Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Изучение действия излучений ультрафиолетовой и красной областей спектра на иммунокомпетентные клетки

ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Показано, что главной. внутриклеточной мишенью при летальном и мутагенном действии ультрафиолетового д&лучения служит ДНК. Еще в 1928 году было выяснено, что спектр действия гибели бактерий соответствует спектру поглощения нуклеиновых кислот (максимум поглощения ДНК равен 254 нм). Для клеток млекопитающих эти спектры несколько отличаются, но Наблюдаемые различия могут быть объяснены эффектами… Читать ещё >

Изучение действия излучений ультрафиолетовой и красной областей спектра на иммунокомпетентные клетки (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • I. Введение
  • II. Обзор литературы
    • II. 1. Биологические эффекты и механизмы действия ультрафиолетового излучения на клетки
    • 11. 2. Клеточные эффекты облучения красным светом
    • 11. 3. Взаимодействие ответов клеток на облучение светом разных разных спектральных диапазонов
    • 11. 4. Роль внутриклеточного pH в регуляции клеточного метаболизма
    • 11. 5. Структура и функция нейтрофилов
    • 11. 6. Роль активных метаболитов кислорода в регуляции клеточных функций
  • III. Материалы и методы исследования
    • III. 1. Объекты исследования.&bdquo-,&bdquo-.&bdquo-.,>.¦
  • III. 1.1. Получение лимфоцитов селезенки vi- vV'
  • III. l.2. Выделение перитонеальных фагоцитов мышей
  • III. 1.3. Культивирование клеток
    • 111. 2. Методы исследований.,
      • 111. 2. 1. Микрофлуориметрический анализ клеток с использованием флуоресцентных зондов
      • 111. 2. 2. Радиометрические определение включения в лимфоциты селезенки мышей 3Н-тими^ина
      • 111. 2. 3. Спектрофотометрическое определение накопления в клетках формазана в результате восстановления 3-(4,5,-диметилтиазолил-2-ил)-2,5-дифенилтетразолий бромида
  • Ш. 2.4.Непрямая иммунопероксидазная реакция на клетках (ELISA — метод)
    • 111. 2. 5. Определение фагоцитарной активности перитонеальных макрофагов
    • 111. 2. 6. Определение содержания в клетках АТФ
    • 111. 3. Экспериментальные воздействия
    • 111. 3. 1. Облучение клеток некогерентным излучением
    • 111. 3. 2. Облучение клеток когерентным излучением
    • 111. 4. Статистическая обработка и представление полученных данных
  • IV. Результаты и обсуждений
  • ГУЛ. Повреждающие и модифицирующие эффекты УФ-излучения на клетки животных
  • 1. У.2. Влияние облучения красным светом на внутриклеточный рН и параметры функциональной активности перитонеальных фагоцитов мыши
  • 1. У.З. Защитный эффект красного света от повреждающего действия на клетки ультрафиолетового излучения
  • ГУ.4. Перекись водорода как возможный посредник в реализации повреждающих и модифицирующих эффектов оптического излучения
  • V. Выводы
  • VI. Список сокращений

В последнее время все большее внимание исследователей привлекает к себе проблема механизмов ответных реакций неретинальных клеток животных на действие оптического излучения, которое, включая ультрафиолет, составляет основную часть излучения солнца, падающего на поверхность Земли. Обладающее наибольшей энергией ультрафиолетовое излучение (УФИ) даже в низких дозах вызывает негативные для клетки последствия. Прежде всего • это относится к коротко- (КУФ, менее 280 нм) и средневолновому (СУФ, 280(2®0)-320 нм) участкам УФ-спектра. В связи с возрастающим присутствием в достигающем/земной поверхности солнечном излучении именно этих спектральных диапазонов, имеющим место вследствие повреждения озонового слоя атмосферы, проблема его действия на клетки и организм представляет большой интерес для биологии и медицины. Механизмы деструктивного действия УФИ на клеточном уровне в широком диапазоне доз в основном изучены. В центре внимания исследователей в настоящее время находятся практические и теоретические вопросы УФ-индуцированных канцерогенеза, эритемы и повреждений сетчатки глаза, то есть негативные эффекты на уровне организма. Вместе с тем, ультрафиолет естественного и антропогенного происхождения активно применяется в медицине как при лечении заболеваний кожи, так и внутренних органов в методе аутотрансфузии облученной крови.

Knott, 1948). В последнем Случае в качестве воздействующего фактора используются.

• <�" главным образом именно КУФ и СУФ (Холмогоров и др., 1988). Известны и модифицирующие эффекты УфИ на клеточном уровне (Оболенская и др., 1988; Deoliveira et al, 1996).

Интерес к модифицирующим клеточным эффектам оптического излучения объясняется широким распространением терапевтических подходов в медицине, связанных с его применением для лечения трофических расстройств, дерматитов, незаживающих ран и т. д. Особенно часто в этих целях используется излучение красной и ближней инфракрасной областей спектра (600−900 нм), в частности, излучение He-Ne лазера (632.8 нм). Несмотря йа большое количество публикаций по этой проблеме (Каш, 1989) и наличие ряда интересных гипотез относительно механизмов клеточных и организменных эффектов красного света (Зубкова, 1978; Гамалей и др., 1988; Владимиров, Потапенко, 1989; Клебанов и др., 1998) остаются открытыми вопросы о первичных акцепторах этого излучения и способах реализации ответов на него.

В реализации модифицирующих клеточных эффектов как ультрафиолетового излучения, так и оптического излучения других длин волн могут участвовать системы мессенджерной регуляции (Schieven G.L., Ledbetter J.А., 1993), к числу которых относят и систему регуляции внутриклеточного рН (Busa, Nuccitelli, 1984). Сравнительно недавние исследования показывают, что изменения концентрации вторичных мессенджеров, вызванные УФ-облучением, способны обеспечить как запуск репарационных механизмов (Ganer et al, 1997), так и разщтие апоптоза (Gottlieb et al, 1996). Обсуждается также роль активных форм кислорода (АФК), образующихся при УФ-облучении (Зенков, Меньшикова, 1993; Zhang et al, 1997), в обеспечении как негативных последствий для клетки (повреждения мембран, белков и ДНК) (Shindo, Hashimoto, 1998), так и модификаций ее функции (Amano et al, 1998). В последнем случае определенное участие в обеспечении эффектов оптического излучения на клетки может принимать наиболее стабильная АФК — перекись в. одорода, регуляторная роль которой привлекает в настоящее время большое внимание исследователей (Гамалей, Клюбин, 1996).

Большой интерес представляет разрабатываемая российскими учеными (Фрайкин и др., 1995) проблема защитного эффекта облучения дрожжевых клеток красным светом от действия УФ-излучения, приводящего к отсроченной гибели клеток. Предполагается, что красный свет вызывает активацию репарационных механизмов ДНК, повреждающейся уже при сравнительно небольших дозах ультрафиолета. Неизвестно, однако, способно ли облучение красным Светом защищать клетки от повреждений их мембран, имеющим место при значительно более высоких дозах УФ-облучения и более коротких временах пострадиационной инкубации.

