Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Методы IN VITRO в селекции огурца (Cucumis Sativus L.) на устойчивость к фузариозу

ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Практическая ценность работы состоит в том, что оптимизирован процесс получения растений — регенерантов огурца in vitro на основе верхушечных почек, гипокотильных сегментов и каллуса. Получены растения — регенераты, характеризующиеся повышенной устойчивостью к фузариозу. Разработаны и опубликованы методические рекомендации «Получение растений огурца с повышенной устойчивостью к фузариозному… Читать ещё >

Методы IN VITRO в селекции огурца (Cucumis Sativus L.) на устойчивость к фузариозу (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
  • ЦЕЛИ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЙ
  • ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 1. 1. Природа устойчивости растений к фитопатогенам и способы создания сортов, устойчивых к болезням
    • 1. 2. Клеточная селекция растений на устойчивость к фитопатогенам
      • 1. 2. 1. Использование тканевых и клеточных культур в селекции на устойчивость к фитопатогенам
      • 1. 2. 2. Использование патогенов в клеточной селекции растений
    • 1. 3. Селекция огурца на устойчивость к фузариозу
  • ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТ
  • ГЛАВА 2. УСЛОВИЯ, ИСХОДНЫЙ МАТЕРИАЛ, СХЕМА И МЕТОДИКИ ПРОВЕДЕНИЯ ОПЫТОВ
    • 2. 1. Исходный материал
      • 2. 1. 1. Растительный материал
      • 2. 1. 2. Штаммы возбудителя фузариозного увядания огурца
    • F. oxysporum
      • 2. 2. Схема исследований
      • 2. 3. Методы исследований
        • 2. 3. 1. Методы выращивания растений
        • 2. 3. 2. Методики лабораторных опытов
      • 2. 4. Условия выращивания эксплантов
      • 2. 5. Методы оценки огурца на устойчивость к фузариозу
  • ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ
    • 3. 1. Оптимизация факторов, влияющих на морфогенетическую способность эксплантов огурца
      • 3. 1. 1. Стерилизация семян и сегментов растений огурца для введения в культуру in vitro
      • 3. 1. 2. Обоснование выбора эксплантов
      • 3. 1. 3. Изучение влияния фитогормонов на морфогенетическую активность тканей огурца
      • 3. 1. 4. Получение растений — регенерантов огурца, укоренение и адаптация к почвенным условиям
    • 3. 2. Разработка селективных условий для создания in vitro тканевых культур, устойчивых к фильтрату культуральной жидкости гриба
    • F. oxysporum и фузариевой кислоте
      • 3. 2. 1. Изучение влияния концентрации фильтрата культуральной жидкости F. oxysporum на тканевые культуры огурца in vitro
      • 3. 2. 2. Изучение влияния фузариевой кислоты на морфогенетическую активность тканей огурца при культивировании in vitro
      • 3. 3. Усовершенствование экспресс — оценки огурца на устойчивость к фузариозу
      • 3. 3. 1. Усовершенствование экспресс — оценки огурца на устойчивость к фузариозу, основанные на проращивании семян на фильтрате культуральной жидкости гриба F. oxysporum

      3.3.2. Усовершенствование экспресс — оценки огурца на устойчивость к фузариозу, основанные на культивировании проростков in vitro на селективных средах, содержащих фильтрат культуральной жидкости гриба F. oxysporum.

      3.3.3. Оценка огурца на устойчивость к фузариозу на искусственном инфекционном фоне.

      3.4. Коэффициенты корреляции признаков при сравнительной оценке методов на устойчивость к фузариозу.

      3.5. Биохимическая оценка растений огурца на основании колориметрического метода суммарного содержания фенольных соеди- 97 нений

      3.6. Экономическая эффективность.

      ВЫВОДЫ.

      ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В СЕЛЕКЦИОННОЙ ПРАКТИКЕ.

Актуальность темы

Одним из важных направлений селекции является создание форм, сортов и гибридов растений, устойчивых к биотическим факторам. Это обусловлено большими потерями урожая сельскохозяйственных растений, вызванными поражением их грибными, бактериальными, вирусными болезнями и повреждением вредителями. Снижение урожайности сельскохозяйственных культур до 30% является следствием широко распространенного и вредоносного заболевания — фузариоз (Коновалов Ю.Б., 1999). Наиболее перспективным способом защиты растений от фитопатогенов является селекция, создание комплексно устойчивых сельскохозяйственных культур. Однако продолжительность периода создания сортов и гибридов достигает 10 и более лет, при этом часто степень устойчивости растений к вредным организмам является недостаточной и далеко не всегда отвечает требованиям производства (Калашникова Е.А., 2003).

Решение большинства практических задач селекции во многом может определяться эффективностью вовлечения современных методов в селекционный процесс. Значительное место в решении этих задач занимает клеточная селекция, основанная на отборе клеточных популяций, устойчивых к селективному фактору, и регенерации из них растений (Поляков А.В., 2003; Калашникова Е. А., 2003).

При использовании методов клеточной селекции в нашей стране и за рубежом достигнуты значительные результаты: созданы устойчивые линии люцерны (Мезенцева О.Н., 1992) и льна (Поляков А.В., 2000; Пролетова Н. В., Поляков А. В., 2003) к фузариозутоматов (Нгуен Х.М., 1991) и моркови (Калашникова Е.А., Ипатова Н. В., 2004) к альтернариозукартофеля — к фи-тофторозу и бактериальной гнили (Калашникова Е.А., 2000). Благодаря достижениям клеточной селекции стало возможным получение in vitro расте-ний-регенерантов с измененными признаками, среди которых селекционер может отобрать устойчивые к болезням формы и при этом сохранить положительные черты исходного образца (Бутенко Р.Г., 1999). Однако, несмотря на определенные успехи, имеющиеся в селекции огурца, до настоящего времени не созданы сорта и гибриды, устойчивые к фузариозному увяданию. В связи с этим необходимо шире использовать в селекционном процессе методы in vitro.

