Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Клонирование генов структурных белков вируса классической чумы свиней

Диссертация: Клонирование генов структурных белков вируса классической чумы свиней
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Наличие перекрестных реакций вызывает большие затруднения при дифференциации различных штаммов и изолятов вируса КЧС с помощью вирусологических и серологических методов. По данным серологических исследований ряд пестивирусных изолятов, выделенных от свиней, отличаются от вируса КЧС и, согласно предположениям (Van Oirschot JT., 1983; Wensvoort G., 1988; Paton D.J., 1992; 1994), происходят… Читать ещё >

Клонирование генов структурных белков вируса классической чумы свиней (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
  • 1. ВВЕДЕНИЕ
  • 2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 2. 1. Общая характеристика пестивирусов
    • 2. 2. Структура генома пестивирусов
    • 2. 3. Пестивирусные белки
    • 2. 4. Эпитопное картирование структурных бежов
    • 2. 5. Филогенетический анализ пестивирусов
    • 2. 6. Молекулярно-биологические штоды диагностики пести '-я < ' л.'ЛТ^'-}вирусных инфекций
    • 2. 7. Рекомбинантные вакцины против КЧС

1.1. Актуальность работы. Классическая чума свиней — инфекционная болезнь, регистрируемая в различных регионах нашей страны и за рубежом, наносит серьезный экономический ущерб промышленному свиноводству. Широкое распространение болезни, высокая контагиозность и наличие многочисленных факторов, способствующих передаче возбудителя в условиях развитого свиноводства, создают постоянную угрозу возникновения новых вспышек КЧС и обуславливают необходимость проведения профилактических мероприятий, включающих и поголовную вакцинацию.

Вместе с тем, систематическое применение живых вакцин, как основной меры контроля КЧС, способствуют эволюции вируса и возникновению подострых, хронических и других атипичных форм течения болезни, которые вызваются ослабленными вариантами вируса (Куриннов В.В., 1994; Liess В., 1988).

Наличие перекрестных реакций вызывает большие затруднения при дифференциации различных штаммов и изолятов вируса КЧС с помощью вирусологических и серологических методов. По данным серологических исследований ряд пестивирусных изолятов, выделенных от свиней, отличаются от вируса КЧС и, согласно предположениям (Van Oirschot JT., 1983; Wensvoort G., 1988; Paton D.J., 1992; 1994), происходят от вирусов диареи КРС или пограничной болезни овец, поэтому подобные изоляты называют «ВДКРС-подобными» или «ВПБО-подобными» (Becher Р., 1995). Кроме того, имеются сообщения о том, что некоторые штаммы ВДКРС вызывают заболевание не только у КРС, но и у овец, коз, оленей, жирафов. Вирус пограничной болезни овец поражает также коз и свиней (Carlsson U., 1991; Vilchek S., 1997). Сравнительные исследования генома и антигенных б свойств пестивирусов жвачных позволили разделить их на три группы: «истинные» ВПБО, ВДКРС-I и ВДКРС-П (Becher Р., 1994; Paton, D.I., 1995).

Для контроля за распространением инфекции необходима ранняя диагностика, так как вирус КЧС способен за короткие сроки поражать значительное поголовье. Наиболее широко применяемыми методами диагностики КЧС в настоящее время являются методы МФА и ИФА, основанные на прямой идентификации вируса в культуре инфицированных клеток (Куриннов В.В., 1994; Лыска В. М., 1999). Новые возможности для диагностики КЧС открывает использование панели моноклональных антител (Paton D., 1995; Vassilev V., 1997).

Кроме серологических исследований в последние годы при диагностике вирусных болезней применяют выявление в исследуемых образцах специфических фрагментов нуклеиновых кислот. С этой целью интенсивно разрабатываются методы молекулярной гибридизации и ПЦР, позволяющие выявлять нуклеиновые кислоты в пробах, в которых вирус потерял инфекционные и антигенные свойства (Brock K.V., 1991; 1993; Fu L., 1998; Giangaspero M., 1997). В нашей стране и за рубежом данный метод успешно используется для сравнительного анализа геномов различных штаммов и полевых изолятов вируса КЧС, а также для эпизоотологического изучения пестивирусов (Безбородова C.B., 2000; Zaberezhny A.D., 1999).

Необходимость изучения структурно-функциональной организации генома и разработка специфичных методов идентификации и дифференциации пестивирусных изолятов обусловлена и тем фактором, что пестивирусы не являются строго хозяинспецифичными. Таким образом, важным моментом при разработке тест-систем на основе методов анализа 7 генома является изучение структурной организации генома возбудителя КЧС.

1.2. Цель работы. Основной целью данной работы явилось клонирование кДНК фрагментов генома вируса КЧС в плазмидном векторе и идентификация РНК вируса КЧС с помощью ПЦР.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

— получить банк генов, кодирующих структурные белки вируса КЧС и изучить возможность их экспрессии в составе эукариотического вектора;

— сконструировать ДНК-зонды для обнаружения РНК вируса КЧС с помощью метода молекулярной гибридизации;

— определить праймеры для избирательной амплификации различных участков генома вируса КЧС, пригодных для идентификации РНК вируса КЧС с помощью ПЦР.

1.3. Научная новизна и теоретическое значение:

— в результате молекулярного клонирования создан и изучен с использованием методов молекулярной гибридизации и рестрикционного анализа банк рекомбинантных плазмид, содержащих кДНК фрагменты генома вируса КЧС (штамм «ЛК-К»). Показана способность экспрессии гена §-р55 вируса в составе рекомбинантного вируса осповакцины;

— показано, что с помощью рестрикционного анализа ПЦР продукта, комплементарного участку гена бежа р125, возможна дифференциация вакцинных штаммов («ЛК-ВНИИВВиМ», «ЛК-К») от вирулентных штаммов и полевых изолятов вируса КЧС.

1,4. Практическая значимость и реализация результатов исследований. Полученные в ходе работы рекомбинантные плазмиды, содержащие гены структурных белков вирусного генома, могут использоваться для изучения структуры и функции генов, кодирующих белки вируса КЧС, а также для 8 поиска видоспецифических нуклеотидных последовательностей при разработке гибридизационных зондов. И^чены в сравнительном аспекте чувствительность и специфичность методов молекулярной гибридизации и ПЦР при выявлении РНК вакцинных штаммов и вирулентных изолятов вируса КЧС.

На основании экспериментальных данных предложен способ дифференциации вакцинных штаммов («ЛК-ВНИИВВиМ», «ЛК-К») от вирулентных штаммов вируса КЧС с помощью рестрикционного анализа ПЦР продукта, комплементарного участку гена бежа р125.