При анализе механизмов действия оптического излучения особый интерес представляют клетки, участвующие в обеспечении иммунного гомеостаза организма. К их числу относятся и клетки-фагоциты, обладающие высокой активностью и способностью быстро отвечать на внешние воздействия (Маянский Д.Н., Маянский А. Н., 1983).

Таким образом, несмотря на значительные успехи, достигнутые в последние годы проблема механизмов реализации клеточных эффектов оптического излучения еще далека от своего окончательного разрешения. При этом следует подчеркнуть, что помимо важного теоретического, она имеет и большое практическое значение.

II. Обзор литературы.

11.1. Биологические эффекты и механизмы действия ультрафиолетового излучения на клетки.

В настоящее время все больший интерес для медицины и биологии вызывает проблема увеличения присутствия ультрафиолетового излучения (УФИ) естественного и антропогенного происхождения в биосфере. История изучения этого вопроса насчитывает уже несколько десятков лет, Однако, он еще далек от своего окончательного разрешения. К настоящему времени выявлены основные механизмы действия дальнего УФИ на прокариотические клетки. Фотобиология же клеток млекопитающих и, в частности, в области ближнего УФИ значительно менее изучена.

Показано, что главной. внутриклеточной мишенью при летальном и мутагенном действии ультрафиолетового д&лучения служит ДНК. Еще в 1928 году было выяснено, что спектр действия гибели бактерий соответствует спектру поглощения нуклеиновых кислот (максимум поглощения ДНК равен 254 нм). Для клеток млекопитающих эти спектры несколько отличаются, но Наблюдаемые различия могут быть объяснены эффектами самоэкранировки, которые дЛд коротковолнового излучения более значительны у клеток млекопитающих, чем у 'бактериальных клеток (Сахаров, 1988). Наиболее распространенное фотоповреждение ДНК — образование пиримидиновых димеров. Могут также происходить фотогидратация пиримидиновых оснований, сшивки ДНК с белками, разрыв цепей ДНК. Характер. повреждений зависит от дозы и длины волны излучения, а также наличия сенсибилизаторов. Так, при облучении УФИ с длинами волн больше 310 нм димеры и разрывы ДНК. образуются косвенным путем с участием определенных сенсибилизаторов, поскольку" - длинноволновая граница ее поглощения лежит в области 300−310 нм (Фрайкин, 1908). Установлено, что процесс образования димеров осуществляется не по фотодинамическому механизму, а путем молекулярной фотосенсибилизации. В то ж£- время, разрывы ДНК образуются с участием свободных радикалов и синглетного кислорода. Показано, что НАДН обладает способностью к фотосенсибилизации образования in vitro однонитевых разрывов в двуцепочечной плазмидной ДНК под действием ближнего УФИ (320−400 нм) (Бурчуладзе и др., 1990). Отношение выхода димеров к выходу одноцепочечных разрывов в ДНК уменьшается с увеличением длины волны УФ-света. Так, при облучении светом с длиной волны 254 нм данное отношение равно 800, при 313 нм — 25, а при 365 нм — 1.7. Очевидно, что это сказьюается на относительном вкладе димеров и разрывов в длинноволновую УФ-инактивацию клеток (Фрайкин, 1988).

У клеток млекопитающих, способных к делению, одним из способов регуляции развития опухолей вследствие облучения ультрафиолетом является апоптоз. Так, облучение В-УФИ вызывало апоптоз у нескольких линий клеток лейкимии (Ueno Е., 1997), в то же время, индукция дифференциации этих клеток приводила к задержке в развитии апоптоза. Однако, апоптоз известен и для высокодифференцированных клеток, каковыми являются нейтрофилы (Frasch et al, 1998).

В липидных система^' ультрафиолетовое облучение активизирует протекание процессов перекисного окисления (Bateman, Gec, 1984). Показано, что большую чувствительность к фотоокислению проявляют ненасыщенные жирные кислоты, насыщенные же жирные кислоты практически не подвергаются фотоокислению. Фотоокислению легко подвергается также холестерин, значительный процент которого содержится в клеточных мембранах млекопитающих (Черницкий, Воробей, 1988). В пострадиационный период в облученных мембранах протекают процессы аутоокисления, инициируемые первичными фотопродуктами. Процессы аутоокисления идут гораздо медленнее фотоокисления, но за длительный темновой период могут приводить к значительному повреждению мембраны (Пеленицин и др., 1974). Темновое аутоокисление липидов в облученных мембранах может блокироваться низкими концентрациями антиоксидантов: ионола, а-токоферола, ß—каротина, аскорбиновой кислотой и др. (Рощупкин и др., 1988). На основании этого было выдвинуто предположение, что одной из причин стимуляции УФ-светом темнового фотоокисления липидов является фотолиз эндогенных антиоксидантов, прежде всего а-токоферола.

Много работ посвящецо изучению влияния УФИ на белки. Как правило, такое воздействие является инактивирующим. Показано, что при облучении растворов белков ультрафиолетовым светом наблюдается потеря ферментативной активности, изменение молекулярной массы, растворимости, спектров поглощения и других физических и химических характеристик: (Конев, Волотовский, 1979). Возможный механизм инактивации был установлен Гроссвейнером с сотрудниками (Grossweiner et al, 1976). Определяющей начальной фотохимической реакцией в механизме фотоинактивации всех изученных ферментов является ионизация остатков триптофана, тирозина и фенилаланина с образованием гидратированного электрона и последующими модификациями этих аминокислот (Pileni, 1976;' Saito, 1978). Ароматические аминокислоты поглощают ультрафиолет стах в области280 нм. Дальнейшие процессы специфичны для различных белков. Установлено, что это. свободнорадикальные процессы, могущие идти даже без участия кислорода. Результатом их протекания может быть частичная или полная фотодеструкция молекулы белка с образованием низкомолекулярных фрагментов СО и NH=CHR (Львов, Львова, 1988). Кроме того, захват электрона аминогруппами основных аминокислот лизина и аргайгйна приводит к дезаминированию остатков, а реакции гидратированного электрона-с серосодержащими аминокислотами цистином, цистеином приводят к образованию радикалов типа RS. При относительно сильном поглощении УФИ дисульфидными связями в некоторых белках имеет место прямой фотолиз этих связей (Baugher, Grossweiner,. 1978). При достаточной концентрации кислорода в системе ионизация ароматических ¿-кинокислот может приводить к образованию супероксид аниона Ог", либо попадание кванта ультрафиолета на ароматическое кольцо приводит к прямому переносу энергии на кислород с образованием синглетного кислорода ('Ог) без ионизации (Pileni et al, 1976; Холмогоров и др., 1988). Таким образом, поглощение остатками ароматических. Аминокислот коротковолнового ультрафиолета может щ приводить к сенсибилизации цепных реакций как с участием активных форм кислорода, так и без них, приводящих к Модификациям и деструкции клеточных молекул.

