Энтеробактериозы. 
Характеристика, методы лечения и диагностики пчелиных болезней

Энтеробактериозы (Enterobacteriosis) — заболевания взрослых пчел и шмелей в результате проникновения в их гемолимфу микроорганизмов семейства Enterobacteriaceae, приводящие к гибели насекомых.

Историческая справка, распространение, степень опасности и ущерб. Возбудители энтеро-бактериозов очень широко распространены в природе, присутствуют в почве, воде, на фруктах, овощах, зерне, цветковых растениях и деревьях, у различных животных от червей и насекомых до млекопитающих, включая человека. Микроорганизмы весьма разнообразны по особенностям экологии, кругу хозяев, патогенности для растений, насекомых, животных и человека. Ряд видов вызывает желудочно-кишечные заболевания, могут быть возбудителями оппортунистических инфекций у человека.

Гафниоз (лат., англ. — Hafniosis; паратиф, трихобациллез) — бактериальная болезнь взрослых пчел и шмелей.

Возбудитель болезни. Возбудитель — Hafhia alvei семейства Enterobacteriaceae, мелкая прямая палочка размером 1×2…5мкм; оптимальный рост отмечен при температуре 30…37 «С. Ультраструктура клеток типична для большинства грамотрицательных бактерий и идентична таковой возбудителей сальмонеллезов сельскохозяйственных животных. При общем сходстве с грамотрицательными бактериями у гафний не обнаружены мезосомы, выявлены вогнутости на одном или двух концах клеток. Микроб широко распространен в природе, встречается в фекалиях человека, животных, в том числе птиц, сточных водах, почве, воде, на растениях, в молочных продуктах, в организме насекомых.

Гафнии развиваются в организме насекомых и могут стать причиной септицемии. Патогенны для медоносных пчел, а также ос, выделены из гусениц тутового шелкопряда. Лабораторные животные (кролики, морские свинки и мыши) невосприимчивы.

Н. alvei сохраняет жизнеспособность в меде до 70…90 дней. В воске при 14…28 «С выживает до 146 дней, при 4 °C — 210 дней, в перге — 300 дней, на сотах при 4 «С — 240 дней, на стенках ульев — 200…270 дней. Кипячение убивает микроорганизм за 1…2мин, прогревание при 60…85 «С —за 10…30 мин; 0,1%-ный раствор гидроксида натрия — за 3 ч; 0,5%-ный раствор гидроксида натрия — за 35…85 мин; смесь 5%-ной карболовой кислоты и формалина — за 1…5 мин; в 0,025%-ном растворе прополиса возбудитель остается жизнеспособным в течение 1 сут.

Эпизоотология. Заражение пчел возможно при скармливании клеток возбудителя, опрыскивании, содержании здоровых насекомых в садках, где ранее находились инфицированные особи. Признаки поражения и гибель зараженных пчел отмечают на 3…12-Й день, но иногда и через 24 ч.

Н. alvei обнаружена в кишечнике здоровых рабочих пчел, трутней, маток, на куколках и перге в нормально функционирующих семьях пчел. Фактором передачи инфекции служит загрязненная возбудителем окружающая среда. Дальнейшему распространению микроорганизма способствуют пчелы и различные насекомые. Пчелы, осы, шмели, муравьи и особенно клещ варроа могут быть переносчиками возбудителя как внутри семьи, так и между насекомыми на местности.

Возникнув, заболевание быстро распространяется внутри пасеки за счет пчелиного воровства и манипуляций пчеловода. Очевидно, существует определенная породная чувствительность пчел к заражению.

Заболевание отмечают весной и осенью, в ряде случаев гибель пчел регистрируют в зимне-весенний период.

Гафниоз встречается в семьях пчел как самостоятельное заболевание (16,9%) или чаще при смешанных инфекциях (83,1%), в ассоциации с варроозом (62,19%), нозематозом (27,91%) или обоими сразу (9,9%). Отмечены также случаи одновременного поражения семей пчел гафнией, вирусом хронического паралича, шигеллами, сальмонеллами, псевдомоналами, амебами. Возникновению и распространению болезни также способствуют нарушения в кормлении (наличие пади или пестицидов в зимних кормах, вызывающих увеличение порозности кишечной стенки) и содержании (повышенная влажность и беспокойство пчел в зимовнике). Предрасполагают к заболеванию длительная зимовка, неблагоприятные погодные условия, отсутствие нектаровыделения, длительные перерывы в медосборе. Частой особенностью гафниоза является одновременное поражение нескольких пасек на местности.