1.6. Положения, выносимые на защиту: результаты получения банка рекомбинатных плазмид и идентификации клонов, содержащих кДНК фрагменты структурных генов вируса КЧС, позволяющие изучить экспрессию генов и сконструировать ДНК-зонды;

— результаты выявления РНК вируса КЧС с использованием праймеров, комплементарных участку гена бежа р125, позволяющих провести дифференциацию вакцинных штаммов («ЛК-ВНИИВВиМ», «ЛК-К») от вирулентных штаммов и полевых изолятов вируса КЧС с помощью рестрикционного анализа ПЦР продуктов.

1.6. Апробация и публикация результатов. Материалы исследований доложены и обсуждены на заседаниях ученого совета ВНИИВВиМ в 1996, 1997 ггопубликованы в в журнале «Вестник Россельхозакадемии» (ТЛ, 1999), в материалах научно-практических конференциий: «Инфекционные болезни молодняка сельскохозяйственных животных» (Москва, 19%), «Научные основы технологии промышленного производства ветеринарных биологических препаратов» (Щежово, 1996) — «Актуальные проблемы биотехнологии в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии» (Москва, 1996) — «Профилактика и меры борьбы с инфек9 ционными болезнями молодняка КРС и свиней» (Новосибирск, 1996), «Диагностика, профилактика и меры борьбы с особо опасными и экзотическими болезнями животных» (Покров, 1998). По материалам диссертации опубликовано 7 печатных работ.

Исследования по диссертационной работе выполнены в 1995;2000 г. г. в лабораториях Биофизики и Диагностики ВНИИВВиМ в соответствии с утвержденными плановыми заданиями НИР Российской академии сельскохозяйственных наук по темам 01.03.G2.M. «Разработать и усовершенствовать средства и методы дифференциальной диагностики вирусных болезней: крупного рогатого скота (чума КРС, эпизоотическая геморрагическая болезнь оленей, блютанг, вирусная диарея, лейкоз, болезнь Ибараки, болезнь Акабане) — свиней (классическая чума свиней, африканская чума свиней, болезнь Тешена) — бешенства животных, пограничной болезни овец и бактериальных болезней животных (сибирская язва, КПП КРС)».

В выполнении отдельных разделов работы принимали участие научные сотрудники лабораторий Биофизики и Диагностики ВНИИВВиМ — к.б.н., ст.н.с. Селянинов Ю. О., к.в.н., ст.н.с. Куриннов В. В., к.б.н., ст.н.с. Перзашкевич B.C., к.б.н., ст.н.с. Власова Н. Н., к.б.н., ст.н.с. Кривонос Г. И., к.б.н., н.с. Кадетов В. В. Всем сотрудникам, помогавшим в выполнении работы, автор выражает искреннюю признательность.

6. ВЫВОДЫ.

1. Методом молекулярного клонирования получены 6 рекомбинантных плазмид на основе PTZ18R, содержащих фрагменты кДНК генов структурных белков штамма «JIK-K» вируса КЧС, размерами от 500 до 4000 п.о.

2. При изучении экспрессии кДНК копии транслируемой области гена структурного гликопротеина gp55 в составе рекомбинатного вируса осповакцины (штамм «ЛИВП») установлено, что в клетках CV-I, зараженных рекомбинантным вирусом, синтезируются специфические антитела к вирусу КЧС, а у иммунизированных серонегативных кроликов индуцируется синтез вируснейтрализующих антител в титрах 1:16—1:32.

3. Использование в реакции дот-гибридизации радиоактивномеченных ДНК-зондов из рекомбинантной плазмиды, содержащей ген гликопротеина gp55 и олигонуклеотидов, комплементарных фрагменту гена gp55, при температуре гибридизации 65 °C, позволяет обнаружить РНК вируса КЧС в пробах патологического материала и зараженных культур клеток при инфекционной активности вируса 100 010 000 БОЕ50/см3.

4. Праймеры, комплементарные нетранслируемой области генома (5'-NCR) вируса КЧС, при оптимальных условиях проведения ПЦР пригодны для идентификации РНК вакцинных штаммов и полевых изолятов вируса КЧС в пробах патматериала и зараженных культур клеток при инфекционной активности вируса 10 — 100 БОЕзо/см3.

5. Рестрикция ПЦР продукта участка генома, кодирующего неструктурный белок р125 вируса КЧС, содержащего уникальные сайты для рестриктаз Kpnl, Avail позволяет провести дифференциацию вакцинных штаммов от вирулентных штаммов и полевых изолятов вируса КЧС.

