Продуктивные и физиолого-биохимические качества трансгенных свиней

Возникновение и бурное развитие биотехнологии и ее основных ветвей клеточной и генной инженерии создает возможности более быстрого и радикального воздействия на организм животных, расширения и ускорения их селекции. Основной целью работ по генной инженерии в животноводстве является создание и изучение уникальных племенных животных с измененной и устойчивой наследственностью, используемых в больших популяциях для их совершенствования, повышения продуктивности и качества продукции.

Наступает совершенно новый этап в развитии животноводства, когда традиционный ассортимент продуктов животноводства будет постепенно расширятся за счет продуктов биотехнологии.

Включение чужеродных последовательностей ДНК в геном организма — реципиента с последующей устойчивой их наследуемостью в ряде поколений обеспечивает получение так называемых трансгенных животных (122). Включившись в геном данного организма, такие чужеродные последовательности, называемые трансгенами, устойчиво наследуются в ряде поколений. Весьма важное значение имеет тот факт, что трансгены часто экспресируются и при этом вызывают изменения в системе тканевой специфичности, физиологических реакциях, а иногда и во всей программе развития организма (102).

В последнее время развернут широкий фронт исследований по созданию трансгенных животных с конечной целью повышения продуктивности, использования их как продуцентов биологически-активных веществ, получения трансгенных животных с повышенной устойчивостью к инфекционным заболеваниям, применения этих животных в качестве биомоделей в медицине, а также для ксенотрансплантации органов и тканей (71, 124).

Многочисленные успешные работы Палмиттера, Гордона, Брема и ряда других исследователей по получению трансгенных животных, как лабораторных, так и сельскохозяйственных, продемонстрировали широчайшие возможности использования метода генетической трансформации генома организма (94, 118,100).

Опыты по получению и изучению трансгенных животных проводятся во многих странах мира. Но несмотря на многочисленность и многообразие этих исследований, многие факторы, определяющие эффективность экспрессии чужеродных генов в клетках целостного организма остаются недостаточно изученными. В связи с этим, изучение экспрессии введенных генов и изучение их взаимосвязи с физиолого-морфологическими признаками у трансгенных свиней является актуальной задачей как в биотехнологии, так и селекции сельскохозяйственных животных.

Совместными усилиями российско-германских ученых (Всероссийский научно-исследовательский институт животноводства, РоссияИнститут животноводства и генетики, ветеринарно-медицинский университет, г. Вена) были получены свиньи, трансгенные по рекомбинантным генным конструкциям WAP/hGH, mMTl/hGRF и mMTl/hGRF + WAP/hGH. Рекомбинантная генная конструкция mMTl/hGRF содержит структурную часть гена релизинг фактора гормона роста человека (hGRF) и металлотионеиновый промотор 1 мыши (mMTl). Конструкция WAP/hGH состоит из структурной части гена гормона роста человека (human growth hormon, hGH) и промотора гена кислого белка сыворотки молока мышей (whey acidic protein, WAP) длиной 2,6 kb.

Получение этих животных выдвинуло на первый план необходимость изучения физиолого-биохимических процессов и хозяйственно-ценных признаков и их особенностей у вышеприведенных трансгенных свиней четвертого возрастного поколения.

Цель и задачи исследований:

Целью исследований было изучение физиолого-биохимических процессов и выявление их особенностей в организме свиней, с интегрированными в геном рекомбинантными генными конструкциями WAP/hGH, mMTl/hGRF и mMTl/hGRF + WAP/hGH четвертого возрастного поколения.

Для достижения указанной цели, были поставлены следующие задачи:

1) определить динамику среднесуточных привесов при откорме свиней с 50 до 160 кг живой массы;

2) изучить переваримость основных питательных веществ, обмен азота, углерода и энергии при живой массе 100 кг;

3) вывить особенности биохимических процессов в организме трансгенных свиней;

4) изучить особенности иммунологического ответа организма трансгенных свиней на раздражение возбудителями острых кишечных заболеваний.

