Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Усовершенствование методов выделения, идентификации индикации бактерий Pseudomonas Aeruginosa

Диссертация: Усовершенствование методов выделения, идентификации индикации бактерий Pseudomonas Aeruginosa
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Предложенная в диссертационной работе схема бактериологической идентификации и дифференциации позволяет выделять и типировать атипичные, беспигментные штаммы Р. aeruginosa из объектов внешней среды, пищевого сырья и пищевых продуктов. Использование сконструированной нами среды накопления, усовершенствованной селективной среды и подобранных тестов бактериологической идентификации, позволяет… Читать ещё >

Усовершенствование методов выделения, идентификации индикации бактерий Pseudomonas Aeruginosa (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • СПИСОК УСЛОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ
  • 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
    • 1. 1. Классификация бактерий рода Pseudomonas
    • 1. 2. Биологические свойства Pseudomonas aeruginosa
    • 1. 3. Устойчивость Pseudomonas aeruginosa к некоторым веществам
      • 1. 3. 1. Антибиотикочувствительность Pseudomonas aeruginosa
    • 1. 4. Резервуар распространения Pseudomonas aeruginosa и вызываемые бактериальные инфекции
    • 1. 5. Способность Pseudomonas aeruginosa к биодеструкции
    • 1. 6. Идентификация Pseudomonas aeruginosa
      • 1. 6. 1. Бактериологические методы идентификации
  • Pseudomonas aeruginosa
    • 1. 6. 2. Генетические методы идентификации
  • Pseudomonas aeruginosa
    • 1. 7. Фагодиагностика Pseudomonas aeruginosa
    • 1. 7. 1. Чувствительность бактериофагов Pseudomonas aeruginosa к инактивирующим факторам
    • 1. 7. 2. Развитие фаговых корпускул в клетке хозяина
    • 1. 7. 3. Реакция нарастания титра фага
  • 2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
    • 2. 1. Объект материалы и методы исследований
    • 2. 2. Результаты исследований и их обсуждение
      • 2. 2. 1. Тинкториальные свойства клеток Pseudomonas aeruginosa
      • 2. 2. 2. Рост референс-штаммов Pseudomonas aeruginosa на стандартных средах и образование пигментов
      • 2. 2. 3. Характеристики отечественных селективных сред, применяющихся для выделения Pseudomonas aeruginosa
      • 2. 2. 4. Биохимические свойства референс-штаммов
  • Pseudomonas aeruginosa
    • 2. 2. 5. Антибиотикочувствительность референс-штаммов
  • Pseudomonas aeruginosa
    • 2. 2. 6. Конструирование среды накопления УГСХА-Р.а
    • 2. 2. 7. Усовершенствование плотной селективной среды с цетримидом УГСХА-Р.а
    • 2. 2. 8. Конструирование тестов бактериологической дифференциации
      • 2. 2. 8. 1. Конструирование теста «А»
      • 2. 2. 8. 2. Разработка теста «В»
      • 2. 2. 8. 3. Усовершенствование теста «С»
      • 2. 2. 8. 4. Усовершенствование теста «D»
      • 2. 2. 9. Усовершенствование бактериологической схемы выделения и идентификации Pseudomonas aeruginosa
      • 2. 2. 10. Образование пигментов штаммами Pseudomonas aeruginosa, выделенных из объектов внешней среды, пищевого сырья и пищевых продуктов
      • 2. 2. 11. Основные биохимические свойства выделенных штаммов Pseudomonas aeruginosa
      • 2. 2. 12. Выделение бактериофагов Pseudomonas aeruginosa
      • 2. 2. 13. Характеристика выделенных фагов Pseudomonas aeruginosa
      • 2. 2. 14. Разработка технологических параметров изготовления и контроля биопрепарата для диагностики Pseudomonas aeruginosa
      • 2. 2. 15. Разработка оптимальных условий постановки реакции нарастания титра фага с применением диагностического биопрепарата

Актуальность темы

*.

Бактерии вида Pseudomonas aeruginosa вызывают заболевание «псевдо-моноз» к которому восприимчивы: крупный рогатый скот, свиньи, овцы, птица, пушные звери, пчёлы, рыбы, из лабораторных животных чувствительны белые мыши, морские свинки и кролики (Lipej et al., 1993; Прунтова и др., 1995; Покровский 2002). Диагноз ставят на основании лабораторных исследований на Р. aeruginosa. Источник возбудителя, больные животные, выделяющие его с различными выделениями, калом, мочой, молоком, со спермой. Факторы передачи возбудителя — инфицированные корма, пищевое сырьё, вода, почва, окружающая среда (Сидоров, 1995; Красильников, 1999). По существующим данным в окружающей среде Р. aeruginosa паразитирует в простейших (Ряпис, 1994; Бухарин, Розенберг, 2007). На особом месте стоит водный ареал распространения Р. aeruginosa (Смирнов, Киприанова, 1990; Афонин, 1999).

Отмечена высокая резистентность бактерии к антибиотикам и антимикробным веществам (Nikaido, 1978; Илюхин, 1985). Р. aeruginosa вызывает порчу белковых пищевых продуктов (в первую очередь мясомолочных) (Стефанов, 1997). Сообщается, что Р. aeruginosa вызывает деструкцию нефтепродуктов и углеродсодержащих веществ (Al-Hadhrami, Lapin-Scott, Ficher, 1995). Несмотря на то, что потребность в диагностике синегнойной инфекции очевидна, существующие бактериологические параметры схем, методов выделения, идентификации и индикации Р. aeruginosa в объектах внешней среды, пищевом сырье и пищевых продуктах не совершенны. Трудности диагностики Р. aeruginosa связаны с беспигментными штаммами и ассоциативной микрофлорой (Шуляк, 2003). В связи с этим исследования, посвященные методам быстрого и точного обнаружения Р. aeruginosa в объектах окружающей среды, пищевом сырье и пищевых продуктах являются актуальными и могут иметь значительный научный интерес и прикладное значение.

Цель работы.

Совершенствование методов выделения, идентификации и индикации бактерий вида Р. aeruginosa из объектов внешней среды, пищевого сырья и пищевых продуктов.

Задачи работы.

1. Изучить основные биологические свойства штаммов Р. aeruginosa, выделенных из объектов внешней среды, пищевого сырья и пищевых продуктов.

2. Усовершенствовать среды для выделения и идентификации атипичных и беспигментных штаммов Р. aeruginosa.

3. Усовершенствовать схему бактериологической идентификации и дифференциации Р. aeruginosa из объектов внешней среды, пищевого сырья и пищевых продуктов на основе разработанных сред и тестов.

4. Выделить из объектов внешней среды, пищевого сырья и пищевых продуктов специфические бактериофаги бактерий Р. aeruginosa и изучить их основные биологические свойстваотобрать наиболее оптимальный специфический бактериофаг для конструирования биопрепарата.

5. На основе отобранного бактериофага создать биопрепарат и технологию его изготовления для индикации и идентификации бактерий вида Р. aeruginosa.

6. Усовершенствовать схему индикации бактерий Р. aeruginosa в объектах внешней среды, пищевого сырья и пищевых продуктов с помощьюбиопрепарата бактериофага УГСХА-Р.а.№ 4, методом реакции нарастания титра фага.

Научная новизна.

Проведены комплексные исследования по выделению и из объектов внешней среды, пищевого сырьяи пищевых продуктов, штаммов Р. aeruginosa. Получены новые данные о биологических свойствах атипичных и беспигментных штаммах, выделенных из объектов внешней среды, пищевого сырья и пищевых продуктов. Сконструирована новая специфическая среда накопления. Усовершенствована селективная среда с цетримидом для выделения атипичных и беспигментных штаммов Р. aeruginosa. Отобран" ряд наиболее информативных тестов и разработаны дополнительные тесты, позволяющие проводить видовую дифференциацию бактерий рода Pseudomonas с учётом существующих беспигментных штаммов.

Усовершенствована схема выделения и бактериологической идентификации бактерий вида Р. aeruginosa в объектах внешней среды, пищевом сырье и пищевых продуктах.

Выделены и изучены по заданным биологическим свойствам бактериофаги Р. aeruginosa, и отобран наиболее оптимальный специфический бактериофаг УГСХА-Р.а.№ 4 для создания диагностического биопрепарата.