Большая роль по увеличению урожайности огурца, улучшению качества и стабильности урожая отводится селекции. Снижение урожайности на 30.

— 50% является следствием широко распространенного и вредоносного заболевания — фузариоз. Ее вызывает ряд патогенов, основными из них являются грибы рода Fusarium: F. oxysporum, F. solani. Провоцируют болезнь резкие перепады температуры воздуха, переувлажнение почвы, пониженная температура. Источником инфекции являются компосты, рассадные смеси, недостаточно продезинфицированные грунты, растительные остатки, а также семена, где патоген находится в состоянии глубокого покоя. Причиной заболевания являются в основном фитотоксичные выделения возбудителя заболевания — несовершенного гриба F. oxysporum, вызывающие нарушения физиологического гомеостаза растений. Реже наблюдается трахеомикозная закупорка сосудов проводящей системы, приводящая к увяданию и гибели растений из — за нарушений водного обмена. (Будынков Н.И. и др., 1999; На-стенко Н.В. и др., 1994; Юрина О. В., 1986).

Традиционным методом селекции огурца на повышенную устойчивость к фузариозу является отбор устойчивых растений из гибридов и сортов в фазе первого настоящего листа на искусственном инфекционном фоне. Этот метод хорошо себя зарекомендовал, но он остается трудоемким и длительным.

Одним из путей решения этой проблемы является получение растений.

— регенерантов, характеризующихся повышенной устойчивостью к фузариозному увяданию. Их создание возможно с использованием методов биотехнологии.

Исходя из вышеописанных проблем, целью исследований являлось усовершенствование методов in vitro применительно к культуре огурца для повышения эффективности селекционного процесса этой культуры и создания форм, характеризующихся повышенной устойчивостью к фузариозу.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

— оптимизировать факторы, влияющие на морфогенетическую способность эксплантов огурца;

— разработать селективные условия для создания in vitro тканевых культур, устойчивых к фильтрату культуральной жидкости (ф.к.ж.) гриба Fusarium oxysporum и фузариевой кислоте (ф.к.);

— усовершенствовать элементы методики экспресс-оценки огурца на устойчивость к фузариозу, основанные на проращивании семян на ф.к.ж. гриба F. oxysporum и культивировании проростков in vitro на селективных средах, содержащих ф.к.ж. гриба F. oxysporum;

— оценить полученные от гибридов и линий формы огурца на устойчивость к фузариозу на искусственном инфекционном фоне с использованием традиционных методов.

Объект исследований — методы культуры ткани и органов в селекции огурца и методы селекции на устойчивость к фузариозу.

Предмет исследований — каллус, почки, побеги, сегменты растений, растения — регенеранты, семена огурца.

Научная новизна работы. Усовершенствована методика экспресс-оценки огурца на устойчивость к фузариозу, основанная на культивировании семян и растений на ф.к.ж. и селективной среде, содержащей ф.к.ж. гриба F. oxysporum в концентрации 10% в условиях in vitro, позволяющая в течение 12 и 14 суток оценить селекционный материал и выделить образцы с повышенной устойчивостью к фузариозу.

Усовершенствован метод клеточной селекции in vitro, основанный на ступенчатом культивировании эксплантов и трансплантов огурца на селективной среде, содержащей ф.к.ж. гриба F. oxysporum в концентрации 10% и на среде без селективного фактора, позволяющий получать каллусные линии растения огурца с повышенной устойчивостью к фитопатогену.

Оптимизированы условия получения растений-регенерантов огурца. Подобран режимы стерилизации семян и сегментов растений для введения в культуру in vitro. Определено соотношение фитогормонов в питательной среде для культивирования эксплантов и трансплантов.

Практическая ценность работы состоит в том, что оптимизирован процесс получения растений — регенерантов огурца in vitro на основе верхушечных почек, гипокотильных сегментов и каллуса. Получены растения — регенераты, характеризующиеся повышенной устойчивостью к фузариозу. Разработаны и опубликованы методические рекомендации «Получение растений огурца с повышенной устойчивостью к фузариозному увяданию методами in vitro» (2006 г.).

Обоснование и достоверность научных положений. Исследования выполнены по методикам, рекомендованным научными учреждениями страны. Все выводы и предложения подтверждены экспериментальными исследованиями, статистической обработкой полученных данных.

Апробация работы. Основные результаты экспериментальной работы по диссертации, выводы и предложения были доложены или представлены на III Международной конференции, посвященной памяти Б. В. Квасникова (Москва, 2003), Международной научно — практической конференции «Биотехнология овощных, цветочных и малораспространенных культур» (Москва, 2004), Международной научно — практической конференции «Проблемы научного обеспечения овощеводства юга России» (Краснодар, 2004), III Московском международном конгрессе «Биотехнология: состояние и перспективы развития» (Москва, 2005), Всероссийской научно-практической конференции «Биотехнология как инструмент сохранения биоразнообразия растительного мира» (Волгоград, 2006).

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

— элементы технологии получения растений-регенерантов огурца в условиях in vitro;

— система селективных условий для создания in vitro тканевых культур, устойчивых к ф.к.ж. гриба F. oxysporum и ф.к.;

— усовершенствованный метод экспресс-оценки огурца на устойчивость к фузариозу.

