Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Биохимические характеристики фракций тимоцитов крысы, различающихся по плавучей плотности

Диссертация: Биохимические характеристики фракций тимоцитов крысы, различающихся по плавучей плотности
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Следует, однако, отметить, что имеющиеся в настоящее время радиобиологические данные о молекулярных событиях, развертывающихся в интерфазно гибнущих клетках, получены в основном на суммарной популяции лимфоцитов и тимоцитов, что затрудняет их конкретную интерпретацию (Евтушенко В.И., 1980; Водолазская H.A. и др., 1981). Очевидно, что дальнейшее изучение молекулэдных основ дифференци-ровки… Читать ещё >

Биохимические характеристики фракций тимоцитов крысы, различающихся по плавучей плотности (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • Глава I. Обзор литературы
    • 1. Характеристика клеточного состава тимуса млекопитающих .Ю
    • A. Структура и функции тшдеса
  • Б.Дифференцировка и созревание клеток тимуса
    • B. Препаративные методы разделения клеток тимуса и отологические характеристики фракций
  • Г. Влияние радиации и глюкокортикоидных гормонов на лимфоциты тимуса
    • 2. Краткие сведения о структурно-функциональной организации генома высших организмов
  • Глава II. Материалы и методы
    • I. Объекты исследования
    • 2. Облучение животных и культуры клеток
    • 3. Выделение и фракционирование тимоцитов
    • 4. Определение количества тимоцитов находящихся в стадии метафазы
    • 5. Оценка адгезивной способности тимоцитов
    • 6. Анализ суперспиральной структуры ядерной ДНК тимоцитов методом вискозиметрии
    • 7. Включение %-тимидина и %-уридина в фракционированные тимоциты
    • 8. Выделение ядер
    • 9. Выделение РНК. а. Получение суммарной РНК б. Экстракция РНК из ядер в. Выделение цитоплазматической РНК
    • 10. Очистка препаратов РНК от примесей ДНК а. Обработка РНК ДНКазой I. б. Высаливание высокомолекулярной РНК
    • II. Выделение поли (А)-содержащей РНК. а. Синтез поли (У)-сефарозы б. Хроматография РНК на поли (У)-оефарозе
    • 12. Определение концентрации РНК
    • 13. Аналитическое фракционирование РНК. а. Электрофорез высокомолекулярных РНК б. Регистрация результатов электрофореза РНК. в. Определение молекулярной массы РНК
    • 14. Выделение ДНК
    • 15. Фрагментация ДНК
    • 16. Синтез гранулированного оксиаппатита
    • 17. Выделение уникальной ДНК
    • 18. Иодирование ДНК
    • 19. Реассоциация уникальной ДНК
    • 20. Гибридизация 1251-унДНК с избытком РНК
    • 21. Получение 1251-мЦНК и 1251-нДНК
    • 22. Изучение кинетики реассоциации и гибридизации методом хроматографии на колонке с ГАИ
    • 23. Определение концентрации белка
    • 24. Определение концентрации ДНК
    • 25. Статистические методы
    • 26. Реактивы, используемые в работе
  • Глава III. Результаты

I.Фракционирование тимоцитов в градиенте фиколл-пака и их характеристика. а. Связь плавучей плотности клеток с их биологическими параметрами б. Исследование влияния гидрокортизона и радиации на фракции тимоцитов

2.Влияние рентгеновского облучения на биосинтез и созревание РНК в субпопуляциях тимоцитов

3.Изучение генетической сложности ядерной и поли-аденилированной цитоплазматической РНК фракций тимоцитов.

Глава 17. Обсуждение результатов

Выводы.

Форма внедрения

Актуальность исследования. Тимус является одним из центральных лимфоидных органов, которому принадлежит ведущая роль в формировании иммунной системы организма (Брондз Б.Д., Рохлин О. В., 1978). Процесс созревания периферических Т-лим$оцитов, ответственных за клеточный иммунитет включает ряд стадий протекающих в пределах тимуса (Burton et ai. t 1976). Именно этим определяется значительная гетерогенность лимфоидных клеток тимуса" Претимоци-ты, делящиеся и зрелые кортикальные клетки, медуллярные тимоциты представляют собой последовательные этапы формирования Т-лимфощь-тов (Брондз Б.Д., Рохлин О. В., 1978). Однако не все кортикальные тимоциты проходят подобный путь развития, значительная их часть не участвует в иммуногенезе и погибает в органе, претерпевая летальную дифференцировку.(Burton et ai., 1976). Физиологическая роль летальной дифференцировки остаетоя неизвестной. Морфологически она проявляется в постоянном присутствии в тимусе клеток с пикнотизированными ядрами (Schreck, 1955). Значительное возрастание числа клеток с пикнотизированными ядрами обнаруживается при воздействии лимфолитическшс агентов, таких как глюкокортико-идные гормоны и ионизирующее излучение (Schreck, 1955, Ханоон К. П., 1979). В основе механизма действия этих агентов, по-видимому, лежит их способность ускорять естественный процесс терминальной дифференцировки и клеточной гибели (Хансон К.П., 1979).