Разработаны биотехнологические параметры изготовления диагностического биопрепарата и усовершенствована схема индикации Р. aeruginosa в объектах внешней среды, пищевого сырья и пищевых продуктов с применением специфического бактериофага УГСХА-Р.а.№ 4.

Практическая значимость работы.

Предложенная в диссертационной работе схема бактериологической идентификации и дифференциации позволяет выделять и типировать атипичные, беспигментные штаммы Р. aeruginosa из объектов внешней среды, пищевого сырья и пищевых продуктов. Использование сконструированной нами среды накопления, усовершенствованной селективной среды и подобранных тестов бактериологической идентификации, позволяет выделять и типировать бактерии Р. aeruginosa до вида в течение 75 часов. Сконструирован диагностический биопрепарат на основе специфичного бактериофага и усовершенствована схема индикации бактерий Р. aeruginosa методом реакции нарастания титра фага (РНФ) в течение 19−20 часов.

Результаты усовершенствования бактериологической схемы выделения и идентификации Pseudomonas aeruginosa из объектов внешней среды, пищевого сырья, и пищевых продуктов, а также возможность использования диагностического биопрепарата специфичного бактериофага-УГСХА-Р:а.4 в схеме реакции нарастания титра фага, подтверждены актами комиссионных испытанийв Ульяновской ГСХА от 22 января-20 Юг.

По материалам диссертационной работы разработаны и утверждены ректором УГСХА (от 10 феврвля 2010г) «Методические рекомендации по ускоренной индикации бактерий P. aeruginosa методом реакции нарастания титра фага в объектах санитарного надзора», «Методические рекомендации по изготовлению и контролю бактериофага УГСХА-Р.а.№ 4», а так же «Методические рекомендации по выделению и идентификации бактерий вида Р. aeruginosa в объектах санитарного надзора». Методические рекомендации разработаны для сотрудников медико-биологических научных учреждений и специалистов бактериологических лабораторий. Материалы диссертационной работы используются в учебном процессе при чтении лекций, для практических занятий студентов, работы аспирантов на кафедре микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ВСЭ Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Среда накопления (УГСХА-P.a.l) способствует избирательному росту и размножению P. aeruginosa, при первичном посеве исследуемого материала. Плотная селективная среда (УГСХА-Р.а.2) является специфичной и обеспечивает преимущественный рост P. aeruginosa, угнетая рост возможных ассоциантов.

2. Использованные среды УГСХА-P.a.l и УГСХА-Р.а.2, а также подобранные тесты в усовершенствованной схеме бактериологической дифференциации дают возможность за 75 ч идентифицировать P. aeruginosa.

3:. Отобран штамм специфического бактериофага для целей идентификации и индикации P. aeruginosa в объектах внешней среды, пищевом сырье и пищевых продуктах.

4. Разработаны биотехнологические параметры по созданию диагностического биопрепарата специфического бактериофага УГСХА-Р.а.№ 4.

5. Усовершенствованная схема индикации Р. aeruginosa методом РНФ с применением диагностического биопрепарата бактериофага УГСХА-Р.а.№ 4 ускоряет определение видовой принадлежности Р. aeruginosa.

Апробация работы.

Материалы диссертации были представлены на: Всероссийских научно-практических конференциях Ульяновской ГСХА (Ульяновск, 2005, 2008, 2009), Международной научно-практической конференции «Современное состояние и перспективы исследований по инфекционной и протозойной патологии животных, рыб и пчел» (Москва, 2008), Конференции молодых ученых «Актуальные проблемы инфекционной патологии ветеринарной медицины» (Покров, 2009).

Работа выполнена на кафедре микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия».

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 9 научных работ, из них 1 статья в журнале, рекомендованном ВАК РФ.

Структура и объем диссертации

.

Диссертация состоит из введения, двух глав: обзора литературы, собственных исследований, состоящих из материалов и методов, результатов исследований и их обсуждения, заключения, выводов, списка использованных литературных источников, приложений. Материалы диссертации изложены на 155 страницах, включают 33 таблицы и 21 рисунок. Список использованных литературных источников включает 203 наименования, в том числе 111 зарубежных.

127 ВЫВОДЫ.

1. Показано, что сконструированная накопительная среда с сукцинатом* натрия, аргинином и фурадонином и усовершенствованная селективная среда с цетримидом, в комплексе обладают высокой специфичностью, позволяют выделять атипичные и беспигментные штаммы.

P. aeruginosa, из объектов внешней среды, пищевого сырья и пищевых продуктов.

2. Усовершенствованая бактериологическая схема выделения и диффе ренциации P. aeruginosa, включающая специфичные среды и подоб ранные бактериологические тесты, основанные на утилизации ацета мида в анаэробных условиях, ингибировании солями бария, окислении глюкозы, разжижении желатина, позволила из внешней среды, пище вого сырья и пищевых продуктов выделить и идентифицировать 35 штаммов P. aeruginosa, в течение 75 часов.

3. Выделено 7 бактериофагов бактерий вида P. aeruginosa и изучены их изоляты, которые имели два типа колоний: с прозрачным центром и мутной переферией и мелкие прозрачныелитическая активность варьировала от 10″ 7 до 10″ 10 по методу Аппельмана и от 2×107 до 2 х Ю10 по методу Грациа. Изоляты бактериофагов проявляли устойчивость к хлороформу в течение 60 минут и инактивировались при температуре 75 °C в течение 30 минут.

4. В результате изучения биологических свойств бактериофагов, выбран один бактериофаг УГСХА — Р.а.№ 4 имеющий оптимальные для конструирования диагностического биопрепарата свойства: титр бактериофага составляет Ю" 10 по методу Аппельмана и 2×10ю по методу Грациаспектр литической активности 94.8%.

5. Разработаны параметры постановки реакции нарастания титра фага для ускоренной индикации бактерий вида P. aeruginosa с использованием биопрепарата из бактериофага УГСХА-Р.а.№ 4, позволяющие обнаружить в исследуемом материале указанные бактерии в концентрации от.

10 м.к. в 1 г (1мл) в течение 19−20 часов. 6. Оптимальными технологическими показателями для изготовления специфического биопрепарата бактериофага УГСХА-Р.а.№ 4 с высокой литической активностью являются: соотношение количества фаговых корпускул к количеству бактериальных клеток индикаторного штамма Р. aeruginosa 1:5, оптимальное время инкубирования при температуре 37 °C — 6 часов, обработка фаголизата хлороформом в соотношении 1:10 в течение 30 минут.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

Проблема диагностики так. называемых неферментирующих бактерий, и в. частности Р. aeruginosa, во внешней среде, пищевом сырье и пищевых продуктах, наиболее актуальна (Афонин, 1999; Покровский, 2002; Шуляю 2003) — Бактерии Р. aeruginosa вызывают заболевания у животных, что приводит к снижению экономического эффекта в животноводстве (Бовкун, Борисенкова, 1995).

Р. aeruginosa вызывает порчу пищевого сырья животного происхождения, а продукты питания, кроме того, являются одними из факторов передачи инфекций вызванных бактериями этого вида (Стефанов, 1997; Красильников, 1999).

Определенные проблемы, связанные с биодеградацией и ухудшением качества нефтяного сырья и нефтяных продуктов Р. aeruginosa представляет для нефтегазовой отрасли (Al-Hadhrami, Lapin-Scott, Ficher, 1995).

Инфекции, вызванные Р. aeruginosa в условиях госпитальных стационаров, представляют серьезную проблему для больных ожоговых отделений, родильных отделений, урологических и хирургических стационаров (Яковлев, 2001; Kirschke, 2003).

Устойчивость Р. aeruginosa во внешней среде, а так же способность длительное время сохранять свою жизнеспособность в субстратах бедных питательными веществами, способствуют циркуляции указанных бактерий в городах и в животноводческих комплексах (Bergen, 1981).

Проведение нерациональной антибиотикотерапии, а также безконтроль-ное применение антибиотиков в животноводстве, способствуют появлению штаммов Р. aeruginosa обладающих полирезистентностью к широкому спектру антибиотиков. Этому способствует наличие у Р. aeruginosa плазмид резистентности, отвечающих за устойчивость к определенным группам антибиотиков (Trevors, 1991).

