Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Лептоспироз в Республике Мали и идентификация лептоспир

Диссертация: Лептоспироз в Республике Мали и идентификация лептоспир
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Наибольшее внимание привлекает метод полимеразной цепной реакции (ПЦР), основанный на выявлении специфического фрагмента ДНК исследуемого возбудителя в исследуемом материале путем амплификации ее копий в реакции полимеризации со специально подобранными праймерами (затравками). Высокая чувствительность метода и сравнительно непродолжительное время, затрачиваемое на проведение реакции амплификации… Читать ещё >

Лептоспироз в Республике Мали и идентификация лептоспир (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • ГЛАВА I. ОБЗОР ЖГЕРАТУШ
    • 1. 1. Общие сведения
    • 1. 2. Распространенность лептоспироза в странах Африки
    • 1. 3. Климато-географические и экономические особенности Республики Мали
    • 1. 4. Дифференциация лептоспир
    • 1. 5. Молекулярные аспекты организации лептоепир
    • 1. 6. Использование некоторых современных методов анализа для ускоренной идентификации инфекционных агентов, в том числе лептоспир
  • ГЛАВА I. СОБСТВЕННЫЕ ИСШЩЦОВАНШ
    • 2. 1. Материалы и методы исследования
      • 2. 1. 1. Культивирование лептоспир
      • 2. 1. 2. Серологические исследования
      • 2. 1. 3. Выделение ДНК
      • 2. 1. 4. Подбор праймеров и постановка амплификации
      • 2. 1. 5. Снектрофотометрическая оценка концентрации и чистоты ДНК и праймеров
      • 2. 1. 6. Электрофорез в агарозном геле
      • 2. 1. 7. Идентификация лептоспир
  • ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
    • 3. 1. Характеристика роста исследуемых штаммов лептоспир
    • 3. 2. Распространенность лептоспироза в Республике Мали
    • 3. 3. Этиологическая структура лептоспироза крупного рогатого скота в Республике
    • 3. 4. Подбор праймеров для использования полимеразной цепной реакции
    • 3. 5. Первичные испытания праймеров и подбор условий для постановки полимеразной цепной реакции
    • 3. 6. Проверка специфичности праймеров и оценка чувствительности метода на препаратах ДНК l. interrogans и других микроорганизмов
    • 3. 7. Отработка метода постановки полимеразной цепной реакции на препаратах бактериальной массы ь. interrogans
    • 3. 8. Оценка работы метода в модельной системе 1 при исследовании образцов бакмассы
    • L. interrogans, разведенных в моче
  • ГЛАВА. ХУ. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ. III
  • ВЫВОДЫ

Актуальность теш. Лептоспироз представляет собой зооантро-понозную, природно-очаговую инфекцию, поражающей человека, домашних и диких животных. Материальный ущерб, наносимый лентошшрозом животноводству, складывается из гибели части заболевших животных, абортов, потери продуктивности животных и затрат на проведение диагностики и противоэпизоотических мероприятий.

Большой вклад в изучение лептоспироза внесли С.й.Тарасов, В. В. Ананьин, В. И. Терских, А. А. Варфоломеева, С. Я. Любашенко, B.C. Киктенко, Ю. А. Малахов, Ю. Г. Чернуха, Р.§.Сосов и др., а также ученый Соединенных Штатов Америки, ряда стран Европы, Японии, Австралии и других стран.

Лептоспироз, но данным ВОЗ, остается одним из самых распространенных зооантропонозных заболеваний животных в Мире. Имеются сообщения о наличии лептоспироза и в странах Африки, в том числе и в странах сопредельных с Республикой Мали. Исследования лептоспироза животных и лвдей в Республике Мали не проводились и заболевание в официальной ветеринарной отчетности не регистрируется.

В связи с этим нам представлялось актуальным выяснить наличие лептоспироза животных в Республике Мали, а в случае его обнаружения выяснить этиологическую структуру лептоспироза крупного рогатого скота на территории Республики.

Диагностика лептоепироза в настоящее время основана на таких традиционных методах, как серологический и культуральный. Серологическая диагностика лептоепироза (РИА, РСК, иммуно-ферментный анализ и др.), позволяющая выявить специфические антитела и антигены, дает только ретроспективную оценку заболевания, т.к. диагностический титр антител появляется у заболевших животных только к концу заболевания и не дают надежной информации жри латентно протекающей инфекции и у носителей. Культуральный метод затруднен в связи со сложностями выделения, культивирования и тестирования леитоепир.

До настоящего времени актуальным остается вопрос поиска и новых методов диагностики лептоспироза и идентификации леитоепир, базирующихся на применении более специфичных методов молекулярной биологии и геносистематики. К числу таких методов относятсярестрикциошшй анализ ДНК, метод гибридизационшх зондов, моно-клональных антител (Ю.В.Ананьина, 1990), ДНК-гибридизации (С.К. Артюшин, 1991), полимеразной цепной реакции (А.В1®ек@з* et ai.,.

1991), ША (Т.Bogautdineva et al., X99I), иммунодисперсион-ный анализ (Е.И.Ерохин, 1990), блот-гибрвдизации (j.y. H (c)@key,.

1992) и др.