Лимфоциты тимуса являются одной из наиболее радиочувствительных клеточных популяций организма, гибель которых происходит по так называемому интерфазному типу (Окада Ш., 1974). Известно, что интерфазная гибель клеток лежит в основе таких специфических проявлений лучевого поражения, как лимфопения и инволюция лимфо-идных органов (Хансон К.П., Комар Б. Е., 1977). Поэтому выяснение механизмов интерфазной гибели имеет важное значение для понимания закономерностей радиационного поражения организма.

Следует, однако, отметить, что имеющиеся в настоящее время радиобиологические данные о молекулярных событиях, развертывающихся в интерфазно гибнущих клетках, получены в основном на суммарной популяции лимфоцитов и тимоцитов, что затрудняет их конкретную интерпретацию (Евтушенко В.И., 1980; Водолазская H.A. и др., 1981). Очевидно, что дальнейшее изучение молекулэдных основ дифференци-ровки тимоцитов, а также понимание природы клеточной гибели под действием радиации и других лимфолитических агентов становится проблематичным без разработки методов препаративного разделения клеток тицуса, находящихся на разных стадиях созревания. Наряду с простыми удобными методами разделения клеток, не менее важно располагать комплексом методов, которые позволяли бы надежно характеризовать уровень дифференцировки и степень зрелости клеток в составе фракций, полученных в результате препаративных процедур. Несомненно, что наиболее полное представление о дифференцировке может быть получено на основании данных об экспрессии генома на разных стадиях созревания клеток (Britten, Davidson, 1969; Galau et al., 1976).

Таким образом, выделение из тимуса субфракций тимоцитов, находящихся на различных стадиях дифференцировки, изучение их радиочувствительности и исследование особенностей экспрессии генетической информации в каждой из них является важной и актуальной задачей, как биохимии, так и радиобиологии.

Основной целью настоящего исследования являлось изучение особенностей экспрессии генетической информации на разных стадиях дифференцировки клеток тимуса и выяснение взаимосвязи между уровнем дифференцировки и радиочувствительностью тимоцитов.

Для достижения указанной цели решались следующие конкретные экспериментальные задачи:

1.Разработать простой метод изоплотностного центрифугирования в градиенте фиколл — пака позволяющий разделить клетки тимуса на фракции, различающиеся по степени зрелости.

2.На основании цитологических, биохимических и радиобиологических 1фитериев оценить уровень дифференцировки клеток находящихся во фракциях,.

3.Изучить генетическую сложность информационных РНК, представленных в ядре и цитоплазме выделенных субпопуляций тимоцитов.

Научная новизна и теоретическое значение работы. Впервые с помощью упрощенного метода изоплотностного центрифугирования в градиенте фиколл — пака получены три фракции тимоцитов, находящихся на различных стадиях дифференцировки. При изучении генетической сложности суммарных препаратов ядерной и цитоплазмати-ческой поли (А+)-РНК, вццеленных из фракционированных тимоцитов, впервые показано, что уровень экспрессии генетической информации в клетках нижней радиочувствительной фракции выше. Установлено также, что такое характерное для лимфоцитов пострадиационное нарушение процессинга рРНК, как усиление «утечки» 18 Б рРНК наиболее выражено в нижней фракции, что коррелирует с её повышенной радиочувствительностью.

Полученные результаты вносят существенный вклад в понимание особенностей экспрессии генетической информации в тимоцитах, находящихся на разных стадиях дифференцировки. Они способствуют также пониманию взаимосвязи процессов дифференцировки клеток с их радиочувствительностью.

Практическое значение. Разработан упрощенный, эффективный метод изоплотностного центрифугирования тимоцитов в градиенте фиколл-пака, позволяющий разделить лимфоидную популяцию клеток тимуса на фракции, различающиеся по степени зрелости. Результаты молекулярно-биологичаских, цитологических и радиобиологических исследований этих фракций могут иметь практическое значение для обоснования путей поиска средств защиты критических органов, богатых лимфоидными клетками.