Описанные эффекты УФИ при действии его на клеточные белки в больших дозах приводят в конечном итоге к гибели клетки. Менее высокие дозы УФИ на всем диапазоне длин волн способны вызывать транскрипцию многих генов, что, как считают некоторые исследователи, обусловлено фосфорилированием белков-рецепторов клеточных факторов роста, что, в свою очередь, вызвано нарушением функции тирозиновых фосфотаз этих белков при облучении УФИ'-(Bender et al, 1997). Характер более отдаленного ответа клетки на облучение будет'-'зависеть от летальности повреждений ее ДНК, и, если повреждения незначительны, то можно ожидать пролиферативного ответа. В то же время, в клетках, как прокариотических, так и эукариотических, существуют механизмы запуска синтеза так называемых белков теплового шока при сильных стрессовых воздействиях, к числу которых относится и УФИ. Механизм запуска системы синтеза этих белков при действии УФИ пока не известен (Trautiger F. et al, 1996), но по всей видимости может вовлекать системы сигнальной трансдукции.

Интересные данные были получены при изучении действия УФИ (240−390 нм) в о дозах 0.015−0.3 Дж/см на один из важнейших компонентов антиоксидантной системы супероксидцисмутазу (АртюхЪв и др., 1992). Как оказалось, облучение приводит к фотоактивации фермента, наиболее выраженной при экстремальных для проявления активности супероксиддисмутазы значениях рН (меньше 6.0 или больше 10.0 ед. рН). л.

Максимальный эффект достигался при 0.15 Дж/см. Наблюдаемая фотоактивация супероксиддисмутазы обусловлена, как полагают, конформационными изменениями ее белковой глобулы.

При изучении продуктов облучения белков плазмы крови было установлено, что триптофан и гистидин способны после фотолиза давать соединения, обладающие антирадикальной активность^, в то время, как природные антиоксиданты, содержащиеся в плазме (прежде всего, аскорбиновая кислота) утрачивают антирадикальную активность (Удилова и др., 1997). .

Одной из основных мишеней для УФИ является клеточная мембрана. Облучение клеток в высоких дозах приводит к значительному увеличению проницаемости мембран для различных веществ, в том числе, и для красителей (эозина, трипанового синего, этидиум бромида), и их гиб|ли (Мопэоп ег а1, 1979). УФИ вызывает изменение ионной V проницаемости в различных, объектах: дрожжах, яйцах морского ежа, водорослях, простейших и др. (Владимиров, Потапенко, 1989). Изменение ионной проницаемости в эритроцитах человека сопровождается выходом из них К+ и входом № +, что приводит вследствие нарушения осмотического баланса к набуханию и лизису клеток (Рощупкин и др., 1988). Показано также" повышение при облучении пассивной проницаемости внутренней мембраны митохондрий для Н+, Ыа+ и К+, в результате чего происходит разобщение окислительного фосфорилирования. УФИ инактивирует мембранные ферменты митохондрий и эритроцитов. Анализ относительного вклада в повреждение мембран, вызванного УФИ, окисления липидов и инактивации белков показал, что действие больших доз облучения связано с перекисным окислением ненасыщенных жирных кислот биологических мембран. При действии же более низких доз больший вклад вносит денатурация белка (Владимиров, Потапенко, 1989). Показано также, что у разных субпопуляций одногои того же вида клеток (в частности, лимфоцитов) могут преобладать разные механизмы фотоповреждения мембран, зависящие и независящие от перекисного окисления липидов (Рощупкин и др., 1988). Важной особенностью перекисного фотоокисления ненасыщенных жирных кислот в биологических мембранах является зависимость его скорости от структурного состояния мембран. Показано Чзначительное влияние рН перекисное фотоокисление липидов в мембранах эритроцитов. Увеличение рН. от 5 до 9 приводит к интенсификации процесса в несколько раз. По мнению авторов, наблюдаемый эффект связан с изменением структурного состояния липидов мембрйн,. опосредованным изменением структуры белков при изменении рН. В то же время, значительное влияние температуры на процессы перекисного фотоокисления обусловлено ее влиянием непосредственно на состояние липидной части мембраны (Рогцупкин и др., 1988; Рощупкин и Мурина, 1993; Roshchupkin et al, 1978).

Способность ультрафиолета вызвать модификации клеточных мембран обуславливает известные эффекты его действия на уровне организма, в частности, такие явления, как эритему (Warin А., 1978) и терапевтические эффекты реинфузии облученной крови (Савельев и др., 1981; Knott, 1948).

Ультрафиолет, особенно коротковолновый, поглощаясь белками и нуклеиновыми кислотами, практически не проходит сквозь верхние слои кожи. При этом происходит модификация клеток иммунной системы в капиллярах и непосредственно в коже. Основную часть солнечного УФИ составляют Аи ВУФИ в диапазонах 320−400 нм и 280−320 нм, соответственно, большинство эффектов такого УФИ на уровне организма иммуносупрессивны. Это и ослабление аллергических контактных дерматитов, подавление замедленной. гиперчувствительности к антигенам, увеличение продолжительности жизни чужеродных клеток, увеличение риска развития опухолей (Roberts, 1995). Эти эффекты опосредованы действием ультрафиолета непосредственно на клетки кожи, что приводит к высвобождению цитокинов, интерлейкинов и факторов роста, модулирующих клетки иммунной системы. Так, при взаимодействии локально-продуцируемых при облучении В-УФИ цитокинов с представляющими антиген клетками происходит их миграция из верхних слоев кожи, что приводит к антиген-специфической толерантности (Ohnishi Т., 1993; Boonstra А., 1997). Установлено также, что развитие вириса ВИЧ усиливается в облученных клетках благодаря активации клеточного фактора траскрипции NF-каппа-В, которая происходит как в облученных клетках, так и при действии растворимых факторов, высвобождающихся при облучении, на необлученные клетки (Visenzi Е., 1994). у.

•у.

Облучение плотвы в .дозе 0.4 Дж/см приводило к уменьшению миграции фагоцитов, выделенных из почки, и способности их к окислительному взрыву через 1−2 суток после облучения. Однако, по прошествии 14 суток активность нейтрофилов и макрофагов восстанавливалась и даже превосходило норму (Salo et al, 1998). Возможность увеличения активности клеток, обеспечивающих природный неспецифический иммунитет (фагоциты) после облучения была также установлена в экспериментах по изучению влияния облучения В-УФИ мышей на развитие в организме бактерии Listeria monocytogenes. В то же время, облучение ультрафиолетом снижало иммунитет, приобретенный после предварительной иммунизации мышей (Kang I.C. et al, 1997).