5) определить мясо-сальную продуктивность при убое свиней в 160 -170 кг живой массы, морфологический состав туш, развитие внутренних органов;

6) изучить цито-морфологические особенности органов и тканей трансгенных свиней;

7) выявить корреляционную зависимость высокого уровня соматотропина в крови с другими физиологическими и хозяйственно-полезными признаками.

Научная новизна работы.

Впервые выявлены особенности физиолого-биохимических процессов, мясо-сальной продуктивности и качества туш, цито-морфологических показателей органов и тканей, иммунного ответа при вакцинации бактериальной вакциной, в организме свиней, с интегрированными в геном конструкциями WAP/hGH и mMTl/hGRF + WAP/hGH у четвертого возрастного поколения.

Проведен анализ корреляционной зависимости высокого уровня соматотропина в крови трансгенных свиней с другими физиологическими и хозяйственно-полезными признаками.

Практическая значимость работы.

1. Определены биологические особенности развития трансгенных свиней.

2. Установлены особенности гематологических показателей трансгенных свиней.

3. Изучены особенности иммунологического ответа организма трансгенных свиней на раздражение возбудителями острых кишечных заболеваний.

4. Определена мясо-сальная продуктивность при убое свиней в 160 -170 кг живой массы, морфологический состав туш, развитие внутренних органов.

5. Изучены цито-морфологические особенности органов и тканей трансгенных свиней.

6. Выявлена корреляционная зависимость высокого уровня соматотропина в крови с другими физиологическими и хозяйственно-полезными признаками.

Положения, выносимые на защиту.

1. Интегрированные в геном свиней, изученные рекомбинантные конструкции, эффективно экспрессируют, что проявляется по динамике увеличения собственного гормона роста животных, в сравнении с этим показателем животных-сверстников.

2. Секреция собственного гормона роста у трансгенных свиней способствовала повышению уровня среднесуточных привесов и лучшему иммунному ответу при вакцинации.

3. У трансгенных животных по рекомбинантной генной конструкции WAP/hGH и рекомбинантной генной конструкции mMTl/hGRF происходит улучшение мясо-сальных качеств.

4. У дитрансгенных животных происходит ухудшение мясо-сальных качеств в сравнении этими показателями животных-сверстников.

5. Трансгенные свиньи по рекомбинантной генной конструкции WAP/hGH и рекомбинантной генной конструкции mMTl/hGRF являются желанными для целей селекции, а трансгенные по обеим генным конструкциям одновременно не пригодны для селекции. 9.

Апробация работы.

Материалы диссертации были представлены на заседании отдела биотехнологии ВИЖа и на 48-й конференции аспирантов и молодых ученых «Вопросы интенсификации животноводства», Дубровицы, 1999.

По материалам диссертации опубликовано две работы.

Структура и объем работы:

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, обсуждения, выводов, практических предложений, списка использованной литературы. Диссертация изложена на 163 страницах машинописного текста, включает 50 таблиц, 5 рисунков, 5 фотографий.

Список литературы

включает 125 источников, в том числе 65 на иностранных языках.

1. Аршавский И. А. /Биология периода новорожденности у млекопитающих. В кн.: Биологические основы периода новорожденности.// Москва, Наука, 1968, с.7−16.

2. Балаболкин М. И. Секреция гормона роста в норме и патологии. М.:Медицина, 1978. 173 с.

3. Балаболкин М. И. Эндокринология. М.:Медицина, 1989. 416 с.

4. Берман В. М. /Возрастная реактивность в инфекционных процессах. В кн.: Вопросы возрастной реактивности в инфекционных и иммунологических процессах.// Л., Медицина, 1955, с.5−12.