На защиту выносятся следующие положения:

— при изоплотностном центрифугировании тимоцитов в градиенте фиколл-пака получены три фракции клеток, различающиеся между собой по уровню дифференцировки и по радиочувствительности;

— тимоциты нижней фракции являются наиболее радиочувствительными;

— такое пострадиационное нарушение процессинга рРНК, как усиление «утечки» 18зрРНК наиболее выражено в нижней фракции, что коррелирует с её радиочувствительностью;

— генетическая сложность препаратов ядерной и цитоплазмати-ческой поли (А+)-РНК нижней радиочувствительной фракции на 5% выше, чем у РНК верхней и средней фракции.

ВЫВОДЫ.

1.Популяция тимоцитов крыоы в одноступенчатом градиенте фиколл-пака препаративно разделена на три фракции обозначенные в соответствии с их плавучей плотностью, как верхняя (легкая), средняя и нижняя (тяжелая). Клетки между фракциями распределены в соотношении 14:20:66- доля жизнеспособных клеток достигает.

2.Верхняя фракция обогащена пролифериругощими формами тимоцитов, на что указывают высокий митотический индекс, увеличенное содержание ДНК и интенсивное включение предшественников в нуклеиновые кислоты. В средней фракции представлены медуллярные тимоциты с повышенной реактивностью к конканава-лину А.

3.В нижней фракции в основном сосредоточены чувствительные к гидрокортизону и ионизирующему излучению неделящиеся кортикальные тимоциты,.

4.Регуляция уровня внутриклеточного содержания рРНК во всех фракциях тимоцитов осуществляется при участии характерного для лимфоидных клеток механизма элиминации вновь синтезированных: молекул 18 Б рРНК.

5.Облучение тимоцитов в дозе 4 Гр нарушает процесс созревания рРНК, что выражается в накоплении высокомолекулярных предшественников и в последующем усилении распада вновь синтезированных молекул 18БрРНК. Наиболее резко эти изменения выражены в радиочувствительных тимоцитах нижней фракции.

6.Методами молекулярной гибридизации проведена сравнительная оценка размеров транскрибируемой части генома. Наиболее высокий уровень экспрессии свойственен для клеток тяжелой о фракции. Число транскрибируемых генов в них на Ъ% 10 генов) больше, чем в более легких субпопуляциях тимоцитов.

ФОРМА ВНЕДРЕНИЯ.

Работа проведена в порядке выполнения плановых заданий Центрального Научно-исследовательского Рентгено-радиологического Института Минздрава СССР по программе 0.74.05 «Молекулярные механизмы интерфазной гибели радиочувствительных клеточных популяций» (Постановление ГКНТ СССР и Президиума АН СССР от 20. Х1−1976Г. № 426/91).

Основное содержание диссертации изложено в 7 научных статьях.