Облучение непосредственно клеток иммунной системы, что имеет место в методе аутотрансфузии облученной крови, приводит к прямым фотохимическим реакциям мембранных липидов и белков. В этом методе применяется УФИ в дозах и интенсивностях, не ведущих к гибели клеток. Механизмы влияния на клетки терапевтических доз УФИ изучены далеко не так хорошо, как летальных. Это объясняется тем, что вызываемые ими эффекты весьма многоплановы и сложны и, в значительной степени, зависят от многих факторов (спектрального состава излучения, дозы, интенсивности и др.). На — сегодняшний день установлено, что при действии на выделенные из крови человека мононуклеары и эритроциты излучения различного спектрального состава в нелетальных дозах, близких к применяемым в терапии, внешний поверхностный слой клеток подвергается частичной деструкции, а его компоненты выходят в раствор (Оболецская и др., 1988). При исследовании функциональных последствий структурных изменений гликокаликса облученных клеток крови был установлен ряд фактов, указывающих на значительную активацию специализированных систем клеточной поверхности, обусловленную, вероятно, их обнажением и демаскированием. В частности, значительно возрастает фагоцитарная активность моноцитов и гранулоцитов (Оболенская и др., 1988). Способность УФИ (320−400 нм) в дозе 0.3*104 Дж/м2 повышать функциональную активность (люминолзависимую, активируемую хемотаксическим пептидом FMLP хемилюминесценцию) нейтрофилов человека была показана в работе (Bredberg, Forsgren, 1985). В то же время, облучение этих клеток в диапазоне 306−428-.нм в дозе 0.63−10.17 кДж/м2 приводило к снижению их фагоцитарной активности, сопровождающемуся потерей клетками специфических мембранных рецепторов, определяющих их иммунные характеристики (Вальтер и др., 1989). Изучение фотомодификации рецепторов поверхности лимфоцитов крови человека при их облучении УФИ в области 275−365 нм в нелетальных дозах (24−60 Дж/м2) показало, что в течение 60 мин после воздействия происходит возрастание их способности к образованию Еи ЕАСрозеток с эритроцитами барана. Повышение доз облучения до 96 180 Дж/м2 подавляло эту способность лимфоцитов. В этих же условиях происходила модификация выраженности группоспецифических антигенов эритроцитов системы ABO, v изучавшаяся в реакциях агглютинации с соответствующими изогемагглютининами (Холмогоров и др., 1988). Предполагается, что в основе наблюдаемых изменений иммунологических характеристик клеток крови лежат в основном процессы перекисного окисления липидов, изменяющие физико-химические свойства плазматических мембран. Кроме того, конформационные изменения белковых молекул мембраны, вызванные нарушением их третичной (гйшогда вторичной и первичной) структуры могут вести к появлению на мембране «новых» маркеров, рецепторов и антигенов, что повышает «спектр» возможных мишеней иммунной системы и способствует проявлению лечебного эффекта (Холмогоров и др., 1988).

Большое внимание уделяется в настоящее время изучению механизмов действия средневолнового УФИ (29−0(280)-320 нм), ответственного за значительную часть.

V i канцерогенных эффектов солнечного облучения. Показано, что облучение меланоцитов в этом диапазоне приводит к' задержке их пролиферации в фазе G1. Это обусловлено модификацией ряда процессор участвующих в протекании клеточного цикла (Barker et al, 1995; Medrano et al, 1995)-? Весьма интересные результаты получены при изучении комбинированного действия на клетки разных длин волн ультрафиолетового излучения. Так, на бактериях и дрожжах было показано (Фрайкин, 1988), что при этом могут наблюдаться разные типы синергических эффектов (летальные, фотореактивационные и фотозащитные).

Основные процессы, происходящие в клетке при действии средневолнового ультрафиолетового излучения представлены на Схеме 1.

Таким образом, если на сегодняшний день механизмы действия УФИ в высоких летальных дозах в достаточной степени понятны, то вопрос о действии на клетки животных низких доз УФ-излучения требует дальнейших углубленных исследований.

V. Выводы.

1) Показано, что облучение изолированных нейтрофилов средневолновым л ультрафиолетом в дозах, превышающих 2.1 Дж/см, приводит к увеличению содержания в.

V. популяции клеток с повреждейной плазматической мембраной. Максимум в спектре повреждающего действия УФИ на клетки наблюдается в области 280 нм. Эффект возрастает с повышением температуры и времени темновой инкубации клеток и снижается при уменьшении концентрации Ог в среде и действии антиоксидантов.

2) Обнаружено, что' УФ-излучение в дозах, не вызывающих повреждения клеточных мембран (0.2 — 2.1 Дж/см2), приводит к отсроченному во времени снижению выживаемости и пролиферативной активности клеток. Облучение в более низких дозах вызывает в короткие сроки после облучения увеличение эстеразной активности и рН внутриклеточного содержимого.:

3) Выявлены фазовые изменения внутриклеточного рН при действии УФ-излучения и красного света в. дозах от 0.02 до 12.7 Дж/см2, сопровождавшиеся сходными изменениями содержания в клетках АТФ, эстеразной и фагоцитарной активности.

5 .

4) Обнаружено, что повреждающее действие УФ-облучения на клетки снижается при одновременном облучении их красным и ближним инфракрасным светом с длиной волны около 700 нм и более. Защитное действие красного света оказывается менее выраженным при его применении до или после УФ-облучения клеток.

5) Показано, что введение во внеклеточный раствор Н2О2 в концентрации превышающей 25 мМ, приводит к возрастанию содержания в популяции нейтрофилов клеток с поврежденной мембраной.

6) Обнаружено, что введение в среду инкубации клеток перекиси водорода (Ю'МО" 10 М) вызывает зависящие от концентрации агента и времени инкубации фазовые изменения внутриклеточного рН.

7) Показано, что фазовые изменения внутриклеточного рН, имеющие место при действии на нейтрофилы Н2О2, а также УФ-излучения и красного света в низких дозах, исчезают при ингибировании Na/H-обменника клеток и действии каталазы (0.1 мг/мл).

VI. Список сокращений.

АТФаденозинтрифосфорная кислота ДНКдезоксирибонуклеиновая кислота.

ЕГТАэтиленгликоль-бис-(р-щиноэтил)-М, Н,]Ч', М'-тетраацетиловая кислота.

НСТнитросиний тетразолий.

ФДАфлуоресцеиндиацетаЩ.

УФИультрафиолетовое изучение цАМФциклический моноаДеяозинтрифосфат.

НМАгексаметиленамилорйД.

НЕРЕв- (Ы-[2-Гидроксиэтилпцперазин^'-[2-этансульфоновая кислота]).