5. Богатырев А. Н., Эрнст Л. К. Генная инженерия сельскохозяйственных животных мощный рычаг селекции XXI века // Генноинженерные сельскохозяйственные животные /Сб. науч. тр. — 1995. Вып.1. С. 3−13.

6. Брем Г., Зиновьева Н. А., Эрнст Л. К. Генные формы новый путь производства биологически активных протеинов трансгенными животными // Сельскохозяйственная биология.- 1993. №.6 — С.3−27.

7. Брем Г., Эрнст Л. К., Андропов Л. А. и др. Трансгенные свиньи (mMTl-hGRF): оценка качества туш и химического состава мяса при убое животных // Генноинженерные сельскохозяйственные животные /Сб. науч. тр. 1995.-Вып.1.-С. 26−33.

8. Брондз Б. Д. /Иммунологическое распознавание и реакции клеточного иммунитета.// Успехи современной биологии, 1972, т.73, вып.1, с.42−58.

9. Газарян К. Трансгенные животные: перспективы использования животноводстве // Сельскохозяйственная биология.- 1988. №.2. С.31−39.

10. Герберт У. Д. /Ветеринарная иммунология.//М.: Колос, 1974.

11. Гольдман И. Л., Башкеев Е. Д., Гоголевский П. А. Прогрессивная технология получения трансгенных овец // Докл. РСХА 1992. №.9−10.-С.25−30.

12. Гольдман И. Л., Разин С. В., Эрнст Л. К. и др. Молекулярно-биологические аспекты проблемы позиционно-независимой экспрессии чужеродных генов в клетках трансгенных животных // Биотехнология.1994.-№.2. С.3−8.

13. Гольдман И. Л., Эрнст Л. К., Гоголевский П. и др. Теоретические вопросы получения трансгенных животных. Эксперименты на кроликах // Генноинженерные сельскохозяйственные животные / Сб. науч. тр. Вып.1.1995. С.93−102.

14. ГОСТ 19 496–93. Мясо. Метод гистологического анализа. М., «Стандарты», 1993.

15. Григорян Г. Ш. Биотехнологические основы повышения производства говядины, свинины и сокращения потерь в процессе переработки. ВНИИплем. М., 1993. 239 с.

16. Дворянчиков Г. А., Иванов Л. Ю., Рудько Н. П. и др. Идентификация и анализ интегрированного в геном животных трансгена методом ПЦР-амплификации и с помощью блот-гибридизации // Сельскохозяйственная биология.- 1993. №.4. С.39−46.

17. Дозорцев Д. И., Сорокин А. В., Курышев В. Ю., Перевозчиков А. П. и др. /Трансгенные кролики как модель некоторых форм атеросклероза.// Тез.Докл. Всесоюзн. Конф.: «Новые направления биотехнологии», Пущино, 1990.

18. Доклад научной группы ВОЗ № 448. Факторы, регулирующие иммунный ответ.// Женева, 1971.

19. Дразнин Н. М., Мережинский М. Ф. Основы эндокринологии / Минск. — 1963. 420 с. 1.

20. Држевицкая И. А. Основы физиологии обмена веществ и эндокринной системы// М.: Высшая школа, 1983. — 272 с.

21. Дыбан А. П., Городецкая С. И. Трансгенные млекопитающие: изучение фенотипических эффектов гормона роста человека, индуцированного животным // Биотехнология.- 1987. №.3. С.352−357.

22. Карпуть И. М. /Возрастная реактивность кроветворно лимфоидных органов у вакцинированных и больных паратифом поросят и влияние на нее антибиотиков.// Тр. 5 Всесоюз. Конф. по патологической анатомии с/х жив., 1973, с.268−271.

23. Карпуть И. М. /Динамика Т и В — лимфоцитов у свиней в онтогенезе.//Ветеринария, 1977, № 4.

24. Карпуть И. М. /Кроветворение и иммунологическая реактивность у свиней.//Ветеринария, 1975, № 2.