Наибольшее внимание привлекает метод полимеразной цепной реакции (ПЦР), основанный на выявлении специфического фрагмента ДНК исследуемого возбудителя в исследуемом материале путем амплификации ее копий в реакции полимеризации со специально подобранными праймерами (затравками). Высокая чувствительность метода и сравнительно непродолжительное время, затрачиваемое на проведение реакции амплификации, открывает широкие возможности для использования его в диагностике инфекционных болезней, в том числе и лептоспироза, и идентификации возбудителей.

Педьработы. Целью работы являлось выявление серологическим методом (РМА) наличия лептоспироза крупного рогатого скота на территории Республики Мали и отработка режима постановки полимеразной цепной реакции (ИЦР) с целью идентификации лептоспир.

В задачи исследований входило:

— провести серологические исследования (РМА) на лептоспироз сывороток крови крупного рогатого скота, полученных от животных в Республике Мали;

— определить инфицированность животных и этиологическую структуру лептоспироза крупного рогатого скота;

— подобрать праймеры для проведения амплификации;

— определить оптимальные условия постановки полимеразной цепной реакции (ПЦР) с ДНК лептоспир;

— проверить специфичность и чувствительность ЩР на модельных системах при детекции лептоспир.

Научная новизна. Впервые в Республике Шли проведено исследование на лептоспироз серологическим методом сывороток крови крупного рогатого скота, на основании которых установлено наличие лептоспирозней инфекции у животных.

Противолептоепирозные антитела в сыворотках крови крупного рогатого скота выявлены в диагностических титрах в провинции Ку-ликоро у 83,63 $, в провинции Кутиала у 52,0 $ животных. Антитела выявлены к лептоспирам 17 серогрупп. Ведущую роль в этиологической структуре лептоспироза (по высоте титра антител) занимают лептосниры серогрупп Sejr"© (40,95 $), L (c)uisiaaa (30,47 $), Hebdomadis (29,52 $), Ranaram (20,95 $), Taraasevi (14,28 $).

Показана возможность использования полимеразной цепной реакции для идентификации лептоспир iaterxogMa и Mfiexa. Подобраны праймеры и оптимальные условия проведения ИЦР с очищенными препаратами ДНК и с лизатами лептоспир в воде и в моче. Установлено, что применяемый метод является высокочувствительным и специфичным.

Практическая значимость. Результаты серологических исследований обосновывают необходимость разработки мероприятий в Республике Мали по диагностике и мерам борьбы с лептоспирозом. Показана возможность использования полимеразной ценной реакции для дифференциации патогенных и сапрофитных лептоспир и выявления их в исследуемом материале (в моче) без выделения ДНК.

На защиту выносятся: I. Данные о распространенности лепто-спирозной инфекции у крупного рогатого скота на территории Республики Мали.

2. Данные об этиологической структуре леятоспирозной инфекции крупного рогатого скота на основе анализа обнаруженных в сыворотках крови противолеитоспирозных антител.

3. Результаты идентификации лептоспир с помощью полимеразной цепной реакции.

Апробация диссертационного материала. Основные результаты диссертационной работы доложены и обсуждены: на XI конференции молодых ученых медицинского факультета РУДН (Москва, 1992 г.), на ХП конференции молодых ученых РУДН (Москва, 1993 г.), на Ж конференции молодых ученых РУДН (Москва, 1994 г.).

По результатам исследований сдано в печать «Труды молодых ученых медицинского факультета РУДН» две работы.

Предварительное рассмотрение диссертации проведено на совместном заседании кафедры микробиологии и ЦНИЯа Российского.

Университета дружбы народов и лаборатории молекулярной биологии и биохимии Российского института экспериментальной ветеринарии (Москва, 1994 г.).

Объем работы. При выполнении данной работы нами выполнен следующий объем экспериментальных исследований: получено и исследовано в РМА 105 проб сывороток крови крупного рогатого скотапоставлено более 2000 серологических реакцийвыращено на жидких средах около 15 литров культур лептоспир музейных штаммов лептоспирпроизведено и проанализировано более 500 посевов и пересевов лептоспир, просмотрено в темном поле зрения микроскопа более 15 000 препаратов при оценке чистоты роста лептоспир и при оценке результатов серологических исследованийвыделено ДНК из 26 штаммов лептоспирподобраны праймеры, проведена реакция амплификации, проведен электрофорез и произведена оценка результатов с 26 штаммами лептоспир и 10 штаммами бактерий других видов.

Диссертационная работа изложена на ^ страницах машинописного текста и включает: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты собственных исследований, обсуждение, практические рекомендации, выводы, список использованной литературы.

выводы.

1. На основании обнаружения противолептоспирозных антител в сыворотках крови крупного рогатого скота нами впервые установлено наличие лептоспирозной инфекции у животных в Республике Мали.

2. В РМА. противолептоспирозные антитела выявлены в 72 (из 105) образцах сыворотки крови крупного рогатого скота (68,75 $).

• в титрах 1:50 — 1:3200.

3. По данным серологических исследований в этиологической структуре лептоспироза крупного рогатого скота в Республике Мали преобладающими являются лептоспиры серогрупп: Без гее (40,95%) iLouisiana (30,47%), Heodomadis (29,52%), Ranar"ia (2©, 95%)?T a2? ass (c)vi (X4,28%) Кроме того выявлены противолептоспирозные антитела к лептоспирам других 12 серогруш лептоспир.