При разработке накопительной УГСХА-Р.а.1 и усовершенствовании селективной среды УГСХА-Р.а.2, нами были использованы антимикробный препарат фурадонин и поверхностно-активное вещество цетримид, существенно не влияющие на рост клеток P. aeruginosa, но в комплексе обеспечивающие хороший селективный эффект. Чувствительность разработанной нами среды накопления УГСХА-Р.а.1, составляет 10 м.к./мл. Через 24 часа культивирования при температуре 37 °C количество бактериальных клеток P. aeruginosa увеличивается в 400 раз. Чувствительность селективной среды.

— J.

УГСХА-Р.а.2 составляет 10 м.к./мл. При дифференцированной чувствительности среды накопления УГСХА-Р.а.1 и селективной среды УГСХА-Р.а.2, появляется возможность визуализировать бактериальные колоний на плотной селективной среде и, кроме того, снижается риск лабораторных ошибок и случайного заражения среды второго этапа.

Типичные штаммы P. aeruginosa синтезируют различные пигменты, и идентификация пигментообразующих штаммов для бактериологов при проведении рутинных исследований не представляет серьезных трудностей. Однако 8% - 18% штаммов P. aeruginosa лишены пигментов (Мороз, 1988). Лабораторные ошибки при идентификации P. aeruginosa от неферментирую-щих бактерий других близких видов и родов создают трудности в своевременной диагностике этого возбудителя во внешней среде, пищевом сырье и пищевых продуктах (Meschede, 1986; Neu, 1985; Zierdt, 1985).

Нами предложено 4 теста бактериологической идентификации Р. aeruginosa, учитывающие их основные биохимические свойства. Тест «А» основан на способности Р. aeruginosa утилизировать ацетамид в анаэробных условиях, тест «В» основан на ингибировании роста Р. aeruginosa солями бария, тест «С» учитывает способность вышеуказанных бактерий окислять глюкозу с образованием кислоты и тест «D» выявляет протеолитические ферменты. Так же в бактериологическую схему добавлен биопрепарат бактериофага УГСХА-Р.а.№ 4, обладающий высокой специфичностью и широким спектром литической активности.

Таким образом, используя разработанные среды, тесты и специфичный бактериофаг УГСХА-Р.а.№ 4 в строгой последовательности, мы усовершенствовали схему выделения и идентификации P. aeruginosa с чувствительностью 10 м.к./мл в исследуемом субстрате, высокой специфичностью и учетом непигментированных штаммов. Специфичность сконструированной схемы выделения и идентификации P. aeruginosa из объектов внешней среды, пищевого сырья и пищевых продуктов проверена на 16 штаммах бактерий других видов и родов. С использованием усовершенствованной нами схемы, из объектов внешней среды, пищевого сырья и пищевых продуктов выделено 35 штаммов P. aeruginosa, четыре из которых лишены пигментов, что согласуется с данными литературы. Общее время, затрачивающееся на бактериологическую схему выделения и идентификацию бактерий до вида Pseudomonas aeruginosa, составляет 75 часов.

Для быстрого и точного обнаружения Р. aeruginosa, ускоренная индикация в объектах внешней среды, пищевом сырье и пищевых продуктах приобретает важное значение. Однако, применение современных генетических и иммунологических методов для решения этих задач зачастую притерпевает трудности связанные с высокой стоимостью, либо сложностью выполнения данных исследований.

О возможности применения бактериофагов бактерий Р. aeruginosa с целью идентификации указанных бактерий сообщают некоторые исследователи (Postic, Finland, 1961; Graber, Latta, Vogel, Brame, 1962; Sjoberg, Lindberg, 1968).

Для достижения поставленной цели, из объектов внешней среды выделено 7 бактериофагов активных в отношении штаммов Р. aeruginosa. Для конструирования биопрепарата и разработки реакции нарастания титра фага нами были изучены основные биологические свойства выделенных бактериофагов, это морфология негативных колоний и литическая активность и на основании полученных данных отобран наиболее подходящий дляэтих целей штамм бактериофага.

По морфологии негативных колоний выделенные бактериофаги разделены на две группы. К первой группе относятся бактериофаги, образующие негативные колонии диаметром 2 мм и полностью прозрачные, ко второй группе относятся бактериофаги, имеющие диаметр 3−4мм с четким прозрачным центром и мутным ореолом по периферии.

Литическая активность выделенных бактериофагов P. aeruginosa варьи.

7 1Л 7 1П ровала от 10″ до 10″ по методу Аппельмана и от 2×10 до 4×10 по методу Грациа.

Далее изучили спектр литической активности и специфичность действия выделенных и отобранных бактериофагов УГСХАР.а.№ 1 и УГСХА-Р.а.№ 4. Проведенные эксперименты показали, что оба фага являются высокоспецифичными по отношению к штаммам P. aeruginosa. Спектр литической активности составил у бактериофага УГСХАР.а.№ 1 — 76.9%, а спектр литической активности бактериофага УГСХАР.а.№ 4 — 94.8%. В настоящее время в России препараты бактериофагов выпускаются на производственных объединениях концерна «Микроген». Спектр литической активности комер-ческих бактериофагов составляет 48,4%. Препарат разработанный коллективом авторов Санкт-Петербурга, состоящий из нескольких бактериофагов, имеет совокупный спектр литической активности 81,7% (Асланов, Яфаев, Зуева, 2003).

Изучена температурная чувствительность и устойчивость к хлороформу бактериофага УГСХАР.а.№ 4. Оказалось что бактериофаг УГСХАР.а.№ 4 оказался устойчив к температуре 55 °C. При температуре выше 55 °C фаг УГСХА-Р.а.№ 4 терял свою физиологическую активность и погибал при температуре выше 75 °C. Литературные данные показывают, что фаги P. aeruginosa устойчивы к температуре 60 °C — 65 °C в течение 30 минут (Maillard, Hann, Perrin, 1998; Жиленков, 1998).

Результаты исследований устойчивости бактериофага УГСХА-Р.а.№ 4 к инактивирующему действию хлороформа (обработка 1:10 в течение 60 минут) определили их 100% устойчивость, а штаммы P. aeruginosa инактивиро-вались уже при экспозиции 30 минут. В результате анализа полученных данных было установлено, что при конструировании биопрепарата и постановки реакциинарастания®титра фага, инактивировать фаголизаты целесообразно? хлороформом.

Таким образом по результатам изучения биологических свойств был отобран бактериофаг УГСХА-Р.а.№ 4, для изготовления биопрепарата с целью идентификации и индикации P. aeruginosa в объектах внешней среды, пищевом сырье и пищевых продуктах.

Определены оптимальные технологические параметры для изготовления биопрепарата с высокой литической активностью: соотношение количества фаговых корпускул к к количеству бактериальных клеток индикаторного штамма P. aeruginosa 1:5, время инкубирования при температуре 37 °C — 6 часов. Для освобождения фаголизата от жизнеспособных бактерий необходимо применение хлороформа в соотношении 1:10 в течение 30 минут.

Для ускоренной индикации P. aeruginosa в объектах внешней среды, пищевом сырье и пищевых продуктах, разработали биотехнологические параметры постановки реакции нарастания титра фага, включающие количественный показатель реакции, имеющий диагностическое значение и оптимальное время, обеспечивающее полноценное взаимодействие: фага с бактериями.

По результатам проведенных исследований установлено, что количественный показатель реакции нарастания титра фага для УГСХА-Р.а.№ 4 (увел личение количества корпускул фага более чем в 5 раз) составил 10 м.к./мл. Оптимальное время экспозиции выбирали из следующих параметров:

— предварительное подращивание исследуемого материала в течение 5, «16, 24 часов, с последующим инкубированием в течение 5 ч при температуре 37 °C.

— Увеличение времени контакта исследуемого материала с фагом до 7, 16, 24 часов при температуре 37 °G.

В результате проведенных исследований было установленочто после предварительного подращивания исследуемого материала: в течение 5 часов удалось обнаружить P. aeruginosa гомологичные фагу УГСХА-Р.а.№ 4 в fy концентрации 10 м.к./мл.

Увеличение времени предварительной инкубации до 16 часов повысило чувствительность РНФ на один порядок. Подращивание материала при 24-часовой экспозиции существенно не повлияло на результаты РНФ.

