Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Клинико-диагностическое исследование плазмидных ДНК грамотрицательных и грамположительных микроорганизмов

Диссертация: Клинико-диагностическое исследование плазмидных ДНК грамотрицательных и грамположительных микроорганизмов
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

В связи с этим большое значение придаётся разработке оптимальных условий выделения и изучения электрофоретической подвижности плазмидных ДНК грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, что позволит расширить возможности эпидемиологического анализа при изучении посттравматических и постоперационных гнойных осложнений. Существуют различные методы выделения плазмидных ДНК, особенно… Читать ещё >

Клинико-диагностическое исследование плазмидных ДНК грамотрицательных и грамположительных микроорганизмов (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • Глава 1. Обзор литературы
    • 1. 1. Источники и пути передачи внутрибольничной инфекции
    • 1. 2. Особенности внутрибольничной инфекции в травматологическом стационаре
    • 1. 3. Возбудители внутрибольничной инфекции
      • 1. 3. 1. Полиантибиотикорезистентные грамотрицательные и грамположительные микроорганизмы
      • 1. 3. 2. Устойчивость микроорганизмов к химиопрепаратам
      • 1. 3. 3. Роль плазмид в формировании госпитальных штаммов
      • 1. 3. 4. Плазмиды как дополнительный эпидемиологический маркер
    • 1. 4. Контроль за распространением антибиотикорезистентных штаммов
  • Глава 2. Материалы и методы
    • 2. 1. Микробиологическое исследование клинических штаммов
    • 2. 2. Изучение плазмидных ДНК грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов
  • Глава 3. Изучение клинических штаммов грамотрицательных и грамположительных микроорганизмов
    • 3. 1. Исследование этиологического значения различных микроорганизмов при гнойных осложнениях в травматологическом стационаре
    • 3. 2. Изучение распространенности полиантибиотикорезистентных грамотрицательных штаммов микроорганизмов, выделенных от больных с гнойными осложнениями
    • 3. 3. Исследование плазмидных ДНК полиантибиотикорезистентных грамотрицательных микроорганизмов
    • 3. 4. Выявление возможных источников и путей распространения антибиотикорезистентных штаммов микроорганизмов
    • 3. 5. Изучение распространенности полиантибиотикорезистентных штаммов стафилококка в клиниках СарНИИТО
    • 3. 6. Изучение распространенности плазмидных ДНК Staphylococcus aureus при различных гнойных осложнениях в клиниках СарНИИТО
  • Глава 4. Исследование методов выделения и электрофоретической подвижности в агарозных гелях плазмидных ДНК, выделенных из клинических штаммов грамотрицательных микроорганизмов
    • 4. 1. Сравнительное исследование методов выделения плазмидных ДНК из грамотрицательных штаммов микроорганизмов
    • 4. 2. Изучение электрофоретической подвижности плазмидных ДНК в агарозном геле
  • Глава 5. Выделение плазмидных ДНК из грамположительных бактериальных клеток

Повышение эффективности профилактики и лечения посттравматических и послеоперационных нагноений является одной из важных проблем в травматологии и ортопедии. Частота этих осложнений, по данным различных авторов, составляет от 10 до 30% [Петраков A.A. и соавт., 1993; Покровский В. И., 1997; Блатун Л., 1998].

Госпитальная инфекция в травматологии и ортопедии характеризуется наличием широкого спектра возбудителей гнойно-воспалительных процессов. В последние годы отмечается изменение качественного и количественного состава возбудителей, что нередко определяет особенности клинических проявлений хирургической инфекции на современном этапе [Фадеев С.Б., 2001].

Одним из основных возбудителей раневой инфекции у травматолого-ортопедических больных остаётся золотистый стафилококк, который в 40% случаев является единственной причиной гнойного процесса. Грамотрицательная микрофлора является этиологическим агентом в 35% случаев гнойных осложнений [Петраков A.A., 1993; Neely J.L., 1994; Kluytmans J., 1994].

По мнению некоторых авторов [Marchese А., 2000; Сидоренко C.B., 2001], в настоящее время в хирургических стационарах количество нагноений, связанных с инфицированием грамотрицательной микрофлорой, в основном представителями рода Pseudomonas, вновь возрастает.

Изучение плазмидных ДНК грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов является дополнительным методом бактериологической диагностики и позволяет определить пути и источники распространения внутрибольничной инфекции [Домбровский A.M., 1990; Alexander J.W., 1990; Marcellino М.Т. et al., 1992].

Плазмидный профиль штаммов в комплексе с другими видами исследований используется различными авторами для изучения явления бактериальной транслокации, которая в последние годы признаётся одним из основных механизмов эндогенного инфицирования и может являться причиной значительного числа гнойных осложнений [Бородин A.B. и соавт., 2001; Kollef М.Н., 1999].

Существуют различные методы выделения плазмидных ДНК, особенно грамотрицательных бактерий, которые различаются между собой по чистоте получаемого продукта, по затрачиваемому времени, однако далеко не все они применимы к клиническим штаммам микроорганизмов, имеющим особенности морфологического строения и биохимического метаболизма [Харди К., 1989].

Выделение плазмидных ДНК из стафилококков представляет определённые трудности, одна из которых заключается в сложности разрушения клеточной стенки стафилококка [Покровский В.И., 1999; Coia J.E. et al., 1989].

