Изучение микробного биоценоза слизистой оболочки зева
Приготовление субстрата (гиалуроновой кислоты) и определение рабочей дозы из пупочных канатиков по методу Смирновой Л. Г. Пупочные канатики, собранные в 0,5% раствор карболовой кислоты, тщательно промыть дистиллированной водой, очистить от крови и сосудов, пропустить через мясорубку, полученную массу взвесить и залить полуторным объемом дистиллированной воды. Отстоять 30 мин при повторном… Читать ещё >
Изучение микробного биоценоза слизистой оболочки зева (реферат, курсовая, диплом, контрольная)
Изучение микробного биоценоза слизистой оболочки зева
Введение
Обзор литературы Собственные исследования Материалы и методы исследования Описание контингента Протоколы обследования контингента
3. Обсуждение результатов обследования Выводы
Актуальность проблемы
Известно, что микрофлора организма — высокоинформативный и доступный метод оценки состояния здоровья человека, коррелирующий с другими клиническими и лабораторными показателями [Бисекенова А.Л., 2000]. Организм человека и его микрофлора, как единая экологическая система, находящаяся в состоянии динамического равновесия, поддерживаемого процессами саморегуляции. Однако под воздействием агрессивных факторов социальной и природной сред обитания компенсаторные возможности экосистем не беспредельны. Происходит дезадаптация естественных биотопов в разных возрастных группах. Одной из уязвимых категорий населения является студенческая молодежь, которая подвергнута различным неблагоприятным воздействиям, для них характерен следующий комплекс отрицательных факторов социального и биологического характера: хронический психогенный стресс, неполноценное и нерегулярное питание, нерациональный режим дня, различные вредные привычки (курение, употребление спиртных напитков, наркомания). Под воздействием всех этих факторов происходит срыв компенсаторных возможностей как самого микроорганизма, так и его естественной микрофлоры. В связи с этим отмечается рост числа дисбиотических нарушений различных биотопов организма человека, что приводит к формированию новых микробных сообществ (патоценозов), развитию бактерионосительства. Микрофлора зева является наиболее уязвимым нормоценозом человеческого организма, поскольку постоянно контактирует с биотическими и абиотическими факторами окружающей среды. Под воздействием неблагоприятных факторов качественный и количественный состав микрофлоры зева может изменяться, приводя к различным нарушениям биоценоза. Одной из форм нарушения нормальной флоры слизистой оболочки зева является стафилококковое бактерионосительство. Носители патогенных стафилококков — основные источники распространения заболевания микробной этиологии в неинфекционной клинике. Поскольку студенты медицинских ВУЗов должны посещать лечебно-профилактические учреждения различного профиля в процессе обучения, они вступают в контакт с объектами больничной среды и пациентами конкретного лечебно-профилактического учреждения. В такой ситуации студенты-бактерионосители могут стать дополнительными источниками условно-патогенных внутрибольничных штаммов. И в то же время, учитывая снижение естественной резистентности у основной массы учащихся [Русанова Е.И., 1998; Камаев И. А., Васильева О. Л., 2002] они сами могут стать мишенью для циркулирующих госпитальных штаммов, и, в связи с этим, необходимы динамичные наблюдения за состоянием бактерионосительства у студентов, что и явилось целью наших исследований.
Задачи исследования
Изучение микрофлоры зева;
Определение факторов вирулентности у выделенных культур;
Установить удельный вес носительства S. aureus в группе обследованных студентов.
1. Обзор литературы
Важнейшей составной частью социальной и экономической стратегии государства является подготовка высококвалифицированных кадров для различных отраслей хозяйства. Успешное решение данной проблемы во многом зависит от состояния здоровья и работоспособности студенческой молодежи. Студенты высших учебных заведений, составляют особый социальный слой населения, объединенный определенным возрастом, специфическими условиями обучения и образом жизни. С одной стороны, студенчество можно отнести к группе высокого риска, поскольку на данном этапе своего развития молодые люди находятся под мощным влиянием двух неоднозначных, но неизбежных процессов — активной физиологической перестройки организма и интенсивной социализации личности. С другой стороны, молодой организм активно отвечает на профилактические, оздоровительные мероприятия, что делает эту деятельность достаточно эффективной [И.А. Камаев, О. А. Васильева, 2002 г.]. Анализ состояния здоровья студенческой популяции свидетельствует о том, что проблема сохранения и укрепления здоровья учащейся молодежи является актуальнейшей для общества и государства, в связи с чем необходима государственная поддержка системы охраны здоровья студентов. Проблема оптимизации жизни и здоровья студентов в современных условиях социальной и экономической неустойчивости требует пристального внимания, прежде всего от самого образовательного учреждения, в котором обучаются студенты.
Анализ литературы по проблеме охраны здоровья студентов позволил установить, что в настоящее время не выработано единого методологического подхода к вопросам организации медицинского обслуживания и оценки состояния здоровья студентов.
Состояние здоровья любой популяции, в том числе и студенческой, можно оценить как по ряду статистических показателей (общая заболеваемость, заболеваемость по классам болезней инвалидность и т. д.), так и по комплексу морфофункциональных признаков. Одним из таких признаков является состояние микрофлоры организма — высокоинформативный и доступный метод оценки состояния здоровья человека, коррелирующий с другими клиническими и лабораторными показателями.
Организм человека контактирует с окружающей средой поверхностью кожи и слизистых оболочек. Слизистая зева — входные ворота для разнообразных возбудителей инфекционных болезней, ее микрофлора — потенциальный источник эндогенных инфекций. Это диктует необходимость систематического изучения и оценки данного биотопа.