Патогенез. При попадании Н. alvei в кишечник пчел или шмелей и наличии благоприятных условий (ослабление перистальтики, что обычно у зимующих насекомых) микроорганизм начинает размножаться с выделением экзои эндотоксинов. В результате этого нарушается целостность стенки средней и тонкой кишки, бактерии проникают в гемоцель насекомого. Процесс проникновения возбудителя ускоряют нарушения порозности кишечника, возникающие при нозематозе, падевом токсикозе или под воздействием других факторов. Нарушаются процессы усвоения питательных веществ, что ведет к большему потреблению корма, изменяется водный баланс в организме. Переполнение кишечника приводит к непроизвольной дефекации жидким содержимым внутри зимующей семьи пчел, что способствует дальнейшему перезаражению особей в ней.

Проникновение гафний в гемолимфу пчелы обусловливает подавление гуморальных и клеточных факторов защиты организма хозяина, возбудитель начинает интенсивно размножаться в ней. Выделяемые токсины нарушают нервную деятельность, что вызывает малоподвижность пчел, отсутствие реакций на стук, свет, паралич летательного аппарата. Пчелы гибнут в результате сепсиса и интоксикации.

Течение и клиническое проявление. В период зимовки пчелы беспокоятся, клуб распадается, на дне улья много погибших насекомых. От улья исходит неприятный запах, реакция семьи на стук и свет отсутствует. Пчелы темнеют, медленно передвигаются по сотам, некоторые выходят из летка. Крылья расставлены, брюшко раздуто, при надавливании выделяется светло-желтая, коричневая, грязно-серая жидкая слизистая масса с неприятным запахом. Иногда леток, наружная передняя и внутренние стенки улья, соты покрыты пятнами фекалий. Облет вялый, недружный, вокруг улья много неподвижно сидящих, медленно ползающих, не способных к полету или перелетающих на небольшие расстояния, прыгающих пчел, у некоторых насекомых отмечают параличи ног. Семьи пчел часто погибают до появления в них расплода в зимовнике или в течение 7…8 дней после выставки, многие семьи резко ослабевают и в дальнейшем плохо развиваются, не дают продукции. Ослабшие осенью семьи нередко гибнут в период зимовки.

Клинические признаки заболевания у шмелей обычно проявляются через 1…4 дня после вывода маток из диапаузы. Больные шмели малоподвижны, брюшко увеличено, кал жидкий, клейкий, коричневого цвета, с неприятным запахом. Насекомые погибают в течение 3…8 дней.

Патологоанатомические признаки. Гемолимфа мутная, иногда белая. Грудные мышцы темно-серого, коричневого или черного цвета. Средняя и тонкая кишка отечны, растянуты, заполнены грязно-серым или серо-бурым содержимым. Задняя кишка переполнена, серого цвета.

Гистологически отмечают разрушение перитрофической мембраны средней кишки на отдельных участках или на всем протяжении, остатки мембраны в виде бесформенного оксифильного детрита прилегают к деге-нерированному эпителию. Мышечные волокна растянуты, границы их плохо прослеживаются. Аналогичные изменения отмечены в кутикуляр-ном слое и эпителии тонкой кишки.

Диагностика и дифференциальная диагностика. Диагноз ставят на основании выделения возбудителя из гемоцеля насекомого с учетом характерных признаков болезни и эпизоотологической ситуации.

В лабораторию высылают 30 больных пчел или свежие трупы насекомых. Материалом для бактериологического исследования служат стерильно взятая гемолимфа или грудные мышцы. У шмелей исследуют гемолимфу, содержимое кишечника и испражнения. Используемый в практике посев суспензии из целого насекомого не может служить основанием для постановки диагноза. При проведении исследований руководствуются существующими определителями бактерий.

Результаты выделения возбудителя могут быть подтверждены РА со специфической сывороткой против Н. alvei.

Болезнь дифференцируют от других энтеробактериозов: саль-монеллеза, протеоза, эшерихиоза, цитробактероза, псевдомоноза, нозематоза.

Профилактика. Профилактика болезни складывается из поддержания хорошего санитарного состояния пасеки, территории, на которой она располагается, и мест хранения продуктов пчеловодства и пчеловодного оборудования. Особую опасность для пчел могут представлять загрязненные водоемы, стоки нечистот из навозохранилищ, туалетов, выгребных ям. Пасеку оборудуют поилками с чистой или слегка подсоленной водой (0,01%-ный раствор натрия хлорида), активно потребляемой пчелами, особенно весной при выращивании расплода. Весной после облета семью пчел пересаживают в чистый улей, удаляют лишние соты, гнездо сокращают и утепляют, дают побудительную подкормку, стимулируют яйцекладку маток. Пчел содержат на чистых сотах, бывших в эксплуатации не более 2…3 лет, с приносом пыльцы расширяют гнездо за счет рамок с вощиной для отстройки новых сотов. Проводят обработку семей против клеща варроа. Зимовку пчел осуществляют в сухом зимовнике на качественных кормах, в период зимовки семьи нельзя беспокоить (уничтожают грызунов и не допускают сотрясения стен ульев). Своевременно проводят выставку пчел. Не разрешают завоз неблагополучных семей и использование непродезинфицированного инвентаря и оборудования на пасеке. Систематически проводят дезинфекцию свободных сотов и ульев раствором пероксида водорода или пероксида водорода с муравьиной кислотой. Для предупреждения нозематоза годные для использования соты хранят в парах уксусной кислоты. С целью предупреждения гафнио-за шмелей отловленных в природе маток выдерживают в течение 10 сут в отдельных садках и исследуют их фекалии.