В связи с этим большое значение придаётся разработке оптимальных условий выделения и изучения электрофоретической подвижности плазмидных ДНК грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, что позволит расширить возможности эпидемиологического анализа при изучении посттравматических и постоперационных гнойных осложнений.

Цель исследования:

Целью настоящего исследования является клинико-диагностический анализ частоты встречаемости плазмидных ДНК при различных гнойных осложнениях в травматологическом стационаре на основе оптимизации методов выделения и условий проведения электрофореза высокои низкомолекулярных плазмидных ДНК клинических штаммов грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов.

Задачи исследования:

1.Исследовать распространенность различных полиантибиотикорезистентных грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, выделенных от больных с гнойными осложнениями в клиниках травматологического стационара и провести анализ частоты встречаемости плазмидных ДНК у этих штаммов микроорганизмов.

2. Изучить на клинических штаммах грамотрицательных микроорганизмов возможность применения различных методов выделения плазмидных ДНК.

3. Разработать доступные методы выделения плазмидных ДНК из грамположительных микроорганизмов.

4. Исследовать оптимальные условия проведения электрофореза высокои низкомолекулярных плазмид грамотрицательных и грамположительных микроорганизмов.

Научная новизна.

Впервые проведён клинико-диагностический анализ частоты встречаемости плазмидных ДНК при различных гнойных осложнениях у травматологических больных.

Впервые подобраны минимальные концентрации лизостафина, используемого при разрушении клеточной стенки стафилококка, а также модифицированы и применены в исследовательской работе доступные методы выделения плазмидных ДНК из клинических штаммов стафилококка.

Впервые разработаны оптимальные условия изучения электрофоретической подвижности высокои низкомолекулярных плазмидных ДНК различных грамотрицательных микроорганизмов.

Практическая значимость.

Предложенные модификации методов выделения плазмидной ДНК из грамотрицательных и грамположительных микроорганизмов позволяют / * У^.г-4 Л ^ 51 8 идентифицировать плазмиды бактериальных клеток, определять источники и пути передачи госпитальной инфекции в травматологическом стационаре. Результаты проведенных исследований используются в практической работе бактериологической лаборатории Саратовского НИИ травматологии и ортопедии и в учебном процессе кафедры биологической химии Саратовского государственного медицинского университета. По материалам исследований составлены и утверждены учебно-методические рекомендации «Анализ плазмидных ДНК методами биологической химии». Получено свидетельство на полезную модель «Кювета для выращивания микроорганизмов» № 22 478 по заявке № 2 001 131 454/20/33 618, приор, от 21.11.2001 // БИ.- 2002. № 10. Соавт.: В. Б. Бородулин, А. М. Гнетнёв, Е. Г. Чеботарева, Ю. И. Кирова, Н. Ю. Фомина.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. В клинических штаммах грамотрицательных и грамположительных микроорганизмов обнаруживается плазмидная ДНК, определена зависимость частоты встречаемости плазмидных ДНК от видовой принадлежности микроорганизмов, выделенных при различных гнойно-воспалительных осложнениях у травматологических больных.

2. Разработаны доступные методы выделения плазмидных ДНК из грамположительных микроорганизмов и эффективный метод лизиса клеток стафилококка, позволяющие шире использовать выделение плазмидных ДНК для выполнения эпидемиологического анализа в связи с упрощением методики и снижением материальных затрат.

3. Подобраны оптимальные условия электрофореза высокои низкомолекулярных плазмидных ДНК клинических штаммов грамотрицательных микроорганизмов, что обеспечивает высокую визуальную чёткость плазмидного профиля.

Апробация работы.

Материалы диссертации доложены и обсуждены на II Российской конференции с международным участием «Внутрибольничная инфекцияпроблемы эпидемиологии, клиники, диагностики, лечения и профилактики» (Москва, 1999) — на конференции «Лабораторные исследования в хирургии, акушерстве, травматологии» (Саратов, 2002) — на научно-практической конференции СГМУ «Молодые учёные — здравоохранению региона» (Саратов, 2003). Диссертация обсуждена и одобрена на расширенном заседании кафедры биологической химии Саратовского государственного медицинского университета и лабораторного отдела Саратовского НИИ травматологии и ортопедии (2003).

Публикации.

По материалам диссертации опубликовано 10 печатных работ, в том числе одна — в центральной печати.

Объем и структура диссертации.

Диссертация состоит из введения, пяти глав, заключения, выводов, практических рекомендаций и указателя использованной литературы.

ВЫВОДЫ.

1. Исследовано соотношение наиболее этиологически значимых грамотрицательных микроорганизмов в клиниках травматологического стационара. В клинике острой травмы распространенность представителей семейства Enterobacteriaceae составила 88,7%, а представителей рода Pseudomonas- 12,3% от общего количества изученных грамотрицательных бактерий в этом отделении. В клинике последствий травм 36,6% грамотрицательных бактерий составляли представители семейства Enterobacteriaceae и 64,4% - бактерии рода Pseudomonas.

Значительную часть штаммов, отнесенных к роду Staphylococcus, составили штаммы Staphylococcus aureus — 63,6% от всех изученных штаммов стафилококка. Из них наибольшее количество было выделено в клинике последствий травм — 44,6% и в клинике острой травмы — 28,9% от общего количества штаммов Staphylococcus aureus.

