Помощь в написании студенческих работ
Антистрессовый сервис

Влияние микрогравитации на межклеточное взаимодействие иммунокомпетентных клеток человека с клетками-мишенями (К-562) in vitro

Диссертация: Влияние микрогравитации на межклеточное взаимодействие иммунокомпетентных клеток человека с клетками-мишенями (К-562) in vitro
ДиссертацияПомощь в написанииУзнать стоимостьмоей работы

Снижение цитотоксической активности лимфоцитов — естественных киллеров было показано многими исследователями как после длительных космических полетов, так и после кратковременных экспедиций. Отмечена высокая степень вариабельности данного показателя у различных космонавтов (астронавтов), однако тенденция к снижению была явно выражена после завершения космического полета. Анализ системы… Читать ещё >

Влияние микрогравитации на межклеточное взаимодействие иммунокомпетентных клеток человека с клетками-мишенями (К-562) in vitro (реферат, курсовая, диплом, контрольная)

Содержание

  • Список сокращений
  • Глава 1. Обзор литературы. ¦
    • 1. 1. Влияние факторов космического полета на иммунный статус 11 человека
    • 1. 2. Влияние микрогравитации на состояние 20 иммунокомпетентных клеток in vitro
    • 1. 3. Воздействие клиностатирования как модели эффектов 30 микрогравитации in vitro на иммунные клетки
    • 1. 4. Особенности функционирования лимфоцитов — 35 естественных киллеров
  • Глава 2. Материалы и методы исследования
    • 2. 1. Приготовление среды и суспензий клеток
    • 2. 2. Описание укладки «Фибробласт-1»
    • 2. 3. Предполетное снаряжение укладки «Фибробласт-1» 57 биологическими пробами
    • 2. 4. Снаряжение укладки «Фибробласт-1 М»
    • 2. 5. Определение цитотоксической активности лимфоцитов — 60 естественных киллеров
    • 2. 6. Изучение субпопуляционного состава и жизнеспособности 61 суспензии клеток (проточная цитофлуориметрия)
    • 2. 7. Определение уровня интерлейкинов в среде 63 культивирования (ELISA)
    • 2. 8. Моделирование эффектов микрогравитации методом 64 клиностатирования
    • 2. 9. Статистическая обработка результатов
  • Глава 3. Результаты и обсуждение
    • 3. 1. Модификация метода изучения цитотоксической активности 66 лимфоцитов — естественных киллеров применительно к условиям космического полета
    • 3. 2. Анализ субпопуляционного состава используемых культур 72 лимфоцитов человека
    • 3. 3. Разработка схемы полетного эксперимента и укладки 76 «Фибробласт-1»
    • 3. 4. Результаты полетных экспериментов «Межклеточное 81 взаимодействие», проведенных на борту Международной космической станции (МКС-7 — МКС-12)
    • 3. 5. Изучение цитотоксической активности лимфоцитов — 93 естественных киллеров in vitro при наземном моделировании эффектов микрогравитации методом клиностатирования
    • 3. 6. Изучение продукции интерлейкинов суспензией 96 лимфоцитов в условиях измененной гравитации
    • 3. 7. Индивидуальные особенности цитотоксической активности 99 лимфоцитов человека
    • 3. 8. Стимуляция цитотоксической активности интерлейкином-2 102 в наземных модельных экспериментах
    • 3. 9. Изучение цитотоксической активности лимфоцитов 106 человека в рамках программы KUBIK Европейского космического агентства (эксперимент NKA)

В результате проведенных многолетних исследований на космических кораблях и орбитальных станциях было установлено, что космические полеты оказывают существенное влияние на функциональное состояние всех систем организма человека [Газенко О.Г., 1984; Григорьев А. И., 2001; Moore D., Bie Р. et al., 1996]. В том числе, в этих условиях и система иммунитета подвергается воздействию факторов, негативно сказывающихся на резистентности организма человека к различным инфекционным агентам [Константинова И.В., 1988; Мешков Д. О., 2001; Konstantinova I.V., Fuchs В.В., 1991; Sonnenfeld G., Shearer W.T., 2002]. Исследование иммунной системы космонавтов после завершения полетов различной продолжительности выявило ряд изменений функциональных свойств и количества иммунокомпетентных клеток. Так, воздействие микрогравитации проявлялось качественными и количественными сдвигами в популяциях клеток белой крови, включая нейтрофилию, эозинопению и лимфоцитопению [Taylor G.R., Dardano J.R., 1983; Cogoli A., Tschopp P., 1985; Kaur I., Simons E.R. et al., 2004; Stowe R.P., Sams C.F. et al., 1999].

Наиболее существенным изменениям в условиях космического полета подвергается клеточный иммунитет человека, ответственность за который несут Т-лимфоциты, осуществляющие прямой контакт с чужеродными антигенами и разрушающие их. Исследования, проведенные после длительных космических полетов, позволили выявить ряд закономерностей в изменениях Т-системы иммунитета [Константинова И.В., 1988; Kimzey S.L., 1977; Konstantinova I.V., Sonnenfeld G. et al., 1991]. Было, в частности, показано, что воздействие факторов космического полета приводит к снижению митоген-индуцированной пролиферативной активности лимфоцитов (ФГА-реактивности) — одного из основных показателей функционального состояния Т-клеток. У части космонавтов отмечали также снижение количества этих клеток в периферической крови.

Константинова И.В., 1972; Leach C.L., Rambaut P.C., 1974; Kimzey S.L., 1977; Taylor G.R., 1993]. Эксперименты in vitro подтвердили, что микрогравитация может сама по себе изменять функциональный статус Т-клеток, нарушая проведение сигнала и ремоделируя цитоскелет [Lewis M.L., Reynolds J.L. et al., 1991; Cogoli A., Bechler В., 1993].

