferrer M., et al./IJ. Cell Sci. 1994. — V. 107. — P. 463−475.
  80. К.Ш., Дудник O.A., Сперанский A.M., и др. // Биологические мембраны. 1998. — Т. 15. — С. 657−669.
  81. Savino Т.М., Gebrane-Younes J., De Mey J., et al. HL Cell Biol. 2001. -V. 153.-P. 1097−1110.
  82. Heine M.A., Rankin M.L., DiMario P. JJ/UoX. Cell Biol. 1993. — V. 4. — P. 1189−1204.
  83. Ho S.N., HuntH.D., Horton R.M., et al./IGene. 1998. — V. 77. — P. 51−59.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!