Полученные экспериментальные данные позволяют считать, что наиболее оптимальным является режим РНФ при 7 часовой экспозиции исследуемого материала с фагом без подращивания. Такой режим позволяет провести индикацию P. aeruginosa в количестве 10 м.к./мл, в течение 24 часов. Однако увеличение времени инкубирования до 16 часов повышает чувствительность метода и биопрепарата на порядок и позволяет выявлять P. aeruginosa при наличии их в исходном исследуемом материале 10 м.к./мл.

РНФ как указывают В. Д. Тимаков и Д. М. Гольдфарб (1956), является чувствительным и специфическим методом диагностики, позволяющим за относительно короткий срок обнаружить искомые бактерии в субстрате, при наличии посторонней микрофлоры без выделения чистых культур.

Показать весь текст

Список литературы

  1. , М.А. Сравнительное изучение реакции нарастания титра фага и бактериологического метода при диагностике брюшного тифа у больных и реконвалесцентов / М. А Абдусаматов. // ЖМЭИ. — 1960. -№ 1. С. 23−27.
  2. , В.В. О применении бактериофагов в диагностике сальмонелле-зов / В. В. Аврех // ЖМЭИ. 1954. — № 7. — С. 93−96.
  3. , P.P. Изменение наследственности бактерий путем фаговой конверсии / P.P. Азизбекян // В кн. Микробиология. Т.З. (Итоги науки и техники ВИНИТИ АН СССР). М. — 1974. — С. 191−233.
  4. , Е.П. Способ идентификации Pseudomonas aeruginosa / Е. П. Алешня, В. В. Алешня // Открытия. 1977. — № 36. — С. 70−72.
  5. , P.M. Применение синтетических минеральных сред для выделения синегнойной палочки / P.M. Ароне, Т. В. Чурсина // Лаб. дело. -1976. -№ 3.- С. 179−180.
  6. , В.Г. Применение реакции нарастания титра фага для диагностики хронической дизентерии / В. Г. Арский, 3.3. Ахметов, А.В. Ясен-ский // Здравоохранение Таджикистана. — 1961. — № 2. — С. 5−11.
  7. , И.И. Фаготипирование патогенных стафилококков, выделенных из молока коров / Б. А. Степанов, И. И. Архангельский // Ветеринария. 1966. — № 3. — С. 27−29.
  8. , Б.И. Пути рационального использования синегнойных бактериофагов в лечебной И’противоэпидемической практике / Б. И. Асланов, Р. Х. Яфаев, Л. П. Зуева // Микробиол. 2003. — № 5. — С. 72−76.
  9. , Э.А. Разработка бактериологического метода выделения и идентификации Pseudomonas aeruginosa / Э. А. Афонин // Автореф. дис.. канд. биол. наук. — Ульяновск, 1999 — 18 с.
  10. , И.П. Статистические методы в микробиологических исследованиях / И. П. Ашмарин, А. А. Воробьев. — Л., 1962. — 261 с.
  11. Байрак В*.А. Тесты патогенности и фаготипы стафилококков, выделенных при мастите коров / В. А. Байрак // Автореф. дис. .канд. биол. наук. — М., 1970-- 19 с.
  12. , Н. Математика-в биологии и медицине / Н. Бейли. — М.: Мир, 1970.-326 с.
  13. Г. Ф. Биологические свойства синегнойной, палочки и ее роль в патологии птицы / Г. Ф. Бовкун, А. Н. Борисенкова // Ветеринария. — 1995.- № 2.- С. 30−33.
  14. , Д. В. Физико-химические явления на поверхности алюминия и его сплавов при воздействии микроорганизмов / Д. В. Белов // Автореф. дис. канд. химич. Наук. Нижний-Новгород, 2007. — 23 с.
  15. , Е.А. Выделение и изучение основных биологических свойств бактериофагов Klebsiella, конструирование на их основе биопрепарата и разработка параметров их применения // Автореферат, дис.. канд. биол. наук. — Саратов. — 2006. — 20 с.
  16. , О.В. Биоиндикация экологического состояния равнинных рек / О. В. Бухарин, Г. С. Розенберг. М.: Наука, 2007. — 403 с.
  17. , Р. Генетика бактериофага / Р. Висконти // Онтогенез вирусов. М. — 1956. — С. 141−142.
  18. Владимиров, Добрецов Флюорисцентные зонды в исследовании биологических мембран / Ю. А. Владимиров, Г. Е. Добрецов // Наука. — М. — 1980.- С. 268−270.
  19. , И.М. Общая, характеристика бактериофагов / И. М. Габрилович // Основы бактериофагии. Минск. — 1973. — С. 5 — 24.
  20. , В.Я. Бактериофаги Salmonella choleraesuis, сравнительная характеристика и практическое применение / В. Я. Ганюшкин // Автореф. дис. .докт. вет. наук. — М. — 1984. — 34 с.
  21. , Д.М. Опыт применения реакции нарастания титра фага для диагностики дизентерии / Д. М. Гольдфарб, В. Н. Кузнецова // ЖМЭИ. — 1957.-№ 8.-С. 90−94.
  22. Гольдфарб, Д. Mi Бактериофагия / Д. М. Гольдфарб // Mi: Медгиз. -1961.-299 с.
  23. , Р.В. Фаготипирование паратифозных В бактерий: и действие на них бактериофагов / Р1 В. Гордина // Автореф. дис.. докт. вет. наук. -М., 1954.-С. 24−27.
  24. ГОСТ Р 26 670−91. Продукты пищевые. Методы культивирования, микроорганизмов. Взамен ГОСТ 26 670–85. — М.: Изд-во стандартов, 2008. -8 с.
  25. ГОСТ Р 51 426−99. Микробиология. Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Общее руководство по приготовлению разведений для микробиологических исследований. — М.: Изд-во стандартов, 2002. — 7 с.
  26. ГОСТ Р 51 446−99. Микробиология. Продукты пищевые. Общие правила микробиологических исследований. — введен 01.01.2001 до 01.01.2010.-М.: Изд-во стандартов, 2005 .-31 с.
  27. , Т.А. Фаготипирование S.typhimurium, выделенных в Киеве в 1966—1970 / Т. А. Давиденко, А. М. Зарицкий // В кн.: Кишечные инфекции. Киев. — 1972. — С. 41−43.
  28. , И.В. Методика быстрого обнаружения чумного микроба при помощи бактериофага / И. В. Домарадский, О. Н. Мосолова, JI.K. Денисенко // Иркутск. 1957. — С. 44−51.
  29. , М.С. Оценка эффективности питательных сред для обнаружения синегнойной палочки / М. С. Жарикова, А. Т. Козлова, Л.Г. Зимина//Лаб. дело. 1983. — № 10. — С. 48−51.
  30. , Е.Л. Изучение начальных стадий взаимодействия умеренного фага phi04 с клеткой Pseudomonas aeruginosa / Е. Л. Жиленков // Микробиол. 1997. — Т.66. — № 4. — С. 532−538-.
  31. , С.Н. Создание и разработка схем применения диагностических" биопрепаратов на основе выделенных и изученных бактериофагов энтеробактерий /¦ С. Н. Золотухин // Автореф. дис.. д-ра биол. наук. -Ульяновск, 2007. 39 с.
  32. Инфекция, вызванная Pseudomonas aeruginosa у шиншилл / Lipej Z. et al. Hrv. Vet. Vjesn. — 1993. — V.21. — № 3. — P. 73−77.
  33. Применение РНФ для индикации дизентерийных бактерий флекснера в организме зараженных кроликов / А. Ю. Иллютович и др. // Бюлл. эксп. биол. и мед. 1958. — № 6. — С. 78−83.
  34. , В.И. Псевдомонадные инфекции в патологии человека / Илюхин, В.И. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1985. — № 2. — С. 110−114.
  35. , Г. П. Применение жидких сред накопления при поисках Pseudomonas aeruginosa в объектах окружающей среды и патологическом материале / Г. П. Калина, Н. Б. Комзолова // ЖМЭИ. — 1988. — № 5. -С. 98−105.