B-клеточная система иммунитета, играющая ключевую роль в развитии гуморального иммунного ответа и вырабатывающая антителаспецифические белки (иммуноглобулины), способные обезвреживать возбудителей инфекционных заболеваний и их токсины, после длительных полетов претерпевала наименьшие изменения под воздействием условий микрогравитации. Об этом свидетельствовало отсутствие почти во всех случаях изменений суммарного содержания в крови популяции В-лимфоцитов [Konstantinova I.A., Fuchs В.В., 1991].

Снижение цитотоксической активности лимфоцитов — естественных киллеров было показано многими исследователями как после длительных космических полетов, так и после кратковременных экспедиций [Vorobyov Ye.I., Gazenko O.G. et al., 1983; Konstantinova I.V., Sonnenfeld G. et al., 1991; Konstantinova I.V., Rykova M.P. et al., 1993; Mehta S. K., Kaur I. et al., 2001]. Отмечена высокая степень вариабельности данного показателя у различных космонавтов (астронавтов), однако тенденция к снижению была явно выражена после завершения космического полета. Анализ системы естественных киллеров позволил установить, что в результате воздействия факторов космического полета угнетаются такие функции, как способность распознавать и образовывать конъюгаты с клетками-мишенями, способность к повторным взаимодействиям с чужеродными клетками, а также интегральная цитотоксическая активность популяции естественных киллеров [Константинова И.В., 1988; Мешков Д. О., 1989; Лесняк А. Т., Рыкова М. П. и др., 1998]. Такие изменения могут явиться пусковым фактором не только для развития злокачественных новообразований, но и заболеваний инфекционной, в первую очередь, вирусной природы у космонавтов, как во время космического полета, так и после его завершения, поскольку лимфоциты — естественные киллеры (ЕК) являются первой линией обороны против инфекционных агентов и трансформированных клеток [Herberman R.B., Ortaldo J.R., 1981]. Лимфоциты данной субпопуляции распознают и убивают некоторые опухолевые клетки и клетки, инфицированные вирусом, а также соматические клетки при нарушении их цитодифференцировки без предварительной сенсибилизации.

Основу механизма взаимодействия лимфоцитов — естественных киллеров с клетками-мишенями, согласно современным представлениям, составляет распознавание «потерявших себя клеток», под которыми подразумеваются клеточные мишени с нарушениями структуры или экспрессии классических и неклассических молекул главного комплекса гистосовместимости I класса (МНС-1) [Ljunggren H.G., Karre К., 1990; Trinchieri G., 1994; Yokoyama W.M., 2002]. Было установлено, что названные молекулы вступают во взаимодействие с особыми рецепторами, присутствующими на мембране ЕК и определяющими как подавление, так и активацию эффекторных функций этих клеток [Warren H.S., Campbell A.J. et al., 2001; Ying H.Y., Shen X. et al., 2000]. В результате возникает баланс активирующих и ингибирующих сигналов, следствием которого является функциональное состояние ЕК в каждый конкретный момент.

Однако, несмотря на интенсивно проводимые исследования системы естественной цитотоксичности, многие механизмы ее иммунорягуляторных и цитотоксических эффектов остаются во многом неясными. Исследование влияния микрогравитации на лимфоциты — естественные киллеры in vitro позволяет приблизиться к более глубокому пониманию процессов взаимодействия этих иммунокомпетентных клеток с клетками-мишенями и выяснению механизмов изменений в системе иммунитета, регистрируемых после космического полета.

Цель работы:

Исследование влияния микрогравитации на межклеточное взаимодействие лимфоцитов человека и клеток-мишеней in vitro.

Основные задачи исследования:

1. Разработать метод и бортовую укладку для определения цитотоксической активности лимфоцитов — естественных киллеров периферической крови человека применительно к условиям космического полета на борту Международной космической станции.

2. Определить влияние микрогравитации на цитотоксичность лимфоцитов — естественных киллеров in vitro при совместном культивировании с клетками К-562.

3. Исследовать влияние клиностатирования на взаимодействие лимфоцитов — естественных киллеров с клетками-мишенями.

4. Изучить продукцию цитокинов суспензией иммунокомпетентных клеток при взаимодействии с клетками линии К-562 в условиях измененной гравитации.

5. Разработать бортовую укладку для оценки влияния биологически активных веществ (в частности, IL-2) на межклеточные взаимодействия культуры лимфоцитов человека и культуры клеток линии К-562 в условиях космического полета.

Научная новизна работы.

Впервые проведено изучение цитотоксической активности изолированных лимфоцитов — естественных киллеров периферической крови человека in vitro в условиях космического полета на борту Международной космической станции. Показано, что микрогравитация не подавляет межклеточные взаимодействия лимфоцитов и клеток-мишеней, в качестве которых использовалась суспензионная линия человеческих эритролейкемических лимфобластоидных клеток К-562.

Полученные результаты анализа синтеза цитокинов изолированными иммунокомпетентными клетками, экспонированными в условиях микрогравитации, при совместном культивировании с клетками-мишенями показали, что условия микрогравитации оказывают разнонаправленное действие на изменение уровня цитокинов (TNF-a, IL-la, IL-2, IL-4, IL-6) у различных доноров.

Практическая и научная значимость работы.

Проведенные исследования позволили разработать новый подход к исследованию роли регуляторных стимулов в функционировании иммунокомпетентных клеток in vitro в условиях микрогравитации. Результаты работы дополняют теоретические представления о влиянии условий микрогравитации на межклеточные взаимодействия лимфоцитов-естественных киллеров и клеток мишеней линии К-562. Полученные данные позволяют обосновать методологические подходы к исследованию состояния противовирусного иммунитета космонавтов непосредственно во время космического полета, что является основанием для разработки средств медицинского контроля на различных этапах длительных экспедиций.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. В результате лабораторных испытаний и проведенных полетных экспериментов показана возможность использования и эффективность применения модифицированного метода изучения цитотоксической активности лимфоцитов — естественных киллеров in vitro и разработанной укладки («Фибробласт-1») для проведения исследований межклеточного взаимодействия в условиях космического полета.