4. Отработаны оптимальные режимы постановки лолимеразной цепной реакции с препаратами ДНК лептоспир.

5. Чувствительность ПЦР с препаратами ДНК лептоспир составляет 10 пг ДНК, что в пересчете соответствует 20−50 клеток в об, разце.

6. Образцы ДНК лептоспир интерроганс после электрофореза в IjK-ном агарозном геле всегда давали полосу специфической амплификации, а образцы ДНК лептоспир бифлекеа, как и других видов микроорганизмов, не давали ее.

7. Установлена возможность использования ПЦР с препаратами лизированных кипячением в воде или моче лептоспир, без выделения ДНК.

8* Полимеразная щепная реакция пригодна для идентификации.

L. interrogans ОТ Ь. в if lex, а И ДРУГИХ ВИДОВ МИКр00рГаНИЗшв. Она проста в техническом отношении, чувствительна и специфична при выявлении продукта амплификации лептоспир и перспективна для использования в практической работе*.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.

1. Результаты серологическихисследований и изучения этиологической структуры лептоспироза сельскохозяйственных животных на территории Республики Мали будут переданы в Департамент, но изучению зооантропонозов Министерства сельского хозяйства и Департамент ветеринарного Управления ШХ и животноводства, которые рекомендовано положить в основу разработки Национальной противо-лептоспирозной программы.

2. Метод полимеразной цепной реакции следует шире применять для идентификации лептоспир и при диагностике лептоспироза.