Показать весь текст

Список литературы

  1. А.К., Пархоменко И. П., Соколова Т. Н. Исследование изменений клеточных мембран фибробластов китайского хомячка при лазерном и рентгеновском облучении с помощью флуоресцентного зонда.// Радиобиология, 1982, т. 22, С. 55−159.
  2. О.В., Бурлаков А. Б., Пащенко В. З., Слепцова J1.A., Тусов В. Б., Туровецкий
  3. B.Б. Исследование влияния лазерного излучения на раннее развитие вьюна.// Вестн. Моск. Ун-та. 1991. Сер.16,биол. N1. С.34−39.
  4. А.И., Максимов Г. В., Чатерджи, Ш., Туровецкий В. Б., Колье О. Р. Исследование транспорта Са2+ в миелиновых нервных волокнах при высоких экстраклеточных концентрациях калия. // Вестник Московского Университета, 1999, (в печати). :
  5. В.Г., Башарйна О. В., Филиппов Ф. А. Активация молекул супероксидцисмутазы под влиянием ультрафиолетового облучения.// Биофизика, 1992, Т. 37, Вып. 1, С. 13−16.
  6. A.M., Годин ШТ., Панков Е. Ф. Экзогенные нуклеиновые кислоты и восстановительные процессы.// М.: Медицина, 1974, 200 С.
  7. У.Я., Каримов М. Г., Краснощекова Е. Е. Лазеры в травматологии и ортопедии.//Казань, 1978,.104 с.
  8. Л.Ю., Трдатян И. Ю., Угарова H.H. Оптимизация биолюминесцентного метода определения микробной биомассы.// Прикл. биохим. и микробиол., 1991, т. 21, вып. 1,1. C. 134−140. Г
  9. Е.Б. Эффект сверхмалых доз. //Вестник Российской Академии Наук, 1994, T.64,N5, С. 425−431.
  10. Т.Г., Сидерис Э. Г., Фрайкин Г. Я. Сенсибилизированное НАДН образование однонитевых разрывов в плазмидной ДНК при действии ближнего УФ-излучения.// Биофизика, 1990, Т. 35, Вып. 5, С. 722−725.
  11. Ю.Вальтер Т., Риттер М., Гаст В-, Хауштайн У., Вальтер Г., Лысенко Е. П., Потапенко А. Я. Фагоцитарная активность гранулоцитов после УФ-облучения.// Биофизика, 1989, Т. 34, Вып. 6, С. 1001−1002.
  12. Ю.А., Потапенко А. Я. Физико-химические основы фотобиологических процессов.// М., Высшая школа, 1989,199с.
  13. Н.Воскресенская Н. П. Некоторые аспекты регуляторного действия синего света на высшие растения.// В кн. «Молекулярные механизмы биологического действия оптического излучения», М., Наука, 1988, С. 178−189.
  14. И.А., Каулин А. Б., Кирпичникова K.M. Применение диацетата флуоресцеина для исследования активации макрофагов.// Цитология, 1988, т. 30, № 12, с. 1426−1431.
  15. И.А., Каулин А. Б., Кирпичникова K.M., Вологина C.B. Участие ионов кальция в активации макрофагов пептидами биорегуляторами. // Цитология, 1989, т.31, № 9, с. 1098.
  16. И.А., Клюбин И. В. Перекись водорода как сигнальная молекула.// 1996, Цитология, т. 38, № 12, С. 1233−1247.
  17. Н.Ф., Шишко Е. Д., Яниш Р. В. Новые данные по фоточувствительности животной клетки и механизм лазерной биостимуляции.// ДАН СССР, 1983, т. 273, С. 224−227.
  18. Н.Ф., Шишко Е. Д., Яниш Р. В. Чувствительность неретинальных клеток животных и человека к видимому свету.// В кн. «Молекулярные механизмы действия оптического излучения», М., Наука, 1988, С. 189−198.
  19. Е.А., Азизова O.A., Парамонов Н. В., Владимиров Ю. А. Механизм фотореактивации супероксиддисмутазы светом гелий-неонового лазера.// ДАН СССР, 1988, т. 299, № 4, С. 995−1000.
  20. Е.А., Владимиров Ю. А., Парамонов Н. В., Азизова O.A. Красный свет гелий-неонового лазера реактивирует супероксиддисмутазу.// Бюллетень экспериментальной биологами медицины, 1989, № 3, С. 302−305.
  21. A.M. Микроспектрофлюорецентный анализ лимфоцитов при иммунном ответе.// Канд. дисс., М., 1985.
  22. Ca .in с помощью внешнего АТФ в кардиомиоцитах. // В кн.: Молек. мех-мы действия оптического излучения. М., Наука, 1988, с.77−82. 27.3убкова О.М. О механизме биологического действия He-Ne лазера.// Биол. науки, 1978, № 7, С. 30−37.
  23. Э.В., Поспелов М. Е., Страховская М. Г., Фрайкин Г. Я. Конкурентное действие ультрафиолетовых лучей разной длины волны на выживаемость Saccharomyces cerevisiae.// Микробиология, 1982, т. 51, С. 761−764.
  24. Ш. Г., Попова М. Ф. Влияние лучей гелий-неонового лазера на процесс пострадиационного восстановления в тканях скелетной мышцы.// Бюлл. Эксп. Биол. И мед., 1980, т. 9, С. 222−224-.
  25. Т.Й., Календо Г. С., Лобко В. В., Зависимость биологического действия низкоинтенсивного света от параметров излучения когерентности, дозы и длины волны.// Изв. АН СССР, Сер. Физ. 1983, т. 47, С. 2017−2022.
  26. Т.Й., Календо' Г.С., Лобко В. В., Пятибрат Л. В. Кинетика роста опухолевых клеток линии HeLa в стационарной фазе при их культивации под действием He-Ne лазера.// Экспериментальная онколосия, 1984, т. 6, вып. 4, С. 60−63.
  27. Т.Й., Пятибрат Л. В., Календо Г. С. Радиомодификация ультрафиолетом и видимым лазерным светом.//Радиобиология, 1987, т. 27, С. 804−809.
  28. Т.Й., Пятибрат Л. В., Календо Г. С. Влияние излучения He-Ne лазера наVвыживаемость -клеток HeL, a, подвергнутых действию ионизирующей радиации.// Радиоблиология, 1992, т. 32у"вып. 2, С. 202−206.
  29. Л.П., Грибова З. П., Азизов O.A. Электронный парамагнитный резонанс фотопроцессов биологических соединений.// М. Наука, 1973,704 с.
  30. Клебанов Г. И.,< Крейнина- М. В. Активация полиморфноядерных лейкоцитов крови больных ишемической болезнью сердца и инфарктом миокарда. // Из сборника Кислородные радикалы в химии, билогии и медицине, 1988, Рига, РМИ, с. 132−152.
  31. Клебанов Г. И.% Теселкин Ю. О., Бабенкова И. В., Башкуева Т. Ю., Модестова Т. М.,
  32. Л.С., Владимиров Ю. А. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения нафункциональный потенциал лейкоцитов.// Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 1997, т. 123, № 4,-С. 395−398.
  33. Г. И., Страшкевич И. А., Чичук Т. В., Модестова Т. М., Владимиров Ю. А. Влияние эндогенных фотосенсибилизаторов на лазер-индуцированный прайминг лейкоцитов крови.// Биологические мембраны, 1998, т. 15, № 3, С. 273−285.
  34. Ю.П., Данилов B.C., Каган В. Е., Ситковский М. В. Свободнорадикальное окисление липидов в биологических мембранах.// Изд-во МГУ, 1972, 88 с.