Показать весь текст

Список литературы

  1. Л.П., Козлов Ю, В., Рысков А.П."Георгиев Г. П. Регуляция биосинтеза информационной РНК в животной клетке.
  2. Различие в характере транскрипции на хромосомном дезоксири-бионуклеопротеиде и свободной ДНК.- Мол. биология, 1968, т. 2, 5, с.736−751.
  3. М. Статистические методы в биологии.-М."Наука", 1962.
  4. А.Е., Гармаева Н. П. Мазуров В.И. Особенности биоспецифической хроматографии полиА-содержащей РНК на поли(У)-сефарозе.-Биохимия, 1978, т.43, № 10,с.1830−1837.
  5. Ф. Клеточная иммунология.М.,"Мир", 1971.
  6. К., Саммэр Э., Хромосома эукариотической клетки. М. «Мир», 1981.
  7. .Д., Рохлин О. В. Молекулярные и клеточные основы иммунологического распознавания.М.Наука", 1978.
  8. В.А., Вольфсон В. Г., Воробьев В. И. Уникальные и повторяющиеся последовательности в геноме иглокожих. Дивергенция нуклеотидных последовательностей ДНК у иглокожих. Мол.биол., 1979, т.13, № I, 38−47.
  9. A.A.Дансон К. П. Соотношение структурногосостояния хроматина и биосинтез быстрометящихся ядерных РНК втимусе крыс, подвергнутых общему рентгеновскому облучению.-Вопр. мед. химии, 1976, т.22,1 5, с.643−648.
  10. В.И., Колюбаева С. Н. Климов H.A., Комар В. Е. Изучение суперспиральной структуры ядерной ДНК лимфоцитов периферической крови крыс при гамма-облучении. Радиобиология, 1980, т.20,№ 4,с.483−488.
  11. H.A., Ермолаева Н. В. Влияние глубины подавления синтеза белка на динамику пострадиационного распада ядерного хроматина в клетках тимуса крыс. Радиобиология, 1981, т.21, № I, с.63−67.
  12. Гайцхоки’B.C. Выделение информационных РНК эукаристи-ческих клеток.Мол.биол., 1976, ig 7, с.8−58.
  13. B.C. Молекулярная организация эукаристических информационных РНК. Мол.биол., 1979, т.13,$ 4, с.721−751.
  14. B.C. Информационные РНК клеток животных.М."Медицина", 1980.
  15. В.А. Организация генома у эукариот.Мол.биол., 1978, т.12,№ I, с.5−35.
  16. Г. П. Методы определения «выделения и фракционирования нуклеиновых кислот .Л. „.'Медицина „, 1968, с. 74−120.
  17. Г. П. Исследование структуры генома эукариот в институте молекулярной биологии. Мол.биол.1977,т.6,с. 1274−1282.
  18. Голубева Р, В., Иванник Б. Н., Мурзаев В. И. Анализ появления дикнотических ядер в лимфоидных клетках под воздействием радиации и преднизолона. Материалы Всесоюзного симпозиума „Интерфазная гибель лимфоидных клеток“. Обнинск, 1979, с.7−10.
  19. Городецкий С.И., Сулимова Г. Е."Мильшина Н. В, Богуслаев К. К., Слюсаренко А. Г. Сложность и гетерогенность поли (А) содержащих информационных РНК из разных органов Bostanrus. Мол.биол., 1982, т.16,№ 1,с.82−94.
  20. B.B. Исследование структуры генома методом молекулярной гибридизации. Мол.биол., 1975, № 4,с.89−129.
  21. Е.В. Вычислительные методы анализа и распознавания патологических процессов.Л.,"Медицина“, 1978.
  22. В.А., Александрова С.Е., Курилец Э. С., Ультраструктурные изменения клеток при интерфазной гибели. Материалы Всесоюзного симпозиума."Интерфазная гибель лимфоидных клеток“. Обнинск, 1979, с.3−7.
  23. Евтушенко В, И. Созревание РНК в клетках тимуса крысв норме и при воздействии ионизирующего излучения. Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук. Ленинград, ЦНИРРИ МЗ СССР, 1980.
  24. В.И., Плюснин А. З., Козлов А. Н., Сейц И. Ф. Изучение субклеточной локализации и прочности связи с клеточными структурами низкомолекулярных РНК. Цитология, 1979, т.21,№ 10, C. II75-II80.
  25. .Д. Некоторые молекулярные характеристики генома крыс, подвергнутых воздействию ионизирующей радиации. Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук. Ленинград, ЦНИРРИ МЗ СССР, 1975.
  26. В. Е. Дансон К.П. Информационные макромолекулы при лучевом поражении клеток.М.,"Атомиздат», 1972.- 126