Показать весь текст

Список литературы

  1. М.Х. Источники и пути передачи лептоспирозной инфекции в Северо-Осетинской AGGP // Лептоспирозы: Тр. 1У Всесоюзн. конф. по лептоспирозам. — М., 1967. — С. 144.
  2. В.В. Резервуары патогенных лептоспир в природе: Дис.. докт. наук. М., 1954. — 105 с.
  3. В.В. Лептоспирозы людей и животных. М.: Медицина, 1971. — 314 с.
  4. Ю.В. Опыт применения бикарбонатного теста для дифференциации патогенных и сапрофитных лептоспир // Матер, симпоз. по лептоспирозу. М., 1975. — С. 3−4.
  5. Ю.В., Чернуха Ю. Г. Зависимость антитеяогенеза от вида хозяина возбудителя // Лептоспироз. М., 1976.1. С. 185.
  6. С.К. Генетическое родство лептоспир // Матер, пятого съезда эпидемиологов, микробиологов и паразитологов Азербайджана. Баку, 1980. — С. II9-I20.
  7. С.К. Изучение генетического родства лептоспир: Ав-тореф. дис.. канд. биол. наук. М., 1981. — 16 с.
  8. O.K., Киктенко B.C., Ежов Г. Й., Лысенко A.M. Нуклеотидный состав, размер генома и гомологии в ДНК лептоспир серогруппы Armenica // Биол. науки. 1982. — № 10.1. G. 19−21.
  9. И.И. Молекулярная биология. Л.: йзд-во Ленинград. ун-та, 1977. 368 с. 1. Бакулов И. А., Гаршио М. Г. География болезни животных зарубежных стран. М.: Колос, 197I. — 200 с.
  10. О.В. Очерки по мировому распространению важнейших заразных болезней человека. М.: Медицина, 1967. — 300 с.
  11. Е.П., Мацов В. М. Вьщеление полисахаридных фракций лептоспир методом Фуллера // Микробиол. журн. 1971. -Т. 33, № 4. — С. 454−459.
  12. Е.П., Угрюмов Б. Л. и др. Лептоспирозы. Киев: Здоровье, 1978. — G. 300.
  13. Е.П., Угрюмов Б. Л. и др. Лептоспирозы. Киев, 1979. — 403 с.
  14. Т.В., Долотова м.П. и др. О заболеваемости лепто-спирозом рабочих мясокомбинатов Тульской области // Лептоспирозы. Киев, 1979. — G. 90.
  15. З.М., Харикова А. А. и др. Лептоспироз у различных профессиональных групп населения Воронежской области // Лептоспирозы: Тез. докл. У1 Всесоюзн. научн. конф. по лептоспиро-зу. Баку. — М., 1976. — G. 59.
  16. А.А. Лептоспирозы // Gob. медицина. М., 1946. — С. 8−9, 10−12.
  17. Е.Г., Иванов А. П., Киктенко B.C., Ткаченко Е. А., Арутюнова Г. А. Применение прямого иммуноферментного анализа с родоспецифическим переоксидазным коныогатом при лептоепирозе // Журн. микробиол. 1986. — № 12. — С. 72−75.
  18. Е.Г., Ткаченко Е. А., Иванов А. П., Киктенко B.G. Методические рекомендации к проведению иммуноферментных методов в диагностике лептоспироза. М.: УДН, 1987. — 12 с.
  19. Е.Г., Мельнецкая Е. В., Бернасовская Е. В., Киктенко B.C. Сравнительная оценка чувствительности различных методовсерологической диагностики лептоспир // ЖМЭЙ. 1990. — № 12. — G. 98−103.
  20. B.C. К методике выращивания лептоспир инфекционной иктерогемоглобинурии крупного рогатого скота // Тр. Армянского НИВЙ. 1947. — Вып. У. — С. 15.
  21. B.C. Морфологические особенности колоний лептоспир на плотной питательной среде под воздействием некоторых солей и биологических факторов // Тез. докл. У1 Всесоюзн. научн. конф. по лептоспирозу. М., 1976. — С. 7−8.
  22. Ю.Н. Индустриализация и региональное развитие в Африке. Л.: Наука, 1987. — 235 с.
  23. М.В., Дранкин Д. И. Лептоспироз как профессиональная инфекция // Лептоспирозы: Тез. докл. У1 Всесоюзн. научн. конф. по лептоспирозу, Баку. М., 1976. — С. 66.
  24. З.А. Лептоспироз как профессиональное заболевание людей в Краснодарском Крае // Лептоспирозы: Тр. 1У Всесоюзн. конф. по лептоспирозам. М., 1967. — С. 144.
  25. З.А. Лептоспироз как профессиональное заболевание в Краснодарском Крае // Матер, докл. научн. конф. по лептоспирозам. Краснодар, 1969. — С. 131.
  26. З.А. Лептоспироз как профессиональное заболевание у животноводов Краснодарского Края // Тез. докл. научн. конф. по лептоспирозам. Казань, 1971. — С. 115.
  27. Е.Н., Саликов Ю. С. Фактор передачи лептоспироза на скототрассах Дагестана // Лептоспирозы. Киев, 1979.1. С. 98.
  28. Дас Субхаш Чандра. Этиологическая структура лептоспироза в Народной Республике Бангладеш: Автореф. дис.. канд. мед. наук. М., 1993. — 16 с.
  29. А.А., Кузнецова Л. И. и др. Некоторые факторы, определяющие риск инфицирования лептоспирами при работе на мясокомбинатах // Матер. Всесоюзн. конф. Львов, 1988. -С. 167.
  30. Г. И. Изучение химического состава и биологической особенности лептоспир: Дис.. докт. биол. наук. М., Х975. -330 с.
  31. Г. й., Киктенко B.C., Березов Т. Т. Содержание нуклеиновых кислот и нуклеотидный состав ДНК лептоспир // Журн. гиг., эпидемиол., микробиол. и иммунол. Прага, 1975. — Т. Х9,2. С. 46.