Микрофлора зева может находиться в состоянии нормоценоза (I, II, III порядка) и дисбактериоза (I, II, III стадии). При нормоценозе I порядка из зева могут высеваться б-гемолитические стрептококки (кроме Str. pneumonie и Enterococcus spp.) сапрофитные нейсерии, а также негемолитические и в-гемолитические стрептококки, кроме пиогенных, и коринеформные бактерии для микроорганизмы обеспечивают колонизационную резистентность и являются нормальной микрофлорой зева. Нормоценоз II порядка характеризуется изменением количественных соотношений представителей нормальной микрофлоры и преобладанием одного из представителей биоценоза над остальными. при нормоценозе III на фоне нормальной микрофлоры обнаруживается 1 вид условно-патогенной микрофлоры или 2 вида, не свойственные это биотопу. В группу условно-патогенных микроорганизмов входят S. aureus, Streptococcus pneumoniae, S. piogenes, Pseudomonas aerogenosa, Klebsiella pneumoniae, Proteus spp. К несвойственным зеву микроорганизмам относятся S. epidermidis, S. saprophyticus и другие виды коагулазонегативных стафилококков, Enterococcus spp., плесневые грибы, представители семейства Enterobacteriaceae, а так же неферментирующие грамотрицательные палочки. Дисбактериоз I степени (начальная стадия дисбактериоза зева) характеризуется появлением 1-го или 2-х условнопатогенных, а также 2−3-х не свойственных зеву микроорганизмов; при этом возможно значительное снижение количества стрептококков и сапрофитных нейсерий. Такая начальная фаза может сопровождаться минимальными клиническими признаками или их отсутствием, и возникает при воздействии неблагоприятных факторов на организм здорового человека. Нормоценозы II, III и дисбактериоз I свидетельствуют об определенных, возможно временных, дисбиотических сдвигах в микрофлоре зева. Эти состояния обуславливают понижение колонизационной резистентности, уменьшение устойчивости микробиоценоза зева. Однако эти изменения чаще кратковременны и исчезают без специального лечения. Воздействие сильных или длительных неблагоприятных факторов на организм здорового человека может вызывать более выраженные и стойкие изменения микробиоценоза зева — дисбактериозы II и III степени. Дисбактериоз II степени (средняя степень дисбактериоза) характеризуется появлением 1−2 видов условно-патогенной микрофлоры или 2−4 не свойственных зеву видов микроорганизмов, а также грибов р. Сandida, на фоне нормального или сниженного числа б-гемолитических стрептококков и сапрофитных нейсерий. Дисбактериоз III стадии (выраженный дисбактериоз) связан с увеличением содержания патогенных микроорганизмов с признаками агрессии (гемотоксин, плазмокоагулаза) на фоне снижения представителей нормальной микрофлоры. Возможно и выделение либо не свойственных зеву видов, либо монокультуры патогенных бактерий при полном отсутствии представителей нормальной микрофлоры. Не типичные для зева микроорганизмы могут высеваться в ассоциациях из 2−4 видов, например, ассоциации грибов Candida и патогенных бактерий-возбудителей гнойно-воспалительных заболеваний (Candida + S. aureus, S. aaureus + S. pyogenes, S. aureus + P. aeroginosae). Выраженные дисбактериозы III стадии преобладают у лиц с ослабленной резистентность и сопровождются такими уже выраженными клиническими проялениями, вплоть до воспалительных заболеваний ВДП.
Одной из форм дисбиоза слизистой оболочки зева является стафилококковое бактерионосительство. Условия формирования микробного биоценоа слизистой зева у здоровых лиц и у стафилококковых бактерионсителей изучены недостаточно. Показано, что факторы персистенции золотистых и эпидермальных стафилококков являются информативными признаками при дифференциации резидентных и транзиторных бактерионосителей [Бухарин О.В., Дерябин Д. Г., Матюшина Р. Б., 1996]. Однако комплексная оценка факторов колонизации и персистенции у таксонов, составляющих микробный биоценоз слизистой зева, не проводилась. Не изучались особенности формирования микробного биоценоза слизистой зева у студентов носителей S. aureus, не проводилось долговременных исследований, показывающих качественные изменения биоценоза зева студентов в процессе учебы.
Количественная и качественная оценка микробных биоценозов слизистой зева у студентов-носителей S. aureus и лиц, свободных от носительства, позволяет получить сведения о закономерностях формирования микрофлоры определенной экологической ниши в норме и при патологии, что может быть использовано для разработки способов прогнозирования и санации стафилококкового бактерионосительства и, посколько стафилококковое бактерионосительство агрессивно, наши исследования были направлены именно на выявление этого носительства и опрелеление некоторых качеств, лежащих в основе вирулентности и персистентности плазмокоагулазы, фибринолизина, гиалуронидазы, гемотоксина.
2. Собственные исследования
Материалы и методы исследования
В весеннем семестре 2002;2003 уч. года обследовано 12 студентов лечебного факультета. В осеннем 2002;2003 уч. года, то есть через 6 месяцев, из этой же группы повторно обследовано 11 человек. Кроме того, в осеннем семестре первичному обследованию подвергнуто еще 13 человек. Таким образом, всего обследовано 36 студентов. Данные о характеристике контингента и методах обследования представлены в таблице № 1.
Таблица 1
Контингент, материалы и методы исследования
№ п.п. | Контингент | Количество обследуемых | Материалы | Методы | Число проб | |
1. | Студенты 2 курса л/ф | Отделяемое из зева | Микробиологический: Тинкториальные свойства (окраска по Граму); определение кислотоустойчивых микроорганизмов (окраска по Цилю-Нильсену); определение капсул по Бури-Гинсу; определение капсул по Йоне; оценка адгезии на эпителиоцитах и интенсивности воспалительного процесса по состоянию нейтрофилов (окраска по Романовскому-Гимзе). Бактериологический Изучение некоторых факторов болезнетворности (гиалуронидаза, плазмокоагулаза, гемотоксин, лецитиназа). | |||
2. | Студенты 3 курса л/ф | |||||
Материалом для исследования служило отделяемое из зева, изолированное путем отбора стерильными тампонами в период практических занятий на кафедре.
Всего проведено микробиологических исследований — 144. Мазки окрашивали по следующим методам:
Метод Грама в модификации Синева.
препарат фиксировать над пламенем;
на препарат положить фильтр-бумагу, пропитанную 1% раствором генцианвиолета, добавить 2 капли воды — 2 мин.;
бумагу удалить, оставшуюся краску слить;
окрасить мазок раствором Люголя — 1 мин.;
раствор Люголя слить, мазок промыть 96% спирте (30−40 с.);
тщательно смыть спирт водой;
окрасить водным фуксином — 2 мин.;
промыть водой и высушить.
Метод Циля-Нильсена.
нанести несколько капель карболового фуксина на фиксированный мазок, покрытый фильтровальной бумагой, и подогревать до появления паров (3−5 мин.);
бумагу снять, мазок охладить и обесцветить 5% H2SO4 (2−4 c.);
тщательно промыть водой;
окрасить синькой Леффлера (3−5 мин.)
промыть водой и высушить.
Кислотоустойчивые бактерии в результате такой окраски становятся рубиново-красными, остальные — синими.
III. Метод Романовского-Гимзы.
мазки фиксировать в метиловом спирте — 2−3 мин.;
препарат окрашивают рабочим раствором красителя (1 капля готовой краски на 1 мл воды с рН 7,2) в течение 1 часа;
промыть водой (рН 7,2) и высушить.