25. Кудрявцев А. А. Методы исследования газового и энергетического обмена с.-х. животных. М.:Колос, 1974, — 405 с.

26. Кудрявцев А. А., Кудрявцева Л. А. Клиническая гематология животных. М.:Колос, 1974. 405 с.

27. Лашас Л. В., Лашене Д. Г. Соматотропин человека. Вильнюс: Мокслас, 1981. 143 с.

28. Медведев С. Ю., Козикова Л. В., Бавин В. Г., Яковлев А. Ф. Рост и развитие трансгенных кроликов и свиней с перенесенным геном релизинг-фактора гормона роста человека // Сельскохозяйственная биология.- 1995.-№.6. С.43−48.

29. Меркурьева Е. К. Биометрия в селекции и генетике с.-х. животных. М. Колос, 1970.-424 с.

30. Мертвецов Н. П. Гормональная регуляция экспрессии генов. М.:Наука, 1986, — 207 с.

31. Науменко П. А., Владимиров В. Л., Фридберг Р. В., Школьник Г. С. Биохимические показатели крови, органов и тканей у трансгенных (МТ1-hGRF) и интактных свиней // Генноинженерные сельскохозяйственные животные /Сб. науч. тр. 1995. Вып.1. С. 54−57.

32. Ноздрин Н. Т., Мысик А. Т. Обмен веществ и энергии у свиней. М. Колос, 1975. 240 с.

33. Петров Р. В. /Иммунология и иммуногенетика.// М.: Медицина,.

34. Петров Р. В. /Иммунология.// М.: Медицина, 1978.

35. Попов А. Н., Зиновьева Н. А., Брем Г. Экспрессметод тестирования новорожденных поросят на интеграцию в геном чужеродных генов // Сельскохозяйственная биология.- 1995. №.6. С. 136−138.

36. Рядчиков В., Солодухина Л. Соколов Н. и др. Трансгенные свиньи с геном mTl/hGRP и перспективы их использования в селекции // Генноинженерные сельскохозяйственные животные /Сб. науч. тр. 1995.-Вып.1. С. 73−84.

37. Сиротинин Н. Н. /Реактивность и резистентность организма. Многотомное руководство по патологической физиологии.// Москва, Медицина, 1966, т. 1.

38. Татулов Ю. В., Борткевич Л. Л. Транспортировка и стресс свиней // Обзорная информация. М., АгроНИИТЭИмясомолпром.- 1990. 32 с.

39. Татулов Ю. В., Ивашов В. И., Немчинова И. П. Особенности качества свинины, производимой по интенсивной технологии выращивания и откорма // XXXVI Международный конгресс по проблемам науки и технологии мяса и мясопродуктов.- Куба, Гавана.- 1990.

40. Томмэ М. Ф. Методика взятия образцов корма для химического анализа. М., 1969. 34 с.

41. Томмэ М. Ф. Методика изучения убойных выходов и мяса. М., 1956. 16 с.

42. Томмэ М. Ф. Методика определения переваримости кормов и рационов. М., 1961. С.245−250.

43. Учитель И .Я. /Макрофаги в иммунитете.// М.: Медицина, 1978.

44. Фаворская Ю. Н., Крымский Л. Д., Нестойко Г. В. / Поверхностная структура макрофагов и лимфоцитов при их взаимодействиях.// Архив патологии, 1975, № 8, с.33−39.

45. Федоров Н. А., Суханов Ю. С., Асади Мобархан А. Х., Артемьев М. И. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) / Методическое пособие.- М., 1996,-С.ЗЗ.

46. Фриденштейн А. Я., Чертков И. Л. /Клеточные основы иммунитета.// М.: Медицина, 1969.

47. Эрнст Л. К., Брем Г., Махаев Е. А. Результаты выращивания и изучения обмена веществ трансгенных по гену релизинг-фактора гормона роста свиней 1 поколения // Генноинженерные сельскохозяйственные животные /Сб. науч. тр. 1995. Вып.1. С. 48−57.