2. Изучена частота распространения плазмидосодержащих штаммов грамотрицательных бактерий семейства Enterobacteriaceae, которая колебалась от 40 до 71%, а у представителей рода Pseudomonas от 13 до 19% при различных гнойных осложнениях в клиниках травматологического стационара.

Плазмидосодержащие полиантибиотикорезистентные штаммы.

Staphylococcus aureus встреча tcb с частотой от 57 до 84% при различных гнойных осложнениях в клиниках травматологического стационара.

3.Разработана модификак методов Birnboim, Doli и Kado, Liu, которая является наиболее удобной для выделения как высоко-, так и низкомолекулярных плазмидных ДНК из клинических штаммов грамотрицательных микроорганизмов, обладает хорошей разрешающей способностью и воспроизводимостью.

— ШЩЩЩЧ''.

P5t.

4.0пределена минимальная концентрация лизостафина, необходимая для полного лизиса клеток Staphylococcus aureus — 1 ЕД при инкубации 120 минут} 2 ЕД при времени инкубации 60 минут. Продемонстрировано, что существенное уменьшение концентрации лизостафина не сказывается на процедуре лизиса клеток стафилококка.

Разработаны модификации методов Bhaduri и Demchick, Townsend выделения плазмидных ДНК из клинических штаммов Staphylococcus aureus, доступные для бактериологических лабораторий лечебных учреждений.

5.Разработана процедура проведения электрофореза высокои низкомолекулярных плазмидных ДНК, выделенных из клинических штаммов грамотрицательных микроорганизмов и Staphylococcus aureus. Наиболее оптимальным является проведение электрофореза в течение 4−8 часов при напряжении 40−60 V в трис-боратном буфере как для высоко-, так и для низкомолекулярных плазмидных ДНК различных видов грамотрицательных микроорганизмов. Продолжительность электрофореза в течение 2−3 часов при напряжении 80−100 V в том же буфере являлась наиболее оптимальной при исследовании электрофоретических профилей плазмидных ДНК клинических штаммов Staphylococcus aureus.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.

Для выделения плазмидных ДНК из клинических штаммов грамотрицательных микроорганизмов предлагается модифицированная методика Birnboim-Doli и Kado-Liu. Для выделения плазмидных ДНК из клинических штаммов Staphylococcus aureus предлагаются модифицированные методики Bhaduri — Demchick и Townsend.

Разработанные модификации методов могут быть рекомендованы для внедрения в практику бактериологических лабораторий лечебных учреждений. Выделение плазмидных ДНК может служить дополнительным лабораторным тестом для обнаружения штаммов, вызывающих нозокомиальные инфекции.

