Возбудитель болезни и его систематическое положение

Возбудитель пастереллеза — Pasteurella muitocida и Pasteurella haemolytica — относятся по принятому систематическому делению к царству Procariota, отдел Firmicutes, семейство Pasteurellaceae, рода Pasteurella, вид Pasteurella muitocida и Pasteurella haemolytica. [16] Пастереллез птиц вызывает Pasteurella muitocida.

Встречаются в литературе и другие наименования этого микроба: Pasteurella septika (Topley и Wilson, 1936), B. cholere gallinarum (Р.А. Цион, 1948), Pasteurella avis (М.С. Ганнушкин, 1958), B. bipolare septicus (Я.Е. Коляков, 1965) и т. д., но большинство исследователей в настоящее время называют возбудителя этой болезни Pasteurella muitocida. [2].

Биологические свойства возбудителя

а) морфологические свойства.

P. muitocida в мазках-отпечатках из крови и органов представляет собой неподвижную, грамотрицательную, короткую, овальной или яйцевидной формы бактерию, эндоспоры не образовывает. Длина составляет 0,4…1,2 мкм, ширина — 0,3…0,4мкм. При окраске по Романовскому-Гимзе имеют вид биополяров (интенсивно окашиваются по полюсам).

В мазках из культур пастереллы имеют вид кокковидных палочек, которые располагаются одиночно, реже парно или в виде коротких цепочек, образуют слизистые капсулы. [9].

Делятся пастереллы по-разному: прямым делением на две равные половины с быстрым отделением дочерних клеток друг от друга; делением на две половины с образованием кокка или почки на одном из концов палочки; путем распада на мельчайшие фильтрующиеся частицы; последовательным делением палочки на дочерние клетки с неполным отшнуровыванием, в результате чего образуются цепочки микробов; делением кокковидных форм на две половины. Процесс начинается в центре клетки, и плоскость деления распространяется от цента к периферии. Этот процесс изучали пол электрическим микроскопом В. В. Джейрашвили, Я. Э. Джамрулидзе и др. (1966).

Также известно, что имеются фильтрующиеся формы пастерелл, которые в большем количестве встречаются у наиболее иммуногенных штаммов. Караджаков (1966) установил наличие фильтрующих форм Pasteurella muitocida с помощью ультрафильтрации и видоизмененного метода выделения микоплазм как в свежих 12−24-часовых культурах, так и в хранившихся более одного месяца в холодильнике. Он обнаружил фильтрующиеся формы пастерелл также в фильтрах крови, в высушенных и растертых тканях эксперименально зараженных кур, голубей, кроликов и белых мышей, как в момент их падежа, так и спустя 12, 24 и 36 часов после гибели. Изолированные вторичные культуры сохраняли свою вирулентность (пало 90% зараженных мышей). Однако Даньшев И. А., проводя эксперименты, показал, что фильтрующиеся формы пастерелл не играют роли в патологии пастереллеза, а регенерированные из них микроорганизмы не идентичны исходным формам и отличаются от них по многим свойствам. [2].

Окраска. Пастерелл окрашиваются хорошо всеми растворами основных анилиновых красок, они грамотрицательны. Характерным для этого микроба является биполярное окрашивание анилиновыми красками в мазках из крови или органов птиц, а также в свежевыделенных культурах на полужидких средах. Биполярность пастерелл хорошо видна при окраске лефлеровской метиленовой синькой, карболфуксином, по Ро-мановскому-Гимзе, Мурамцеву. Капсулу у капсульных вариантов пастерелл можно выявить окраской водным раствором сафранина с подогреванием (способ Ольта). Но наиболее отчетливо ее видно при изготовлении мазков по Бурри с дополнительной окраской по способу Ребирга. [2].

б) культуральные свойства.

Pasteurella muitocida является факультативным анаэробом, температура ее жизнедеятельности 22−42єс, оптимум температуры 37−38єс. Оптимальное значение рН среды 7,2−7,4.

Растут на обычных питательных средах — МПА и МПБ, но лучше, при внесении к ним сыворотки крови, на средах Хоттингера или Мартена.

Рост на жидких питательных средах. МПБ в первые сутки роста пастерелл слегка мутнеет, причем помутнение равномерное. На дне пробирки образуется слизистый осадок, который поднимается при встряхивании в виде косички (муаровые волны). Затем помутнение несколько усиливается, а через 4−8 дней роста бульон в пробирке светлеет, на дне более выраженный слизистый осадок. Пленка и пристеночное кольцо, как правило, не образуются. На бульоне Мартена и Хотнатовой пастереллы дают более интенсивный рост, чем на обычных средах. Имеются М — и R-формы. М-формы растут более интенсивно и дают более выраженный слизистый осадок. R-формы образуют хлопьевидный или зернистый осадок.

Рост на плотных питательных средах. На МПА:

S-формы образуют мелкие, выпуклые, прозрачные, округлой формы колонии серого цвета. Они в косо проходящем свете флюоресцируют, что связано с капсулообразованием, сильно вирулентны;

M-формы — более крупные слизистой консистенции с непрозрачным центром, серовато-белые, с ровными краями, имеют капсулу, средней степени вирулентны;

R-формы — шероховатые непрозрачны колонии, капсул не имеют, авирулентны.

На МПЖ при посеве уколом пастереллы растут в виде отдельных колоний, а затем беловатого стержня, никаких отростков, а также разжижения желатины не наблюдается, так как эти бактерии лишены протеолитической активности.

Рост на куриных эмбрионах. Пастереллы могут расти на развивающихся куриных эмбрионах. Картер (1950) даже получил и испытывал эмбрионвакцину против пастереллеза. [2,9].

в) биохимические свойства.

Pasteurella muitocida относится к числу малоактивных бактерий. Образует индол на мартеновском бульоне, реакция на каталазу положительна, ферментирует глюкозу, сахарозу, манит, сорбит, неактивен в отношении лактозы, мальтозы, арабинозы, дульцита, раффинозы, салицина, рамнозы, декстрина. Не разжижают желатин.

Возбудитель восстанавливает нитраты в нитриты. Сероводород культура пастерелл либо не образует, либо образует в небольшом количестве.

Молоко не свертывает, гемолиза на кровяном агаре не вызывают, не растут в бычьей желчи и лизируются в ней. Это свойство используется для дифференциации пастерелл от коли-тифозных бактерий. [2,9].

г) патогенные свойства Патогенные и вирулентные свойства пастерелл варьируют и наиболее сильно выражены при выделении их у птиц. Эпизоотические штаммы высоковирулентны для белых мышей и кроликов. Установлена корреляция между вирулентностью, капсулои токсинообразованием. Наибольшей вирулентностью обладают свежевыделенные культуры. В лабораторных условиях при хранении культур пастерелл резко снижается. [4].