Методы количественного определения местноанестезирующих лекарственных препаратов

Растворы новокаина и лидокаина соответствовали фармакопейным требованиям. Рабочие растворы всех реагентов с меньшими концентрациями готовили последовательным разбавлением соответствующих исходных растворов в день использования при тщательном перемешивании. Различную кислотность создавали буферным раствором из смеси 0.04 М СН3СООН, 0.04 М Н3РО4 и 0.1 М раствора NаОН. Органический экстрагент — хлороформ.Аппаратура.

Оптическую плотность растворов измеряли на КФК-3−01 относительно чистого хлороформа (/ = 1.0 см). Спектры отражения и цветометрические характеристики порошкооб-разных образцов определяли на фотоколориметре «Спектротон» (?Исорбента = 0.100 г) (ОКБА"Химавтоматика", Чирчик) во фторопластовой кювете. Кислотность растворов контролировали универсальным иономером ЭВ-74 со стеклянным электродом ЭСЛ-43−07 и хлоридсеребряным электродом сравнения при (25.0 ± 0.2)°С.Принцип работы колориметра «Спектротон» основан на одновременном измерении спектральных аппертурных коэффициентов отражения на 26 фиксированных длинах волн при освещении образца импульсной ксеноновой лампой ИСК-25 и последующей математической обработке результатов измерения. Все 26 светофильтров выделяют узкие участки спектра, равномерно через каждые 10 нм в диапазоне от 380 до 720 нм. Время съема информации — 1×10−3 с, время обработки — не более 5 с, время между двумя последовательными измерениями — не более 10 с. Подготовка сорбента. Предварительно сорбент просеивали через сита, после чего отбирали фракцию с размерами частиц 63−100 мкм. Такой размер частиц обеспечивает достаточно высокую адсорбционную способность сорбента и быструю седиментацию взвешенных частиц в растворе.

Для освобождения поверхности сорбента от алю-мосиликатов его в течение 1 ч промывали 0.01 М HNO3 [4], затем сушили в муфельной печи при 120 °C до постоянной массы. При контакте с водяным паром при температуре около комнатной у-Al2O3 адсорбирует воду в виде недиссоциированных молекул, связанных с поверхностью сорбента прочными водородными связями. В результате блокируются активные льюисовские кислотные центры (ЛКЦ) на поверхности, представляющие собой неполностью координированные атомы алюминия, образующиеся при дегидратации поверхности. Во избежание этого явления просушенный сорбент хранили в сосуде с плотной крышкой. Эти центры всегда рассматривают как каталитически активные центры на поверхности у-Al2O3, концентрация которых составляет 2.6−5.2 ммоль/м2 (1.5−3 центра/10×10 А2).Методика, измерение и обработка аналитических сигналов. В мерные пробирки емк.

5.0 мл с заранее взвешенным сорбентом (0.100 г) переносили экстракты, полученные по методике [4], плотно их закрывали притертыми пробками и встряхивали в течение 5 мин. Достижение равновесия при сорбции контролировали спектрофотометрически по изменению оптической плотности жидкой фазы после внесения в нее навески сорбента. Сорбаты сушили на воздухе в течение 2 ч до полного испарения хлороформа, после чего снимали их спектры отражения и цветометрические характеристики.Расчеты. Молярные коэффициенты поглощения cорбатов рассчитывали методом наи-меньших квадратов с помощью компьютерной программы «MicrosoftOfficeExcel 2003» при оптимальном рН их образования и температуре (25.0 ± 0.2)°С.На «Спектротоне» измеряли диффузное отражение R и цветометрические характеристики: ко-ординаты цвета X, Y, Z (система XYZ), светлоту L, координаты цвета А, В (в системе СIELAB), насыщенность цвета S, цветовой тон Т, белизну W и желтизну G. Молярные коэффициенты цветометрических функций рассчитывали по аналогии с молярными коэффициентами поглощения, относя сигнал соответствующей функции к молярной концентрации основания в диапазоне линейности функции при переменной концентрации основания.Рисунок. Спектр поглощения 3.77×10−4 М водного раствора АКС (1) и спектр диффузного отражения 2.33×10−6 М ионного ассоциата АКС с ЦТАБ, сорбированного 0.100 г γ-Al2O3 (2) при рН 5.

