С целью облегчения приготовления питательных сред необходимо иметь маточные растворы, составляющие среду. Суть приготовления маточного раствора заключается в том, чтобы, взяв из него определенный объем, приготовить определенный объем питательной среды.
Соли в маточном растворе могут вступать в реакцию, поэтому маточный раствор хранят в нескольких сосудах:
- 1-NH4NO3, KNO3, KH2PO4, MgSO4*7H2O
- 2CaCl2*2H2O
- 3Ca (NO3)2*4H2O
- 4FeSO4* Na2 ЕДТА
- 5MnSO4*4H2O, ZnSO4*7H2O, H3BO3, КУ, Na2MoO4*2H2O, CuSO4*5H2O, CoCl2*6H2O.
Витамины и регуляторы роста хранят в отдельных сосудах.
Концентрации маточных растворов составляют из такого расчета, что для приготовления 1 л среды необходимо взять: макроэлементов — 100 мл, кальция — 100 мл, микроэлементов, хелата железа — 10 мл, витаминов и регуляторов роста — 1 мл маточного раствора. Маточные растворы и питательные среды готовят на бидистиллированной воде. Все вещества, входящие в состав среды, растворяют в воде, за исключением регуляторов роста. Цитокинины растворяют в 0,1 н растворе соляной кислоты, ауксины — в капле спирта. Маточные растворы хранят в холодильнике, их объем должен быть таков, чтобы израсходовать за месяц.
Для приготовления 1 л жидкой среды в колбу объемом 1л пипеткой переносили необходимое количество каждого из исходных растворов.
На электроплитке кипятили дистиллированную воду и добавляли в нее агар при постоянном помешивании. Раствор кипятили до полного растворения агара, затем разбавляли холодной дистиллированной водой и переносили в основную колбу. Объем доводили до 1л и измеряли рН среды.
Готовую среду разливали по баночкам из расчета 1 л среды на 30 баночек. Баночки закупоривали и автоклавировали при 1 атм 18 минут.