Публикации результатов исследований.

По результатам исследований по теме диссертации опубликовано 8 работ. Объем и структура диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, 3 глав, выводов, предложений для использования в селекционной практике, списка использованной литературы, содержащего 155 наименований, в том числе 37 иностранных авторов и приложений.

выводы.

1. Разработаны элементы технологии получения растений-регенерантов огурца в условиях in vitro, включающие оптимизацию условий стерилизации, выбор экспланта, усовершенствованную систему регенерации.

2. Стерилизация сегментов растений и семян, полученных in vivo, раствором гипохлорита натрия в концентрации 1% в течение 10 и 15 минут позволяет получать 85,0 — 97,5% стерильных эксплантов.

3. Культивирование тканей на среде MS, содержащей сахарозу в концентрации 30 г/л, агар -7 г/л и фитогормоны: 6-БАП — 0,1мг/л, а — НУК — 0,1 мг/л, сопровождается индуцированием геммогенеза у 54,2 — 75% эксплантов и трансплантов. Дальнейшее культивирование почек на аналогичной среде приводит к образованию жизнеспособных побегов, культивирование которых на безгормональной среде сопровождается хорошим укоренением (72,0 -88,0%).

4. Разработана система селективных условий для получения in vitro растений — регенерантов с повышенной устойчивостью к фильтрату культуральной жидкости гриба F. oxysporum и фузариевой кислоте, предусматривающая чередование культивирования тканей на селективной и неселективной средах.

5. Культивирование морфогенного каллуса на среде MS, содержащей сахарозу в концентрации 30 г/л, агар — 7 г/л, 6 — БАП — 0,1 мг/л, а — НУК — 0,1 мг/л и фильтрат культуральной жидкости в концентрации 10% или фузарие-вую кислоту в концентрации 10 мг/л в течение 3-х пассажей, позволяет получать растения-регенеранты огурца с повышенной устойчивостью к фуза-риозному увяданию.

6. Усовершенствованы элементы методики экспресс-оценки огурца на устойчивость к фузариозу, основанные на проращивании семян на ф.к.ж. гриба F. oxysporum и культивировании растений in vitro на селективных средах, содержащих ф.к.ж. гриба F. oxysporum в концентрации 10%. Устойчивость растений огурца, полученная при оценке на искусственном инфекционном фоне положительно коррелирует с устойчивостью, полученной в лабораторных условиях in vivo (г = 0,96), а также со всхожестью семян (г = 0,66 — 0,82) и длиной корней (г = 0,80 — 0,92) при оценке in vitro.

7. Проведение отборов на селективных фонах сопровождается повышением устойчивости селектируемого материала к фитопатогену (средний балл поражения снизился с 2,4 — 2,6 до 1,1 — 1,4) и снижением уровня образования фенолов (при двукратном отборе суммарное содержание фенольных соединений уменьшилось на 36% - 44%).

8. Усовершенствованные элементы методики экспресс — оценка позволяют в 2,1 — 2,5 раза сократить время необходимое для оценки селекционного материала и снизить расход семенного материала.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ К ИСПОЛЬЗОВАНИЮ В СЕЛЕКЦИОННОЙ ПРАКТИКЕ И ПРОИЗВОДСТВЕ.

1. Для получения растений-регенерантов огурца, рекомендуется осуществлять культивирование эксплантов и трансплантов на питательной среде MS, содержащей сахарозу в концентрации 30 г/л, агар — 7 г/л, 6 — БАП, аНУК в концентрации 0,1 мг/л. Сегменты растений и семена, полученные in vivo, стерилизовать раствором гипохлорита натрия в концентрации 1% в течение 10 и 15 минут;

2. Для проведения клеточной селекции и получения растений с повышенной устойчивостью к фузариозу рекомендуется чередование культивирования каллуса на селективной и неселективной средах. Концентрация селективного агента в среде составляет: для фильтрата культуральной жидкости 10%, для фузариевой кислоты -10 мг;

3. Для проведения оценки огурца на устойчивость к F. oxysporum рекомендуется культивировать семена на среде или проращивать их на фильтровальной бумаге, содержащих фильтрат культуральной жидкости в концентрации 10%.