Показать весь текст

Список литературы

  1. И.В., Акимова Л. А., Шитов В. Т., Воложанцев Н. В., Светоч Э. А. Трансформация патогенных псевдомонад плазмидной ДНК // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 1992. -№ 3−4. — С.17−20.
  2. A.A., Красильников А. П., Собещук О. С. Сравнительноеисследование антибиотиков и антисептиков в отношении Staphylococcusaureus // Антибиотики и химиотерапия. -1991. Т.36, № 2. — С.21−24.
  3. А., Зуева B.C. Стафилококки. М.: Медицина, 1983. — С.14−35,156−178.
  4. Г. И. Репарация ДНК и мутагенез у бактерий, зависящие от плазмид. Автореф. дис. д-ра. мед.наук. М., 1989. — 45 с.
  5. Н.Х. и др. Профилактика транслокации кишечной микрофлоры после выведения организма из терминального состояния //ЖМЭИ. 1992. -№ 5−6.-С. 11−14.
  6. ., Брей Д., Льюис Дж. и др. Молекулярная биология клетки. М.: Мир, — 1987.-Т.2., С. 34−51.
  7. Г. Е., Блинов Н. П. Антисептики в хирургии. Л.: Медицина, 1987. -144 с.
  8. Ба Т.А.Т., Емшанов О. В., Каминский Г. Д. Анализ плазмидного профиля коллекции штаммов для бактериоцинотипирования Shigella Sonnei // ЖМЭИ. -1993.-№ 6.-С. 23−24.
  9. Ю.В., Левашов B.C. Трансформирующая активность R- и Lac-плазмид клинических штаммов грамотрицательных бактерий // ЖМЭИ.- 1979.-№ 11.-С.86−90.
  10. С.С., Самсонова Л. П. Структура и функции плазмид. М., 1980. — С.24−27.
  11. С.С., Парфенюк Р. Л. Микробиологический контроль за лекарственной устойчивостью возбудителей гнойно-септических инфекций новорожденных детей // Антибиотики и химиотерапия.- 1990.- Т.35, № 5, — С.21−24.
  12. З.Беляков В. Д., Рябис Л. А., Калинский Г. Ф. Типирование возбудителей инфекционных болезней на современном этапе // ЖМЭИ.- 1998.- № 3. -С.37.
  13. .А. и др. Значение аутогенного инфицирования в развитии послеоперационных осложнений //Хирургия. 1993. — № 5. — С.63−66.
  14. Бил Дж., Ноулз Дж. Внеядерная наследственность. -М.: Мир, 1981.- С. 56−64.
  15. Л. Некоторые аспекты госпитальной инфекции // Врач. -1998.-№ 1.-С.41.
  16. В.М., Боев Б. В. Применение компьютерных технологий при оперативном анализе вспышек внутрибольничных инфекций // ЖМЭИ.- 1999.1. S (< н, -V «. да»? ^ $ *1381. Xs3.-C.21.
  17. A.M. Плазмиды резистентности и биодеградации бактерий рода Pseudomonas: Автореф. дис. д-ра. биол. наук. М., 1987. — 38 с.
  18. JI.E. Бактериальная резистентность и чувствительность к химиопрепаратам. М.: Медицина, 1984. — С. 195 -230.
  19. . Антибактериальная профилактика и лечение послеоперационных осложнений и внутрибольничных инфекций // Врач. 1998. -№ 1.- С.30−34
  20. Л. Плазмиды. М.: Мир, 1982. — С.119−173.
  21. А.Я. Микрофлора гнойно-воспалительных очагов и чувствительность ее к антибиотикам // Антибиотики и химиотерапия. 1990.- Т.37, № 1. — С.40
  22. Д. Резистентность к беталактамным антибиотикам // Антибиотики и химиотерапия. 1997.- № 10 — С.5−10.
  23. В.В. Современные представления о механизмах распространения внутрибольничной инфекции // Актуальные проблемы нозокомиальных инфекций и лекарственной устойчивости микроорганизмов. Минск, 1986.
  24. В.В. Этиология // Профилактика внутрибольничной инфекции. М., 43.1. С.53−54.-'4'i1993.-С. 6−11.
  25. С.Д., Ратгауз Г. Л., Миронова Т. Г. и др. Некоторые особенности госпитальных штаммов стафилококка // Антибиотики и химиотерапия. 1979. — № 4. — С.263−267.
  26. Э., Медьеши Г., Верец Т. И. Электрофорез в разделении биологических макромолекул. Под ред. В. И. Розенгарта. М.: Мир, 1982.-446 с.
  27. Т.Г. Распространение R-плазмид в штаммах Staphylococcus aureus и Pseudomonas aeruginosa: Автореф. дис. д-ра. биол.наук. Абовян, 1987. — 24 с.
  28. Т.Г., Галушка Ф. П., Чанишвили Т. Г. Изучение конъюгативных R-плазмид, выделенных из госпитальных штаммов синегнойной палочки // Антибиотики и химиотерапия. 1992. — Т.37, № 12. — С.39−41.
  29. Т.Г., Чаишвили Т. Г., Макаридзе P.M., Чиковани Л. А., Адамия Р. Ш., Галушка Ф. П., Харатаев Г. Н. Изучение плазмид антибиотикорезистентности из различных штаммов Staphylococcus aureus // Антибиотики и химиотерапия.- 1993.- т.38, № 6. С.30−34.
  30. В.И., Кравец А. Н., Новикова И. С. Внехромосомные генетические элементы: значение для науки и практики. М., 1981. — С.43.
  31. В.К., Омельяновский В. В. Пути и возможности профилактики инфекционных осложнений в хирургии // Хирургия. 1997. — № 8. — С. 11−15.
  32. Л.К. Использование плазмид NPL-41 (INC Р-9) и RP-4 (INC Р-1) для1. V { Ii- ГЛ"1 f «V .конструирования векторов с широким кругом хозяев и клонирование генов в грамотрицательных бактериях. Автореф. дис. канд. биол. наук. М., 1989.-23с.