  32. Г. И., Лысенко A.M. и др. Изучение гомологий в нуклео-тидных последовательностях ДНК лептоспир // Актуальные проблемы лептоспироза. М.: УДН, 1979. — С. 18.
  33. Г. Й., Лысенко A.M., Волохова Н. А., Артюшин G.K., Ахме• дов М.М. Изучение генетической гомологии ДНК лептоспир // Лептоспирозы. Киев: Изд-во Киевек. НИИ эпидемиологии, 1979. — С. 55−57.
  34. Г. И., Артюшин G.K., Лысенко A.M. Нуклеотидный состав и гомология ДНК паразитических лептоспир // ЖМЭИ. 1982. -Т. 10. — С. 47−48.
  35. Г. И., Лысенко A.M., Артюшин С. К. Генотипические и фено-типические критерии систематики лептоспир // Лептоспирозы: Тез. докл. УШ Всесоюзн. конф. по лептоспирозам. Тбилиси, 1983. — С. 3.
  36. Г. И., Артюшина И. А., Фоменко А. С. Полусинтетические и синтетические питательные среды для культивирования лептоспир // Передовой научно-производственный опыт в биологической промышленности: Экспресс-информация. М., 2983. — G. 3.
  37. М.В. Водная лихорадка. Воронеж, I960. — 120 с.
  38. П.Л., Бумари С. А. Анализ генома. Методы. М.: Мир, 1990. — 182 с.
  39. B.G. Лептоспирозы человека. М.: Медгиз, 1954. -G. 46.
  40. B.C., Левина Л. Ф. О влиянии солей тяжелых металлов на патогенные и сапрофитные лептоспиры // Лаб. дело. 1968. — № 8. — С. 187−189.
  41. B.G. 0 резервуарах и очагах лептоспирозной инфекции в природе // ЖМЭИ. 1972. — № 9. — С. I06-II0.
  42. B.C., Ежов Г. й., Волина Е. Г., Левина Л. Ф., Саруха-нова Л.Е., Хисамов Г. З. Лептоспироз. М.: УДН, 1985. -150 с.
  43. Т. Этиологическая структура лептоспироза в Республике Бенин: Дис.. канд. биол. наук. М., 1991. — 175 с.
  44. Т., Ежов Г. И., Левина Л. Ф. Распространение лептоспироза в Республике Бенин // Совершенствование методов государственного контроля ветеринарных препаратов: Тез. докл. Всесоюзн. научн. конф. М., 1991.
  45. А.Л., Токаревич К. Н. Лептоспироз. Л.: Медицина, 1982. — G. 150.
  46. Л.Г., Богданова Т. И. Бактерии рода Thermus и их термостабильные ферменты // Биотехнол. 1991. — № 3. -G. 23−29.
  47. A.M., Артюшин С. К. 0 статусе рода лептоспир // Биохимия и биофизика микроорганизмов. Горький: йзд-во Горь-ковск. ун-та, 1980. — С. 25−27.
  48. G.fl. Лептоспирозы животных: инфекционная желтуха. М., 1948. — С. 58−61.
  49. С.Я., Новикова Л. С. Характеристика морфологических, серологических и патогенных свойств штаммов лептоспир, полученных от различных видов животных // ЖМЭИ. 1950. — № 8. -G. 35−39.
  50. Ю.А. Свинья как один из резервуаров патогенных лептоспир в природе // Тез. докл. У Всесоюзн. конф. по лептоспирозу людей и животных. Казань, 1971. — С. 299.
  51. Ю.А. Лептоспироз животных. М.: Агропромиздат, 1992. — 239 с.
  52. Ю.А., Гущин В. Н. Успехи и задачи в борьбе с лепто-спирозом животных // Лептоспирозы: Тез. докл. Ш Всесоюзн. конф. по лептоспирозу. Тбилиси, 1983. — С. 18.
  53. И.Г. Дифференциация М. tuberculosis м. Bovis от атипичных видов микобактерий методами ДНК-ДНК гибридизации и полимеразной цепной реакции: Дис.. канд. биол. наук.1. М., 1993. 188 с.
  54. В.В., Валова Г. П. и др. К изучению комплекса мер по профилактике лептоспирозов в антропургических очагах // Лептоспирозы: Тр. У научн. конф. по лептоспирозам. Казань, 197X. — 0. 157.
  55. В.В., Пекло Г. Н. Лептоспирозы Северо-Западной Сибири // Лептоспирозы. Киев, 1979. — С. 136.
  56. И.В., Евдокимова О. А. Эпвдемиология лептоспирозов в РСФСР и мероприятия по их профилактике // Лептоспирозы: Тез. У научн. конф. по лептоспирозам. Казань, 197I. — С. 161.
  57. М.А. Лептоспироз крупного рогатого скота. М.: Сель-хозиздат, 1959. — 301 с.
  58. В.Г. Малийские этюды. М.: Наука, 1986. — 170 с.
  59. Д.Л. Молекулярная биология. 1986. — Т. 20. -С. 488.
  60. Г. Ф. Страны Сахелы. М.: Мысль, 1983. — С. 11−77.
  61. В.Г. Роль лептоспир в этиологии инфекционной икте-рогемоглобинурии крупного рогатого скота // Тр. Ростовской областной вет.-опытной станции. Ростов-на-Дону, 1940. -Вып. Ж. — С. 18−22.
  62. С.В. Столовая зелень как возможный фактор передачи лептоспирозной инфекции // Матер, симпоз. по лептоспирозу. -М., 1975. С. 137.
  63. Л.Е., Волина Е. Г., Киктенко B.C., Ежов Г. й. Культивирование лептоспир на жидких бессывороточных питательных средах // Лаб. дело. 1980. — № 7. — С. 439−441.
  64. Г. Л. Результаты изучения роста лептоспир в полусинтетической среде // Профилактика и меры борьбы с лептоспирозом сельскохозяйственных животных. Махачкала, 1981.1. С. 18.
  65. Р.Ф. Лептоспироз // Болезни свиней. М., 1970. -С. 214−220.
  66. С.И., Эпштейн Г. В. К вопросу об этиологии так называемой водной лихорадки // ЖГЭМИ. 1928. — № 9. — С. 51−52.
  67. В.И. Лептоспирозы людей и животных. М., 1945. -257 с.