  35. C.B., Волотовский И. Д. Фотобиология: Учеб. пособие для ВУЗов, Минск, Изд-во Белар. Ун-та, 1979,383 С.-
  36. Р.Д., Адильгиреева Р. Х., Ефимов M.JI. Действие света гелий-неонового лазера на культуру фибробластов.// Вопр. стоматологии, Алма-Ата, 1980, вып. 2, С. 8084.
  37. В.Н. Лазеры в лечейии ран.// Саратов, 1980, 125с.
  38. A.A. Механизм образования и роль синглетного кислорода в фотобиологических процессах. // В кн.: Молек. мех-мы действия оптического излучения. М., Наука, 198&, с.23−41.
  39. A.C., Мостовщиков'.В.А., Хохлов И. В., Сердюченко Н. С. Терапевтическая эффективность низкоинтенсивного лазерного излучения.// Минск, Наука и техника, 1986,231 с. :
  40. A.A., Тейлор Дж.Х. .Ультрафиолетовые, видимые и инфракрасные лучи. // В кн. «Основы космической биологии и медицины», 1975, M Наука, т.2, с.59−77.
  41. Л.Л., Векслер-. A.M., Туровецкий В. Б. Пространственно-временная гетерогенность внутриклеточного pH как способ регуляции функционального состояния клетки.// Рукописи деп. в ВИНИТИ 25.03.87, № 2144-В87.
  42. K.M., Львова О. Ф. Фотодеструктивные реакции в белках.// В кн. «Молекулярные механизмы биологического действия оптического излучения», М., Наука, 1988, С. 4155.
  43. Л.Б., Розовская И. А. Внутриклеточный pH и адгезия клеток.// В кн. «Внутриклеточная сигнализация», М., «Наука», 1988, С. 157−158, 235 с.
  44. А.Н., Маянский Д. Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге. Новосибирск, Наука, Сиб. отд., 1989, 344с.
  45. А.Н., Маянский Д. Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге.// 1983, Наука, Новосибирск, 254 С.
  46. А.Б., Рощупкин Д. И., Владимиров Ю. А. О механизме фотогемолиза эритроцитов.// Физико-химические основы функционирования надмолекулярных структур клеток. М. Изд-вр МГУ, 1974, Ч. 2, С. 59−61.
  47. А. Основы иммунологии.//Москва, «Мир», 1991,387с.
  48. Д.И., Мурина М. А. Фотобиологические процессы в биомембранах при действии ультрафиолетового излучения на клетки, ткани и органы животных.// Биофизика, 1993, т. 38, вып. 6,1053−1068.
  49. B.C., Александрова Н. П., Петухов Е. Б. Коррекция гемореологических расстройств методом ультрафиолетового облучения крови.// Вестн. АМН СССР, 1981, № 10, С. 72−74.
  50. И.И. Сенсибилизированное фотоокисление белков и других веществ
  51. Возможное значение этих процессов в фотобиологии.// В кн. «Молекулярные механизмы биологического действия оптического излучения, М., „Наука“, 1988, С. 92 101,232 с.
  52. В.П., Галанкин В. Н. Ультраструктурный анализ взаимодействия стафилококков с моно- и полинуклеарными фагоцитами при нефлогенном и флогенном реагировании. // Бюллетень эксперим. биологии и медицины, 1998, том 125, № 3, с.343−347.
  53. В.Н. Действие дальнего УФ-излучения на клетки млекопитающих в культуре.// В кн. „Молекулярные механизмы биологического действия оптического излучения“.// М., Наука, 1988, С. 140−152.
  54. В.П. Кислород в живой клетке: добро и зло. // Соросовский образовательный журнал, 1996, № 3, с.4−10. ¦
  55. В.П., Возможная- роль активных форм кислорода в защите от вирусных инфекций. // Биохимия, 1998, том 63, вып.12, с.1691−1694.
  56. .И., Мостовников В. А., Рубинов А. Н., Хохлов И. В. Регулирование активности клеток человека, с помощью лазерного излучения.// ДАН СССР, 1977, т. 236, С. 1007−1011.
  57. А.Н. Фотоника молекул красителей и родственных органических соединений.// JL, Наука, 1967, 616 С.
  58. В.Б., Погосян С. И., Золотилин С. А., Мартин Карабайо М.А. Влияние излучения He-Ne лазера на функциональную активность и внутриклеточный pH перитонеальных фагоцитов мыши.// Биол. мембраны, 1992, т. 9, № 10−11, с. 1172−1174.
  59. В.Б., Породина Н. Б., Ерин А. Н., Молнар Е. М., Сухих Г. Т. Влияние пептидного экстракта . фетальных тканей мозга на внутриклеточный pH перитонеальных фагоцитов, мышей. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 1995, № 12, с.626−630.
  60. Н., Попов И.Н.,-Левин Г. И., Владимиров Ю. А. Антиоксидантные свойства облученной ультрафиолетом плазмы крови, изученные методом фотохемилюминесценции.//Биофизика, 1997, т. 42, вып. 1, Р. 187−190.
  61. H.A., Янева КС-'Экскреция ДНК лимфоцитами человека.// Успехи совр.
  62. Биологии, 1982, Т. 93, С. 171−182.
  63. Г. Я. Механизмы УФ-индуцированных деструктивных ифотомодифицирующих реакций у микроорганизмов.// В кн. „Молекулярные механизмы• .биологического действия оптического излучения“.//М., Наука, 1988, С. 154−164.
  64. Г. Я., Пиняскина’Е.В., Страховская М. Г. Новая фотоиндуцибельная защитная система в клетках Gandida. Guilliermondii при летальном действии средневолнового ультрафиолетового излучения.// Доклады Академии Наук, 1995, т. 343, № 2, С. 265−267.
  65. Г. Я., Страховская. М.Г., Иванова Э. В., Рубин А. Б. Активирующее действие длинноволнвого УФ-излучения на ферментативное превращение 5-окситиптофана в серотонин./ Биофизика, т. 34, вып. 6,1989, С. 933−937.
  66. В.Е., Крыленков- В.А., Османов М. А. Первичные фотопроцессы в крови и ее компонентах при действии оптического излучения.// В кн. „Молекулярные механизмы биологического действия оптического излучения“.// М., Наука, 1988, С. 164−177. Т
  67. Е.Е., Рябова Э.З.'^Инбык В. М. Защитное и лечебное действие экзогенной ДНК при облучении быстрыми нейтронами.// Киев, Наук, думка, 1974,140 С.
  68. Е.А., Воробей AJB. Фотосенсибилизированные повреждения биологических мембран.// В кн. „Молекулярные механизмы биологического действия оптического излучения“.//М., Наука, 1988, С. 102−111.
  69. JI.X., Литинская Л.Л- О природе клеточной ритмики.// Ин-т биол. физики АН СССР, препринт.-1973, 20 с.'.
  70. Ager A., Gordon J! I. Differential effects of hydrogene peroxide on induces of endothelial cell function.//1984, J/Exp. Med.,'Vol. 159, pp. 592−603.
  71. Akagi M., Katakuse Y., Fukuishi N., Kan Т., Akagi R. Superoxide anion-induced histamine release from rat peritoneal mastcells.// 1994, Biol. Pharmacol. Bull., vol. 17, pp. 732−734.