  27. E.H., Воробьев В. И., Транскрипция неповторяющейся ДНК зародышей морского ежа. Сб. работ института Цитологии АН СССР, 1974, вып.16, 0.91−93.
  28. Н.В., Литвинов В. И., Мороз A.M. Медиаторы клеточного иммунитета и межклеточного взаимодействия. М., Медицина, 1980.
  29. Д., Дукор П. Биология тимуса.М.Мир", 1967.
  30. Н.В., Азаров Ю. М., Алещенко A.B. «Семенова Л.П. Молекулярно-биологические и цитологические аспекты лимфолейкоза.1981, М. „Наука“.32.0када III. Радиационная биохимия клетки. М.,"Мир», 1974.
  31. Ш. Получение очищенных ядерных ядрышек из клеток млекопитающих. В кн. Методы вирусологии и молекулярной биологии. М., «Мир», 1972, с.31−42.
  32. Прокофьева-Бельговская A.A. Современное представлениео строении и репликации хромосом. Тезисы докладов второго съезда ВОГЙС им. Н. И. Вавилова, 1972, с.24−28.
  33. Е.Ф. Радиационная биохимия тимуса. М., «Атом-издат», 1972.
  34. Н.И., Филиппович И. В., Романцев Е.Ф., Исследование молекулярных механизмов радиационной гибели лимфоцитов.
  35. Радиобиологическая и биохимическая характеристика тимоцитов мышей. Радиобиология, 1981, т.21,М, с.19−27.
  36. А.Ю. Изучение популяции облученных тимоцитов. Материалы Всесоюзного симпозиума «Интерфазная гибель облученных клеток». Обнинск, 1979, с.75−79.
  37. А.Ю. Изоплотностное разделение суспензии клеток. Цитология, 1983, т.25,$ I, с.5−17.
  38. В.И. Радиационные аспекты проблемы транскрипции. Радиобиология, 1976, т.16,№ 5, с.643−651.
  39. К.П., Животовский БД. Транскрипция повторяющихся и уникальных последовательностей ДНК клеток тимуса крысы стимулированной фитогемагглютинином. Биохимия, 1976, т.41, II, с.2031−2036.
  40. К.П., Комар В. Е. Биохимические аспекты действия ионизирующей радиации на живой организм.Л."Медицина", 1977.
  41. К.П. Генетическая гипотеза интерфазной гибели лимфоидных клеток, вызванная воздействием ионизирующего излучения. Материалы Всесоюзного симпозиума «Интерфазная гибель облученных клеток. Обнинск, 1979, с.83−88.
  42. П., Андерсон Л. С. Фракционирование иммунокомпетентных клеток, обладающих различными физическими свойствами. В кн. Лимфоциты, выделение, фракционирование и характеристика.М., „Наука“, 1980, с.43−46.
  43. И.Л., Фриденштейн А. Я. Клеточные основы кроветворения .М.,"Медицина», 1977, с.34−35.
  44. Н.А., Ильин Ю. В., Новый принцип организации генетического материала у Эукариот: характеристика гена Дм 225 представителя множественных рассеянных по хромосомам генов дрозофилы. Докл. АН СССР, 1978, т.239, $ 6,0.1221−1231.
  45. Эйдус Л.X.Неспецифическая реакция клеток и радиочувствительность. Атомиздат, 1977, с.83−100.
  46. Bantle L. I, and William E, Diversity of polyadenylated RITA in mouse brain.-J.Cell Biol., 1974, v.62,H 2, p.71−79.
  47. Bantle J.A. and Kahn W.E. Complexity and characterizat 1tion of polyadenylated RNA in the mouse brain.-Cell, 1976"v, 8, P.139−150.
  48. Berger S.L., Cooper H, L. The relationship between hn RNA±poly (A) and m RNA±poly (A) in non dividing human lymphocytes.-Biochim.Biophys.Acta, 1978, v.517,N 1, p.84*"98,
  49. Birnie G.D., Angus D., Thelfall G., Paul J. Distribution of nuclear RUA s in growing and nongrowing cells Control Proliferat•-Anim.Cells Cold Spring Harbor Conf. Cell proliferat, 1974, v.11, p.757−768.
  50. Blobel G., Potter V.R. Nuclea from rat liver isolation method that combines purity with high yield.-Science, 1966, v.154, N 3757"p.1662−1665.
  51. BByum A. Separation of blood leucocytesgranulocytes and lymphocytes.-Tissue Antigens, 1974, v.4,p.269−274.
  52. Bollum P.J. Termunal deoxynucleotidyl transferase.-In the Enzymes, 1974, v.10,p.145−150.
  53. Brawerman G. The isolation of RNA from mammalian cells.-Meth.Cell Biol., 1973, N 7, P"1−22.65″ Britten R.J., Kohne D. Repeated nucleotide sequences. Carnegie Inst. Wash-Yearbook, 1967, N 66, p.73−88.