Лечение. Для лечения пчел можно использовать окситетрациклин, у шмелей применяют также другие антибиотики.

Меры борьбы. При выявлении в период зимовки неблагополучной семье проводят раннюю выставку. Пчел пересаживают в чистый улей, рамки очищают, удаляют рамки с кормом, гнездо сокращают и утепляют, дают доброкачественный корм, применяют антибиотики. На пасеку (хозяйство) накладывают ограничения (запрещаются выезд на медосбор, продажа семей, отводков, маток пчел, обезличенная перестановка сотов; осушивание сотов после откачки меда проводят только в тех семьях, откуда они взяты). Мед от больных и погибших семей может быть использован для пищевых целей при условии его термической обработки в кондитерском производстве. Подкормка таким медом других семей пасеки не допускается.

Ограничения снимают после ликвидации заболевания и проведения всех работ по улучшению санитарного состояния пасек и дезинфекции инвентаря и оборудования пасеки.

Эшерихиоз (лат., англ. — Escherichiosis; эшерихиоз) — заболевание взрослых пчел, характеризующееся диареей и гибелью в результате сепсиса.

Возбудитель болезни. Возбудителем эшерихиоза (колибактериоза) пчел является Escherichia coli (кишечная палочка), по свойствам не отличающаяся от возбудителя болезни у животных (см. часть 1, Эшерихиоз). Медоносная пчела, шмели, как и большинство других насекомых, не имеют специфических Е. coli. Из организма здоровых и больных пчел выделяют серотипы Е. coli: 0119, 0128, 0101, 0127, 0126, 0143, 055, 0103, 078, 018, 0126.

Е. coli находили в теле здоровых медоносных пчел и шмелей в различных регионах земного шара, обнаружены они в сотовом меде. У здоровых пчел размножение и развитие Е. coli происходят в пищеводе, медовом зобике, средней кишке и особенно в задней кишке. В лётный период заражено 18,7…36,4% пчел в семье.

Данные по выживаемости возбудителя в меде противоречивы. При температуре 4…20 «С они выживают до 7 сут, выдерживают нагревание до 60 «С в течение 10… 15 мин; при 37 °C в меде жизнеспособны 13…60 дней; в воске и вощине при 14…28 «С — 200 дней, при 4 «С — 210 дней; на сотах — 240 дней; в 0,025%-ном растворе прополиса — 1 сут.

Эпизоотология. Заболевание регистрируется в зимне-весенний период. Е. coli чаще выделяют у зимующих пчел с пасек, расположенных в густонаселенных центральных областях России. Источником заражения служат загрязненные водные источники и пыльца.

Заражение пчел возможно при скармливании и инъекции клеток возбудителя в гемоцель взрослых пчел или при инокуляции куколкам. Чаще заражаются взрослые, ослабленные длительным содержанием в садке насекомые.

Распространению возбудителя внутри семьи способствуют начинающаяся в конце зимы и весной интенсивная очистка ячеек сотов, обмен корма между особями.

Кишечная палочка обнаружена также в самках клеща варроа, выделенных из расплода или с самих пчел. Возникновению заболевания в семьях пчел способствует также накопление микроорганизма в гнезде. Возбудитель легко передается с различным загрязненным оборудованием, чему способствуют нарушения санитарно-гигиенических условий содержания насекомых.

Предрасполагающими факторами проникновения микроорганизма из содержимого кишечника в гемоцель насекомого служат недоброкачественный корм, ослабление организма пчел в результате переработки большого количества сахара, наличие среди зимующих пчел большого числа старых особей, определенную роль, возможно, играет заболевание нозематозом и т. д. Эшерихиоз пчел может протекать самостоятельно или в ассоциации с протеозом.

Заболевание медоносных пчел встречается сравнительно редко и лишь на отдельных пасеках, но может сопровождаться 75…100%-ной смертностью семей пчел. Иногда семьи резко ослабевают, плохо развиваются летом и восстанавливаются лишь к осени.

Патогенез. Как и при других энтеробактериозах (см. Гафниоз).