Показать весь текст

Список литературы

  1. C.B. Усовершенствование генетических методов лабораторной диагностики КЧС классической чумы свиней // Дисс.. канд. биол. наук. Владимир, 2000. — 95с.
  2. А.И., Проскрякова О. Ф., Горбань С. Г. и др. Идентификация альфавирусов с помощью кДНК-зондов, комплементарных 3'-концу вирусного генома // Вопр. вирусол. -1992. № 2. — С. 113−116.
  3. И.Ф., Куриннов В. В., Яшин А. Т. и др. Особенности обнаружения и идентификация вируса КЧС из экспертизного материала // Вопр. вет. вирус., микробиол. и эпизоотол.: Тез. докл. научн. конфер. Покров, 1983. — С. 97−100.
  4. И.Ф., Хухоров И. Ю., Куриннов В. В. и др. Совершенствование лабораторной диагностики КЧС // Ветеринария. -1990,-№ 4.-С. 28−29.
  5. Д.В., Золотарев Ф. Н. Метод конкурентной точечной гибридизации для генотипирования вирусов гриппа, А // Вопр. вирусол. 1993- № 5. — С. 198−201.
  6. Е.В., Сатина Т. А. Применение ПЦР в диагностике инфекционных заболеваний животных. Владимир, 1995.
  7. Г. Х., Юсупов Р. Х., Барсков В. Г. Диагностика КЧС методом ИФА /У «КЧС неотложные проблемы науки и практики»: Мат. научно-практической конференции, Покров, 1994. — С.62−63.106
  8. В.В. Эпизоотические, клинические и диагностические исследования при КЧС Я Докл. РВСХН. 1999. — N1. -С. 42−45.
  9. В.В. Эпизоотические проблемы, клиническое проявление и диагностичека КЧС ////' Мат. научно-практической конференции ВНИИВВиМ «КЧС неотложные проблемы науки и практики». — 1994. — С.50−54.
  10. В.Ю. // Дисс. канд. вет. наук. Покров, 2000. — с.
  11. В.М. Разработка и усовершенствование иммунологических методов диагностики КЧС // Дисс. канд. биол. наук. Покров. — 1999.
  12. Т., Фрич Р., Сэмбрук Д. Молекулярное клонирование. М: Мир, 1984. — 480 с.
  13. М.А. Разработка методов молекулярной гибридизации и полимеразной цепной реакции для идентификации вируса бешенснетва// Дисс. канд. биол. наук. Покров. -1998 — 128 с.
  14. Е.Г. К дифференциальной диагностике КЧС /У Мат. научно-практической конференции ВНИИВВиМ «КЧС неотложные проблемы науки и практики». -1994. — С.66.
  15. В.В., Трухина A.F., Шаманин В. А. и др. Бочкова Н.Г., Фролова Т. В. Дезоксиолигонуклеотидные зонды, дифференцирующие антигенные и патогенетические варианты вируса клещевого энцефалита. // Вопр. вирусол. 1992. — № 1. — С. 53−56.
  16. В.И. Обнаружение ВКЧС методом флюоресцирующих антител // Ветеринария. -1984. № 1. — С. 27−29.107
  17. В.И., Пузырев А. Т., Донченко А.С, и др. Способ выявления вируса КЧС: Пат. 2 120 994, Россия- Опубл. 27.10.98.
  18. О.В. Пестивирусы// Вопр. вирусол. 1997. -NI. — С.5−10
  19. В.Н., Белоусова Р. В., Фомина Н. В. Диагностика вирусных болезней животных. М.: Агропромиздат, 1991. — 9−16 с.
  20. В.Н., Самуйленко Б. В., Соловьев Б. В. Вирусные болезни животных // М. ВНИТИБП. 1998. — 111−135 с.
  21. В.И., Рудобельский Э. В., Калинина Т. А., Кантутис Г. С. Репродукция ВКЧС в организме сельскохозяйственных животных // Вопр. вет. вирусол., микроб., эпизоотол.: Мат. науч. конф. ВНИИВВиМ.-Покров.- 1992.-4.1.-С.118−119.
  22. Annual Reports of Oie Reference laboratories and Collaborating Centres Office International des Epizooties. 1996, 1997.
  23. Baker J.C. BVDV: a review // J. Am. Vet. Med. Assoc. 1987. — V.190. -p. 1449−1458.
  24. Baule C., van Vimren M., Lowings J., Belak S. Genetic heterogeneity of BVDV isolated in Southern Africa // Virus Res. 1998. — V.52. — № 2. — P. 205−220.
  25. Bazan J.F., Fletterick R. J. Detection of a trypsin-like serine protease domain in flaviviruses and pestiviruses // Virology. 1989. — V.171. — P. 637−639.
  26. Becher P., Konig M., Paton D.J., Thiel H.-J. Further characterization of border disease virus isolates: evidence for the presence of more than three species within the genus pesti vims // Virology. -1995. -V. 209. P. 200 209.108
  27. Becher P., Orlich M., Shannon A., et al. Phylogenetic analysis of pestiviruses from domestic and wild ruminants// J. Gen. Virol. 1997. -V.78, N6. — P. 1357−1366.
  28. Becher P, Orlich M., Thiel H.-J. Complete genomic sequence of border disease virus, a pestiviruses from sheep// J.Virol. 1998. — V.72, № 6. — P. 5165−5173.
  29. Becher P., Shannon A.D., Tautz N., Thiel H.-J. Molecular chara-cteri-zation of border disease virus, a pestivirus from sheep // Virology. 1994. -V. 198. P. 542−551.
  30. Beck E., Strohmaier K. Sybtyping of European foot-and-mouth disease virus strains by the nucleotide sequence determination // J. Virol. 1987. -V61.- P. 1621−1629.
  31. Behrens S.-E., Grassman C.W., Thiel H.-J., Meyers G., Tautz N. Characterization of an autonomous subgenomic pestiviruses RNA replicon // J.Virol. 1998. — V. 72, N 3. — P. 2364−2372.
  32. Belak S., Ballagi-Pordany A. Application of the PCR in veterinary diagnostic virology // Vet. Res. Com. 1993a. — V.17. — P.55−72.
  33. Belak S., Ballagi-Pordany A. BVDV infection: rapid diagnosis by the PCR //Arch. Virol. 1991.-N3. — P. 181−190.
  34. Belak S., Ballagi-Pordany A. Experiences on the application of the PCR in a diagnostic laboratory // Mol. Cell. Probes. 1993. — V.7. — P. 241−248.
  35. Berry E.S., Lewis T.L., Ridpath J.R., e.a. Genomic comparison of ruminant pestiviruses // Proceeding of the Second Symposium on ruminant Pestiviruses, Annecy. 1992.
  36. BezborodovS.V., Drygin V.V., Gusev A.A. Genetic features of CSFV in Russia // X-th Internal. Congress of Virology. 9−13 august 1999, Sydney, Australia, 1999.-p.329.109
  37. Bjorklund H.V., Stadejek T., Vilcek S., Belak S. Molecular characterization of the 3'NCR of CSFV vaccine strains // Virus Genes. 1998, — V. 16. — P. 307−312.