  54. Cook P.R., Brazell L.A. Supercoils in human DUA.-J.Cell Science, 1975"v.19, N 2, p.261−279.
  55. Cooper H.L. Degradation of 28 S RNA late in ribosomal RNA maturation in nongrowing lymphocytes and its reversal after gxrowth stimulation.-J.Cell Biol., 1973, v.59,N 2tp.250−254.
  56. Dabeva M.D., Dudov K.P., Hadjolov A.A., Stoykova A.S. Qua-titative analysis of rat liver nuclea and nucleoplasmic ribosomal ribonucleic acids.-Biochem.J., 1978, v, 171, N 2, p, 367−374.
  57. Davidson E.H., Britten R.J. Molecular aspects of gene regulation in animal cells.-Cancer Res., 1974, v.39,N 8, p.2034−2043.
  58. Davidson E.H., Grahom D.E., Neufeld B.R., Chamberlin M.E. Arrangement and characterization of repetitive sequence elements in animal DNAs.-Cold Spring.Harbor.Symp.Quant.Biol., 1974, v.38, p.295−301.
  59. Davidson E.H., Britten R.J. Requlation of gene expression: possible role of repetitive sequences.-Science, 1979, v.204,1. N 4397, p.1052−1059.
  60. Despont J.P., Abel C.A., Grey H.M. Sialic acids and sialy-transferases in Murine lymphoid cells indicators of T-cell maturation.-Cell Immunol, 1975, v.17,N 2, p.487−494.
  61. Dougherty T.F., White A. Functional alterations in lymphoid tissue induced by adrenal cortical secretion.-Amer.J.Anat., 1945, v.77,P.81−116.
  62. Droege W., Malchow D., Strominger J.L. Cellular heterogeneity in the thymus.I.Electrophoretic analysis of lymphoid cell populations from chickens.-Fur.J.Immunol., 1972, N 2, p.156−161.
  63. Elliot E.V. The persistent PHA-responsive population in the mouse thymus.I.Characterization of the population.-Immunology, 1977, v.32,N 5, P*383−394.
  64. Elliot E.V. The persistent PHA -responsive population in the mouse thymus. II. Recirculators characteristics and immunological properties.-Immunology, 1977, v.32,K 5, p.395−404.
  65. El-Arini M.O., Osoba B. Differentation of thymus derived cells from precursing in bone marrow.-J.Exp.Med., 1979, v.137,N 82, p.837−840.
  66. Fausto N., Schulty-Ellison G., Atryzch V., Goyetti M.D. Di-strubution and specificity of sequences in polyadenylated nuclear RNA of normall regenerating and neoplastic liver .-J.Biol.Chem., 1982, v.257,N 5, P.2200−2206.
  67. Fillipovich I.V., Sorokina N.I., Soldatenkov V.A., Romant-zev E.E. Supercoiled DNA repair in thymocyte functions differing in radiosensitivity.-Int.J.Rad.Biol., 1982, v.42,N 10p.31−44.
  68. Floyd R.W., Stone M.P., Joklik-W.K. Separation of single stranded ribonucleic acids by acrilamide-agprose-urea gel electro-phore sis.-Ana1it.Bi ochem., 1974, v.59,N 1, p.599−606.
  69. Galau G.A., Klein W.H., Davis M.M., Wald B.J."Britten R.J., Davidson E.H. Structural gene sets active in Embryos and Adult tissues of the Seu Urchin.-Cell, 1976, v.7,p.487−505.
  70. Galau G.A., Klein W.H., Britten R.J., Davidson E.H. Significance of rare mRNA sequences in liver.-Arch, Biochem.Biophys., 1976, v, 179, N 2, p.584−599.
  71. Goldberg R.B., Galau G.A., Britten R.J., Davidson E.H. Non-repetitive DNA sequence representation in Sea Embryo messenger RNA.-Proc.Nat.Acad.Sci USA, 1973, v.70,N 12, p.3516−3520.
  72. Goldshneider J. Antigenic relationship between Bone Marrow lymphocytes, cortical thymocytes and a subpopulation of peripheral T-cells in the ratsDiscription a bone marrow lymphocyte antigen.-Cell Immunol., 1976, v.24,N 2, p.289−307.
  73. Goldshneider J. Heterologous antiserum to rat lymphohe-mopoietic precursor cells.-J, Immunol., 1977, v#118,N 6, p.2040−2046.
  74. Grady L.J., North A.B., Campbell W.P. Complexity of poly A+ and poly A" polysomal RNA in mouse liver and cultured mouse fibroblasts.-Nucleic Acids Res., 1978, v.5,N 3, p.697−712.
  75. Grady L.J., Campbell W.P., Nourth A.B. Nonrepetitive DNA transcription in normal and regenerating rat liver.-Nucleic Acids Res., 1979, v.7,N 1, p.259−267.