  36. Кандемия у пациентов в стационарах Санкт-Петербурга / Н. Н. Климко и др. // журнал клин, микробиол. и антимикр. химиотерап. — 2002. -Т. 4.- № 1. С. 15−21.
  37. , Н.А. Идентификация возбудителя листериоза с помощью бактериофага / И. А. Бакулов, Н. А. Капырина // Симпозиум «Профилактика и меры борьбы с лептоспирозом и листериозом с/х животных». -Новочеркасск. — 1972. С. 76−78.
  38. Усвоение додецилсульфата натрия бактериями рода Pseudomonas / Е. А. Киприанова и др. // Микробиол. 1978. — Т.40. — № 4. — С. 503−505.
  39. Кандемия у пациентов в стационарах Санкт-Петербурга / Н. Н. Климко и др. // Клин, микробиол. и антимикр. химиотерап. — 2002. — Т.4. — № 1.- С. 15−21.
  40. , М. A. Разработка основы.биопрепарата для диградации нефти при загрязнении природных сред / М. А. Клюянова // Автореф. дис. .канд. биол. наук. — Уфа, 2009. — 24 с.
  41. , E.H. Создание биопрепарата на основе выделенных и изученных бактериофагов Enteroccocus faecalis // Автореф. дис. .канд. биол. наук. Ульяновск, 2009. — 20 с.
  42. , O.A. Применение метода РНФ для контроля качества дезинфекции в очагах кишечных инфекций / O.A. Козелько // ЖМЭИ. — 1961.-№ 2.-С. 36−40.
  43. , Т.И. Фаготипирование листерий / Т. И. Кольпикова // Ветеринария. 1990. — № 6. — С. 31−32.
  44. Коритняк, Б.М.. Выделение и изучение основных биологических свойств бактериофагов Yersinia enterocolitica и их применение в диагностике // Автореф. дис.. .канд. биол. наук. Саратов, 2005. — 20 с.
  45. , А.П. Микробиологический словарь — справочник / А. П. Красильников, Т. Р. Романовская // Минск: Асар. 1999. — С. 310−311.
  46. , Г. А. Применение реакции нарастания титра фага для исследования объектов внешней среды / Г. А. Кременчук, М. А. Гицевич, К. П. Бояршинова // ЖМЭИ. 1961. — № 7. — С. 124−126.
  47. , A.M. Биологические свойства и нуклеотидный состав ДНК бактериофагов Pseudomonas / A.M. Кульба, A.C. Горелышев // Ж., Микробиология. 1981. — Т.50. — В.З. — С. 536−542.
  48. Мац, Л. И. Вопросы санитарной бактериологии и вирусологии. — М.: Медицина. 1965. — С. 44−59.
  49. Методические рекомендации: по выделению и диагностике псевдомо-ноза сельскохозяйственных животных. — ГУВ МСХ СССР, М., 1982.
  50. Методы частной бактериологии / Д. А. Васильев и-др. Ульяновск: Ульяновская ГСХ, 2004. — 233 с.
  51. , Н.И. Выделение и изучение основных биологических свойств бактериофагов Escherichia coli 0157 и их применение в диагностике: Автореф. дис. .канд. биол. наук. — Саратов, 2004. 20 с.
  52. , А.Ф. Синегнойная инфекция / Мороз, А. Ф. Анциферова, Н. Г. Баскакова, Н.В. М. — Медицина, 1988. — 256 с.
  53. , А.Ф. Питательная среда для выделения Pseudomunas aeruginosa / А. Ф. Мороз, Г. Е. Афиногенов, Б. М. Бекбергенов // Лаб. дело. — 1976. № 5.- С. 302−303.
  54. Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований / под редакцией А. С. Лабинской, Л. П. Блинковой, А. С. Ещиной. -М.: Медицина, 2004. — 576 с.
  55. , Н.Н. Ускоренный метод диагностики брюшного тифа Vi-фага / Н. Н. Островская, Б. Н. Папкова // ЖМЭИ. 1951. — № 2. — С. 37−40.
  56. Определитель бактерий Берджи / под редакцией Дж. Хоулта и др., 9-е издание. Т.1. М.: Мир, 1997. — 432 с.
  57. Островская, Н: Н. К использованию метода нарастания* титра фага для выявления бруцелл во внешней среде / Н. Н". Островская, Д.М. Гольд-фарб // ЖМЭИ. 1961. — № 5. — С. 145−147.
  58. , И.П. Изучение морфологии и биологических свойств фагов Вас. anthracis и Вас. Cereus / И. П. Павлова // ЖМЭИ. 1971″. — № 7. —1. С. 147−149.
  59. , Е.А. Изучение разнообразия в группе фагов вида РВ1 (Mio-viridae) Pseudomonas aeruginosa и их поведения на адсорбционно-устойчивых мутантах бактерий / Е. А. Плетенева, О. В. Шабурова // Генетика. 2008. — Т. 44. — № 2. — С. 185−194.
  60. , В.И. Медицинская микробиология / В. И. Покровский, O.K. Поздеев // М.: Гоэтар Медицина. 2002. — С. 343−348.
  61. , В.И. Медицинская микробиология / В. И. Покровский, O.K. Поздеев // М.: Гоэтар Медицина. 1998. — С. 183−192.
  62. , E.H. Выделение и изучение биологических свойств бактериофагов рода Enterobacter, конструирование на их основе биопрепарата и разработка параметров практического применения: Автореф. дис.. канд. биол. наук. — Саратов, 2006. — С. 4−19.
  63. , М.С. Питательные среды для медицинской и санитарной микробиологии / М. С. Поляк СПб.: ЭЛБИ-СПб. — 2008. — С. 179−180.
  64. , Л.П. Выделение и изучение основных биологических свойств бактериофагов Citrobacter и их применение в диагностике: Автореф. дис.. канд. биол. наук. Саратов, 2004. — 21 с.
  65. И.П. К диагностике рожи свиней / И. П. Ревенко // Ветеринария. 1970. — № 6. — С. 13−23.
  66. И.П. Бактериофаги и их использование в ветеринарной практике. Киев: Урожай. — 1978. — С. 41−88.
  67. М.А. Меланинообразующие культуры Pseudomonas aeruginosa / М. А. Рожавин, П. Л. Тыдельская // Журн. микробиологии.-1979.- N2.-С. 21−23.
  68. Результаты бактериологического обследования поросят различного возраста в свиноводческом комплексе / О. В. Прунтова и др. // Вирусные болезни с.-х. животных: тез. докл. Всерос. науч.-практ. конф. Владимир. — 1995. 175 с.
  69. .К., Казакова С. Ф. Применение метода нарастания титрафага для исследования объектов внешней среды / Б. К. Рубашкина, С. Ф. Казакова // ЖМЭИ. 1959- - № 6. — С. 110−112.
  70. , Л.А. Биологическая активность, музейных и свежевыделенных культур Pseudomunas aeruginosa и возможные* фазовые преобразования популяций возбудителя / Л. А. Ряпис и др. — микробиол, эпидемиол. и иммунобиол. — 1994. № 6. — С. 31−32.
  71. Ф.Е. Новый метод бактерюлопчно д! агностики за допомо-гою бактерюфага / Ф. Е. Сергиенко // Мжробюл. журн. АН УССР. — 1936. -№ 1. -С. 85−112.
  72. , Е.П. Тест идентификации бактерий рода Pseudomonas / Е. П. Сиволодский // Лаб. дело. 1988. — № 11. — С. 64−66.
  73. , В.В. Бактерии рода Pseudomonas / B.B. Смирнов, Е.А. Ки-прианова // Киев: Наук. Думка. — 1990. С. 65−69.
  74. , И. Распространение Pseudomonas aeruginosa в мякоти мясных продуктов / И. Стефанов // Вет. мед. — 1997. — № 4. С. 256−257.
  75. , Н.В. Сравнительное изучение РНФ для выявления носи-тельства дизентерийных бактерий: Автореф. дис.. канд. мед. наук. — Симферополь. 1964. — С. 6−20.
  76. , М.А. Определитель зоопатогенных микроорганизмов, справочник / М. А. Сидоров, Д. И. Скородумов, В. Ф. Федотов. М.: Медицина, 1995.-319 с.
  77. , В.Д. Экспериментальное обоснование нового принципа обнаружения дизентерийных и брюшнотифозных бактерий с помощью фага / В. Д. Тимаков, Д. М. Гольдфарб // ЖМЭИ. 1956. — № 10. — С. 3−7.