  68. В.й. Лептоспирозы методика изучения лептоспирозов, меры борьбы с ними и проблема ликвидации природных очагов1./ Под ред. акад. Е. Н. Павловского. М., 1952. — G. 200.
  69. В.И., Коковин И. Л. Лептоспирозные заболевания людей. М.: Медицина, 1964. — С. 216.
  70. И.Е. Эпидемиологическая характеристика групповой и спорадической заболеваемости лептоспирозом в восточных регионах РСФСР // Лептоспирозы: Тез. докл. Ш Всесоюзн. конф. по лептоспирозам. Тбилиси, 1983. — С. 155.
  71. .А., Артюшин С. К. ДНК гибридизационный зонд для идентификации бруцелл // Матер. Всесоюзн. научн. конф. по сельскохо-зяйст. биотехн.: Тез. выступлений. Целиноград, 1991. — С. 128 129.
  72. Ю.Г. Этиологическая структура лептоспироза в СССР // Лептоспирозы: Тр. У Всесоюзн. конф. по лептоспирозам человека и животных. Казань, 197I. — С. 26.
  73. Ю.Г., Евдокимова О. А. и др. О несоответствии ареалов хозяина и возбудителя // ЖМЭИ. 1988. — № 12. — С. 70.
  74. ADLER В., MURPHY A. et, а 1. Detect ion., of specific ant i leptospiral immundglobins M & G in .'fiuman serun by sol i<4. Phase ELISA // J.CLIN.Microbiol.-1990.-v.2.-p.452−457.
  75. ALTAMIRANO M., KELLY M.T. et al. Characterization of a DNA probe detection of M. tuberculosis complex in clinical samples by PCR.// J.clin.Microbiol.-1992.-v.30.-N 8.-p.21"3−2176.
  76. ANANYINA YU. V., MAKEEV S.M. Cultural and pathogenic pecularities of Leptospira interrogans Hanka serovar Javanica serogroup.//VII European and IX URSS Leptospirosis research conference Moscow-1991.-Abstracts.-Moscow.-1990.
  77. ARTUSHIN S., BELONSOV V. et a 1. Development of DNA. Hybridization probe for identification of Leptospira interrogans serovar Pomona.// Leptospirosis: VII European and IX USSR Leprospirosis Res. conference-Moscow. -1991. -p. 53 .
  78. BABUDIERI В., ARCHETI I. Leptospira nel territoris Fra il Sagan el 1eme.//R.С. inst. sup. Sanit.-1940.-v.3.-p.461−466.
  79. BAYRET R. L. Leptospirose Chez les animaux d’elevage au Senegal.//Med.Afri.Noire.-1971.-v.16.-N.II.-p.803−805.
  80. BAZOVSKA S.K., HEVIN H.K. et a 1. Leptospira Sp. strain Dimbovitza, Pirst isolate in Europe with characteristics of the proposed genus Leptonema.// Int. J. Syst.Bacteriol.-1983-v.33.-p.325−328.
  81. BEHYMER D. E., RI EM ANN H.P. et al. Mass screening of cattle seraagainst in. infections disease agents using an ELISA system for monitoring health in livestock.// Amer.J. Vet. Res.-1991.-v.52.-N.10.-p.1699−1705.
  82. BLOCKER A., BARANTON G., SAINT GERONS I. DETECTION OF LEPTOSPIRA SPECIFIC 16 S DNA sequences using Polymerase chaine Reaction.// Leptospirosis: VII European & IX USSR leptospirosis Research conference.-Moscow.-1990.-p.54.
  83. BODY B.A.DNA Hibridization for: identification bacteria.//J.Mol.Biol.-1990.-v.8.p.33.
  84. BOGAUTDINEVA T., BOGAUTDINOV Z. Genus specific diagnosis of leptospirosis by ELISA.// Leptospirosis: VII European and IX USSR Leptospirosis Res. conference.-Moscow.-1991.-p.54.
  85. BOIRON H. La leptospirose existetelle en A.O.F.//Acta trop.1948.v.5.-p.195−200. •
  86. BOROS J., A. KISS et al.Physival. map of the seven Ribosemal RNA genes of E. Coli.//Nucleic Acids Res.-1979.-6:1817−1830.
  87. BOTT К.F., G.С. STEWART et al. Genetic mapping of cloned ribosomal RNA genes.// In A.T. Genesan and J.A. Hoch (ed.), Genetics and biotechnology of baci11i-Acad.Press.Inc. New York.-1984.-p.19−34.
  88. BURAND J.P., HORTON H.M. et al. The use of PCR and shortwave UV irridiation to detect bacilovirus DNA on the surface of gygsy moth eggs.// J. inf. Dis.1992.-v.168-p.2591−2599.
  89. BURDIN M.L.rFREYD G. and/ Ashferd W.A. Leptospirosis in Kenya due te leptospira grippotyphosa.// Veterinary Recerd.-1958.-v.70.-p.830−834.
  90. CAROLE А.В., RICHARD L. et al. Comparison of there techniques to detect L. interrogans serovar Hardjo type hardjo-bovis in bovine urine.//Am. J. Vet. Res.-v.50.-N.7−1989.p.1001−1003.
  91. CHRONAS G., MOYES A., YOUNG H. Syphilis diagnosis screening by enzyme immune essay and variation in Fluorescent treponemal antibody absorbed (FTA-ABS) Lonfirmatory test performance.// Med. Lab. Sci.-1992.-Vol.42.-N.I.-p.50−55.
  92. CELBY С., PENHECT E.E. et al. Unique ribosome structure of Leptospira interrogans is composed of four RNA components.// J. of BACTERIOL.-1990.-Vol.172.-N.6.-p.3478−3480.
  93. DEMMELER G.J., BUFFONE J. et al. Detection of cytomegalovirus in urine from newborns by using polymerase chain reaction DNA amplification.// J.infect. Dis.-1988.-v.158.-p.1177−1185.