  38. Bolin S., Moenning V., Kelso Gourley N.E., Ridpath J. Monoclonal antibodies mith neutralizing activity segregate isolates of BVDV into groups // Arch Virol- 1988. V. 99. — P. 117−123.
  39. Boye M., Kamstrup S., Dalsgaard K. Specific sequence amplification of BVDV and HCV and sequencing of BVDV nucleic acid // Vet. Microbiol. -1991.-V.29.-P.1−13.
  40. Brigati D.J., Myerson D, Leary J.J., e.a. Detection of viral genomes in cutured cells and paraffin-embedded tissue sections using biotin-labeled hybridization probes // Virology. 1993 — V. 126. — P. 32−50.
  41. Brock K.V. Detection of persistent BVDV infections by DNA hybridization and PGR assay ii Arch. Virol. 1991. -V. 3. — P. 199−208.
  42. Brock K.V., Ridpath J.F., Deng R. Comparative hybridization and nucleotide-sequence information from 2 noncytopathic isolates of BVDV // Vet. Microbiol. 1993. — V. 36, N1−2. — P. 69−82.
  43. Canal C.W., Hotzel I., Dealmeida L.L., e.a. Differentiation of CSFV from ruminant pestivirases by RT-PCR // Vet. Microbiol. 1996. -V. 48, N3−4.- P. 373−379.
  44. Carbray E.A., Ericson G.f., Metz C.N. Diagnosis of hog cholera // Prev. Vet. Med.-1984.-N2.-P. 103−108.
  45. Carbray E.A. Diagnostic procedures // Classical swine fever and related viral infections. Boston, 1988. — P. 99−114.
  46. Carlsson U. Border disease in sheep caused by transmission of virus from cattle persistently infected with BVDV // Vet Rec. 1991. — V. 128. — P. 145−147.
  47. Chambers T.J., hahn C.S., Galler R., Rice C.M. Flavivirus genome organization, expression, and replication // Annu. rev. Microbiol. -1990. V. 44.-P. 649−688.110
  48. . P., Sacchi N. 1987. Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction // Anal. Biochem. V. 162. — P. 156−159.
  49. Coiijn E.O., Bloemraad M., Wensvoort G. An improved ELISA for the detection of serum antibodies directed against CSFV it Vet.Microbiol. -1997. V.59, N1. — P. 15−25.
  50. Collet M.S. Molecular genetics of pestiviruses // Comp. Immun. Microbiol. Infect. Dis. -1992. V. 15. — P. 145−154.
  51. Collett M.S., Anderson D.K., Retzel E. Comparison of the pestivirus BVDV with members of the flaviviridae.// J. Gen. Virol. 1988. — V. 69. -P. 2637−2643.
  52. Collett M.S., Larson R., Belzer S.K., Retzel E. Proteins encoded by BVDV: the genonic organization of a pestivirus if Virology. 1988. — V. 165. — P. 200−208.
  53. Collett M.S., Larson R., Gold C., e.a. Molecular cloning and nucleotide sequence of the pestivirus BVDV // Virology. 1988. — V. 165. — P. 191 199.
  54. Collett M.S., Wiskerchen M.A., Welniak E., Belzer S.K. BVDV genomic organization. // Arch. Virol. -1991. V.3. — P. 19−27.
  55. Dahle J., Liess B., Frey H.R. Neutralizing antibody development following sequential inoculation of pigs with strains of BVDV and HCV // J. Vet. Med. Ser. B. 1987. — V.34, N 10. — P. 729−739.
  56. Darbyshire J.H. A serological relationship between swine fever and mucosal disease of cattle /7 Vet. Rec. 1960. — V.72, — P. 331.
  57. Demoerlooze L., Desport M., Renard A. The coding region for the 54-kDa protein of several pestiviruses lacks host insertions but reveals a «Zinc Finger-like» domain // Virology. 1990. — V.177. — P. 812−815.
  58. Deng R., Brock K.V. Molecular cloning and nucleotide sequencing of a pestiviruses genome, nonytopathic bovine viral diarrhea virus strain SD-1 // Virology. 1992.-V.191.- P. 867−879.
  59. Despoil M., Collins M.E., Brownlie J. Detection of BVDV RNA by in-situ hybridization with digoxigenin-labeled riboprobes // Intervirilogy. -1994.-V. 37, N5.-P. 269−276.
  60. Diaz de Arce H., Nuner J.L., Ganges L. An RT-PCR assey for the spesific detection of CSFV in clinical samples // Vet. Res. 1998. — V. 29. — P. 431 440.
  61. Donis R.O., Corapi W., Dubovi E.J. BVDV protein and tlieir antygenic analyses // Arch. Virol. 1991. — V. 3. — P. 29−40.
  62. Donis R.O., Corapi W., Dubovi E.J. Neutralizing monoclonal antibodies to BVDV bind to the 56 K to 58 K glicoprotein // J Gen Virol. 1988. — V. 69. -P. 1549−1554.
  63. Easton L.A., Vilcek S., Nettleton P.F. Evaluation of a one tube RT-PCR for the detection of ruminant pestiviruses // J. Vir. Met. -1994. V. 50, N 1−3. -P. 343−348.
  64. Edwards S., Moennig V., Wensvoort G. The development of an international reference panel of monoclonal antibodies for the differentiation of HCV from other pestivimse ?1 Vet. Microbiol.- 1991. N29, — P. 101 108.
  65. Edwards S., Sands J.J. Antigenic comparisons of HCV isolates from Europe, America and Asia using monoclonal antibodies /7 Dtsch. tierarztl. Wchr. -1990. Bd 23. — P.79−81.
  66. Edwards S., Sands J.J., Harkness J.W. The application of monoclonal antibody panels to characterize pestiviruses isolates from ruminants in Great Britain it Arch. Virol. 1988. — V. 102. — P. 197−206.
  67. Emanuel J.R. Simple and efficient system for synthesis of non-radioactive nucleic acid hybridization probes using PCR // Nucleic Acids Res. 1991. -V. 19. — P.2790.112
  68. Entrican G., Dand A., Nettleton P. A double monoclonal antibody ELISA for detecting pestivirus antigen in the blood of viremic cattle and sheep //' Vet. Microbiol. — 1995. — V. 43, N 1. — P. 65−74.
  69. Enzmann P.J. Molecular biology of the virus // Martinus Nijhoff Puplishing, Boston Dordrecht Lancaster. 1988. — P.76.
  70. Enzmann P.J., Rehberg H. The structural components of HCV // Z Naturforsch. -1977. P.456−458.
  71. Ferrari M. A tissue culture vaccine with lapinized shinese (LC) strain of HCV // Compar. Immund. Microbiol, and Infect. Diseases. 1992. — V. 15, N3.-P. 221−228.