  78. Тимаков, В: Д: Об условиях взаимодействия фага и бактериальной клетки / В. Д. Тимаков, Д. М. Гольдфарб // Вестник АМН СССР. 1958. — № 2. — С. 37−43.
  79. , В.Д. Реакция нарастания титра фага (РНФ) / В. Д. Тимаков, Д. М. Гольдфарб. М., 1962. — 32 с.
  80. , A.C. Ультраструктура вирусов бактерий. — М.: Наука.1968.-89 с.
  81. Тыдельская, И.JI.Селективная среда для выделения Pseudomonas aeruginosa / И. Л. Тыдельская, М. А. Рожавин, В. В. Солозуб // Лаб. дело. 1980. — № 9. — С. 549−550.
  82. Усвоение додецилсульфата натрия бактериями рода Pseudomonas / Е. А. Киприанова и др. // Микробиол. 1978. — Т. 40. — № 4. — С. 503−505.
  83. , Н.А. Выделение и изучение основных биологических свойств бактериофагов Proteus, конструирование на их основе биопрепарата и разработка параметров практического применения // Автореф. дис.. канд. биол. наук. — Саратов. — 2006. 22 с.
  84. , К.И. Применение специфического фактериофага для диагностики паратифозного аборта кобыл / К. И. Цветков // Ветеринария. -1941.-№ 6.-С. 4−6.
  85. , Б.Ф. Руководство по бактериальным инфекциям собак. Том 2. Грамотрицательные бактерии / Б. Ф. Шуляк. — М.: «Олита», 2003. -283 с.
  86. , М.К. Некоторые свойства листериозного бактериофага / М. К. Щеглова // ЖМЭИ. 1962. — № 1. — С. 99−102.
  87. С.В. Современные подходы к антибактериальной терапии инфекций мочевыводящих путей / С. В. Яковлев // Consilium-medicum. — 2001.- № 3.-С. 300−306.
  88. , С.В. Бактериальные инфекции в амбулаторной практике: выбор оптимального антибактериального препарата / С. В. Яковлев, Л.И.
  89. , М.П. Суворова // Consilium medicum. 2002. — № 4. — С. 10−21.
  90. A second N-acylhomoserine lactone signal produced by Pseudomonas aeruginosa / J.P. Pearson et al. // Proc Natl Acad Sci U. S. A. — 1995. V. 92.-P. 1490−1492.
  91. Aalam, S. High efficiency styrene biodegradation in a biphasic organic/water continuous reactor / S. Aalam, A. Pauss, J. Lebeault //Applied Microbiology Biotechnology. 1993. — № 39. — P. 696−699.
  92. Al-Hadhrami, M.N. Bacterial survival and n-alkane degradation within omani crude oil and a mousse / M.N. Al-Hadhrami, H.M. Lappin-Scott, P J. Fisher // Mar. Pollut. Bull. 1995. V. 30. — № 6. — P. 403−408.
  93. Barnes, H.J. Miscellaneous and sporadic bacterial infections / H.J. Barnes // In Y.M. Saif: Diseases of poultry, 11th edition. 2003. — P. 845−862.
  94. Bonde, G. Bacterial Indicator of Water Pollution. / G. Bonde // Teknisk For-lag. Copenhagen. — 1963. — P. 164−167.
  95. Boucadida, J. Molecular epidemiology of chronic pulmonary colonization by Pseudomonas aeruginosa in cystic fibrosis / J. Boucadida, M. de Montalembert, J. Lenoir // J. Med. Microbiol. 1993. — V. 38. — P. 29−33.
  96. Bouza, E. A European perspective on nosocomial urinary tract infections. I. Report on the microbiology, work-load, etiology and antimicrobial susceptibility / E. Bouza, A. Voss, et al. // Clin Microbiol Infect. 2001. — V. 7. -P. 523−531.
  97. Boyd, J. S. K. Bacteriophage and heredity / J. S. K. Boyd // Nature. 1954. -V. 173.-P. 50−51.
  98. Burnet, F. M. Induced lysogenicity and mutation of bacteriophage within ly-sogenic bacteria / F. M. Burnet, D. Lush. // Australian J. Exptl. Biol. Med. Sei. 1936. — V. 14. — P. 27−38.
  99. Byng, G. Variable enzymological pattering in tyrosine biosynthesis as a means of determining natural relatedness among the Pseudomonadaceae / G. Byng, R. Whitarer, Cherna et al. // J. Bacteriol. 1980. — V. 144. — № 1. -P. 247−257.
  100. Comparative Genomic Analysis of 18 Pseudomonas aeruginosa Bacteriophages / T. Kwan et al. // Journal of Bacteriology. 2006. — V. 188. — № 3. -P. 184−187.
  101. Darreil, J.H. Pyocine-typing of hospital strains of Pseudomonas pyocyanea / J. H. Darrell, A.H. Wahba. // J. Clin. Pathol. 1964. — V. 17. — P. 236−242.
  102. De Vos, P. Intrageneric and intergeneric similarities of ribosomal RNA cis-trons of the Genus Pseudomonas and the implications for taxonomy / P. De Vos // Antonie van Leeuwenhoek J. Microbiol, and Serol. 1980. — V. 46. — № l.-P. 96−99.
  103. Ednie, L.M. Comparative activities of clinafloxacin against gram-positive and -negative bacteria / L.M. Ednie, M.R. Jacobs, P.C. Appelbaum // An-timicrob Agents Chemother. 1998. — V. 42. — P. 269−273.
  104. Euzeby, J.P. List of Prokaryotic Names with Standing in Nomenclature -Genus Pseudomonas. http://www.bacterio.cict.fr/index.html.
  105. Expression of Pseudomonas aeruginosa virulence genes requires cell-to-cell communication / L. Passador et al. // Science. 1993. — V.260. — P. 127 130.
  106. Feldman, M. Role of flagella inj pathogenesis of Pseudomonas aeruginosa pulmonary infection / M.' Feldman- R. Bryan, S. Rajan, L. Scheffler, S. Brunnert, H. Tang, et al. // Infect Immun. 1998. — V. 66. — P. 43−51.
  107. Festl, H. DNA hybridization probe for the Pseudomonas fluorescens group/ H. Festl, W. Ludwig, K. H. Schleifer // Appl. And Environ. Microbiol. -1986.-V.52.- № 5.- P. 190−194
  108. Finegold, Bailey and Scott’s Diagnostic Microbiology / Finegold // 7th ed., The C. V. Mosby Co., St. Louis. 1986.
  109. Frank, D.W. Cloning and sequence analysis of a transregulatory locus required for exoenzyme S synthesis in Pseudomonas aeruginosa / D.W. Frank, B.H. Iglewski 11J Bacteriol. 1991. — V. 17. — № 3. — P. — 460−468.
  110. Freeman, V. J. Studies on the virulence of bacteriophage infected strains of Corynebacterium diphtheriae / V. J. Freeman // J. Bacteriol. 1951. — V. 61.-P. 675−688.
  111. Frei, W. Uber Cytochrom and das Atmungssystem der Bakterien / W. Frei, L. Riedmuller, F. Almasy // Biochem. Z. 1934. — V.27. — № 4. — P. 253 267.
  112. Fuerst, J.A. Surfase appendages similar to fimbriae (pili) von Pseudomonas cpecies / J.A. Fuerst, A. Hayward // J. Gen. Microbiology. 1969. — V. 58. -№ 2. — P. 227−237.
  113. Fuqua, W.C. Quorum sensing in bacteria: the LuxR-LuxI family of cell density-responsive transcriptional regulators / W.C. Fuqua, S.C. Winans, E. P. Greenberg // J Bacteriol. 1994. -V. 17. — № 6. — P. 269−275.
  114. Gaby, W.L. Differential diagnosis of pseudomonas-like microorganisms in the clinical laboratory / W. L. Gaby, E. Free // J. Bact. 1958. — V.76. -№ 4. p. 442−444.
  115. Gaby, W. L. Practical laboratory test for the identification of Pseudmnas aeruginosa / W. L. Gaby, C. Hadley // J. Bact. 1957. — V. 74. — P. 356−363.