48. Эрнст Л. К., Гольдман И. Л., Кадулин С. Г. Генная инженерия в животноводстве: трансгенные животные, кормовые растения, микроорганизмы рубца//Биотехнология, — 1993. №.5, — С.2−14.

49. Эрнст Л. К., Гольдман И. Л., Семенова В. А. Фенотипический эффект трансгенности по гену гормона роста крупного рогатого скота у кроликов // Доклады ВАСХНИЛ.- 1990. №.6. С.32−36.

50. Agellon L.B., Davies S.L., Chen Т.Т., Powers D.A. Structure of fish (rainbow trout) growth hormone gene and it s evolutionary implications // Proc.Nat.Acad.Sci. USA., 1988.

51. Ausubel F.M., Brent R., Kingston R.E. et.al. Current protocols in molecular biology // Join Wiley and Sons.- New York.- 1987.

52. Baker A.R., Hellingshead P.G., et al. Osteoblastspecific expression of growth hormone stimulates bow growth in transgenic mise// Moll. And Cell. Biol. 1992.-V. 12.-P. 5541−5547.

53. Bayna Е.М., Rosen J.M./ Tissue-specific, high level expression of the rut whey acidic protein gene in transgenic mice// Nucleic Acids Res.- 1990.-V. 18. P. 2977−2985.

54. Bennis R.M. /Cellular immunology in the pig.// Proc. Roy. Soc. Med., 1963, v.66, № 12, p. l 155−1160.

55. Brameld J.M., Weller P.A., et al. Hormonal control of insulin-like growth factor-I and growth hormone receptor mRNA expression by poreine hepatocytes in culture// J. Endocrinol. 1995. — 146. — P. 239−245.

56. Brem G. Interifance and tissue-specific expression of transgenes in rabbits and pigs // Mol. Deprod. and. Dev.- 1993. 36. N.2. P.242−244.

57. Brem G. Production of transgenic mice, rabit and pigs by microinjection into pronuclei // Zuchtyniene.- 1995. V.20. N.5. P.134−139.

58. Brem G. Transgene Nutztiere // Zuchtungkunde.- 1988. V.60. N.3.-P.248−262.

59. Brem G. Transgenic animals. In Biotechnology. 1993a. A MultyVolume Comprehensive Treatise. Edited by H.J.Rehm and G. Reed in cooperation with A. Puhler and. P.Stadtler. VCH. Weinhein, New York, Basel, Cambridge. P.745−832.

60. Brem G., Brening В., Salamons B. et.al. Unerwartets transgene Expression eines gesaengespezifischen Wachstumshormon Genkonstruktes in den Bergmann-Gliazellen der Maus // Tiwrarztl. Prax.- 1991. V.19. P. 1−6.

61. Cantor H., Simpson E. /Regulation of the immune response by subclasses T lymphocytes.// Europ.J. Immunol., 1975, v.5, № 4, p.330−336.

62. Church R.B. Embryo manipulation and gene transfer in domestic animal. Trends Biotechnol. 5. 1987. P.13−19.

63. Church R.B./ Possibilities for genetic engineering of animals // Inf. J. Anim. Sci.- 1989.-V.4.-H.1−6.

64. Clark A.J., Simons P. et al./ Pharmaceuticals from transgenic livestok// Trends-Biotechnol. 5. 1987 — P. 20−24.

65. Eriksen E.F., Kassem M., et al. Growth hormone, insulin-like growth factors and bone remodulling// Braz. J. Med. And Biol. Res. 1996. — 29. — № 6. -P.525−534.

66. Erlich H.A. PCR technology: principles and applications for DNA ampflication. Stocton Press, New York. 1989.

67. Eva D., Hans Т., Hans E., et al. Growth hormone signalng in hepatocytes// (Abstr.) Keystone Symp. «Adipose Cell». Park City. — Utah. — Jan. 14−21, 1994. — Suppl. 18A. — 152p.