  76. Grahome D.E., Neufeld B.R., Davidson E.H., Britten R.J. Interspersion of repetitive and non-repetitive DNA sequences inthe Sea Urchin genome.-Cell, 1979, v.3,P.127−137.
  77. Greenberg J.R. Messenger RNA metabolism of animal cells, Possible involvement of untranslated sequences and in RNA-associated proteins.-J.Cell Biol., 1975, v.64,p.269−288.
  78. Grouse L., Chilton M.D., McCarthy B.J. Hybridization of Ribonucleic Acid with unigue sequences of mouse Deoxyribonucleic Acid.-Biochemistry, 1972, v, 11, N 5, p.798−805.
  79. Hahn W. E, Laird C.D. Transcription of nonrepeated DNA in mouse brain.-Science, 1971, v.173,N 3499, P*158−161.
  80. Hartwig M. Single-strand breakage in mammalian chromosomal DNA sensitive detection by application of a sedimentation anomaly.-Int, J, Rad. Biol, 1980, v.37,N 5, P.569−571.
  81. Hastic N. D, Bishop J.O. The expression of three aban-dance classes of messenger RNA in mouse tissues,-Cell, 1976, v.9, p.761−774.
  82. Herefand L.M., Rosbash M. Number and distribution of polyadenylated RNA sequence in yeast.-Cell, 1977, v. 10, p.4−53−462.
  83. Hopper K., Shortman K. The differentiation of T-lympho-cytes, III, The behavour of subpopulation of mouse thymus cells in shart-term cell culture.-Cell Immunol., 1976, v.27,N 2, p.256−273.
  84. Hough-Evans B, R., Wold B. JI, Ernst C, G., Britten B, J. Appearance and persistence of maternal RNA sequences in Sea Urchin development,-Development Biology, 1977, v.60,p.958−977.
  85. Jacobson H., Blomberg H. Evidence of different cell populations in the mouse thymus releasing and responding to mi-togenic factors.-Scand.J.Immunol., 1975, v.4,N 8, p.791−799.
  86. Kadish J.L., Basch R.S. Thymic regeneration after irradiation sevidence for on intra-thymic radiuresistent T-cell pre-curser.-J.Immunol., 1975"v.114,N 2, p.452−460.
  87. Kallman R.P., Kohn H.J. The reaction of the mouse thymus to X-rays measured by changes in organ wight.-Radiat.Res., 1955″ v.2,p.280−293.
  88. Kates J. Detection and utilization of poly (A) sequences in messenger RNA.-Meth.Cell Biol., 1973"v.7"P.53−65″
  89. Levey R.M., Burleson R. Studies on the isolation of lymphocytes active in cell-mediated immune responses II. Identification and recovery of an immunocompetent subpopulation of mouse thymocytes.-Cell Immunol., 1972, v.4,N 4, p.316−332.
  90. Lindberg V., Persson T. Isolation of mRNA from KB cell by affinity chromatography on polyuridilic acid covalently linked to sepharose.-Pur.J.Biochem., 1972, v.31,N 2, p.246−254.
  91. Loening V.E., Ingle S. Diversity of RNA components in green plant tissues.-Nature, 1967, v.215,N 5099, p.353−367.
  92. Loening V.E. The determination of molecular weight of ribonucleic acid by polyacrilamide-gel electrophoresis. The effect of changes in conformation.-Biochem., J., 1969, v.113,N 1, p.131−138.
  93. Lowry O.H., Eair A. L,"Randall K.J., Rosenbrough N.J. Protein measurement with the Folin phenol reagent.-J.Biol.Chem., 1951, v.193,P.265−270.
  94. Lundin P., Garplid B. Effects of corticosteroids and radiation on lymphoide tissue in mice comparison and mutual interactions.-Lymphology, 1975, N 6, p.158−166.
  95. McCaffrey R., Smoler D.F. and Baltimore D. Terminal deo-xynucleotidyl transferase in a case of childhood acute lymphoblastic leukemia.-Proc.Natl.Acad.Sci USA, 1973"v.70,p.521−528.
  96. Miyazawa T., Sato C. jKojima K. Thymic phagocytosis and reduction in the negative surface change of thymocytes after X-irradia t i on•-Radia t•Re s., 1979, v•74,p.622−629.
  97. Moorhead P. S., Nowell P.C., Mellman W.J., Battips D.M. Chromosome preparations of leukocytes cultured from human peripheral blood.-Exp.Cell Res., 1960, v.20,p.613−616.