  33. Е.В., Пехов A.M. Несовместимость и репликация плазмид // Бюл. эксп. биологии и медицины. 1991. — № 10. — С. 409−411.
  34. В.Г., Зарубин В. В., Кальной С. М. Определение наличия плазмидной ДНК методом электрофоретического скрининга у бактерий // Генетика и биохимия вирулентности возбудителей особо опасных инфекций: Мат-лы Рос. науч. конф. Волгоград, 1992. — С. 34.
  35. В.М. Всесоюзное совещание по программе „Плазмида“.-М., 1995.- С.61−63.
  36. Р. Генетика бактерий. -М.: Мир, 1984. С. 176.
  37. Н.В., Ермолаев A.B. Основы бактериологии для экологов. М., 1999.-С. 70−74.
  38. A.M. Анализ плазмидного профиля антибиотикоустойчивых энтеробактерий, циркулирующих в стационаре // Антибиотики и химиотерапия. 1990. — Т.35, № 4. — С.28−31.
  39. А.Н., Есикова Т. З., Воронин A.M. Новая плазмида с широким кругом хозяев pBSlOOl // Молекул, генетика, микробиология и вирусология. -1989. № 11. — С.40−44.
  40. Т.Е. Генетические детерминанты антибиотикорезистентности штаммовбактерий родов Pseudomonas, Klebsiella, Serratia, Enterobacter: Автореф. дис.канд. биол. наук.- М., 1991. 17 с.
  41. Т.Е., Анисимова JI.A., Смолянская А. З., Воронин А. М. Плазмиды и генетические детерминанты резистентности к антибиотикам грамотрицательных бактерий // Антибиотики и химиотерапия. 1989. — № 5. -С.365−370.
  42. Х.И., Баженов Л. Г. Госпитальные штаммы Pseudomonas aeruginosa в хирургической практике // ЖМЭИ. 1991. — № 9. — С.27−29.
  43. К.В., Глатман Л. И., Бондаренко В. М., Березина JI.A., Терехов A.A., Цепева Г. Я. Плазмида резистентности Klebsiella pneumonia, контролирующая цитотоксическую активность // Антибиотики и химиотерапия. 1992. — № 2.ч .-„: ** л* v.^“ f-tj, 1″!-» j., л
  44. A.B., Махсон Н. Е., Мельникова В. М. Гнойная травматология костей и суставов. М.: Медицина, 1985. — 384с.
  45. А.Н., Вакуленко С. Б. Гены резистентности к аминогликозидным антибиотикам клинических штаммов Serratia marcescens и кодируемые ими ферменты//Антибиотики и химиотерапия. 1992. -Т.37, № И. -С.10−14.
  46. Г. Ю. Дифференцированное выделение низкомолекулярных плазмид // Лаб. дело. 1989.-№ 4. — С. 61−62.
  47. А.Л., Вельских А. Н., Тулупов А. И. Интенсивная терапия послеоперационной раневой инфекции и сепсиса.- СПб.: Фолиант, 2000.-447с.
  48. В.П., Титова A.B., Лямкина Л. М., Механошина И. И. Изменение ант ибиотикочувствительности стафилококков в условиях реализации эффекта пептидного антибактериального фактора // Антибиотики и химиотерапия. -2002.-Т.47, № 2. С.11−15.
  49. А.И., Малышева Т. В. Классификация и эпидемиология R-плазмид энтеробактерий // Антибиотики и химиотерапия. 1988. — Т. ЗЗ, № 2. — С. 149 154
  50. А.Н., Солонин А. С., Захарова М. В., Тарутина З. Е. Плазмидная локализация и клонирование генов системы рестрикции-модификации из штаммов Citrobacter freundii // Молекул, генетика, микробиология и вирусология. 1992. -№ 7−8. — С.4−7.
  51. М.И., Костюченок Б. М. Местное лечение гнойных ран // Раны и раневая инфекция. М.: Медицина, 1990. — С.223−288.
  52. Д.Е. Системы регуляции конъюгационного переноса плазмид Escherichia coli: Автореф. дис. канд. мед. наук.- М., 1989. 16 с.
  53. Т.А., Баженов Л. Г., Суюмова А. С., Шабанова Н. Г. Идентификация и чувствительность к антимикробным препаратам энтеробактерий, выделенных при гнойно-воспалительных заболеваниях // Антибиотики и химиотерапия. -1993. Т.38, № 6. — С.35−40.
  54. Г. Ф., Трошкина Д. М., Усачева С. Ю. //Стафилококковые инфекции. -Ростов. 1990.-С. 35−23.
  55. М.Л., Брусина Е. Б. Госпитальная инфекция: проблемы и пути решения // ЖМЭИ.- 1992.-№ 2.-С.22−24.
  56. Литтл П.Ф.Р., Джексон Й.Дж., Постка А.-М., Лерах X. Новое в клонировании ДНК: Методы. М.: Мир, 1989. — 367 с.
  57. Т.В., Коротяев А. И. Плазмиды как организмы и роль их в современной эпидемиологии бактериальных инфекций // VI Всерос. съезд микробиологов, эпидемиологов и паразитологов: Тез. докл., Н. Новгород. М., 1991. — с.103−104.
  58. Т., Фрич Э., Сэмбруг Д. А. Молекулярное клонирование: Пер. с англ. -М., 1984.-С 112−207.
  59. В.М., Беликов Г. П., Богомолова Н. С. Химиопрофилактика и химиотерапия при некоторых хирургических операциях // Профилактика внутрибольничной инфекции. М., 1993. — С.205−211.
  60. В.М., Беликов Г. П., Локтионова И.В. II Росс. конф. «Внутрибольничные инфекции проблемы эпидемиологии, клиники, диагностики и профилактики»: Тез. докл. -М., 1999.- С.152−153.
  61. Д.Д., Олейник В. А., Янискер Г. Я. Оптимизация надзора за экологией микрофлоры очагов нагноения // Антибиотики и химиотерапия.-1990.- Т.35., № 7.- С.44−47.