  72. Finley D., Bartel B., Varshavsky A. The tails of ubiquitin precursors are ribosomal proteins whose fusion to ubiquitin facilitates ribosome biogenesis // Nature. 1989. — V.338. — P. 394−401.
  73. Finley D., Qzkaynak E., Varshavsky A. The yeast polyubiquitin gene is essential for resistance to high temperatures, starvation and other stresses // Cell. 1987. — V.48. — 1035−1046.
  74. Fleming K.A., Evans M., Ryley K.C., e.a. Optimization of non-isotopic in situ hybridization oil formalin-fixed, paraffin-embedded material using digoxigenin-labeled probes and transgenic tissues // J. Pathol. 1992. -V.167. — 9−17.
  75. Fu L. s Zhang C., Wang N., et al. Wuhan daxue xuebao. Ziran kexue ban // J. Wuhan Univ. Natur. Sci. Ed. 1998. — V.44, N 4. — P. 509−512.
  76. Giangaspero M., Harasawa R., Verhulst A. Genotypic analysis of the 5'-NCR of a pestiviruses strain isilated from human leucocytes // J. Microbiol. Immunol. -1997. V. 41. — P. 829−34.
  77. Gorbalenya A. E., Donchenco A.P., KooninV, Blinov V.M. N terminal domains of putative helicases of flavi- and pestiviruses may be serine proteases // Nucl. Acids Res. — 1989A. — V.17. — P. 3889−3897.
  78. Gorbalenya A. E., KooninV., Donchenco A.P., Blinov V.M. Two related superfamilies of putative helicases involved in replication, recombination, 113repair and expression of DNA and RNA genomes // Nucl. Acids Res, -1989. -V.17.-P. 4713−4729.
  79. Gruber A.D., GTeiserwilke J.M., Haas L., e.a. Detection of BVDV-RNA in formalin-fixed, paraffin-embedded brain-tissue by nested PCR // J. Virol. Met. 1993. — V.43, N 3, P. 309−320.
  80. Gruber A.D., Hewicker-Trautwein M., Liess B., Trautwein G. Brain malformations in ovine fetuses associated with the cytopathogenie biotipe of BVDV // J. Vet. Med. 1995. — V. 42. — P. 443−447.
  81. Harasawa R. Adventitious pestivirus RNA in live virus-vaccines against bovine and swine diseases // Vaccine. 1995. — V. 13, N 1. — P. 100−103.
  82. Harasawa R. Phylogenetic analysis of pestiviruses based on the 5'-NCR // Acta Virol. -1996. V. 40, № 1. — P. 49- 54.
  83. Harasawa R. Tomiyama T. Evidence of pestivirus RNA in human virus -vaccines // J. Clinical Microbiol. 1994. — V. 32, N 6. — P. 1604−1605.
  84. Harding M., Lutzewallace C., Prudhomme I., e.a. RT-PCR assay for detection of HCV if J. Clin. Microbiol. 1994 — V. 32, N 10. — P. 26 002 602.
  85. Hertig C., Pauli U., Zanoni R., Peterhans E. Detection of BVDV using the PCR /7 Vet. Microbiol. 1991. — V. 26. — P.65−76.
  86. Hertig C, Stalder H., Peterhans E. Genetic-heterogeneity within the coding regions of E-? and Ns3 in strains of BVDV // Gene. V. 153, N 2. -P. 191−195.
  87. Hishiyama M., Saiton A., Takagi M. e. a. Comparison of the entire nucleotide and deduced amino acid sequence of the attenuated hog cholera114vaccine strain GPE and the wild-type parental strain ALD // Arch, Virol, ¦ 1995. -V. 140, N8. P. 1385−1391.
  88. Hofler H. Principles of in situ hybridization .// Oxford University Press. Oxford, UK. 1990. — P. 15−30.
  89. Hofmann M., Bossy S. Classical swine fever in 1993 in Switzerland: molecular epidemiologic characterization of the virus isolate // Schweiz. Arch. Tierheilkd. 1998. — V. 140, N 9. — P. 365−70.
  90. Hofmann M.A., Brechtbuhl K., Stauber N. Rapid characterisation of new pestivirus strains by direct sequencing of PCR-amplified cDNA from the 5' lioncoding region fl Arch. Virol. -1994. V. 139, N 1−2. — P. 217−229.
  91. Hooft van Iddekinge B.J.L., Wamel van J.L., Gennip van V. B., Moorman R.J.M. Application of the PCR to the detection of BVDV infections in cattle //Vet Microbiol. -1992.-V. 30. P. 21−34.
  92. Horner G.W., Tham K.M., Orr D. e. a. Comparison of an atigen capture enzyme-linked assay with RT-PCR and cell-culture immunoperoxidase tests for the diagnosis of ruminant pestivirus infections // Vet. Microbiol. 1995. — V. 43, N 1. — P. 75−84.
  93. Horzinek M.C. Pestiviruses taxonomic perspectives // Arch.Virol. -1991. — V.3. — P. 1−5.
  94. Horzinek M.C. Non-arthropod-bome Togaviruses // Academic Press, London / New York / Toronto / Sydney / San Francisco. 1981.
  95. Horzinek M.C., von Berlo M.F. The pestiviruses: where do they belong? .// Ann. Rech. Vet. 1987. — V. 18, N 2. — P. 115−119.
  96. Hulst M.M., Westra D.F., Wensvoort G., Moormann R. Glycoprotein E2 of HCV in insect cells protects swine from hog cholera // J. Virol. 1993. — V. 67. — P. 5435−5442.
  97. Jensen J., Aiken I, Schultz R.D. Detection of BVDV genome in leukocytes from persistently infected cattle by RNA-cDNA hybridization // Can.J. Vet. Res. 1990, — V, 54. — P. 256−259,115
  98. Kassimi L.B., Gonzague M., Boutrouille A., Cruciere C. Expression and characterization of part of HCV nonstructural proteins // J. Vet. Med. -1996, — V, 43, N3.-P. 167−177.
  99. Kassimi L.B., Gonzague M., Ermel G. e.a. Partial sequencing of HCV Alfort strain genome and its comparison with other pestivirus strains // Vet. Res. V. 26, N 4. — P. 300−309.
  100. Karasawa R. Comparative analysis of the 5'non-coding region of pestiviruses RNA detected from live viruses vaccines // J. Vet. Med. Sci. -1994. V. 56, N 5. — P. 961−964.
  101. Katayama Kazuhiko, Kurihara Chie, fukushi Shuetsu et al Characterization of the HCV 5'-terminus // Virus Genes. 1995. — V. 10, N 2. ¦ P. 185−187.
  102. Katz J.B., Ridpath J.F., Bolin S.R. Presumptive diagnostic differentiation of HCV from BVDV and BDV by using a cDNA nested-amplification approach H J. Clin. Microbiol. 1993. — V. 31, N 3. — P. 565 568.
  103. Kuno G., Chang G.-J., Tsuchiya K.R., e.a. Phylogeny of the genus Flavivirus//J. Virol. 1998. — V.72, N 1. — P.73−83.
  104. Laemmli U.K. Nature. 1970. — V. 227. — P. 680.