В результате такой окраски протоплазма клеток окрашивается в синий цвет, ядерные элементы — в красно-фиолетовый.
IV. Метод Бури-Гинса.
на предметное стекло нанести каплю разведенной туши (1:9), смешать ее с исследуемым материалом;
приготовить тонкий мазок, высушить;
фиксировать пламенем;
окрасить фуксином (5 мин.);
промыть и высушить.
В результате такой окраски бактерии окрашиваются в красный цвет, капсулы — бесцветные, общий фон — черный.
V. Метод Йоне.
мазок фиксировать в смеси Никифорова;
на фиксированный препарат налить 0,02% водный раствор генцианвиолета и подогреть над пламенем;
налить на препарат 1% уксусной кислоты — 10 с.;
промыть, высушить, микроскопировать.
Для выделения чистой культуры микроорганизмов предварительно делали посевы на солевой и сахарный МПБ (72 посева), каждый из которых в последующем рассевался на 2 чашки с 5% кровяным МПА и на 2 чашки со средой Чистовича (всего 288 проб).
При выделении культур микроорганизмов изучали характер роста последних на вышеперечисленных средах, обращая внимание на наличие пигмента. Из колоний готовили мазки с окраской по Граму. Отобранные культуры микроорганизмов, представляющие для нас интерес (кокковые формы, палочковидные микроорганизмы) для накопления чистых культур, отсевали на скошенный МПА и кровяной МПА. В последующем определяли некоторые факторы болезнетворности, такие как: гиалуронидазу, плазмокоагулазу, лецитиназу, фибринокиназу, гемотоксин.
Методики определения факторов болезнетворности
Определение гиалуронидазы.
Гиалуронидаза — бактериальных фермент, расщепляющий составную часть соединительной ткани — гиалуроновую кислоту, обуславливает действие фактора проникновения бактерий.
Приготовление субстрата (гиалуроновой кислоты) и определение рабочей дозы из пупочных канатиков по методу Смирновой Л. Г. Пупочные канатики, собранные в 0,5% раствор карболовой кислоты, тщательно промыть дистиллированной водой, очистить от крови и сосудов, пропустить через мясорубку, полученную массу взвесить и залить полуторным объемом дистиллированной воды. Отстоять 30 мин при повторном встряхивании. Вылить полученную жидкость на воронку с наложенной в 2−3 слоя стерильной марлей, отжать и бросить на 1 мин в кипящую воду, количественно соответствующую первоначальному весу измельченных канатиков. Вскипятить субстрат 1 раз. Полученную жидкость быстро отфильтровать через двойной слой стерильной марли в стерильные пробирки, в каждую добавить 2 капли хлороформа. Пробирки закрыть ватно-марлевыми пробками и хранить в холодильнике.
Постановка реакции.
Предварительное титрование субстрата.
Рабочий титр — та наименьшая концентрация раствора, при которой гиалуроновая кислота образует ясно видимый сгусток после инкубирования в термостате и добавления уксусной кислоты.
Таблица 2
Определение рабочего титра гиалуроновой кислоты
№ пробирки | ||||||
Субстрат (мл) | 0,5 | 0,4 | 0,3 | 0,2 | 0,1 | |
Н2О (мл) | 0,5 | 0,6 | 0,7 | 0,8 | 0,9 | |
Смешиваем субстрат и дистиллированную воду согласно данным таблицы № 3, термостатируем при t = 37 °C в течение 15 мин, затем охлаждаем в течение 5 мин и добавляем 2 капли 2 н. раствора уксусной кислоты, и читаем результат (образование сгустка). В опыт берется наименьшая концентрация, при которой еще образуется сгусток, в данном случае — 0,3 мл.
Опыт: из 24 час. агаровой культуры изучаемых бактерий готовили взвесь в дистиллированной воде, соответствующую стандарту в 2 млрд. микробных тел в одном мл.
Мы ставили ориентировачную реакцию определения гиалуронидазы. Субстрат брали в рабочей дозе (0,3 мл), стандартную взвесь микроорганизмов — 0,5 мл, дистиллированную воду — 0,5 мл. В контроле 0,3 мл гиалуроновой кислоты и 0,7 мл дистиллированной воды. Регистрировали наличие в исследуемой культуре активной гиалуронидазы по отсутствию сгустка.
2. Определение наличия плазмокоагулазы.
Плазмокоагулаза — бактериальный фермент, взаимодействующий с компонентами САСС крови и вызывающие превращение фибриногена плазмы в фибрин, в результате чего на поверхности бактерии образуется фибринозная пленка, защищающая их от фагоцитоза.
Реакция плазмокоагуляции.
Петлю суточной агаровой культуры суспензируют в 0,5 мл разведенной 1:5 цитратной кроличьей плазмы. Результаты реакции регистрируют через 1, 2, 4, 18 ч инкубации проб в термостате при температуре 37 °C. появление на дне пробирки студневидного сгустка свидетельствует о наличии у изучаемого штамма фермента.
3. Определение лецитиназы.
Определяли путем посева испытуемой культуры на ЖСА (по наличию розового венчика).
4. Определение фибринокиназы.
Оставляли положительную пробу на плазмокоагулазу в термостате при 37 °C еще на 6 ч. При саморазжижении сгустка установилось наличие фибринокиназы.
5. Определение гемотоксина Устанавливалось посевом испытуемой культуры на кровяной агар.
Описание контингента
Обследовано 36 человек. Из них: женщин — 22, мужчин — 14. Все обследуемые были одной возрастной группы (18−20 лет). Среди обследуемых были лица, на момент обследования не предъявляющие жалоб у которых в анамнезе не устанавливалось наличие хронических заболеваний верхних дыхательных путей — 18 человек. У остальных (18 человек) в анамнезе и на момент обследования были зарегестрированы: хронический тонзиллит в стадии ремиссии или обострения, ОРЗ, хронический бронхит в стадии ремиссии. Лица с зарегестрированным обострением принимали сульфаниламидные препараты — 1 человек; амоксициллин — 1 человек; аэрозольные препараты противовоспалительного и антисептического действия — 1 человек; ринзу и иммунал — 1 человек; симптоматическое лечение (полоскание) — 1 человек. Остальные никакого лечения не проводили — 13 человек.
Ниже приводятся протоколы обследования контингента.