Показать весь текст

Список литературы

  1. , А.О. Физиолого биохимические особенности взаимодействия томатов с Altemaria solani и селекция in vitro на устойчивость к альтернариозу: автореф. дисс. канд. биол. наук: ВИЗР, 1994 — 18 с.
  2. , Б.Г. Клеточно тканевая культура огурца / Б. Г. Анненков, А. И. Ступина // Сиб. Вестник с. — х. Науки, 1997. — N 3 — 4. — С. 14 — 20.
  3. , Н.Н. Токсины фузариума в культуре in vitro / Н. Н. Балашова, О. Б. Дараков, Н. Е. Гордей, А. И. Суржиу // Изв. АН МССР. Сер. биол. и хим. Наук, 1986. № 5. — С. 3 — 6.
  4. , Г. А. Токсические метаболиты грибов и неспецифические ми-тотоксины / Г. А. Белякова, JI.M. Левкина // Миколог, и фитопатол, 1992. Т. 26. — Вып. 3. — С. 183 — 188.
  5. , Г. А. Токсичность КФ грибов, вызывающих пятнистость на хлопчатнике / Г. А. Белякова, Б. С. Ермолинский, С. И. Свиридов // Вестник Московского ун-та, 1991. -№ 4. С. 56 — 61.
  6. , О.А. Определение фитотоксичной активности культур микросеопических грибов / О. А. Берестецкий // Методы экспериментальной микологии. Киев, 1973. — С. 165 — 175.
  7. , И. Методы определения болезней и вредителей сельскохозяйственных растений / И. Беттхер, Т. Ветцель, Ф. В. Древе, X. Кеглер, К. Наумани, Б. Фрайер, К. Фрауэнштайн, Э. Фукс // Москва: Агропромиз-дат, 1987.-е. 79−130
  8. , В.И. Фузарии / В. И. Билай // Наукова думка. Киев: 1977. — 360 с.
  9. , В.И. Основы общей микологии / В. И. Билай // Вища школа. -Киев: 1986. — 14 с.
  10. , Н.К. Простой хороший огурец / Н. К. Бирюкова, В. Леунова // М. Россия молодая, 1996. № 2. — С. 91 — 92.
  11. , Н.К. Перспективные гибриды огурца селекции ВНИИО / Н. К. Бирюкова // М.: Мытищи, Семеновод, 2001.
  12. , А.В. Метаболиты штаммов Fusarium oxysporum / А. В. Боровков, А. О. Барестецкий // Микология и фитопатология, 1983. т. 17. -вып. 4. — С. 349 — 358.
  13. , Н.И. Фузариозное увядание огурца в защищенном грунте / Н. И. Будынков, Е. Ф. Никифорова, В. Н. Юваров // М.: Гавриш, 1999. N 6.-С. 16−17.
  14. , М.С. Новые овощные культуры России / М. С. Бунин. М.: ФГНУ «Росинформагротех», 2002. — С. 190 — 208.
  15. , Р.Г. Клеточная селекция картофеля / Р. Г. Бутенко, JI.M. Хромова, Г. А. Седнина // Сельскохоз. Биология / М., 1983. № 11. — С. 347 -352.
  16. , Р.Г. Культура изолированных протопластов, клеток и тканей в решении задач физиологии растений / Бутенко Р. Г. // Новые направления в физиологии растений / М., 1985. С. 16 — 32.
  17. , Р.Г. Методическими указаниями по получению вариантных клеточных линий и растений у разных сортов картофеля / Р. Г. Бутенко, JI.M. Хромова, Г. А. Седнина // М., 1984.
  18. , Р.Г. Биотехнология растений: культура клеток / Р. Г. Бутенко // М.: Агропромиздат, 1989. 123 с.
  19. , Р.Г. Клеточная инженерия / Р. Г. Бутенко, М. В. Гусев, А. Ф. Киркин // Биотехнология / М.: Высшая школа, 1987. 128 с.
  20. , Р.Г. Биотехнология клеток высших растений in vitro и биотехнологии на их основе / Р. Г. Бутенко // М., ФБК Пресс, 1999.-159 с.
  21. , Р.Г. Культура изолтрованных тканей и физиология морфогенеза / Р. Г. Бутенко // М., 1964.
  22. , Н.И. Проблемы происхождения, географии, генетики, селекции растений, растениеводства и агрономии / Н. И. Вавилов // Избр. тр. /М., 1965. т. V.- 786 с.
  23. Ван дер Планк Я. Проблемы иммунитета культурных растений / Ван дер Планк Я // М.: Колос, 1972. 254 с.
  24. Ван дер Планк Я. / Проблемы иммунитета культурных растений // М.: Колос, 1963. 254 с.
  25. , С.В. Практические аспекты применения достижений биотехнологии в рстениеводстве / С. В. Васильев // Рекомбинационная селекция растений Сибири / Новосибирск, 1989. С. 92 — 100.
  26. , Д.Д. Пути использования иммунитета растений / Д. Д. Вердеревский // Селекция и семеноводство, 1968. 3. — с. 12 -13.
  27. , С.Т. Отбор клеточных линий клевера лугового, устойчивых к КФ Fusarium oxysporum / С. Т. Германович // Материалы конф. Молодых ученых и аспирантов / Новые идеи в растениеводстве, и пути их реализации / М., 1991.- С. 90−91.
  28. , Г. Т. Селекция и семеноводство овощных и плодовых культур / Г. Т. Герматюк, И. А. Шевцов, В. А. Кравченко, В. П. Роенко, A.M. Молоцкий // Киев, 1989. 318 с.
  29. , Э.Э. Основы фитопатологической оценки в селекции растений / Э. Э. Гешеле // М.: Колос, 1978. 208 с.
  30. , М.М. Цели и методы селекции зеленных и пряно вкусовых овощных культур / М. М. Гиренко, Ю. И. Мухонова // Бюллетень ВИР, Д., 1985.- вып. 48. — С. 17−19.