  105. Laude H. Improved method for the purtification of HCV grown in tissue culture// Arch. Virol. 1977. — V.54. — P. 41−51.
  106. Laude H. HCV: arts and facts // Ann Rech Vet. 1987. — V.18. — P. 127−138.
  107. Liess B. Classical swine fever and related viral infections //Martinus Nijhoff Publishing. Boston. — 1988.
  108. Liess B., Roder B., Eife K. Et al. Untersuchungen uber die Evropaiche Schweinepest, 5 ermittlung inapparaten unifizierter Schweine in den Ferkelerreungerbestanden in drei Ortschaften Nordwestdeutschlands It
  109. Berliner und Mimchener Tierartzlishe Wochenchrift 88, Heft 20,21, 1975. P. 397−408.
  110. Liu S.T., Li S.N., Wang D.C., e.a. Rapid detection of HCV in tissues by thePCR // J. Virol. Methods 1991. — V. 35, N2. — P. 227−236.
  111. Lopez O. J., Osorio F.A., Bonis R.O. Rapid detection of B VDV by PCR // J. Clin. Microbiol. 1991. — V. 29. — P. 578−582.
  112. Lowings P., Ibata G., Needham J., Paton D. CSFV diversity and evolution//J. Gen. Virol. 1996. — V. 77. — P. 1311−1321.
  113. Lowings J.P., Paton D.J. A PCR approach to the molecular study of pestiviruses // Proceedings of the Second Symposium on ruminant pestiviruses. 1992.
  114. Lowings J.P., Paton D.J., Sands J.J., e.a. Classical swine fever genetic detection and analysis of differences between virus isolates // J. Gen. Virol. -1994. — V. 75, N 12.- P. 3461−3468.
  115. Lowiy O. H, Rosebrough N. J, Fan* A. L, Randall R. J- J. Biol. Chem. -1951. -V. 193. -P. 265.
  116. Mendez E, Ruggli N, Collet M.S., Rice C.M. InfectiousBVDV strain NADL RNA from stable cDNA clones: a cellular insert determines NS3 production and viral cytopathogenicity // J.Virol. — 1998. — V.72, N6.- P. 4737−4745.
  117. Mengeling M.S., Packer K.A. Patogenesis of cronic hog cholera. Host response // Am. J. Vet. Res. 1969. — V. 30. — P. 409−417.
  118. Meyers G, Rumenapf T., Thiel H. J. Molecular cloning and nucleotide sequence of the genome of HCV /7 Virology. 1989. — V. 171. — P. 555−567.
  119. Meyers G, Rumenapf T., Thiel T.-J. Ubiguitin in a togavirus // Nature. 1989.-P. 341−491.
  120. Meyers G, Stark R, Tautz N., e.a. Molecular biology of Pestiviruses and comparisson with HCV if Viral Hepatititis and Liver Disease. Tokyo ets, 1994.-P. 106−110.117
  121. Meyers G., Taute N., Dubovi E.J., Thiel H.-J. Viral cvtopathogenicity correlated with integration of ubiquitin-coding sequences /7 Virology.1991.-V. 180.-P. 602−616.
  122. Meyers G., Tautz N., Stark R., e.a. Rearrangement of viral sequences in cytopathogenic pestiviruses// Virology. -1992. V. 191. — P. 368−386.
  123. Mexico D.F. Entermedades exoticas de la Comision Mexico -Americano para prevencios de la Fiebra attora. 1988. — P. 64−79.
  124. Moennig V. Characteristics of tlie virus. // Classical swine fever and related infections. Martinus Nijhoff Puplishing Boston Dordrecht Lancaster. 1988. — P. 55−80.
  125. Moennig-V. Pestiviruses: a review // Vet. Microbiol. -1990. V. 23. — P. -35−54.
  126. Moennig V., Plagemann G.W. The Pestiviruses // Adv. in Vir. Res.1992. V. 41. — P.53−98.
  127. Moormann R.J.M., Hulst M.M. HCV: identification and characterization of the viral RNA and virus-specific RNA synthesized in infected swine kidney cells // Virus Research. 1988. — -V. 11. — P. 281−291.
  128. Moormann R.J.M., Vangennip H.G.P., Miedema G.K.W., e.a. Infectious RNA transcribed from an Engineered Full- Length cDNA template of the genome of a pestivirus // J. Virol. 1996. — V. 70, N 2. — P. 763−770.
  129. Moonnann R.J.M., Warmerdam R.A.M., van der Meer B., e.a. Molecular cloning and nucleotide sequence of HCV strain Brescia and mapping of the genomig region encoding envelope protein Ei // Virology. -1990.-V. 177.-P. 184−198.
  130. Muyldermans G, Caij A., Desmet A., e.a. Characterization of structural and nonstructural proteins of HCV by means of monoclonal-antibodies // Arch.Virol. 1993. — V. 131, N 3−4. — P. 405−417.118
  131. Muyldermans G., Sangabriel M.C., Caij A., e.a. PCR -mediated cloning and in-vitro translation of the genes-coding for the structural proteins of HCV// Arch. Virol. 1993.- V. 132, N 3−4. — P. 429−435.
  132. Paton D.J., Carlsson U., Lowings J.P., e.a. Identification of herd-specific BVDV isolates from infected cattle and sheep // Vet. Microbiol. -1995. V. 43, N 4. — P- 283−294.
  133. Paton D.J., Done S.H.J. Congenital infections of pigs with ruminant-type pestiviruses// Comp. Pathol. -1994. V. 111. — P. 151−163.
  134. Paton D.J., Lowings J.P., Barrett A.D.T. Epitope mapping of the gp53 envelope protein of BVDV // Virology. 1992. — V.190. — P. 763−772.
  135. Paton D.J., Sands J.J., Lowings J.P., e.a. A proposed division of the pestivirus genus using monoclonal-antibodies, supported by cross-neutralization assays and genetic sequencing // Vet. Res. 1995.- V. 26, N 2. — P. 92−109.
  136. Paton D.J., Simpson V., Done S.H. Infection of pigs and cattle with BVDV on a single farm in England // Vet. Rec. 1992.-V. 131. — P. 185 188.
  137. Pellerin C., Heerk J.D., Lecomte J., Tijssen P. Identification of a new group of BVDV strains associated with severe outbreaks and high mortalities //J. Virol. -1994. V.203. — P.260−268.
  138. Pellerin C., Moir S., Lecomte J., Tijssen P. Comparison of the p125 coding region of BVDV /7 Vet. Microbiol. 1995. — V. 45, N 1. — P. 45−57.
  139. Pejsak Z., Kotacz J. Zastosowanie methody ELISA w badaniach przegladowych w kierunku pomoru klasvcznego swin // Med. Vet. -1991. -V. 47, N9.-P.400−401.
  140. Purchio A.F., Larson R., Torborg L.L., Collett M.S. Cell free translation of BVDV // J. Virol. -1984. V.52. — P. 973- 975.