  116. Galloway, D. K: Pseudomonas aeruginosa elastase and elastolysis revisited: recent developments / D.R. Galloway I I Mol Microbiol: — 1991. — V.5. — № 2.-P. 315−321.
  117. Gambello, M: J. Cloning and characterization of the Pseudomonas aeruginosa lasR gene, a transcriptional activator of elastase expression / M.J. Gambello, B. H: Iglewski //J Bacteriol. 1991. — V. — 17. — № 3. — P. — 3039.
  118. Greta, B. Elaboraria Si Evaluaria Metodelor Rapide Pentru Diagnosticul La-borator AI Infectiilor Tractusulii Urinar / G. Balan, // Teza de doctor on medicina. Chisunai. — 2008.
  119. Gould, W. New selective media for enumeration and recovery of Pseudomo-nads from various habitats / W. Gould, C. Hagertorn, T. Bardinelli, R. Zabrotoviwicz // Appl. and Envirion.Microbiol. — 1985. V. 45. — № 1. — P. 28−32.
  120. Garg, P.K. Incidence, spectrum and antibiotic sensitivity pattern of bacterial infections among patients with acute pancreatitis / P.K. Garg, S. Khanna, N.P. Bohidar, et al. // J. Gastroenterol Hepatol. 2001. — V.16. — P. 55−59.
  121. Gilardi, G. L. Nonfermentative gram-negative bacteria encouatered in clinical specimens. J. Microbiol. Serol. — 1974. — V. 39. — № 2. -P. 29−42.
  122. Graber, C. D. Bacteriophage grouping of Pseudomonas aeruginosa / C. D. Graber, R. Latta, E. H. Vogel, R. Brame. // Amer. J. Clin. Pathol. 1962. -V.37.-P. 54−62.
  123. Hancock, R. Antibiotic uptake in. Gram-negative bacteria / R. Hancock, A. Bell // Eur. J. Clin Microbiol Infect. Dis. 1988. — V.7. — P. 713−720.
  124. Holloway, B. W. Genom organization in Pseudomonas / B. W. Holloway, A. F. Morgan // Ann. Rev. Microbiol: 1986. — V. 40. — P. 79−105.
  125. Holloway, B.W. Lysogeny in Pseudomonas, aeruginosa / B.W. Holloway, J. B. Egan, M. Monk. // Aust. J: Exp. Biol. 1960. — V. 38. — P. 321−330.
  126. Holloway, B. W. Lysogenic conversion in Pseudomonas aeruginosa / B. W. Holloway, G. N Cooper. II J. Bacteriol. 1962. -V. 84. — P. 321−324.
  127. Hugh, R. The taxonomic significance of fermentative versus oxidative metabolism of carbohydrates by various Gram-negative bacteria / R. Hugh, E. Leifson // J. Bact. 1953. — V. 66. — № 1. — P. 24−26.
  128. Husson, M.O. Pseudomonas and Burkholderia / M.O. Husson, Mr. Hamze, S. Verhille, D. Izard //Clinical precis of bacteriology, Paris. 2000. — P. 259−285.
  129. Iglewski, B.H. Pseudomonas. In: Baron’s Medical Microbiology (Barron S et al, eds.) / B.H. Iglewski // 4th ed., Univ of Texas Medical Branch. 1996. -P. — 543−548.
  130. Iglewski, B.H. Pseudomonas aeruginosa exoenzyme S: an adenosine diphosphate ribosyltransferase distinct from toxin A / B.H. Iglewski, J. Sadoff, M.J. Bjorn, E.S. Maxwell // Proc Natl Acad Sei USA.- 1978. V.75. -№ 3.-P. 211−215.
  131. Jain, D.K. Effect of addition of Pseudomonas aeruginosa Ug2 inocula or biosurfactants on biodegradation of selected hydrocarbons in soil / D.K. Jain, H. Lee, J.T. Trevors // Journal of Industrial Microbiology. 1992. -V.lOi — № 2. — P. 87−93.
  132. Jessen, O. Pseudomonas aerugenosa and other green fluorescent pseudomo-nads / Jessen. O. // Munksgaad, Copenhagen. 1965 — P. 244−246.
  133. Keeven, J. A new selective medium for isolation / J. Keeven, B. De Cicco // Abstr. Annu. Meet. Amer. Soc. Microbiol., 1987, 87tm Annu. Meet., AtlantaWashington, D.C. 1987.-P. 382−385.
  134. Kirschke, D.L. Pseudomonas aeruginosa and Serratia marcescens contamination associated with amanufacturing defect in bronchoscopes / D.L. Kirschke, et. al. // The New England Journal of Medicine. — 2003. V. 348. -№ 3.- P. 214−220.
  135. Klinge, K. Differential tehniques anB methods of isolation of Pseudomonas / K. Klinge // Journal of Applied Microbiology. 1960. — V. 23. — № 3. — P. 442−462.
  136. Kramer, G. Beitrage1 zum- sofortigen Nachweis von Oxydations-und Reduktionswirkungen der Bakterien auf Grund der neuen Methode von W. H. Schultze / G. Kramer // Zbl. Bakt. (Abt. 1 Orig.). 1912. — V.62.1. P. 394−399.
  137. Krylov, V. Myoviridae bacteriophages of Pseudomonas aeruginosa: a long and complex evolutionary pathway / V. Krylov // Res Microbiol. — 2003. — V. 154.-P. 69−75.
  138. Lazdunski, A. Factors of virulence of Pseudomonas aeruginosa and their regulation / A. Lazdunski // Med. Badly. Repugnant. 1998. — V. 28. — P. 109−118.
  139. Levin, M.A. Membrane filter technique for enumeration of Pseudomonas aeruginosa / M.A. Levin, V.J. Cabelli // Appl. Microbiol. 1972. — V. 24. -P. 864−870.
  140. Loele, W. Uber die Verwendbarkeit von Oxydationswirkungen mit Para-phenylendiamin in der Bakteriologie / Loele, W. // Zbl. Bakt. (Abt. 1 Orig.). — 1929. — V. 111.-P. 325−328.
  141. MacFaddin, J.F. Media for Isolation Cultivation -Identification-Maintenance of Medical Bacteria / J.F. MacFaddin // Williams and Wilkins, Baltimore. — 1985. -V. 1. — P. 25−28.
  142. Maillard, J.Y. Perrin R Resistance of Pseudomonas aeruginosa PAOl phage Fl 16 to sodium hypochlorite / J.Y. Maillard, A.C. Hann // J: Appl Microbiol. 1998. — V.85. — № 5. — P. 799−806.
  143. Mann, S. Ober melaninbildende Stamme von Pseudomonas aeruginosa / S. Mann // Arch. Microbiol. 1969. — V. 65. — № 4. — P. 359−379.
  144. Meschede, W. Pseudomonas aerugenosa / W. Meschede // Med. Welt. — 1986. -V. 37, № 41. -P. 269−272.
  145. Multiple antibiotics, resistance in Pseudomonas aeruginosa: evidence, for involvement of an efflux operone / K. Poole et al. // J: Bacteriol. 1993. -V. 175.-P. 363−372.
  146. Neu, H.C. Ecology, clinical significance and antimicrobial susceptibility of Pseudomonas aerugenosa / H.C. Neu // Nonfermentative gram-negative rods.- 1985.-V. 16.-P. 117−159.
  147. Nicas, T.I. The role of exoenzyme S in infections with Pseudomonas aeruginosa / T.I. Nicas, J. Bradley, J.E. Lochner, B.H. Iglewski // J Infect Dis. -1985.-№ 152.-P. 16−21.
  148. Nikaido, H. Outer membranes of gram-negative bacteria. XIX. Isolation from Pseudomonas aeruginosa PAOl and use in reconstitution and definition of the permeability barrier / H. Nikaido, R.E. Hancock // J. Bacteriol. -1978.-V. 136.-№ 1.-P. 381−390.
  149. Nikaido, H. Penetration of lipophilic agents with multiple protonation sites into bacteria cells- tetracyclines and fluoroquinolones as examples / H. Nikaido, D.G. Thanassi // Antimicrob Agents Chemother. — 1993. V. 37. -P. 393−399.
  150. O’Calaghan, R.J. Physical stability and biological and physicochemical properties of twelve Pseudomonas aeruginosa bacteriophages / R.J. O’Calaghan, W. O’Mara, J. B. Grogan // Virology. 1969. — V.37. -P. 642−653.