68. Fuh G., Cunningham B.C., et al. Rational design of potent antogonists to the human growth hormone receptor// Science. 1992. — V.256. — N5064. — P. 16 771 680.

69. Gannon F., Powell R. et al./ Transgenic farm animals// J. Biotechnol. 1990. V.16. P. 155−170.

70. Glosser A., Doetschman Т., Korn R. et.al. Transgenessis by means of blastocyst derived embrionic stem cell lines // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1986.-V.83. P.9065−9069.

71. Good R.A. et al. /The role of the thimus in development of immunologic capacity in rabbits and mice.// Exp. Med., 1962, v. l 16, № 5, p.773−781.

72. Gordon J., Ruddle F. Integration and stable germ line transmission of genes injected into mouse pronuclei // Scince.- 1981. V.214. P.1244−1246.

73. Gordon J.W., Lee E., Vitale J.A. et.al. Production of human tissue plasminogen activator in transgenic mouse milk // Biotechnology 5. 1987.-P.l 183−1187.

74. Grumet F.C., McDevitt H.O. / Nature of the represponding organism. // Contemp. Topics Immunobiol., 1973, v.2, p.63−76.

75. Hammer R.E., Pursel V., Rexroad C. et.al. Production of transgenic rabbits sheep and pigs by microinjection //Nature.- 1985. V.315. P.680−683.

76. Hammerling G.J., McDevitt H.O. /Antigen binding T and Вlymphocytes.// Immunol., 1974, v. l 12, № 5, p. 1726−1733.

77. Heninghausen L.G. / The mammary gland as a bioreactor: production of foreign proteins in milk // Protein Expressiom and Purification. -1990. V. 1. — P. 3−8.

78. Heninghausen L.G. and Sippel A.E. / Mouse whey acidic protein is a novel member of the family of «four-disulfide core» proteins // Nucleic Acids Res. 10. 1982.-P. 2677−2684.

79. Hettiarachchi M., Watkinson A., et al. Growth hormone-induced insulin resistance and its relationship to lipid availability in the rat // Diabetes. 1996. -45.-N4.-P.415−421.

80. Jaroskova L et al. /Immunoglobulin determinants on lymphocytes in germfree piglets.//Eur. J. Immunol., 1973, v.3,№ 12, p.818−824.

81. Kostyo J.L. Rapid effect of growht hormone on amino acid transport and protein synthesis // Ann. N.Y. Acad.Sci.- V.148. P.284−312.

82. Kostyo L.J., Nutting D.K. Growth hormone and protein metabolism. In: Handbook of physiology.- 1979. P. 187−210.

83. Lee K. -F., DeMayo F.J. et. al./ Tissue-specific expression of the rut |3-casein gene in transgenic mice//Nucleic Acids Res, 16. 1988. — P. 1037−1041.

84. Mannmo R.J. and Gould-Fogerite S. Liposome mediated gene transfer // Bio Technigues 6. 1988. P.682−690.

85. Mansour S.L. Gene targeting in mouse embrionic stem cells: introduction of specific alteration into the mammalian genome // Gene-Anal. Tech. 7, — 1990. P.219−227.

86. Nazario E. Petits on grands: Une histoire d’hormone? // Rev. Palais decouv.- 1996. V.24. N.237. P.53−60.lOl.Okada S., Kopchich J.J. Anti-diabetogenic effect of growth hormone antagonists // J. Cell. Biochem. 1994. — (supl. 18a). — P.171−178.

87. Palmiter R.D., Brinster R.L. Germ-line transformation of mice // Ann. Rev. Genet. 1986. V.20. P.465−499.

88. Palmiter R.D., Brinster R.L., Hammer R.E. et.al. Dramatic growth of mice that develop from eggs microinjected with metallothionein-growth hormone fusion genes //Nature.- 1982. V.306. P.611−615.

