Ультраструктура эндокарда ушек сердца интактных половозрелых мышей линии balb/c

Павлович Е.Р., Дугин С. Ф., Орлова Ц.Р.

Эндотелий эндокарда сердца лабораторных животных интенсивно изучается в последние несколько десятилетий с использованием электронной микроскопии [7−10]. Ушки сердца до последнего времени остаются загадочной частью этого органа, чья структура и функциональное назначение изучены недостаточно, особенно у мелких животных, часто используемых в модельных исследованиях [8, 12]. Так как мы не обнаружили в доступной нам литературе сведений об ультраструктуре эндокарда ушек мышей линии Balb/c, то целью данной работы было проведение сравнительного электронно-микроскопического исследования эндокарда обоих ушек сердца интактных половозрелых мышей этой линии.

Материал и методы исследования

Изучали правое и левое ушки сердец интактных половозрелых мышей-самцов линии Balb/c с весом тела от 30 до 35 граммов, полученных из вивария кардиоцентра. Животных усыпляли нембуталом и промывали сердца от крови 5 минут согласно описанию, сделанному в наших более ранних работах [1]. Затем их фиксировали перфузией 2,5% глютаровым альдегидом на 0,1 М фосфатном буфере (рН=7,4) при 4^о С еще 5 минут и оставляли в охлажденном фиксаторе на 2 часа. После промывки буфером дофиксировали ушки 1% четырехокисью осмия, осуществляли проводку в спиртах возрастающей концентрации, в окиси пропилена и заключали в аралдит [4]. Вес сердец после перфузии был от 240 до 280 мг. Поскольку стенки ушек были достаточно тонкими, то их проводили по спиртам и другим обезвоживающим жидкостям и заключали в эпоксидную смолу как целое без предварительной резки на мелкие кусочки. Гистологию ушек изучали на полутонких срезах (0,5−1 мкм), полученных с помощью микротома Histo Range (LKB, Швеция) и окрашенных толуидиновым синим как в предыдущей публикации [2]. Ультратонкие срезы получали на ультратомах фирмы LKB (Швеция) и окрашивали уранилацетатом и цитратом свинца [3]. Электронную микроскопию ультратонких срезов осуществляли на электронном микроскопе JEM-100 C при 80 кв при исходных увеличениях от 5 до 50 тысяч.

Результаты и обсуждение

Анализ полутонких срезов показал, что оба ушка сердца являлись тонкостенными образованиями, покрытыми снаружи однослойным эпителием (мезотелием), а изнутри однослойным эндотелием эндокарда. Между эпикардом и эндокардом располагался компактный или трабекулярный миокард, содержащий большое количество рабочих (сократительных) миоцитов, элементы микрососудистого русла, нервные проводники и соединительнотканую основу. Стенка капилляров в нем была образована 1 — 3 эндотелиоцитами, часто с разной осмиофилией их цитоплазмы, покрытыми снаружи базальной мембраной, в листках которой были видны отростки перицитов более темной окраски, чем эндотелиоциты капилляров. В эндотелиоцитах некоторых капилляров выявлялись пиноцитозные пузырьки и выросты в просвет сосудов. Эндокард ушек, как в трабекулярной, так и в компактной зонах органа был представлен эндотелием и подэндотелиальными структурами схожими в правом и левом ушках. Эндотелий эндокарда был образован уплощенными эндотелиоцитами, лежащими на базальной мембране и содержащими округлые ядра с мелкодисперсным содержимым. Тельца Вайбеля-Палада в эндотелиоцитах ушек интактных мышей отсутствовали, что роднит их с эндотелиоцитами капилляров миокарда ушек у этих животных. Под эндотелием в матриксе соединительной ткани располагались эластические и коллагеновые волокна, а также клетки соединительной ткани, в основном макрофаги, с ячеистой структурой и лизосомами. Кроме того, встречались клетки фиброцитарного ряда. В целом соединительная ткань эндокарда ушек сердца интактных мышей линии Balb/c демонстрировала те же структурные компоненты, что и рабочий миокард правого предсердия и межпредсердной перегородки у интактной крысы [1, 5, 6]. В соединительной ткани между эндотелием эндокарда и миокардом часто проходили немиелинизированные нервные проводники и их эфферентные терминали, содержащие разные типы синаптических пузырьков (мелкие гранулярные и агранулярные, а также крупные гранулярные). Характер проводников и их эфферентных терминалей напоминал нервные волокна в других отделах сердца у интактных крыс, собак и кроликов [1, 3, 4]. Показано, что в трабекулярной части ушек имеются глубокие лакуны между мышечными балками и часть из них, при промывке перфузией сохраняла форменные элементы крови прилежащие к эндотелию эндокарда.

Переходя к обсуждению сделанных находок, отметим, что в целом ультраструктура эндокарда ушек интактных мышей линии Balb/c напоминает таковую у интактных животных других видов [7−12] и в контроле у человека [2], особенно в отношении строения эндотелия и подэндотелиального нервного аппарата [1, 3, 4, 6]. Гетерогенность структуры эндотелиоцитов для эндокарда в отличие от сосудов миокарда у интактных животных и в эксперименте [7, 10] отсутствовала. Наименее изученным в настоящее время является эндотелий эндокарда в плане понимания его происхождения [11], функционирования [7, 9], его взаимодействия с эндотелием микрососудистого русла сердца и его роли в модуляции сокращений миокарда [8, 12]. Эти вопросы требуют проведения дальнейших исследований у линейных животных, в том числе и в экспериментальных условиях с применением количественных методов ультраструктурного анализа [4−6].

микроскопический эндокард интактный сердце.