2. В условиях микрогравитации функциональная активность лимфоцитов — естественных киллеров, выражающаяся в способности к цитолизу клеток-мишеней при совместном культивировании в течение 24 часов и продукции ряда цитокинов, не угнетается, более того, наблюдается тенденция к увеличению цитотоксической активности in vitro в условиях реального космического полета.

3. Выявлены широкие индивидуальные различия в профиле продукции цитокинов суспензией лимфоцитов in vitro различных доноров, а также в степени активации цитотоксической активности при клиностатировании и в условиях микрогравитации (от 2,5% до 171,7%).

Апробация работы и публикации.

Основные результаты и положения работы были доложены и опубликованы в материалах III и IV Конференции молодых ученых, специалистов, аспирантов и студентов, посвященных дню космонавтики (Москва, 2004, 2005) — 6-ой международной научно-практической конференции «Пилотируемые полеты в космос» (Звездный городок, 2005) — 13-ой конференции «Космическая биология и авиакосмическая медицина» (Москва, 2006) — 55th International Astronautical Congress (Канада, Ванкувер, 2004) — International Society of Gravitational Physiology (ISGP) Joint Life Science Conference (Германия, Кельн, 2005) — Science on European Soyuz Mission to the International Space Station (2001;2005) ESA Conference (Испания, Толедо, 2006).

По теме диссертации опубликовано 9 научных работ, в том числе 3 статьи в журналах. Диссертация апробирована на заседании секции Ученого совета ГНЦ РФ — ИМБП РАН «Космическая физиология и биология» (протокол № 9 от 7 сентября 2007 г.).

выводы.

1. Разработана методика и специальная укладка («Фибробласт-1») для изучения цитотоксической активности лимфоцитов — естественных киллеров in vitro в условиях реального космического полета с использованием культуры лимфоцитов человека и опухолевых миелобластов линии К-562.

2. Лимфоциты ЕК, выделенные из периферической крови человека, сохраняли способность распознавать и контактировать с клетками-мишенями (миелобласты линии К-562) в суспензии во время инкубации в условиях микрогравитации и реализовать свой цитотоксический эффект при взаимодействии с высокоспецифическими клетками-мишенями.

3. В условиях микрогравитации показана четкая тенденция к повышению цитотоксичности ЕК клеток человека при их инкубации in vitro с клетками К-562. Выявленные отличия в степени активации лимфоцитов доноров могут зависеть от исходных потенциальных возможностей клеток — естественных киллеров и индивидуальных особенностей донора.

4. При моделировании условий микрогравитации методом клиностатирования показано сходное увеличение цитотоксического индекса лимфоцитов по сравнению с контрольными пробами, которое было менее выражено по сравнению с результатами, полученными в космическом полете.

5. Изучение продукции цитокинов суспензией лимфоцитов человека показало, что условия микрогравитации оказывают неоднозначное влияние на изменение уровня цитокинов (TNF-a, IL-la, IL-2, IL-4, IL-6) у различных доноров.

6. Эксперименты, проведенные в условиях микрогравитации с применением lg-контроля на борту МКС в рамках программы KUBIK (ESA), по изучению цитотоксической активности лимфоцитов — естественных киллеров in vitro подтвердили полученные ранее данные о том, что микрогравитация не ингибирует функциональную активность ЕК лимфоцитов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

.

В экспериментах проведенных в условиях космического полета, а также при обследовании космонавтов и астронавтов до и после экспедиций различной продолжительности, было показано угнетение функций иммунной системы человека, в том числе изменение количества и функции нейтрофилов, снижение цитотоксической активности NK-клеток, изменение продукции цитокинов (снижение синтеза интерлейкина-2 и интерферона-у), изменение фенотипа мононуклеаров периферической крови, изменение (снижение) пролиферации лимфоцитов, снижение реакции лимфоцитов в ответ на митогенный стимул, уменьшение количества лимфоцитов, уменьшение количества эозинофилов, изменение субпопуляционного состава суспензии лимфоцитов [Константинова И.В., 1988; Мешков Д. О., 1989; Лесняк А. Т., Рыкова М. П. и др., 1998; Taylor G.R., Dardano J.R., 1983; Cogoli A., Tschopp P., 1985; Kaur I., Simons E.R. et al., 2004; Stowe R.P., Sams C.F. et al., 1999]. Однако в условиях целостного организма трудно выявить влияние непосредственно фактора микрогравитации на функционирование иммунной системы, так как все наблюдаемые изменения могут быть опосредованы многоуровневой регуляцией, как нервной, так и гуморальной. Так стресс во время взлета и посадки, изоляция и другие стресс-индуцирующие факторы во время космического полета могут вызывать некоторые из этих эффектов. Стресс-гормоны, например, такие как кортизол, который повышается во время полета [Ларина И.М., 2001], как известно, влияют на продукцию гуморальных иммунных факторов и популяцию иммунных клеток, включая моноциты и лимфоциты.

Таким образом, для анализа механизмов клеточных эффектов исследования in vitro представляются перспективным направлением, так как позволяют выявить непосредственные эффекты воздействия микрогравитации на иммунные клетки, в частности, на лимфоциты человека. На иммунокомпетентных клетках in vitro также было показано негативное влияние микрогравитации на жизнеспособность клеток: увеличивалось количество апоптотических клеток по сравнению с наземным контролем [Lewis M.L., Reynolds J.L. et al., 1998], а также на проведение сигнала и организацию цитоскелета [Cogoli-Greuter М. et al., 1994; Schmitt D. A., Hatton J. P., 1996; Lewis M.L., Cubano L.A., 2001]. В результате проведенных нами исследований было показано, что сам по себе фактор микрогравитации не оказывал угнетающего влияния на функцию лимфоцитов — естественных киллеров и на продукцию цитокинов суспензией лимфоцитов in vitro. Кроме того, в эксперименте NKA, проведенном в рамках программы KUBIK (ESA) с использованием lg-контроля на борту МКС были подтверждены полученные ранее в серии экспериментов «Межклеточное взаимодействие» данные о том, что микрогравитации не снижает функциональной активности одной из важных субпопуляций лимфоцитов, являющихся важными факторами противовирусной и противоопухолевой защиты, особенно на ранних этапах иммунных процессов.