Течение и клиническое проявление. Инкубационный период при скармливании медоносным пчелам продолжается 10… 12 дней. Пчелы испытывают сильное беспокойство в период зимовки, плохо реагируют на стук, вялые, малоподвижные, с раздутым брюшком, выползают из летка, обильно выделяют зловонные каловые массы, покрывающие переднюю стенку и внутреннее содержимое улья. Около улья и на его дне большое число погибших пчел с неприятным запахом. Облет недружный. У зараженных куколок быстро темнеет кутикула, часть их погибает, из выживших формируются взрослые маленькие пчелы с укороченным брюшком. Признаки поражения могут наблюдаться до конца основного медосбора. Больные семьи непродуктивны и не могут обеспечить себя кормами для зимовки.

Патологоанатомические признаки. Патологические изменения сходны с таковыми при других энтеробактериозах.

Диагностика и дифференциальная диагностика. Предварительный диагноз подтверждают результатами лабораторных исследований. Диагноз ставят на основании выделения возбудителя из гемоцеля пчел с учетом признаков болезни и эпизоотической ситуации. Для диагностики в лабораторию высылают 30 пчел с признаками заболевания или свежие трупы насекомых. Диагностику проводят согласно Методическим указаниям по диагностике эшерихиоза пчел.

Заболевание дифференцируют от других энтеробактериозов и нозематоза.

Лечение. Для лечения больных пчел применяют пенициллин, окситет-рациклин, стрептомицин и многие другие антибиотики и сульфаниламидные препараты. В течение 1 сут после начала терапии количество бактерий в средней кишке достоверно уменьшается.

Профилактика и меры борьбы. Аналогичны таковым при других энтеробактериозах.

Сальмонеллез (лат., англ. — Salmonellisis) — заболевание взрослых пчел, проявляющееся поражением пищеварительной системы.

Возбудители болезни. Болезнь могут вызывать различные представители рода Salmonella: S. typhimurium, S. gallinarum-pullorum, S. enteritidis, S. dublin, S. florida (см. часть 1, Сальмонеллезы).

Сальмонеллы патогенны для животных и птиц многих видов и часто обнаруживаются у различных насекомых, скапливающихся у нечистот. Различные виды сальмонелл обнаружены в кишечном содержимом здоровых пчел, выделены из сотового меда.

При пассаже через гемолимфу пчел микроорганизм усиливает свою вирулентность для насекомых, срок жизни которых сокращается с 2…3 сут до 2…4 ч.

Сальмонеллы сохраняют жизнеспособность в воде 70…84 дня, в пыли помещений — до 80 дней. S. pullorum способна к размножению после хранения при 37 «С в меде 70…90 дней; при 13…27 °С от 20 до 210 дней, а при.

6504″ С— 176…270 дней. В воске при 17…24°С сохраняется 170 дней, при 4 «С — 210 дней; на сотах при 4 °C — 260 дней; в 0,025%-ном растворе прополиса— 10 дней. Сохранность S. typhivurium в различных медах при 37 °С- 60…95 дней; при 13…27°С-18…30 дней; при 4°С-17б… 270 дней.

Эпизоотология. Болезнь регистрируют в ряде стран мира. Чаще отмечают на пасеках, размещенных вблизи животноводческих помещений, мест стоянок скота, около загрязненных водоисточников.

Источником возбудителя инфекции служат различные животные и человек — больные и бактерионосители. Вымытые из удобренных навозом почв весенними стоками воды и дождями сальмонеллы могут широко разноситься и попадать на растения-медоносы заливных лугов, полей, садовых участков и тем самым включаться в цепь циркуляции медоносных пчел. От пчел чаще всего выделяют S. typliimurium и, возможно, S. enteritidis, что может быть связано с активным загрязнением сотов и инвентаря в сотохранилищах или гнезд пчел в зимовнике выделениями мышевидных грызунов.

Заболевание и гибель пчел регистрируют в зимне-весенний период, чаще в виде отдельных энзоотических вспышек на одной или нескольких близлежащих пасеках.

Предрасполагающие факторы заболевания те же, что и при гафниозе.

Патогенез, течение и клиническое проявление, патологоанатомические признаки. Аналогичны таковым при других энтеробактериозах (см. Гаф-ниоз).

Диагностика и дифференциальная диагностика. Диагноз ставят на основании выделения возбудителя с учетом признаков болезни и эпизоотической ситуации.

Для лабораторного подтверждения болезни посылают 30 больных пчел и свежих трупов. Посевы делают из гемолимфы или мускулатуры груди. Проводят бактериологические исследования и идентификацию сальмонелл аналогично исследованиям на другие сальмонеллезы (см. часть 1, Сальмонеллезы, Диагностика).

Заболевание дифференцируют от других энтеробактериозов и нозематоза пчел.

Иммунитет, специфическая профилактика. Иммунитет к сальмонеллезу у пчел, очевидно, формируется так же, как у других животных. Перораль-ная вакцинация возможна, однако вакцинопрофилактика не разработана.