89. Palmiter R.D., Norstedt R.E., Gelinas R.E. et.al. Metallothionein-human GH fusion genes stimulate growt of mice // Science.- 1983. V.222. P.809−814.

90. Persuy M.A., Stinnakre M.G. et. al. / High expression of the carpine (3-casein gene in transgenic mice//Eur. J. Biochem. 205. 1992. P. 887−893.

91. Pursel V.G. et.al. II-th International Congress on Animal Reproduction and Artificial Insemination, Dublin, 1988.

92. Pursel V.G., Bolt D.J., Mileer K. Expression and performance in transgenic pigs // J.Reprod. Fert. Suppl.- 1990. V.40. P.235−245.

93. Pursel V.G., Pincert C., Mileer K. et.al. Genetic engineering of livestok // Science.- 1989. V.244. P.1281−1288.

94. Pursel V.G., Pinkert C., Rexroad C., Mileer K. Animal growth regulation // Et by D.K.Campion, C.J.Hausman, K.J.Martin. New York.- London. 1989.

95. Pursel V.G., Rexroad С. Status of research with transgenic farm animals // J.Anim.Sci.- 1993. V.71. P.10−19.

96. Pursel V.G., Rexroad C., Pincert C. et.al. Progress on gene transfer in animals // Vet.Immimol. Immunopathol.- 1987. V. 17. P.303−312.

97. Rexroad C.E. Transgenic technology in animal agriculture // Animal Biotechnology.- 1992.-V.3.-N.I.-P.l-13.

98. Rexroad C.E., Pursel V.G. Status of gene transfer in domestic animals // Proc. of 11th inter. congress on animal reproduction and artifical insemination. Dublin, 1988.-V.5. P.28−35.

99. Saiki R.K., Gelfand D.N., Stoffel S. et.al. Primer-directed enzymatic ampflication of DNA with a thermostable DNA polymerase // Science, 239.1988, — P.439−491.

100. Saiki R.K., Scharf S., Faloona F. et.al. Enzymatic amplification of (3-globulin genomic seguenes and restriction site analysis for diagnosis of sockle cell anemia// Science, 230. 1985, — P. 1350−1354.

101. Saiki R.K., Scharf S., Faloona F. et.al. Enzymatic amplification of b-globulin genomic sequences and restriction site analysis for diagnosis of sickle cell anemia//Science.- 1985.-V.230.-P. 1350−1354.

102. Taussing M.J. /Т cell factor which can replace T cells in vivo.// Nature, 1974, v.248, № 5445, p.234−236.

103. Tyrreil H.F., Brown A.C., Peynolds P.J. Effect of bovine somatotropin on metabolism of lactating dairy cows: energy and nitrogen utilization as determined by respiration calorimetry // J.Nutr. 1988. V. 118. N.8. P.1024−1030.

104. Van Brunt J. / Molecular farming: transgenic animals as bioreactors // Bio/Technology. V.6. — 1988. — P. 1149−1154.

105. Vernon R.G. Influence of somatotropin on metabolism // Use Somatotropin LivestockProd. Semin. Brussels. 27 — 29 Sept. — 1988. — London. — 1989.-P. 31−50.163.

106. Wall R.J., Pursel V.G. et. al. / High-level synthesis of a heterologous milk protein in the mammary glands of trancgtnic swine // Proc. Natl. Acad. Sci USA 88. 1991.-P. 1696−1700.

107. Wall R.J., Siedel G.E. Transgenic farm animals a critical analysis // Theriogenology. — 1992. — V. 38. — P. 337−357.

108. Ward K.A. Nancarrow C.D. The genetic engineering of production traits in domestic animals // Experienta.- 1991. V.47. P.913−922.

109. Wilmut I., Archibald A.L., et.al./ Producnion pharmaceutical poteins in milk //Experientia.- 1991. V.47. P.905−912.