  94. ELAIN E.D., GOOTE J.G. Identification of Bordetedla pertussis in nasopharyngeal swabs by PCR amplification of a region of the adenylete cyclase gene.// J.Med.Microbiolol.#1993.-v.38.-p.140−14 4.
  95. EZEH O.A. and AGLA M.I.The detection of antibodies incattle and pigs in plateau state of Nigeria.//In proceeding XII the world Vet. congress on diseases of cattle, utrecht, the Netherlands.-1982.v 42 .-p.1285−1286. # .
  96. EZEH A.O., ELLIS W.A. et al. The prevalence of leptospirosis in abattoir worker in Jos, in Nigeria.//J.Vet.Med.-1988.-v.44.-p.69−73.
  97. ENGRALL P.&PERLMANN 1972. ELISA Tect to detect Leptospira.//Microbiol. immunol.1972.-v.8.-p.170.
  98. EROHIN E.P.New methods identification Leptospira.//Microbiol.immunol.-1990.-v.20.-p.160.
  99. FACH P. TRAP D. et al. Biotinylated probes to detect Leptospira interrogans on det GI hybridization or by in situ hybridization.// Lett. appli. microbiol. (GBR).-1991.-v.12.-N5.-p.171−176.
  100. FAINE S. Guidelines for the control of the Leptospirosis.-Edited by Faine S. WHO., Geneva.-1982.-p.305.
  101. FAINE S. and STALLMAN N. D. Amended descriptions of the genus leptospira Noguchi 1917 and the species L. interrogans Stimson (1907)Wenyen 1926 and L. biflexa (Welbach and Binger 1914 Noguchi 1918).// Int. J. Syst. Bacteriol.-1992.-v.32.-p.461−463.
  102. FALKOW S. The use of DNA hybridization for the identification of pathogenic bacteria.// Depaetment of medical Microbiology, STANFORD University.-USA.-1983.-p.33.
  103. FOX G. E., STACTELRANDT E. et al. The phylogeny of procaryetes.// Science.-1980 --v.209.-p.457−4 63.
  104. FRAYA DE AZEVEDE J. M., Isolation leptospira serovars Ballum and Grippotyphosa from Regents in Nigeria.// Bull. Hyg.-1961.-v.38.-p.580.
  105. FUKUNAGA M., HORIE J. Nucleotide sequence of a 23 S RNA gene f-rom leptospira interrogans serovar canicola strain Moulton.// nucleic acids Res.-1989.-Vol.17.-p.2123.
  106. FUKUNAGA M. and MIFUCHI J. Tthe number of large RNA genes in L. interrogans and L. Biflexa.// Microbiol, immunol.-1989.-Vol.33.-p.459−466.
  107. FUKUNAGA M. and MIFUCHI J. Unique organization of Leptospira interrogans RNA crenes.// J. of Bacterid.-1989.-v.171-N II.-p.5763−5767.
  108. FUKUNAGA M., HORIE I. et al. Isolation and characterisation of the 5 Sr RNA crene of 1. interrogans .// J. of Bacterid .-1990. v. 172 .-N 6.-p.3264−3268.
  109. FUKUNAGA M., HORIE J et a 1. Nucleotide sequence of 16 Sr RNA gene for I". interrogans serovar Canicola s. train Mou. l ton.//Nucleic Acids Res.-1990.-Vol.18.-n 2.-p.366.
  110. GALLIMANT M. Sondes nucleiques et amplification de l’adn.// Lett, infect. Microbiol.-1991−1992.-v.7.-N 2.-p.46.
  111. GILLET R. Un siijet de la recente epidemie de denque a Dakar. Note sur un cas de sspirochetose humaine.//Bui1. Sec. Path, exet.-1926.-19.-p.860−863.
  112. GOEZ J. Diagnostique de la spirochetose Icterohaemorrhagie en A.O.F.:These.-Paris.-1933.-p.180.
  113. GOLD L., PRILNOW D. et al. Translational initiation in prokaryotes.// Annu. Rev. Microbiol.-1981.-35:365−403.
  114. GRAVEKAMP C., KEMP H.V.D. et al. Detection of icterohaemorrhagiae or copenhageni in human serum by the polymerase chain Reaction.// Leptospirosis: VII European and IX USSR Leptospirosis Res. Conference.-Moscow.-1991.-p.57.
  115. GUIDELINES.For the control of Leptospirosis.// edited by FAINE S. WHO -Geneva.-1982.
  116. HAAPALA, M. REGU and ALEXANDER. Справочная Лаборатория /
  117. Лептоспирозная. В0з. и ФА0. Вашингтон. США. — 1969.
  118. HERRMANN J. L. Genome conversation in isolates of Leptospira interrogans.// J. Bacterid.-1991.-v.173.-N.93.-p.7582−7588.
  119. HOGERSEIL H. Z.. Terpstra W.J. et al. Leptospirosis in rural Ghana.// Trop. Geogr. Med.-1986.-v.38.-p.162−166.
  120. HOLLAND J., PARKER A.J.C. and HESLEP C.G. The prevalence of antibodies against leptospiroses in goats. sheep and cattle in Nothern Nigeria.//Rep. W.A.F. Res. team Royal Vet. college, University of1.ndon.-197−7.-p. 29−37.
  121. HOVIND H.K., ELLIS W.A. et a 1. Leptospira parva sp. Nov. some morphol. and Biological characters.//Zentra1. Bact. Parasitenkol Infect. Hyg. Adt.Orig. Eeihe.-1981.-1981.-v.250.-p.343−354.
  122. JOHNSON R.C. and HARRIS V.G. Differentiation of pathogenetics and saprophytics Leptospires.I. Grth 'at low temperatures.//J. Bacteriology.-1977.-94.-p.27−31.13 6. JOHNSON" R. G* The spirochetes.// Annu. Rev Microbiol.-1977. -31.-p.89−106.
  123. JOHNSON R.C. 1981. Aerobic spirochetes.//The genus leptospira in P.M. ATTAR. H. stolp (ed.).-1981.-p.582−591.
  124. JOHNSON R.C. and FAINE S. Family II.Leptospiraceae.// Bergey1 manuel of syst. Bacteriol.-1984.-v.I.-p.62−67.