Лечение. При лечении пчел успешно применяют скармливание им различных антибиотиков с учетом чувствительности возбудителя. Выделенные от пчел сальмонеллы чувствительны к мономицину, мицерину, лево-мицетину. Однако в настоящее время для лечения пчел рекомендован только окситетрациклин.

Профилактика и меры борьбы. Аналогичны таковым при гафниозе.

Спироплазмоз (лат., англ. — Spiroplasmosis; майская болезнь, частично-пыльцевой токсикоз) — болезнь взрослых медоносных пчел, характеризующаяся атонией кишечника и гибелью насекомых.

Историческая справка, распространение, степень опасности и ущерб. В специальной литературе по пчеловодству болезнь известна с середины XIX в. Признаки ее чаще всего наблюдали во второй половине мая, и такое состояние пчел было названо майской болезнью.

Причиной поражения считали пыльцу некоторых ядовитых растений. Лишь в 1977 г. в США Кларк впервые выделил от таких пчел спироплазм.

Возбудитель выделяют от больных пчел в США, Перу, Марокко, Франции, Венгрии, Китае, Тайване и России. Однако если учитывать, что майская болезнь регистрируется практически во всех странах мира с развитым пчеловодством, то распространение спироплазм должно быть повсеместным.

Анализ лабораторных исследований свидетельствует, что болезнь встречается практически повсеместно на территории России — на 73,5% пасек. Возникающий в летнее время спироплазмоз резко ослабляет семьи пчел, сокращает их продуктивность на 50… 60%, иногда приводит к гибели.

Возбудитель болезни. Основной возбудитель болезни Spiroplasma melliferum представляет собой грамположительные мелкие извитые нитевидные, иногда ветвящиеся или сферические подвижные микроорганизмы, принадлежащие к группе микоплазм.

При темнопольной микроскопии установлено, что клетки имеют форму спирально извитой нити с утолщениями на одном из концов, способны к поступательному, вращательному движению вокруг своей оси. При электронной микроскопии часто видны спирально извитые клетки с многочисленными ветвящимися отростками различной длины. Культивируются (в аэробных и анаэробных условиях) на жидких и твердых специальных средах с содержанием олеиновой кислоты, холестерина, сывороточного альбумина, пуриновых и пиримидиновых оснований.

Кроме S. melliferum, однако реже, от пчел выделяют также S. apis. В организме медоносной пчелы они могут паразитировать одновременно.

Антибиотики тетрациклинового ряда, а также эритромицин, левоми-цетин, неомицин, гентамицин подавляют рост спироплазм; пенициллин, стрептомицин, спектиномицин, рифампицин, налидиксиновая кислота, актиномицин, казугамицин на них не действуют.

Эпизоотология. В лабораторных условиях болезнь воспроизводится у рабочих пчел и маток при инокуляции возбудителя в гемоцель или его скармливании. Гибель отмечают на 4…9-е сутки после инокуляции, срок зависит от дозы введенного возбудителя.

Источником заражения пчел спироплазмами служат нектар и пыльца некоторых растений. В природе чаще болеют молодые пчелы различных пород в возрасте 3…13 дней.

Заболевание пчел отмечают в апреле—июле, реже в более позднее время (октябрь); спироплазмы обнаружены в перезимовавших пчелах. В пораженных семьях возбудитель найден на сотах, в меде, пыльце и перге, личинках, куколках, молодых и старых пчелах, на рамках, стенках ульев, покрывающем холстике. Фактором заражения насекомых могут служить корма неблагополучной по спироплазмозу семьи пчел, где происходит накопление возбудителя.

Как самостоятельное заболевание спироплазмоз протекает в 38% случаев, в 55% он регистрируется в ассоциации с нозематозом и хроническим параличом. Симптомокомплекс признаков смешанного заболевания пчеловоды часто называют болезнью ползания, или ползучкой.

Спироплазмоз появляется внезапно в семьях пчел отдельных пасек, чаще охватывает ряд пасек на местности. В отдельные годы заболевание приобретает характер энзоотии, в другие отсутствует. Длительность проявления и степень выраженности признаков болезни в семьях пчел также значительно колеблются.

Патогенез. Попав с кормом в организм насекомого, возбудитель размножается в средней кишке и обычно на 3…4-е сутки проникает в гемоцель; в гемолимфе происходит после-дующее его деление. Спироплазмы, возможно, выделяют токсины. Размножение микроорганизма сопровождается развитием атонии кишечника пчелы, в результате чего нарушается эвакуация содержимого кишки и масса пыльцевых зерен скапливается в средней и задней кишке.