  98. Moriyama Y., Hodnett J.L., Prestuyko A#W., Bush H. Studies on the nuclear 4 to 7S RNA of the Novik"ff hepatoma.-J.Mol.Biol., 1969, v.39,N 2, p.335−349.
  99. Myers D. R, Wolfe-Slade D.D. Some effects of cationic condensing agents of rat thymocytes.-Exp.Cell Res., 1964, v.33, p.344−349.
  100. Peacock A.C., Dingmon C.W. Resolution of multiple ribonucleic acid species by polyacrilomide gel electrophoresis.-Biochemistry, 1967, v.6,N 6, p.1818−1827.
  101. Penman S. RNA metabolism in the Hela cell nucleus.-J, Mol.Biol., 1966, v.17,N 1, p.117−130.
  102. Perlman S., Rosbash M. Analysis of Xenopus laevis ovary and somatic cell polyadenylated RNA by molecular hybridization.-Devel.Biol., 1978, v.63,p.197−212.
  103. Perry R.R., Kelley D.E., La Torre J. Synthesis and turnover of nuclear and cytoplasmic polyadenylated acid in mouse L-cells.-J.Mol.Biol., 1974, v.82,N 3, P"315−331.
  104. Prensky W. The radioiodination of RNA and DNA to high specific activites.-Meth.Cell Biol., 1976, v.13,p.121−152.
  105. Reeves J.P. Methylglucosa transport by rat thymosite subpopula tions.-J.Cell Physiol., 1977, v.92,p, 304−318.
  106. Reisner I., Linker-Israeli M., Sharon N. Thymocytes into two subpopulations by the use peanut agglutinin.-Cell Immunol., 1976, v.25,N 1, p.129−135″
  107. Ryffel G.U., McCarthy B.J. Complexity of cytoplasmic RNA in different mouse tissues measured by hybridization of polyade-nylated RNA to complementary DNA.-Biochemistry, 1975, v.14,N 7"1. P.1379−1385.
  108. Sabolovic D., Dumont P. Separation and characterization of cell subpopulations in thymus.-Immunology, 1973, v.24,N 4-«p.601−606.
  109. Schlesinger M., Gottesfeld S., Kozash Z. Thymus cell subpopulations separated on discontinuous BSA gradients iAntige-nie properties and circulation capacity.-Cell Immunol., 1973» v.6,N 1, p.49−55.
  110. Schreck R.M.D. Cinemicrographic observation and theoretical considerations on reactions of lymphocytes to X-rays.-Radiology, 1955, v.65,N 6, p.912−919.
  111. Schreck R.M.D. Qualitative and Quantitative reactions of lymphocytes to X-rays.-Ann.N.Y.Acad, Sci, 1961, v.95,N 2, p.839−848.
  112. Scollay R., Jacobs S., Jerabek L., Butoher E., ffeissman J. T-cell maturation thymocyte and thymus migrant subpopulations defined with monoclonal antibodies to MHC Region antigens.-J. Immunol., 1980, v.124,N 6, p.2845−2853.
  113. Vogelstein B., Gillespie D. RNA-DNA hybridization in solution without DNA reannealing.-Biochem.Biophys.Res.Commun., 1977″ v.75,N 4, p.145−158.
  114. Walker P.M.B., Flamm W.G."McLaren A. Higly repetitive DNA in Rodents.-In Handbook of Mol. Cytology, 1969, v.1,p.52−65•
  115. Waring W, J. Britten H.J. Nucleotide sequence repetition: A rapidly reassociating fraction of mouse DNA.-Science, 1967, v.154,N 11, p.791−794.
  116. Weiesman J.L. Thymus cell maturation studies on the origin of cortisone-resistant thymus lymphocytes.-J.Exp.Med., 1973, v.137,N 2, p.504−511.
  117. Wetmur J.G., Davidson E.H. Kinetics of renatiration of DNA.-J.Mol.Biol., 1968, v.31,N 3, P.349−370.
  118. Williams N., Shortman K. The separation of different cell classes from lymphoid organs. The effect of pH on the buoyant density of lymphocytes and erythrocytes.-J.Exp.Biol.Med.Sci., 1972, v.50,p.133−150.
  119. Wiiiams N., Kraft N., Shortman K. The separation of different cell classes from lymphoid organs.VI.The effect of osmo-larity of gradient media on the density distribution of cells.-Immunology, 1972, v.22,N 7, p.885−899.
  120. Wilkes P.R., Birnie G.D. The appearance of new polyade-nylated nuclear RNA sequences during rat-liver regeneration.-N. A.R., 1981, v.9,N 8, p.2021−2055″
  121. Wyllie A.H., Kerr J.P.R., Cwirie A.R. Cell death: the significance of apoptosis.-Intern.Rev.Cytol., 1980, v.68,p.251−306.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!