  125. JOHNSON R.C. and Faine S. Leptospiraceae.// In N.R.KREIG and HOLD J.G.(edi.), BERGLY1S manual of systematic bacteriology.-1984.-p.62−70.
  126. JOSS A.W.L., JEAN M.W. et a 1. Texoplasma polymerase chain reaction on experimental Hood samples .//J .Med. Microbiol.-1993 .-v.38.-p.38−43.
  127. KAI M., KAMIYA S. et al. Rapid detection of mycoplasma pneumoniae in clinical samples by polymerase chain reaction.//J.Med.Microbiol.-1993.-v.38.-p.166−17 0.
  128. KISS A., SAIN B. et al.1977.The number of rRNA genes in E.Celi.//FEBS Leh.-19 77.-79:7 7−7 9.
  129. KOBAYASHI H., and OSAWA S. The number of 5 Sr RNA genes in B. subtilis.//FEBS.LeH.-1982.-141:161−16 3.
  130. KOUNDE T., EJOV G.I., LEXINA L.F.Serological examination of domestic animals and differents groups of population for leptospirosis VII European and IX USSR Leptospirosis research conference, Moscow, February 1991. Abstracts Moscow-1990.-p.9.
  131. KOUNDE Th. Serological survey of Leptospirosis in Republic of Benin.//Leptospirosis on the African continent. Procedings of ACEC/STD3
  132. MARMUR J., DOTY P. Heterogeneity in deoxyribonucleic acids. II Dependence on compositiom of the configurationa1 stability of deoxyribonucleic acids.//Nature.-1959.-183.-p.1427−1429.
  133. MARMUR J., DOTY P. Determination of the base composition of deoxyribonucleic acid from ins thermol denaturation temperature.//J.Mol. Biol1962.-v.5.-p.109−118.
  134. NAKENE P., KAWAOI A. Perexidase-labelled antibodyra new method of conjugation.//J.Histochem.Cytochem.-1974.-v.22.-p.1084−1091.155.NIELSEN J.N., ARMST
  135. ONG C.N. et al. Relationship among selected leptospira interrogans serogroups as determined by nuclic acidhybridization.J.clin.Microbiol.-1989.-v.27.-p.2724−2729.
  136. NOC F., ESQUIER A. Les spirochetes a Dakar.//Bui1.9 sec.Path.Exet.-1920.-v.20.-p.672.
  137. NOMURA M. and MORGAN E.A.Genetics of bacterial ribosomes.//Annu. Rev. Genet.-1977.-II:297−347.
  138. PALMER N.M.A., NOLAN A. et a 1. Development of an ELISA for detection of antibodies to the Sejroe group in bovin sera.//Leptospirosi s: VII European and IX USSR Leptospirosis Res.conference.-Moscow.-1991.-p.61.
  139. PASTER В.J., STACTOBRANDT E. et al. The phylogeny of the -spirochetes.//Syst.appli.Microbiol.-1984.-v.5.-p.337−351.
  140. PASTER В.J., DEWHERST F.E. et a 1. Leptospira interrogans 16S ribosoma1 RNA, complete sequence.//Phylogenetic analysis of the spirochetes.1990.2,36.
  141. PYATKIN К. KRIVOSHEIN Y.Microbiology.-Mir pul1ishers.-Moscow.-1980.-p.560.
  142. ROTHSTEIN N.S.Leptospirosis in Ghana a preliminary serological survey.//Ghana med.J.-19 64.-1964.-N.3.-p.90−9 3.
  143. SAIKI R.К., SHARF S. et al. Enzymatic amplification of globin genomic sequences and restriction site analysis of for diagnosis of siekle cell anemia .//Science.-1985.-v.230.-p.1350−1354 .
  144. SAIKI R.К., GELFAND D.H. et al. Primer directed enzymatic amplification of DNA with a thermostable DNA polymerase.//Science.-1988.-v.2 39.-p.487−491.
  145. SHINE J. and DOLGARNO L.D. The 3°terminal sequence of E. CELI 16 Sr RNA complementary to nonsense triplets and ribosome binding sites.//Proc.Natl.acad.Sci.USA.-1971.-71:-p.1342−1346.
  146. SAOAWA M., OSAWA S. et al.The number of r RNA genes in mycoplasma capricolum. //Mol. Gen. Genet •-1981.-v .182: 502−504.17 3"STWART G.C. et al. Delaited physical mapping of r RNA genes of В. subti1is gene.//Microbiol.immunol.-1982.-v.19.-p.153−162.
  147. VAN DER GIESSEN J.W., EGER B. et a 1. Amplification of 16 S rRNA sequences to detect M.paratuberculosis.//L.Med.Microbiol.-1992.-v.36.-N4.-p.255−263.
  148. VAN EYS G.J., ZAAL J. et a 1. Hybridization with hardjo-bovis-specific recombinant probes as a method for type discrimination of leptospira interrogans serovar hardio.//J.Gen.Microbiol.-1988. -v.134.-p.567−574.
  149. WOESE et al. Genome organisATION OF Leptospira.//J.Mol.Evol.-1978.-v.II.-p.245−252.
  150. WREN В.W., HEARD S.R. et a 1. Characterization of Cl. difficile • «strains by PCR with toxin A &B specific primers.//J.Med.Microbiol.1993.-v.38.-p.109−113.
  151. YANAGAWA R., SHINAGAWA M. et a 1. Serologica1 studies of leptospiras by immunodiffusion.//Zbl.Bakt.-Abt.I.orig.Bd.A.228.-p.369−377.
  152. YANISH P.C., VIEIRA J. &MESSING J. Gene.-1985.-v.33.-p-103 119.
  153. YASUDA P.H., STEIGRWALT A.G. et a 1. Deoxyribonucleic acid relatedness betwen serogroups and serovars in the family leptospiraceae with proposals for seven new leptospira species.//Int.J.Syst.Bact.-1987.-v.37.-N4.-p.407−415.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!