  31. , B.C. Оценка устойчивости к действию КФ грибного патогена в культуре незрелых зародышей / B.C. Гирко, К. Г. Волощук // С. х. биология. — сер. Биология растений / 1993. — № 9. — С. 62 — 70.
  32. , С.А. Генетическая изменчивость клеток растений при культивировании / С. А. Гостимский // Успехи совр. Генетики, 1977. № 14 С. 48−63.
  33. , Е.А. Получение газонных трав, толерантных к засолению и ионам меди, методами биотехнологии: автореф. дисс.. канд. биол. наук: МГУ, 2003. 20 с.
  34. , Ю.Ю. Станет ли клеточная инженерия новой технологией в селекционном процессе? / Ю. Ю. Глеба // Импакт: наука и общество, 1987.- № 2. С. 59−67.
  35. , Н.Н. Продолжая дело великого ученого / Н. Н. Гусева // Защита растений, 1987. № 12. — С. 16.
  36. Данлади Дада Кута. Маркеры сортовой устойчивости к пирикуляриозу в каллусной культуре риса: автореф. диссерт. канд. биол. наук: М., 2000.-21 с.
  37. Данлади Дада Кута. Маркеры сортовой устойчивости к пирикуляриозу в каллусной культуре риса: автореф. диссерт. канд. биол. наук: М., 2000.-21 с.
  38. , Р.А. Изолирование и поддержание каллусных и суспензионных культур клеток / Р. А. Диксон // В кн.: Биотехнология растений: культура клеток. Пер. с англ. В. И. Негрука — под ред. Р. Г. Бутенко. — М.: М.В. О. Агропромиздат, 1989. — С. 33 — 51.
  39. , Б.А. Методика полевого опыта (с основами стат. обработки результатов исследований) / Б. А. Доспехов // М.: Колос, 1979. 416 с.
  40. , И.А. Методы экспериментальной микологии / И. А. Дудка, С. П. Вассер // Под ред. В. И. Билай. Киев: Наукова думка, 1982. — 364 с.
  41. , М.Н. Фенольные соединения / М. Н. Запрометов // М.: Наука, 1993.-272 с.
  42. М.Н. Колориметрическим метод с использованием реактива Фолина Дениса / М. Н. Запрометов // М.: Наука, 1974.
  43. , О.С. Клеточная селекция на инфекционном фоне для получения фузариозоустойчивых форм томатов / О. С. Иванова // Материалы Всесоюз. конф. по с/х биотехнологии / Целиноград, 1991. С. 97 — 98.
  44. , Н.Г. Разработка селективного фактора для проведения клеточной селекции на устойчивость к Corynebanium sepedorium / Н. Г. Иванова // Использование клеточной технологии в селекции картофеля /М., 1987-С. 26−28.
  45. , С.А. Культура in vitro биотехнологический прием для создания фузариозоустойчивых форм люцерны / С. А. Игнатова, С.Ф.
  46. , Т.К. Овсюк // Тез. докл. Всесоюз. Конф. Применение биотехнологий в животноводстве, растениеводстве и ветеринарной медицине/М., 1988.-С. 153 155.
  47. , П. Р. Повышение устойчивости селекционных сортов льна-долгунца к фузариозу в процессе первичного семеноводства / П. Р. Ильина // Тр. ВНИИЛ. вып. 5. — 1958. — с. 33
  48. , Е.А. Клеточная селекция растений на устойчивость к грибным болезням: Дис. Док. Биол. наук: М.: ТСХА, 2003. 279 с.
  49. , Е.А. Клеточная селекция пшеницы на устойчивость к септориозу / Е. А. Калашникова // Сельскохозяйственная биотехнология /М.: Воскресенье, 2000. Т. -1. — С.61 — 71.
  50. , Н.В. Клональное микроразмножение растений / Н. В. Катаева, Р. Г. Бутенко // М.: Наука, 1983. 97 с.
  51. Кирай, 3. Методы фитопатологии / 3. Кирай, 3. Клемент // М.: Колос, 1974.- 145 с.
  52. Кирай, 3. Результаты и перспективы использования биотехнологии в растениеводстве и защите растений / 3. Кирай, 3. Барабаш // Агропром. 1990.-№ 3.-с. 7−10.
  53. , Р.И. Интенсивное растениеводство: проблемы иммунитета / Р. И. Кирюхина // Вестник с. х. науки, 1987. — № 5. — 36 с.
  54. , И.Г. Клеточная селекция клевера лугового на устойчивость к фузариозу / И. Г. Кирьян, В. В. Мазин // Тез. докл. 1 Всесоюзного симпозиума «Новые методы биотехнологии растений» / Пущино, 1991.
  55. , Ю.Б. Селекция растений на устойчивость к болезням и вредителям / Ю. Б. Коновалов // М.: Колос, 1999. 135 с.
  56. В.В. Устойчивость сортов пшеницы к фузариозу и методы ее определения / В. В. Котляров // Селекция и семеноводство, 1986. № 6. -51 с.
  57. , Т.В. Вирулентность местной популяции возбудителя ржавчины льна долгунца / Т. В. Крылова // Сб. трудов ВНИИЛ, 1994. — вып.28.29.-С. 47−56.
  58. Куку шина, JI.H. Изучение оценки регенерантов картофеля по устойчивости к фитофторе in vivo и in vitro / J1.H. Кукушина, A.A. Дорошенко // Использование клеточных технологий в селекции картофеля / М., 1987.-С. 52−56.
  59. , В.А. Изменчивость растииельного генома в процессе дедиффе-ренцировки и каллусообразования in vitro / В. А. Кунах // Физиология растений, 1999. т. 46. — № 6. — С. 919 — 929.