Более того, в наших исследованиях была выявлена тенденция к повышению цитотоксической активности лимфоцитов — естественных киллеров, выделенных из периферической крови здоровых доноров, против клеток-мишеней линии К-562. Величина этой активности не зависела от базальной цитотоксической активности и от количества ЕК лимфоцитов в популяции иммунокомпетентных клеток. Можно предположить, что продукция цитокинов в условиях микрогравитации не влияет на данный процесс, так как не было выявлено корреляции между содержанием цитокинов в среде культивации после взаимодействия и эффектом активации цитотоксической активности в условиях космического полета.

Исследование цитотоксической активности изолированных лимфоцитов крови человека при совместном культивировании с культурой клеток линии К-562 в присутствии биологически активных веществ с использованием укладки «Фибробласт-1М», вероятно, позволит перейти к более глубокому пониманию некоторых процессов, лежащих в основе межклеточных контактов в условиях невесомости. Также целесообразно было бы использование методов молекулярной биологии для уточнения механизмов данного процесса на молекулярном уровне, например, изучение в условиях микрогравитации тирозинкиназной активности.

Так как известно, что линия К-562 с ее чрезвычайно выраженной чувствительностью к литическому действию ЕК является МНС-1-негативной и, следовательно, не может быть источником ингибиторных сигналов [Ье ВоШеШег Р., Вагакопу1 А. & а!., 2002], соответственно единственным вариантом для увеличения цитотоксической активности является усиление активирующих сигналов, которые запускаются с участием тирозинкиназы 8ук. Механизм реализации этого эффекта непрямой, он связан со структурой иммунорецепторного тирозинсодержащего активирующего участка, включенного в состав гликолипидобогащенного мембранного комплекса, что приводит, в конечном счете, к росту тирозинкиназной активности на внутренней стороне мембраны и, как следствие, к мобилизации кальция, продукции эйкозаноидов и транскрипции генов, ведающих синтезом цитокинов [ТотасеНо Е., 01сезе Ь. е1 а!., 1998; СИепутзИ Н. е1 а1.,.

2000].

Еще одна возможность, по которой цитотоксический индекс может увеличиваться в условиях микрогравитации, — это чисто «механическая» теория. Вероятно, что в условиях космического полета, а также при постоянном изменении вектора гравитации (клиностатировании) клетки не оседают под влиянием гравитации, а постоянно находятся во взвешенном состоянии, за счет чего облегчается процесс контакта лимфоцитаестественного киллера с клеткой-мишенью. Косвенным подтверждением этого является тот факт, что в проведенных нами исследованиях с использованием динамического контроля (шейкера), было обнаружено повышение цитотоксической активности сопоставимое с увеличением данного показателя при клиностатировании. В обоих случаях имело место постоянное перемешивание среды, что, вероятно, облегчает процесс распознавания клеток-мишеней лимфоцитами и установление межклеточных контактов при данном соотношении эффектор: мишень (10:1).

Представляет безусловный интерес возможность сопоставления результатов, полученных при исследовании лимфоцитов здорового человека в различных экспериментах, проведенных в течение трех лет. Было обнаружено, что высокая вариабельность функциональной организации системы естественной цитотоксичности человека проявляется не только на половом, возрастном и популяционных уровнях [Чекнев С.Б., 1998; 2004], но также показана на уровне отдельного индивидуума. При этом анализ субпопуляционного состава лимфоцитов на протяжении трех лет, дважды в год показал стабильность в соотношении популяций лимфоцитов у данного донора. Однако выявленная высокая изменчивость активности естественных киллеров служит проявлением действия механизмов, поддерживающих выраженную пластичность популяции ЕК, связанную с филогенетически закрепленным полиморфизмом рецепторных структур этих клеток, и обеспечивающих высокие компенсаторные возможности.

Созданная на базе укладки «Фибробласт-1» модифицированная укладка «Фибробласт-1М», предназначенная для изучения влияния биологически активных веществ, в частности, интерлейкина-2 на межклеточные взаимодействия культуры лимфоцитов человека и перевиваемой суспензионной культуры клеток линии К-562 в условиях микрогравитации, не только сохраняет все преимущества ранее разработанной модели, но и предоставляет дополнительные удобства для использования. Применение данной укладки в экспериментах в условиях реального космического полета позволит более детально изучить воздействие микрогравитации на контактное взаимодействие ЕК с клетками-мишенями в суспензионных клеточных культурах.