  62. Д.Д., Олейнин В. А., Янискер Г. Я., Кумачева Е. Г., Залогуева Г. В., Финогеева Л. Г., Енилеев Р. Х. Организация надзора за экологией микрофлоры очагов нагноений // Антибиотики и химиотерапия. -1990. Т.35, № 7. — С.44−47.
  63. Г. Бактериальные плазмиды. М.: Мир, 1976. — 237с.
  64. С.Д. Выбор антибиотиков при внутрибольничных инфекциях у больных со злокачественными новообразованиями // Антибиотики и химиотерапия. 2002. — Т.47., № 3 — С.29−32.
  65. И.С., Гуторова Л. Д., Рязанова А. И. Биологические свойства энтеробактерий и их использование в практических целях // Госпитальные инфекции и лекарственная устойчивость микроорганизмов: Сб. науч. тр. М., 1992. — С.90−92.
  66. А.Ф., Анциферова Н. Г., Баскакова Н. В. Синегнойная инфекция. М.: Медицина, 1988.-256 с.
  67. А.Ф., Глатман Л. И. Роль R-плазмид в формировании госпитальных штаммов грамотрицательных бактерий // Антибиотики и химиотерапия.- 1983.-Т.28, № 11.- С.859−874.
  68. Медицинская микробиология // Гл. ред. Покровский В. И., Поздеев O.K. М.: ГЭОТАР Медицина, 1999. — 462 с.
  69. С.М., Сазыкин Ю. О. Антибиотики: новые механизмы передачи резистентности // Антибиотики и химиотерапия. 1998.- Т.43, № 6. — С.28−36.
  70. С.М., Фомина И. П. Рациональная антибиотикотерапия. M": Медицина, 1982.-495 с.
  71. О.В. Метод выделения хромосомной ДНК, свободной от плазмид на примере эшерихий клинического происхождения // Биотехнология и генетика: Межвуз. сб. науч. тр. Н.Новгород. — 1991. — С.32−35.
  72. А.Г. Поведение гетерологичных R-плазмид в клетках Erwinia: Автореф. дис. канд. биол. наук. Минск, 1987. — 18 с.
  73. A.A. Травматолого-ортопедические стационары // Профилактика ВБИ.-М., 1993.-С.113−115.
  74. A.A., Арутчева A.A., Аржакова И. И. и др. Профилактика эндогенных инфекционных осложнений у больных после тяжелых травм и ортопедических операций // Антибиотики и химиотерапия. 1993. — Т.38, № 6. — С.55−59.
  75. А.П. Плазмиды бактерий. М.: Медицина, 1986. — С.152−223.
  76. В.И. Внутрибольничная инфекция // Тер. архив.- 1998. Т.60, № 11.-С.З-6.
  77. .Д. Плазмиды резистентности Pseudomonas aeruginosa pBS52 и pBS222 с широким кругом бактериальных хозяев: Автореф. дис. канд. биол. наук. М., 1987.- 17с.
  78. К.Д., Кривошеин B.C. Микробиология. М. 1980. — 108 с.
  79. Самсонова A. JL, Левашев B.C. Чувствительность к дезинфектантам штаммов Е. coli, содержащих плазмиды множественной лекарственной устойчивости // ЖМЭИ. 1993. — № 6. — С. 33−34.
  80. С.В. Теоретические и практические проблемы антибиотикорезистентности // Антибиотики и химиотерапия. 1992. — Т.37, № 9. С. 44−47.
  81. С.В. Перспективы контроля распространения антибиотикорезистентности // Антибиотики и химиотерапия, — 1998.- Т.43, № 7. -С. 3−5.
  82. С.В., Резван С. П., Грудинина С. А., Стерхова Г. В. Динамика антибиотикорезистентности возбудителей госпитальных инфекций в отделении реанимации // Consilium medicum: Экстра-выпуск. 2001. — С. 6−9.
  83. С.В., Яковлев С. В. Инфекции в интенсивной терап и. М.: Зеркало, 2000. -237 с.
  84. Л.З., Сидоренко С. В., Нехорошева А. Г., Резван С. П., Карп В. П. Практические аспекты современной клинической микробиологии. М.: Медицина, 1990.-215 с.
  85. JI.E., Уланова Т. И., Мазепа В. Н., Бруснигина Н. Ф., Барышева Н. Н. Плазмиды бактерий семейства Enterobacteriaceae, несущие ген термолабильного эндотоксина // Биотехнология и генетика: Межвуз. сб. науч. тр.- Н. Новгород, 1991. С. 20−23.
  86. Г. Молекулярная генетика. М.: Мир, — 1986. — 315 с.
  87. JI.С., Белоусов Ю. Б., Козлов С. Н. Антибактериальная терапия: 1 Практическое руководство. М., 2000. — 190 с.
  88. Д.М., Леванова Г. Ф. Плазмидный анализ кадмий-пенициллинорезистентных штаммов стафилококков, выделенных в акушерских стационарах // Антибиотики и химиотерапия.- 1992. Т.37, № 5. -С.7−9.
  89. С.Б. Некоторые этиологические аспекты хирургической инфекции мягких тканей // Анналы травматологии и ортопедии. 2001. — № 2.- С. 23−25.
  90. К. Плазмиды. Методы. М.: Мир, 1989. — 267 с.
  91. .В. Генетика Pseudomonas // Молекулярные основы генетических процессов. М.: Наука 1981. -С.269−278.
  92. С.В. Клиническое значение резистентных микроорганизмов для выбора режима антибактериальной терапии в хирургии //Consilium medicum: Экстра-выпуск. 2001.- С 11−14.
  93. P. X., Зуева Л. П. Эпидемиология внутрибольничной инфекции. Л.: Медицина, 1989. — 168 с.
  94. Alexander J.W. et al. Plasmid labeling confirms bacterial translocation in pancreatitis // Ann. Surg. 1990. — V. 212. — P. 496−512.