  141. Qi F., Ridpath J.F., Lewis T., e.a. Analyses of the BVDV genome for possible celluar insertions // Virology. 1992. — V. 189. — P. 285−292.
  142. Rechsteiner M. Ubiquitin-metiated pathways for intracelluar proteolysis // Annu Rev. Cell Biol. -1987. -V.3. P. 1−30.
  143. Redmann K.L., Rechsteiner M. Identification of the long ubiquitin extension as ribosomal protein S27a. Nature. — 1989. — V.338. — P. 438 440.
  144. Renard A., Dina D., Martial J. A, Camplete nucleotide sequence of BVDV genome and its fragment, useful for making antigenic proteins useful in therapy and diagnosis. European Patent Application. No. 208 672. -1987.
  145. Renard A., Guiot C., Schmetz D., e.a. Molecular cloning of BVDV sequences//DNA. 1985. — V. 4. — P.429−438.
  146. Ridpath J.F., Bolin S.R. Comparision of the complete genomic sequence of the BDV, BD-31 to other pestiviruses // Virus Res, 1997. -V.50, N2. -P.237−243.
  147. Ridpath J.F., Bolin S.R. The genomic sequence of a virulent BVDV from the type 2 genotype: Detection of a large genomic insertion in a noncytopathic BVDV if Virology. -1995. V.212, N 1. — P.39−46.120
  148. Ridpath J. F, Bolin S. R, Dubovi E.J. Segregation of BVDV into genotypes /'/' Virology. 1994. — V. 205. — P. 66−74.
  149. Roehe P.M., Woodward M.J. PCR amplification of segments of pestivirus genomes // Arch. Virol. -1991. V. 3. — P. 231−238.
  150. Roehe P.M., Woodward M. J, Edwards S. Characterisation of p20 gene sequences irom border disease-like pestivirus isolated from pigs // Vet. Microbiol. 1992. -V.33.-P.231−238.
  151. Ruggli N, Moser C, Mitchell D, e.a. Baculovirus expression and affinity purification of protein E2 of CSFV strain Alfort-187 // Vir. Genes. — 1995.- V. 10, N2.-P. 115−126.
  152. Rumenapf T. Klonierung, Sequenzierung und expression des genoms des virus der klassischen schweinepest // Thesis, University of Giessen, Giessen, FRG. 1990.
  153. Rumenapf T, Meyers G, Stark R, Thiel H.-J. HCV characterization of specific antiserum and identification of cDNA clones // Virology. — 1989. -V. 171.-P. 18−27.
  154. Rumenapf T, Meyers G., Stark R, Thiel H.-J. Molecular characterization of HCV // Arch. Virol. 1991. — V. 3. — P. 7−18.
  155. Rummennapf T., Stark R., Heimann M., Thiel H.-J. N-tenninal protease of pestiviruses: Identification of putative catalytic residues by site- directed mutagenesis .// J.Virol. 1998, — V.72, N 3. — P. 2544−2547.
  156. Rumenapf T, Stark R, Meyers G, Thiel H.-J. Structural proteins of HCV expressed by vaccinia virus: Further caracterization and induction of protective immunity il J. Virol. 1991. -V. 65. — P. 589−597.121
  157. Rumenapf T., Unger G., Strauss J.H., Thiel H.-H, Processing of the envelope glycoproteins of pestiviruses //' J. Virol. V. 67. — 1993. — N 6. — P. 3288−3294.
  158. Saiki R.K., Scharf S., Fallona F., e.a. Enzymatic amplification of b^ globin genomic sequencee and restriction site analysis for diagnosis of sickle cell anemia // Science. 1985. — V.230. — P. 1350−1354.
  159. Sandvik T., Paton D.J., Lowings P.J. Detection and identification of ruminant and porcine pestiviruses by nested amplification of 5'-NCR. // J. Virol. Methods.- 1997. V.64, N1. — P.43−56.
  160. Schelp C., Danhle J., Krietsch T., e.a. Differentiation of pestiviruses by a HCV-specific genetic probe if Arch. Virol. 1991. — V, 3. — P. 209−215.
  161. Schroeder B.A., Balassu-Chan T.C. Specific sequence amplification of BVDV nucleic acid /7 Arch. Virol. 1990. — V. 11. — P. 239−246.
  162. Sciu J.-S., Chang M.-H., Liu S.-T., e.a. Molecular cloning and nucleotide sequence determination of three envelope genes of CSFV Taiwan isolate p97 // Vims. Res. -1996. -V. 41, N 2. P. 173−178.
  163. Snowdown W.A., French E.L. The bovine mucosal disease-swine fever vims complex in pigs // Austral. Vet. J. 1968. — V. 44.- P. 179−184.
  164. StadejekT., PejsakZ. Zastosowanie zeakcji polimeryzacji fancuehowej u wykrywaniu zakazen wirusami z rodraju Pestivirus // Med, Wef. 1994. -V, 50, N3. — P. 122−124,
  165. Stadejek T., Vilcek S., Lowings J.P., et al. Genetic heterogeneity of CSFV in Central Europe H Virus Res. 1998. — V.52, N 2. — P. 195−204.
  166. Stadejek T., Warg J., Ridpath. Comparative sequence analysis of the 5'-noncoding region of CSFV strains from Europe, Asia and Amarica (Brif report)/7 Arch. Virol. 1996, — V.141.-P. 771−777.
  167. Stark R., Meyers G., Rumenapf T., Thiel H.-J. Processing of pestivirus polvprotein cleavage site between autoprotease and nucleocapsid protein of CSFV // J. Virol. — 1993. — V. 67, N 12. — P. 7088−7095.122.
  168. Stark R, Rumenapf T., Meyers G., Thiel H.-J. Genomic localization of HCV glycoproteins // Virology. -1990. -174. 286−289.
  169. Sullivan D.G., Akkina R.K. A nested PGR assay to differentiate pestiviruses // Vir. Res. -1995. V. 38, N 2−3. — P. 231−239.
  170. Tajima M., Kirisawa R., Taguchi M., e.a. Attempt to discriminate between BVDV strains using PCR // J. Vet. Med. — 1995. — V. 42, N 5. -P. 257−265.
  171. Terpstra C" Wensvoort G. Natural infections of pigs with BVDV associated with sings resembling swine fever // Res. Vet. Sc. 1988. — V.45, N 2. — P. 137−142.
  172. Thiel H.-J., Stark R., Weiland E., e.a. HCV: molecular composition of virions from a pestivirus ft J. Virol. 1991, — V. 65. — P. 4705−4712.
  173. Van Oirschot JT. Effect of infections with swine fever virus an imune functions // Vet. Microbiol. -1983. V. 8. — P. 321−361.
  174. Van Oirshot J.T., Terpstra C. HCV // Virus infections of Porcines.
  175. Amsterdam, 1989. P. 113−130.