Показать весь текст

Список литературы

  1. В.В., Григорьев А. И., К. Лич Хантун. Космическая биология и медицина. // Наука. 1997.
  2. Н.М. Интерлейкины и формирование иммунологического ответа при злокачественном росте. // Аллергология и иммунология. -2000.-Том 1. № 1 -С.45−61.
  3. Л.Б., Романов Ю. А. и др., 2005.
  4. О.Г. Человек в космосе. // Космическая биология и авиакосмическая медицина. 1984. — Том 18. № 1. — С. 3−8.
  5. А.И., Бугров С. А. Егоров А.Д., 1990.
  6. А.И., Космическая биология и медицина. Орбитальная станция «Мир». Москва. 2001. — 660 с.
  7. Т. К. Аванесян Л.А. О взаимоотношении иммунного и адаптивного ответов. // Успехи современной биологии. 2001. — Том 121. № 3.-С. 275−286.
  8. Г. А. Иммунная система и патология. // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1997. — № 2. — С. 26−38.
  9. Г. А. Современные представления об иммунитете (контуры общей теории). // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 2003. — № 2. — С. 2−7.
  10. В.К., Воложин А. И., Виха Г. В. Колонизационная резистентность организма в измененных условиях обитания. Москав. Наука. 2005. -273с.
  11. К.П. Цитокины иммунной системы: основные свойства и иммунобиологическая активность (лекция). // Клиническая лабораторная диагностика. 1998. -№ 11. — С. 21−32.
  12. Л.В., Ганковская Л. В., Рубакова Э. И. Система цитокинов. Москва. 1999 -78 с.
  13. Константинова И. В. Исследование некоторых сторон иммунного ответа при действии экстремальных факторов, присущих космическому полету
  14. Цитохимия иммуногенеза в ординарных и экстремальных условиях. М. Медицина. 1973. — С. 100−250.
  15. И.В. Космические полеты человека и иммунная система: Кратковременные полеты. // Иммунная система в экстремальных условиях. Космическая иммунология. М. Наука. 1988. — С.104−124.15. Константинова И. В., 1972.
  16. И.В., Антропова E.H. Иммунологическая реактивность организма при обитании в герметичных помещениях. // Проблемы космической биологии. 1980. — Том 42. — С. 191−213.
  17. И.В., Антропова E.H., Зажирей В. М., Легоньков В. И. Изучение реактивности лимфоидных клеток у членов экипажей космических кораблей «Союз-6», «Союз-7», «Союз-8» до и после полета. // Космическая биология и медицина. 1973. — № 6. — С. 35−40.
  18. И.В., Антропова E.H., Рыкова М. П. и др. Клеточный и гуморальный иммунитет у космонавтов при действии факторов космического полета. // Вестн. АМН СССР. 1985. — № 8. — С. 52−58.
  19. И.М. Гормональная регуляция. В кн. Орбитальная станция «Мир». Космическая биология и медицина. 2001. Том. 1. — С. 603−606.
  20. А.Т., Рыкова М. П., Мешков Д. О., Антропова E.H., Митирев Г. Ю., Воротникова И. Е., Константинова И. В. Клеточный иммунитет человека и космический полет. // Авиакосмическая и экологическая медицина. 1998. — Том 32. № 1. — С. 29−35.
  21. A.A., Уваров В. Ю. К вопросу о систематизации цитокинов. // Успехи современной биологии. 2001. — Том 121. № 6. — С. 589−603.
  22. В.Н. Натуральные киллеры отдельный класс иммунокомпетентных клеток или совокупность функциональных популяций. // Иммунология. — 2006. — № 1. — С. 56−57.
  23. Н.В. Цитокины и аллергия. // Иммунология. 1999. — № 5. -С. 5−9.
  24. Д.О. Влияние факторов космического полета на иммунитет. // Авиакосмическая и экологическая медицина. 2001. — Том 35. № 2. — С. 14−21.
  25. Д.О. Влияние факторов космического полета на эффекторные механизмы естественной цитотоксичности. Автореферат диссертации .канд. мед. наук. Москва. 1990.
  26. М.А., Иванов A.A. Межклеточные взаимодействия. Москва. Медицина. 1995. — 224 с.
  27. Р.В. Иммунология. Москва. Медицина. 1987. — 368 с.
  28. Пол У. Е. Иммунология. В 3 т. Москва. Мир. 1987.
  29. М.П. Влияние факторов космического полета на функциональную активность лимфоцитов нормальных киллеров. Автореферат диссертации.канд. мед. наук. Москва. — 1984.
  30. М.П., Антропова E.H., Мешков Д. О. Иммунологическое обследование. В кн. Орбитальная станция «Мир». Космическая биология и медицина. -2001. Том. 1. С. 615−618.
  31. Н.В., Новицкий В. В., Белоконь В. В., Зима А. П., Жукова О. Б., Наследникова И. О., Литвинова JT.C., Колобовникова Ю. В., Часовских Н. Ю. Цитокины и противовирусный иммунитет. // Успехи Физиологических наук. 2006. — Том 37.№ 4. — С.34−44.
  32. И.Н. Естественные киллерные клетки (ЕКК) как звено в иммунной системе человека. // Иммунология. 1991. — № 4. — С.4−6.
  33. Р.И., Балмасова И. П. Естественные киллеры и биогенные амины: паракринная регуляция в иммунной системе. // Российскийфизиологический журнал им. Сеченова. 2005. — Том 91. № 8. — С. 927 941.
  34. Р.И., Балмасова И. П. Естественные киллеры и их рецепторы, специфичные к МНС-1. // Иммунология. 2006. — № 1. — С. 46−51.
  35. Р.И., Балмасова И. П. Физиология естественных киллеров. Москва.-2005.-с.
  36. М.Г. Гравитационная биология клетки (теория и эксперимент). Москва. 1997. — 128 с.
  37. М.Г. Молекулярные и клеточные основы гравитационной чувствительности. Москва. 2002. — 104 с.
  38. Г. Р., Дардано Д. Р. Клеточная иммунореактивность у человека после космического полета. // Космическая биология и авиакосмическая медицина, 1984.-№ 1.-С. 74−80.
  39. И.С. Паракринные и аутокринные механизмы цитокиновой иммунорегуляции. // Иммунология. -2001. № 5. — С. 4−7.
  40. .Б., Константинова И. В. Цитохимия иммуногенеза в ординарных и экстремальных условиях. М. Медицина. 1973. — С. 170−189.