  95. Bigelow N., Robson H.G., Dillom J.R. Strategies for molecular characterisation of methicillin- and gentamicin-resistant Staphylococcus aureus in a Canadian nosocomial outbreak // J. Med. Microbiol. 1989. — Vol.30. — P. 51−58.
  96. Birnboim H. C. A rapid alkaline extraction method for the isolation of plasmid DNA // Methods Ensimol. 1983. — V. 100. — P. 234−255.
  97. Birnboim H. C., Doly S. A rapid alkaline extraction procedure for screening recombinant DNA //Nucleic Acid Res. 1979. — V.7. — P. 1513−1523.
  98. Bhaduri S., Demchick P.H. A simple and rapid method for disraption of bacteria for protein studies // Appl. Environ. Microbiol. 1985. — V. 46. — P. 941−943.
  99. Carlson C. A., Pierson L. S., Rosen J.I. Pseudomonas stutzeri and related species undergo natural transformation // J. Bacteriol. 1983. — V.31. — P.93−99.
  100. Datta N. Plasmid classification. // Plasmids of medical environmental and commercial importance. Eds. K. Tummis, Puhler A. Elsevier. North. Holland: Biomed. Press, 1979. — P. 3−12.
  101. Domenico P., Marx J.L., Schoch P.E., Cunha B.A. Rapid plasmid DNA isolation from mucoid gram-negative bacteria // J. Clin. Microbiol. 1992. — V. 30, № 11. — P. 2859−2863.
  102. Duncle L.M., Sippel J.C. Rapid microprocedure for extraction of plasmid DNA from Staphylococcus aureus // J. Infec. Dis. 1984. — V. 149. — P. 921−923.
  103. Dyer D.W., Iamdolo J.J. Rapid isolation of DNA from Staphylococcus aureus //- ^ v'1. V *
  104. Appl. Environ. Microbiol. 1983. — V. 46. — P. 283−285.
  105. T. // Plasmid. 1978. — P. 584.
  106. Firth N., Ridgway K.P., Byrne M.E. et al. Analysis of a trasfer region from the staphylc: occal cojugative plasmid pSK41.// Gene. 1993. — Vol.22. — P. 13−25.
  107. Grady F., Lambert H. P., Finch R. G. Antibiotic and chemotherapy: antiinfective agents and their use in therapy. Seventh edition. Churchill — Livingstone — New York, 1997.-987 p.
  108. Hacker J., Blum 0. G., Mbhidorfer I., Tscliape H. Pathogenicy islands of virulent bacteria: structure, function and impact on microbial evolution //Mol. Microbiol. -1997.- V.23.-P.1089−1097.
  109. Halle E., Grimm H. Chinolonrezistenz in der klinischen Praxis: Fortsh. Antimikrob. Antineoplast. Chemother. 1998. — 16, 1. — S. 13−19.
  110. Hardy K. G. Plasmid. A practical approah. Washington DC: IRL Press Oxford, — 1990.-P.5−12, 90−92.
  111. Health L. S., Gary L. S., H.E.Health. A Simple and Generally Applicable Procedure for Releasing DNA from Bacterial Cells // Appl. Environ. Microbiol. -1986.- May.-P. 1138−1140.
  112. Health L. S., Gary L. S., H.E.Health. A Simple and Generally Applicable Procedure for Releasing DNA from Bacterial Cells // Appl. Environ. Microbiol. -1986.- May.-P.l 138−1140.
  113. S., Vapnek D. // Plasmid. 1985. — P.17−30.
  114. Kado C., Liu T. Rapid procedure for detection and isolation of large and small Plasmids // Bacteriol. 1981. — V.145. — P. 1365−1373.
  115. Klein R. D., Seising E., Wells R. D. A rapid microscale technique for isolation of recombinant plasmid DNA suitable for restriction enzyme analis // J. Clin. Microbiol. 1980. -№ 3. -P.88−91.
  116. Kloos W. E. Systematic and the natural history of staphylococcy // J. Of Appl. Bacter. -1990. № 8. — P.225−375.
  117. Kluytmans J., Mouton J.W., Maat A.P. et al. Surveillance of postoperative infections in thoracic surgery // J. Hosp. Infect. 1994.- V.27., № 2. — P. 139−147.
  118. KollefM.H. Epidemiology and risk factors for nosocomial pneumonia//Clinics in Chest Medicine. 1999. — V. 120, № 3. — P. 653−670.
  119. Lyon B.R., May J.W., Skurray P.A. Analysis of plasmids in nosocomial strain of multiple-antibiotic-resistant Staphylococcus aureus // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 1983. — V. 23. — P. 817−826.
  120. Ma M.Y., Goldstein E.Y., Friedman M.H. et al. Resistance of gram-negative bacille as related to hospital use of antimicrobial agents // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 1983. — V. 24., № 3. — P. 347−352.
  121. Marcellino M.T., Iona E., Farinelli S. et al. Plasmids as epidemiologic markers in nosocomial gram-negative bacilli: experience in an intensive care unit // Drugs Exp.Clin. Res. 1992. — V.18, № 4. — P.121−128.
  122. Marchese A., Schito G.C. Evolution of antibiotic resistance in gram-positive pathogens // J. chemother. 2000. — V. 12, № 6. — P.459−462.