студент стафилококковый микробный биоценоз
Протоколы обследования контингента
Ф.И.О. и № (весенний семестр) | Статус | Прием лек. Средств в теч. 3х мес. | Характеристика микрофлоры зевамазок (по Граму, Романовскому-Гимзе, Циль-Нильсену, Йоне) | Выделенные штаммы | ||||
Пол | Возраст | Группа крови | Состояние ВДП на момент обследования | |||||
1. Куликова Светлана Евгеньевна | Ж | ; | Хронический тонзиллит в фазе обострения | Не принимала | Плоский эпителий распологается в мазке пластами по 20−15 кл., признаков деструкции ядра / цитоплазмы нет. Нейтрофилы располагаются в виде скоплений (12 кл. в поле зрения), признаков деструкции ядра / цитоплазмы нет. Обнаружены следующие микроорганизмы: Грамположительные кокки, располагающиеся в мазке крупными конгломератами (количество клеток не поддается подсчету), не адсорбированные на эпителиальных клетках. Грамотрицательные, ланцетовидные, безкапсульные диплококки, ИА=17. Грамположительные, безкапсульные кокки, формирующие короткие цепочки по 3−5 кл., ИА=20. | S. aureus Гемотоксин ; Лецитиназа ; Пигментообразование + Плазмокоагулаза + Фибринолизин + Гиалуронидаза ; Род Staphylococcus Гемотоксин + Гиалуронидаза ; Фибринокиназа ; (не идентифицированы) | ||
2. Айропетова Тамара Арамовна | Ж | II, Rh+ | Жалоб нет. Визуально: без патологических проявлений | Не принимала | Клетки плоского эпителия распологаются отдельными элементами (1−2 в поле зрения), нейтрофилы отсутствуют. В мазке обнаруженны следующие микроорганизмы: Грамположительные крупные кокки (тетракокки), не адсорбированные на эпителиальных клетках, по 2−3 тетрады в поле зрения. Грамположительные безкапсульные кокки, располагающиеся короткими цепочками (по 5−7 кл.), не адсорбированные на эпителиальных клетках, по 2−3 цепочки в поле зрения. Грамположительные, полиморфные, капсулообразующие диплококки, ИА=15. | Диплококки Капсула + Гематоксин ; Лецитиназа + Гиалуронидаза ; Плазмокоагулаза + Фибринокиназа + (не идентифицированы) | ||
3. Колодюк Елена Сергеевна | Ж | ; | Жалоб нет. Визуально: без патологических проявлений | Не принимала | Клетки плоского эпителия распологаются отдельными элементами (3−5 в поле зрения), нейтрофилы отсутствуют. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: Грамположительные безкапсульные кокки, формирующие гроздьевидные скопления, не адсорбированные на эпителиальных клетках (3 в поле зрения). Грамположительные безкапсульные, ланцетовидной формы диплококки, ИА=7. | S. aureus Гемотоксин + Лецитиназа ; Пигментообразование ; Плазмокоагулаза + Фибринолизин ; Гиалуронидаза ; | ||
4. Багушевич Екатерина Александровна | Ж | I, Rh+ | ОРВИ в течение 7 дней Визуально: гиперемия зева и задней стенки глотки | Принимает бисептол, парацетамол | Клетки плоского эпителия сформированы в симпласт, ядра эпителия частично деструктированны. Нейтрофилов нет. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: Грамположительные безкапсульные кокки, распологающиеся гроздьевидными скоплениями, не адсорбированными на эпителиальных клетках, по 2−3 в поле зрения (скопления). Грамположительные безкапсульные полиморфные диплококки, ИА=7. | S. aureus Гемотоксин + Лецитиназа ; Пигментообразование + Плазмокоагулаза + Фибринолизин + Гиалуронидаза + | ||
5. Федосова Елена Юрьевна | Ж | II, Rh+ | Жалоб нет. Визуально: без патологических проявлений | Не принимала | Эпителиальные клетки расположены отдельными элементами (3 в поле зрения), нейтрофилы отсутствуют. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: 1) Грамположительные безкапсульные полиморфные диплококки, ИА=11 | ; | ||
6. Вичирко Евгений Васильевич | М | II, Rh; | Жалоб нет. Визуально: без патологических проявлений | Не принимал | Эпителиальные клетки расположены группами по 5−6 элементов. Нейтрофилы отсутствуют. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: Грамположительные безкапсульные кокки, образующие крупные конгломераты (не поддается подсчету), несвязанные с эпителиальными клетками. Грамположительные крупные единичные безкапсульные кислотонеустойчивые палочки, неадсорбированные на эпителиальных клетках (1 кл. в поле зрения). | S. aureus Гемотоксин + Лецитиназа ; Пигментообразование + Плазмокоагулаза + Фибринолизин ; Гиалуронидаза ; | ||
7. Гольтяев Антон Васильевич | М | I | Хронический тонзиллит, ремиссия. Визуально: зев без признаков патологического процесса | Не принимал | Эпителиальные клетки расположены группами по 2−3 элемента (1−2 в поле зрения). Нейтрофилы отсутствуют. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: Грамположительные безкапсульные одиночные кокки, ИА=12. Грамположительные безкапсульные кокки, формирующие гроздьевидные скопления, неадсорбированные на эпителиальных клетках. | S. aureus Гемотоксин + Лецитиназа ; Пигментообразование + Плазмокоагулаза + Фибринолизин + Гиалуронидаза ; | ||
8. Вахрушев Николай Александрович | М | II | Хронический тонзиллит, ремиссия. Визуально: зев без признаков патологического процесса | Не принимал | Эпителиальные клетки расположены отдельными элементами (3−4 в поле зрения). Нейтрофилы отсутствуют. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: Грамотрицательные безкапсульные кислотонеустойчивые крупные одиночные палочки с внутренней зернистостью, неадсорбированные на клетках, формируют хаотические скопления по 5−7 кл. (по 1−2 скопления в поле зрения) Грамвариабельные капсулообразующие диплококки, ИА=8. Грамвариабельные безкапсульные полиморфные стрептококки, формирующие короткие цепочки по 7−8 кл., неадсорбированные на клетках. | ; | ||
9. Волкорез Максим Александрович | М | II | Жалоб нет. Визуально: без признаков патологического процесса. | Не принимал | Клетки плоского эпителия расположены в виде отдельных элементов (по 3 в поле зрения). Нейтрофилов нет. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: Грамположительные безкапсульные полиморфные диплококки, ИА=2. Грамположительные безкапсульные одиночные кокки, неадсорбированные на эпителиальных клетках (6−7 в поле зрения). | S. aureus Гемотоксин + Лецитиназа ; Пигментообразование ; Плазмокоагулаза + Фибринолизин + Гиалуронидаза + | ||