  60. Курчакова, J1.H. Использование токсичности культуральной жидкости гриба Fusarium для отбора здоровых каллусов льна / J1.H. Курчакова // Селекция, семеноводство и агротехника возделывания льна долгунца /Торжок: ВНИИЛ, 1991.
  61. , Л.А. Подходы к разработке технологии массовой регенерации растений in vitro / Л. А. Кучеренко // Биология культивируемых клеток и биотехнология растений / М.: Наука, 1991. С. 232 — 242.
  62. , Г. Использование культуры тканей и органов в селекции растений и производстве посадочного материала / Г. Лейке, Р. Лабес, К. Эр-тель, М. Петерсдорф // Пер. с нем. и предисл. Ю. Л. Гужова / М.: Колос, 1980. 77 с.
  63. Лети Джое. Получение форм пшеницы (Triticum aestivum) устойчивых к грибу Septoria nodorum в условиях in vitro: автореф. дис. канд. биол. наук: М., 1998.-22 с.
  64. Лети Джое, Влияние гриба S. nodorum и его метаболитов на прорастание семян пшеницы / Лети Джое, Е. А. Калашникова // Известия ТСХА, 1996.-Вып. 4.-С. 150−155
  65. , С.С. Сорта и гибриды овощных, бахчевых и цветочныхкультур селекции ВНИИО / С. С. Литвинов // Каталог/ М., 2002 99 с.
  66. , А.Н. Использование жидких питательных сред для получения моноспоровых культур грибов / А. Н. Лихачев // Микология и фитопатология, 1994. Т. 28. — Вып. 5. — С. 14 -16.
  67. , Л.А. Каллусо и побегообразование у различных форм гороха Pisum sativum L. в условиях in vitro / Л. А. Лутова, Е. К. Забелина // Генетика, 1988. — т. XXIV. — № 9. — С. 1632 — 1640.
  68. , Н.В. Методы in vitro для ускорения м облегчения селекционной работы с растениями огурца (Cucumis sativus) / Н. В. Маркова: ав-тореф. дисс. канд. биол. наук: НИИОХ, 1991 26 с.
  69. , И.М. Клеточная селекция картофеля на устойчивость к патогенам / И. М. Маруненко, А. А. Кучко // Междунар. Конф. «Биология культивируемых клеток и биотехнология» / Новосибирск, 1988. Ч. 1. 169 с.
  70. , И.М. Отбор генотипов, устойчивых к мокрым гнилям картофеля, методами клеточной селекции / И. М. Маруненко // Создание ииспользование исходного материала в селекции картофеля / Киев, 1992. -С. 62−70.
  71. , С.Е. Получение устойчивых к корневым гнилям растений люцерны с использованием методов культуры каллусов и клеток / С. Е. Масленников // Соврем, достижения биотехнологии / Ставрополь, 1995.-С. 24−25.
  72. , О.Ю. Использование тканевых и клеточных культур в селекции на устойчивость к фитопатогенам / О. Ю. Мезенцева // Селекция и семеноводство, 1990. № 4. — С. 59 — 62.
  73. , О.Н. Получение клеточных линий пшеницы, устойчивых к токсинам фузариоза / О. Н. Мезенцева // Доклады научно практич. Конф. «Ученые Нечерноземья — развитию сельского хозяйства» / М., 1991.-С. 179- 183.
  74. , О.Н. Создание исходного селективного материала люцерны и пшеницы устойчивых к фузариозу методом биотехнологии: автореф. дис. канд. биол. наук: М.: ТСХА, 1992. 15 с.
  75. , С.А. Методы культуры тканей в фитопатологии: грибы / С. А. Миллер // Биотехнология растений: культура клеток. Пер. с англ. В. И. Негрука. — Под ред. и с предисл. Р. Г. Бутенко / М.: ВО Агропромиздат. 1989.-С. 259−274.
  76. , О.А. Токсины фитопатогенных грибов / О. А. Монастырский // Защита и карантин растений, 1996. № 3. — С. 5 — 7.
  77. , Г. С. Основы сельскохозяйственной биотехнологии / Г. С. Муромцев, Р. Г. Бутенко, М. И. Прокофьев // М.: Агропромиздат, 1990. -384 с.
  78. , Н.В. Разработка способа предварительной оценки растений огурца на устойчивость к фузариозу / Н. В. Настенко, Н. А. Шмыкова, Н. Н. Балашова, В. П. Кушнерева // 1994. С. 74 — 77.
  79. Нгуен Хонг Минь Селекция in vitro на устойчивость к Fusarium oxysporum f. Sp. Lycopersici у томатов: автореф. дисс. канд. биол. наук /1. Минск, 1991.-21 с.
  80. , Т.Р. Токсины фитопатологических грибов и их роль в развитии растений / Т. Р. Никуленко, Д. И. Чкаников // М.: Агропромиздат, 1987.
  81. Озерецковская, O. J1. Проблемы специфического фитоимунитета / O. J1. Озерецковская //Физиология растений, 2002 т.49 — № 1 .-С. 1−7.
  82. Основные результаты научной деятельности ВНИИ фитопатологии за 1996−2000 гг.
  83. , В.М. Клеточная селекция клевера и люцерны на устойчивость к фузариозному увяданию / В. М. Плащев // Гаметофитная и защитная селекция растений / Кишенев, 1987. С. 176 — 178.
  84. А.В. Усовершенствование селекционного процесса льна-долгунца (Linum usitatissimum L.) на основе использования биотехнологических методов: автореф. дисс. д-ра биол. наук / РАСХН, 1998. -50 с.
  85. , А.В. Биотехнология в селекции льна / А. В. Поляков // Тверь: Формат, 2000. 180 с.