Течение и клиническое проявление. У больных насекомых брюшко увеличено, наблюдают нервные расстройства, судорожное сокращение мышц (дрожащие, трясущиеся пчелы), потерю способности к полету; пчелы в массе выползают из летка, ползают по земле около улья, скапливаются кучками и погибают. За 4…5 дней отход взрослых пчел может доходить от единичных особей до 25…40% численности семьи. На лет-ковой доске улья иногда находят червеобразные желтоили темно-ко-ричневые испражнения. При большом отходе взрослых пчел нередко погибает расплод. Гибель пчел может продолжаться в течение нескольких дней или недель, семьи резко слабеют. Ослабление семей пчел перед периодом медосбора (или во время него) отрицательно сказывается на их продуктивности.

Патологоанатомические признаки. У погибших пчел часто расставлены крылья, хоботок вытянут, брюшко увеличено, твердое. При вскрытии насекомых с признаками поражения и свежих трупов средняя и прямая кишка сильно растянуты содержимым тестоватои консистенции, желтого или желто-коричневого цвета, представляющим собой массу целых и полупереваренных зерен пыльцы. Средняя и задняя кишка могут быть увеличены соответственно в 40 и 60 раз. У некоторых пчел задняя кишка заполнена прозрачным содержимым с мелкими белыми хлопьями, видимыми на просвет.

Диагностика и дифференциальная диагностика. Для диагностики в лабораторию доставляют 10…20 живых пчел с признаками поражения. Диагноз устанавливают по результатам темнопольной микроскопии гемолимфы с последующей постановкой реакции коагглютинации (РКоА).

Информативным диагностическим методом является также непрямой ИФА. Классические бактериологические методы выделения чистых культур на практике неприемлемы из-за длительности получения окончательного результата, так как при культивировании необходимо проведение серии слепых пассажей на специальных средах, что затягивает выделение спироплазм на 1 мес и более.

Спироплазмоз дифференцируют от острого, хронического параличей, энтеробактериозов пчел.

Профилактика. Профилактика болезни основывается на соблюдении общих мер по содержанию пчел и предупреждению распространения возбудителя на пасеке. После механической очистки рамок проводят дезинфекцию свободных от корма и расплода сотов в парах формалина и концентрированной муравьиной кислоты в течение 2…3 дней с последующим проветриванием в течение такого же времени.

Лечение. Для лечения применяют тетрациклин (окситетрациклин, хлортетрациклин) или эритромицин вместе с сахарным сиропом. При необходимости лечение повторяют через 5…7 дней. При возникновении заболевания в отдельных семьях или на соседних пасеках заблаговременная дача тетрациклина позволит предупредить появление больных насекомых в семье. В экспериментальных условиях спироплазмы чувствительны также к толизину.

Меры борьбы. На неблагополучную пасеку накладывают ограничения. Не допускают заготовку пыльцы семьями пчел. Больные семьи пересаживают в чистые ульи, тщательно очищают планки сотовых рамок. Гнездосокращают и утепляют, пчелам дают лечебный сахарный сироп и побудительные подкормки для стимуляции яйцекладки маткой. Ослабленные семьи могут быть посажены в один улей через глухую диафрагму. Мед и пергу из больных семей не используют для подкормки пчел. Ограничения снимают после исчезновения признаков заболевания.

Аспергиллез (лат. — Aspergillosis; англ. — Stone brood; каменный расплод, аспергилломикоз) — грибная болезнь преимущественно расплода, иногда взрослых пчел.

Историческая справка, распространение, степень опасности и ущерб. Болезнь впервые наблюдал в США Ховард (1894—1896). На территории Европы (в Германии) о каменном расплоде сообщал Маассен (1906); в последующем болезнь была выявлена во многих европейских странах. В России И. Л. Сербинов (1910) обнаружил поражения аспергиллезом расплода и взрослых пчел, особенно в северных губерниях.

В настоящее время аспергиллез медоносных пчел (A. flavus) зарегистрирован в странах Европы, Азии, Северной и Южной Америке, вероятно, встречается повсеместно. В последние годы заболевание часто протекает в ассоциации с аскосферозом и приобретает несколько большее распространение, кроме того, учитывая опасность аспергилл для человека, несмотря на отсутствие прямых доказательств заражения людей от пчел, оно требует большего внимания.

Возбудитель болезни. Возбудители болезни — грибы рода Aspergillus. Наиболее часто поражения медоносных пчел и карликовой пчелы вызывает A. flavus, несколько реже — A. fumigatus, A. niger, A. nidulans и др.

A. flavus растет на обычных питательных средах (агар Чапека, Сабуро, солодовый агар, декстрозный агар) в аэробных условиях при температуре от 7 до 40 °C (оптимум 20…35 °С) и рН среды 2,8…7,4 (оптимум 3,1…4,4). Колонии гриба в течение 10 дней достигают диаметра 3…7 см, образуют тонкий плоский, иногда бороздчатый или складчатый, волнообразный мицелий, сверху выглядят мелкозернистыми, желтого, зеленовато-желто-го цвета; у A. niger — темно-коричневого цвета.