10. Семенов Максим Юрьевич | М | ; | Жалоб нет. Визуально: без признаков патологического процесса. | Не принимал | Клетки плоского эпителия располагаются в виде отдельных элементов по 1−2 в поле зрения. Нейтрофилов нет. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: 1) Грамположительные безкапсульные полиморфные одиночные диплококки, ИА=12. | Диплококки Грам + Гемотокисн ; Плазмокоагулаза ; Фибринолизин ; Лецитиназа ; Диплококки Грам ; Гемотокисн ; Плазмокоагулаза ; Фибринолизин ; Лецитиназа ; (не идентифицированы) | ||
11. Бурдюг Мария Борисовна | Ж | ; | Жалоб нет. Визуально: без признаков патологического процесса. | Не принимала | Клетки плоского эпителия располагаются в виде отдельных элементов (по 3−4 в поле зрения) без признаков деструкции. Нейтрофилов нет. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: Грамотрицательные безкапсульные кислотонеустойчивые крупные палочки с внутренней зернистостью, образующие короткие цепочки по 3−4 клетки, по 1−2 цепи в поле зрения, не адсорбированы на эпителиальных кл. Грамвариабельные безкапсульные одиночные кокки (5−6 в поле зрения), не адсорбированые на эпителиальных кл. Грамотрицательные полиморфные капсулообразующие диплококки, ИА=3. | S. aureus Гемотоксин ; Лецитиназа ; Пигментообразование ; Плазмокоагулаза + Фибринолизин + Гиалуронидаза ; Диплококки Гемотокисн + Плазмокоагулаза ; Фибринолизин ; Лецитиназа ; Гиалуронидаза ; Пигментообразование ; (не идентифицированы) | ||
12. Хаирзаманова Татьяна Александровна | Ж | ; | Жалоб нет. Визуально: без признаков патологического процесса. | Не принимала | Эпителиальные клетки располагаются в виде пластов по 6−7 элементов. Обнаружены единичные нейтрофилы без признаков деструкции (1−2 в поле зрения). В мазке обнаружены следующие микроорганиззмы: Грамотрицательные капсулообразующие диплококки, ИА=2. Грамвариабельные безкапсульные единичные кокки (10 в поле зрения), неадсорбированные на эпителиальных кл. Грамотрицательные безкапсульные извитые (3−4 завитка) микроорганизмы (3 кл. в 1 поле зрения из 10). | S. aureus Гемотоксин ; Лецитиназа ; Пигментообразование ; Плазмокоагулаза + Фибринолизин + Гиалуронидаза ; | ||
1. Колодюк Елена Сергеевна | Ж | ; | Жалоб нет. Визуально: без патологических проявлений | Не принимала | Клетки плоского эпителия располагаются отдельными элементами по 3−4 в поле зрения. Нейтрофилов нет. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: Грамвариабельные безкапсульные полиморфные кокки (по 10 в поле зрения), неадсорбированные на эпителиальных кл. Грамотрицательные капсулообразующие кислотонеустойчивые мелкие округлые палочки, по 1−2 в поле зрения, одиночные, неадсорбированные на эпителиальных кл. Грамотрицательные нитевидные безкапсульные кислотонеустойчивые микроорганизмы (2−3 в поле зрения), неадсорбированные на эпителиальных клетках. | Род Staphylococcus Гемотоксин + Гиалуронидаза ; Фибринокиназа ; Пигментообразование ; Лецитиназа ; Плазмокоагулаза ; (не идентифицированы) | ||
2. Вахрушев Николай Александрович | М | II | Хронический тонзиллит, ремиссия в теч. 2х недель после обострения. Визуально: незначительная гиперемия небных дужек | Не принимал | Клетки плоского эпителия располагаются пластами, без признаков деструкции. Обнаружены ядра разрушенных нейтрофилов (5 в поле зрения). В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: Грамположительные безкапсульные кокки, образующие гроздьевидные конгломераты, неадсорбированные на эпителиальных кл. (по 2 конгломерата в поле зрения). Грамположительные капсулообразующие стрептококки, расположеные конгломератами по 5−6 цепочек (узловатые, перекрученые), 1−2 в поле зрения. | S. aureus Гемотоксин + Лецитиназа ; Пигментообразование ; Плазмокоагулаза + Фибринолизин ; Гиалуронидаза ; | ||
3. Волкорез Максим Александрович | М | II | Жалоб нет. Визуально: без признаков патологического процесса. | Не принимал | Клетки плоского эпителия располагаются отдельными элементами по 3 в поле зрения, без признаков деструкции. Нейтрофилов нет. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: 1) Грамположительные полиморфные безкапсульные диплококки, ИА=40. | Нет роста на средах. | ||
4. Куликова Светлана Евгеньевна | Ж | ; | Хронический тонзиллит в фазе обострения в течение 3х дней | Не принимала | Клетки плоского эпителия образуют пласты, обнаружены нейтрофилы с признаками деструкции цитоплазмы (10 в поле зрения). В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: 1) Грамположительные безкапсульные кокки, собранные в конгломераты, неадсорбированные на эпителии. | S. aureus Гемотоксин + Лецитиназа ; Пигментообразование ; Плазмокоагулаза + Фибринолизин + Гиалуронидаза + | ||
5. Вичирко Евгений Васильевич | М | II, Rh; | Жалоб нет. Визуально: без патологических проявлений | Не принимал | Клетки плоского эпителия располагаются отдельными элементами по 2−3 в поле зрения. Нейтрофилов нет. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: Грамположительные капсульные одиночные кокки, ИА=30. Грамположительные безкапсульные одиночные кокки, ИА=30. Грамположительные капсулообразующие кислотоустойчивые палочки, одиночные, ИА=10. | S. aureus Гемотоксин + Лецитиназа ; Пигментообразование ; Плазмокоагулаза + Фибринолизин + Гиалуронидаза ; Род Staphylococcus Грам +, гроздья Гемотоксин ; Гиалуронидаза ; Фибринокиназа ; Пигментообразование ; Лецитиназа ; Плазмокоагулаза ; (не идентифицированы) | ||
6. Гольтяев Антон Васильевич | М | I | Хронический тонзиллит, ремиссия. Визуально: зев без признаков патологического процесса | Не принимал | Клетки плоского эпителия располагаются отдельными элементами по 2−3 в поле зрения. Нейтрофилов нет. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: 1) Грамположительные единичные безкапсульные кокки, ИА=20. | S. aureus Гемотоксин ; Лецитиназа ; Пигментообразование + Плазмокоагулаза + Фибринолизин + Гиалуронидаза ; | ||