  41. P.M. Физиология иммунной системы. Москва. ВИНИТИ РАН. 2001, С.
  42. P.M., Пинегин Б. В. Оценка иммунного статуса человека в норме и при патологии. // Иммунология. 2001. — № 4. — С. 4−6.
  43. С.Б. Вариабельность активности естественных киллеров в динамике иммунотерапии. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины.-2004.-Том 137. № 2.-С. 194−197.
  44. С.Б., Горожанина Е. С. Изменение протекания цитотоксической реакции в результате взаимодействия на клетку-мишень. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2005. — Том 139. № 3. — С. 325−329.
  45. А.А. Гомеостатические процессы в иммунной системе. Контроль численности лимфоцитов. // Иммунология 2004. — № 5. — С. 312−320.
  46. А.А. Основы иммунологии. Москва. Медицина. 1999. — С.
  47. А.А. Система цитокинов и принципы ее функционирования в норме и патологии. // Иммунология. 1997. — № 5. — С. 7−14.
  48. Bakos A., Varkonyi A., Minarovits J., Batkai L. Production of cytokines by human PBMCs in simulated micrograviry. // Journal Gravit Physiology. -2005.-Vol. 12. № 1.-P. 163−164.
  49. Bechler В., Cogoli A., Cogoli-Greuter M., Muller O., Hunzinger E., Criswell S.B. Activation of microcarrier-attached lymphocytes in microgravity. // Biotech. Bioeng. 1992. — Vol. 40. — P. 991−996.
  50. Bonavida В., Wright S.C. Role of natural killer cell cytotoxic factors in the mechanism of target-cell killing by natural killer cells. // Journal Clin. Immunology. 1986. — Vol. 6. — P. 1−8.
  51. Carson W.E., Fehniger T.A., Caligiuri M.A. CD56 bright natural killer cell subsets: characterization of distinct functional responses to interleukin-2 and the c-kit ligand // European Journal of Immunology. 1997. — Vol. 27. — P. 354−360.
  52. Cogoli A. Gravitational physiology of human immune cells: A review of in vivo, ex vivo and in vitro studies. // Journal Gravitational Physiology. 1996. -Vol. 3. № l.-P. 1−9.
  53. Cogoli A. The effect of hypogravity and hypergravity on cells of immune system. // Journal of Leukocyte Biology. 1993. — Vol. 54. — P. 259−268.
  54. Cogoli A., Bechler В., Cogoli-Greuter M., Criswell S.B., Joller H., Hunzinger E., Muller O. Mitogenic signal transduction in T lymphocytes in microgravity. // Journal of Leukocyte Biology. 1993. — Vol. 53. — P. 569−575.
  55. Cogoli A., Tschopp A. Lymphocyte reactivity during spaceflight. // Immunology Today. 1985. — Vol. 6, № 1. — P. 1−4.
  56. Cogoli A., Valluchi-Morf M., Muller M., Briegleb W. The effect of hypogravity on human lymphocyte activation. // Aviation Space and Environmental Medicine. 1980. — Vol. 51. — P. 29−34.
  57. Cogoli-Greuter M., Galleri G., Meloni M.A., Liuzzo M.I., Cogoli A., Pippia P. A quantitative analisis of human monocytes motility in modelled low gravity conditions. // Journal Gravit Physiology, Vol. 12, No 1, 2005, P. 243 244.
  58. Cogoli-Greuter M., Lovis P., Vadrucci S. Signal transduction in T cells. An overview. // Journal Gravit Physiology. 2004. — Vol. 11. № 2. — P. 53−56.
  59. Cooper D., Pellis N. R. Suppressed PHA activation of T lymphocytes in simulated microgravity is restored by direct activation of protein kinase C. // Journal of Leukocyte Biology. 1998. — Vol. 63. — P. 550−562.
  60. Cooper M.A., Fehniger T.A., Turner S.C. et al. Human natural killer cells: a unique innate immunoregulatory role for the CD56 (bright) subset // Blood. — 2001.-Vol. 97.-P. 3146−3151.
  61. Crucian B. E., Cubbage M. L., Sams C. F. Altered cytokine production by specific human peripheral blood cell subsets immediately following space flight. // Journal of Interferon and Cytokine Research. 2000. — Vol. 20. P. 547−556.
  62. Dohring C, Colonna M. Human natural killer cell inhibitory receptors bind to HLA class I molecules // European Journal of Immunology. 1996. — Vol. 26. -P. 365−369.
  63. Hashemi B.B., Penkala J.E., Vens C., Huls H., Cubbage M., Sams C. F. T cell activation responses are differentially regulated during clinorotation and in spaceflight. // The FASEB Journal. 1999. — Vol. 13. — P. 2071−2082.
  64. Hata K, Zhang X.R., Iwatsuki S., Van Thiel D.H., Herberman R.B., Whiteside T.L. Isolation, phenotyping, and functional analysis of lymphocytes from human liver. // Clinical Immunology and Immunopathology. 1990. -Vol. 56. № 3.-P. 401−419.
  65. Hauser T.A., Malyguine A.M., Dawson J. R. Conformation dependence of MHC class I in the modulation of target cell sensitivity to natural killing // Human Immunology. 1998. — Vol. 59. — P. 71−76.
  66. Herberman R.B., Ortaldo J.R. Natural killer cells: their roles in defenses against disease. // Science. 1981. — Vol. 214. № 2. — P. 24−30.
  67. Hercend D.T., Schmidt R.E. Characteristics and used of natural killer cells. // Immunology Today. 1988. — Vol. 9. — P.291−293.
  68. Jacobs R., Hintzen G., Kemper A. et al. CD56bright cells differ in their KIR repertoire and cytotoxic features from CD56dim NK cells // European Journal of Immunology. 2001. — Vol. 31. — P. 3121 -3127.
  69. Kaur I., Simons E. R., Castro V. A., Ott C. M., Piersonc D. L. Changes in neutrophil functions in astronauts. // Brain, Behavior, and Immunity. 2004. -Vol. 18.-P. 443−450.
  70. Kimzey S.L. Hematology and immunology studies. // Biomedical Results from Skylab. Washington. NASA. 1977. — P.249−282.