  123. Meinhardt F., Schaffrath R., Larsen M. Microbial linear plasmids // Appl. Microbiol. Biotechnol. 1997. — Vol. 47. — P.329−336.
  124. NeelyJ.L. Staphylococcus aureus: a continuing problem// W.V.Med. J. 1994. -Vol.90., № 6.-P.238−241.
  125. Nikiforov V.V., Aistov I.A., Fedorova L.S. An improved method for isolation of total bacterial DNA // Roumanian Biotechnological Letters. 1999. — V. 4, № 5. — P. 431−438.
  126. R.P., Murphy E., Gryczan T. J., Bason E., Edelman I. // Plasmid. 1979. -V.2.-P. 109.
  127. Pena C., Pujol M., Ardanay C. et al. Epidemiology and successeful control of large outbreak due to Klebsiella pneumonie producing extended-spectrum ?-lactamases. // Ibid. 1998. — V.2. — P.53−58.
  128. Ramos J., Duque E., Ramos-Gonzalez M. Survival in soils of an herbicide-resistant Pseudomonas putida strain bearing a recombinant TOL plasmid. // Appl. Environ. Microbiol. 1991. — Vol. 57. — P.260−266.
  129. Rappuoli R. New Vaccines // Molecular basis of bacterial infection. 1998.1. P. 147.
  130. Refsahl K., Anderson B. M. Coagulase-negative staphylococci: problem bacteria in hospital. Identification and resistance status // Nord. Med. 1991. — V.106. -P.228−231.
  131. Rosendal K., Jessen O., Bulow et al. Reduction of Multiresistant Staphylococci in Danish Hospital, 1967−1974 // Staphylococci and Staphylococcus disease.- Stuttgart, New York, 1975.-P. 1027−1032.
  132. Rosendal K., Jessen O., Faber V. Et al. Frequency, phagotypes and antibiotic resistance of Staphylococcus aureus isolated from blood cultures in Danmark 19 751 981 // Scand J. Infect. Dis. 1983. — Suppl. 41. -P. 19−29.
  133. Rodrigues L., Guenara G. Inducible tellurium resistance and the Pac B character as traits for the identification of plasmids Inc H 12 in Serratia marcescens // Biomed. Lett. -1992. V.185. -P.71−72.
  134. Stewart G. J., Carlson C.A., Ingraharn J.L. Evidence for an active role of donor cells in natural transformations of Pseudomonas stutzen // J. Bacteriol. 1983. — V. 156. -P.30−35.
  135. Swartz M.N. Hospital-acquired infections: diseases with increasingly limited therapies//Proc. Nat. Acad. Sei. 1994.-V. 91, № 7.-P. 2420−2427.
  136. Takahashi S., Nagano G. Rapid Procedure for isolation of Plasmid DNA and Application to Epidemiological analysis // J. Clinical Microbiology. 1984. -№ 5. -P. 608−613.
  137. Tend R.H.K., Kenneth J., Sharon S. E. coli resistance to ampicillin/sulbactam // Chemotherapy. 1992. — V.6. — P.399−404.
  138. Tomson C. J. Trimetoprim and brodimoprim resistance of gram-positive and gram-negative bacteria // J. Chemother. 1993. — V. 5, № 6. — P. 458 — 464.
  139. Townsend D.E., Ashdown N. Green L.C., Grubb W.B. Analysis of plasmids mediating gentamicin resistance in methicillin-resistant Staphylococcus aureus. // J. Antimicrob. Chemother. 1984. — V.13. — P. 347−352.
  140. Townsend D.E., Ashdown N. Momoh M., Grubb W.B. Distribution of plasmid-borne resistance to nucleic acid binding compounds in methicillin-resistant Staphylococcus aureus. // J. Antimicrob. Chemother. 1985. -V.l. — P. 417−434.
  141. Townsend D.E., Bolton S., Ashdown N., Grubb W.B. Transfer of plasmid-borne aminoglycoside resistance determinants in staphylococci. // J. Med. Microbiol. -1985.-V. 20.-P. 169−185.
  142. Williams J.D. Antibiotic resistance in hospital pathogens-acquisition or spread? // Int. J. antimicrob. Agents. 2000. — V. l8, № 3. — P.295−298.
  143. Российским агентством по патентам и товарным. шакам на основании Патентного закона Российской Федерации, введенного в действие 14 октября 1992 года, выдано настоящее свидетельство на полезную модель
  144. КЮВЕТА ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ1. Обладагель (ли):
  145. Саратовский пау1по-исслвдоватвлъскн? институт травматологии и ортопедии МЗ (РФпо заявке № 2 001 131 454, дата поступления: 21.11.20 011. Приоршет от 21.11.20 011. Авюр (ы):см. па оооротв I
  146. Свидетельство действует на всей территории Российской Федерации в течение 5 лет с 21 ноября 2001 г. при условии своевременной уплаты пошлины за поддержание свидетельства в силе
  147. Зарегистрирован в Государственном реестре полезных моделей Российской Федерацииг. Москва, 10 апреля 2002 г. сЖЗ). сЖу&ашхi9) RU an 22 478 аз) U151. 7 С 12 M 1/34
  148. Адрес для переписки: 410 002, г. Саратов, ул. Чернышевского, 148, Саратовский НИИ травматологии и ортопедии, для директора И.И. ЖадсноваI
  149. Руководитель лабораторногоотдела СарНИИТО с--——у «канд. мед. наук ^ ----«Г Гнетнев A.M.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!