7. Семенов Максим Юрьевич | М | ; | Жалоб нет. Визуально: без признаков патологического процесса. | Не принимал | Клетки плоского эпителия располагаются отдельными элементами по 3−4 в поле зрения. Нейтрофилов нет. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: Грамотрицательные кислотонеустойчивые мелкие безкапсульные одиночные палочки, ИА=10. Грамположительные безкапсульные одиночные кокки, неадсорбированные на эпителиальных клетках. | Диплококки Гемотокисн ; Плазмокоагулаза ; Фибринолизин ; Лецитиназа ; Гиалуронидаза ; Пигментообразование ; (не идентифицированы) | ||
8. Федосова Елена Юрьевна | Ж | II, Rh+ | Жалоб нет. Визуально: без патологических проявлений | Не принимала | Клетки плоского эпителия располагаются отдельными элементами по 3−4 в поле зрения, нейтрофилов нет. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: 1) Грамотрицательные ланцетовидные капсулообразующие диплококки, ИА=20. | S. aureus Гемотоксин + Лецитиназа ; Пигментообразование + Плазмокоагулаза + Фибринолизин ; Гиалуронидаза ; | ||
9. Бурдюг Мария Борисовна | Ж | ; | Жалоб нет. Визуально: без признаков патологического процесса. | Не принимала | Клетки плоского эпителия располагаются отдельными элементами по 2−3 в поле зрения. Нейтрофилов нет. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: Грамвариабельные полиморфные единичные капсулообразующие палочки, ИА=3. Грамположительные безкапсульные одиночные кокки, ИА=5. | Палочки Грам ; Капсула ; Гемотоксин + Плазмокоагулаза + Фибринолизин + Гиалуронидаза ; Лецитиназа ; (не идентифицированны) | ||
10. Хаирзаманова Татьяна Александровна | Ж | ; | Жалоб нет. Визуально: без признаков патологического процесса. | Не принимала | Эпителиальные клетки располагаются отдельными элементами по 4 в поле зрения. Нейтрофилов нет. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: Грамотрицательные полиморфные безкапсульные палочки, неадсорбированные на эпителиальные кл., по 5−7 в поле зрения. Грамотрицательные полиморфные капсулообразующие диплококки, ИА=15. | ; | ||
11. Айропетова Тамара Арамовна | Ж | II, Rh+ | ОРВИ, в теч. 7 дней. Визуально: гиперемия зева. | Не принимала | Клетки плоского эпителия распологаются пластами, нейтрофилы — 5−10 в поле зрения. В мазке обнаруженны следующие микроорганизмы: Грамположительные безкапсульные кокки, формирующие гроздьевидные скопления, не адсорбированные на эпителиальных клетках. Грамотрицательные капсулообразующие кислотонеустойчивые короткие округлые единичные палочки, не адсорбированные на эпителиальных клетках, по 10 в поле зрения. | S. aureus Гемотоксин + Лецитиназа + Пигментообразование + Плазмокоагулаза ; Гиалуронидаза ; Род Staphylococcus Грам + Гемотоксин + Гиалуронидаза ; Пигментообразование ; Лецитиназа ; Плазмокоагулаза ; (не идентифицированы) | ||
12. Миронова Ольга | Ж | II | Жалоб нет. Визуально: без патологических проявлений | Непринимала | Клетки плоского эпителия располагаются отдельными элементами по 2−3 в поле зрения. Нейтрофилов нет. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: Грамвариабельные безкапсульные одиночные палочки, не адсорбированные на эпителиальных клетках, по 6−7 в поле зрения. Грамотрицательные капсулообразующие диплококки, ИА=2. | Диплококки Капсула ; Гематоксин ; Лецитиназа ; Гиалуронидаза ; Плазмокоагулаза ; Фибринокиназа ; (не идентифицированы) | ||
13. Яременко Марина | Ж | III, Rh+ | Острый назофарингит. Визуально: выраженная гиперемия зева, увеличение миндалин | Амоксициллин в течение 7 дней | Эпителиальные клетки располагаются пластами и скоплениями по 5−7 клеток в поле зрения. Нейтрофилы с признаками деструкции ядра и цитоплазмы — 7−10 в поле зрения. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: Грамположительные безкапсульные кокки, располагающиеся гроздьевидными скоплениями (не поддаются подсчету). Грамотрицательные капсулообразующие овальные диплококки, ИА=13. | S. aureus Гемотоксин ; Лецитиназа ; Пигментообразование ; Плазмокоагулаза + Фибринолизин + Гиалуронидаза ; | ||
14. Смоловик | М | I, Rh+ | Острый назофарингит, 7 дней. Визуально: гиперемия зева, отек задней стенки глотки. | Не принимал | Эпителиальные клетки формируют симпласт, ядра эпителия частично деструктированы; обнаруживаются отдельные нейтрофилы с признаками деструкции ядра. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: Грамположительные одиночные безкапсульные кокки, 2−7 в поле зрения. Грамположительные безкапсульные полиморфные одиночные палочки, 1−2 в поле зрения. | Род Staphylococcus Грам + Капсула ; Гемотоксин ; Гиалуронидаза ; Фибринокиназа ; Пигментообразование ; Лецитиназа ; Плазмокоагулаза ; (не идентифицированы) | ||
15. Пасько Елена Сергеевна | Ж | I, Rh+ | Острый фарингит, 7 дней. Визуально: гиперемия зева, миндалины увеличены, с белым слизистым налетом | Аэрозоль | Эпителиальные клетки располагаются отдельными элементами по 1−2 в поле зрения с признаками деструкции ядра. Нейтрофилы сплошь в поле зрения (деструкция цитоплазмы) В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: Грамположительные безкапсульные кокки, формирующие крупные конгломераты (на несколько полей зрения), неадсорбированные на эпителиальных клетках. Грамотрицательные безкапсульные кислотонеустойчивые мелкие одиночные палочки, ИА=11. | S. aureus Гемотоксин ; Лецитиназа ; Пигментообразование ; Плазмокоагулаза + Фибринолизин + Гиалуронидаза + | ||
16. Петровская | Ж | ; | Хронический бронхит, ремиссия в течение 3х месяцев. Визуально: зев без изменений. | Не принимала | Клетки плоского эпителия располагаются пластами, признаков деструкции ядра и цитоплазмы нет нейтрофилов нет. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: Грамотрицательные безкапсульные одиночные кокки, ИА=15. Грамвариабельные безкапсульные кислотонеустойчивые кокки, формирующие гроздьевидные скопления по 10−20 клеток (1−2 скопления в поле зрения), неадсорбированные на эпителиальных клетках. | S. aureus Гемотоксин ; Лецитиназа ; Пигментообразование ; Плазмокоагулаза + Фибринолизин + Гиалуронидаза + | ||