  176. VassilevV., Collett M., Donis R. Authenticand chimeric full-length genomic cDNA clones of BVDV that yield infectious transcripts // J.Virol. -1997. 71, N1. — P.471−478.
  177. Vanrijn P.A. A preliminary map of epitopes on envelope gp Ei of HCV strain Brescia // Vet. Microbiol. -1992. V.33, N1. — P. 221−30.
  178. Vanrijn P.A., Bossers A., Terpstra C., e.a. Deletion subunit vaccine against classical swine fever virus and accompanying diagnostic test based on envelope glycoprotein Ej // III-kongress vet. virusol. Immunobiol. vir. infections. Tessis. — 1994.
  179. Vanrijn P.A., Miedema G.K.W., Wensvoort G., e.a. Antigenic structure of envelope gp Ei of HCV/./ J. Virol. 1994B. — V. 68, N6. — P. 3934−3942.123
  180. Vanrijn P.A., Vangennip H.G.P., Demeijer E.J., Mooniiann R.J.M. Epitope mapping of envelope gpEj of HCV strain Brescia // J. Gen. Virol. — 1993. — V. 74, N 10. — P. 2053−2060.
  181. Van Zijl M., Wensvoort G., E. de Kluyver, e.a. Live attenuated Pseudorabies virus expressing envelope gp Ei of HCV protects swine against both Pseudorabies and hog cholera // J. Virol. 1991. -V.65. — P. 2761−2765.
  182. Vilcek S. Development of PCR assays for detection of EHV-1, Brsv and Pestiviruses //Vet. Med. 1994. — V. 39, N11. — P. 687−700.
  183. Vilcek S., Bjorklund H.V., Horner G.W., e.a. Genetic typing of pestiviruses from New Zealand // N.Z.VetJ. 1998. — V. 46, N 1. — P. 35−37.
  184. Vilcek S. Belak S. Genetic identification of pestivirus strain frijters as a BDV from pigs /7 J.Virol. Met. 1996. — V. 60, N 1. — P. 103−108.
  185. Vilcek S., Belak S. Discrimination between vaccine strains and european field isolates of CSFV // Intern. FEMS. Symp. Kosice. — 1996. — P.17.
  186. Vilcek S., Belak S. Organization and diversity of the 3'-NCR of CSFV genome /7 Virus Genes. 1997. — V. 15, N2, — P. 181 -186.
  187. Vilcek S., Herring A.J., Herring J.A., e.a. Pestiviruses isolated from pigs, cattle and sheep can be allocated into at least 3 genogroups using PCR and restriction-endonuclease analysis // Arch. Virol. 1994. — V. 136, N3−4. — P. 309−323.
  188. Vilcek S., Nettleton P.F., Paton D.J., Belak S. Molecular characterization of ovine pestiviruses // J. Gen. Virol. 1997. — V.78, N 4. -P. 725−735.
  189. Vilcek S, Paton D.J. Application of genetic methods to styde the relationship between classical swine fever outbreaks // Res. Vet. Sci. 1998. -V. 65, Nl.-P.89−90.
  190. Vilcek S. s Stadejek T., Ballagipordany A., e.a. Genetic-variability of CSFV // Vir. Res. 1996. — V. 43, N 2. — P. 137−147.124
  191. Vilcek S., Stadejek T., Takacsova I., e.a. Genetic analysis of CSFV isolates from a small geografic area // Dtsch. Tierarztl. Wschr. 1997. -V.104, N1. — P.9−12.
  192. Von Heijne G. A new method for predicting signal sequence cleavage sites//Nucleic Acids Res. 1986. -V.14. — P.4683−4690.
  193. Vydelingum S., Tao T., Balazsi K., Hecker R. Comparison of a RT-PCR assay and virus isolation for the detection of CSFV // Rev. Sci. Tech. OIE 1998. — V. 17, N3. — P.674−681.
  194. Ward P., Misra V. Detection of BVDV using degenerate oligonucleotide primers and the PGR //Am. J. Vet. Res. -1991. V.52. — P. 1231−1236.
  195. Warrener P., Collett M.S. Pestivirus Ns3 (P8o) protein prossesses RNA helicase activity source // J. of Virol. -1995 V. 69, N 3. — P. 1720−1726.
  196. Weiland E., Alii R., Stark R., e.a. A second envelope gp mediates neutralization of a pestivirus, HCV .// J. Virol. 1992. — V.66. — P.3677−3682.
  197. Weiland E., Stark R., Haas B., e.a. Pestivirus glycoprotein which induces neutralizing antibodies forms part of a disulfide-linked heterodimer // J. Virol. -1990. V.64, N8. — P. 3563−3569.
  198. Wensvoort G. Topographical and functional mapping of epitopes on HCV with monoclonal antibodies // J. Gen. Virol. 1989. — V.70. — P.2865−2876.
  199. Wensvoort G., Bloemraad M., Terpstra C. An enzyme immunoassay employing monoclonal antibodies and specifically detecting antibodies to CSFV// Vet Microbiol. 1988. — V. 17. — P, 129−140.
  200. Wensvoort G., Boonstra J., Bodzinga B.G. Immunoaffinity purification and characterization of the envelope protein E} of HCV // J. Gen. Virol. -1990. -V.71. P. 531−540.125
  201. Wensvoort G., Terpstra C. BVDV infection in piglets born to sows vaccinated against swine fever with contaminated vaccine /7 Res. Vet. Sei. 1988. -V.45.~- P. 143−148.
  202. Wensvoort G., Terpstra C. Classicl swine fever. A changing clinical picture /7 Tijdschr. Diereneesk. 1985. — V. 110. — P.263−269.
  203. Wensvoort G., Terpstra C., Boonstra J., e.a. Production of monoclonal antibodies against swine fever viruses and their use in laboratory diagnosis // Vet. Microbiol. 1986. — V.12, N2. — P.101−1O8.
  204. Wirz B., Tratschin J.D., Muller H.K., Mitchell D.B. Detection of HCV and differentiation from other pestiviruses by PCR // J. Clin. Microbiol. ~ 1993.-V. 31, N5.-P. 1148−1154.
  205. Wiskerchen M.A., Beizer S.K., Collett M.S. Pestivirus gene expression: the first protein of the BVDV large open reading frame, p20, posseses proteolye activity // J. Virol. 1991. — V.65. — P. 4508−4514.
  206. Wiskerchen M.A., Collett M.S. Pestivirus gene expression: protein p8Q of BVDV is proteinase involved in polyprotein processing /7 Virology. -1991. V.184. — P.341−350.
  207. Youing S.H. The use of supplemental tests in the diagnosis and eradication of hog cholera// J. Am. Vet. Med. Assoc. 1970. — V. 157. — P. 18 855−1859.
  208. Zhang C., Wang J., Huang Q. Molecular cloning and nucleotide sequence of the CSFV Shimen strain and the attenuated HCV lapinized Chinese strain /7 XI Inter. Cong. Virol. -Sydney. 1999. — P. 340.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!