В созревших культурах грибов ряда видов аспергилл образуются растворимые в эфире токсичные и канцерогенные вещества (производные кумаринов) — афлатоксины (см. Микотоксикозы). Патогенность штаммов аспергилл для пчел зависит от способности их спор и мицелия противостоять действию кишечного сока и защитным веществам кутикулы насекомых.

Рост гриба подавляют амфотерицин В, циклогексамид, тиабендазол, гризеофульвин, квинсолин в 1%-ной концентрации. Возбудитель погибает при нагревании до 60 «С в течение 30 мин. Споры инактивируются в растворе сулемы 1: 1000, 2…5%-ных растворах фенола, 5%-ном растворе формалина.

Эпизоотология. A. flavus широко распространен в природе — встречается в почве, нектаре и пыльце цветов, семенах (злаковые, бобовые), гниющих корнеплодах (свекла), силосе, грубых кормах. Аспергиллы вызывают у многих видов животных, рыб и насекомых, в том числе пчел, заболевания афлатоксикозы.

Чаще болеют отдельные семьи, реже аспергиллез охватывает все семьи пчел пасеки. Заражение происходит вследствие заноса спор грибов насекомыми на своем теле, вместе с нектаром и пыльцой, а также постановки в улей заплесневевших сотов, особенно с пергой, для их очистки пчелами.

Расплод и взрослые пчелы инфицируются при поступлении спор с кормом, реже происходит заражение личинок через кутикулу. Распространение спор гриба внутри семьи происходит в результате циркуляции воздуха и передвижения молодых пчел, участвующих в кормлении расплода и очистке ячеек сотов.

Заболевание чаще регистрируют в холодном и умеренном климате весной или осенью, в затяжные периоды ненастной погоды, на расположенных в низинах пасеках, при содержании пчел во влажных, плохо вентилируемых ульях. Все факторы, ведущие к снижению резистентности пчел (погрешности в содержании, кормлении и разведении, неумеренное применение антибиотиков, другие болезни), способствуют распространению аспергиллеза.

Личинки погибают через 1…3 дня после заражения, как правило, в печатном расплоде перед окукливанием.

Заболевание чаще обнаруживают по изменению в расплоде, однако первые признаки его поражения обычно остаются незамеченными из-за удаления взрослыми пчелами погибших личинок до их мумификации. Поражение расплода в семье нарастает постепенно, охватывает взрослых пчел, что приводит к гибели семьи.

В настоящем, очевидно, в силу общих предрасполагающих факторов аспергиллез встречается нередко совместно с аскосферозом. Кроме того, повсеместно аспергиллез протекает на фоне поражения семей медоносных пчел клещом варроа, ослабляющим организм насекомых и выступающим в роли механического переносчика спор гриба.

Патогенез. Споры прорастают в кишечнике, мицелий за счет выделяемых ферментов и механического давления быстро пронизывает все внутренние органы и ткани, выходит через кутикулу. У личинки вблизи переднего конца тела часто образуется своеобразный воротничок, который затем в течение 1…3 дней распространяется по поверхности тела, формируя ложную оболочку, прорастает в стенки и иногда в крышечки ячеек. У взрослых пчел мицелий выходит на поверхность тела позади головы и в месте соединения груди и брюшка. В период роста в кишечнике гриб выделяет токсины, приводящие к гибели хозяина. Тело погибшей личинки и брюшко взрослой пчелы постепенно затвердевают, мумифицируются. При выходе мицелия на поверхность тела погибшей особи формируются конидиофоры, споры гриба заполняют ячейки, содержащие мумии личинок, и встречаются на крышечках таких ячеек.

Течение и клиническое проявление. Обычно в семье поражается только часть расплода и взрослых пчел, реже болезнь охватывает весь расплод и значительную часть имаго.

Гибель личинок происходит чаще на 3-й день после заражения. Больные личинки беспокоятся, меняют положение в ячейке. При гибели в открытом расплоде личинки приобретают кремовый цвет, сегментация тела исчезает. Чаще гибель происходит в печатном расплоде, погибают личинки последних стадий развития, предкуколки и куколки рабочих пчел, трутней и маток. Крышечки над такими ячейками обычно вдавлены, часто с отверстиями неправильной формы. Трупы личинок становятся морщинистыми, меньшими по объему, боковая поверхность, обращенная кверху, высыхает раньше, и труп сначала принимает изогнутую С-образ-ную форму, а затем выпрямляется. На переднем конце тела личинки образуется кольцо беловато-желтого мицелия, или все тело покрыто оболочкой из мицелия. Образование спор начинается с передней части личинки. В больной аспергиллезом семье обнаруживали до 97% погибшего трутневого расплода в состоянии гнилостной массы. Поверхность сота приобретает углубления, края ячеек неровные, расплод пестрый, ячейки со здоровым расплодом в различных стадиях развития располагаются между пустыми или содержащими остатки бело-желтых или желто-зеленых (при А. flavus) мумий ячейками. Крышечки некоторых печатных ячеек покрыты желто-зеленым «газоном» гриба. Запах обычно отсутствует. В запущенных случаях плесень может распространяться на ячейки, занятые пергой, и свободные участки сота.