  86. , Т.Т. Вопросы методики выявления, создания и повышения болезнеустойчивости льна / Т. Т. Попова // Труды ВНИИЛ / Калинин: ВНИИЛ, 1958.-Вып
  87. , Ж.Г. Воздействие токсина Fusarium oxysporum на прорастание пыльцы сои / Ж. Г. Простакова, А. И. Бронштейн, JI.H. Показань-ева // М.: МСХА, 1991, С. 78 87.
  88. , В.А. Использование методов биотехнологии в получении исходных форм моркови, устойчивых к патогенному грибу Alternaria radicina / М., Dr. Et. Е.: автореф. дис. канд. биол. наук / М., 2001 -18 с.
  89. , В.А. Использование методов биотехнологии в получении форм моркови, устойчивых к альтернариозу / В. А. Раскалиева, Е. А. Калашникова // Сельскохозяйственная биотехнология / М.: Воскресенье, 2001.-т. 2.- С. 81−91.
  90. , В. Биологичен эфект на културални филтрати от различии изо-пати на Alternaria solani върху растение доматени растение in vitro / В. Родева, И. Станчева // Биотехнология, 1990. Т. 4. — № ¾. — С. 27 — 30.
  91. , Б.А. Биохимия и физиология иммунитета растений / Б. А. Рубин, Е. В. Архиховская, В. А. Аксенова // М.: Высшая школа, 1975.
  92. , O.JI. Новая форма проявления фузариозного увядания огурца в защищенном грунте / O. J1. Рудаков, Н. И. Будынков, Е. Ф. Никифорова // АГРО XXI, 1998. -N 10. С. 9 -10.
  93. , А.Я. Инфекция семян хлебных злаков / А. Я. Семенов // М.: Колос, 1984.-94 с.
  94. , В.А. Биотехнология растений / В. А. Сидоров // Клеточная селекция / Киев.: Наукова Думка, 1990. 360 с.
  95. , Т.Г. Исследование механизмов действия токсических веществ из гриба Bipolaris sorokihiaki на ункционирование фотосинтетического аппарата пшеницы / Т. Г. Симонян, Т. Ш. Адешвили // Тез. докл.
  96. Всесоюз. Научно-техн. Конф. «Применение биотехнологии в животноводстве, растениеводстве и ветеренарной медецине» / М., 1988. С. 153 -155.
  97. , JI.A. Методы создания форм клевера лугового с повышенной устойчивостью к раку / JI.A. Солодкая, Е. Ю. Новоселова // Сборн. Науч. Трудов ВНИИ кормов, 1989. Вып. 42. — С. 57 — 65.
  98. , Н.В. Методические указания по селекции и семеноводству огурцов в защищенном грунте / Н. В. Турбин // М., 1976. С. 17−21.
  99. , Ю.Н. Действие токсической фракции веществ гриба на хлоропласта яровой пшеницы / Ю. Н. Фадеев, Т. Ш. Адеишвили // Достижения науки и техники АПК, 1990. № 1. — С. 19 — 20.
  100. , JI.B. Динамика клеточных популяций в культуре ткани Vicia tabacum В кн.: Культура клеток растений / JI.B. Фролова, З. Б. Шамина //Труды II Всесоюзн. Конф./Киев:Наук. Думка, 1978.-С.27−32.
  101. , Ю.А. Сохранение инфекционных свойств возбудителя ризокто-ниоза риса при культивировании на искусственных питательных средах / Ю. А. Хотин, Т. М. Полякова // Микология и фитопатология, 1991. Т. 25.-Вып. 1.-С. 80−84.
  102. , З.Б. Генетическая изменчивость растительных клеток in vitro -В кн.: Культура клеток растений / З. Б. Шамина // Труды II Всесоюзн. Конф. / Киев: Наук. Думка, 1978. С. 80 — 93.
  103. , И.Ф. Особенности регенерации растений пшеницы из каллусной ткани выращенной на фоне фитотоксинов / И. Ф. Шаяхметов // 1 симпозиум Новые методы биотехнологии растений / Пущино, 1991.
  104. , И.Ф. Биологически активные метаболиты из культураль-ного фильтрата Fusarium oxysporum в связи с клеточной селекции злаков на устойчивость к фитопатогенам / И. Ф. Шаяхметов // Микология и фитопатология, 2001. — № 6. — С. 13 -14.
  105. , И.Ф. Особенности каллусообразования и регенерации растений в культуре незрелых зародышей яровой твердой пшеницы / И. Ф. Шаяхметов, Ф. К. Иштерякова, М. М. Хабирова, // Сельскохозяйственная биология, 1988. № 4. — С. 125 — 130.
  106. И.Ф., Биотехнология растений / И. Ф. Шаяхметов // УФА: Рио Баш ГУ, 2004. С. 6 — 99.
  107. , B.C. Новая биотехнология в селекции и растениеводстве / B.C. Шевелуха // Вестник с / х науки, 1986. № 2. С. 25 31.
  108. , B.C. Сельскохозяйственная биотехнология / B.C. Шевелуха //Москва, 2003.- 470 с.
  109. , B.C. Сельскохозяйственная биотехнология / B.C. Шевелуха //Москва, 2003.- 470 с.
  110. , С. Рост растений и его регуляция в онтогенезе / B.C. Шевелуха // М.: Колос, 1992. 594 с.
  111. , B.C. Сельскохозяйственная биотехнология / B.C. Шевелуха, Е. А. Калашникова, Е. С. Воронин // М.: Высшая школа, 1994.-18 с.
  112. , Ф.П. Повышение устойчивости сортов к болезням / Ф. П Шевченко // Селекция и семеноводство, 1950. 8. — С. 19 — 20.
  113. , А.П. Условия внешней среды и урожайность огурца в открытом грунте / А. П. Шкларов, // «Овощеводство». Сборник научных трудов/Минск, 1998.-вып. 10.- С. 107- 109.