  151. Ojeniyi, B. Comparison of genome fingerprinting with conventional typing methods used on Pseudomonas aeruginosa isolates from cystic fibrosis patients / B. Ojeniyi, U. Steen-Petersen, N. Hoiby // APMIS. 1993″. — V. 101. -P. 168−175.
  152. Ogle, J.W. Characterization and use of a DNA probe as an epidemiological marker for Pseudomonas aeruginosa / J.W. Ogle, J.M. Janda, D.E. Woods, M.L. Vasil // J. Infect. Dis. 1987. -V. 155. — P. 119−126.
  153. Olive, P. r B. Di Principles and applications of methods for DNA-based typing of microbial organisms / PI B. D. Olive // J. Olin Microbiol 1999. V. 37.-P. 661−669.
  154. Osman, M.A.Pyocine typing of P. Aeruginosa / M.A. Osman // J. Clin. Pathol. 1965. — V. 18. — P. 200−202.
  155. Palleroni, N.J. Doudoroff M. Nucleic acid homologies in the genus Pseudomonas / N.J. Palleroni, M. Doudoroff // Int. J. Syst. Bacteriol. 1973. — V. 23.-№ 4.-P. 333−339.
  156. Palleroni, N.J. Genus Pseudomonas Migula 1984 / N.J. Palleroni // Bergey’s manual of systematic bacteriology Ed. R. Noel, Krieg J. G. Holf.-Baltimore: London: Williams Wilkins. 1984. — V.l. — P. — 141−198.
  157. Palleroni, N.J. The Pseudomonas group / N.J. Palleroni // Bushey: Meadow-field press Ltd. 1978. — 80 p.
  158. Pesci, E.C. The chain of command in Pseudomonas quorum sensing / E.C. Pesci, B.H. Inglewski // Trends Microbiol. 1997. — V. 24. — P. 132−134.
  159. Pickett, M.J. Manual of Clinical Microbiology / M.J. Pickett, D.G. Hollis, E. Bottone // 5th ed., ed. in chief A.Ballows. Washington: Am Soc Mirobiol. -1991.-P. 410−428.
  160. Postic, B. Observations on bacteriophage typing of Pseudomonas aeruginosa / B. Postic, M. Finland // J. Clin. Invest.-1961. V.40. — № 20. — P. 6475.
  161. Premalatha, A. Pentachlorophenol degradation by Pseudomonas aeruginosa / A. Premalatha, G. S. Rajakumar // World Journal of Microbiology" and Biotechnology. 1994. -№ 10. — P. 334−337.
  162. Roncero, C. Pseudomonas aeruginosa Transposable Bacteriophages D3112 and B3 Require Pili and Surface Growth for Adsorption / C. Roncero, A. Darzins, J. Malcolm // J. of Bact., Apr. 1990. P. 899−904.
  163. Ryan, K.J. Sherris Medical Microbiology / K.J. Ryan, C.G. Ray // 4th ed., McGraw. 2004. — P. 236−239.
  164. Shibata, N., Doi Y., Yamane K., Yagi T., Kurokawa H., Kato K.S.H.,.Kai. K., Arakawa Y. // Journal of Clinical Microbiology. 2003. — V. 41. — P. 407−411.
  165. Schubert R., The use of arginine brilliant' green glucose peptone broth (ABGP medium) as a primary culture medium for Pseudomonas’aeruginosa / R. Schubert // Zbl.Bakt. B. 1989. — V.187. — № 3. — P. 266−268.
  166. Schultze, W.H. Uber eine neue Methode zum Nachweis von Reduktions-u. Oxydations-wirkungen der Bakterien / W.H. Schultze // Zbl. Bakt. (Abt. 1 Orig.). 1910. — V. 56. — P. 544−548.
  167. Schwartz, D.C. and Cantor C.R. // Cell. 1984. -V. 37. -P. 67−75.
  168. Sellers, W. Medium for differentiating the gram-negative, nonfermenting bacilli of medical interest / W. Sellers //J. Bact. 1964. — V.8. — P. 46−48.
  169. Sjoberg, L. Phage typing of Pseudomonas aeruginosa / L. Sjoberg, A. A. Lindberg. // Acta Pathol. Microbiol. Scand. 1968. — V.74. — P. 61−68.
  170. Srinivasan, A. An outbreak of Pseudomonas aeruginosa infection associated with flexible bronchoscopes / A. Srinivasan, et.al. // The New England Journal of Medicine. 2003. — V.348. -№ 3. — P. 221−227.
  171. Stackrerbrandt, E. The evolution of prokaryotes / E. Stackrerbrandt, C.R. Woese // Molecular and cellular aspects of microbial evolution: Soc. Gen. microbiol. symp.- Cambridge: Univ. Press. — 1981. — P. 21−31.
  172. Stanier, R. Y. The aerobic pseudomonads: a taxonomic study / R. Y. Stanier, N. J. Palleroni, M. Doudoroff. // J. Gen. Microbiol. 1966. -V. 43. P. 159 271.
  173. Steed, C.J. Common infections acquired in the hospital: the nurse’s role in prevention / C.J. Steed. // Nurs Clin North Am. 1999. — V.34. — № 2. — P. 43−61.
  174. Stock, J.B. Protein phosphorylation and regulation of adaptive response in bacteria / J.B. Stock, A.J. Ninfa, A.M. Stock // Microbiol Rev 1989. V. 53. -P. 450−490.
  175. Uetake, H. Conversion of somatic antigens in Salmonella by phage infection leading to lysis or lysogeny / H. Uetake // Virology. 1958. — V. 5. — P. 6891.
  176. Van Dyke, M.I. Evaluation of microbial surfactants for recovery of hydrophobic pollutants from soil / M.I. Van Dyke, S.L. Gulley, H. Lee, J.T. Trevors // Journal of Industrial Microbiology. 1993. — № 11. — P. 163−170.
  177. Vidal, D.R. Immunosuppressive effects of Pseudomonas aeruginosa exotoxin A on human B-lymphocytes / D.R. Vidal, P. Garrone, J. Banchereau // Toxicon. 1993. — V.31. — P. 27−34.
  178. Weber, D.J. Nosocomial infections in the ICU: the growing importance of antibiotic-resistant pathogens / D.J. Weber, R. Raasch, W.A. Rutala // Chest 1999.-V.115.-P. 34−41.
  179. Welsh, J. Fingerprinting genomes using PCR with arbitrary primers / J. Welsh, M. McClelland // Nucleic Acids Res. 1990. — V. 18. — № 72. — P. 13−18.
  180. Wick, M.J. Analysis of the structure-function relationship of Pseudomonas aeruginosa exotoxin A / M.J. Wick, A.N. Hamood, B.H. Iglewski //Mol Microbiol 1990. V.4. -№ 5. — P. 27−35.
  181. Williams, J.G.K. DNA polymorphism amplified by arbitrary primers useful as genetic markers / J.G.K. Williams, A.R. Kubelik, K.J. Livak, J.A. Rafal-ski, S.V. Tingey // Nucleic Acids Res. 1989. — V.18. -№ 6. -P. 531−535.
  182. Woese, C.R. Phylogenetic definition of the major eubacterial taxa / C.R. Woese, E. Stackrerbrandt, T. Macre, J.E. Fox // Syst. Appl. Microbiol. -1985. V.6. -№ 1. — P. 143−151.
  183. Woods, D.E. Toxins of Pseudomonas aeruginosa: new perspectives / D.E. Woods, B.H. Iglewski // Rev Infect Dis. 1983. — V.4. — № 7. — P. 15−22.
  184. Yahr, T.L. Identification of type III secreted products of the Pseudomonas aeruginosa exoenzyme S regulon / T.L. Yahr, L.M. Mende-Mueller, M.B. Friese, D.W. Frank // J. Bacteriol. 1997. — V.179. — № 7. — P. — 165−168.
  185. Zabransky, R.J. Day Pyocine typing of clinical strains of Pseudomonas aeruginosa / R.J. Zabransky, F.E. Day // Appl. Microbiol. 1969. — V. 17. -P. 293−296.
  186. Zierdt, C.H. Pseudomonas aerugenosa: Serology, phase, pyocin / C.H. Zierdt // Nonfermentative gram-negative rods. New York- Basel. — 1985. — V. 15. -P. 283−241.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!