При заболевании взрослых рабочих пчел, трутней и маток отмечают беспокойство, пчелы покидают клуб, становятся вялыми, у некоторых насекомых наблюдают параличи конечностей, потерю способности к полету, брюшко больных насекомых увеличивается, становится более плотным, гибель основной массы пчел происходит вне гнезда и часто остается незамеченной пчеловодами.

При заражении A. fumigatus и A. niger отмечают угнетение, выпадение волосков тела, потерю способности к полету (на 3…4-Й день после заражения), на 5…6-й день насекомые лежат на боку, конечности конвульсивно сокращаются.

У погибших пчел бело-желтый неспороносящий мицелий сначала появляется позади головы, а затем спороносящая желто-зеленая плесень возникает на месте соединения груди и затвердевшего негниющего брюшка.

Патологоанатомические признаки. Скопление спор и прорастание мицелия A. fumigatus и A. niger через эпителий чаще наблюдают в задней части средней кишки взрослых пчел. В просвете кишечника присутствуют отторгнутые участки перитрофической мембраны, измененные эпителиальные клетки. Кольцевые складки кишечника сглажены, мышцы и другие внутренние ткани пронизаны мицелием гриба. В печатных и частично вскрытых ячейках сотов находятся твердые, мумифицированные личинки бело-желтого, желто-зеленого (A. flavus), серо-зеленого (A. fumigatus) или черного цвета (A. niger).

Диагностика и дифференциальная диагностика. Для подтверждения первоначального диагноза в лабораторию направляют соты размером 10×15 см с погибшими личинками и не менее 50 живых пчел с признаками болезни. В лаборатории проводят осмотр присланного материала и исследуют соскобы с мумий; выделяют культуру возбудителя на агаре Чапека при температуре 25…30 °С; проводят идентификацию гриба в соответствии с методическими указаниями по лабораторной диагностике аспер-гиллеза пчел.

Аспергиллез дифференцируют от аскосфероза по морфологии гриба.

Профилактика. Выполняют весь комплекс мероприятий, аналогичный таковому при аскосферозе (см. Аскосфероз, Профилактика). Не допускают постановку в ульи заплесневевших при хранении сотов для очистки их пчелами, следят за состоянием утеплительного материала в ульях. Систематически проводят текущую дезинфекцию инвентаря и оборудования пасеки.

Лечение. Лечение рекомендованными средствами согласно наставлениям осуществляют только после выполнения работ по пересадке пчел в чистые ульи на сокращенное гнездо.

Меры борьбы. При установлении диагноза на аспергиллез пасеку объявляют неблагополучной и накладывают ограничения: запрещают заготовку пыльцы, реализацию пчел, маток, продуктов пчеловодства и предметов ухода за пчелами; выезд на медосбор возможен только по разрешению ветеринарных специалистов в специально отведенные места.

При поражении расплода и взрослых пчел семьи уничтожают, соты и утеплительный материал сжигают. При единичном поражении личинок пчел соты вместе с пчелами переносят в чистые сухие продезинфицированные ульи, все рамки с кормами удаляют или делают перегон пчел с голоданием на чистые соты. Семьи максимально сокращают и утепляют, обеспечивают полноценными кормами. Обычно таких мер при слабом поражении бывает достаточно, необходимости в применении лечебных препаратов не возникает.

Мед и пергу из больных семей нельзя использовать для кормления пчел. Перга подлежит уничтожению. Мед при исключении наличия афла-токсинов может быть использован после термической обработки в кондитерской промышленности. Воск с неблагополучной пасеки направляют на технические цели. Ульи и инвентарь после тщательной механической очистки обеззараживают огнем паяльной лампы или раствором формальдегида. Соты дезинфицируют раствором пероксида водорода с муравьиной кислотой, затем промывают и сушат.

Ограничения с пасеки снимают после ликвидации заболевания, подтвержденного лабораторными исследованиями.

Меры по профилактике заражения людей. Все работы на неблагополучной по аспергиллезу пасеке и в лаборатории с патологическим материалом проводят во влажных марлевых повязках, закрывающих рот и нос, в очках, предохраняющих от попадания пыли в глаза. После выполнения работ тщательно моют руки и лицо.