  72. Alvarez S. Boveris A. Antioxidant adaptive response in human blood mononuclear cells exposed to UVB. // Photochemistry and Photobiology. В Biology, 1997, Vol. 38, № 2−3, P. 152−157. T.
  73. Barker D., Dixon K., Medrano Ё.Е., Smalara D., S. Im, Mitchell D., Babcock G., Z.A. Abdel-Malek. Comparison of the responses of human melanocytes with different melanin contents to ultraviolet В irradiation.// Cancer Res., 1995, V. 55, P. 4041−4046.
  74. Basaga H.S. Biochemical aspects of free radicals. // Biochem. Cell Biol., 1990, vol 68, p.989−998
  75. Bateman L., Gee G. A kinetic’investigation of the photochemical oxidation of certain nons *conjugated defines.// Kroc. Koy.'Soc. London A., 1984, V. 195, P. 376−391.
  76. Baugher J.F., Grossweir^er L.I. Photolysis mechanism of aqueous tyrosine and tyrosyl peptides.//Photochem. and Photobiol., 1978, V. 28, P. 175−184.
  77. Bender K., Blattner C., Knebel A., Iordanov M., Herrlich P., Rahmsdorf H J. New trends in photobiology Invited review- UV-induced signal transduction. // Journal of Photochemistry & Photobiology. B Biology, 1−997, vol.37, № 1−2, p.1−17.
  78. Boerker E.A., Snell E.E. The enzymes.// N.Y. Acad. Press, 1972, V. 6, P. 217.
  79. Bohn E., Muller-Berghaus G. The effect of leukocyte and platelet transfusion on the activation of intravascular coagulation by thrombocytopenic rabbits. // Amer. J. Pathol., 1972, vol.68, p.521−528.
  80. Boonstra A., Savijlkoul H F J. The role of cytokines in ultraviolet-B induced immunosuppression.// European Cytokine Network, 1997, vol.8, № 2, p. 117−123.
  81. Bredberg A., Forsgfen A. Long wavelength UV radiation affects chemiluminescence of human polymorphonuclear leucocytes. // Photochem. and Photobiol., 1985, vol.41, № 3, p.337−342.
  82. W.B., Nuccitelli R. 1984. Metabolic regulation via intracellular pH. // Amer. J. Physiol., vol. 246, № 4, pp. R409-R438.
  83. Dankberg F., Persidsky M.D. A test of granulocyte membrane integrity and phagocytic function.// Cryobiology, 1976, vol. 13, pp. 430−432.
  84. Deme D., Doussiere J., De Sandro V., Dupuy C., Pommier J., Virion A. The Ca2+/NADPH-dependent H2O2 generator ifi thyroid plasma membrane: inhibition by diphenyleneiodonium.// 1994, Biochem. J., Vol. 301, pp. 75−81.
  85. Demphle B. Redox signaling and gene control in the Escherichia coli soxRS oxidative stress regulon a review. // Gene, 1996, vol.179, p.53−57.
  86. Deoliveira A.R., Castrucci A.M.L., Visconti M.A. Cellular signalling in vertebrate pigment cells.// Brazilian Journal of Medical and Biological Research, 1996, Vol. 29, № 12, P. 17 431 749.
  87. Fraikin G.Y., Strakhovskaya.M.G., Rubin A.B. Involvment of near-UV-induced synthesis of serotonin in photoprotection and in potentiation of far-UV lethality in the yeast Candida guilliernondii.// Ibid.5- 1981, Vol. 33, p. 839−843.
  88. Frelin C., Vigne P., Ladoux A., Lazdunski M. The regulation of the intracellular pH in cells from vertebrates. // Eur. J. Biochem., 1988, vol.174, p.3−14.
  89. Gaboury J. P., Anderson D.S., Kubes P. Molecular mechanisms involved in superoxide-induced leukocyte-endothelial cell interactions in vivo.// 1994, Amer. J. Physiol., vol. 266, pp. H637−42.
  90. Gafter U., Malachi T., Ori Y., Breitbart H. The role of calcium in human lymphocyte DNA repair ability. Journal of Laboratory and Clinical Medicine, 1997, Vol. 130, № 1, P. 33−41.
  91. Gamaley I.A., Kirpichnikova K.M., Klyubin I.V. Activation of murine macrophages by hydrogene peroxide.//1994, Cellular Signal, vol. 6, pp. 949−957.
  92. Goldman R., Ferber E., Zort U. Reactive oxygen species are involved in the activation of cellular phospholipase A2. //'FEBS Letters, 1992, vol.309, p. 190−192.
  93. Gorman A., Mcgowan A., Cotter T.G. Role of peroxide and superoxide anion during tumor cell apoptosis. // FEBS Letters, 1997, vol.404, '1, p.27−33.
  94. Grinstein S., Rothstein A. Mechanisms of regulation of the Na+/H+ exchanger. // J. Membrane Biol., 19&6, vol.90, p.1−12.
  95. Grinstein S., Woodside M., Goss G.G., Kapus A. Osmotic activation of the Na+/H+ antiporter during volume regulation. // Biochemical Society Transactions, 1994, vol 22, p.513−515.
  96. Grossweiner L.I., Kaluskar AG., Baugher J.F. Flash photolysis of enzymes.// Intern. J. Radiat. Biol., 1976, V. 29, P. 1−16.
  97. Hamilton T.A., Adams D.O. Molecular mechanisms of signal transduction in macrophages. // Immunology Today, 1987, vol.8, № 5, p. 151 -158.
  98. Holian A., Daniel R.P. Stimulation of oxygen consumption and superoxide anion production in pulmonary macrophages-.by N-formylmethionyl peptides. // FEBS Lett., 1979, vol.108, p.47−50.
  99. Holian A., Stickle D.F. Calcium regulation of phosphatidyl inositol turnover in macrophage activation by formyl peptides. // J. cell. Physiol., 1985, vol.123, p.39−45.
  100. Karu T. Photobiology of low-p'ower laser effects. // Health Physics, 1989, vol.56, № 5, p.691−704.
  101. Knott E.K. Development of ultraviolet blood irradiation.// Amer. J. Surg., 1948, vol. 76, p. 165−171.
  102. Lirvall M., Ljungqvist Hoddelius P., Wasteson A., Magnusson K E. UVB radiation affects the mobility of epidermal growth factor receptors in human keratinocytes and fibroblasts.// Bioscience Reports, 1996, Vol. 16, № 3, P. 227−238.
  103. Menon I A. Basu P K. Persad S D. Das A. Wiltshire J D. Reactive oxygen species in the photosensitization of retinal pigment epithelial cells by rose bengal.// Journal of Toxicology-Cutaneous and Ocular Toxicology, 1992, Vol. 11, № 4, P. 269−283.
  104. Miura T., Muraoka S., Fujimoto Y. Temperature-dependent lipid peroxidation of rat brain homogenate.// Research Communications in Molecular Pathology and Pharmacology, 1998, Vol. 100, № 1, P. 117−128.
  105. Morison W.L., Parrish J.A., Anderson R.R., Bloch K.J. Sensitivity mononuclear cells to UV radiation.// Photochem. and Photobiol., 1979, V. 29, P. 1045−1047.