9.Спектр диффузного отражения сорбата 2.33 x x 10−6 М ионного ассоциата АКС с ЦТАБ приведен на рисунке. Система ЦТАБ-АКС выбрана как модельная для определения новокаина и лидока-ина с АКС в аналогичных условиях. Спектры ДО сорбатов АКС с новокаином и лидокаином подобны приведенным на рисунке. Вероятнее всего, происходит химическое связывание АКС с ЛКЦ на поверхности γ-Al2O3 с практически вертикальной ориентацией молекул реагента в пространстве. При взаимодействии (адсорбции) хлороформа с сорбентом существенно изменяются свойства его поверхности, в частности, образуется значительное количество карбонатов. Этим объясняется изменение рН хлороформных экстрактов от 4.3 до 5.9 до и после сорбции соответственно. В результате такого повышения рН происходит визуальный переход АКС из желтой формы в красную, сорбцию которой и наблюдали на поверхности носителя. В литературе нет единого мнения в отношении ализариновых комплексов. Хелатную группировку в молекуле АКС образуют хинонная и гидрок-сильная группа, расположенная в пери-положении; гидроксильная группа, расположенная в положении 2, также влияет на окраску хелатов, но, как правило, не участвует в комплексообразовании [5].

Можно предположить, что при взаимодействии металлов с АКС происходит замещение протона гидроксигруппы, и металл, кроме того, соединяется координационной связью с карбонильным кислородом. В поддержку выдвинутого предположения о химической сорбции АКС на поверхности носителя говорит и отсутствие реакции на дополнительно введенные в систему ионы Al (III), Sm (III), Zr (IV) и Th (IV), а прочности образовавшегося соединения — отсутствие взаимодействия с фторид-ионами. Благодаря наличию неподеленной электронной пары у атома азота также можно предположить хемосорбцию органических оснований на ЛКЦ, но в ряде работ по сорбции различных азотсодержащих соединений не выявлено возможности участия и-электронов атома азота в образовании химической связи с поверхностью у-Al2O3.Сдвиги максимумов в спектрах ДО зависят от энергии взаимодействия молекулы с сорбентом в основном и возбужденном состояниях [3, 5]. Для сольватированных сорбентов величина сдвигов максимумов спектров ДО сорбата зависит от разницы в энергиях сольватации в основном и возбужденном состояниях в растворах и на поверхности. Изменения в положении максимума спектров ДО сорбированных молекул в значительной мере определяются природой электронного перехода. Использование менее полярного раствори-теля (хлороформа вместо воды) сопровождается и—я* электронным переходом в молекуле АКС, что и объясняет гипохромный сдвиг полос поглощения сорбированного АКС (500 нм) по сравнению с его водным раствором (520 нм) той же концентрации. Как видно из рисунка, спектры АКС в водном растворе и в фазе сорбента практически идентичны. Это подтверждает предположение, что АКС сорбируется на поверхности у-Al2O3 в виде двухзарядного иона. Влияние на сорбцию времени контакта фаз, объема пробы и массы сорбента.

Равновесие достигается при времени контакта фаз 2 мин. Для гарантии достижения равновесия в дальнейшем все ионные ассоциаты сорбировали в течение 5 мин. Установлено, что влияние объема пробы на коэффициент ДО умеренно при довольно больших объемах (20−50 мл) и резко увеличивается при переходе к меньшим объемам пробы. При использовании градуировочных пробирок на 5.0 мл, 0.100 г сорбента и объема экстракта 5.0 мл достигается фактор концентрирования 50 (а с учетом работы [4] - 150).При использовании навески сорбента меньшей массы не достигается равномерного заполнения фторопластовой кюветы, и подложка начинает участвовать в формировании сигнала; а при большей массе — происходит неравномерное окрашивание сорбента (механическое разбавление неокрашенными частицами), в результате чего ухудшаются его цветометрические характеристики. Максимальная концентрация органических оснований, определяемая сорбционно-фотометрически в 0.100 г γ-Al2O3 для ЦТАБ, новокаина и лидокаина составляет 17.01 мг/мл, 133.