17. Межорина Елена | Ж | ; | ОРВИ, в теч. 5 дней. Визуально: незначительная гиперемия задней стенки глотки. | Не принимала | Клетки плоского эпителия располагаются пластами, признаков деструкции ядра и цитоплазмы нет. Нейтрофилов нет. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: Грамотрицательные безкапсульные овальные диплококки, ИА=1. Грамположительные безкапсульные одиночные кокки, ИА=15. Грамположительные безкапсульные кислотоустойчивые мелкие тонкие палочки, располагающиеся скоплениями по 5−6 клеток, неадсорбированные на эпителиальных кл. | Род Staphylococcus Грам + Гемотоксин ; Гиалуронидаза ; Фибринокиназа ; Пигментообразование + Лецитиназа ; Плазмокоагулаза ; (не идентифицированы) | ||
18. Тимофеева | Ж | ; | Острый назофарингит, 7 дней. Визуально: гиперемия зева и задней стенки глотки, увеличение миндалин. | Астросепт | Клетки плоского эпителия располагаются пластами, признаков деструкции ядра и цитоплазмы нет. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: Грпмотрицательные ланцетовидные безкапсульные диплококки, ИА=12. Грамположительные безкапсульные кокки, формирующие крупные гроздьевидные скопления. | S. aureus Гемотоксин ; Лецитиназа ; Пигментообразование ; Плазмокоагулаза + Фибринолизин + Гиалуронидаза + | ||
19. Хан | Ж | II | Острый назофарингит. Визуально: гиперемия зева, увеличение миндалин. | Не принимала | Клетки плоского эпителия располагаются пластами. нейтрофилы (ядра нейтрофилов) — 10 в поле зрения. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: Грамположительные безкапсульные кокки, формирующие гроздьевидные скопления — сплошь в поле зрения. Грамположительные безкапсульные полиморфные кислотоустойчивые палочки, формирующие короткие цепочки по 2−3 клетки, неадсорбированные на эпителиальных клетках, по 5−6 в поле зрения. | S. aureus Гемотоксин ; Лецитиназа ; Пигментообразование + Плазмокоагулаза + Фибринолизин + Гиалуронидаза ; | ||
20. Яроцкий Дмитрий | М | IV, Rh+ | Острый тонзиллит, 7 дней. Визуально: гиперемия зева, увеличение миндалин. | Не принимал | Клетки плоского эпителия формируют симпласт. Деструкция ядер значительная по всему симпласту. Нейтрофилы с признаками деструкции ядра и цитоплазмы, по 5−6 в поле зрения. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: Грамположительные капсулообразующие кокки, формирующие плотные конгломераты, неадсорбированные на эпителиальных клетках. Грамотрицательные безкапсульные тонкие длинные кислотонеустойчивые палочки, располагающиеся «веерными» скоплениями по 5−6 клеткок, по 1−2 скопления в поле зрения, неадсорбированные на эпителиальных клетках. | S. aureus Гемотоксин ; Лецитиназа ; Пигментообразование ; Плазмокоагулаза + Фибринолизин + Гиалуронидаза ; | ||
21. Симакова | Ж | II, Rh; | Острый тонзиллит. Визуально: гиперемия зева и миндалин. | Не принимала | Клетки плоского эпителия формируют симпласт, без признаков деструкции ядер. Нейтрофилы не обнаружены. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: Грамотрицательные капсулообразующие ланцетовидные диплококки, ИА=20. Грамотрицательные безкапсульные крупные кислотоустойчивые кокки, расположенные тетрадами, по 5−7 в поле зрения, неадсорбированные на эпителиальных клетках | Диплококки Грам ; Капсула ; Гематоксин ; Лецитиназа ; Гиалуронидаза ; Плазмокоагулаза ; (не идентифицированы) | ||
22. Куликов | М | 2ьл0 | III, Rh+ | Острый назофарингит. Визуально: гиперемия задней стенки глотки. | Не принимал | Клетки плоского эпителия располагаются пластами, без признаков деструкции. Нейтрофилы (разрушенные ядра) — 5−6 в поле зрения. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: 1) Грамположительные безкапсульные кислотоустойчивые одиночные кокки, ИА=30. | S. aureus Гемотоксин + Лецитиназа + Пигментообразование + Плазмокоагулаза ; Гиалуронидаза + | |
23. Уткина | Ж | II, Rh+ | Хронический тонзиллит, обострение в течение 1 мес. Визуально: миндалины увеличены, отечны, при надавливании тампоном из лакун выделяется | Иммунал в течение 1 мес. Ринза | Нейтрофилы (разрушенные ядра) — сплошь в поле зрения, слизь. Клетки плоского эпителия располагаются группами по 3−4, без признаков деструкции. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: Грамположительные капсулообразующие стрептококки, ИА=10. Грамположительные безкапсульные кокки, располагающиеся гроздьевидными скоплениями, неадсорбированные на эпителиальных клетках. | S. aureus Гемотоксин + Лецитиназа + Пигментообразование ; Плазмокоагулаза + Фибринолизин + Гиалуронидаза ; | ||
24. Шаповалов Сергей | М | ; | Жалоб нет. Визуально: без патологических изменений. | Не принимал | Клетки плоского эпителия располагаются отдельными элементами (2 в поле зрения) без деструкции, слизь +++, нейтрофилов нет. В мазке обнаружены следующие микроорганизмы: Грамвариабельные полиморфные кислотонеустойчивые безкапсульные палочки, ИА=2. Грамположительные безкапсульные кислотонеустойчивые палочки, формирующие короткие цепочки по 5−7 клеток, неадсорбированные на эпителиальных клетках. | Палочки Грам + Капсула ; Гемотоксин ; Лецитиназа ; Пигментообразование ; Плазмокоагулаза ; Гиалуронидаза ; (не идентифицированы) | ||
3. Обсуждение результатов обследования
Микроскопическая характеристика микрофлоры зева
В препаратах, окрашенных по методу Грама, выявлена разнообразная микрофлора. У 90,5% она была представлена микроорганизмами шаровидной формы: стафилококки — 49%, диплококки ланцетовидной формы — 41%, овальной формы — 0,5%. Палочковидные формы были обнаружены у 7% обследованных. Остальная флора (2,5%) была грамвариабельной и полиморфной. Кислотоустойчивые бактерии в мазках из зева не обнаружены. У 45% обследованных капсула была обнаружена как у грамположительных шаровидных микроорганизмов, так и у палочковидных бактерий.