  106. Morliere P., Santus R. Pro-oxidant role of superoxide dismutase in ultraviolet-A-induced lipid peroxidation in cultured normal human skin fibroblasts.// European Journal of Biochemistry, 1998- Vol. 256, № 1, P. 184−189.
  107. Mosman T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: Application to proliferation and cytotoxity assays.// J. Immunol. Methods, 1986, vol. 65, pp. 55−63.
  108. Mosman T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: Application to proliferation and cytotoxity assays.// J. Immunol. Methods, 1986, vol. 65, pp. 55−63.
  109. Muller-Runkel R., Blais J., Grossweiner L.J. Photodynamic damage to eggs lecithin liposomes.// Photochemistry and Photobiology, 1981, Vol. 33, P. 683−687.
  110. Nakano H. Shinohara K. X-ray-induced cell death: Apoptosis and necrosis.// Radiation Research, 1994, Vol. 140, № 1, P. 1−9.
  111. Ndele J. K, Yoshioka K., Fisher J.W. Hydrogen peroxide in the regulation of erythropoietin (Epo) gene expression in hepatocellular carcinoma cells. // East Afr. Med. J., 1996, vol.73, № 2, p. 143−146.
  112. Nelson W.G., Kastan M.B. DNA strand breaks: The DNA template alterations that trigger p53-dependent DNA damage response pathways.// Molecular and Cellular Biology, 1996, Vol. 14, № 3, P. 1815−1823.
  113. Nihonyanagi K., Oba T. Gold ion induces contraction in frog skeletal muscle fibers. // European Journal of Pharmacology, 1993, vol.238, № 2−3, p.149−155.
  114. Pileni M.-P., Walrant P., Santus P. Electron properties of N-formyl-kynurenine and related compounds.// J. Phys. CheiA, 1976, Vol. 80, p. 1804−1809.
  115. Pitts D.G., Bruce. W.R., Tredici T.J. A comparative study of the effects of ultraviolet radiation on the eye.// 1970, USAF SC Rept SAM-TR-70−28.
  116. Roberts J. E. Visible light induced changes in the immune response through an eye-brain mechanism (photorieuroimmunology). // Journal of Photochemistry & Photobiology. B -Biology, 1995, vol.29, № 1, p.3−15.
  117. Roshchupkin D.I., Pelenitsyn A.B., Vladimirov Yu. A. Effect of temperature and pH on the lipid photoperoxidation and structural state of erythrocyte membranes.// Stud, biophys., 1978, V. 71, P. 23−27.
  118. Rotman B., Paperniaster B.W. Membrane properties of living mammalian cells as studied by enzymatic hydrolysis of fluorogenic esters.// Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1966, vol. 55, p. 134−141.
  119. Saito I., Imuta M» Nakada A. Peroxidic intermediates indolesingiet oxygen reactions: mechanism of C2-C3 rins clevage of tryptophol.// Photochem. And photobiol., 1978, vol. 28, p. 531−534.
  120. Sakkar Hemanta K., Song Pill-Soon. Blue-light-induced phototransformation of phytochrome in the presence of flavin.// Photochem. And Photobiol., 1982, Vol. 35, P. 243 246.
  121. Salo H.M., Aaltorien T.M., — Markkula S.E., Jokinen E.I. Ultraviolet B irradiation modulates the immune system of fish (Rutilus rutilus, Cyprinidae). I. Phagocytes.// Photochemistry and Photobiology, 1998," Vol. 67, № 4, P. 433−437.
  122. Schieven G L. Ledbetter J A. Ultraviolet radiation induces differential calcium signals in human peripheral blood lymphocyte subsets.// Journal of Immunotherapy, 1993, Vol. 14, № 3, P. 221−225.
  123. Shindo Y., Hashimoto T. Ultraviolet B-induced cell death in four cutaneous cell lines exhibiting different enzymatic antioxidant defences: Involvement of apoptosis.// Journal of Dermatological Science, 1998, Vol. 17, № 2,140−150.
  124. Shuppe-Koistinen I., Moldius P., Bergman T., Cotgreave I.A. S-thiolation of human endothelial cell glyceraldehyde-3-phosphate dehidrogenase after hidrogen peroxide treatment. // Eur J Biochem, 1994, vol.22i- № 3, p.1033−1037.
  125. Simchowitz L. Intracellular pH. modulates the generation of superoxide radicals by human neutrophyls. //the J^Of Clinical Investigation, Inc., 1985, vol.76, p. 1079−1089.
  126. Simchowitz L., Roos A.,' Regulation of intracellular pH in human neutrophyls // J. of General Physiology,. 1985, vol 85, p.444−470.
  127. Swallow C.J., Grinstein S., Rotstein O.D. Regulation of cytoplasmic pH in resident and activated peritoneal macrophages. // Biochimica et Biophysica acta, 1990, vol.1022, p.203−210. • ¦
  128. Szollosi J., Kertai P., Somogyi B., Damjanovich S. Characterization of living normal and leucemic mouse lymphocytes by fluorescein diacetate.// The Journ. of Histochemistry and Cytochemistry, 198f, vol. 29,№ 4, pp. 503−510.
  129. Trautinger F., Kin|as Mugge I., Knobler R. M. Honigsmann H. Stress proteins in the cellular response to ultraviolet radiation. // Journal of Photochemistry & Photobiology. B Biology, 1996, vol.35, № 3, ?-.141−148.
  130. Turovetsky V.B., Andreev A.I., Buravkova L.B., Rubin A.B. The influence of short-term gravity on mouse spleen lymphocytes in vitro (microfluorimetry with probes).// Journal of Gravitational Physiology, 1998, V. 5, № 1, P. 153−154.
  131. Ueno E., Tanigawa T., Osaki M., Ito H. Apoptosis induced by ultraviolet B irradiation of leukemia cells and macrophages: Effects of anti-oxygen reagents and cell differentiation. // Oncology Reports, 1997, vol.4, № 3, p.531−533.
  132. Vicenzi E., Poli G. Ultraviolet irradiation and cytokines as regulators of HIV latency and expression. // Chemico-Bioiogical Interactions, 1994, vol.91, № 2−3, p.101−109.
  133. Warin A.P. The ultraviolet erythemas in man.// Brit. J. Dermatol., 1978, Vol. 98, P. 473−477.
  134. Wu X., Torres Zamorano V., Yang H., Reinach P. S. ET-A receptor mediated inhibition of intracellular pH regulation in cultured bovine corneal epithelial cells. // Experimental Eye Research, 1998, vol.66, № 6, p.699−708.
  135. Zhang X., Rosenstein B.S., Wang Y., Lebwohl M., Wei H. Identification of possible reactive oxygen species involved in ultraviolet radiation-induced oxidative DNA damage.// Free Radical Biology and Medicine, 1997, Vol. 23, № 7, P. 980−985.
  136. Zigmond S.H. Chemotaxis by polimorphonuclear leukocytes. // J. Cell Biol., 1978, vol.77, p.269−287. % %
Заполнить форму текущей работой