  71. Kogure T., Fujinaga H., Niizawa A. et al. Killer-cell inhibitory receptors, CD158a/b, are upregulated by interleukin-2, but not interferon-gamma or interleukin-4 // Mediators of Inflammation. 1999. — Vol. 8. — P. 313−318.
  72. Konstantinova I.V. Immune resistance of man in space flight. // Acta Astronautica. 1991.-Vol. 23.-P. 123−127.
  73. Konstantinova I.V., Fuchs B.B. The immune system in space and other extreme conditions. // Harwood Acad. Publ. 1991. — P. 112−144.
  74. Konstantinova I.V., Rykova M.P., Lesnyak A.T. Antropova E.A. Immune changes during long-duration mission. // Journal of Leukocyte Biology. -1993.-Vol. 54.-P. 189−201.
  75. Konstantinova I.V., Sonnenfeld G., Lesnyak A.T. et al. Cellular immunity and lymphokine production during spaceflights. // Physiologist. 1991. — Vol. 34.№ 1. — P. S52-S56.
  76. Lanier L.L., Corliss B., Wu J., Phillips J.H. Association of DAP 12 with activating CD94/NKG2C NK cell receptors // Immunity. 1998. — Vol. 8. -P. 693−701.
  77. Leach C.L., Rambaut P.C. Biomedical responses of the Skylab crewmen. // Proc. Skylab Life Sciences Symposium. 1974. — P. 1−4.
  78. Lewis M.L., Cubano L.A., Zhao B., Dinh H.-K., Pabalan J. G., Piepmeier E. H., Bowman P. D. cDNA microarray reveals altered cytoskeletal gene expression in space-flown leukemic T lymphocytes (Jurkat). // The FASEB Journal.-2001.-Vol. 15.-P. 1783−1785.
  79. Lewis M.L., Reynolds J. L., Cubano L.A., Hatton J. P., Lawless B. D., Piepmeier E. H. Spaceflight alters microtubules and increases apoptosis inhuman lymphocytes (Jurkat). // The FASEB Journal. 1998. — Vol. 12. — P. 1007−1018.
  80. Lewis M.L., Reynolds J.L. et al., 1991.
  81. Licato L. L., Grimm E. A. Multiple interleukin-2 signaling pathways differentially regulated by microgravity. // Immunopharmacology. 1999. -Vol. 44. — P. 273−279.
  82. Limouse M., Manie S., Konstantinova I.V., Ferrua B., Schaffar L. Inhibition of phorbol-ester-induced cell activation in microgravity. // Experimental Cell Research. 1991,-Vol. 197.-P. 82−86.
  83. Lindberg J., Martin-Fontecha A., Hoglund P. Natural killing of MHC class I (-) lymphoblasts by NK cells from long-term bone marrow culture requires effector cell expression of Ly49 receptors // International Immunology. -1999.-Vol. 11.-P. 1239−1246.
  84. Ljunggren H.G., Kane K. In search of the «missing self. MHC molecules and NK cell recognition // Immunology. Today. — 1990. Vol. 11. — P. 237−244.
  85. Lopez-Botet M., Bellon T., Llano M. et al. Paired inhibitory and triggering NK cell receptors for HLA class I molecules. // Human Immunology. 2000. -Vol. 61.-P. 7−17.
  86. Lowin-Kropf B., Held W. Positive impact of inhibitory Ly49 receptor-MHC class I interaction on NK cell development // Journal of Immunology. 2000. -Vol. 165.-P. 91−95.
  87. Makrigiannis A.P., Anderson S.K. Regulation of natural killer cell function. // Cancer Biol. Therapy. 2003. — Vol. 2. — P. 610−616.
  88. Mehta S. K., Kaur I., Grimm E. A., Smid C., Feeback D. L., Pierson D. L. Decreased non-MHC-restricted (CD56+) killer cell cytotoxicity afterspaceflight. // Journal of Applied Physiology. 2001. — Vol. 91. — P. 18 141 818.
  89. Meloni M.A., Galleri G., Camboni M.G., Pippia P., Cogoli A., Cogoli-Greuter M. Modeled microgravity affects motility and cytoskeletal structures. // Journal Gravit Physiology. 2004. — Vol. 11. № 2. — P. 197−198.
  90. Menier C, Riteau B., Carosella E. D., Rouas-Freiss N. MICA triggering signal for NK cell tumor lysis is counteracted by HLA-Gl-mediated inhibitory signal // International Journal of Cancer. 2002. — Vol. 100. — P. 63−70.
  91. Meshkov D.O., Rykova M.P. The natural cytotoxity in cosmonauts on board space stations. // Acta Astonaut. 1995. — Vol. 36. — P. 719−726.
  92. Mills P. J., Meek J. V., Waters W. W., D’Aunno D., Ziegler M. G. Peripheral Leukocyte Subpopulations and Catecholamine Levels in Astronauts as a Function of Mission Duration. // Psychosomatic Medicine. 2001. — Vol. 63. -P. 886−890.
  93. Mognato M., Celotti L. Modeled microgravity affects cell survival and HPRT mutant frequency, but not the expression of DNA repair genes in human lymphocytes irradiated with ionising radiation. // Mutation Research. 2005. -Vol. 578.-P. 417−429.
  94. Moore D., Bie P., Oser H. Biological and medical research in space. Springer. -1996.-P.
  95. Natarajan K., Dimasi N., Wang J. et al. Structure and function of natural killer cell receptors: multiple molecular solutions to self, nonself discrimination // Annual Review of Immunology. 2002. — Vol. 20. — P. 853−885.
  96. Perussia B. Lymphokine-activated killer cells, natural killer cells and cytokines. // Curr. Opin. Immunology. 1999. — Vol. 3. — P49−55.
  97. Risin D., Pellis N.R. Modeled microgravity inhibits apoptosis in peripheral blood lymphocytes. // In vitro Cellular and Developmental Biology. 2001. -Vol. 37.-P. 66−72.
  98. Riteau B., Rouas-Freiss N. Menier C. et al. HLA-G2, -G3, and -G4 isoforms expressed as nonmature cell surface glycoproteins inhibit NK and antigen specific CTL cytolysis // Journal of Immunology. 2001. — Vol. 166. — P. 5018−5026.
  99. Roitt I., Brostoff J., Male D. Immunology. London, 1996.
  100. Schmitt D. A., Hatton J. P., Emond C., Chaput D., Paris H., Levade T., Cazenave J.-P., Schaffar L. The distribution of protein kinase C in human leukocytes is altered in microgravity. // The FASEB Journal. 1996. — Vol. 10.-P. 1627−1634.
