Лабораторная диагностика микозов

Материалом для лабораторной диагностики дерматомикозов служат волосы, чешуйки, покрышки пузырьков, ногти. При подозрении на грибковое заболевание стоп для лабораторных исследований на грибы берут частицы эпидермиса стоп, где наиболее часты стертые проявления эпидермофитии и руброфитии. Для исследования на грибы ногтевых пластинок необходимо брать скальпелем крошащиеся желтоватые массы, предварительно обрезав загрязненную часть ногтя ножницами. Грибы, как правило, исследуют в неокрашенных препаратах. Применяют несколько методов исследования на грибы:

• 1) метод обработки патологического материала перед микроскопией с диметилсульфоксидом — ДМСО (KОН — 15 г, ДМСО — 15 г, дистиллированной воды — 7 мл), позволяющий исследовать материал без предварительного подогревания через 10 мин;
• 2) патологический материал помещают на предметное стекло и на него наносят 2−3 капли едкой щелочи (20−30% раствор KОН). При исследовании препарат волос осторожно подогревают над пламенем горелки до появления паров щелочи. Затем препарат накрывают покровным стеклом и просматривают сначала при малом (Ч10), а затем при большом (Ч100) увеличении микроскопа. Конденсор микроскопа должен быть опущен на 0,5−1 см (при ярком источнике света — до упора), диафрагма обязательно прикрыта;
• 3) более простой и удобный метод исследования чешуек и ногтей заключается в том, что патологический материал помещают в пробирку и заливают 10−20% раствором едкой щелочи (KОН). Пробирки оставляют при комнатной температуре до следующего дня. Через 20−24 ч наступает полное размягчение и просветление чешуек ногтевых пластинок. Избыточное количество щелочи сливают, а осадок помещают на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и просматривают под микроскопом. Этот метод имеет известное преимущество при массовых лабораторных исследованиях. Он позволяет просматривать сразу большое количество патологического материала без повторного многократного приготовления препаратов, в результате чего повышается тщательность и достоверность исследования.

По отношению гриба к волосу, по размерам и характеру расположения спор можно определить вид возбудителя заболевания. При поражении гладкой кожи или ногтевых пластинок микроскопическое исследование патологического материала обычно позволяет подтвердить грибковый характер поражения, то есть обнаружить мицелий гриба, а уже по клинической картине врач решает вопрос о характере процесса либо проводит культуральную диагностику.

При поражении волос грибами типа T. endothrix волос сплошь заполнен круглыми или овальными спорами, расположенными тесными параллельными рядами или беспорядочно, как горох в пробирке. Волосы, пораженные грибами типа T. ectothrix, представляются окутанными цепочками из круглых спор, поэтому границы волоса стертые, нечеткие. При этом в одних случаях споры крупные (крупноспоровый трихофитон), в других споры мелкие, по размеру напоминающие споры микроспорума. Для трихофитонов характерно расположение спор продольными цепочками, в отличие от мозаичного расположения спор при микроспории. Внутри волоса нередко встречаются кучки или цепочки спор, реже — нити мицелия. При микроспории волосы окутаны чехлом из мелких круглых спор, расположенных мозаично. При надавливании на покровное стекло чехол с волнообразными краями распадается на отдельные кучки спор. Внутри волоса также обнаруживаются скопления спор.