  114. , О.В. Селекция огурца на устойчивость к болезням / О.В. Юри-на // Плодоовощное хозяйство, 1986. Т — 3. — С. 36 — 37.
  115. , А.А. Перспектива фитопатологических исследований в отношении болезней льна / А. А. Ячевский // Сб. трудов I совещания по селекции льна и конопли / JL, 1929.
  116. Allard, R.W. Principles of Plant Breeding / R.W. Allard // John Wilei. New York, 1960.-P. 11−50.
  117. Bar, H. Untersuchungen iiber die Wirkungsweise der Fusarinsaure / H. Bar // Phytopathol. Z., 1963. 48. — P. 149 — 177
  118. Barakat, M.N. Plant regeneration from protoplast-derived tissues of Linum usitatissimum L. (flax) / M.N. Barakat, E.C. Cocking // Plant Cell Rep, 1985.-V. 4.-P. 164- 167.
  119. Barker, H.D. Study of wilt resistance in Flax / H.D. Barker // Minn. Apr. Exnt. Sta Tech. Bui. 20,1923
  120. F.N. / F.N. Briggs, P.F. Knowles // 1967
  121. Daub, M.E. Tissue culture and the selection of resistance to patogens / M.E. Daub // Ann. Rev. Phitopathol, 1986. V. — 24. — P. 156 — 186.
  122. Deadon, W.R. Expressed resistance to black shankamong tobacco callus cultures / W.R. Deadon, G.J. Keyes, G.B. Collins // Theer. And Appl. Genet., 1982.-V.-63. P. 65−70.
  123. Durin, R.D. The biochemistry of fungal and bacterial toxins and their modes of action / R.D. Durin // Biochemistry Plant Pathology. Ed J. A. Callow, 1983.-P. 137- 162.
  124. Foroughi Wehr, B. Pflanzenshuts / B. Foroughi Wehr, K. Stalle, D. Nachr // 1985.-V. 37.-P. 170- 173.
  125. R., / R. Johnson, C.N. Law //1975
  126. Haberlach, G.T. Modification of Disease Resistance of Tobacco Callus Tissues by Cytokinins / G.T. Haberlach, A.D. Budde, L. Sequeira, J.P.
  127. Helgeson // Plant Physiol, 1978. V. 62. — № 6. — P. 522 — 525.
  128. Hartman, G.L. Selection of alfalfa cell lines and regeneration of plant resistant to the toxin (S) produced by Fusarium oxsisporum / G.L. Hartman, T.Y. McCoy // 1984. vol. 34. — 31. 2. — P. 183 — 194.
  129. Hedin, P.A. Biotechnology for Crop Protection / P.A. Hedin, J.J. Menn // Washington. Amer. Chem. Soc, 1988. 379 p.
  130. Yoder, O.C. Toxins in Plant Disease / O.C. Yoder // New York, 1981. P. 45 -77.
  131. Lupotto, E. Z. Pflanzenphysiology / E. Z. Lupotto // 1983. V. 111. -.95p.
  132. Ludwig, R.A. Toxin production by Helminthosporium sativum P.K. et B. fnd its significance in disease development / R.A. Ludwig // Can. J, 1957. -Vol. 35.-№ 3.-P. 291 -304.
  133. Mirocha, T.J. Mycotoxins ansthe Fungi that produce them / T.J. Mirocha // (Proc. of Amer. Phytophthora., 1986.
  134. McCoy, T.J. Cytogenetic analysis of plants regenerated from oat (Avena sativa) tissue cultures: high frequency of partial chromosome loss / T.J. McCoy, R.L. Phillips, H.W. Rines // Can. J. Genet. Cytol, 1982. V. 24. — P. 37−50.
  135. Murashige Т., Skoog F. A. revised medium for rapid growth and biossays with tobacco tissue culture // Physiol. Plant, 1962. V. 15. — № 13. P. 473 -497.
  136. Chawa H.S. Thea. Appl. Gen. / H.S. Chawa, G. Wenzel // 1987 v. 74. p. 841 -845.
  137. Chawa H.S. Thea. Appl. Gen. / H.S. Chawa, G. Wenzel // 1987 v. 74. p. 841 -845.
  138. Nichterlein, K. Genotypic and exogenous factors affecting shoot regeneration from anther callus of linseed (Linnum usitatissimum L.) / K. Nichterlein, H. Umbach, W. Friedt // Institute of Agronomy and Plant Breeding, Giessen. -1991.-P. 125 128.
  139. R.A. / R.A. Robinson // 1976
  140. Scowcroft, W.R. Use of Tissue Culture and Protoplasts in Plant Pathology / W.R. Scowcroft, P.F. Larkin, R. Brettell // Syndey, New York, 1983. P. 139- 162.
  141. Chawa H.S. Thea. Appl. Gen. / H.S. Chawa, G. Wenzel // 1987 v. 74. p. 841 -845.
  142. Smith, G.A. Biotechnology and Ecology of pollen / G.A. Smith // New York, 1986.-P. 83 -88.
  143. E.C. / E.C. Stakman//1954
  144. Toyoda, Y. Phytopathol / Toyoda Y., et. al. // Soc. Janan, 1984. V. 50. — P. 538 — 540.
  145. Turner, W.B. Fungal metabolities / W.B. Turner // Lond., Acad. Press, 1971. P. 29−36.
  146. Wheeler, H. Plant. Dis. Rep / H. Wheeler, A.S. Williams, L.G. Young // 1971.-vol. 55, 8.-P. 667−671
  147. Van Der Plank J.E. / J.E. Van Der Plank //1963
  148. Vocho, H. Induced mutations and genetic correlations between scab risistance and sole agronomic characters in wheat / H. Vocho, F. Hirai // GTh International Wheat Genetics Semposiun. Japan, 1983. — 39 p.
Заполнить форму текущей работой