  101. Schwarzenberg M., Cossu G., Cogoli-Greuter M., Meloni M.A., Pippia P., Cogoli A. Gravitational effects on the response to different stimulatory signals in T cells. // Journal Gravit Physiology. 2000. — Vol. 7. № 2. — P. 9−11
  102. Semov A., Semova N., Lacelle Ch., Marcotte R., Petroulakis E., Proestou G., Wang E. Alterations in TNF- and IL-related gene expression in space-flown WI38 human fibroblasts. // The FASEB Journal. 2002.
  103. Sinkovics J.G., Horvath J.C. Human natural killer cells: A comprehensive review. // International Journal of Oncology. 2005. — Vol. 27. — P. 5−47.
  104. Sonnenfeld G. The immune system in space and microgravity. // Medicine & Science in Sports & Exercise. 2002. — Vol. 34. №. 12. — P. 2021−2027.
  105. Sonnenfeld G., Butel J.S., Shearer W.T. Effects of the space flight environment on the immune system. // Reviews on Environmental Health. -2003.-Vol. 18.№ 1. P. 1−17.
  106. Sonnenfeld G., Mandel A.D., Konstantinova I.V., Berry W.D., Taylor G.R., Lesnyak A.T., Fuchs B.B., Rakhmilevich A.L. Space flight alters immune cell function and distribution. // Journal of Applied. Physiology. 1992. — Vol. 73. -P. 191−195.
  107. Sonnenfeld G., Shearer W. T. Immune Function during Space Flight. // Nutrition. 2002. — Vol. 18.№ 10 — P. 899−903.
  108. Stowe R.P., Sams C.F., Mehta S.K., Kaur I., Jones M.L., Feeback D.L., Pierson D.L. Leukocyte subsets and neutrophil function after short-term spaceflight. // Journal of Leukocyte Biology. 1999. — Vol. 65. — P. 179−186.
  109. Sundaresan A., Risin D., Pellis N. R. Modeled microgravity-induced protein kinase C isoform expression in human lymphocytes. // Journal of Applied. Physiology. 2004. — Vol. 96. — P. 2028−2033.
  110. Taylor G.R. Immune changes during short-duration missions. // Journal of Leukocyte Biology. 1993. — Vol. 54. № 3. — P. 202−208.
  111. Taylor G.R., Dardano J.R. Human cellular immune responsiveness following space flight. // Aviation, Space, and Environmental Medicine. 1983. — Vol. 57.-P. S55-S59.
  112. Taylor G.R., Konstantinova I.V., Sonnenfeld G., Jennings R. Changes in the immune system during and after spaceflight. // Advances in Space Biology and Medicine. 1997. — Vol. 6. — P. 1−32.
  113. Taylor G.R., Neale L.S., Dardano J.R. Immunological analisis of US space shuttle crew memders. // Aviation, Space, and Environmental Medicine. -1986.-Vol. 57.-P. 213−217.
  114. Tomacello E., Olcese L., Vely F. et al. Gene structure, expression pattern, and biological activity of mouse killer cell activating receptor-associated protein (KARAP)/DAP-12 // The Journal of Biological Chemistry. 1998. — Vol. 273.-P. 115−119.
  115. Trapani J.A., Smyth M.J. Functional significance of the perforin/granzyme cell death pathway. // Nature Reviews Immunology. 2002. — Vol. 2. — P. 735−747.
  116. Trinchieri G. Biology of natural killer cells // Adv. Immunology. 1994. -Vol. 47.-P. 187−376.
  117. Vadrucci S., Lovis P., Henggeler D., Lambers B., Cogoli A. Effects of vector-averaged gravity on the response to different stimulatory signals in T-cells. // Journal Gravit Physiology. 2005. — Vol. 12. № 1.-P. 177−178.
  118. Vales-Gomez M., Reyburn H., Strominger J. Molecular analyses of the interactions between human NK receptors and their HLA ligands // Human Immunology. 2000. — Vol. 61. — P. 28—38.
  119. Vorobyov Ye.I., Gazenko O.G., Genin A.M., Yegorov A.D. Medical results of Salyu-6 manned space flights. // Aviation, Space, and Environmental Medicine. 1983. — Vol. 54. — P. S31-S40.
  120. Wagtmann N., Rajagopalan S., Winter C.C. et al. Killer cell inhibitory receptors specific for HLA-C and HLA-B identified by direct binding and by functional transfer // Immunity. 1995. — Vol. 3. — P. 801−809.
  121. Walther I., Pippia P., Meloni M. A., Turrini F., Mannu F., Cogoli A. Simulated microgravity inhibits the genetic expression of interleukin-2 and its receptor in mitogen-activated T lymphocytes. // FEBS Letters. 1998. — Vol. 436.-P. 115−118.
  122. Warren H. S. NK cell proliferation and inflammation. // Immunology and Cell Biology. 1996. — Vol. 74. — P. 473−480.
  123. Warren H. S., Campbell A. J., Waldron J. C, Lanier L. L. Biphasic response of NK cells expressing both activating and inhibitory killer Ig-like receptors // International Immunology. 2001. — Vol. 13. — P. 1043−1052.
  124. Whiteside T.L., Herberman R.B. Role of Human Natural Killer Cells in Health and Disease. // Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology. -1994.-Vol. l.№ 2.-P. 125−133.
  125. Whiteside T.L., Herberman R.B. The Biology of Human Natural Killer Cells. //Ann. Ital. Inst. Health. 1990. — Vol. 26. -P.335−348.
  126. Wu J., Cherwinski H., Spies T. et al. DAP10 and DAP12 from distinct, but functionally cooperative, receptor complexes in natural killer cells // The Journal of Experimental Medicine. 2000. — Vol. 192. — P. 1059−1068.
  127. Ying H.Y., Shen X., Ding R.R. Research progress in natural killer cell receptors // Sheng Li Ke Xue Jin Zhan. 2000. — Vol. 31. — P. 25−29.
  128. Yokoyama W.M. The search for the missing «missing-self' receptor on natural killer cells. // Scandinavian Journal of Immunology. 2002. — Vol. 55. -P.233−237.
Заполнить форму текущей работой

Сессия? Спокойно!