Результаты изучения мазков, окрашенных по Романовскому-Гимзе, позволили установить значительное разнообразие расположения плоского эпителия. Оно проявлялось в одиночном расположении клеток (50%), в виде небольших скоплений по 3−5 клеток (13,8%) и в виде клеточных пластов с сохраненной структурой отдельных клеток (19,4%). Наряду с этим мы встретили в поле зрения симпласты (16,8%). Характер адгезии бактерий был разнообразен. Наиболее активно адгезировались на поверхности эпителия грамотрицательные диплококки. Количество адгезированных диплококков колеблется от 7 до 40, составляя в среднем 24 на 1 эпителиальную клетку. Выраженной адгезии стафилококков к эпителию не обнаружено. Они чаще располагались в виде больших скоплений вне близости к эпителию.
Палочковидные микроорганизмы не проявляли выраженной адгезии к эпителию. Однако у некоторых обследованных количество адгезированных клеток составляло в среднем 11 на 1 эпителиальную клетку.
При исследовании мазков из зева, окрашенных по Романовскому-Гимзе мы выявили, что преобладающее их количество не содержит или содержит единичные лейкоциты в поле зрения (83,3%). Такие результаты были характерны для практически здоровых обследуемых, либо находящихся в состоянии острого респираторного заболевания, возможно вирусной этиологии. У таких обследуемых эпителий располагается чаще всего в виде симпластов. Аутофагоцитоз имел незавершенный характер, лейкоциты были разрушены, а эпителиальные клетки — усеяны бактериями (индекс адгезии к эпителиальным клеткам = 30).
Результаты бактериологического обследования свидетельствуют, что 50% выделенных штаммов принадлежит к роду Staphylococcus и составляют вид S.aureus. Они обладали плазмокоагулазной, фибринокиназной, гиалуронидазной активностью. Одновременно с этим они были вариабельны по пигментообразованиюв, лецитиназе и гемотоксину. 23,6% штаммов отнесены к коагулазонегативным стафилококкам, которые требуют дальнейшей дифференциации, 18,4% - морфологически относятся к диплококкам, 2,6% - к стрептококкам, палочковидная форма составляет 5,4%. Все эти штаммы нуждаются в дальнейшей идентификации.
Выводы
Установлено носительство S. aureus у 50% обследуемых.
У носителей регистрируется деструкция эпителиальной ткани, незавершенный аутофагоцитоз.
Такое широкое носительство требует развертывания более широких исследований состояния здоровья студентов с обязательным включением микробиологических исследований, состояния иммунитета, и последующей коррекцией выявленной патологии.
Бисекенова А. Л. Состояние микробиоценоза зева как критерий здоровья при использовании системы П. К. Иванова в комплексной реабилитации детей. Вопросы туберкулеза и др. инфекционных заболеваний.// Cборник трудов, 2000, II, с.81−86.
Бочков И. А. Микрофлора зева у здоровых лиц в условиях экстремальных состояний.// Эпидемиология инфекционных болезней, 1998, № 3, с.26−30.
Бухарин О. В. Биомедицинские аспекты персистенции бактерий, с.4−13.
Бухарин О.В., Чернова О. Л. Построение диагностической модели дифференциации резистентной и транзиторной стафилококковой микрофлоры при бактерионосительстве. // Журн. микробиол., 1996, № 3, с.68−70.
Гербич И.И., Некрасова А. В. Особенности стафилококкового бактерионосительства и заболеваемости у школьников Оренбургской области. Материалы 60-й научной конференции студентов и молодых ученых Башкирского государственного медицинского института. Ч.1, 1999, с. 25−26.
Гербич И.И., Некрасова А. В. Характеристика стафилококкового носительства и заболеваемости среди школьников Оренбургской области. Тезисы докладов 13-й конференции «Молодые ученые — здравоохранению», 1995, с. 97−99.
Дерябин Д.Б., Курлаев П. П. Роль персистентных характеристик возбудителя в определении затяжного течения гнойно-воспалительного процесса. // Журн. микробиол., 1996, № 3, с. 74−77.
Журавская Н.С., Виткина Н. И. Метод мазков-отпечатков со слизистой носа в диагностике заболеваний органов дыхания.// Клиническая лабораторная диагностика, 2002, № 2, с. 40−42.
Зайцева И.П., Насолодин В. В. Оценка иммунологической реактивности у студенток в течение учебного года.
Камаев И.А., Васильева О. Л. Динамика заболеваемости и особенности медицинского обслуживания студентов. // Гигиена и санитария, 2002, с. 26−29.
Константинов В.Б., Копейкин Н. Ф. Здоровье — индикатор развития человека и общества.
Ланкина М. В. Микрофлора зева человека как показатель определения резистентности организма. // Журн. микробиол., 2002, № 3, с. 97−98.
Ляхович А.В., Ахмерова С. Г. Роль гигиенического воспитания и обучения в стабилизации заболеваемости студентов., с. 26−29.
Лесова В.С., Новицкая И. В. Микобиота зева пациентов и помещений многопрофильной клинической больницы Волгограда: экологические аспекты. // Эпидемиология и инфекционные болезни, 2002, № 5, с. 16−19.
Матюшина С. Б. Роль факторов персистенции стафилококков при бактерионосительстве. // Афтореф. — Оренбург, 1996. — 21с.
Паршута Л. И. Особенности формирования микробного биоценоза слизистой оболочки носа при стафилококковом бактерионосительстве. // Афтореф. — Оренбург, 1998. — 23с.
Сравнительная характеристика микробного биоценоза у носителей S. aureus и лиц, свободных от носительства. Тезисы докладов региональной конференции молодых ученых Урала и Поволжья, посвященный 250-летию Оренбургской губернии и 60-летию образования Оренбургской области.- 1994, Т.1. — с. 202−203.
Русанова Е. И. Вопросы охраны здоровья студентов в законодательстве Российской Федерации., с. 24−28.
Чернова О.П., Матюшина С. Б. Динамика персистентных характеристик стафилококков под воздействием микроклимата спелеошахты. // Журн. микробиол., 1996, № 3, с. 78−80.