33 мкг/мл и 26.90 мкг/мл соответственно. Такая высокая концентрация сорбируемого ЦТАБ, вероятнее всего, объясняется существованием аттракционного взаимодействия, которое, согласно соответствующим представлениям [4], проявляется при вертикальной ориентации адсорбированных молекул. Однако при больших концентрациях вещества (малых значениях R) имеет место отклонение от линейности зависимости «R — концентрация вещества» из-за образования на поверхности молекулярных агрегатов, а в спектрах ДО таких образцов наблюдается существенное уширение основной полосы. Образование таких агрегатов молекул органического реагента на поверхности сорбента может быть вызвано как их сорбцией из концентрированных водных растворов, где они уже существуют, так и специфическими особенностями взаимодействия сорбированных мономерных форм [50]. Так как принизких концентрациях спектры ДО аналитов не деформируются, то, вероятно, агрегация молекул реагента на поверхности сорбента обусловлена наличием специфических взаимодействий между его сорбированными мономерными формами. Таким образом, существует методика количественного сорбционно-фотометрического определения не-которыхместноанестезирующих органических оснований с цветометрическим окончанием, достоинствами которой является простота, доступность используемых реагентов и аппаратурного оформления, а также возможность автоматизации. Определены оптимальные условия образования всех сорбатов, получены уравнения зависимостей ЦФ сорбатов от концентраций органических оснований.

Установлено, что АКС химически сорбируется на поверхности γ-Al2O3 в виде двухзарядного иона с вертикальной ориентацией молекул в пространстве. Рассчитанные МКЦФ сорбатов превышают таковые для соответствующих экстрактов в 200 раз. На основе разработанной методики создана цветовая шкала для тест-определения ЦТАБ, новокаина и лидо-каина. В качестве преимуществ цветометрии необходимо также отметить тот факт, что данный метод не требует монохроматизации светового потока, а прибор сразу выдает усредненное значение изучаемых ЦФ. Все это обусловливает большую надежность получаемых величин и возможности цветометрии.

Заключение

.

В работе проведен анализ и систематизация известных в настоящее время методов определения МАЛП. Титриметрические методы (продолжающие оставаться самыми доступными и точными) рекомендованы нормативной документацией и широко используются для количественного определения МЛП в фармацевтических субстанциях или однокомпонентных ЛП АК. УФ-спектрофотометрия, ИК-спектроскопия, спектроскопия ЯМР (высокоинформативные методы, используемые в основном для анализа МЛП в субстанциях или монопрепаратах) не могут быть использованы в анализе многокомпонентных смесей АК без предварительного разделения. Кроме того, ЯМР-спектрометры по-прежнему остаются труднодоступными для региональных контрольноаналитических лабораторий. Хроматографические методы используются для одновременного разделения, идентификации и количественного определения МАЛП (методы БХ, ТСХ, ГХ, ВЭЖХ, ионообменной хроматографии). В настоящее время они занимают лидирующие позиции по частоте использования и количеству публикаций. Хроматографический анализ становится все более доступным для повседневного применения на практике. Это связано в первую очередь с тем, что метод ВЭЖХ позволяет не только разделить большинство эссенциальных.

МАЛП, но и определить оптические изомеры, что является одной из главных задач фармацевтического анализа. Масс-спектрометрический анализ — один из самых точных и информативных методов исследования МАЛП в составе сложных многокомпонентных объектов, позволяющий решить все задачи за одну аналитическую процедуру. Однако широкое применение данного метода остается все еще невозможным из-за высокой стоимости оборудования, вспомогательных реактивов, трудности в эксплуатации прибора, а следовательно, и значительной себестоимости одного анализа.

Список литературы

Фармацевтическая химия / под ред. А. Арзамасцева. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. — 640 с. Чупак-Белоусов В. Фармацевтическая химия.

3 курс. Книга 1. — М.: Бином, 2012.

— 336 с. Фармацевтическая химия: учебник для вузов / под ред. Г. В. Раменской. — М.: Бином, 2015.

— 384 с. Пешкова В. М., Громова М. И. Методы абсорбционной спектроскопии в аналитической химии. — М.: Наука, 1976. — 280 с. Иванов В. М., Кузнецова О. В. // Успехи химии.

2001. Т. 70. № 5. С. 411. Золотов Ю. А., Иванов В. М., Амелин В. Г. Химические тест-методы анализа. ;

М.: Едиториал УРСС, 2002. — 304 с. Горчев В. Ф., Гончарук В. В. // Теорет. и эксперим. химия.

1985. Т. 21. № 4. С.

475.Иванов В. М., Адамова Е. М., Фигуровсквая В. Н. // Журн. аналит. химии. 2010. Т. 65.

№ 9. С. 934.